一種二苯基四嗪二甲酰胺化合物及制備和應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種二苯基四嗪二甲酰胺化合物及制備和應(yīng)用，提供了一種新型的、具有較好的抗癌(尤其是人乳腺癌和人肺癌)活性的四嗪化合物；提供了該四嗪化合物的制備方法，該制備方法簡(jiǎn)單，易于操作，原料易得且生產(chǎn)成本較低，適于實(shí)用，有望應(yīng)用于制備預(yù)防或治療腫瘤疾病的藥物中。
【專利說(shuō)明】
一種二苯基四嗪二甲酰胺化合物及制備和應(yīng)用 (一)
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ] 本發(fā)明涉及N1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺及 其制備方法，以及所述化合物在制備預(yù)防或治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。 (二)
【背景技術(shù)】
[0002] 四嗪類化合物具有許多較好的物理性質(zhì)、光譜性質(zhì)以及較高的反應(yīng)活性，尤其一 些特殊結(jié)構(gòu)的四嗪衍生物具有明顯的抗病毒活性、抗腫瘤活性，以及可用作為農(nóng)藥及殺蟲(chóng) 劑。例如農(nóng)藥目前已有兩個(gè)品種（四螨嗪和氟螨嗪)上市，醫(yī)藥已有一個(gè)品種(抗腫瘤藥替莫 唑胺)上市。
[0003] 1978年，文獻(xiàn)報(bào)道3,6_二苯炔基-六氫-1，2,4,5-四嗪具有抗腫瘤活性（參閱 Eremeev,A.V. ；Tikhomirova,D.A. ；Tyusheva,V.A. ；Liepins, 卩.1〇1丨111.66七6仰七8丨1^1.3〇6乜11，1978,753)，這是1，2,4,5-四嗪類化合物首次被報(bào)道可能有 潛在的抗腫瘤活性。之后，陸續(xù)報(bào)道了一些1，2,4,5-四嗪類化合物具有抗腫瘤活性，例如具 有抗腫瘤活性的3,6-雙（2'-羥基-5'-氯苯基）-1，2,4,5-四嗪（參閱1^ 〇,6.-1;!111，1-X.Bioorg.Med.Chem.Lett. 2006,16(14) ,3702)、妒，#_二（間甲基苯基）-3,6-二甲基-1,2， 4,5-四嗪-1,4-二甲酰胺（參閱Rao，G.-W. ;Guo，Y.-M. ;Hu,W.-X.ChemMedChem,2012,7(6)， 973)等。當(dāng)然大多數(shù)1，2,4,5-四嗪類化合物并不具有抗腫瘤活性。 (三)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的第一個(gè)目的在于提供一種具有抗人乳腺癌和人肺癌活性的新型四嗪化 合物--N1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺。
[0005] 本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供所述N1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺的制備方法，該制備方法簡(jiǎn)便，易于操作，原料易得，且生產(chǎn)成本較低， 適于工業(yè)化應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供所述N1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺在制備預(yù)防或治療人乳腺癌或人肺癌藥物中的應(yīng)用。
[0007] 下面對(duì)本發(fā)明所采用的技術(shù)方案做具體說(shuō)明。
[0008] 本發(fā)明提供了一種新型四嗪化合物，即N1，#-二苯基_3,6-二苯基-1，4-二氫-1，2， 4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺，其具有下列結(jié)構(gòu)式(I):
[0010] 本發(fā)明還提供了所述的N1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I)的制備方法，所述制備方法包括:將三光氣加入有機(jī)溶劑A中，-10~12 °C攪拌 條件下，滴加含有式（Π )所示的3,6_二苯基-1，4-二氫-1，2,4,5-四嗪和堿性催化劑的有機(jī) 溶劑A溶液，滴完后反應(yīng)液升至室溫，回流反應(yīng)0.5~20小時(shí)后，減壓蒸除有機(jī)溶劑，再加入 有機(jī)溶劑B，-10~12°C攪拌條件下，滴加含苯胺的有機(jī)溶劑B溶液，滴完后反應(yīng)液升至室溫， 回流反應(yīng)1~60小時(shí)后，反應(yīng)液經(jīng)分離純化得到式（I)所示的N 1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1， 4-二氫-1，2,4,5_四嗪-1，4-二甲酰胺，所述堿性催化劑為下列之一:三乙胺、4-二甲氨基吡 啶(DMAP)、吡啶或氫氧化鈉；
[0012] 本發(fā)明所述制備N(xiāo)1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰 胺(I)的反應(yīng)如下列反應(yīng)式(a)所示，反應(yīng)式(a)尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道：
[0013]
[0014]進(jìn)一步，所述的3,6_二苯基-1，4-二氫-1，2,4,5-四嗪（11)與堿性催化劑、三光氣、 苯胺的投料物質(zhì)的量之比為1:0.1~3:0.1~3:1~8。
[0015] 進(jìn)一步，所述有機(jī)溶劑A或有機(jī)溶劑B均選自下列之一:二氯甲烷、氯仿或甲苯。所 述有機(jī)溶劑A或有機(jī)溶劑B用量以能夠溶解三光氣、3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪、 堿性催化劑、反應(yīng)中間體、苯胺即可，優(yōu)選有機(jī)溶劑A總體積用量以式（Π )所示化合物物質(zhì) 的量計(jì)為6-18mL/mmol，其中溶解三光氣所用有機(jī)溶劑A體積用量以式（Π )所示化合物物質(zhì) 的量計(jì)為1-lOmL/mmol;有機(jī)溶劑B總體積用量以式（Π )所示化合物物質(zhì)的量計(jì)為6-18mL/ mmol，其中溶解苯胺所用有機(jī)溶劑B體積用量以式（Π )所示化合物物質(zhì)的量計(jì)為l-8mL/ mmol 〇
[0016] 進(jìn)一步，反應(yīng)過(guò)程用TLC跟蹤檢測(cè)（展開(kāi)劑為體積比0.5~20:1的石油醚和乙酸乙 酯混合溶液），以確定反應(yīng)終點(diǎn)，一般反應(yīng)時(shí)間在〇. 5~60小時(shí)。
[0017] 進(jìn)一步，所述的分離純化采用如下步驟:反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液水洗，分出有機(jī)相，蒸 除溶劑后，殘留物柱層析得到式（I)所示的N 1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2,4,5_ 四嗪-1,4-二甲酰胺。
[0018] 更進(jìn)一步，所述的柱層析的操作步驟具體如下：取蒸除溶劑后的殘留物于單口瓶 中，加入有機(jī)溶劑C將其溶解，獲得溶解液，然后向溶解液中加入殘留物質(zhì)量1~2倍量的柱 層析硅膠(優(yōu)選300~400目粗孔(zcx. II)型柱層析硅膠），混勻后，蒸除溶劑，得干燥的殘留 物與硅膠的混合物，將混合物裝柱上樣，然后以體積比為0.5~20:1的石油醚和乙酸乙酯混 合溶液為洗脫劑進(jìn)行洗脫，TLC跟蹤檢測(cè)（展開(kāi)劑為體積比0.5~20:1的石油醚和乙酸乙酯 混合溶液），根據(jù)TLC檢測(cè)收集含式(I)所示化合物的洗脫液，將洗脫液濃縮干燥，獲得式（I) 所示化合物;所述有機(jī)溶劑C為下列之一:石油醚、二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯;所述有機(jī)溶 劑C用量以能夠溶解殘留物即可。
[0019] 本發(fā)明所述的有機(jī)溶劑A、有機(jī)溶劑B、有機(jī)溶劑C，所表示的都是指用于反應(yīng)或柱 層析的有機(jī)溶劑，這里的字母并沒(méi)有特指某一些有機(jī)溶劑的含義，字母只是為了便于表答 清楚，用來(lái)區(qū)分這些出現(xiàn)在不同的步驟中的有機(jī)溶劑。上述有機(jī)溶劑A為同一有機(jī)溶劑，有 機(jī)溶劑A、B、或C可以為同一溶劑，也可為不同種溶劑。
[0020] 本發(fā)明還提供一種所述Νι，N4-二苯基-3，6_二苯基_丨，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I)在制備治療人乳腺癌藥物中的應(yīng)用，優(yōu)選所述藥物為抑制人乳腺癌細(xì)胞株 MCF-7活性的藥物。
[0021 ] 本發(fā)明還提供一種所述Νι，N4-二苯基-3，6_二苯基_丨，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I)在制備治療人肺癌藥物中的應(yīng)用，優(yōu)選所述藥物為抑制人肺癌細(xì)胞株A-549活 性的藥物。
[0022] 本發(fā)明所述的N1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺 (I)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和人肺癌細(xì)胞株A-549具有顯著的抑制率，可應(yīng)用于制備預(yù)防 或治療人乳腺癌或人肺癌的藥物。
[0023]本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：（1)提供了一種新型的、具有較好的抗癌(尤其是 人乳腺癌和人肺癌)活性的四嗪化合物；（2)提供了該四嗪化合物的制備方法，該制備方法 簡(jiǎn)單，易于操作，原料易得且生產(chǎn)成本較低，適于實(shí)用，有望應(yīng)用于制備預(yù)防或治療腫瘤疾 病的藥物中。 (四）【具體實(shí)施方式】
[0024]本發(fā)明結(jié)合具體實(shí)施例作進(jìn)一步的說(shuō)明，以下的實(shí)施例是說(shuō)明本發(fā)明的，而不是 以任何方式限制本發(fā)明。
[0025] 3,6_ 二苯基-1，4-二氫-1，2,4,5-四嗪（Π )的制備參照文獻(xiàn)（1^〇,6.-1;此，￥·-X·Bioorg·Med· Chem· Lett · 2006，16( 14)，3702)的方法制備得到。
[0026] 實(shí)施例 1: N1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I) 的制備
[0027] 將10mL的氯仿溶解0.297g(1.0mmol)三光氣，-10°C磁力攪拌條件下，滴加含有 2.3638(10.0111111〇1)3,6-二苯基-1，4-二氫-1，2,4,5-四嗪（11)和0.1228(1.0111111〇1)01^?的 50mL氯仿溶液，滴完后反應(yīng)液升至室溫，回流反應(yīng)20小時(shí)(反應(yīng)過(guò)程采用TLC跟蹤檢測(cè)，展開(kāi) 劑為體積比1:2的石油醚和乙酸乙酯混合溶液），減壓蒸除有機(jī)溶劑，再加入50mL氯仿，-10 °(：磁力攪拌條件下，滴加含0.931g(10.0mmol)苯胺的10mL氯仿溶液，滴完后反應(yīng)液升至室 溫，回流反應(yīng)60小時(shí)后(反應(yīng)過(guò)程采用TLC跟蹤檢測(cè)，展開(kāi)劑為體積比1:2的石油醚和乙酸乙 酯混合溶液），反應(yīng)液用（50mLX3)水洗，分出有機(jī)相，蒸除溶劑后，殘留物柱層析，即取蒸除 溶劑后的殘留物加入10毫升石油醚溶劑將其溶解，獲得溶解液，然后向溶解液中加入1.0克 硅膠(300~400目粗孔(zcx. II)型柱層析硅膠），混勻后，蒸除溶劑，得干燥的殘留物與硅膠 的混合物，將混合物裝柱，然后以體積比1:2的石油醚和乙酸乙酯混合溶液為洗脫劑，洗脫， TLC跟蹤檢測(cè)（展開(kāi)劑為體積比1:2的石油醚和乙酸乙酯混合溶液），根據(jù)TLC檢測(cè)收集含式 α)所示化合物的洗脫液，收集的洗脫液蒸除溶劑，干燥得到淡黃色固體產(chǎn)物，即n1，N4-二苯 基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I)，收率32 · 6 % (以3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2,4,5-四嗪物質(zhì)的量計(jì)，下同），熔點(diǎn)184~186°(：。1!1匪1?(50冊(cè)泡，0(：1 3%: 8.513(s,2H),7.595-7.612(m,4H),7.478-7.554(m,10H),7.334-7.366(m,4H),7.125-7.155(m,2H).IR(KBr,cm _1)v ：3377,3315,1699,1651,1594,1525,1504,1471,1443,1349, 1317,1297,1230,1181,1143,1115,1077,1005,996,916,887,837,785,759,715,692.
[0028]實(shí)施例 2: N1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I) 的制備
[0029] 將100mL的二氯甲烷溶解8 · 903g(30 · Ommol)三光氣，12°C磁力攪拌條件下，滴加含 有2.3638(10.0111111〇1)3,6-二苯基-1，4-二氫-1，2,4,5-四嗪（11)和2.3738(30.0111111〇1)吡啶 的80mL二氯甲烷溶液，滴完后反應(yīng)液升至室溫，回流反應(yīng)0.5小時(shí)(反應(yīng)過(guò)程采用TLC跟蹤檢 測(cè)，展開(kāi)劑為體積比20:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液），減壓蒸除有機(jī)溶劑，再加入100mL 二氯甲烷，12 °C磁力攪拌條件下，滴加含7.450g (80.0 mmo 1)苯胺的80mL二氯甲烷溶液，滴完 后反應(yīng)液升至室溫，回流反應(yīng)1小時(shí)后(反應(yīng)過(guò)程采用TLC跟蹤檢測(cè)，展開(kāi)劑為體積比20:1的 石油醚和乙酸乙酯混合溶液），反應(yīng)液用（50mLX3)水洗，分出有機(jī)相，蒸除溶劑后，殘留物 柱層析，即取蒸除溶劑后的殘留物加入10毫升二氯甲烷溶劑將其溶解，獲得溶解液，然后向 溶解液中加入1.0克硅膠(300~400目粗孔(zcx. II)型柱層析硅膠），混勻后，蒸除溶劑，得 干燥的殘留物與硅膠的混合物，將混合物裝柱，然后以體積比20:1的石油醚和乙酸乙酯混 合溶液為洗脫劑，洗脫，TLC跟蹤檢測(cè)（展開(kāi)劑為體積比20:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶 液），根據(jù)TLC檢測(cè)收集含式（I)所示化合物的洗脫液，收集的洗脫液蒸除溶劑，干燥得到淡 黃色固體產(chǎn)物，即N 1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I)， 收率30.8%，熔點(diǎn)184~186°(：。 1!1匪1?和11?同實(shí)施例1。
[0030] 實(shí)施例 3: N1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I) 的制備
[0031] 將40mL的甲苯溶解2 · 968g( 10 · Ommol)三光氣，0°C磁力攪拌條件下，滴加含有 2.363區(qū)（10.〇1111]1〇1)3,6-二苯基-1，4-二氛-1，2,4,5-四嘆（11)和1.012區(qū)（10.〇1]11]1〇1)三乙胺 的20mL甲苯溶液，滴完后反應(yīng)液升至室溫，回流反應(yīng)4小時(shí)（反應(yīng)過(guò)程采用TLC跟蹤檢測(cè)，展 開(kāi)劑為體積比10:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液），減壓蒸除有機(jī)溶劑，再加入40mL甲苯，0 °(：磁力攪拌條件下，滴加含1.863g(20.0 mmol)苯胺的20mL甲苯溶液，滴完后反應(yīng)液升至室 溫，回流反應(yīng)30小時(shí)后（反應(yīng)過(guò)程采用TLC跟蹤檢測(cè)，展開(kāi)劑為體積比10:1的石油醚和乙酸 乙酯混合溶液），反應(yīng)液用(50mLX3)水洗，分出有機(jī)相，蒸除溶劑后，殘留物柱層析，即取蒸 除溶劑后的殘留物加入10毫升乙酸乙酯溶劑將其溶解，獲得溶解液，然后向溶解液中加入 1.0克硅膠(300~400目粗孔(zcx. II)型柱層析硅膠），混勻后，蒸除溶劑，得干燥的殘留物 與硅膠的混合物，將混合物裝柱，然后以體積比10:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液為洗脫 劑，洗脫，TLC跟蹤檢測(cè)(展開(kāi)劑為體積比10:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液），根據(jù)TLC檢測(cè) 收集含式（I)所示化合物的洗脫液，收集的洗脫液蒸除溶劑，干燥得到淡黃色固體產(chǎn)物，BP N 1，N4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I)，收率21.4%，熔點(diǎn) 184~186Γ</Η NMR和IR同實(shí)施例1。
[0032] 實(shí)施例 4: Ν1，Ν4-二苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I) 的制備
[0033] 將20mL的甲苯溶解1 · 484g(5 · Ommol)三光氣，5 °C磁力攪拌條件下，滴加含有 2.3638(10.0臟〇1)3,6-二苯基-1，4-二氛-1，2,4,5-四嘆（11)和0.20〇8(5.〇1111]1〇1)氛氧化納 的40mL甲苯溶液，滴完后反應(yīng)液升至室溫，回流反應(yīng)12小時(shí)(反應(yīng)過(guò)程采用TLC跟蹤檢測(cè)，展 開(kāi)劑為體積比5:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液），減壓蒸除有機(jī)溶劑，再加入40mL氯仿，0 °(：磁力攪拌條件下，滴加含3.725g(40.0 mmol)苯胺的40mL氯仿溶液，滴完后反應(yīng)液升至室 溫，回流反應(yīng)20小時(shí)后(反應(yīng)過(guò)程采用TLC跟蹤檢測(cè)，展開(kāi)劑為體積比5:1的石油醚和乙酸乙 酯混合溶液），反應(yīng)液用（50mLX3)水洗，分出有機(jī)相，蒸除溶劑后，殘留物柱層析，即取蒸除 溶劑后的殘留物加入10毫升氯仿溶劑將其溶解，獲得溶解液，然后向溶解液中加入1.0克硅 膠(300~400目粗孔(zcx. II)型柱層析硅膠），混勻后，蒸除溶劑，得干燥的殘留物與硅膠的 混合物，將混合物裝柱，然后以體積比5:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液為洗脫劑，洗脫， TLC跟蹤檢測(cè)（展開(kāi)劑為體積比5:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液），根據(jù)TLC檢測(cè)收集含式 (I)所示的化合物的洗脫液，收集的洗脫液蒸除溶劑，干燥得到淡黃色固體產(chǎn)物，即N1，N4-二 苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（I)，收率43·6%，熔點(diǎn)184~186 Γ,Η NMR和IR同實(shí)施例1。
[0034]實(shí)施例5:抗癌活性體外測(cè)試
[0035] (1)將實(shí)施例1制得的化合物（I)進(jìn)行了人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和人肺癌細(xì)胞株Α-549生物活性測(cè)試。結(jié)果顯示化合物（I)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和人肺癌細(xì)胞株Α-549具有 較好的抗癌活性。
[0036] 測(cè)試方法：四氮唑鹽(Methyl-Thiazol_Tetrozolium，MTT)還原法。
[0037]細(xì)胞株:人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和人肺癌細(xì)胞株A-549。上述腫瘤細(xì)胞株購(gòu)自中國(guó) 科學(xué)院上海生命科學(xué)院細(xì)胞庫(kù)。
[0038] 實(shí)驗(yàn)步驟如下：
[0039] 1)樣品的準(zhǔn)備：對(duì)于可溶樣品，每lmg用40yL DMS0溶解，取2yL用1000yL細(xì)胞培養(yǎng) 基稀釋，使?jié)舛葹镾Oyg/mL，再用細(xì)胞培養(yǎng)基連續(xù)稀釋至使用濃度(50yg/mL，5yg/mL，0.5yg/ mL) 〇
[0040] 2)細(xì)胞的培養(yǎng)
[0041 ] a)細(xì)胞培養(yǎng)基的配制:每1000mL培養(yǎng)基(RPMI-1640)中含80萬(wàn)單位青霉素，l.Og鏈 霉素，10 %滅活胎牛血清。
[0042] b)細(xì)胞的培養(yǎng):將腫瘤細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)基中，置37°C，5 %⑶:^培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，3 ~5d傳代。
[0043] c)測(cè)定樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用
[0044]將細(xì)胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋成1 X 106/mL，加到96孔細(xì) 胞培養(yǎng)板中，每孔1 〇〇μL，置37 °C，5 %⑶2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種24h后，加入樣品（樣品終濃度 分別為50yg/mL，5yg/mL，0 · 5yg/mL)，每孔100yL，3個(gè)復(fù)孔，置37°C，5%⑶2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)， 72h后在細(xì)胞培養(yǎng)孔中加入5mg/mL的MTT，每孔10yL，置37 °C孵育3h，加入DMS0，每孔150yL， 用振蕩器振蕩，使甲臢完全溶解，用酶標(biāo)儀在570nm波長(zhǎng)下比色。以同樣條件用不含樣品，含 同樣濃度DMS0的細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞作為對(duì)照，計(jì)算樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的IC 5Q。測(cè)試的 結(jié)果如表1所示：
[0045] 表1化合物(I)對(duì)細(xì)胞株MCF-7和A-549生長(zhǎng)的抑制作用
[0047] (2)參照實(shí)施例1，分別以甲胺、鄰甲基苯胺、3,4_二甲基苯胺、N-甲基苯胺替代苯 胺，合成了化合物N 1，N4-二甲基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（ΙΠ )， N1，N4-二鄰甲苯基-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺(IV)，N 1，N4-二(3， 4-二甲苯基)-3，6-二苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺（V)，N 1，N4-二甲基-N1， N4，3，6-四苯基-1，4-二氫-1，2，4，5-四嗪-1，4-二甲酰胺(VI)。
[0048] 再根據(jù)上述方法，將制得的化合物（ΙΠ )、αν)、（ν)和(VI)進(jìn)行了人乳腺癌細(xì)胞株 MCF-7和人肺癌細(xì)胞株Α-549生物活性測(cè)試，測(cè)試結(jié)果表明化合物(ΙΠ )、（IV)、（ V )和(VI)對(duì) 人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和人肺癌細(xì)胞株Α-549抑制效果均不明顯，化合物(ΙΠ )、（IV)、（ V )和 (VI)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和人肺癌細(xì)胞株Α-549的抗癌活性遠(yuǎn)不如化合物（I)。具體結(jié) 果如表2所示：
[0049] 表2化合物（ΙΠ )、（IV)、（ V)和(VI)對(duì)MCF-7和Α-549細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用
[0051 ]上述抗癌活性體外測(cè)試實(shí)驗(yàn)表明：其它4個(gè)結(jié)構(gòu)類似的化合物（ΙΠ )、（IV)、（ V )和 (VI)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和人肺癌細(xì)胞株A-549生長(zhǎng)的抑制作用均不明顯?；衔铮↖) 對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7和人肺癌細(xì)胞株A-549生長(zhǎng)的抑制作用顯著，明顯優(yōu)于化合物 (ΙΠ )、αν)、（ν)和(VI)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種式(I)所示二苯基四嗪二甲酰胺化合物，2. -種權(quán)利要求1所述二苯基四嗪二甲酰胺化合物的制備方法，其特征在于所述方法 為:將三光氣加入有機(jī)溶劑A中，-10~12°C攪拌條件下，滴加含有式（Π )所示化合物和堿性 催化劑的有機(jī)溶劑A溶液，滴完后反應(yīng)液升至室溫，回流反應(yīng)0.5~20小時(shí)后，減壓蒸除有機(jī) 溶劑，再加入有機(jī)溶劑B，_10~12°C攪拌條件下，滴加含苯胺的有機(jī)溶劑B溶液，滴完后反應(yīng) 液升至室溫，回流反應(yīng)1~60小時(shí)后，反應(yīng)液經(jīng)分離純化得到式（I)所示的二苯基四嗪二甲 酰胺化合物;所述堿性催化劑為下列之一:三乙胺、4-二甲氨基吡啶、吡啶或氫氧化鈉；〇3. 如權(quán)利要求2所述二苯基四嗪二甲酰胺化合物的制備方法，其特征在于所述式（Π ) 所示化合物與堿性催化劑、三光氣、苯胺的投料物質(zhì)的量之比為1: 〇. 1~3:0.1~3:1~8。4. 如權(quán)利要求2所述二苯基四嗪二甲酰胺化合物的制備方法，其特征在于所述有機(jī)溶 劑A為下列之一：二氯甲烷、氯仿或甲苯;所述有機(jī)溶劑B為下列之一：二氯甲烷、氯仿或甲 苯。5. 如權(quán)利要求2所述二苯基四嗪二甲酰胺化合物的制備方法，其特征在于所述反應(yīng)液 分離純化的方法為:反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液水洗，分出有機(jī)相，蒸除溶劑后，殘留物柱層析得 到式(I)所示二苯基四嗪二甲酰胺化合物。6. 如權(quán)利要求5所述二苯基四嗪二甲酰胺化合物的制備方法，其特征在于所述柱層析 方法為:取蒸除溶劑后的殘留物用有機(jī)溶劑C溶解，獲得溶解液，然后向溶解液中加入殘留 物質(zhì)量1~2倍量的柱層析硅膠，混勻后，蒸除溶劑，得干燥的殘留物與硅膠的混合物，將混 合物裝柱上樣，然后以體積比為0.5~20:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液為洗脫劑進(jìn)行洗 脫，TLC跟蹤檢測(cè)，展開(kāi)劑為體積比0.5~20:1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液，根據(jù)TLC檢測(cè) 收集含式（I)所示化合物的洗脫液，將洗脫液濃縮干燥，獲得式（I)所示二苯基四嗪二甲酰 胺化合物;所述有機(jī)溶劑C為下列之一:石油醚、二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯。7. -種權(quán)利要求1所述二苯基四嗪二甲酰胺化合物在制備治療人乳腺癌藥物中的應(yīng) 用。8. 如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物為抑制人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7活性的 藥物。9. 一種權(quán)利要求1所述二苯基四嗪二甲酰胺化合物在制備治療人肺癌藥物中的應(yīng)用。10. 如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物為抑制人肺癌細(xì)胞株A-549活性的 藥物。
【文檔編號(hào)】A61P11/00GK105949140SQ201610301080
【公開(kāi)日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年5月6日
【發(fā)明人】饒國(guó)武, 許芬, 靳浩, 章莉玲
【申請(qǐng)人】浙江工業(yè)大學(xué)