專利名稱：通過偶氮甲堿葉立德的閉環(huán)制備稠多環(huán)生物堿,其新化合物和其作為化療劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般性地涉及制備可用于治療的化合物的方法。更具體地，本發(fā)明涉及制備一類稠多環(huán)生物堿的方法，以及所獲得的新化合物，含有它們的藥物組合物，和應(yīng)用它們的治療方法。
背景技術(shù)：
潛在地顯示有益的藥理性質(zhì)的天然存在分子可以從自然界，如海洋，植物和微生物分離出來。這類分子的一個(gè)例子是以片螺素(Lamellarins)已知的化合物的總類。這些多芳香生物堿從海洋中分離出來，并包括稠合的多芳香結(jié)構(gòu)。片螺素C和D已經(jīng)顯示出在受精海膽分析中引起細(xì)胞分裂的抑制，而片螺素I，K和L在培養(yǎng)時(shí)都顯示出對(duì)P388和A549細(xì)胞系有相當(dāng)明顯的細(xì)胞毒性。最近，片螺素N已經(jīng)通過作為IV型微管毒物在肺癌細(xì)胞系中顯示出活性。而且，這些化合物也已經(jīng)顯示出對(duì)多藥耐受細(xì)胞具有細(xì)胞毒性，并可作為多藥耐受表型的無毒調(diào)節(jié)劑，并因此提供一種有吸引力的化療劑的潛在來源。
但是，片螺素的潛在臨床應(yīng)用受到其有限天然產(chǎn)量，以及分離困難的嚴(yán)重限制。Steglich及其合作者在《應(yīng)用化學(xué)，英文國(guó)際版》Angew.Chem.Int.Ed.Eng.1997，36，155中已經(jīng)描述了一種用于合成片螺素G三甲基醚的仿生序列，但是，該方法所受的限制是其缺少區(qū)域化學(xué)控制，并且不適于由天然產(chǎn)物支配的特異性取代方式。因此，需要能夠生產(chǎn)片螺素和其同系物的合成方法。
發(fā)明提要在整個(gè)說明書中，除非上下文需要，“包括”一詞及其變化形式將被理解為意指包含規(guī)定的整體或整體的組，但不排除任何其他的整體或整體的組。
第一方面，本發(fā)明涉及制備通式(I)化合物、或其藥用衍生物和鹽，外消旋體，異構(gòu)體和/或互變異構(gòu)體的方法
包括通式(II)的偶氮甲堿葉立德的環(huán)化步驟
A是可選被芳基或芳雜環(huán)基取代的環(huán)狀基團(tuán)；或A是環(huán)狀基團(tuán)RA1RA2C-CRA3RA4，其中RA2和RA3與其所連接的碳原子一起形成可選取代的飽和或不飽和碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，而RA1和RA4如下定義或一起形成一條鍵；或A是非環(huán)狀基團(tuán)RA1RA2C-CRA3RA4，其中RA1-RA4如下定義，而RA2和RA3可以可選地一起形成一條鍵；Z是碳或雜原子；n選自0，1，2或3；和RA1-RA4，W，X和Y可以相同或不同，各自選自氫，非強(qiáng)制性取代的烷基，非強(qiáng)制性取代的鏈烯基，非強(qiáng)制性取代的炔基，非強(qiáng)制性保護(hù)的羥基，非強(qiáng)制性取代的氨基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基，非強(qiáng)制性取代的鏈烯氧基，非強(qiáng)制性取代的炔氧基，非強(qiáng)制性取代的芳基，非強(qiáng)制性取代的雜環(huán)基，羧基，羧基酯，酰胺基，?；Ｑ趸?，巰基，非強(qiáng)制性取代的烷硫基，鹵素，硝基，硫酸基，磷酸基和氰基，或W和X與其所連接的氮和碳原子一起形成飽和或不飽和的含氮雜環(huán)基，該雜環(huán)基可以非強(qiáng)制性地被取代，或非強(qiáng)制性地與飽和或不飽和的碳環(huán)基，芳基或雜環(huán)基稠合。
本發(fā)明的另一方面涉及由如本文所述的方法制備的式(I)化合物。
本發(fā)明的另一方面涉及如本文所述的通式(I)新化合物
其中A，Z，W，X，Y和n如前定義，條件是該化合物不是片螺素A-N，S-X；T，U，V或Y 20-硫酸酯；或D，K，L，M或N-三乙酸酯；G-三甲基醚；或I-乙酸酯。
本發(fā)明還一方面涉及治療多藥物耐受腫瘤的方法，包括給予有效量的式(I)化合物。
本發(fā)明另一方面提供包括式(I)化合物與藥用載體，賦形劑或稀釋劑的藥物組合物。優(yōu)選方案的說明通式(II)的偶氮甲堿葉立德可以通過本領(lǐng)域已知的方法，例如A.Padwa等，在《化學(xué)評(píng)論》Chem Rev.，1996，96，(1)，241和V.P.Litvinov，《俄羅斯有機(jī)化學(xué)雜志》Russian Journal of OrganicChemistry，Vol.31(No.10)，1995，pp.1301-1340中所述的方法，由相應(yīng)的前體獲得。產(chǎn)生通式(II)的偶氮甲堿葉立德特別合適的手段是通過將堿加入式(III)化合物而實(shí)現(xiàn)。
其中抗衡離子L是穩(wěn)定的弱堿性陰離子。
合適的陰離子包括從磺酸，如甲苯磺酸，甲磺酸，三氟甲磺酸，bosylate，苯磺酸，tresylate，nonaflate，nosylate，和鹵素，尤其是氯和溴和碘衍生的離子。優(yōu)選L是溴離子和碘離子。
在優(yōu)選的方案中，本發(fā)明提供制備式(Ia)化合物的方法
包括通式(IIa)的偶氮甲堿葉立德的環(huán)化步驟
其中R1-R8和R14與前面對(duì)W，X和Y的定義相同。
優(yōu)選地，式(IIa)的偶氮甲堿葉立德通過將堿加入通式(IIIa)的化合物中而產(chǎn)生
其中R1-R8，R14，Y，Z，n和L如前定義。
用于產(chǎn)生式(II)偶氮甲堿葉立德的合適的堿包括從堿金屬衍生的堿如苯基鋰，丁基鋰，KNH2和NaNH2；金屬碳酸鹽如碳酸鉀，碳酸鋰，碳酸鈉和碳酸銫；以及胺。優(yōu)選地，所用的堿是單-，二-或三-取代的胺，更優(yōu)選地是烷基胺。最優(yōu)選地，該堿是三乙胺或二異丙基乙胺。
偶氮甲堿葉立德的環(huán)化可以通過任何合適的手段，如熱處理或用金屬鹽，優(yōu)選Cu(I)鹽如CuI處理而實(shí)現(xiàn)。優(yōu)選地，環(huán)化通過熱處理，如通過在非強(qiáng)制性沸騰的溶劑中加熱而實(shí)現(xiàn)。合適的溶劑包括四氫呋喃，氯仿和1，2-二氯乙烷。
在另一優(yōu)選的方面，式(II)化合物環(huán)化后，接著氧化處理。氧化處理可以通過本專業(yè)技術(shù)人員已知并常規(guī)進(jìn)行的手段實(shí)現(xiàn)。特別合適的手段包括在空氣中，非強(qiáng)制性地在硅膠存在下直接氧化；用Fremy’s鹽處理；用諸如氯醌或2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯并醌(DDQ)的醌處理，和用金屬催化劑如鉑，鈀和鎳處理。優(yōu)選地，氧化處理通過DDQ或在空氣中的硅膠或Fremy’s鹽進(jìn)行。當(dāng)式(III)化合物的L是碘時(shí)，氧化被促進(jìn)。
在優(yōu)選的方案中，通式(I)化合物通過用三乙胺或二異丙基胺處理通式(III)化合物，接著熱誘導(dǎo)環(huán)化，隨后用DDQ或空氣中的硅膠氧化處理而制備。在更優(yōu)選的方案中，通式(Ia)的化合物通過用三乙胺或二異丙基胺處理通式(IIIa)的化合物，接著熱誘導(dǎo)環(huán)化，并隨后用DDQ或在空氣中的硅膠或Fremy’s鹽氧化處理。
當(dāng)n為1，Z優(yōu)選地選自碳，氮，氧或硫中之一。更優(yōu)選地，Z是氮或氧。最優(yōu)選地，Z是氧。當(dāng)n是2或3時(shí)，優(yōu)選地一個(gè)Z是碳，優(yōu)選地其余的Z是氧或氮。當(dāng)n是2或3時(shí)，合適的例子包括A-O-CH2-C(O)-，A-CH2-N-C(O)-，A-O-CH2-O-C(O)-和A-CH2-O-CH2-C(O)-。
優(yōu)選地，當(dāng)W和X與其所連接氮和碳原子一起形成飽和或不飽和的雜環(huán)時(shí)，該基團(tuán)是非強(qiáng)制性取代的喹啉基，非強(qiáng)制性取代的異喹啉基，非強(qiáng)制性取代的二氫喹啉基，非強(qiáng)制性取代的二氫異喹啉基，非強(qiáng)制性取代的吡啶基或其二氫或四氫同系物，或非強(qiáng)制性取代的菲啶基。優(yōu)選地，W和X與其所連接氮和碳原子一起形成通式(i)的非強(qiáng)制性取代的異喹啉基或非強(qiáng)制性取代的二氫異喹啉基
其中R1-R4和R14如前定義。
優(yōu)選地R1-R4是氫，羥基，非強(qiáng)制性取代的烷基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基，酰氧基，或硫酸基。最優(yōu)選地，它們是氫，羥基，甲氧基，異丙氧基甲基，乙酰氧基或硫酸基。優(yōu)選地R14是氫或羥基。
當(dāng)A是芳基或芳雜環(huán)基時(shí)，A環(huán)可以非強(qiáng)制性地被苯或萘環(huán)取代，或非強(qiáng)制性取代的芳雜環(huán)基如吡啶，呋喃，吡咯或噻吩，和其苯并稠合類似物，例如，喹啉，吲哚，苯并呋喃和苯并噻吩。雙環(huán)雜環(huán)基的連接可以經(jīng)過苯或雜環(huán)。優(yōu)選地A是非強(qiáng)制性取代的苯。優(yōu)選地，該取代基是氫，羥基，非強(qiáng)制性取代的烷基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基，酰氧基，或硫酸基。最優(yōu)選地，它們是氫，羥基，甲氧基，異丙氧基，甲基，乙酰氧基或硫酸基。
當(dāng)A是非環(huán)狀基團(tuán)RA1RA2C-CRA3RA4時(shí)，RA1-RA4優(yōu)選地獨(dú)立選自氫、非強(qiáng)制性取代的烷基，非強(qiáng)制性保護(hù)的羥基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基或酰氧基。優(yōu)選地至少一個(gè)RA1-RA4是氫。更優(yōu)選地至少兩個(gè)是氫。再優(yōu)選地至少三個(gè)是氫。最優(yōu)選地所有的RA1-RA4都是氫。當(dāng)RA2和RA3一起形成一條鍵從而形成基團(tuán)RA1C＝CRA4時(shí)，優(yōu)選地RA1-RA4中的至少一個(gè)為氫，或優(yōu)選地兩者都為氫。
當(dāng)A是如前定義的環(huán)狀基團(tuán)RA1RA2C-CRA3RA4時(shí)，優(yōu)選地RA2-RA3形成3至8-員環(huán)狀基團(tuán)，優(yōu)選地為5至6-員環(huán)狀基團(tuán)。優(yōu)選地，RA2和R3與其所連接的碳原子一起形成環(huán)戊烷，環(huán)己烷，環(huán)戊烯，環(huán)己烯，環(huán)戊二烯，環(huán)己二烯，四氫呋喃，二氫呋喃，吡咯烷，吡咯啉，吡喃，二氫吡喃或哌啶基。在另一優(yōu)選的形式中，RA1和RA4是氫。
優(yōu)選地Y是式(ii)非強(qiáng)制性取代的苯基
其中R9-R13與前面對(duì)R1-R8和R14的定義相同。
更優(yōu)選地，R9-R13是氫，羥基，非強(qiáng)制性取代的烷基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基或酰氧基。最優(yōu)選地，R9-R13是氫，羥基，甲氧基，異丙氧基，甲基，乙酰氧基或硫酸基。
本發(fā)明的方法特別適合于制備如表1和2給出的化合物1至39。
本文所用的術(shù)語“烷基”指直鏈，支鏈或環(huán)狀全飽和烴基。除非碳原子數(shù)是特定的，否則該術(shù)語優(yōu)選地指C1-20烷基或環(huán)烷基。直鏈或支鏈烷基的例子包括甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，異戊基，仲戊基，1，2-二甲基丙基，1，1-二甲基丙基，己基，4-甲基戊基，1-甲基戊基，2-甲基戊基，3-甲基戊基，1，1-二甲基丁基，2，2-二甲基丁基，3，3-二甲基丁基，1，2-二甲基丁基，1，3-二甲基丁基，1，2，2-三甲基丙基，1，1，2-三甲基丙基，庚基，5-甲氧基己基，1-甲基己基，2，2-二甲基戊基，3，3-二甲基戊基，4，4-二甲基戊基，1，2-二甲基戊基，1，3-二甲基戊基，1，4-二甲基戊基，1，2，3-三甲基丁基，1，1，2-三甲基丁基，1，1，3-三甲基丁基，辛基，6-甲基庚基，1-甲基庚基，1，1，3，3-四甲基丁基，壬基，1-，2-，3-，4-，5-，6-或7-甲基辛基，1-，2-，3-，4-或5-乙基庚基，1-，2-或3-丙基己基，癸基，1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-和8-甲基壬基，1-，2-，3-，4-，5-或6-乙基辛基，1-，2-，3-或4-丙基庚基，十一烷基，1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-，8-或9-甲基癸基，1-，2-，3-，4-，5-，6-或7-乙基壬基，1-，2-，3-，4-或5-丙基辛基，1-，2-或3-丁基庚基，1-戊基己基，十二烷基，1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-，8-，9-或10-甲基十一烷基，1-，2-，3-，4-，5-，6-，7-或8-乙基癸基，1-，2-，3-，4-，5-或6-丙基壬基，1-，2-，3-或4-丁基辛基，1-，2-戊基庚基等等。環(huán)烷基的例子包括單-或多環(huán)烷基，如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，環(huán)辛基，環(huán)壬基，環(huán)癸基等等。
本文所用的術(shù)語“鏈烯基”指從直鏈，支鏈或環(huán)狀烴基形成的，含有至少一個(gè)碳-碳雙鍵的基團(tuán)，包括烯化的單-，二-或多-不飽和的如前定義的烷基或環(huán)烷基。除非碳原子數(shù)是特定的，否則該術(shù)語優(yōu)選地指C1-20鏈烯基。鏈烯基的例子包括乙烯基，烯丙基，1-甲基乙烯基，丁烯基，異丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，1-戊烯基，環(huán)戊烯基，1-甲基環(huán)戊烯基，1-己烯基，3-己烯基，環(huán)己烯基，1-庚烯基，3-庚烯基，1-辛烯基，環(huán)辛烯基，1-壬烯基，2-壬烯基，3-壬烯基，1-癸烯基，3-癸烯基，1，3-丁二烯基，1，4-戊二烯基，1，3-環(huán)戊二烯基，1，3-己二烯基，1，4-己二烯基，1，3-環(huán)己二烯基，1，4-環(huán)己二烯基，1，3-環(huán)庚二烯基，1，3，5-環(huán)庚三烯基和1，3，5，7-環(huán)辛四烯基。
本文所用的術(shù)語“炔基”指從含有至少一個(gè)碳-碳三鍵的直鏈，支鏈或環(huán)狀烴基產(chǎn)生的基團(tuán)，包括炔化的如前定義的單-，二-或多-不飽和烷基或環(huán)烷基。除非碳原子數(shù)是特定的，否則該術(shù)語優(yōu)選地指C1-20炔基。例子包括乙炔基，1-丙炔基，2-丙炔基，和丁炔基異構(gòu)體，和戊炔基異構(gòu)體。
術(shù)語“烷氧基”，“鏈烯氧基”和“炔氧基”分別指與氧連接的如前定義的烷基，鏈烯基和炔基。
術(shù)語“鹵素”指氟，氯，溴或碘。
術(shù)語“芳基”指單，多核，共軛和稠合的芳香烴環(huán)系的殘基。芳基的例子包括苯基，聯(lián)苯基，三聯(lián)苯基，四聯(lián)苯基，萘基，四氫萘基，蒽基，二氫蒽基，苯并蒽基，二苯并蒽基，菲基，芴基，芘基，idenyl，薁環(huán)基，基。
術(shù)語“雜環(huán)”指其中至少一個(gè)碳原子被優(yōu)選地選自氮，硫和氧的雜原子代替的單-或多碳環(huán)。合適的雜環(huán)基包括含氮雜環(huán)基，如含有1至4個(gè)氮原子的不飽和的3至6員雜單環(huán)，例如，吡咯基，吡咯啉基，咪唑基，咪唑啉基，吡唑基，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，噠嗪基，三唑基或四唑基；含有1至4個(gè)氮原子的飽和的3至6員雜單環(huán)，例如，吡咯烷基，咪唑烷基，哌啶基，吡唑烷基或哌嗪基；含有1至5個(gè)碳原子的稠合飽和或不飽和雜環(huán)基，如吲哚基，異吲哚基，二氫吲哚基，二氫異吲哚基，中氮茚基，異中氮茚基，苯并咪唑基，喹啉基，異喹啉基，吲唑基，苯并三唑基，嘌呤基，喹唑啉基，喹喔啉基，菲啶基，菲咯啉基，2，3-二氮雜萘基，1，5-二氮雜萘基，噌啉基，喋啶基，萘嵌間二氮雜苯基或四唑并噠嗪基；含有1至3個(gè)氧原子的飽和的3至6員雜單環(huán)，如四氫呋喃基，四氫吡喃基，四氫二噁英基，含有一個(gè)氧原子的不飽和3至6員雜單環(huán)基，如吡喃基，二噁英基或呋喃基；含有1至3個(gè)氧原子的稠合飽和或不飽和雜環(huán)基，如苯并呋喃基，色烯基或呫噸基；含有1至2個(gè)硫原子的不飽和3至6員雜單環(huán)基，如噻吩基或二硫雜環(huán)戊二烯基；含有1至2個(gè)氧原子和1至3個(gè)氮原子的不飽和3至6員雜單環(huán)基，如噁唑基，噁唑啉基，異噁唑基，呋咱基或噁二唑基；含有1至2個(gè)氧原子和1至3個(gè)氮原子的飽和3至6員雜單環(huán)基，如嗎啉基；含有1至2個(gè)氧原子和1至3個(gè)氮原子的不飽和稠雜環(huán)基，如苯并噁唑基或苯并噁二唑基；含有1至2個(gè)硫原子和1至3個(gè)氮原子的不飽和3至6員雜單環(huán)基，如噻唑基，噻唑啉基或噻二唑基；含有1至2個(gè)硫原子和1至3個(gè)氮原子的飽和3至6員雜單環(huán)基，如噻唑烷基；和含有1至2個(gè)硫原子和1至3個(gè)氮原子的不飽和稠雜環(huán)基，如苯并噻唑基或苯并噻二唑基。
術(shù)語“?；敝钙渲蠴H被例如對(duì)W，X，和Y定義的殘基置換的羧酸殘基，具體地可以指氨基甲酰基，脂族?；蚝蟹枷悱h(huán)的酰基，被稱為芳族?；?，或含有雜環(huán)的?；环Q為雜環(huán)?；?，優(yōu)選C1-20?；?。合適?；睦影ò被柞；?；直鏈或支鏈烷?；缂柞；?，乙?；；?，丁?；?，2-甲基丙酰基，戊酰基，2，2-二甲基丙?；?，己?；；?，辛?；甚；?，癸?；?，十一烷?；轷；轷；耐轷；?，十五烷?；?，十六烷?；咄轷；送轷；磐轷；投轷；?；烷氧羰基如甲氧羰基，乙氧羰基，叔丁氧羰基，叔戊氧羰基和庚氧羰基；環(huán)烷基羰基如環(huán)丙基羰基，環(huán)丁基羰基，環(huán)戊基羰基和環(huán)己基羰基；烷基磺?；缂谆酋；鸵一酋；?；烷氧基磺?；缂籽趸酋；鸵已趸酋；?；芳?；绫郊柞；?，甲苯甲酰基和萘甲?；环纪轷；绫交轷；?例如苯基乙?；交；交□；?，苯基異丁?；交祯；捅交乎；?和萘基烷?；?例如萘基乙酰基，萘基丙?；洼粱□；?；芳基烯?；绫交；?例如苯基丙烯?；交∠；交惗∠；?，苯基戊烯?；捅交合；洼粱；?例如萘基丙烯?；?，萘基丁烯?；洼粱煜；?；芳烷氧羰基如苯基烷氧羰基(例如芐氧羰基)；芳氧羰基如苯氧羰基和萘氧羰基；芳氧基烷酰基如苯氧基乙?；捅窖趸；?；諸如苯基氨基甲?；姆蓟被柞；?；芳硫基氨基甲?；绫搅蚧被柞；?；芳基乙醛?；绫交胰；洼粱胰；?；芳基磺酰基如苯基磺?；洼粱酋；浑s環(huán)羰基；雜環(huán)烷酰基如噻吩基乙?；绶曰；绶曰□；?，噻吩基戊?；绶曰乎；?，噻唑基乙?；?，噻二唑基乙酰基和四唑基乙?；浑s環(huán)基烯?；珉s環(huán)丙烯酰基，雜環(huán)丁烯?；?，雜環(huán)戊烯?；碗s環(huán)己烯?；?；和雜環(huán)乙醛酰基如噻唑基乙醛?；袜绶曰胰；?。
術(shù)語“酰氧基”指與氧連接的如前定義的?；?。
在本說明書中，“非強(qiáng)制性取代的”意思是一個(gè)基團(tuán)可以被一個(gè)或多個(gè)選自由烷基，鏈烯基，炔基，芳基，鹵素，鹵代烷基，鹵代鏈烯基，鹵代炔基，鹵代芳基，羥基，烷氧基，鏈烯氧基，芳氧基，芐氧基，鹵代烷氧基，鹵代鏈烯氧基，鹵代芳氧基，硝基，硝基烷基，硝基鏈烯基，硝基炔基，硝基芳基，硝基雜環(huán)基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，烯基氨基，炔基氨基，芳基氨基，二芳基氨基，芐基氨基，二芐基氨基，?；?，鏈烯基?；?，炔基?；蓟；?，?；被?，二酰基氨基，酰氧基，烷基磺酰氧基，芳基亞磺酰氧基，雜環(huán)基，雜環(huán)氧基，雜環(huán)氨基，鹵代雜環(huán)氨基，烷基亞磺酰基，芳基亞磺酰基，羰烷氧基，羰芳氧基，巰基，烷硫基，芐硫基，酰硫基，氰基，硝基，硫酸基和磷酸基組成的一組基團(tuán)進(jìn)一步取代，或不取代或稠合(形成稠多環(huán)基團(tuán))。
本文所用的術(shù)語“保護(hù)基團(tuán)”指引入的官能團(tuán)，用于暫時(shí)使特定的官能團(tuán)失活。術(shù)語“保護(hù)的羥基”指已經(jīng)被保護(hù)基暫時(shí)失活的羥基。合適的保護(hù)基團(tuán)是本專業(yè)技術(shù)人員已知的，例如在《有機(jī)合成中的保護(hù)基》Protective Groups in Organic Synthesis(T.W.Greene和P.G.M.Wutz著，Wiley Interscience，New York)中描述的。
本文所用的“雜原子”指可以是環(huán)狀有機(jī)化合物成員的除碳原子之外的任何原子。合適雜原子的例子包括氮，氧，硫，磷，硼，硅，砷，硒和碲。
本文所用的術(shù)語“堿”指適合于產(chǎn)生偶氮甲堿葉立德的任何質(zhì)子受體/電子對(duì)供體。
術(shù)語“合成子”指與所需的功能單元在結(jié)構(gòu)或化學(xué)上的等效物，并可以通過已知的或想得到的合成操作轉(zhuǎn)化為所需單元。
本文所用的術(shù)語“離去基”指被親核試劑置換的化學(xué)基團(tuán)。合適的離去基包括具有穩(wěn)定其所帶的負(fù)電荷能力的基團(tuán)，如鹵素，如前定義的硫酸基，質(zhì)子化的醇和醚，吡啶鎓鹽，從二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)衍生的亞銨鹽和重氮鹽。
本發(fā)明下面用通過下述方法制備的式(II)化合物描述。但是，必須明白，本發(fā)明延伸至由任何其他方法制備的式(II)化合物。
因此，本發(fā)明另一方面涉及制備式(I)化合物的方法，包括a)式(IV)化合物與式(V)化合物偶聯(lián)
給出式(VI)化合物
其中PZn是Zn合成子。b)暴露化合物(VI)的Zn并與化合物L(fēng)-CH2-C(O)-L’偶合，提供化合物(VII)
其中L’是離去基或可以轉(zhuǎn)化為離去基的取代基。c)用式(VIII)的亞胺處理化合物(VII)
d)產(chǎn)生通式(II)的偶氮甲堿葉立德，并隨后將葉立德環(huán)化；其中Hal是鹵素，而A，L，W，X，Y，Z和n如前定義。
在優(yōu)選的方案中，本發(fā)明涉及制備式(Ia)化合物的方法，包括a)式(IV)化合物與式(Va)化合物偶合
給出式(VIa)化合物
b)暴露化合物(VIa)的Zn并與化合物L(fēng)-CH2-C(O)-L’偶合，提供化合物(VIIa)
c)用式(VIIIa)的化合物處理化合物(VIIa)
d)產(chǎn)生通式(IIa)的偶氮甲堿葉立德，并隨后將葉立德環(huán)化；其中Hal是鹵素，而A，L，L’，PZ，Y，Z，R1-R8，R14和n如前定義。
優(yōu)選地Y是式(ii)非強(qiáng)制性取代的苯基。更優(yōu)選地，Y是被非強(qiáng)制性取代的烷基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基或酰氧基取代的苯基。最優(yōu)選地，Y是被氫，羥基，甲氧基，甲基或乙酰氧基取代的苯基。
在優(yōu)選的方面，P是Zn的保護(hù)基，而暴露Zn指脫去保護(hù)基。保護(hù)基P的脫去可以在本專業(yè)技術(shù)人員已知的常規(guī)條件下進(jìn)行，例如在《有機(jī)合成中的保護(hù)基》Protective Groups in Organic Synthesis中描述的。優(yōu)選地，P是在水解條件下不穩(wěn)定的保護(hù)基。更優(yōu)選地，P是乙?；Ｔ趦?yōu)選的方案中，n是1，Z是氧，而P是乙酰基。
在另一優(yōu)選的方面，其中末端Z是氧，PZn是醛或?；?。Zn的暴露包括醛或?；难趸?，如Baeyer-Villiger氧化為其相應(yīng)的酯，接著水解。
其他合適的合成子是本專業(yè)技術(shù)人員已知的。
優(yōu)選的L’是鹵素，最優(yōu)選地是氯或溴，或OH(優(yōu)選地通過與DCC反應(yīng)轉(zhuǎn)化為離去基)。
通式(IV)化合物與式(V)化合物的偶合可以合適地在已知且本專業(yè)技術(shù)人員常用的條件下進(jìn)行，例如在催化劑如Pd(PPh3)4，PdCl2(PPh3)2存在下，或Cu(I)介導(dǎo)的條件，例如，CuI，和如在《綜合有機(jī)合成》Comprehensive Organic Synthesis.(B.M.Trost和I.Fleming編，Peramon出版社，New York，1991，Vol.3，521)中所述的。
圖解1至4給出了本發(fā)明代表性方法的總圖解。其中，lamellarin為片螺素，10-deoxylamellarin為10-脫氧片螺素，“bond shiftisomer”表示鍵移位異構(gòu)體。
反應(yīng)路線1a
a注(a)苯乙炔1.1當(dāng)量，Pd(PPh3)4 0.01％，CuI 0.02％，Et3N，18℃，4小時(shí)(b)(i)K2CO31.5當(dāng)量MeOH，0.25小時(shí)；(ii)2-溴乙酸，1當(dāng)量，DCC 1.05當(dāng)量，DMAP 0.05當(dāng)量，18℃，92％.(c)(I)異喹啉1當(dāng)量，THF，18℃，36小時(shí)然后Et3N 1當(dāng)量，CHCl3回流，8小時(shí)；(i)DDQ 1當(dāng)量，CH2Cl2，18℃，2小時(shí)(92％)。
反應(yīng)路線2a
a注(a)K2CO32當(dāng)量，PriBr 1.3當(dāng)量，DMF 80℃，13小時(shí)(100％)。(b)I21.1當(dāng)量，AgO2CCF31.1當(dāng)量，65℃，7小時(shí)(93％)。(c)CBr42當(dāng)量，PPh32當(dāng)量，Zn 2當(dāng)量，(100％)。(d)nBuLi 2當(dāng)量-78℃下加入偕二溴苯乙烯的THF溶液，然后ZnCl21.1當(dāng)量-78→18℃然后芳基碘1當(dāng)量，Pd(PPh3)40.02當(dāng)量，18℃ 1.5小時(shí)(84％)。(e)mCPBA 1.3當(dāng)量，KHCO33當(dāng)量，CH2Cl2，0→18℃(92％)。(f)2-碘乙酸1.1當(dāng)量，DCC 1.1當(dāng)量，DMAP 0.05當(dāng)量，CH2Cl2，18℃，4小時(shí)(97％)。(g)3，4-二氫-6，7-二甲氧基5-異丙氧基異喹啉1.1當(dāng)量，1，2-二氯乙烷(溶劑)，18℃，8小時(shí)然后Pri2NEt 1當(dāng)量，83℃，32小時(shí)(81％)。(h)AlCl33.6當(dāng)量，CH2Cl2，18℃，4小時(shí)(95％)。
反應(yīng)路線3a
a注(a)CBr42當(dāng)量，PPh32當(dāng)量，Zn 2當(dāng)量，(100％)。(b)nBuLi 2當(dāng)量-78℃下加入偕二溴苯乙烯的THF溶液，然后ZnCl21.1當(dāng)量-78→18℃然后芳基碘1當(dāng)量，PdCl2(PPh3)40.005當(dāng)量，18℃ 1.5小時(shí)(92％)。(c)mCPBA 1.2當(dāng)量，KHCO33當(dāng)量，CH2Cl2，0→18℃(93％)。(d)2-碘乙酸1.05當(dāng)量，DCC 1.05當(dāng)量，DMAP 0.01當(dāng)量，CH2Cl2，18℃，4小時(shí)(94％)。(e)3，4-二氫-5，6，7-三甲氧基異喹啉1.2當(dāng)量，1，2-二氯乙烷(溶劑)，18℃，15小時(shí)然后Pri2NEt 1當(dāng)量，24℃，32小時(shí)(71％)。(f)AlCl32.4當(dāng)量，CH2Cl2，18℃，0.5小時(shí)(90％)。(g)Ac2O/吡啶(1∶1，溶劑)，DMAP催化，18℃，26小時(shí)(83％)。
反應(yīng)路線4a
a注(a)3，4-二氫-6，7-二甲氧基異喹啉1.2當(dāng)量，1，2-二氫乙烷(溶劑)，18℃，15小時(shí)然后Pri2NEt 1.05當(dāng)量，83℃，28小時(shí)(79％)。(b)AlCl3當(dāng)量，CH2Cl2，18℃，16小時(shí)(89％)。(c)3，4二氫-6，7-二甲氧基異喹啉1.2當(dāng)量，1，2-二氯乙烷(溶劑)，18℃，17小時(shí)然后Pri2NEt 1.05當(dāng)量，83℃，20小時(shí)(70％)。(d)AlCl33.3當(dāng)量，CH2Cl2，18℃，14小時(shí)(94％)。(e)DDQ 1.25當(dāng)量，CHCl3，65℃，2小時(shí)(99％)。(f)AlCl33.3當(dāng)量，CH2Cl2，18℃，17小時(shí)(94％)。
本發(fā)明的方法包括一大組化合物的合成。傳統(tǒng)上，藥物候選者被單個(gè)合成，如果合成過程只含有幾步，而大量的化合物需要評(píng)價(jià)其生物活性，這將是很費(fèi)時(shí)和費(fèi)力的方法。組合合成是用于實(shí)現(xiàn)一大組分子的產(chǎn)生的新興技術(shù)，并已成功地開發(fā)用于小有機(jī)分子庫(kù)的合成和評(píng)價(jià)。這些庫(kù)可以以分子在游離的溶液中存在，或連接在固相，例如，聚合物珠，針，微滴板或微片上?；瘜W(xué)不等性可以通過平行或分開(分開和混合)的合成實(shí)現(xiàn)，其中各個(gè)步驟都具有提供眾多化合物的潛力。液相庫(kù)可以由平行合成制備，其中不同的化合物平行地在分開的反應(yīng)器中，經(jīng)常以自動(dòng)化的方式合成。另外，用于合成過程中的單個(gè)成分與適當(dāng)?shù)墓滔嘀лd體的連接使得通過不僅用平行合成，而且也用分開合成進(jìn)一步建立化學(xué)不等性成為可能，其中含有在前面步驟中制備的化合物的固體支載體可被分開為好多批，用適當(dāng)?shù)脑噭┨幚聿⒅亟M。通過以平行或分開方式，在液相或固體支載體上實(shí)施如前所述的步驟a)-c)的一步或多步，本發(fā)明經(jīng)得起檢驗(yàn)地產(chǎn)生大量通式(I)的化合物。
因此，本發(fā)明另一方面提供通過實(shí)施下列步驟的一步或多步而產(chǎn)生式(I)化合物的手段a)式(IV)化合物與式(V)化合物偶合，b)暴露化合物(VI)的Zn并與化合物L(fēng)-CH2-C(O)-L’偶合c)用式(VIII)的亞胺在液相或固體支載體上，以平行或分開的方式。
本發(fā)明另一方面提供通式(I)新化合物
條件是該化合物不是片螺素A-N，S-X；T，U，V或Y 20-硫酸酯；或D，K，L，M或N-三乙酸酯；或如表1和2中所述的I-乙酸酯或G-三甲基醚。
本發(fā)明還一方面提供通式(II)的化合物
本發(fā)明另一方面提供通式(III)的化合物
本發(fā)明另一方面提供通過本文所述方法制備的通式(I)化合物。
本發(fā)明還一方面提供治療方法，包括對(duì)需要治療的動(dòng)物，包括人施用有效量的通式(I)化合物作為活性成分。優(yōu)選地通式(I)的化合物通過如前所述的方法制備。
本文所用的術(shù)語“有效量”指當(dāng)根據(jù)所需的劑量處方給藥時(shí)，提供所需的治療活性的化合物的量。劑量給藥可以在分，小時(shí)，天，周，月或年的間隔發(fā)生，或超越這些周期的任何一個(gè)連續(xù)進(jìn)行。合適的劑量在每劑量約每kg體重0.1ng至每kg體重10g的范圍內(nèi)。優(yōu)選地，劑量在每劑量每kg體重1μg至每kg體重10g的范圍。更優(yōu)選地，劑量在每劑量每kg體重1mg至每kg體重10g的范圍。還更優(yōu)選地，劑量在每劑量每kg體重1mg至每kg體重5g的范圍。更優(yōu)選地，劑量在每劑量每kg體重1mg至2g的范圍。更優(yōu)選地，劑量在每劑量每kg體重1mg至1g的范圍。
在優(yōu)選的方案中，治療方法涉及治療多藥物耐受的腫瘤。
在另一方案中，治療方法涉及改善多藥物耐受影響藥物的抗腫瘤化療效果。
在另一優(yōu)選的方案中，治療方法是誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方法。更優(yōu)選地，治療方法是對(duì)多藥物耐受細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方法。
在另一方案中，治療方法涉及調(diào)節(jié)免疫功能。
活性成分可以由單劑量或一系列劑量給藥。在活性成分可以被單獨(dú)給藥的同時(shí)，優(yōu)選地是以組合物，優(yōu)選藥物組合物的形式存在。
本發(fā)明還一方面涉及包括通式(I)化合物與藥用載體，賦形劑或稀釋劑一起的組合物。優(yōu)選地，通式(I)化合物通過如前所述的方法制備。
載體必須是藥學(xué)上“可接受的”，即可以與組合物中的其他成分共容，并且不傷害施藥對(duì)象。組合物包括適合于口服，直腸，鼻內(nèi)，局部(包括頰內(nèi)和舌下)，陰道內(nèi)或腸胃外(包括皮下，肌內(nèi)，靜脈內(nèi)和真皮內(nèi))給藥的組合物。該組合物可以方便地以單位劑量形式存在，并可以通過制藥行業(yè)公知的任何方法制備。這類方法包括使活性成分與由一種或多種輔助成分組成的載體混合的步驟。一般說來，組合物通過使活性成分與液體載體或很細(xì)的固體載體或者它們兩者均勻和密切地混合，如果需要，然后將產(chǎn)品成形。
適合于口服給藥的本發(fā)明組合物可以以分離的單元如各自含有預(yù)定量的活性成分的膠囊，藥囊或片劑；以散劑或顆粒劑；以在水溶液或非水溶液中的溶液或懸浮液；或以水包油乳劑或油包水乳劑存在?；钚猿煞忠部梢砸酝鑴?，藥糖劑或糊劑存在。
片劑可以通過壓片或壓模，非強(qiáng)制性地以一種或多種輔助成分制造。壓制的片劑可以通過在合適的機(jī)器中將活性成分以自由流動(dòng)的形式如粉末或顆粒，非強(qiáng)制性地與粘合劑(例如惰性稀釋劑，防腐劑，崩解劑(例如淀粉乙醇酸鈉，交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)，表面活性劑或分散劑混合，壓片而制備。模制的片劑可以通過在合適的機(jī)器中，將用惰性液體稀釋劑潤(rùn)濕的粉末狀化合物的混合物壓模而制造。該片劑可以非強(qiáng)制性地包衣或刻痕，并被配制以提供活性成分的緩釋或受控釋放，例如以不同的比例使用羥丙基甲基纖維素，提供所需的釋放形式。片劑可以非強(qiáng)制性地用腸衣包裹，使其在腸內(nèi)而不是胃中釋放。
適合于在口內(nèi)局部給藥的組合物包括在調(diào)味基，一般為蔗糖和阿拉伯膠和黃蓍膠中包含活性成分的錠劑；在惰性基質(zhì)如明膠或甘油，或蔗糖和阿拉伯膠中包含活性成分的軟錠劑；和在合適的液體載體中包含活性成分的漱口劑。
用于直腸內(nèi)給藥的組合物可以以帶有合適的基質(zhì)，包含，例如可可脂的栓劑存在。
適合于陰道內(nèi)給藥的組合物可以以含有除活性成分之外的，如本領(lǐng)域已知的載體的陰道栓，塞子，軟膏，凝膠，糊劑，泡沫或噴霧制劑存在。
適合于腸胃外給藥的組合物包括水或非水的等滲無菌注射液，它可含有抗氧化劑，緩沖劑，殺菌劑和使組合物與受體的血液等滲的溶質(zhì)；可以包括懸浮劑和增稠劑的水和非水無菌懸浮液。該組合物可以存在于單劑量或多劑量密封容器，例如安瓿和小瓶中，并可在冷凍-干燥(凍干)條件下貯存，只需要在使用前加入無菌液體載體，例如注射用水?，F(xiàn)場(chǎng)的注射溶液和懸浮液可以從前述種類的無菌粉劑，顆粒劑和片劑制備。
優(yōu)選的單位劑量組合物是含有如上所述日劑量或單元，日亞劑量，或其適當(dāng)部分的活性成分的組合物。
應(yīng)該明白，除了上面具體提到的活性成分之外，本發(fā)明的組合物可以包括其他與所討論的組合物類型有關(guān)的本領(lǐng)域普通的藥劑，例如，適合于口服給藥的組合物可包括諸如粘合劑，甜味劑，增稠劑，調(diào)味劑，崩解劑，包衣劑，防腐劑，潤(rùn)滑劑和/或延時(shí)劑的藥劑。合適的甜味劑包括蔗糖，乳糖，葡萄糖，阿斯巴甜或糖精。合適的崩解劑包括玉米淀粉，甲基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮，黃原膠，膨潤(rùn)土，藻酸或瓊脂。合適的調(diào)味劑包括薄荷油，冬青油，櫻桃，橙子或覆盆子香精。合適的包衣劑包括丙烯酸和/或異丁烯酸和/或其酯的聚合物或共聚物，蠟，脂肪醇，玉米醇溶蛋白，紫膠或谷蛋白。合適的防腐劑包括苯甲酸鈉，維生素E，α-生育酚，抗壞血酸，對(duì)羥基苯甲酸甲酯，對(duì)羥基苯甲酸丙酯或亞硫酸氫鈉。合適的潤(rùn)滑劑包括硬脂酸鎂，硬脂酸，油酸鈉，氯化鈉或滑石。合適的延時(shí)劑包括甘油單硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。
本發(fā)明也提供通式(I)化合物的在生產(chǎn)用于治療有這種需要的動(dòng)物或人的醫(yī)藥方面的用途。優(yōu)選地，通式(I)化合物通過如前所述的方法制備。
本發(fā)明另一方面涉及包含通式(I)化合物用于治療有這種需要的動(dòng)物或人的藥劑。優(yōu)選地，通式(I)化合物通過如前所述的方法制備。
在第一方案中，藥劑是用于治療多藥物耐受腫瘤的。
在另一方案中，藥劑是用于對(duì)多藥物耐受細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的。
還一方案中，藥劑是用于改善多藥物耐受影響的藥物的抗腫瘤化療效果的。
另一方案是用于調(diào)節(jié)免疫功能的藥劑。
本發(fā)明還一方面涉及通式(I)化合物用于治療有這種需要的動(dòng)物或人的用途。優(yōu)選地，通式(I)化合物通過如前所述的方法制備。
在優(yōu)選的方案中，該用途是治療多藥物耐受腫瘤。
在另一方案中，用途是改善多藥物耐受影響的藥物的抗腫瘤化療效果。
還一方案是調(diào)節(jié)免疫功能的應(yīng)用。
在另一方案中，本發(fā)明涉及通式(I)化合物用于對(duì)需要的動(dòng)物或人誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的應(yīng)用。優(yōu)選多藥物耐受細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。
下列縮寫用于本發(fā)明下文所述的方案中。
DCC 二環(huán)己基碳二亞胺
DDQ 2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌DMAP 4-(N，N)-二甲基氨基吡啶THF 四氫呋喃在本發(fā)明的一個(gè)方案中，化合物1通過苯基乙炔與o-碘代苯基乙酸酯的Sonogashira交叉偶合制備，起始偶合產(chǎn)物水解后，給出o-羥基二苯乙炔。最后的化合物與溴代乙酰溴在標(biāo)準(zhǔn)條件下反應(yīng)給出酯，該酯然后用異喹啉處理給出異喹啉鹽，該鹽立即用三乙胺(為了產(chǎn)生相應(yīng)的偶氮甲堿葉立德)在回流的THF中處理，所得的二氫吡咯型環(huán)加成產(chǎn)物的混合物用2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌(DDQ)或空氣中的硅膠進(jìn)行氧化。在此方法中，得到了目標(biāo)化合物1，其結(jié)構(gòu)通過單晶X-射線分析確定。
在另一方案中，使用氧更高度飽和了的二苯乙炔-酯與6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉在與化合物1形成相同的條件下反應(yīng)，給出8，9-二氫同系物化合物34?；衔?4用BCl3或AlCl3脫保護(hù)，則給出化合物35。
本發(fā)明現(xiàn)在參考下列非限制性實(shí)施例進(jìn)行說明。實(shí)施例14-苯基-6H-[1]苯并吡喃并[4’，3’4，5]吡咯并[2，1-a]異喹啉-6-酮(化合物1)o-乙酰氧基二苯乙炔相繼將Pd(PPh3)4(132mg，0.114mmol)，苯基乙炔(1.3mL，1.20g，12.6mmol)和CuI(44mg，0.23mmol)加入2-乙酰氧基碘代苯(3.0g，11.45mmol)的三乙胺(20mL)溶液中，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物室溫下真空濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(50mL)，產(chǎn)生的溶液用鹽酸(1×50ml的0.5M水溶液)和鹽水(1×50ml)洗滌，然后干燥(硫酸鎂)，過濾并濃縮到硅膠(8g)上。將此固體進(jìn)行層析(硅膠；己烷/二氯甲烷洗脫3∶1，2∶1，1∶1然后1∶2)，將適當(dāng)?shù)牧鞣譂饪s，給出純的o-乙酰氧基二苯乙炔(2.7g，100％)。此化合物的光譜與以往報(bào)道(A，Arcadi，S.Cacchi，M.D.Rasario，G.Fabrizi和F.Marinelli，《有機(jī)化學(xué)雜志》J.Org.Chem.，1996，61，9280)的完全相同。
o-(α-溴代乙酰氧基)二苯乙炔在攪拌下，將o-乙酰氧基二苯乙炔(2.24g，9.50mmol)加入碳酸鉀(2.0g，mmol)在甲醇(20mL)的漿狀物中。15分鐘后，反應(yīng)混合物用鹽酸(50ml的0.5M水溶液)稀釋，并用二氯甲烷(2×40mL)萃取。將合并的萃取液干燥(硫酸鎂)，然后減壓濃縮。在此方法中所得的固體殘余物[由1H nmr確定為純o-羥基二苯乙炔]被溶于二氯甲烷(20mL)，加入α-溴代乙酸(1.32g，9.5mmol)和DMAP(58mg，0.48mmol)。然后分批加入二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)(2.07g，10mmol)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)，然后用硅藻土過濾，將濾液濃縮到硅膠(8g)上。此固體在硅膠上進(jìn)行開始層析(相繼用2∶1，1∶1然后1∶2己烷/二氯甲烷洗脫)，將適當(dāng)?shù)牧鞣譂饪s，給出標(biāo)題化合物(2.73g，91.2％)琥珀色油狀物。IR(KBr無cm-1)3060，2221，1761，1596，1571，1496，1444，1258，1195，1116，1099.1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.61(dd，J＝1.5，7.5Hz，1H，7.54-7.52(m，2H)，7.41-7.35(m，4H)，7.29(dd，J＝1.5，7.5Hz，1H)，7.17(dd，J＝1.4，8.1Hz，1H)，4.13(s，2H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ165.0(C)，150.5(C)，133.0(CH)，131.4(CH)，129.3(CH)，(CH)，128.2(CH)，126.3(CH)，122.4(C)，121.7(CH)，116.9(C)，94.6(C)，83.5(C)，25.1(CH2).MS(70 eV)m/z(％)316(31)314(30)(M+·)，193(100，M+·-COCH2Br).分析計(jì)算C16H11NO2BrC，60.98；H，3.52；Br，25.35. 實(shí)測(cè)C，61.26；H，3.45；Br，25.06.14-苯基-6H-[1]苯并吡喃并[4’，3’4，5]吡咯并[2，1-a]異喹啉-6-酮將異喹啉(98μl，0.83mmol)加入o-(α-溴代乙酰氧基)二苯乙炔(262mg，0.83mmol)的THF(5mL)溶液中，產(chǎn)生的混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。加入三乙胺(215μl，0.83mmol)和氯仿(10mL)，給出亮橙色溶液，將其回流加熱4小時(shí)，此時(shí)溶液變?yōu)闇\黃色。將冷卻的反應(yīng)混合物減壓濃縮，殘余物溶于二氯甲烷(7mL)并加入DDQ(189mg，0.83mmol)。將反應(yīng)混合物立即濃縮到硅膠(2g)上，并在硅膠上進(jìn)行快速層析(用2∶1，1∶1然后1∶2己烷/二氯甲烷連續(xù)洗脫)。將適當(dāng)?shù)牧鞣譂饪s，給出標(biāo)題化合物白色晶體(277mg，92.1％)，mp＝313-5℃.IR(KBr片，cm-1)3047，1705，1536，1470，1445，1411，1369，1312，1179，1110，1049.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.29(d，J＝7.2Hz，1H)，7.67(d，J＝7.2Hz，1H)，7.64-7.62(m，2H)，7.56-7.39(m，4H)，7.32(dt，J＝1.8，7.5Hz，1H)，7.25(dt，J＝1.5，7.5Hz，1H)，7.12-7.05(m，2H)，6.99(dt，J＝1.5，7.5Hz，1H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ155.2(C)，151.7(C)，135.6(C)，134.1(C)，131.0(CH)，129.9(CH)，128.7(CH)，128.6(C)，128.4(CH)，128.1(CH)，127.5(CH)，127.3(CH)，125.0(C)，124.4(CH)，124.0(CH)，123.9(CH)，117.9(C)，117.3(CH)，114.3(C)，113.4(CH)，109.3(CH).MS(70eV)m/z(％)361(100，M+·)；HRMS 計(jì)算C25H15NO2361.1103. 實(shí)測(cè)361.11031.得到X-射線。實(shí)施例2片螺素K三異丙基醚(化合物36)異香草醛異丙基醚將異丙基溴(19.0mL，200mmol)加入碳酸鉀(42.0g，302mmol)和異香草醛(23g，151.3mmol)在DMF(100mL)中的懸浮液，將漿狀物在80℃攪拌加熱13小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙醚(200mL)稀釋，并用水(4×200mL)洗滌，干燥(硫酸鎂)并減壓濃縮，給出標(biāo)題化合物微褐色油狀物(29.3g，100％)，不需進(jìn)一步純化。此物的光譜與以往報(bào)道(H.Ishii，I.S.Chen和T.Ishikawa，《化學(xué)會(huì)志，伯琴匯刊1》J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，1987，671)的完全一致。
香草醛異丙基醚將異丙基溴(40.0mL，421mmol)加入碳酸鉀(48.0g，348mmol)和香草醛(40g，263mmol)在DMF(150mL)中的懸浮液，將漿狀物在80℃攪拌加熱15小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙醚(200mL)稀釋，并用水(4×200mL)洗滌，干燥(硫酸鎂)并減壓濃縮，給出標(biāo)題化合物微褐色油狀物(51.0g，100％)，不需進(jìn)一步純化。此物的波譜與以往報(bào)道(M.F.Comber和M.V.Sargent，《化學(xué)會(huì)志，伯琴匯刊1》J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，1991，2783)的完全一致。
2-碘-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醛在氮?dú)庵袑⑷宜徙y(12.3g，56.7mmol)加入異香草醛異丙基醚(10.0g，51.5mmol)的干燥(12.3g，56.7mmol)加入異香草醛異丙基醚(10.0g，51.5mmol)的干燥氯仿(120mL)溶液中，產(chǎn)生的漿狀物被攪拌并加熱至61℃。然后在0.6小時(shí)內(nèi)分批加入(6批)碘(14.4g，56.7mmol)，將反應(yīng)物再回流6.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻并過濾，用氯仿(50ml)清洗。濾液用Na2S2O5(10％水溶液，150mL)，碳酸氫鈉(飽和水溶液，150ml)和水(150mL)洗滌，干燥(硫酸鎂)并真空濃縮。將固體殘余物懸浮于己烷(200mL)中，劇烈攪拌1小時(shí)，在冰浴中冷卻1小時(shí)，用冰冷的己烷(200mL)過濾清洗，給出標(biāo)題化合物膏狀固體mp75-6℃.IR(KBr片，cm-1)3072，2978，2932，1673，1581，1503，1438，1385，1332，1260，1215，1174，1157，1133，1105，1024，939.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.77(s，1H，)，7.34(s，1H)，7.24(s，1H)，4.57(septet，J＝6.0Hz，1H)，3.86(s，3H)，1.31(d，J＝6.0Hz，6H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ194.7(-)，155.5(+)，147.9(+)，128.2(+)，122.2(-)，114.1(-)，110.8(+)，92.4(+)，71.3(-)，56.4(-)，21.77(-).MS(70eV)m/z(％)320(M+·，43)，278(100)，249(17)，207(12)，150(40).分析計(jì)算C11H13O3IC，41.27；H，4.09；I，39.64 實(shí)測(cè)C，41.06；H，3.80；I，39.59.
β，β-二溴-4-異丙氧基-3-甲氧基苯乙烯磁力攪拌下，將四溴化碳(51.3g，154.7mmol)分批加入鋅粉(10.1g，154.5mmol)和PPh3(40.5g，159.4mmol)在二氯甲烷(350ml)中的混合物中，在冰-鹽浴上保持0℃。將此懸浮液溫?zé)嶂潦覝?，然后再攪?2小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物再冷卻至0℃，在2分鐘內(nèi)滴加香草醛異丙基醚(15.0g，77.3mmol)，并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。用己烷(200ml)稀釋后，將產(chǎn)生的混合物濾過燒結(jié)的玻璃漏斗，濾液被濃縮到硅膠(30g)上。產(chǎn)生的固體被加入快速層析柱(硅膠20cm長(zhǎng)×10cm寬)的頂部，將其進(jìn)行梯度洗脫(2∶1，1∶1然后1∶2己烷/二氯甲烷)。將適當(dāng)?shù)牧鞣?在1∶1己烷/二氯甲烷中Rf0.5)濃縮，給出標(biāo)題化合物(27.2g，99.8％)白色晶體，m.p.36-38℃.IR(KBr片，cm-1)2976，2973，1599，1510.1464，1418，1383，1373，1267，1235，1141，1110，1036.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.41(s，1H)，7.21(d，J＝2.1Hz，1H)，7.07(dd，J＝2.1，8.4Hz，1H)，6.87(d，J＝8.4Hz)，4.58(septet，J＝6.0Hz，1H)，3.87(s，3H)，1.39(d，J＝6.0Hz，6H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ149.7(C)，147.7(C)，136.5(CH)，127.9(C)，121.9(CH)，114.4(CH)，111.8(CH)，87.1(CH)，71.1(CH)，56.0(CH3)，22.1(CH3).MS(70eV)m/z(％)352(28)，350(49)，448(31)(M+·)，310(51)，308(100)，306(54)(M+·-CH2CHCH3)，295(34)，293(38)，291(36)(M+·-CH2CHCH3-CH3).分析計(jì)算C12H14O2Br2，41.17；H，4.03；Br，45.65 實(shí)測(cè)C，41.21；H，3.92；Br，45.472-[(4-異丙氧基-3-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醛在磁力攪拌下，3分鐘內(nèi)將正丁基鋰(5.25mL的2.5M己烷溶液，13.15mmol)滴加到β，β-二溴-4-異丙氧基-3-甲氧基苯乙烯(2.3g，6.58mmol)THF(30mL)溶液中，在干冰-丙酮浴上保持-78℃。所得的微褐色溶液在-78℃再攪拌50分鐘，然后將無水ZnCl2(高真空下于120℃干燥20小時(shí))加入反應(yīng)混合物中，其在1小時(shí)內(nèi)溫?zé)嶂潦覝貢r(shí)，慢慢變?yōu)闊o色。加入Pd(PPh3)4(145mg，0.125mmol)和醛(2.0g，6.26mmol)，反應(yīng)混合物在18℃攪拌4小時(shí)。然后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(150mL)稀釋，用鹽水(2×100mL)洗滌，然后干燥(硫酸鎂)，過濾并濃縮到硅膠(10g)上。產(chǎn)生的固體被加入快速層析柱(硅膠10cm長(zhǎng)×5cm寬)的頂部，將其進(jìn)行梯度洗脫(己烷/二氯甲烷2∶1，1∶1然后1∶2，二氯甲烷，然后9∶1二氯甲烷/乙酸乙酯)。將適當(dāng)?shù)牧鞣?在二氯甲烷中Rf0.4)濃縮，給出標(biāo)題化合物白色晶體，mp121-2℃.IR(KBr片，cm-1)2978，2933，2837，2204，1687，1589，1515，1509，1471，1397，1357，1275，1241，1217，1133，953.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.48(s，1H)，7.41(s，1H)，7.12(d，J＝8.1Hz，1H)，7.04(s，2H)，6.87(d，J＝8.1Hz，1H)，4.68(septet，J＝6.0Hz，1H)，4.58(septet，J＝6.0Hz，1H)，3.95(s，3H)，3.88(s，3H)，1.40(2×d，2×J＝6.0Hz，2×6H).13CNMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ190.2(CH)，154.4(C)，149.7(C)，148.1(C)，147.6(C)，129.6(C)，124.7(CH)，121.3(C)，114.6(CH)，114.5(CH)，114.3(CH)，110.6(CH)，94.9(C)，83.4(C)，71.0(CH)，70.9(CH)，56.0(CH3)，55.7(CH3)，21.8(CH3)，21.6(CH3).MS(70eV)m/z(％)382(M+·)，340(4，M+·-CH2CHCH3)，298(100，M+·-2×CH2CHCH3)，283(60，M+·-2×CH2CHCH3-CH3).分析計(jì)算C23H26O5C，72.23；H，6.85.實(shí)測(cè)C，72.08；H，6.92.
2-[(4-異丙氧基-3-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯酚磁力攪拌下，0.25小時(shí)內(nèi)，將間氯過氧苯甲酸[1.2g，Aldrich，50％(其余為3-氯苯甲酸和水)，約7.0mmol]分批加入2-[(4-異丙氧基-3-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醛(2.20g，5.75mmol)和碳酸氫鉀(1.73g，17.3mmol)在二氯甲烷(50mL)中的混合物中，保持0℃(冰浴)。產(chǎn)生的漿狀物在0℃至18℃之間再攪拌1小時(shí)，然后用硅藻土濾過，保留的固體用二氯甲烷(1×50mL)沖洗。將合并的濾液減壓濃縮，殘余物用NH3(30ml飽和的甲醇溶液)處理。于18℃1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物減壓濃縮，殘余物再溶于二氯甲烷(200ml)，然后濃縮到硅膠(8g，400-200目)。產(chǎn)生的粉末裝在硅膠(40-10目TLC級(jí)，10cm寬×5cm長(zhǎng))柱的頂部，用2∶1，1∶1和1∶2己烷/二氯甲烷，然后凈二氯甲烷(各250ml)洗脫。將適當(dāng)?shù)牧鞣?在1∶2己烷/二氯甲烷中Rf0.3)減壓濃縮，給出標(biāo)題化合物(1.97g，92％)白色晶體，mp 130-1℃.IR(KBr片，cm-1)3404，2981，2935，1620，1573，1513，1467，1450，1418，1383，1373，1330，1269，1240，1214，1166，1135，1113，951.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.03(dd，J＝1.8，8.4Hz，1H)，7.00(d，J＝2.1Hz，1H)，6.87(s，1H)，6.81(d，J＝8.4Hz，1H)，6.53(s，1H)，5.81(s，1H)，4.52(septet，J＝6.0Hz，2H)，3.82(s，3H)，3.78(s，3H)，1.35(d，J＝6.0Hz，12H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ151.8(C)，149.7(C)，149.3(C)，147.8(C)，143.6(C)，124.6(CH)，115.0(C)，114.7(CH)，114.6(CH)，114.3(CH)，102.0(CH)，100.1(C)，94.7(C)，82.2(C)，71.1(CH)，71.0(CH)，56.4(CH3)，55.7(CH3)，21.9(CH3)，21.8(CH3).MS(70eV)m/z(％)370(M+·)，355(2，M+·-CH3)，328(18，M+·-CH(CH3)2]，327(20，M+·CH2CHCH3)，286(100，M+·-2×CH2CHCH3)，271(42，M+·-2×CH2CHCH3-CH3). 分析計(jì)算 C22H26O5C，71.33；H，7.07. 實(shí)測(cè)C，70.91；H，7.24.
1-(α-碘代乙酰氧基)-2-[(4-異丙氧基-3-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯將DCC(1.60g，7.75mmol)加入2-碘代乙酸(1.44g，7.74mmol)，2-[(4-異丙氧基-3-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯酚(2.60g，7.03mmol)和DMAP(43mg，0.35mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中，所得的溶液在18℃攪拌3小時(shí)。將產(chǎn)生的懸浮液過濾(二氯甲烷沖洗)，濾液被減壓濃縮。將殘余物在0℃通過快速攪拌懸浮于乙醚(20mL)中，然后過濾[用預(yù)冷至0℃的乙醚(20mL)沖洗]給出標(biāo)題化合物(3.67g，97％)膏狀固體，mp127-8℃.IR(KBr片，cm-1)2969，2930，2833，1755，1611，1575，1516，1467，1416，1402，1385，1365，1320，1252，1236，1212，1135，1108.1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.08(dd，J＝1.8，8.4Hz，1H)，7.04(d，J＝2.1Hz，1H)，7.01(s，1H)，6.82(d，J＝8.4Hz，1H)，6.65(s，1H)，4.53(septet，J＝6.0Hz，2Hz)，3.95(s，2H)，3.85(s，6H)，1.38(d，J＝6.0Hz，6H)，1.37(d，J＝6.0Hz，6H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ167.3(C)，150.0(C)，148.4(C)，148.3(C)，148.2(C)，145.1(C)，125.2(CH)，115.6(C)，115.3(CH)，115.2(CH)，115.0(CH)，108.8(CH)，93.6(C)，82.7(C)，72.0(CH)，71.6(CH)，56.5(CH3)，56.3(CH3)，22.3(CH3)，22.0(CH3)，-6.2(CH2).MS(70eV)m/z(％)538(80，M+·)，496(10，M+·-CH2CHCH3)，370(10，M+·-CH2ICO)，328(34)，286(100)；HRMS 分析 C24H27O6I538.0852. 實(shí)測(cè)538.0854.
片螺素K三異丙基醚將3，4-二氫-6，7-二甲氧基-5-異丙氧基異喹啉(1.20g，4.81mmol)加入1-(α-碘代乙酰氧基)-2-[(4-異丙氧基-3-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯(2.30g，4.27mmol)的干燥1，2-二氯乙烷(40mL)溶液中，該溶液在18℃攪拌8小時(shí)。然后，加入二異丙基乙胺(750μl，4.30mmol)，反應(yīng)混合物在83℃加熱32小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，蒸發(fā)到硅膠(6g)上，殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用2∶1∶0，2∶3∶1己烷/二氯甲烷/乙醚連續(xù)洗脫)，將適當(dāng)?shù)牧鞣?在5∶5∶2己烷/二氯甲烷/乙醚中Rf0.4)濃縮，給出標(biāo)題化合物(2.28g，81％)白色固體 mp244-5℃IR(KBr片，cm-1)2974，2935，2832，1702，1620，1539，1506，1476，1465，1444，1420，1259，1237，1203，1175，1110，1040.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.10(m，2H)，7.05(s，1H)，6.92(s，1H)，6.64(s，1H)，6.60(s，1H)，4.74(br t，J＝6.6Hz，2H)，4.56(m，3H)，3.83(s，6H)，3.42(s，3H)，3.34(s，3H)，3.15(br t，J＝6.6Hz，2H)，1.41(d，J＝6.0Hz，6H)，1.39(d，J＝6.0Hz，6H)，1.31(d，J＝6.0Hz，6H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ155.6(C)，151.7(C)，151.2(C)，148.5(C)，147.0(C)，146.9(C)，146.5(C)，145.9(C)，142.5(C)，135.5(C)，128.5(C)，128.1(C)，123.3(CH)，123.0(C)，121.1(C)，116.8(CH)，115.5(C)，114.5(CH)，113.8(C)，110.3(C)，104.9(CH)，104.8(CH)，104.7(CH)，103.4(CH)，75.7(CH)，71.7(CH)，71.4(CH)，60.6(CH3)，56.1(CH3)，55.4(CH3)，55.1(CH3)，42.3(CH2)，22.7(CH3)，21.8(CH3)，21.7(CH3).MS(70eV)m/z(％)657(100，M+·)，615(44，M+·-CH2CHCH3)，572(9，M+·-2×CH2CHCH3)；HRMS 分析 C38H43NO9657.2938.實(shí)測(cè) 657.2938.實(shí)施例3片螺素K(化合物21)片螺素K將氯化鋁(1.33g，9.94mmol)加入片螺素K三異丙基醚(1.80g，2.76mmol)的干燥二氯甲烷(20mL)溶液中，反應(yīng)物被攪拌4小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物用NH4Cl(飽和水溶液，20ml)處理。將兩相轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用乙酸乙酯(50mL)稀釋，并用水(40mL)洗滌。水層用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。將合并的有機(jī)相干燥(硫酸鎂)并濃縮到硅膠(8g)上。將殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用20∶1，10∶1，5∶1二氯甲烷/甲醇連續(xù)洗脫)，將相關(guān)流分(在10∶1二氯甲烷/甲醇中Rf0.6)濃縮，給出片螺素K(1.4mg，95％)白色固體，mp 230-2℃.IR(KBr片，cm-1)3472，2940，2839，1709，1600，1549，1511，1458，1428，1407，1265，1207，1142，1122，1031.1HNMR(300MHz，CDCl3)δ7.13(d，J＝8.1Hz，1H)，7.07(dd，J＝1.5，8.1Hz，1H)，6.97(s，1H)，6.96(d，J＝1.5Hz， 1H)，6.59(s，1H)，6.38(s，1H)，5.95(s，1H)，5.75(s，1H)，5.71(s，1H)，4.90(m，1H)，4.64(m，1H)，3.89(s，3H)，3.87(s，3H)，3.49(s，3H)，3.36(s，3H)，3.12(m，2H).1H NMR(300MHz，d6DMSO)δ9.29(br s，2H)，7.03(br s，1H)，6.99(dd，J＝1.5，8.1Hz，1H)，6.82(d，J＝8.1Hz，1H)，6.74(s，1H)，6 54(s，1H)，6.34(s，1H)，4.54(m，2H)，3.75(s，3H)，3.55(s，3H)，3.35(s，3H)，3.27(s，3H)，3.01(m，2H).13C NMR+APT(75.5MHz，d6DMSO)δ154.6(C)，151.0(C)，148.7(C)，147.5(C)，147.0(C)，146.7(C)，145.9(C)，144.6(C)，136.6(C)，135.5(C)，127.8(C)，125.8(C)，123.6(CH)，122.7(C)，116.5(CH)，115.7(C)，114.9(CH)，114.5(C)，112.8(C)，108.9(C)，105.2(CH)，103.8(CH)，101.1(CH)60.5(CH3)，56.2(CH3)，55.2(CH3)，54.8(CH3)，41.9(CH2)，21.5(CH2).MS(70eV)m/z(％)531(100，M+·)，516(17，M+·-CH3)，265.5(4，M2+)；HRMS 分析 C29H25NO9531.1539. 實(shí)測(cè) 531.1524.實(shí)施例4片螺素T二異丙基醚(化合物37)β，β-二溴-3-異丙氧基-4-甲氧基苯乙烯磁力攪拌下，將四溴化碳(51.3g，154.7mmol)分批加入鋅粉(10.1g，154.5mmol)和PPh3(40.5g，159.4mmol)在二氯甲烷(350ml)中的混合物中，在冰-鹽浴上保持0℃。將此懸浮液溫?zé)嶂潦覝?，然后再攪?2小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物再冷卻至0℃，在2分鐘內(nèi)滴加異香草醛異丙基醚(15.0g，77.3mmol)。產(chǎn)生的混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)然后用己烷(200ml)稀釋，并濾過No.3孔隙度的燒結(jié)的玻璃漏斗。濾液被濃縮到硅膠(400-200目，30g)上，產(chǎn)生的固體被加入快速層析柱(硅膠20cm長(zhǎng)×10cm寬)的頂部，將其用2∶1，1∶1然后1∶2己烷/二氯甲烷梯度洗脫。將適當(dāng)?shù)牧鞣?在1∶1己烷/二氯甲烷中Rf0.5)濃縮，給出標(biāo)題化合物(27.0g，99％)白色晶體，m.p.67-69℃.νmax(KBr)3009，2975，2929，1597，1572，1508，1463，1441，1429，1373，1301，1276，1260，1233，1144，1110 and 999cm-1.1H n.m.r.δ7.38(s，1H)，7.24(d，J＝2.1Hz，1H)，7.08(dd，J＝8.4and2.1Hz，1H)，6.84(d，J＝8.4Hz，1H)，4.53(septet，J＝6.0Hz，1H)，3.86(s，3H)，1.38(d，J＝6.0Hz，6H).13C n.m.r.δ150.5(C)，146.7(C)，136.4(CH)，127.7(C)，122.1(CH)，115.3(CH)，111.3(CH)，87.0(C)，71.4(CH)，55.8(CH3)，22.0(2×CH3). 質(zhì)譜m/z 352(20)350(40)348(22)(M+·)，310(50)308(100)306(50)[(M-C3H6)+·]，295(30)，293(61)291(33)[(M-C3H6-CH3+·)+].分析計(jì)算 C12H14Br2O2C，41.2；H，4.0；Br，45.7.實(shí)測(cè)C，41.1；H，3.7Br，45.3％.
2-[(3-異丙氧基-4-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醛在磁力攪拌下，0.2小時(shí)內(nèi)將正丁基鋰(45.8mL的2.5M己烷溶液，114.5mmol)滴加到β，β-二溴-3-異丙氧基-4-甲氧基苯乙烯(20.0g，57.2mmol)THF(250mL)溶液中，在干冰-丙酮浴上保持-78℃。所得的微褐色溶液在-78℃攪拌0.5小時(shí)，然后將反應(yīng)容器從冷浴上移走。0.1小時(shí)后，將無水ZnCl2(7.79g，57.2mmol，于120℃和0.01mm Hg干燥20小時(shí))加入反應(yīng)混合物中，其在1小時(shí)內(nèi)溫?zé)嶂潦覝貢r(shí)，慢慢變?yōu)闊o色。加入醛(17.8g，55.6mmol)，然后加入PdCl2(PPh3)2(195mg，0.128mmol)，反應(yīng)混合物在18℃攪拌6小時(shí)。然后，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(600mL)稀釋，用水(2×500mL)洗滌，然后干燥(硫酸鎂)，過濾并減壓濃縮。所得的固體被懸浮于乙醚/己烷(100ml的4∶1v/v混合物)，產(chǎn)生的懸浮液進(jìn)行真空過濾，所得的固體用乙醚/己烷(2×50ml的4∶1v/v混合物)洗滌，給出標(biāo)題化合物(16.5g，78％)白色晶體，mp＝110-113℃。將合并的濾液進(jìn)行快速層析(硅膠1∶1，1∶2己烷/二氯甲烷，二氯甲烷，然后9∶1二氯甲烷梯度洗脫)。將適當(dāng)?shù)牧鞣?在二氯甲烷中Rf0.4)濃縮，給出另一批產(chǎn)物(3.64g，14％) mp＝110-113℃；νmax(KBr)2978，2933，2837，2203，1685，1589，1515，1508，1448，1397，1387，1376，1358，1322，1276，1240，1216，1156，1132 and 1091 cm-1.1H n.m.r.δ10.49(s，1H)，7.41(s，1H)，7.21(dd，J＝8.4and 2.4Hz，1H)，7.06(d，J＝2.4Hz，1H)，7.03(s，1H)，6.84(d，J＝8.4Hz，1H)，4.70(septet，J＝6.0Hz，1H)，4.57(septet，J＝6.0Hz，1H)，3.97(s，3H)，3.88(s，3H)，1.40(2×d，J＝6.0Hz，2×6H)；13C n.m.r.δ190.5(CH)，154.5(C)，151.2(C)，147.8(C)，146.9(C)，129.7(C)，125.2(CH)，121.5(C)，118.2(CH)，114.4(CH)，111.7(CH)，110.7(CH)，95.0(C)，83.4(C)，71.4(CH)，71.1(CH)，56.1(CH3)，55.8(CH3)，21.9(CH3)，21.8(CH3)； 質(zhì)譜m/z 382(31％，M+·)，298[100，(M-2×H2CCHCH3)+·]，283[46，(M-2×H2CCHCH3，-CH3)+].HRMS，Calcd for C23H26O5382.1780. 實(shí)測(cè) 382.1781.
2-[(3-異丙氧基-4-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯酚磁力攪拌下，0.25小時(shí)內(nèi)，將間氯過氧苯甲酸[19.4g，Aldrich，50％(其余為3-氯苯甲酸和水)，約56mmol]分批加入2-[(3-異丙氧基-4-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醛(18.0g，47.1mmol)和碳酸氫鉀(14.1g，141.0mmol)在二氯甲烷(220mL)中的混合物中，保持0℃(冰浴)。產(chǎn)生的漿狀物在0℃至18℃之間再攪拌1小時(shí)，然后用硅藻土濾過，保留的固體用二氯甲烷(1×200mL)沖洗。將合并的濾液減壓濃縮，殘余物用NH3(1×300ml飽和的甲醇溶液)處理。于18℃1小時(shí)后，將反應(yīng)混合物減壓濃縮，殘余物再溶于二氯甲烷(200ml)，然后濃縮到硅膠(20g，400-200目)。產(chǎn)生的粉末裝在硅膠(40-10m目TLC級(jí)，10cm寬×5cm長(zhǎng))柱的頂部，用2∶1，1∶1和1∶2己烷/二氯甲烷，然后凈二氯甲烷(各250ml)洗脫。將適當(dāng)?shù)牧鞣?在1∶2己烷/二氯甲烷中Rf0.3)減壓濃縮，給出標(biāo)題化合物(5)(16.2g，93％)白色晶體，m.p.139-140℃.νmax(KBr)3431，2983，2934，1513，1461，1332，1267，1241，1210，1136，1110，1024 and 991cm-1.1H n.m.r.δ7.12(dd，J＝8.1 and 2.1Hz，1H)，7.10(d，J＝2.1Hz，1H)，6.88(s，1H)，6.84(d，J＝8.1Hz，1H)，6.56(s，1H)，5.61(s，1H)，4.55(septet，J＝6.0Hz，2×1H)，3.88(s，3H)，3.82(s，3H)，1.38(2×d，J＝6.0Hz，2×6H)13C n.m.r.δ151.8(C)，151.1(C)，149.6(C)，147.0(C)，143.9(C)，125.1(CH)，118.4(CH)，114.8(C)，114.2(CH)，111.7(CH)，101.9(CH)，100.0(C)，95.2(C)，81.8(C)，71.6(CH)，71.2(CH)，56.7(CH3)，56.0(CH3)，22.1(CH3)，21.9(CH3).質(zhì)譜1m m/z370(68，M+·)，328[24，(M-H2CCHCH3)+·]，286[70，(M-2×H2CCHCH3)+·]，271[100，(M-2×H2CCHCH3-CH3·)+].分析計(jì)算 C22H26O5.C，71.3，H，7.1. 實(shí)測(cè)C，71.5，H，7.1.
1-(α-碘代乙酰氧基)-2-[(3-異丙氧基-4-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯將DCC(6.43g，31.1mmol)加入2-碘代乙酸(5.80g，31.2mmol)，2-[(3-異丙氧基-4-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯酚(11.0g，29.7mmol)和DMAP(36mg，0.30mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液中，所得的溶液在18℃攪拌3小時(shí)。將產(chǎn)生的懸浮液過濾(二氯甲烷，100mL沖洗)，濾液被減壓濃縮。將殘余物在0℃通過快速攪拌懸浮于乙醚(150mL)中，然后過濾[用預(yù)冷至0℃的乙醚(70mL)沖洗]給出產(chǎn)物(15.0g，94％)膏狀固體，mp 136-7℃.IR(KBr片，cm-1)3021，2978，2930，1771，1607，1512，1460，1444，1420，1330，1241，1211，1133，1110，1096.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.12(dd，J＝1.8，8.4Hz，1H)，7.06(d，J＝2.1Hz，1H)，7.02(s，1H)，6.82(d，J＝8.4Hz，1H)，6.66(s，1H)，4.55(septet，J＝6.0Hz，2Hz)，3.96(s，2H)，3.87(s，6H)，1.40(d，J＝6.0Hz，6H)，1.38(d，J＝6.0Hz，6H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ166.9(C)，150.8(C)，147.9(C)，147.8(C)，146.7(C)，144.6(C)，125.1(CH)，118.3(CH)，115.0(C)，114.7(CH)，111.5(CH)，108.3(CH)，93.2(C)，82.3(C)，71.5(CH)，71.3(CH)，56.1(CH3)，55.7(CH3)，22.0(CH3)，21.8(CH3)，-6.6(CH2).MS(70eV)m/z(％)538(100，M+·)，496(12，M+·-CH2CHCH3)，370(26，M+·-CH2ICO)，328(62)，286(81)；HRMS分析 C24H27O6I 538.0852. 實(shí)測(cè) 538.0843.
片螺素T二異丙基醚將3，4-二氫-5，6，7-三甲氧基異喹啉(986mg，4.46mmo1)加入1-(α-碘代乙酰氧基)-2-[(3-異丙氧基-4-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯(2.0mg，3.71mmol)的干燥1，2-二氯乙烷(50.0mL)溶液中，該溶液在18℃攪拌15小時(shí)。然后，加入二異丙基乙胺(677μl，3.90mmol)，反應(yīng)混合物在83℃加熱24小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，蒸發(fā)到硅膠(5g)上，殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用9∶1，6∶1二氯甲烷/乙醚洗脫)，將適當(dāng)?shù)牧鞣?在7∶1二氯甲烷/乙醚中Rf0.5)濃縮，給出標(biāo)題化合物(1.67g，71％)白色固體mp 192-5℃.IR(KBr片，cm-1)2975，2935，2834，1700，1620，1540，1506，1476，1455，1442，1416，1259，1239，1208，1175，1137，1116，1084，1037，1013.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.07(br s，2H)，7.03(s，1H)，6.89(s，1H)，6.63(s，1H)，6.56(s，1H)，4.74(br t，J＝6.6Hz，2H)，4.52(m，2H)，3.92(s，3H)，3.88(s，3H)，3.85(s，3H)，3.42(s，3H)，3.33(s，3H)，3.12(br t，J＝6.6Hz，2H)，1.36(d，J＝6.0Hz，6H)，1.32(d，J＝6.0Hz，6H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ155.6(C)，151.8(C)，150.6(C)，150.0(C)，148.0(C)，147.0(C)，146.5(C)，145.9(C)，142.1(C)，135.3(C)，128.1(C)，127.8(C)，123.6(CH)，123.0(C)，120.0(C)，117.7(CH)，115.5(C)，113.8(C)，112.6(CH)，110.3(C)，105.1(CH)，104.8(CH)，103.3(CH)，71.3(CH)，71.2(CH)，61.0(CH3)，60.5(CH3)，56.3(CH3)，55.4(CH3)，55.1(CH3)，42.1(CH2)，22.0(CH3)，21.9(CH2)，21.8(CH3).MS(70eV)m/z(％)629(100，M+·)，587(63，M+·-CH2CHCH3)；HRMS 分析 C36H36NO9629.2625. 實(shí)測(cè) 629.2642.實(shí)施例5片螺素T(化合物26)片螺素T將氯化鋁(480mg，3.60mmol)加入片螺素T二異丙基醚(945mg，1.50mmol)的干燥二氯甲烷(10.0mL)溶液中，反應(yīng)物被攪拌0.5小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物用NH4Cl(飽和水溶液，5ml)處理。將兩相轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用水(100mL)稀釋，并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。將合并的有機(jī)相干燥(硫酸鎂)并濃縮到硅膠(4g)上。將殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用99∶1，20∶1二氯甲烷/甲醇連續(xù)洗脫)，將相關(guān)流分(在20∶1二氯甲烷/甲醇中Rf0.2)濃縮，給出片螺素T(736.8mg，90％)白色固體，mp283-4℃.IR(KBr片，cm-1)3492，3303，2998，2982，2835，1677，1624，1582，1551，1507，1476，1462，1450，1413，1273，1249，1207，1160，1122，1041，10231H NMR(300MHz，d6DMSO)δ9.65(s，1H)，9.29(s，1H)，7.13(d，J＝8.7Hz，1H)，6.90(m，2H)，6.80(s，1H)，6.65(s，1H)，6.60(s，1H)，4.65(m，1H)，4.56(m，1H)，3.83(s，3H)，3.79(s，3H)，3.75(s，3H)，3.38(s，3H)，3.30(s，3H)，3.06(br t，J＝7.0Hz，2H).13C NMR+APT(75.5MHz，d6DMSO)δ154.3(C)，151.3(C)，150.2(C)，147.7(C)，147.5(C)，146.8(C)，145.6(C)，144.4(C)，141.8(C)，134.5(C)，127.3(C)，127.1(C)，122.4(C)，121.5(CH)，120.0(C)，117.7(CH)，115.2(C)，113.3(CH)，112.8(C)，108.5(C)，105.1(CH)，104.9(CH)，103.6(CH)，60.8(CH3)，60.5(CH3)，56.0(CH3)，55.0(CH3)，54.7(CH3)，41.6(CH2)，21.4(CH2).MS(70eV)m/z(％)545(100，M+ ·)，530(31，M+·-CH3)272.5(27，M2+)；HRMS 計(jì)算 C30H21NO9545.1686.
實(shí)測(cè) 545.1690.實(shí)施例6片螺素T二乙酸酯(化合物39)片螺素T二乙酸酯將片螺素T(48mg，0.088mmol)溶于乙酸酐(1.0mL)和含有DMAP(幾個(gè)晶體)的吡啶(1.0mL)的溶液中，該溶液在18℃攪拌26小時(shí)。然后將該溶液用乙酸乙酯(15ml)稀釋，并用碳酸氫鈉(飽和水溶液，20ml)和檸檬酸(10％水溶液，20ml)洗滌，干燥(硫酸鎂)，減壓濃縮。將殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用2∶1，1∶1己烷/乙酸乙酯連續(xù)洗脫)，將相關(guān)流分(在1∶1己烷/乙酸乙酯中Rf0.42)濃縮給出標(biāo)題化合物(47mg，83％)白色固體，mp251-2℃.IR(KBr片，cm-1)2937，2840，1769，1718，1603，1545，1507，1475，1456，1414，1295，1266，1201，1141，1117，1036.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.31(dd，J＝2.1，8.4Hz，1H)，7.22(d，J＝2.1Hz，1H)，7.14(d，J＝8.7Hz，1H)，7.07(s，1H)，4.90(m，1H)，4.60(m，1H)，3.90(s，3H)，3.89(s，3H)，3.86(s，3H)，3.45(s，3H)，3.39(s，3H)，3.13(m，2H)，2.30(s，6H)13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ168.7(C)，168.4(C)，155.0(C)，151.9(C)，147.5(C)，144.8(C)，142.2(C)，140.6(C)，138.7(C)，135.6(C)，129.5(CH)，127.6(C)，127.2(C)，125.4(CH)，122.6(C)，119.8(C)，116.1(C)，114.8(C)，114.4(C)，112.9(CH)，111.7(CH)，105.4(CH)，105.0(CH)，60.9(CH3)，60.8(CH3)，56.2(CH3)，55.5(CH3)，55.2(CH3)，42.1(CH2)，21.7(CH2)，20.4(CH3).MS(70eV)m/z(％)629(53，M+·)，587(100，M·-CH2CO)；HRMS 計(jì)算C34H31NO11629.1897. 實(shí)測(cè) 629.1907.實(shí)施例710-脫氧片螺素K二異丙基醚(化合物34)10-脫氧片螺素K二異丙基醚將3，4-二氫-6，7-二甲氧基異喹啉(170mg，0.82mmol)加入1-(α-碘代乙酰氧基)-2-[(4-異丙氧基-3-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯(400mg，0.74mmol)的干燥1，2-二氯乙烷(4.0mL)溶液中，該溶液在18℃攪拌5小時(shí)。然后，加入二異丙基乙胺(136μl，0.78mmol)，反應(yīng)混合物在83℃加熱28小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，蒸發(fā)到硅膠(3g)上，殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用1∶2∶0，3∶6∶1，0∶5∶1己烷/二氯甲烷/乙醚連續(xù)洗脫)，將適當(dāng)?shù)牧鞣?在9∶1二氯甲烷/乙醚中Rf0.7)濃縮，給出標(biāo)題化合物(352m，79％)白色固體 mp222-3℃.IR(KBr片.cm-1)2975，2933，2831，1709，1611，1578，1543，1514，1485，1464，1438，1415，1271，1240，1212，1165，1042.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.11(m，2H)，7.05(s，1H)，6.92(s，1H)，6.77(s，1H)，6.75(s，1H)，6.68(s，1H)，4.80(m，2H)，4.57(m，2H)，3.90(s，3H)，3.83(s，3H)，3.43(s，3H)，3.37(s，3H)，3.12(br t，J＝7.0Hz，2H)，1.41(d，J＝6.0Hz，6H)，1.39(d，J＝6.0Hz，6H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ155.5(C)，151.2(C)，148.9(C)，147.4(C)，147.0(C)，146.9(C)，146.5(C)，146.0(C)，135.9(C)，128.5(C)，128.3(C)，126.6(C)，123.4(CH)，120.1(C)，116.8(CH)，114.9(C)，114.5(CH)，113.7(C)，110.9(CH)，110.3(C)，108.6(CH)，104.8(CH)，103.4(CH)，71.7(CH)，71.4(CH)，56.2(CH3)，55.9(CH3)，55.5(CH3)，55.1(CH3)，42.4(CH2)，28.7(CH2)，21.9(CH3)，21.8(CH3).MS(70eV)m/z(％)599(100，M+·)，557(61，M+·-CH2CHCH3)，515(49，M+·-2×CH2CHCH3)；HRMS 計(jì)算 C35H37NO8599.2519. 實(shí)測(cè) 599.2519.實(shí)施例810-脫氧片螺素K(化合物35)10-脫氧片螺素K將氯化鋁(80.3mg，0.60mmol)加入10-脫氧片螺素K二異丙基醚(120mg，0.20mmol)的干燥二氯甲烷(10.0mL)溶液中，反應(yīng)物被攪拌1小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物用NH4Cl(飽和水溶液，10ml)處理。將兩相轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用乙酸乙酯(40mL)稀釋，并用水(40mL)萃取。將水層用乙酸乙酯(2×20ml)萃取。將合并的有機(jī)相干燥(硫酸鎂)并濃縮到硅膠(2g)上。將殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用20∶1，10∶1二氯甲烷/甲醇連續(xù)洗脫)，將相關(guān)流分(在10∶1二氯甲烷/甲醇中Rf0.7)濃縮，給出10-脫氧片螺素K(91.7mg，89％)白色固體，mp，292-4℃.IR(KBr片，cm-1)3529，3105，3003，2937，2833，1667，1609，1546，1520，1486，1464，1439，1416，1274，1217，1163，1047.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.13(d，J＝8.1Hz，1H)，7.08(dd，J＝1.5，8.1Hz，1H)，6.98(d，J＝1.5Hz，1H)，6.96(s，1H)，6.76(s，1H)，6.71(s，1H)，6.64(s，1H)，5.76(s，1H)，5.74(s，1H)，4.96(m，1H)，4.64(m，1H)，3.90(s，3H)，3.87(s，3H)，3.51(s，3H)，3.38(s，3H)，3.11(m，2H).1HNMR(300MHz，d6DMSO)δ9.40(s，1H)，9.09(s，1H)，6.99(d，J＝8.1Hz，1H)，6.96(d，J＝1.5Hz，1H)，6.85(dd，J＝1.5，8.1Hz，1H)，6.82(s，1H)，6.74(s，1H)，6.67(s，1H)，6.59(s，1H)，4.62(m，2H)，3.78(s，6H)，3.39(s，3H)，3.27(s，3H)，3.05(br t，J＝7.0Hz，2H)13C NMR+APT(75.5MHz，d6DMSO)δ152.8(C)，147.0(C)，146.7(C)，145.3(C)，145.0(C)，144.9(C)，144.1(C)，142.7(C)，133.8(C)，126.2(C)，124.8(C)，123.9(C)，121.8(CH)，117.9(C)，114.5(CH)，113.0(C)，112.8(CH)，111.0(C)，109.7(CH)，107.3(C)，107.0(CH)，103.4(CH)，101.9(CH)，54.3(CH3)，53.8(CH3)，53.4(CH3)，52.9(CH3)，40.3(CH2)，26.3(CH2).MS(70eV)m/z(％)515(100，M+ ·)，257.5(19，M2+)；HRMS 計(jì)算 C29H25NO8515.1580.實(shí)測(cè) 515.1576.實(shí)施例9片螺素U二異丙基醚(化合物38)片螺素U二異丙基醚將3，4-二氫-6，7-二甲氧基異喹啉(425mg，2.23mmol)加入1-(α-碘代乙酰氧基)-2-[(3-異丙氧基-4-甲氧基苯基)乙炔基]-5-異丙氧基-4-甲氧基苯(1.00g，1.86mmol)的干燥1，2-二氯乙烷(30.0mL)溶液中，該溶液在18℃攪拌17小時(shí)。然后，加入二異丙基乙胺(340μl，1.95mmol)，反應(yīng)混合物在83℃加熱20小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，蒸發(fā)到硅膠(5g)上，殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用9∶1二氯甲烷/乙醚連續(xù)洗脫)，將適當(dāng)?shù)牧鞣?在7∶1二氯甲烷/乙醚中Rf0.5)濃縮，給出標(biāo)題化合物(780m，70％)白色固體mp213-4℃.IR(KBr片，cm-1)2975，2936，2836，1694，1620，1608，1580，1542，1511，1485，1463，1440，1415，1271，1259，1241，1213，1167，1043.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.01(br s，2H)，7.03(s，1H)，6.87(s，1H)，6.74(s，1H)，6.69(s，1H)，6.65(s，1H)，4.75(m，2H)，4.50(m，2H)，3.90(s，3H)，3.86(s，3H)，3.41(s，3H)，3.35(s，3H)，3.10(br t，J＝6.9Hz，2H)，1.34(d，J＝6.0Hz，6H)，1.32(d，J＝6.0Hz，6H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ155.6(C)，149.9(C)，148.8(C)，147.9(C)，147.4(C)，146.9(C)，146.4(C)，145.9(C)，135.8(C)，128.2(C)，127.8(C)，126.5(C)，123.6(CH)，120.0(C)，117.7(CH)，114.8(C)，113.6(C)，112.5(CH)，110.9(CH)，110.3(C)，108.5(CH)，104.8(CH)，103.3(CH)，71.3(CH)，71.2(CH)，56.3(CH3)，55.9(CH3)，55.5(CH3)，55.1(CH3)，42.3(CH2)，28.6(CH2)，21.9(CH3)，21.8(CH3).MS(70eV)m/z(％)599(100，M+·)，557(81，M+·-CH2CHCH3)，515(41，M+·-2×CH2CHCH3)；HRMS計(jì)算CH35H37NO8599.2519.實(shí)測(cè) 599.2526.實(shí)施例10片螺素U(化合物29)片螺素U將氯化鋁(315.8mg，2.36mmol)加入片螺素U二異丙基醚(430.0mg，0.717mmol)的干燥二氯甲烷(20.0mL)溶液中，反應(yīng)物被攪拌14小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物用NH4Cl(飽和水溶液，10ml)處理。將兩相轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用乙酸乙酯(40mL)稀釋，并用水(20mL)洗滌。將水層用乙酸乙酯(2×20ml)萃取。將合并的有機(jī)相干燥(硫酸鎂)并濃縮到硅膠(2g)上。將殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用20∶1，10∶1二氯甲烷/甲醇連續(xù)洗脫)，將相關(guān)流分(在10∶1二氯甲烷/甲醇中Rf0.7)濃縮，給出片螺素U(347.1mg，94％)白色固體，mp242-3
C.IR(KBr片，cm-1)3526，3449，3296，3001，2954，2838，1683，1674，1609，1584，1485，1464，1440，1413，1273，1247，1215，1171，1048.1H NMR(300MHz，d6DMSO)δ9.67(s，1H)，9.30(s，1H)，7.15(d，J＝8.1Hz，1H)，6.98(s，1H)，6.90(m，2H)，6.80(s，1H)，6.69(s，2H)，4.62(m，2H)，3.84(s，3H)，3.78(s，3H)，3.39(s，3H)，3.26(s，3H)，3.11(br t，J＝7.0Hz，2H).13C NMR+APT(75.5MHz，d6DMSO)δ154.6(C)，149.2(C)，148.0(C)，147.9(C)，147.3(C)，146.0(C)，144.8(C)，135.7(C)，127.7(C)，127.6(C)，127.3(C)，122.0(CH)，119.6(C)，118.2(CH)，114.7(C)，113.8(CH)，112.9(C)，112.1(CH)，109.0(C)，108.9(CH)，105.4(CH)，103.4(CH)，56.4(CH3)，55.9(CH3)，55.4(CH3)，54.8(CH3)，42.9(CH2)，28.0(CH2).MS(70eV)m/z(％)515(100，M+·)，257.5(15，M2+)；HRMS 計(jì)算C28H25NO8515.1580.實(shí)測(cè)515.1586實(shí)施例11片螺素W二異丙基醚(化合物11)片螺素W二異丙基醚將DDQ(219mg，0.963mmol)加入片螺素T二異丙基醚(485mg，0.77mmol)的干燥氯仿(10ml)溶液中，反應(yīng)物在61℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，蒸發(fā)到硅膠(3g)上，殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用(9∶1，4∶1二氯甲烷/乙醚)連續(xù)洗脫)，將適當(dāng)?shù)牧鞣?在6∶1二氯甲烷/乙醚中Rf0.6)濃縮，給出標(biāo)題化合物(479m，99％)白色固體mp200-1℃.IR(KBr片，cm-1)2975，2935，2834，1698，1621，1606，1536，1498，1480，1453，1429，1418，1395，1260，1233，1177，1137，1117，1073，1045，975.
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.21(d，J＝7.8Hz，1H)，7.38(d，J＝7.8Hz，1H)，7.17(br s，2H)，7.14(s，1H)，7.01(s，1H)，6.97(s，1H)，6.72(s，1H)，4.58(m，2H)，4.03(s，3H)，3.97(s，3H)，3.94(s，3H)，3.46(s，6H)，1.41(d，J＝6.3Hz，6H)，1.36(d，J＝6.0Hz，6H).13C NMR+APT(75.5MHz，CDCl3)δ155.5(C)，153.2(C)，150.2(C)，148.4(C)，1487.2(C)，147.9(C)，146.6(C)，146.5(C)，142.6(C)，133.8(C)，129.3(C)，128.1(C)，124.0(CH)，122.8(CH)，121.3(C)，119.3(C)，114.1(CH)，112.7(CH)，111.9(C)，109.8(C)，108.1(C)，106.8(CH)，105.4(CH)，103.3(CH)，101.5(CH)，71.3(CH)，71.2(CH)，61.6(CH3)，61.1(CH3)，56.4(CH3)，55.4(CH3)，55.1(CH3)，21.9(CH3)，21.8(CH3).MS(70 eV)m/z(％)627(100，M+·)，585(85，M+·-CH2CHCH3)；HRMS 計(jì)算CH36H37NO9627.2468. 實(shí)測(cè) 627.2475.實(shí)施例12片螺素W(化合物9)片螺素W將氯化鋁(112mg，0.836mmol)加入片螺素W二異丙基醚(175mg，0.279mmol)的干燥二氯甲烷(10.0mL)溶液中，反應(yīng)物被攪拌14小時(shí)。然后，將反應(yīng)混合物用NH4Cl(飽和水溶液，5ml)處理。將兩相轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用水(40mL)稀釋，并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取，并洗滌。將合并的有機(jī)相干燥(硫酸鎂)并濃縮到硅膠(2g)上。將殘余物在硅膠上進(jìn)行快速層析(用90∶1，20∶1二氯甲烷/甲醇連續(xù)洗脫)，將相關(guān)流分(在20∶1二氯甲烷/甲醇中Rf0.2)濃縮，給出片螺素W(143mg，94％)白色固體，mp284-6℃.IR(KBr片，cm-1)3413，3135，2937，2841，1667，1606，1481，1424，1275，1240，1207，1156，1075，1045.1H NMR(300MHz，d6DMSO)δ9.50(br s，2H)，8.89(d，J＝7.8Hz，1H)，7.28(d，J＝7.8Hz，1H)，7.09(d，J＝8.1Hz，1H)，6.96(s，2H)，6.87(d，J＝8.1Hz，1H)，6.82(s，1H)，6.67(s，1H)，3.92(s，3H)，3.84(s，3H)，3.81(s，3H)，3.37(s，6H).13CNMR+APT(75.5MHz，d6DMSO)δ154.8(C)，152.4(C)，147.5(C)，147.1(C)，146.9(C)，146.8(C)，146.0(C)，143.9(C)，141.4(C)，133.0(C)，128.8(C)，127.4(C)，121.9(CH)，121.8(CH)，120.6(C)，118.4(C)，117.7(CH)，111.7(CH)，111.3(C)，108.3(C)，107.7(C)，106.0(CH)，104.8(CH)，103.3(CH)，101.2(CH)，61.0(CH3)，60.3(CH3)，55.6(CH3)，54.7(CH3)，54.4(CH3).MS(70eV)m/z(％)543(100，M+·)，271.5(11，M2+)；HRMS 計(jì)算30H19NO9543.1529.實(shí)測(cè)543.1533.
表1
*Lamellarin片螺素表1(續(xù)
Lamellarin片螺素表2
*Lamellarin片螺素表2(續(xù))
*Lamellarin片螺素表2(續(xù))
*Lamellarin片螺素本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該意識(shí)到，本文所述的發(fā)明很容易推導(dǎo)出未具體描述的改變形式或改進(jìn)形式。應(yīng)該明白，本發(fā)明包括這些改變和改進(jìn)。
權(quán)利要求
1.制備通式(I)化合物或其藥用衍生物和鹽，外消旋體，異構(gòu)體和/或互變異構(gòu)體的方法
包括通式(II)的偶氮甲堿葉立德的環(huán)化步驟
其中，A是被芳基或芳雜環(huán)基非強(qiáng)制性取代的環(huán)狀基團(tuán)；或A是環(huán)狀基團(tuán)RA1RA2C-CRA3RA4，其中RA2和RA3與其所連接的碳原子一起形成非強(qiáng)制性取代的飽和或不飽和碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，而RA1和RA4如下定義或一起形成一條鍵；或A是非環(huán)狀基團(tuán)RA1RA2C-CRA3RA4，其中RA1-RA4如下定義，而RA2和RA3可以非強(qiáng)制性地一起形成一條鍵；Z是碳或雜原子；n選自0，1，2或3；和RA1-RA4，W，X和Y可以相同或不同，各自選自氫，非強(qiáng)制性取代的烷基，非強(qiáng)制性取代的鏈烯基，非強(qiáng)制性取代的炔基，非強(qiáng)制性保護(hù)的羥基，非強(qiáng)制性取代的氨基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基，非強(qiáng)制性取代的鏈烯氧基，非強(qiáng)制性取代的炔氧基，非強(qiáng)制性取代的芳基，非強(qiáng)制性取代的雜環(huán)基，羧基，羧基酯，酰胺基，?；Ｑ趸?，巰基，非強(qiáng)制性取代的烷硫基，鹵素，硝基，硫酸基，磷酸基和氰基，或W和X與其所連接的氮和碳原子一起形成飽和或不飽和的含氮雜環(huán)基，該雜環(huán)基可以非強(qiáng)制性地被取代，或非強(qiáng)制性地與飽和或不飽和的碳環(huán)基，芳基或雜環(huán)基稠合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中A選自苯，萘，吡啶，呋喃，吡咯，噻吩，喹啉，吲哚，苯并呋喃或苯并噻吩，它們各自可以非強(qiáng)制性地被取代。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中A是非強(qiáng)制性取代的苯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中A是環(huán)狀基團(tuán)RA1RA2C-CRA3RA4，其中RA2-RA3與其所連接的碳原子一起形成選自環(huán)戊烷，環(huán)戊烷，環(huán)己烷，環(huán)己烯，環(huán)戊二烯，環(huán)己二烯，四氫呋喃，二氫呋喃，吡咯烷，吡咯啉，吡喃，二氫吡喃，四氫吡喃或哌啶的環(huán)狀基團(tuán)，它們各自可以非強(qiáng)制性地被取代。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中A是非環(huán)狀基團(tuán)RA1RA2C-CRA3RA4，其中RA1-RA4獨(dú)立地選自氫，非強(qiáng)制性保護(hù)的羥基，非強(qiáng)制性取代的烷基或非強(qiáng)制性取代的烷氧基。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中A是H2C-CH2。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中W和X與它們所連接的相應(yīng)的氮和碳原子一起形成非強(qiáng)制性取代的飽和或不飽和含氮雜環(huán)基團(tuán)，該雜環(huán)基團(tuán)可以非強(qiáng)制性地與飽和或不飽和碳環(huán)基團(tuán)，芳基或雜環(huán)基團(tuán)稠合。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中其中W和X與它們所連接的相應(yīng)的氮和碳原子一起形成式(I)的基團(tuán)
其中
是可有可無的雙鍵，而R1-R4和R14與權(quán)利要求1中對(duì)W和X的定義相同。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中R1-R4和R14選自氫，羥基，非強(qiáng)制性取代的烷基，?；蛄蛩峄?br> 10.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中n是1。
11.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中Z是碳，氮，硫或氧。
12.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中Z是氧。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中Y是式(ii)的非強(qiáng)制性取代的苯基
其中R9-R13與權(quán)利要求5中對(duì)中R1-R4和R14的定義相同。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中R9-R13選自氫，羥基，非強(qiáng)制性取代的烷基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基，或酰氧基。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中R9-R13選自氫，羥基，甲氧基，異丙氧基，甲基或乙酰氧基。
16.制備式(Ia)化合物的方法
包括通式(IIa)的偶氮甲堿葉立德的環(huán)化步驟
其中R1-R8和R14可以相同或不同，且各自選自氫，非強(qiáng)制性取代的烷基，非強(qiáng)制性取代的鏈烯基，非強(qiáng)制性取代的炔基，非強(qiáng)制性保護(hù)的羥基，非強(qiáng)制性取代的氨基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基，非強(qiáng)制性取代的鏈烯氧基，非強(qiáng)制性取代的炔氧基，非強(qiáng)制性取代的芳基，非強(qiáng)制性取代的雜環(huán)基，羧基，羧基酯，酰胺基，?；?，酰氧基，巰基，非強(qiáng)制性取代的烷硫基，鹵素，硝基，硫酸基，磷酸基和氰基；而Y，Z和n如權(quán)利要求1中定義。
17.制備式(Ib)化合物的方法
包括通式(IIb)的偶氮甲堿葉立德的環(huán)化步驟
其中R1-R4，Y，Z和n如權(quán)利要求16中定義，而RA1-RA4形成如權(quán)利要求1中定義的環(huán)狀或非環(huán)狀基團(tuán)。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中RA1-RA4是氫。
19.根據(jù)權(quán)利要求16或17的方法，其中Y是式(ii)的非強(qiáng)制性取代的苯基
其中R9-R13與權(quán)利要求16中對(duì)中R1-R8和R14的定義相同。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中R1-R14選自氫，羥基，非強(qiáng)制性取代的烷氧基，非強(qiáng)制性取代的烷基，硫酸基或酰氧基。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中R1-R14選自氫，羥基，異丙氧基，甲氧基，乙酰氧基或硫酸基。
22.根據(jù)權(quán)利要求16或17的方法，其中n是0或1。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中n是1。
24.根據(jù)權(quán)利要求16或17的方法，其中Z是碳，氮，硫或氧。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的方法，其中Z是氧。
26.根據(jù)權(quán)利要求1，16或17的方法，其中偶氮甲堿葉立德的環(huán)化通過熱處理而實(shí)現(xiàn)。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中熱處理包括在四氫呋喃，氯仿或1，2-二氯乙烷中加熱偶氮甲堿葉立德。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的方法，其中熱處理進(jìn)一步包括用金屬鹽處理。
29.根據(jù)權(quán)利要求28的方法，其中金屬鹽是CuI。
30.根據(jù)權(quán)利要求1，16或17的方法，其中環(huán)化后接著氧化處理。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中氧化處理包括在空氣中氧化。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，其中在空氣中的氧化處理在硅膠存在下進(jìn)行。
33.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中氧化處理包括用Fremy’s鹽處理。
34.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中氧化處理包括用醌處理。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中醌選自氯醌或2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4-苯醌。
36.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中氧化處理包括用金屬催化劑處理。
37.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中式(II)的化合物通過用堿處理式(III)化合物形成
其中A，Z，X，W，Y和n如權(quán)利要求1中定義，而抗衡離子L是穩(wěn)定的弱堿性陰離子。
38.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中式(IIa)的化合物通過用堿處理通式(IIIa)的化合物而產(chǎn)生
其中R1-R7，R14，Y，Z和n如前定義，而抗衡離子L是穩(wěn)定的堿性陰離子。
39.根據(jù)權(quán)利要求37或38的方法，其中L是磺酸化合物或鹵素。
40.根據(jù)權(quán)利要求39的方法，其中L選自甲苯磺酸根，甲磺酸根，三氟甲磺酸，bosylate，besylate，tresylate，nonaflate，nosylate，溴，氯或碘離子。
41.根據(jù)權(quán)利要求37或38的方法，其中堿是從堿金屬衍生的或該堿是單-，二-，或三-取代的胺。
42.根據(jù)權(quán)利要求41的方法，其中堿是烷基鋰或芳基鋰。
43.根據(jù)權(quán)利要求41的方法，其中堿是堿金屬碳酸鹽。
44.根據(jù)權(quán)利要求41的方法，其中堿是烷基取代的胺。
45.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中堿是三乙胺或二異丙基乙胺。
46.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中環(huán)化步驟通過如下步驟進(jìn)行a)式(IV)化合物與式(V)化合物偶合
給出式(VI)化合物
其中PZn是Zn合成子；b)暴露化合物(VI)的Zn并與化合物L(fēng)-CH2-C(O)-L’偶合，提供化合物(VII)
其中L’是離去基或可以轉(zhuǎn)化為離去基的取代基；c)用式(VIII)的亞胺處理化合物(VII)
d)產(chǎn)生通式(II)的偶氮甲堿葉立德，并隨后將葉立德環(huán)化；其中Hal是鹵素，而A，L，W，Z，Y和n如權(quán)利要求37中定義。
47.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中環(huán)化步驟通過如下步驟進(jìn)行a)式(IV)化合物與式(Va)化合物偶合
給出式(VIa)化合物
其中PZn是Zn合成子。b)暴露化合物(VIa)的Zn并與化合物L(fēng)-CH2-C(O)-L’偶合，提供化合物(VIIa)
c)用式(VIIIa)的化合物處理化合物(VIIa)
d)產(chǎn)生通式(IIa)的偶氮甲堿葉立德；其中Hal，L，L’，PZn，Y和Z如權(quán)利要求40定義，而R1-R8和R14如權(quán)利要求13中定義。
48.根據(jù)權(quán)利要求46或47的方法，其中PZn是OAc，而暴露是指OAc基團(tuán)水解產(chǎn)生OH。
49.根據(jù)權(quán)利要求46或47的方法，其中PZn是醛或?；?，而暴露是指醛或酰基氧化為相應(yīng)的酯，接著水解。
50.根據(jù)權(quán)利要求46或47的方法，其中L’是鹵素或轉(zhuǎn)化為離去基的羥基。
51.根據(jù)權(quán)利要求50的方法，其中L’是溴或氯。
52.根據(jù)權(quán)利要求46或47的方法，其中偶合步驟a)在鈀催化劑存在下進(jìn)行。
53.根據(jù)權(quán)利要求52的方法，其中鈀催化劑選自PdCl2(PPh3)2或Pd(PPh3)4。
54.根據(jù)權(quán)利要求52或53的方法，其中偶合是由Cu(I)化合物介導(dǎo)的。
55.產(chǎn)生式(I)化合物的方法，通過組合合成，由下列步驟的一步或多步進(jìn)行a)式(IV)化合物與式(V)化合物偶合；b)暴露化合物(VI)的Zn并與化合物L(fēng)-CH2-C(O)-L’偶合；c)用式(VIII)的亞胺處理化合物(VII)。
56.通過權(quán)利要求1的方法制備的式(I)化合物
其中A，Z，W，X，Y和n如權(quán)利要求1中定義。
57.通過權(quán)利要求16的方法制備的式(Ia)化合物
其中R1-R8，R14，Y，Z和n如權(quán)利要求16中定義。
58.通過權(quán)利要求17的方法制備的式(Ib)化合物
其中R1-R4，Y，Z，n和RA1-RA4如權(quán)利要求17中定義。
59.包括根據(jù)權(quán)利要求56至58任意一項(xiàng)的化合物與藥用載體，賦形劑或稀釋劑一起的組合物。
60.如前定義的通式(I)化合物
其中A，Z，Z，W，Y和n如權(quán)利要求1中定義，條件是該化合物不是選自片螺素A-N，S-X；D，L，K，M，N-三乙酸酯；I-乙酸酯；G-三甲基醚；或T，U，V，Y-20-硫酸酯的化合物。
61.通式(II)的化合物
其中A，Z，W，X，Y和n如權(quán)利要求1中定義。
62.通式(IIa)的化合物
其中R1-R8，R14和W，X，Y，Z和n如權(quán)利要求16中定義。
63.通式(IIb)的化合物
其中R1-R4，R14，Y，Z，n和RA1-RA4如權(quán)利要求17中定義。
64.通式(III)的化合物
其中A，Z，W，Y，n和L如權(quán)利要求37中定義。
65.通式(IIIa)的化合物
其中R1-R8，R14，Y，Z和L如權(quán)利要求38中定義。
66.通式(IIIb)的化合物
其中R1-R4，R14，Y，Z和n如權(quán)利要求63中定義，而L如權(quán)利要求64中定義。
67.權(quán)利要求56至58任意一項(xiàng)的化合物的用途，用于生產(chǎn)對(duì)需要的動(dòng)物或人治療多藥物耐受腫瘤的醫(yī)藥。
68.權(quán)利要求56至58任意一項(xiàng)的化合物的用途，用于生產(chǎn)對(duì)需要的動(dòng)物或人的多藥物耐受細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的醫(yī)藥。
69.權(quán)利要求56至58任意一項(xiàng)的化合物的用途，用于生產(chǎn)對(duì)需要的動(dòng)物或人的受多藥物耐受影響藥物改善抗腫瘤化療效果的醫(yī)藥。
70.權(quán)利要求56至58任意一項(xiàng)的化合物的用途，用于生產(chǎn)對(duì)需要的動(dòng)物或人調(diào)節(jié)免疫功能的醫(yī)藥。
71.治療多藥物耐受腫瘤的方法，包括對(duì)需要的人或動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求56至58任意一項(xiàng)的化合物。
72.對(duì)需要的人或動(dòng)物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的方法，包括對(duì)需要的人或動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求56至58任意一項(xiàng)的化合物。
73.對(duì)多藥物耐受細(xì)胞改善抗腫瘤化療效果的方法，包括對(duì)需要的人或動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求56至58任意一項(xiàng)的化合物。
74.調(diào)節(jié)免疫功能的方法，包括對(duì)需要的人或動(dòng)物施用有效量的權(quán)利要求56至58任意一項(xiàng)的化合物。
全文摘要
制備通式(Ⅰ)化合物或其藥用衍生物和鹽,外消旋體,異構(gòu)體和/或互變異構(gòu)體的方法,包括通式(Ⅱ)的偶氮甲堿葉立德的環(huán)化步驟,其中,A是被芳基或芳雜環(huán)基非強(qiáng)制性取代的環(huán)狀基團(tuán);或A是環(huán)狀基團(tuán)R
文檔編號(hào)A61P35/00GK1262677SQ98806847
公開日2000年8月9日 申請(qǐng)日期1998年5月1日 優(yōu)先權(quán)日1997年5月2日
發(fā)明者M·G·班威爾, B·L·福萊恩 申請(qǐng)人:澳大利亞國(guó)立大學(xué)