專利名稱：：含有環(huán)糊精和紫杉醇類物質(zhì)的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新的、非腸道應(yīng)用的、含有紫杉醇類物質(zhì)和某些環(huán)糊精而不含有有害溶劑和／或去污劑的可溶于水的固態(tài)藥物組合物及其含水溶液。更具體而言，本發(fā)明涉及新的可溶于水的固態(tài)藥物組合物及其在含水溶劑中的溶液，所述組合物包括a)活性成分紫杉醇類物質(zhì)(taxoid)，如紫杉醇和docetaxel，任選地是它們的鹽或它們的多晶型水合物或溶劑合物(如，與乙醇形成的溶劑合物)形式；和b)大表面積的乙酰-γ-糊精或羥-丙基-β-糊精(下稱環(huán)糊精)-所述紫杉醇類物質(zhì)與所述環(huán)糊精的重量比范圍為1∶25～1∶250；c)和任選地在非腸道應(yīng)用藥物中所使用的其它水溶性助劑。本發(fā)明也涉及所述可注射藥物組合物的制備和應(yīng)用。下列定義適用于整個(gè)說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)紫杉醇=紫杉醇(taxol)Adocetaxel=[N-脫芐基-N-叔-丁氧基羰基]-10-脫乙酰基-紫杉醇；“含水溶劑”=注射質(zhì)量級(jí)的水或含有以一定量和一定濃度溶解的有效地使所述含水溶液等滲的等滲物(如，氯化鈉，葡萄糖)的含水溶液；“無(wú)晶形的”=X-線顯示非晶型結(jié)構(gòu)CD=環(huán)糊精γ-環(huán)糊精=環(huán)麥芽辛糖β-環(huán)糊精=環(huán)麥芽庚糖AcγCD=乙酰-γ-環(huán)糊精HPβCD=羥丙基-β-環(huán)糊精(每一個(gè)CD單位有約2～約8個(gè)羥丙基基團(tuán))DIMEβ=七(heptakis)-2，6-二-o-甲基-β-環(huán)糊精紫杉醇類物質(zhì)是紫杉醇和結(jié)構(gòu)相關(guān)物質(zhì)的統(tǒng)稱。紫杉醇是已知具有顯著抗癌活性的化合物，對(duì)有絲分裂紡錘體具有毒性并且是強(qiáng)的細(xì)胞增殖抑制劑。也已知它在室溫下具有約0．0005mg／ml的很小的水溶解度，據(jù)報(bào)道，在貯放溶液中和作為其鍵合酯的溶劑分解產(chǎn)物均不穩(wěn)定，從而導(dǎo)致對(duì)細(xì)胞毒性喪失。市售的是乙醇和CremophorEL(多羥基化的蓖麻油)1∶1的混合物。CremophorEL在靜脈治療中已經(jīng)顯示出一些副作用(過(guò)敏、釋放組織胺)，因此，在過(guò)去的十年內(nèi)進(jìn)行了不懈的努力以開(kāi)發(fā)新的藥物釋放系統(tǒng)。紫杉醇在有機(jī)溶劑乙醇和多羥基化蓖麻油中被配制成溶液后，以超飽和的水包油乳液形式給藥，并在血液中迅速稀釋，血液是富含脂類和蛋白質(zhì)提供的疏水區(qū)域的含水環(huán)境。紫杉醇通過(guò)擴(kuò)散作用穿經(jīng)質(zhì)膜的疏水環(huán)境而進(jìn)出細(xì)胞。紫杉醇的溶劑依賴性和濃度依賴性自聚集傾向，妨礙了將此水溶性極差的藥物用可藥用賦形劑配制成適于臨床給藥的努力。也已知，docetaxel(半合成紫杉醇類物質(zhì))高度親水并且較紫杉醇具有更大親脂性(lipophylic)(美國(guó)專利4814470)。市售的docetaxel是藥物在吐溫80中的無(wú)菌溶液的注射濃縮液，附帶注射時(shí)使用的13％(w／w)乙醇水稀釋液?？梢允褂玫淖畲笏幬餄舛仁?．3～0．9mg／ml。由于析出問(wèn)題，所以應(yīng)當(dāng)避免濃度高于0．9mg／ml。與吐溫80有關(guān)的過(guò)敏反應(yīng)可能引起市售制劑的有關(guān)副作用。在制劑方面已經(jīng)進(jìn)行了廣大范圍的研究，包括具有疏水特性的賦形劑。在大多數(shù)賦形劑中，紫杉醇類物質(zhì)配制成毫摩爾濃度范圍，該濃度范圍相當(dāng)于能夠觀察到導(dǎo)致析出的紫杉醇類物質(zhì)自聚集作用的濃度。基于紫杉醇類物質(zhì)和環(huán)糊精之間的相互作用，得到了一些提示。在存在環(huán)糊精時(shí)研究紫杉醇類物質(zhì)的薄層色譜遷移率(國(guó)際藥學(xué)雜志(Int．J．Pharm．)1994．108．64-75．)，首次得到紫杉醇類物質(zhì)和環(huán)糊精之間的相互作用非常微弱的結(jié)論。隨后發(fā)現(xiàn)(澳大利亞專利35544／93；645927)，使用不飽和環(huán)糊精和酶修飾的支鏈-β-環(huán)糊精能夠適度增加紫杉醇類物質(zhì)的溶解度。與環(huán)糊精結(jié)合的少量地溶解在水中的藥物的含水非腸道溶液，被建議用于減少非腸道應(yīng)用后注射部位或器官處的藥物析出(美國(guó)專利5024998)。因而，使用高(50％w／v左右)CD濃度觀察到溶解增強(qiáng)作用，并且由這些濃縮液的一些產(chǎn)物得到固態(tài)復(fù)合物，所述濃縮液強(qiáng)調(diào)低于20％w／vCD濃度時(shí)才發(fā)生析出。在說(shuō)明書(shū)所列舉的大量藥物中，既只字未提紫杉醇類物質(zhì)，也只字未提乙酰-γCD。進(jìn)一步的改進(jìn)是，使用甲基化的β-環(huán)糊精的含水溶液作為紫杉醇的有效溶解增強(qiáng)劑(PCTWO94／26728)并且甲基化的β-環(huán)糊精與乙醇組合配制1～4mg／ml的紫杉醇溶液(歐洲專利788373)。這些紫杉醇類物質(zhì)濃縮液在稀釋到一定限度時(shí)不發(fā)生析出并且避免了有毒去污劑的使用。也建議使用2，6-二-O-甲基-β-環(huán)糊精作為紫杉醇的更為有效的增溶劑(歐洲專利0639380A)，并且公開(kāi)了其增溶效力的詳細(xì)結(jié)果(藥物科學(xué)雜志(J．Pharm．Sci．)84．10．1223-1230；1995)。然而，由于環(huán)糊精的表面活性劑特性、在已經(jīng)是低濃度和低劑量的情況下對(duì)于膽固醇和其它細(xì)胞膜脂成分的親和性，因此，對(duì)于甲基化β-環(huán)糊精在注射液中的使用也表露出一些憂慮。一些研究公布環(huán)糊精與水溶性藥物一起使用時(shí)與相同的細(xì)胞毒化合物制劑比較，在外滲時(shí)前者形成的潰瘍較小(WO95／06485)。盡管紫杉醇不溶于水，但是該專利說(shuō)明書(shū)也包括一個(gè)“紫杉醇”50％乙醇溶液的實(shí)施例，以描述加入“HPCD”的效果。該結(jié)果顯示，當(dāng)紫杉醇沉積在真皮部位時(shí)，HPCD發(fā)揮保護(hù)皮膚而導(dǎo)致?lián)p傷尺寸減少的作用。硫代-支鏈環(huán)糊精增溶抗腫瘤劑紫杉醇類物質(zhì)(例如，docetaxel和紫杉醇，參見(jiàn)PCTWO95／19994)已被披露，但是沒(méi)有有關(guān)溶解度、穩(wěn)定性或毒性改善的細(xì)節(jié)。該制劑為紫杉醇提供了顯著增加的水溶解度。然而，在非腸道應(yīng)用的稀釋液中(0．3～1．2mg／ml)出現(xiàn)藥物析出。本發(fā)明目的是進(jìn)一步改進(jìn)紫杉醇類物質(zhì)在注射制劑中的溶解度和非腸道給藥的紫杉醇類物質(zhì)藥物系統(tǒng)的穩(wěn)定性同時(shí)盡可能地降低為配制目的所使用的輔助材料的毒性。本發(fā)明是基于這樣的認(rèn)識(shí)乙?；?γ-環(huán)糊精和羥丙基-β-環(huán)糊精顯示出確定的延長(zhǎng)溶解的紫杉醇和docetaxel的過(guò)飽和狀態(tài)、防止過(guò)早析出的作用而不使用乙醇作為共-溶劑。令人驚奇的事實(shí)是，以前的公開(kāi)告知γ-環(huán)糊精和其羥丙基衍生物(已知在CDs中具有最大尺寸)極少適于紫杉醇增溶和絡(luò)合(國(guó)際藥物學(xué)雜志(Int．J．Pharm．)133．191-201．1996)。這也得到了本研究的證實(shí)記錄紫杉醇的平衡溶解度對(duì)化學(xué)改性的γ-環(huán)糊精含水溶液濃度的函數(shù)，盡管使用了高環(huán)糊精濃度，但是沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有效的增溶效果。見(jiàn)表1紫杉醇的溶解度作為乙酰-γ-環(huán)糊精濃度的函數(shù)表1<tablesid="table1"num="001"><table>乙酰-γ-環(huán)糊精(％)w／v溶解的紫杉醇(μg／ml)24．058．81025．02048．040170．0</table></tables>紫杉醇在室溫下的水溶解度是約0．5μg／ml，因此，紫杉醇在40％乙酰-γ-環(huán)糊精溶液中達(dá)到的170μg／ml的溶解濃度已經(jīng)意謂著溶解度增加了約340倍。然而，與40％(w／v)DIMEβ含水溶液中紫杉醇溶解約800-1000μl／ml的已知結(jié)果相比，上述數(shù)據(jù)很差。使用HPβCD作為增溶劑也得到相似的差的溶解度。該數(shù)值與治療量紫杉醇對(duì)應(yīng)的所需數(shù)值相距甚遠(yuǎn)，并且該劑型的使用將需要大于70克的環(huán)糊精與30mg劑量單位的紫杉醇一起施用。本發(fā)明目的是制備非腸道使用的藥物組合物的方法，所述組合物可以是含有乙酰-γ-環(huán)糊精或羥基-丙基-β-環(huán)糊精(在下面稱為環(huán)糊精)的即刻溶于水的固體，也可以是其在含水溶劑中的溶液，所述方法包括a)將紫杉醇類物質(zhì)，優(yōu)選紫杉醇或者docetaxel，或它們的鹽或水合物溶于乙醇，然后進(jìn)行下列步驟中的任一步驟ⅰ)加入固態(tài)環(huán)糊精和任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑，在含水溶劑中溶解混合物并冷凍干燥得到固體，或者ⅱ)加入固態(tài)的、大表面積的非晶形(優(yōu)選冷凍干燥的)環(huán)糊精和任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑，蒸發(fā)溶劑并干燥得到固體，或者ⅲ)將溶液與固態(tài)的大表面積的非晶形(優(yōu)選為冷凍干燥的)環(huán)糊精(和任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑)混合，然后任選地在有效量的等滲添加劑存在的條件下，使用含水溶劑溶解，得到溶液；其中含有a)作為活性組分的所述紫杉醇類物質(zhì)，和b)所述的環(huán)糊精，和c)任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑其中紫杉醇類物質(zhì)環(huán)糊精的重量比范圍為1∶25～1∶400；和任選地b)當(dāng)使用步驟ⅰ)或ⅱ)時(shí)，將固體溶解于含水溶劑中以得到可隨時(shí)直接用于醫(yī)療的非腸道用溶液。根據(jù)本發(fā)明，紫杉醇類物質(zhì)紫杉醇是使用其水合的多晶型物形式或其溶劑合物形式(如乙醇溶劑合物)。本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案是，紫杉醇作為活性組分，與乙酰-γ-環(huán)糊精按照1∶100～1∶250的重量比一起使用。另一優(yōu)選的實(shí)施方案是使用1∶25～1∶100重量比的docetaxel與HPβCD。當(dāng)實(shí)施本發(fā)明的方法時(shí)，下述的任何一個(gè)溶劑可以用作含水溶劑或稀釋劑注射質(zhì)量級(jí)的水、等滲添加劑如氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、右旋糖的含水溶液。后一溶液在本文所述條件下必需含有使所述含水溶液等滲的有效量的所述成分。因此，在有環(huán)糊精和紫杉醇類物質(zhì)存在時(shí)，適宜于使藥物溶液等滲的等滲劑的已知濃度發(fā)生一些變化。于是，氯化鈉約0．9％w／v或者葡萄糖約5％w／v的濃度值將不得不依據(jù)特定組合物中所用的紫杉醇類物質(zhì)與CD的量和質(zhì)量而進(jìn)行優(yōu)化。本發(fā)明另一目的是含有按照本發(fā)明方法制備的任一產(chǎn)品作為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明的再一目的是水溶性固體藥物組合物和其在含水溶劑中的溶液，所述組合物含有a)作為活性成分微細(xì)地分散的大表面積的紫杉醇類物質(zhì)，如紫杉醇或docetaxel，任選地是它們的鹽或它們的多晶型水合物或溶劑合物(如與乙醇形成的溶劑合物)和b)微細(xì)地分散的、大表面積的乙酰-γ-環(huán)糊精或羥基-丙基-β-環(huán)糊精(環(huán)糊精)所述紫杉醇類物質(zhì)所述環(huán)糊精的重量比為1∶25～1∶250；c)和任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑。本發(fā)明優(yōu)選的組合物含有紫杉醇作為活性成分和環(huán)糊精是乙酰-γ-環(huán)糊精，二者的重量比是1∶100～1∶250。更優(yōu)選的組合物是docetaxel和羥基-丙基-β-環(huán)糊精以1∶25～1∶100的重量比組合。本發(fā)明另一目的是防止紫杉醇類物質(zhì)(如紫杉醇和docetaxel及它們的鹽、溶劑合物和含水溶液中水合物)的自-聚集和過(guò)早析出，并且延長(zhǎng)藥物的過(guò)飽和溶解狀態(tài)，其手段是通過(guò)使用上述本發(fā)明藥物組合物形式的紫杉醇類物質(zhì)。本發(fā)明還有一目的是通過(guò)使用有效量的上述本發(fā)明藥物組合物治療不需要的細(xì)胞增殖的方法。待用的紫杉醇溶液在適當(dāng)?shù)钠谙迌?nèi)保持物理穩(wěn)定性。靜脈治療通常需要所用溶液在至少6小時(shí)內(nèi)是物理穩(wěn)定的。當(dāng)本發(fā)明化合物溶解于含水溶液中時(shí)，重新配制的溶液在至少6～8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。當(dāng)溶液是紫杉醇／AcγCD或者docetaxel／AcγCD或HPβCD組合時(shí)，測(cè)得超過(guò)24小時(shí)的物理穩(wěn)定性。本發(fā)明方法向需要治療的患者提供含有藥物組合物的非腸道劑型。100mg劑量單位的紫杉醇類物質(zhì)可以制備成冷凍干燥形式。將藥物稀釋得到隨時(shí)可用的配藥溶液，例如，用于靜脈治療。根據(jù)患者特定需要的所需治療應(yīng)用，可以使用數(shù)個(gè)100mg單位以便達(dá)到相應(yīng)的通常用mg／m2體表面積表示的所需有效劑量。這樣例如可達(dá)到紫杉醇的135～250mg／m2體表面積的推薦劑量。取決于所治療的癌癥類型和所選用的紫杉醇類物質(zhì)與環(huán)糊精，藥物可以按照例如靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)途徑而有效地使用。由于與迄今已知組合物中所含載體的毒性相比，在很大程度上降低了劑型的毒性，因此，與已知的療法相比，可以取得改進(jìn)的治療效果。也不再需要讓患者在紫杉醇或docetaxel給藥之前前期服用預(yù)防過(guò)敏和其它不希望的副作用的類固醇、抗組胺藥和H2-受體拮抗劑來(lái)防止嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)。以例證性方式在下面的實(shí)施例中給出本發(fā)明的細(xì)節(jié)，而不是旨在限定發(fā)明的保護(hù)范圍。Ⅰ．制劑的制備實(shí)施例Ⅰ．1．干燥法制備可重新配制的、固態(tài)紫杉醇／乙酰-γ-環(huán)糊精組合。3mg紫杉醇(溶在0．3ml乙醇中)加入到500mg乙酰-γ-環(huán)糊精粉末(由含水溶液冷凍干燥制得)中。該混合物在真空下保持18小時(shí)，用五氧化二磷除去乙醇。得到的不含乙醇的粉末組合部分分別溶于5ml、4ml、3ml和2ml的5％葡萄糖水溶液中。這些重新配制的溶液的物理穩(wěn)定性示于表2。表2<tablesid="table2"num="002"><table>加入的5％葡萄糖溶液的ml數(shù)5ml4ml3ml2ml紫杉醇終濃度mg／ml0．60．751．01．5AcγCD終濃度mg／ml100125167250憑視覺(jué)評(píng)價(jià)穩(wěn)定性，以小時(shí)計(jì)＞120＞48＞48＞4872小時(shí)后出現(xiàn)析出溶解的紫杉醇mg／ml(HPLC)0．576</table></tables>使用低劑量乙酰-γ-環(huán)糊精重復(fù)了該試驗(yàn)。3mg紫杉醇(溶在0．3ml乙醇中)加入到450mg、400mg或350mg冷凍干燥的乙酰-γ-環(huán)糊精樣品中。然后在真空下保持18小時(shí)，用五氧化二磷除去乙醇。得到的組合部分分別溶于5ml、4ml、3ml和2ml的5％葡萄糖水溶液中。使用不同量乙酰-γ-環(huán)糊精根據(jù)實(shí)施例Ⅰ．1制備的組合物和這些重新配制的紫杉醇溶液的物理穩(wěn)定性總結(jié)于表3、4、5。表3<tablesid="table3"num="003"><table>加入的5％葡萄糖溶液的ml數(shù)5ml4ml3ml2ml紫杉醇終濃度mg／ml0．60．751．01．5AcγCD終濃度mg／ml90112．5150225憑視覺(jué)評(píng)價(jià)穩(wěn)定性，以小時(shí)計(jì)乳白色溶液＞48＞48＞48</table></tables>表4<tablesid="table4"num="004"><table>加入的5％葡萄糖溶液的ml數(shù)5m4ml3ml2ml紫杉醇終濃度mg／ml0．60．751．01．5AcγCD終濃度mg／ml80100133200憑視覺(jué)評(píng)價(jià)穩(wěn)定性，以小時(shí)計(jì)＜4輕度乳濁＞24澄清溶液溶解的紫杉醇mg／ml配制后22小時(shí)后0．410．421．261．25</table></tables>表5<tablesid="table5"num="005"><table>加入的5％葡萄糖溶液的ml數(shù)5ml4ml3ml2ml紫杉醇終濃度mg／ml0．60．751．01．5AcγCD終濃度mg／ml7086117175憑視覺(jué)評(píng)價(jià)穩(wěn)定性，以小時(shí)計(jì)乳濁度增加乳濁度增加＞24幾乎澄清溶液溶解的紫杉醇mg／ml(HPLC)配制時(shí)22小時(shí)后1．161．17</table></tables>實(shí)施例Ⅰ．2．制備紫杉醇的標(biāo)稱濃度為0．6mg／ml的制劑用3ml濃度為10mg／ml的紫杉醇(相當(dāng)于30mg紫杉醇)將6．5g非晶形乙酰-γ-環(huán)糊精潤(rùn)濕。立即向濕的混合物中加入50ml5％右旋糖溶液，搖蕩組合物直至得到澄清溶液。0．2μm濾膜過(guò)濾溶液后，用HPLC檢測(cè)，溶液中溶解的紫杉醇的濃度達(dá)0．55±0．05mg／ml。該溶液可盛放在玻璃容器中于正常光線下室溫貯放至少6小時(shí)而沒(méi)有可察覺(jué)的乳濁和／或顆粒形成。貯放6小時(shí)后再用HPLC分析溶解的紫杉醇，證實(shí)溶解的紫杉醇濃度沒(méi)有降低。實(shí)施例Ⅰ．3．制備紫杉醇的標(biāo)稱濃度為0．3mg／ml的制劑先用3ml濃度為10mg／ml的紫杉醇(相當(dāng)于30mg紫杉醇)將6．5g非晶形乙酰-γ-環(huán)糊精潤(rùn)濕。立即向濕的混合物中加入100ml5％右旋糖溶液，搖蕩混合物直至得到澄清溶液。0．2μm濾膜過(guò)濾溶液后，用HPLC檢測(cè)，溶液中溶解的紫杉醇的濃度達(dá)0．27±0．03mg／ml。該溶液可盛放在玻璃容器中于正常光線下室溫貯放至少12小時(shí)而沒(méi)有可察覺(jué)的乳濁和／或顆粒形成。貯放12小時(shí)后再用HPLC分析溶解的紫杉醇，證實(shí)溶解的紫杉醇濃度沒(méi)有降低。實(shí)施例Ⅰ．4．制備docetaxel的標(biāo)稱濃度為0．5mg／ml和1mg／ml的制劑用0．1ml濃度為20mg／ml的docetaxel(相當(dāng)于2mgdocetaxel)將100mg非晶形乙酰-γ-環(huán)糊精潤(rùn)濕。立即向濕的固態(tài)混合物樣本中加入1ml或2ml5％w／v右旋糖水溶液，搖蕩混合物直至得到澄清溶液。按照實(shí)施例I．4．的方法，溶液中溶解的docetaxel的濃度分另別達(dá)1mg／ml和0．5mg／ml。該溶液可盛放在玻璃容器中于正常光線下室溫貯放至少24小時(shí)而沒(méi)有可察覺(jué)的乳濁和／或顆粒形成。提到的20mgdocetaxel劑量單位的兩種溶液組合物如下-AcγCD∶1000mg-docetaxel∶20mg-乙醇1ml-5％右旋糖20ml或40ml實(shí)施例Ⅰ．5．用羥丙基-β-環(huán)糊精(HPβCD)制備docetaxel的標(biāo)稱濃度為0．75mg／ml的制劑用0．15ml濃度為10mg／ml的docetaxel(相當(dāng)于1．5mgdocetaxel)將200mgHPβCD潤(rùn)濕。立即向濕的混合物中加入2ml5％右旋糖水溶液，搖蕩混合物直至得到澄清溶液。按照實(shí)施例I．5．的方法，溶液中溶解的docetaxel的濃度達(dá)0．75mg／ml。該溶液可盛放在玻璃容器中于正常光線下室溫貯放至少24小時(shí)而沒(méi)有可察覺(jué)的乳濁和／或顆粒形成。提到的20mgdocetaxel劑量單位的溶液組合物如下-HPβCD2670mg-docetaxel20mg-乙醇2ml-5％右旋糖27ml實(shí)施例Ⅰ．6．制備二元紫杉醇／乙酰-γ-環(huán)糊精的共-凍干物將溶于3ml乙醇的30mg紫杉醇加入到5．0g非晶形乙酰-γ-環(huán)糊精中。向該濕的粉末中再加入2ml乙醇并將粉末溶于50ml蒸餾水，得到標(biāo)稱濃度為0．6mg／ml紫杉醇的澄清溶液。在干冰中迅速冷凍溶液并且冷凍干燥，得到紫杉醇含量為0．6±0．05％／w的白色凍干物。通過(guò)加入50ml5％葡萄糖水溶液，可以很方便地將該凍干物重新配制成其原始體積的溶液。得到濃度為0．6mg／ml的紫杉醇澄清溶液。重新配制的溶液盛放在玻璃容器中于室溫下常態(tài)貯放。0．2μm濾膜過(guò)濾測(cè)試溶液后，HPLC法分析紫杉醇濃度。紫杉醇的含量為制備后0．513±0．07mg／mL★貯放25小時(shí)后0．556±0．01mg／mL(★標(biāo)稱和實(shí)測(cè)紫杉醇濃度的差異是由于凍干物的體積膨脹的緣故)實(shí)施例Ⅰ．7．制備二元docetaxel／乙酰-γ-環(huán)糊精的共-凍干物將溶于0．5ml乙醇的10mgdocetaxel加入到400mg非晶形乙酰-γ-環(huán)糊精中。將該濕粉末溶于8ml蒸餾水，得到標(biāo)稱濃度為1．25mg／mldocetaxel的澄清溶液。在干冰中迅速冷凍溶液并且冷凍干燥，得到docetaxel含量為2．25±0．1％的白色凍干物。50mg的固態(tài)凍干物可以很容易地溶于1ml5％葡萄糖水溶液中，得到濃度為1．13mg／ml(HPLC測(cè)定)的docetaxel澄清溶液。重新組配的溶液盛放在玻璃容器中于室溫下常態(tài)貯放。使用HPLC法測(cè)得貯放21小時(shí)后docetaxel的濃度為1．15±0．02mg／ml。甚至在貯放72小時(shí)后，溶液中仍沒(méi)有視覺(jué)可察覺(jué)的乳濁或固體顆粒形成。實(shí)施例Ⅰ．8．制備紫杉醇／乙酰-γ-環(huán)糊精／葡萄糖的共-凍干物將30mg紫杉醇溶于3ml乙醇并將溶液加入到5．0g非晶形乙酰-γ-環(huán)糊精中。向該濕的粉末中再加入2ml乙醇，然后將粉末溶于50ml5％葡萄糖水溶液。在干冰中迅速冷凍溶液并且冷凍干燥，得到紫杉醇含量為0．42±0．01％的白色凍干物。通過(guò)加入50ml蒸餾水，可以很容易地將該凍干物重新配制成其原始體積的溶液。得到標(biāo)稱濃度為0．6mg／ml的紫杉醇澄清溶液。重新組配的溶液盛放在密封的玻璃容器中于室溫下常態(tài)貯放。0．2μm濾膜過(guò)濾測(cè)試溶液后，HPLC法測(cè)定貯放期間的紫杉醇濃度。測(cè)得紫杉醇的含量為制備后即刻0．530±0．08mg／mL★貯放25小時(shí)后0．541±0．05mg／mL(★標(biāo)稱和實(shí)測(cè)紫杉醇濃度的差異是由于凍干物的體積膨脹的緣故)實(shí)施例Ⅰ．9．制備docetaxel／乙酰-γ-環(huán)糊精／葡萄糖的共-凍干物將溶于0．4ml乙醇的8mgdocetaxel加入到400mg非晶形乙酰-γ-環(huán)糊精中，然后將該濕粉末溶于8ml5％w／v葡萄糖水溶液中。得到標(biāo)稱濃度為1mg／ml的docetaxel澄清溶液，在干冰中迅速冷凍該溶液并且冷凍干燥，得到docetaxel含量為1％的白色凍干物。通過(guò)加入1、2或4ml蒸餾水，可以很容易地將100mg不含乙醇的固態(tài)凍干物重新配制成標(biāo)稱濃度分別為1、0．5或0．25mg／ml的docetaxel澄清溶液。表6總結(jié)了用HPLC測(cè)定不同標(biāo)稱濃度時(shí)溶解的docetaxel濃度在密封的玻璃容器中于室溫下貯放21小時(shí)的docetaxel溶液的物理穩(wěn)定性。表6<tablesid="table6"num="006"><table>溶解的docetaxelmg／mlHPLC標(biāo)稱的溶解的docetaxel濃度mg／ml0．5mg／ml0．25mg／ml制備時(shí)0．930．490．2421小時(shí)后0．890．480．24</table></tables>實(shí)施例Ⅰ．10．制備二元docetaxel／羥丙基-β-環(huán)糊精(HPβCD)共-凍干物將溶于0．3ml乙醇的6mgdocetaxel加入到300mgHPβCD中。將該濕粉末溶于6ml蒸餾水得到標(biāo)稱濃度為1mg／ml的docetaxel澄清溶液，在干冰中迅速冷凍該溶液并且冷凍干燥，得到docetaxel含量為2％w／v的白色凍干物?？梢院苋菀椎貙?0mg固態(tài)凍干物溶于1或2ml5％葡萄糖含水溶液中，得到docetaxel含量分別為0．97mg／ml和0．59mg／ml(經(jīng)HPLC測(cè)定)的澄清溶液。重新配制的溶液盛放在密封的玻璃容器中于室溫下常態(tài)貯放。貯放21小時(shí)后HPLC分析，docetaxel的濃度為0．95±0．05mg／ml和0．49±0．05mg／ml。實(shí)施例Ⅰ．11．通過(guò)共同-蒸發(fā)方式延長(zhǎng)紫杉醇的過(guò)飽和溶解狀態(tài)將30mg紫杉醇溶解于6ml乙醇中，并將該溶液與5g乙酰-γ-環(huán)糊精充分混合。再加入3ml乙醇，并于室溫下攪拌混合物5分鐘。使用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在氮?dú)饬髦谐セ旌衔镏械囊掖肌Ｈ缓髮⒌玫降陌咨腆w溶于5ml去離子水中，得到輕度渾濁的溶液，立即用干冰冷凍溶液并且冷凍干燥。得到的凍干物是速溶的非晶形粉末。通過(guò)加入注射水或5％葡萄糖水溶液，可以很方便地將凍干物重新配制成澄清溶液。重新配制的溶解濃度為0．3-0．6mg／ml的紫杉醇溶液在室溫下保持穩(wěn)定至少24小時(shí)。實(shí)施例Ⅰ．12．靜脈內(nèi)應(yīng)用的非腸道組合物溶于10ml乙醇的100mg紫杉醇加入到15．0g非晶形大表面積的乙酰-γ-環(huán)糊精中。向該濕粉末中再加入10ml乙醇，并將粉末溶于80ml蒸餾水中，得到標(biāo)稱濃度為1．25mg／ml的紫杉醇澄清溶液。在干冰中迅速冷凍溶液并且冷凍干燥，得到紫杉醇含量為0．7±0．05％w的白色凍干物。用5％w／v右旋糖水溶液可以很容易地將該凍干物配制成100ml。得到隨時(shí)可用于靜脈應(yīng)用的濃度為1．0mg／ml的紫杉醇澄清溶液。Ⅱ．生物學(xué)研究該研究的目標(biāo)是評(píng)價(jià)紫杉醇靜脈給藥后的某些特異副作用。在α-氯醛糖／戊巴比妥鈉維持麻醉下的總共7只比哥獵犬(beagle)身上檢測(cè)了紫杉醇靜脈給藥后的心血管和呼吸系統(tǒng)的作用。Ⅱ．1．測(cè)試物質(zhì)A．1ml液態(tài)紫杉醇(30mg／ml，乙醇溶解)裝在小瓶中供用。在測(cè)試過(guò)程中溶于載體1∶1的CremophorELP乙醇中。B．紫杉醇／AcγCD白色結(jié)晶粉末；根據(jù)本發(fā)明說(shuō)明書(shū)實(shí)施例Ⅰ．Ⅰ．6．制備。在測(cè)試過(guò)程中溶于載體2．5％w／v右旋糖水溶液中。Ⅱ．2．方法記錄或?qū)С鱿铝袇?shù)，參數(shù)用作心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)內(nèi)各種要素功能狀態(tài)的指標(biāo)。圓括號(hào)中表示的是測(cè)量單位。<tablesid="table7"num="007"><table>收縮壓、舒張壓、平均動(dòng)脈壓(mmHg)心率(搏動(dòng)次數(shù)／分鐘)總的血液動(dòng)力學(xué)狀態(tài)左室收縮壓(mmHg)左室最大收縮速度(dp／dtmax)(mmHg．sec-1)心肌收縮狀態(tài)心電圖(H導(dǎo)聯(lián))心肌電狀態(tài)股動(dòng)脈流量(ml／min)股動(dòng)脈阻力(mmHg／ml／min)外周血管系統(tǒng)的狀態(tài)和阻力呼吸頻率(次／分鐘)1分鐘呼吸容積(ml)潮式呼吸容積(ml)總的呼吸系統(tǒng)狀態(tài)</table></tables>靜脈注射硫噴妥鈉誘導(dǎo)麻醉，需要量的α-氯醛糖和戊巴比妥鈉混合物維持麻醉。注意保持體溫。進(jìn)行氣管插管，插管連接呼吸速度描記器的屏幕以便測(cè)量潮式呼吸容積(ml)和導(dǎo)出參數(shù)-呼吸頻率(次／分鐘)和1分鐘呼吸容積(ml)。將導(dǎo)管插入右側(cè)股動(dòng)脈和頭靜脈以方便分別進(jìn)行血壓測(cè)量和靜脈給予載體、測(cè)試物質(zhì)和麻醉藥。股動(dòng)脈連接充有肝素／生理鹽水的壓力傳感器，后者與Grass7E多種波動(dòng)描記儀聯(lián)接。心率則由血壓的電信號(hào)讀出。將一超聲測(cè)流探針置于左股動(dòng)脈附近并連接在耦聯(lián)了Grass多種波動(dòng)描記儀的血流計(jì)上，以記錄股動(dòng)脈流量(ml／min)。將一導(dǎo)管插入左頸動(dòng)脈并繼續(xù)進(jìn)入左心室，以便測(cè)量左室收縮壓(LVSP)。導(dǎo)管連接在充有肝素／生理鹽水的壓力傳感器上，并在Grass多種波動(dòng)描記儀上顯示出LVSP信號(hào)。皮下針狀電極插入適當(dāng)?shù)闹w中，以便監(jiān)視心電圖，后者顯示在Grass多波描記儀上。來(lái)自Grass多波描記儀的各種信號(hào)傳入計(jì)算機(jī)，捕獲的數(shù)據(jù)得到分析和顯示。30分鐘的穩(wěn)定期后，用15分鐘期間按照7．0ml／KG的劑量容積靜脈注入載體。45分鐘后和此后按最小為45分鐘的間隔靜脈給藥，每次給藥劑量為7．0ml／KG，給藥時(shí)間為15分鐘。從開(kāi)始輸注起，對(duì)于參數(shù)至少要監(jiān)測(cè)45分鐘。所有劑量均是通過(guò)KdS200型輸注泵而給予的。檢測(cè)了下列樣品編號(hào)動(dòng)物靜脈注射藥物藥物劑量7ml/KG，15minmg/m21．CremophorELP乙醇紫杉醇6；602．CremophorELP乙醇紫杉醇6；603．2901AKCremophorELP乙醇無(wú)-4．2841AKCremophorELP乙醇無(wú)-5．D25152．5％右旋糖／在水中紫杉醇／AcγCD*10；20；40；606．D29372．5％右旋糖／在水中紫杉醇／AcγCD*40；10；60；907．D52．5％右旋糖／在水中紫杉醇／AcγCD*90；120；240*=按照實(shí)施例Ⅰ．6．制備的所有的參數(shù)包括高圖形分辨率(50mm／秒)記錄的ECG，在穩(wěn)定期均按照5分鐘的間隔進(jìn)行測(cè)定，在給予載體和藥物后按照0．5、1、2和5分鐘的間隔測(cè)定。在整個(gè)觀察期結(jié)束時(shí)，靜脈注射過(guò)量戊巴比妥鈉殺死動(dòng)物。Ⅱ．3．結(jié)果動(dòng)物結(jié)果1和2由于動(dòng)物死亡，在1∶1CremophorELP乙醇中的紫杉醇按6和60mg／m2給藥沒(méi)能繼續(xù)。3和4在CremophorELP乙醇中以兩種劑量水平(所用劑量分別相當(dāng)于6和60mg／m2的紫杉醇)靜脈給藥均引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)，迅速降低動(dòng)脈血壓、心率、左室收縮壓和左室最大收縮速率(dp／dtmax)，下降幅度在兩個(gè)動(dòng)物是相似的。給藥后很少或沒(méi)有觀察到任何心血管參數(shù)的恢復(fù)。兩個(gè)劑量水平均誘導(dǎo)室性異位搏動(dòng)，ECG波形的振幅全部降低，T-波下凹，振幅下降。在動(dòng)物2841AK，載體誘導(dǎo)S-T段抬高。這些發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致這樣的結(jié)論溶劑-混合物本身具有毒性，應(yīng)當(dāng)避免靜脈給藥。5；6；7按7ml／KG的劑量容積給予2．5％w／v的右旋糖，對(duì)3只試驗(yàn)動(dòng)物的心血管系統(tǒng)或呼吸系統(tǒng)沒(méi)有引發(fā)任何明顯的作用。紫杉醇／AcγCD總劑量增至240mg／m2，僅引起測(cè)量的心血管和呼吸系統(tǒng)參數(shù)微小變化。輕度作用包括動(dòng)脈血壓和左室收縮壓輕度升高，伴隨有心率和左室最大dp／dt下降。其它不一致的變化包括股動(dòng)脈血流、潮式容積和呼吸頻率增加。這些發(fā)現(xiàn)是可逆的。Ⅱ．4．附圖為描述結(jié)果中的一個(gè)重要參數(shù)，用圖1～6表示靜脈給藥對(duì)麻醉比哥犬動(dòng)脈血壓的影響動(dòng)脈血壓(mmHg)對(duì)時(shí)間(分鐘)作圖●-●-●-收縮壓▲-▲-▲-舒張壓圖動(dòng)物載體藥物mg／m2圖12901AKCremophor乙醇無(wú)圖22841AKCremophor乙醇無(wú)圖3D25152．5％右旋糖水溶液紫杉醇／AcγCD實(shí)施例I．6．10，20，40，60圖4D52．5％右旋糖水溶液紫杉醇／AcγCD實(shí)施例I．6．120，90，240圖5D29372．5％右旋糖水溶液紫杉醇／AcγCD實(shí)施例I．6．10，90；40；60圖6D52．5％右旋糖水溶液紫杉醇／AcγCD實(shí)施例I．6．120；90；240平均動(dòng)脈壓Ⅱ．5．小結(jié)靜脈給予載體1∶1的CremophorELP乙醇或者紫杉醇與載體一起給藥，均引起過(guò)敏反應(yīng)，因此不適于施用。以含水右旋糖溶液作為載體給予紫杉醇／乙酰-γ-CD(從20mg直到240mg／m2)，在所有試驗(yàn)動(dòng)物中對(duì)任何參數(shù)均沒(méi)能產(chǎn)生顯著的和持久的心血管作用。權(quán)利要求1．制備非腸道應(yīng)用的即刻溶解的固態(tài)的和其在含水溶劑中溶液形式的含有乙酰-γ-環(huán)糊精或羥基-丙基-β-環(huán)糊精(下稱環(huán)糊精)的藥物組合物的方法，其特征在于a)將紫杉醇類物質(zhì)，優(yōu)選紫杉醇或者docetaxel，或它們的鹽或水合物或溶劑合物溶于乙醇，然后進(jìn)行下列步驟中的任一步驟ⅰ)加入固態(tài)環(huán)糊精(和任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑)，在含水溶劑中溶解混合物并冷凍干燥得到固體；或者ⅱ)加入冷凍干燥的環(huán)糊精(和任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑)，蒸發(fā)溶劑并干燥得到固體，或者ⅲ)將溶液與固態(tài)的大表面積的環(huán)糊精(優(yōu)選為冷凍干燥的)和任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑混合，然后任選地在有效量的等滲添加劑存在的條件下，使用含水溶劑溶解，得到溶液；其中含有A．作為活性成分的所述紫杉醇類物質(zhì)，和B．所述的環(huán)糊精，和C．任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑其中紫杉醇類物質(zhì)環(huán)糊精重量比范圍為1∶25～1∶400；和任選地b)當(dāng)使用步驟ⅰ)或ⅱ)時(shí)，將固體溶解于含水溶劑中以得到隨時(shí)可直接用于醫(yī)療的非腸道用溶液。2．根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于使用下列任一物質(zhì)作為含水溶劑或稀釋劑注射質(zhì)量級(jí)的水、含有有效量的能夠使含水溶液等滲的等滲添加劑如氯化鈉、葡萄糖或右旋糖的含水溶液。3．根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的方法，其特征在于使用下列任一物質(zhì)作為環(huán)糊精組分乙?；潭葹槊總€(gè)環(huán)糊精環(huán)具有約2～約12個(gè)乙?；囊阴?γ-環(huán)糊精，乙?；潭葹槊總€(gè)環(huán)糊精環(huán)具有約8個(gè)乙?；囊阴?γ-環(huán)糊精。4．根據(jù)權(quán)利要求1和2中任一所述的方法，其特征在于使用下列任一物質(zhì)作為環(huán)糊精組分取代程度為每個(gè)環(huán)糊精環(huán)具有約2～約10個(gè)羥丙基的羥基-丙基-β-環(huán)糊精，取代程度為每個(gè)環(huán)糊精環(huán)具有約4～約6個(gè)羥丙基的羥基-丙基-β-環(huán)糊精。5．根據(jù)權(quán)利要求1-4任一所述的方法，其特征在于使用紫杉醇的水合多晶型物形式或其溶劑合物形式如與乙醇的溶劑合物。6．可溶于水的固態(tài)藥物組合物和其在含水溶劑中的溶液，所述組合物含有a)作為活性成分微細(xì)地分散的、大表面積的、非晶形的、優(yōu)選為冷凍干燥的紫杉醇類物質(zhì)，如紫杉醇或docetaxel，它們的鹽或它們的多晶型水合物或溶劑合物如與乙醇形成的溶劑合物和b)微細(xì)地分散的、大表面積的、非晶形的、優(yōu)選為冷凍干燥的乙酰-γ-環(huán)糊精或羥基-丙基-β-環(huán)糊精(環(huán)糊精)，其中所述紫杉醇類物質(zhì)所述環(huán)糊精的重量比為1∶25～1∶400；c)和任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性輔劑。7．根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于含有紫杉醇作為活性成分和環(huán)糊精是乙酰-γ-環(huán)糊精，二者的重量比為1∶100～1∶250。8．根據(jù)權(quán)利要求5所述的組合物，其特征在于含有活性成分docetaxel和羥基-丙基-β-環(huán)糊精，二者重量比為1∶25～1∶100。9．含有按照權(quán)利要求1-4中的任一所制備的產(chǎn)品作為活性成分的藥物組合物。10．使用權(quán)利要求5-8中的任一藥物組合物形式的紫杉醇類物質(zhì)防止紫杉醇類物質(zhì)，紫杉醇和docetaxel及它們的鹽、在含水溶液中的溶劑合物和水合物的自-聚集和過(guò)早析出作用并延長(zhǎng)藥物的過(guò)飽和溶解狀態(tài)的方法。11．通過(guò)使用有效量的權(quán)利要求1-8中的任一藥物組合物來(lái)治療不需要的細(xì)胞增殖的方法，其特征在于給需要治療的患者施用含有權(quán)利要求1-8中含有有效量紫杉醇類物質(zhì)，優(yōu)選為紫杉醇和docetaxel及它們的鹽和溶劑合物和水合物的任一藥物組合物劑型。全文摘要本發(fā)明涉及可溶于水的固態(tài)藥物組合物及其在含水溶劑中的溶液,所述組合物含有a)作為活性組分的微細(xì)地分散的、大表面積的、非晶形的、優(yōu)選為冷凍干燥的紫杉醇類物質(zhì),如紫杉醇或docetaxel,其鹽類或其多晶型水合物或溶劑合物諸如與乙醇形成的溶劑合物,和b)微細(xì)地分散的、大表面積的、非晶形的、優(yōu)選冷凍干燥的乙酰－γ－環(huán)糊精或羥基－丙基－β－環(huán)糊精(環(huán)糊精),其中所述紫杉醇類物質(zhì):所述環(huán)糊精的重量比為1∶25和1∶400;c)和任選地非腸道應(yīng)用藥物所使用的其它水溶性助劑。文檔編號(hào)A61P35/00GK1281373SQ98811010公開(kāi)日2001年1月24日申請(qǐng)日期1998年11月9日優(yōu)先權(quán)日1997年11月10日發(fā)明者J·M·格茨申請(qǐng)人:西森實(shí)驗(yàn)室有限公司