7BL/6雌性小鼠（20±2g)，采用國際通用的潰瘍性結腸炎造模 方法（Gastroenterology2002, 123:256-70;PLoSOne2012, 7:636075)，在研究開始階段， 使小鼠自由進食和飲水，在初期適應階段后，將水換成4% (w/v)的DSS，自由飲用7天，W 引起潰瘍性結腸炎。
[0039] 2. 2分組及給藥方法
[0040] 正常對照組：10只，給予正常飲食。
[0041] 模型對照組：1〇只，給予4%DSS溶液自由飲用7天。
[0042]SASP組：10只，給予4%DSS溶液的同時灌胃給予SASP(根據(jù)臨床用量換算成小 鼠用量：350mg/kg)連續(xù)7天。
[0043] 黃柏酬組：10只，給予4%DSS溶液的同時灌胃給予黃柏酬巧Omg/kg)連續(xù)7天。
[0044] 實驗期間，每天新鮮制備劑量制劑，用0. 5%的簇甲基纖維素鋼溶解，并在制備1 小時內使用。 W45] 2. 3腸炎的評估
[0046] 腹瀉、血便、組織病理分析等均參考前期研究發(fā)表論文（PLoS化e 2012, 7:e36075JWiarmacolExpllier2013,345:473-82)所述的方法。實驗期間每天記 錄體重變化、腹瀉及血便癥狀。實驗結束后麻醉并頸椎脫白處死小鼠，打開腹腔，取出結腸， 測量從盲腸到直腸的結腸長度。并取末端結腸做組織切片，進行H&E染色，對H&E染色結 腸標本進行病理評分：（1)炎癥細胞的滲出評分標準：〇分-黏膜固有層內有極少量炎癥細 胞，1分-黏膜固有層內有較多的炎癥細胞或黏膜固有層內的炎癥細胞增多，2分-炎癥細 胞擴散至黏膜下層，3分-全層均有炎癥細胞滲出；（2)組織損壞評分標準：0分-無黏膜損 傷，1分-非連續(xù)的黏膜上皮損壞，2分-表層黏膜糜爛，3分-廣泛的黏膜破損并向腸壁深 層擴展。將炎癥細胞的滲出計分和組織損壞計分相加，計算出組織病理評分（1-6分）。
[0047] 2. 4統(tǒng)計分析
[0048] 所有實驗數(shù)據(jù)均重復3次，結果W平均值+標準差表示，采用SPSS16. 0統(tǒng)計軟 件對實驗數(shù)據(jù)采用單向方差分析的ne-wayAN0VA)及LSD檢驗，P<0.05為統(tǒng)計學上差異有 顯著性。 陽0例 3結果
[0050] 3. 1對潰瘍性結腸炎小鼠體重的影響
[0051] 圖1體現(xiàn)了黃柏酬對潰瘍性結腸炎小鼠體重的影響，由圖1可見：正常對照組小 鼠的體重增加了 0. 9 + 0. 8%，模型組小鼠的體重減輕了 8. 2 + 0. 9%，陽性對照組小鼠的體 重減輕了 5. 0 + 0. 8%，黃柏酬組小鼠的體重減輕了 2. 9 + 0. 3%;進一步說明黃柏酬能顯著 抑制DSS引起的潰瘍性結腸炎小鼠的體重下降（P<0. 001);并且，口服給藥情況下，黃柏酬 (50mg/kg)對體重下降的抑制作用效果顯著優(yōu)于陽性對照藥SASP(350mg/kg) (P<0. 05)。
[0052] 3. 2對潰瘍性結腸炎小鼠血便發(fā)生率的影響
[0053] 圖2體現(xiàn)了黃柏酬對潰瘍性結腸炎小鼠血便發(fā)生率的影響，由圖2可見：正常對照 組小鼠無血便發(fā)生，模型組小鼠的血便發(fā)生率為96. 7±5. 8%，陽性對照組小鼠的血便發(fā)生 率為60. 0 + 10. 0%，黃柏酬組小鼠的血便發(fā)生率為43. 3 + 5. 8 %;進一步說明黃柏酬能顯 著減少DSS引起的潰瘍性結腸炎小鼠的血便率（P<0. 001);并且，口服給藥情況下，黃柏酬 (50mg/kg)對血便發(fā)生率的抑制作用效果顯著優(yōu)于陽性對照藥SASP(350mg/kg) (P<0. 05)。
[0054] 3. 3對潰瘍性結腸炎小鼠結腸長度的影響
[0055] 圖3體現(xiàn)了黃柏酬對潰瘍性結腸炎小鼠結腸長度的影響，由圖3可見：正常對照 組小鼠無結腸縮短發(fā)生，模型組小鼠的結腸縮短率為35. 3 + 0. 6%，陽性對照組小鼠的結腸 縮短率為19. 4 + 0. 3%，黃柏酬組小鼠的結腸縮短率為14. 3 + 0. 2%;進一步說明黃柏酬能 顯著改善DSS引起的潰瘍性結腸炎小鼠的結腸縮短癥狀（P<0. 01);并且，口服給藥情況下， 黃柏酬巧Omg/kg)對結腸縮短癥狀的改善作用效果顯著優(yōu)于陽性對照藥SASP(350mg/kg) (P<0. 01)。。
[0056] 3. 4對潰瘍性結腸炎小鼠結腸組織病理的影響
[0057] 圖4和圖5體現(xiàn)了黃柏酬對潰瘍性結腸炎小鼠結腸組織的損傷修復作用，由圖4 可見：模型組小鼠的結腸組織為典型炎癥黏膜表現(xiàn)，可見黏膜、黏膜下層甚至肌層大量炎性 細胞浸潤，組織結構素亂、斷裂，黏膜下層出血、水腫，毛細血管擴張；陽性對照組小鼠和黃 柏酬組小鼠的結腸組織可見病變減輕，潰瘍愈合，黏膜下層出血減輕。由圖5可見：正常對 照組小鼠計分為0,模型組小鼠計分為5. 7 + 0. 3%，陽性對照組小鼠計分為3. 4 + 0. 4%，黃 柏酬組小鼠計分為3. 0 + 0. 2%，與模型組相比，差異有顯著性（P<0. 001)。說明黃柏酬可 W顯著減輕結腸黏膜炎癥細胞浸潤和組織病理損傷狀況（P<〇. 001)。并且，口服給藥情況 下，黃柏酬巧Omg/kg)對結腸病理損傷的修復效果顯著優(yōu)于陽性對照藥SASP(350mg/kg) (P<0. 05)。
[0058] 綜上研究結果表明：黃柏酬可W明顯改善潰瘍性結腸炎小鼠的體重下降、血便發(fā) 生率、結腸縮短率、W及組織病理損傷癥狀。并且，口服給藥情況下，黃柏酬巧Omg/kg)對潰 瘍性結腸炎小鼠的體重下降、血便發(fā)生率、結腸縮短率、W及組織病理損傷的改善作用顯著 優(yōu)于陽性對照藥SASP(350mg/kg) (P<0. 05)。
[0059] 本發(fā)明所設及的多個方面已做如上闡述。然而，應理解的是，在不偏離本發(fā)明精神 之前提下，本領域專業(yè)人員可對其進行等同改變和修飾，所述改變和修飾同樣落入本申請 所附權利要求的覆蓋范圍。
【主權項】
1. 黃柏酮在制備防治潰瘍性結腸炎的藥物或食品中的應用。2. 如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述黃柏酮是作為唯一的活性成分用于制 備防治潰瘍性結腸炎的藥物或食品。
【專利摘要】本發(fā)明涉及醫(yī)藥學領域，特別是涉及一種黃柏酮的醫(yī)藥用途。本發(fā)明的黃柏酮可用于防治潰瘍性結腸炎。
【IPC分類】A23L1/30, A61P1/04, A61K31/585, A61P1/00
【公開號】CN105147703
【申請?zhí)枴緾N201510478406
【發(fā)明人】竇薇, 任改艷, 孫阿寧, 王崢濤, 鄧超, 羅曉平
【申請人】上海中醫(yī)藥大學
【公開日】2015年12月16日
【申請日】2015年8月7日