專利名稱：環(huán)肽衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種如結(jié)構(gòu)式I所示的化合物和其鹽R1-Q1-X-Q2-R2I其中Q1、Q2在任何情況下都相互獨立，在通式中它們可以不存在，也可以是基團-NH-(CH2)n-CO-，R1、R2在任何情況下都相互獨立，在通式中它們既可以不存在，也可以是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Z)，其中，Z通過側(cè)鏈與Q1或Q2鍵合，當Q1和/或Q2不存在時Z直接與X連接，及其中R1或R2中至少有一個必須存在，X是-CO-R18-CO-，并且，若R1-Q1或R2-Q2-不存在時，它是R10、R13、R16、Het-CO、或一個通過-CONH-、-COO-、-NH-C(＝S)NH-、-NH-C-(O)-NH-、-SO2NH-、或-NHCO-鍵連接的熒光染料基團，Z在各種情況下都彼此獨立，它是氨基酸殘基或二、三或四肽殘基；其中各氨基酸彼此獨立，分別選自一組由Ala、Asn、Asp、Arg、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr、Val或M組成的氨基酸組，其中，上述氨基酸也可以是氨基酸衍生物，并且這些氨基酸殘基以肽方式通過α-氨基和α-羧基相互連接起來，以及其中，M是必不可少的基團，M是NH(R8)-CH(R3)-COOH，R3是-R5-R4、-R6-R4、或-R7-R4，R4是OH、NH2、SH或COOH，R5是含有1-6個碳原子的亞烷基，R6是含有7-14個碳原子的亞烷基亞苯基，R7是含有8-15個碳原子的亞烷基苯基亞烷基，R8是H、A或含有7-12個碳原子的亞烷基苯基，A是含有1-6個碳原子的烷基，R10是含有1-18個碳原子的鏈烷酰基，該鏈烷?；槐蝗〈虮换鶊FCOOH、COOA、SR11或NR12R12’取代一次，R11是H或三苯甲基、吡啶基-2-硫基或含有1-6個碳原子的烷基硫基，R12、R12’在任何情況下都相互獨立，可以是H、含有1-8個碳原子的烷基或氨基保護基團，R13是含有7-11個碳原子的芳酰基，該芳酰基不被取代，或被一個或兩個含有1-6個碳原子的烷基、含有1-4個碳原子的烷氧基、含有1-8個碳原子的烷?；?、Hal、SR14或NR15R15’取代，R14是H或A，R15、R15’在任何條件都相互獨立，且是H或A，R16是含有7-19個碳原子的芳烷酰基，該芳烷?；梢圆槐蝗〈?，或芳基部分被一個、兩個或三個Hal、含有1-6個碳原子的烷氧基或OH取代，而芳基部分還可以是基團
E是CH2或O，D是羰基或[C(R17R17’)]m，R17、R17’在任何情況下都相互獨立，且是H或A，R18不存在，或是R19、R20、R19-R20-R19、或亞苯基，該亞苯基可以是非取代的，或被一個或兩個R5取代，取代基R5的鏈長度在各種條件下都彼此獨立，R19是含有1-8個碳原子的亞烷基，其中1個或2個亞甲基可以被S、-CH＝CH-或-C≡C-代替，R20是含有3-7個碳原子的環(huán)亞烷基，Hal是F、Cl、Br或IHet是含有1-4個N、O和/或S原子并且通過N或C原子鍵合的單核或雙核飽和或不飽和或芳香的雜環(huán)，該雜環(huán)可不被取代，或可以被一個、兩個或三個Hal、A、R3、NR4R4’、CN、NO2和/或羰氧基取代，n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，m是1或2，其中，當這些殘基是光學活性氨基酸和氨基酸衍生物時，包括D和L形式。
在德國專利4310643中公開了類似的環(huán)肽化合物。
本發(fā)明是基于要發(fā)現(xiàn)具有有利特性新化合物的目的，尤其是那些可以用于制備藥物的化合物。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，結(jié)構(gòu)式I所示的化合物及其鹽具有非常有用的藥理學特性并且可被良好地地耐受。特別是，它們可以作為整聯(lián)蛋白抑制劑，其中尤其對αv-、β3-或β5-整聯(lián)蛋白受體與其配體的相互反應(yīng)具有抑制作用，例如，血纖蛋白原與β3-整聯(lián)蛋白受體之間的結(jié)合。這些化合物對αvβ3-、αvβ5-和αIIbβ3-整聯(lián)蛋白受體具有特別的活性，對αvβ1-、αvβ6-和αvβ8-整聯(lián)蛋白也同樣具有活性。這種活性作用可以采用，例如J.W.Smith等人在J.Biol.Chem.265，12267-12271(1990)中公開的方法來證明。
PC Brooks，R.A.Clark和D.A.Cheresh在Science 264569-71(1994)中報導(dǎo)了有關(guān)依賴血管整聯(lián)蛋白與胞外基質(zhì)蛋白間相互反應(yīng)的血管生成的研究。
P.C.Brooks，A.M.Montgomery，M.Rosenfeld，R.A.Reisfeld，T.-Hu，G.Klier和D.A.Cheresh在Cell 79，1157-64(1994)中闡述了利用環(huán)肽來抑制這類相互反應(yīng)并促使生血管性血管細胞發(fā)生凋亡(編程性細胞死亡)的可能性。
結(jié)構(gòu)式I所示化合物可以作為GPIIb/IIIa拮抗物來預(yù)防因腫瘤轉(zhuǎn)移而造成的腫瘤細胞擴散，這些化合物能夠阻斷整聯(lián)蛋白受體與其配體之間的相互反應(yīng)，例如血纖蛋白原與血纖蛋白受體(糖蛋白，IIb/IIIa)的相互反應(yīng)。該作用可以用下面的論述證明本發(fā)明化合物能夠抑制金屬蛋白酶與整聯(lián)蛋白的結(jié)合，從而避免細胞利用這些蛋白酶的酶活性。例如，P.C.Brooks等人在Cell85，683-693(1996)中描述了利用環(huán)RGD肽來抑制基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)與玻連蛋白受體αvβ3的結(jié)合。
腫瘤細胞從局部性腫瘤擴散到血管系統(tǒng)中，是腫瘤細胞與血液的血小板相互作用，結(jié)果導(dǎo)致微凝聚體(微凝血物)的形成。微凝聚體產(chǎn)生的保護作用使腫瘤細胞被屏蔽起來，并且這種腫瘤細胞不被免疫系統(tǒng)細胞識別。微凝聚體沉淀于血管壁上，易使腫瘤細胞進一步穿透到組織中。由于血纖蛋白原與血液中已活化血小板上的血纖蛋白原受體結(jié)合，從而介導(dǎo)了微凝血物的形成，而GPIIa/IIIb拮抗物卻可作為有效的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制劑。
結(jié)構(gòu)式I所示化合物在人用藥物和獸藥中都可被作為藥用活性化合物來使用，尤其是為了預(yù)防和/或治療血栓形成、心肌梗塞、動脈硬化、炎癥、中風、心絞痛、腫瘤疾病、溶骨疾病例如骨質(zhì)疏松癥、病理性血管生成疾病例如炎癥、眼科疾病、糖尿病視網(wǎng)膜病、斑變性、近視、眼組織胞漿菌病、風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、潮紅青光眼、潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎、動脈粥樣硬化、牛皮癬、血管成形術(shù)后再狹窄、病毒性感染、細菌性感染、真菌性感染、急性肝功能衰竭，以及在創(chuàng)傷愈合中對愈合過程發(fā)揮輔助作用。
結(jié)構(gòu)式I所示化合物也可以作為具有抗微生物作用的物質(zhì)在那些采用了生物材料、植入物、導(dǎo)管、或心臟起博器的手術(shù)中使用。在這里，化合物發(fā)揮著防腐抗菌作用?；衔锟刮⑸锘钚缘墓πЭ梢酝ㄟ^P.Valentin-Weigund等人在Infection and Immunity，2851-2855(1988)中描述的方法來證明。
在上下文中引用的氨基酸殘基縮寫代表了下列氨基酸殘基Abu 4-氨基丁酸Aha 6-氨基己酸Ala 丙氨酸Asn 天冬酰胺Arp 天冬氨酸Arg 精氨酸Cys 半胱氨酸Dab 2，4-二氨基丁酸Dap 2，3-二氨基丙酸Gln 谷氨酰胺Glp 焦谷氨酸Glu 谷氨酸Gly 甘氨酸His 組氨酸Homo-phe 高苯丙氨酸Ile 異亮氨酸Leu 亮氨酸Lys 賴氨酸Met 甲硫氨酸Nle 正亮氨酸Orn 鳥氨酸Phe 苯丙氨酸Phg 苯基甘氨酸4-Ha1-Phe 4-鹵代-苯丙氨酸Pro 脯氨酸Ser 絲氨酸Thr 蘇氨酸Trp 色氨酸Tyr 酪氨酸Val 纈氨酸另外，下列縮寫代表的意思是Ac乙?；鵅OC 叔丁氧羰基CBZ或Z 芐氧基羰基DCCI二環(huán)己基碳化二亞胺DMF 二甲基甲酰胺EDCIN-乙基-N、N’-(二甲氨基丙基)碳化二亞胺Et 乙基FCA 熒光素羧酸FITC熒光素異硫氰酸酯Fmoc9-芴基甲氧基羰基FTH 熒光素硫脲HOBt1-羥基苯并三唑Me 甲基MBHA4-甲基二苯甲基胺Mtr 4-甲氧基-2、3、6-三甲基苯磺酰基HONSu N-羥基琥珀酰亞胺OBut叔丁酯Oct 辛?；鵒Me 甲酯OEt 乙酯POA 苯氧乙?；鵖al 水楊?；鵗FA 三氟乙酸Trt 三苯甲基如果上述氨基酸存在數(shù)種不同的對映體，那么，在上下文中包括了所有異構(gòu)體及它們的混合物(例如DL型)，例如作為通式I所示化合物的組成部分。另外，氨基酸可以帶有適當?shù)囊阎Ｗo基團，這種基團可以作為，例如結(jié)構(gòu)式I所示化合物的組成部分。
本發(fā)明所述化合物還包括了所謂的前藥衍生物，即那些如結(jié)構(gòu)式I所示并且被例如烷基或芳香基、糖類或寡核苷酸基團修飾的化合物，這些化合物在機體內(nèi)可以迅速的分解成本發(fā)明所述的有效化合物。同時還包括那些本發(fā)明所述化合物的可被生物降解的聚合衍生物，例如在Int.J.Pharm.115，61-67(1995)中所述。
本發(fā)明還進一步涉及權(quán)利要求1中的結(jié)構(gòu)式I所示化合物及其鹽的制備方法，其特征在于(a)結(jié)構(gòu)式II所示的化合物H-Q1-R1II其中Q1和R1定義如權(quán)利要求1所述，與結(jié)構(gòu)式III所示化合物進行?；磻?yīng)，X-LIII其中，X定義如權(quán)利要求1所述，和L是Cl、Br、I或一個自由羥基或被官能團修飾的反應(yīng)活性羥基，或(b)結(jié)構(gòu)式IV所示化合物H-Q2-R2IV其中Q2、R2與權(quán)利要求1中的定義相同，與結(jié)構(gòu)式V所示化合物進行酰化反應(yīng)，R1-Q1-X-L V其中R1、Q1、X、L都已給出定義，或(c)結(jié)構(gòu)式II所示化合物H-Q1-R1II其中Q1和R1的定義如權(quán)利要求1所述，與結(jié)構(gòu)式VI所示化合物進行加成反應(yīng)，X-U VI其中X的定義如權(quán)利要求1所述，并且L是-N＝C＝O、-N＝C＝S或馬來酰亞胺基或d)其中，經(jīng)溶劑分解試劑或氫解試劑處理，結(jié)構(gòu)式I所示化合物及其鹽從它們的官能衍生物中釋放出來，和/或結(jié)構(gòu)式I所示堿性或酸性化合物經(jīng)酸或堿處理后轉(zhuǎn)化成它們的鹽。
在上文及下文中，基團Q1、Q2、R1、R2、X和L的含義與結(jié)構(gòu)式I中的定義相同，除非另有其他含義，否則不再指出。
在上述的結(jié)構(gòu)式中，優(yōu)選的烷基是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基，及，還有戊基、1-、2-、或3-甲基丁基、1，1-、1，2-、或2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-、2-、3-、或4-甲基戊基、1，1-、1，2-、1，3-、2，2-、2，3-、或3，3-二甲基丁基、1-或2-乙基丁基、1-乙基-1-甲基丙基、1-乙基-2-甲基丙基、或1，1，2或1，2，2-三甲基丙基。
優(yōu)選的亞烷基是亞甲基、亞乙基、亞丙基、亞丁基、亞戊基、或亞己基。優(yōu)選的亞烷基苯基是芐基或苯乙基。優(yōu)選的亞烷基苯基亞烷基是4-亞甲基芐基或4-亞乙基芐基。
優(yōu)選Q1和Q2在任何情況下相互獨立，為6-氨基己酸或不存在，其中優(yōu)選的是，例如Q1是6-氨基己酸且Q2不存在。
優(yōu)選的M是Dap、Ser、Cys、Asp、D-Asp、Dab、高絲氨酸、高半胱氨酸、Glu、D-Glu、Thr、Orn、Lys、D-Lys、4-氨甲基-Phe或4-氨甲基-D-Phe。
在Z定義中提及的氨基酸和氨基酸殘基可以是它們的衍生物，其中優(yōu)選那些與N-甲基、N-乙基、N-丙基、N-芐基或Cα-甲基的衍生物。還優(yōu)選Asp和Glu的衍生物，尤其優(yōu)選其側(cè)鏈羧基與甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基、新戊基或芐基生成的酯；還優(yōu)選Arg的衍生物，Arg的-NH-C(＝NH)-NH2基團被乙?；?、苯甲?；?、甲氧基羰基或乙氧基羰基取代。
還優(yōu)選Z是M基團，作為優(yōu)選例給出的還有D-Phe-M、D-Trp-M、D-Tyr-M、D-Phe-Lys、D-Phe-D-Lys、D-Trp-Lys、D-Trp-D-Lys、D-Tyr-Lys、D-Tyr-D-Lys、D-Phe-Orn、D-Phe-Dab、D-Phe-Dap、D-Phe-D-Orn、D-Phe-D-Dab、D-Phe-D-Dap、D-Phe-4-氨甲基-Phe、D-Phe-4-氨甲基-D-Phe、D-Trp-4-氨甲基-Phe、D-Trp-4-氨甲基-D-Phe、D-Tyr-4-氨甲基-Phe、D-Tyr-4-氨甲基-D-Phe、D-Phe-Asp、D-Phe-D-Asp、D-Trp-Asp、D-Trp-D-Asp、D-Tyr-Asp、D-Tyr-D-Asp、D-Phe-Cys、D-Phe-D-Cys、D-Trp-Cys、D-Trp-D-Cys、D-Tyr-Cys、D-Tyr-D-Cys、Phe-D-Lys、Trp-D-Lys、Tyr-D-Lys、Phe-Orn、Phe-Dab、Phe-Dap、Trp-Orn、Trp-Dab、Trp-Dap、Tyr-Orn、Tyr-Dab、Tyr-Dap、Phe-4-氨甲基-D-Phe、Trp-4-氨甲基-D-Phe、Tyr-4-氨甲基-D-Phe、Phe-D-Asp、Trp-D-Asp、Tyr-D-Asp、Phe-D-Cys、Trp-D-Cys、Tyr-D-Cys、D-Phe-Lys-Gly、D-Phe-M-Gly、D-Trp-Lys-Gly、D-Trp-M-Gly、D-Tyr-Lys-Gly、D-Tyr-M-Gly、D-Phe-Val-Lys、D-Phe-Gly-Lys、D-Phe-Ala-Lys、D-Phe-Ile-Lys、D-Phe-Leu-Lys、D-Trp-Val-Lys、D-Trp-Gly-Lys、D-Trp-Ala-Lys、D-Trp-Ile-Lys、D-Trp-Leu-Lys、D-Tyr-Val-Lys、D-Tyr-Gly-Lys、D-Tyr-Ala-Lys、D-Tyr-Ile-Lys、D-Tyr-Leu-Lys、及M-Pro-Ala-Ser-Ser。
優(yōu)選的-R6-R4基團是2-、3-或4-羥基芐基、2-、3-或4-氨基芐基、2-、3-或4-巰基芐基、2-、3-或4-羧基芐基，還優(yōu)選2-、3-或4-羥基苯乙基、2-、3-或4-氨基苯乙基、2-、3-或4-巰基苯乙基或2-、3-或4-羧基苯乙基。
烷?；袃?yōu)選甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基、己酰基、庚?；?、辛酰基、壬酰基、癸?；?、十一烷?；?、十二烷基?；⑹榛；?、十四烷基?；?、十五烷基酰基、十六烷基酰基、十七烷基?；蚴送榛；?。
優(yōu)選的芳酰基是苯甲?；蜉刘；?。
優(yōu)選的R13是未取代的；優(yōu)選如定義所述的單取代苯甲?；o出的優(yōu)選例是鄰-、間-或?qū)?甲基苯甲?；⑧?、間-或?qū)?乙基苯甲酰基、鄰-、間-或?qū)?丙基苯甲?；⑧?、間-或?qū)?異丙基苯甲酰基、鄰-、間-或?qū)?叔丁基苯甲?；?、鄰-、間-或?qū)?氨基苯甲?；?、鄰-、間-或?qū)?(N-甲氨基)-苯甲酰基、鄰-、間-或?qū)?甲氧基苯甲?；?、鄰-、間-或?qū)?乙氧基苯甲酰基、鄰-、間-或?qū)?(N，N，二甲基氨基)-苯甲?；⑧?、間-或?qū)?(N-乙氨基)-苯甲?；?、鄰-、間-或?qū)?(N，N-二乙氨基)-苯甲?；⑧?、間-或?qū)?氟代苯甲?；?、鄰-、間-或?qū)?溴代苯甲?；⑧?、間-或?qū)?氯代苯甲酰基、鄰-、間-或?qū)?甲?；郊柞；?、鄰-、間-或?qū)?乙?；郊柞；?、鄰-、間-或?qū)?丙酰基苯甲?；⑧?、間-或?qū)?丁?；郊柞；?、鄰-、間-或?qū)?戊?；郊柞；⑧?、間-或?qū)?甲硫基苯甲酰基；還優(yōu)選2，3-、2，4-、2，5-、2，6-、3，4-或3，5-二氟代苯甲?；?，3-、2，4-、2，5-、2，6-、3，4-或3，5-二氯代苯甲?；?，3-、2，4-、2，5-、2，6-、3，4-或3，5-二溴代苯甲酰基、2-氯代-3-甲基-、2-氯代-4-甲基-、2-氯代-5-甲基-、2-氯代-6-甲基-、2-甲基-3-氯代-、2-甲基-4-氯代-、2-甲基-5-氯代-、2-甲基-6-氯代-、3-氯代-4-甲基、3-氯代-5-甲基、或3-甲基-4-氯代苯甲酰基、2-溴代-3-甲基-、2-溴代-4-甲基-、2-溴代-5-甲基-、2-溴代-6-甲基-、2-甲基-3-溴代、2-甲基-4-溴代、2-甲基-5-溴代、2-甲基-6-溴代、3-溴代-4-甲基、3-溴代-5-甲基或3-甲基-4-溴代苯甲?；?、或2，5-或3，4-二甲氧基苯甲?；?br> 優(yōu)選的R16可是未取代的，還優(yōu)選如定義所述的單取代苯乙?；o出的苯乙?；鶅?yōu)選實例有鄰-、間-或?qū)?甲氧基苯乙?；⑧?、間-或?qū)?羥基苯乙酰基、鄰-、間-或?qū)?乙氧基苯乙?；⑧?、間-或?qū)?氟代苯乙?；?、鄰-、間-或?qū)?溴代苯乙酰基、鄰-、間-或?qū)?氯代苯乙?；€優(yōu)選3-苯丙?；?-苯丁?；?-苯戊?；?-苯己?；?-苯庚?；?-苯辛?；?、9-苯壬?；?、10-苯癸?；?、11-苯十一烷?；?2-苯十二烷?；⒒?3-苯十三烷?；?，另外還有2，3-亞甲基-二氧苯基、3，4-亞甲基-二氧苯基、2，3-二氫-苯并呋喃基或2，3-二氫-2-氧代苯并呋喃基。
優(yōu)選的環(huán)亞烷基是環(huán)亞丙基、1，2-或1，3-環(huán)亞丁基、1，2-或1，3-環(huán)亞戊基、1，2-、1，3-或1，4-環(huán)亞己基和1，2-、1，3-或1，4-環(huán)亞庚基。
D優(yōu)選是CH2，還優(yōu)選羰基。
Het優(yōu)選是2-或3-呋喃基、2-或3-噻吩基、1-、2-、或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-異噁唑基、2-、4-或5-噻唑基、3-、4-或5-異噻唑基、2-、3-或4-吡啶基、2-、4-、5-或6-嘧啶基，還優(yōu)選1，2，3-三唑-1-、-4-或-5-基、1，2，4三唑-1-、-3-或-5-基、1-或5-四唑基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，3，4-噻二唑-2-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、2-、3-、4-、5-或6-2H-噻喃基、2-、3-或4-4-H-噻喃基、3-或4-噠嗪基、吡嗪基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并呋喃基、2-、3-、4-、5-、6-或7-苯并噻吩基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-苯并吡唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并噁唑基、3-、4-、5-、6-或7-苯并異噁唑、2-、4-、5-、6-或7-苯并噻唑基、2-、4-、5-、6-或7-苯并異噻唑基、4-、5-、6-或7-苯并-2，1，3-噁二唑基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-異喹啉基、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基或2-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉唑基。雜環(huán)基團還可以被部分或全部氫化。所以，Het還可以是，例如，2，3-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基、2，5-二氫-2-、-3-、-4-或-5-呋喃基、四氫-2-或-3-呋喃基-、1，3-二氧戊環(huán)-4-基-、四氫-2-或-3-噻吩基、2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、2，5-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡咯基、1-、2-、或3-吡咯烷基、四氫-1-、-2-或-4-咪唑基、2，3-二氫-1-、-2-、-3-、-4-或-5-吡唑基、四氫-1-、-3-或-4-吡唑基、1，4-二氫-1-、-2-、-3-或-4-吡啶基、1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-或-6-吡啶基、1-、2-、3-或4-哌啶基、2-、3-或4-嗎啉基、四氫-2-、-3-或-4-吡喃基、1，4-二噁烷基、1，3-二噁烷-2-、-4-或-5-基、六氫-1-、-3-或-4-噠嗪基、六氫-1-、-2-、-4-或-5-嘧啶基、1-、2-或3-哌嗪基、1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-喹啉基、1，2，3，4-四氫-1-、-2-、-3-、-4-、-5-、-6-、-7-或-8-異喹啉基。
優(yōu)選的氨基保護基團是乙?；?、丙?；⒍□；?、苯乙酰基、苯甲?；?、甲苯甲?；OA、甲氧基羰基、乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、BOC、2-碘代乙氧基羰基、CBZ(“芐氧羰基”)、4-甲氧基芐氧基羰基、FMOC、Mtr或芐基。
優(yōu)選的熒光染料基團是7-乙酸基香豆素-3-基、熒光素-5-(和/或6-)基、2’，7’-二氯熒光素-5-(和6-)基、二氫四甲基薔薇明(rosamin)-4-基、四甲基若丹明-5-(和/或6-)基、4，4-二氟-5，7-二甲基-4-硼雜-3a，4a-二氮雜-s-引達省(indacen)-3-乙基或4，4-二氟-5，7二苯基-4-硼雜-3a，4a-二氮雜-s-引達省-3-乙基。
適于作為本發(fā)明結(jié)構(gòu)式I所示化合物的制備用試劑的官能團化熒光染料基團在，例如，R.P.Haughland，Molecular probes，Inc.的“Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals，5thEdition，1992-1994”中作出了描述。
m優(yōu)選為1，還可以優(yōu)選2。
Hal優(yōu)選F、Cl、Br，還有I。
結(jié)構(gòu)式I所示化合物可能帶有一個或更多的手性中心，因此可能有不同的立體異構(gòu)體。結(jié)構(gòu)式I包括所有這些異構(gòu)體。
因此，本發(fā)明特別涉及了那些至少含有一個上述定義優(yōu)選基團的結(jié)構(gòu)式I化合物。化合物中的一些優(yōu)選基團可以用下列局部結(jié)構(gòu)式Ia-Ih來表示，這些局部結(jié)構(gòu)式是相對于結(jié)構(gòu)式I而言，并且其中的基團如不特別指明就具有與結(jié)構(gòu)式I中相同的定義，其中a)Q1、Q2和R2不存在，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Z)，和X是烷?；籦)Q1、Q2和R2不存在，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-M)，和X是烷?；?；c)Q1、Q2和R2不存在，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)，和X 是烷酰基；d)Q1和Q2不存在，R1和R2是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)，和X*是-CO-(CH2)n-CO-；e)Q2和R2不存在，Q1是-NH-(CH2)5-CO-，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Z)，和X 是熒光染料基團；f)Q2和R2不存在，Q1是-NH-(CH2)5-CO-，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-M)，和X 是熒光素基；g)Q1和Q2不存在，R1和R2是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-M)，和X 是-CO-(CH2)8-CO-；h)Q1、Q2和R2不存在，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Z)，和X 是-CO-(CH2)16-CO-。
更優(yōu)選結(jié)構(gòu)式VII所示的化合物環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Q1-X)VII其中Q1的含義與權(quán)利要求1中的相同，并且，其中Q1與賴氨酸的側(cè)鏈相鍵合；或者，若Q1不存在，X與賴氨酸側(cè)鏈相鍵合，其中的X優(yōu)選是含有1-18個碳原子的烷?；撏轷；槐蝗〈蚩梢员灰粋€COOH、COOA、SR14或NR15R15’、FCA或FTH基團取代；或是含有7-11個碳原子的芳?；?，該芳酰基不被取代或被一個或兩個含有1-6個碳原子的烷基、含有1-4個碳原子烷氧基、含有1-8個碳原子的烷酰基、Hal、SR14或NR15R15’基團取代，其中R14、R15、R15’的定義與權(quán)利要求1所述的相同。
另外，結(jié)構(gòu)式I所示化合物以及制備它們所用的起始反應(yīng)物都可以采用那些本身已知的方法來制備，這些在文獻中都有具體描述(例如標準化手冊，如Houben-Weyl，Methoden der organischenChmie，[有機化學方法]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart；)，且反應(yīng)是在適當?shù)囊阎臈l件下進行。在這里，實際中還可以對已知方法進行多種常規(guī)的改變，但在此不詳細介紹。
若需要，起始反應(yīng)物還可以現(xiàn)時制備，這樣就不須將它們從反應(yīng)混合物中分離出來，而是立刻直接用于下一步的反應(yīng)以制得結(jié)構(gòu)式I所示化合物。
可優(yōu)選由結(jié)構(gòu)式II所示化合物與結(jié)構(gòu)式III所示化合物進行反應(yīng)來制得結(jié)構(gòu)式I所示化合物。
通常，結(jié)構(gòu)式II和III所示化合物是那些已知的物質(zhì)。若它們是未知物，它們也可以通過已知的方法來制備。
在結(jié)構(gòu)式III所示化合物中，基團L優(yōu)選是一種預(yù)活化羧酸，其優(yōu)選是酰鹵、對稱或混合的酸酐或活化酯。此類在常規(guī)酰化反應(yīng)中可活化羧基的基團在文獻中有報導(dǎo)(例如標準化手冊，如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chmie，[有機化學方法]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart；)。
活化酯適合在反應(yīng)中現(xiàn)場制備，例如加入HOBt或N-羥基琥珀酰亞胺。
L基團優(yōu)選是H、F、Cl、Br或-ON-琥珀酰亞胺。
通常，反應(yīng)是在含有酸結(jié)合劑的惰性溶劑中進行，優(yōu)選的酸結(jié)合劑是有機堿，例如三乙胺、二甲基苯胺、吡啶或喹啉，或在過量的結(jié)構(gòu)式III所示的羧基組分存在下進行。
反應(yīng)中還適于加入堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽，或是堿金屬或堿土金屬與其他弱酸生成的另一種鹽，優(yōu)選的金屬有鉀、鈉、鈣、或銫。
在任何情況下，根據(jù)反應(yīng)條件的不同，反應(yīng)時間可以是幾分鐘至14天，而反應(yīng)溫度約是-30-140℃，通常在-10-90℃之間，優(yōu)選在0-70℃之間。
惰性溶劑的合適例子有碳氫化合物，如己烷、石油醚、苯、甲苯、或二甲苯；氯代烴，如三氯乙烯、1，2-二氯乙烷，四氯化碳、氯仿或二氯甲烷；醇，如甲醇、乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇或叔丁醇；醚，如乙醚、異丙醚、四氫呋喃(THF)或二噁烷；乙二醇醚，例如乙二醇單甲醚或乙二醇單乙醚(甲基乙二醇或乙基乙二醇)、乙二醇二甲醚(diglyme)；酮，例如丙酮或丁酮；酰胺，例如乙酰胺、二甲基乙酰胺或二甲基甲酰胺(DMF)；腈，例如乙腈；亞砜，例如二甲基亞砜(DMSO)；二硫化碳；羧酸，例如甲酸或乙酸；硝基化合物，例如硝基甲烷或硝基苯；酯，如乙酸乙酯；水或上述溶劑的混合物。
另外，將結(jié)構(gòu)式IV和V所示化合物進行反應(yīng)可以制得結(jié)構(gòu)式I所示化合物。通常，結(jié)構(gòu)式IV和V所示的起始反應(yīng)物是已知的。若它們不是已知化合物，則可以通過已知的方法來制備。
結(jié)構(gòu)式V所示的化合物中，基團L優(yōu)選是一種預(yù)活化羧酸，其中優(yōu)選酰鹵、對稱或混合的酸酐或活化酯。此類在采用常規(guī)酰化反應(yīng)中可活化羧基的基團在文獻中有報導(dǎo)(例如標準化手冊，如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chmie，[有機化學方法]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart；)。
優(yōu)選L是F、Cl、Br或-ON-琥珀酰亞胺。
結(jié)構(gòu)式IV所示化合物與結(jié)構(gòu)式V所示化合物的反應(yīng)條件，即反應(yīng)時間、溫度和溶劑，都與結(jié)構(gòu)式II和III所示化合物的反應(yīng)條件相同。
另外，可以將結(jié)構(gòu)式II和VI所示化合物進行反應(yīng)制得結(jié)構(gòu)式I所示化合物。通常，結(jié)構(gòu)式II和VI所示的起始反應(yīng)物是已知的。若它們不是已知化合物，則可以通過已知的方法來制備。
結(jié)構(gòu)式II所示化合物與結(jié)構(gòu)式III所示化合物之間的反應(yīng)是異硫氰酸酯的常規(guī)加成反應(yīng)。這種加成反應(yīng)在文獻中有報導(dǎo)(例如標準化手冊，如Houben-Weyl，Methoden der organischen Chmie，[有機化學方法]，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart；)。
結(jié)構(gòu)式R1和/或R2所示的環(huán)化合物可以通過將鏈狀化合物環(huán)化而制得，例如，DE4310643或Houben-Weyl，I.c.，第15/II卷，第1-806頁(1974)中描述的內(nèi)容。
結(jié)構(gòu)式I所示化合物還可以通過溶劑解、尤其是水解或氫解方法從其官能衍生物中釋放出來。
易于被溶劑解或氫解的起始反應(yīng)物是那些在一個或多個自由氨基和/或羥基上都帶有氨基和/或羥基保護基團的化合物，優(yōu)選那些在與N相連的H原子被氨基保護基團取代的起始反應(yīng)物，例如，那些符合結(jié)構(gòu)式I但NHR’基團替代了NH2(其中R’是一個氨基保護基，例如BOC或CBZ)的化合物。
另外，起始化合物還優(yōu)選那些羥基上的H原子被羥基保護基團取代的化合物，例如那些符合結(jié)構(gòu)式I所示但其羥基苯基基團被R”O(jiān)-苯基基團替代(其中R”是羥基-保護基團)的化合物。
起始反應(yīng)物分子中還可以含有幾種相同或不同的氨基和/或羥基保護基團。如果含有的保護基團彼此各不相同，它們可以在不同的反應(yīng)中被選擇性地脫除。
術(shù)語“氨基保護基團”是熟知用語，它是指那些用于保護(阻斷)氨基使其不發(fā)生某些特定化學反應(yīng)，并且當分子其他位置的所需反應(yīng)進行完畢后很容易從氨基上脫除下來的保護基團。未取代或取代的?；⒎蓟?、芳烷氧基甲基或芳烷基都是常用的氨基保護基團。由于在所需化學反應(yīng)(一系列反應(yīng))后這些氨基保護基團要被脫除掉，那么對它們的性質(zhì)和大小沒有嚴格的要求；但是，優(yōu)選含有1-20個碳原子的保護基團，更優(yōu)選含有1-8個碳原子的基團。本發(fā)明制備過程中，術(shù)語“?；笨梢栽诳尚械淖顝V范圍內(nèi)進行選擇。該?；四切﹣碓从谥咀?、芳基脂肪族、芳香族或雜環(huán)的羧酸或磺酸，尤其優(yōu)選烷氧羰基、芳氧羰基，并且更優(yōu)選芳烷氧羰基。這類?；缡峭轷；?，如乙?；?、丙?；投□；?；芳烷?；?，例如苯基乙?；?；芳?；?，如苯甲?；蚣妆郊柞；?；芳氧基烷?；鏟OA；烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、BOC或2-碘代乙氧基羰基；芳烷氧基羰基，例如CBZ(“芐氧羰基”)，4-甲氧基芐氧基羰基或FOMC；芳基磺酰基，如Mtr。在這些氨基保護基團中優(yōu)選BOC和Mtr，還優(yōu)選CBZ、Fmoc、芐基和乙?；?。
術(shù)語“羥基保護基團”也是公知用語，它是指那些適用于保護(阻斷)羥基使其不發(fā)生某些特定的化學反應(yīng)，并且當分子其他位置上所需反應(yīng)進行完畢后很容易從羥基上脫除的保護基團。上述未取代的或取代的芳香基、芳烷基或?；约巴榛际沁@類常用的羥基保護基團。由于在特定化學反應(yīng)或系列反應(yīng)后這些羥基保護基團要再被脫除掉，那么對它們的性質(zhì)和大小沒有嚴格的要求。優(yōu)選含有含有1-20個碳原子的保護基團，更優(yōu)選含有1-8個碳原子的基團。羥基保護基團的具體例子是，即芐基、對-硝基苯甲?；?、對-甲基苯甲?；?、叔丁基和乙?；?，其中優(yōu)選芐基和叔丁基。天冬氨酸和谷氨酸中的COOH優(yōu)選以叔丁基酯的形式來保護(例如Asp(OBut))。
根據(jù)所用保護基團的不同，例如，可利用強酸來將結(jié)構(gòu)式I所示化合物從其官能衍生物中釋放出來，常用的有TFA和高氯酸，但還有其他無機強酸，例如鹽酸或硫酸；有機強酸，例如三氯乙酸；或磺酸，如苯磺酸或?qū)?甲基苯磺酸。如果可能的話，還可同時存在附加的惰性溶劑，但這并不總是必須的。優(yōu)選的適宜溶劑是有機溶劑，例如羧酸，如乙酸；醚，如四氫呋喃或二噁烷；酰胺，如DMF；鹵代烴，如二氯甲烷；還有醇，例如甲醇、乙醇或異丙醇；及水。上述溶劑的混合物也適合作為溶劑。當反應(yīng)中不加入其他任何溶劑時，所用TFA最好要有過量；而高氯酸是以比例為9∶1的乙酸70％高氯酸混合物的形式來使用。脫除保護基團的反應(yīng)溫度通常約是在＝至約50℃之間，優(yōu)選的脫除溫度范圍是15-30℃(室溫)。
BOC、OBut和Mtr基團容易被脫除掉，例如，在15-30℃條件下，利用TFA的二氯甲烷溶液或約3-5n HCl的二噁烷溶液進行脫除；而采用約5-50％二甲胺、二乙胺或哌啶的DMF溶液，在15-30℃條件下FMOC易被脫除。
組氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺和半胱氨酸中采用三苯甲基作為氨基酸保護基團。根據(jù)終產(chǎn)物的不同，利用TFA/10％苯硫酚時將會把各氨基酸上的所有三苯甲基脫除掉；而當采用TFA/苯甲醚或TFA/苯硫基甲烷時，僅將His、Asn和Gln上的三苯甲基脫除，但Cys上的仍保留。
能被氫解脫除的保護基團(例如CBZ或芐基)可以采用，例如氫在催化劑(例如貴金屬催化劑，如鈀催化劑，通常這類催化劑附著在載體上，例如碳)存在下來進行處理。此時，適用溶劑可以是上述溶劑，尤其是，例如醇，如甲醇或乙醇；或酰胺，如DMF。通常，氫解反應(yīng)溫度是在0-100℃之間，同時壓力為1-200巴，優(yōu)選的反應(yīng)條件是20-30℃和1-10巴。在20-30℃時，采用在5-10％Pd/C的甲醇液中的氫或在Pd/C的甲醇/DMF液中的甲酸銨(代替氫)來脫除CBZ基團可以得到滿意的效果。
將結(jié)構(gòu)式I所示的堿用酸處理可以轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的酸加成鹽，例如，將堿與等量的酸在惰性溶劑，如甲醇中反應(yīng)，然后蒸發(fā)濃縮。此類反應(yīng)中，優(yōu)選那些合適的并且能得到生理無毒性鹽的酸。因此，可以采用無機酸，例如磺酸、硝酸、氫鹵酸如鹽酸或氫溴酸、磷酸如正磷酸、和氨基磺酸；另外還包括有機酸，尤其是脂肪族、脂環(huán)族、芳烷族、芳香族或雜環(huán)的一元或多元羧酸或磺酸或硫酸，例如，甲酸、乙酸、丙酸、新戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、葡糖酸、抗壞血酸、煙酸、異煙酸、甲磺酸、乙磺酸、乙二磺酸2-羥基乙磺酸、苯磺酸、p-甲苯磺酸、萘單磺酸、萘二磺酸、和十二烷基硫酸。含有生理毒性酸的鹽，如苦味酸鹽，可以用來分離和/或純化結(jié)構(gòu)式I所示的化合物。
另一方面，結(jié)構(gòu)式I所示的酸可以通過與堿反應(yīng)轉(zhuǎn)化成生理無毒性的金屬鹽或銨鹽。此時，特別適用的鹽是鈉、鉀、鎂、鈣、和銨鹽，還有取代銨鹽，例如，二甲基、二乙基、或二異丙基銨鹽，單乙醇、二乙醇、或二異丙醇銨鹽，環(huán)己基和二環(huán)己基銨鹽，和二芐基乙二銨鹽；以及，還有精氨酸或賴氨酸的鹽。
本發(fā)明還進一步涉及了結(jié)構(gòu)式I所示化合物和/或它們的生理無毒性鹽在制備藥用制劑中的應(yīng)用，尤其是通過非化學途徑制備藥物。在這方面，它們可以與至少一種固體、液體和/或半固體的載體物質(zhì)或輔料共同制成適當?shù)闹苿?，其中，還可適當?shù)亟Y(jié)合一種或多種其他活性化合物。
本發(fā)明還涉及了含有至少一種結(jié)構(gòu)式I所示化合物和/或它們的生理無毒性鹽的藥用制劑。
這些制劑可以作為人用藥物和獸藥。合適的載體物質(zhì)是那些適于腸胃內(nèi)(例如口服)、腸胃外、或局部施用或吸入噴劑形式給藥的有機或無機物質(zhì)，并且這些載體物質(zhì)不與本發(fā)明新化合物發(fā)生反應(yīng)；例如水、植物油、苯甲醇、亞烷基二醇、聚乙二醇、甘油三乙酯、明膠、碳水化合物如乳糖或淀粉、硬脂酸鎂、滑石或凡士林。為了口服給藥，可特別制成片劑、丸劑、包衣片劑、膠囊、粉劑、顆粒劑、糖漿劑、(果)汁劑或滴劑；經(jīng)直腸給藥時可制成栓劑；采用腸胃外給藥的溶液時，可以是油性溶液或含水溶液，及混懸液、乳劑或植入物；局部施用時采用軟膏劑、霜劑或粉劑。該新化合物還可以被冷凍干燥，所得凍干物用于，例如，制成注射制劑。所述的制劑可以是無菌的和/或含有輔助物質(zhì)，如潤滑劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑、乳化劑、滲透壓調(diào)節(jié)用鹽、緩沖劑、染料、矯味劑和/或一些附加活性化合物，例如一種或多種維生素。吸入噴劑給藥時，噴劑中的活性物質(zhì)既可以溶解也可以懸浮在推進氣體或推進氣體混合物中(例如，CO2或氟氯烴)。此時，活性化合物通常是微粒化形式，可能的話還可以同時存在一種或多種附加的可生理用溶劑，例如乙醇。吸入溶液可以通過常規(guī)吸入器來給藥。
結(jié)構(gòu)式I所示化合物及其可生理用鹽可以作為整聯(lián)蛋白抑制物來控制疾病，尤其是病理性血管生成性疾病、血栓形成、心臟梗塞、冠心病、動脈硬化、腫瘤、骨質(zhì)疏松癥、炎癥和感染。
在這里，本發(fā)明所述物質(zhì)的通常給予方式與一些已知的市售肽產(chǎn)品相似，尤其與US-A-4472305描述的化合物相類似，優(yōu)選的給藥劑量范圍約是0.05-500mg，更優(yōu)選每單劑劑量是0.5-100mg。優(yōu)選的日劑量約為0.01-2mg/kg體重。而且，不同患者所用的具體劑量要依據(jù)很多可變因素來確定，例如，所用特定化合物的活性、患者的年齡、體重、健康狀態(tài)、性別、飲食、給藥的時間和途徑、排泄速度、聯(lián)合用藥及被治療疾病的嚴重程度。優(yōu)選經(jīng)腸胃外給藥。
另外，結(jié)構(gòu)式I所示的新化合物可以采用生物學和分子生物學方法來分析。
對于結(jié)構(gòu)式I所示的新化合物，當基團X是一個通過-CONH-、-COO-、-NH-C(＝S)-NH-、-NH-C(＝O)-NH-、-SO2NH-或-NHCO-鍵連接的熒光染料基團時，該新化合物可以作為FACS(熒光激活細胞分選儀)分析法和熒光顯微法中的診斷標記物。
在熒光顯微法中標記化合物的應(yīng)用已有報導(dǎo)，例如，Y.-L.Wang&D.L.Talor的“Fluorescene Microscopy of Living Cells inCulture，Part A+B，Acadimic Press，Inc.1989”。
結(jié)構(gòu)式I所示新化合物還可以在親和色譜中用來洗脫結(jié)合蛋白。尤其是作為整聯(lián)蛋白配體來洗脫整聯(lián)蛋白。
上文和下文中所有的溫度都是℃。在下列實施例中，“常規(guī)處理步驟”代表了若需要首先加入水，再根據(jù)需要和終產(chǎn)物組成調(diào)節(jié)pH值至2-10，將混合物用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，分離各相，有機相用硫酸鈉干燥并蒸除溶劑，殘留物用硅膠色譜和/或重結(jié)晶法純化。測定在硅膠上的Rf值。流動相乙酸乙酯/甲醇＝9∶1。
RT＝在下列體系中的HPLC保留時間[A]色譜柱Nucleosil 7C 18 250×4mm洗脫劑A0.1％TFA的水溶液洗脫劑B0.1％TFA的乙腈溶液流速1ml/min梯度20-50％B/30min[B]洗脫時間是50分鐘，采用0-80％的2-丙醇水溶液進行梯度洗脫，洗脫液中還含有0.3％TFA，流速是1ml/min，色譜柱是LichrosorbRP Select B(7μm)250×4mm柱。[C]色譜柱Lichrospher(5μm)100RP8 125×4mm洗脫劑ApH為7.0的0.1M磷酸鈉溶液洗脫劑B0.005M的磷酸鈉溶液，pH為7.0/60體積％的2-丙醇流速0.7ml/min梯度1-99％B/50min。質(zhì)譜(MS)EI(電子撞擊電離)M+FAB(快速原子轟擊)(M+H)+實施例1將1.0g的O-乙?；畻钏酦-琥珀酰亞胺酯[由乙酰水楊酸在乙酸乙酯、DMF和1.2當量二異丙基碳化二亞胺溶液中與HONSu反應(yīng)得到的，F(xiàn)AB 278]和0.5g三乙胺加入到3.05g環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)[其制備是將H-Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Lys(BOC)-OH環(huán)化，得到環(huán)-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Lys(BOC))，然后脫除保護基]的100mlDMF溶液中。混合物在室溫下攪拌5小時，經(jīng)過“常規(guī)處理步驟”及同時脫去乙酰基后，得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Sal))×TFA；RT[B]22.0；FAB 724。
采用類似上述的方法，將環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)分別與下列物質(zhì)反應(yīng)與苯基丙酸N-琥珀酰亞胺酯(PhEtCO-ONSu)反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-PhEtCo))×TFA；RT[C]28.2；FAB 736；與3，3，3-三-(4-氯代苯基)-丙酸N-珀酰亞胺酯(TCPP-ONSu)反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-TCPP)×TFA；RT[B]33.19；FAB 992；與三苯甲巰基丙酸N-琥珀酰亞胺酯(TrtSEtCO-ONSu)反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe)Lys(Nε-TrtSEtCO)×TFA；RT[B]33.4；FAB934；與芐氧羰基氯反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-CBZ))與辛酸酐反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Oct))×TFA；RT[B]27.58；FAB 730；與乙酸酐反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Ac))×TFA；RT[B]17.02；FAB 646；與FCA-N-琥珀酰亞胺酯反應(yīng)得到環(huán)-((Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-FCA))；RT[B]24.18；FAB 962；與FITC反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-FTH))×TFA；RT[B]27.3；FAB 994；與NH4HCO3形成內(nèi)鹽；RT[B]22.26。
下列物質(zhì)是采用類似的方法將環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-N(Me)-Lys)與FITC反應(yīng)得到的環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-N(Me)-Lys(Nε-FTH))；RG22.64；FAB 1007；與芐氧羰基氯(CBZ-Cl)反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-N(Me)-Lys(Nε-CBZ))RT23.35；FAB 752。實施例2首先將3.05g環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)與40ml 5％的NaHCO3水溶液和40ml THF配制成溶液，將6gBOC-Aha-N-琥珀酰亞胺酯加入到該溶液中。將混合物攪拌4小時，并且經(jīng)過常規(guī)處理步驟，得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(BOC-Aha))；RT[C]27.7；FAB817。在HCl/二噁烷中脫除掉BOC基團，經(jīng)常規(guī)處理步驟后，得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Aha))×2TFA；RT[C]14.76；FAB 717。采用與實施例1類似的方法，再將上述產(chǎn)物與FCA-N-琥珀酰亞胺酯進行后續(xù)反應(yīng)，得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-FCA-Aha))×TFA；RT[B]23.8；FAB 1075。
采用相似的制備方法，將環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Aha))分別進行下列反應(yīng)與FITC反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-FTH-Aha))與乙酸酐反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Ac-Aha))×TFA；RT[B]17.1；FAB 759；實施例3與實施例2相類似，將環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys-Gly)[由H-Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Lys(BOC)-Gly-OH經(jīng)環(huán)化得到環(huán)-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Lys(BOC)-Gly)及脫除保護基團制得]和BOC-Aha-N-琥珀酰亞胺酯反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-BOC-Aha)-Gly)；在HCl/二噁烷中將BOC基團脫除掉，再經(jīng)過常規(guī)處理步驟得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Aha)-Gly)×2TFA。
采用與實施例1相類似的方法，下列化合物是將環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Aha)-Gly)×2TFA與苯基丙酸N琥珀酰亞胺酯進行后續(xù)反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-PhEtCO-Aha)-Gly)采用類似的方法，下列化合物通過將環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Aha)-Gly)與辛酸酐反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-Oct-Aha)-Gly)與FCA-N-琥珀酰亞胺酯反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-FCA-Aha)-Gly)與FITC反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-FTH-Aha)-Gly)
與實施例2相類似，將環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val-Lys-Gly)[由H-Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Val-Lys(BOC)-OH經(jīng)環(huán)化得到環(huán)-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Val-Lys(BOC))并脫除保護基團而制得]與BOC-Aha-N-琥珀酰亞胺酯反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val-Lys(Nε-BOC-Aha))×TFA。
在HCl/二噁烷中將BOC基團脫除掉，再經(jīng)過常規(guī)處理步驟得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val-Lys(Nε-Aha))×2TFA。
采用與實施例1相類似的方法，再將環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val-Lys(Nε-Aha))×2TFA與苯基丙酸N-琥珀酰亞胺酯進行后續(xù)反應(yīng)得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val-Lys(Nε-PhEtCo-Aha))。實施例4采用與實施例2相類似的方法，將BOC-氨基己酸N-琥珀酰亞胺酯與下列物質(zhì)反應(yīng)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Lys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Lys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Cys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dab)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Cys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Cys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Lys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Lys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Lys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Cys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-Dab)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Cys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Cys)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Orn)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Orn)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Orn)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Orn)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Orn)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Orn)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dab)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dab)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dap)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dap)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dap)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Dap)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Dap)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Dap)反應(yīng)得到下列肽環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Lys(Nε-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys(Nε-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Lys(Nε-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Cys(S-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dab(Nγ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Cys(S-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Cys(S-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Lys(Nε-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Lys(Nε-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Lys(Nε-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Cys(S-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-Dab(Nγ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Cys(S-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Cys(S-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Orn(Nδ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Orn(Nδ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Orn(Nδ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Orn(Nδ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Orn(Nδ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Orn(Nδ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dab(Nγ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dab(Nγ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dap(Nβ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dap(Nβ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dap(Nβ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Dap(Nβ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Dap(Nβ-BOC-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Dap(Nβ-BOC-Aha))在在HCl/二噁烷中將BOC基團脫除掉后，得到下列(“A”)化合物環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Lys(Nε-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys(Nε-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Lys(Nε-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Cys(S-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dab(Nγ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Cys(S-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Cys(S-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Lys(Nε-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Lys(Nε-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Lys(Nε-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Cys(S-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-Dab(Nγ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Cys(S-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Cys(S-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Orn(Nδ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Orn(Nδ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Orn(Nδ-Aha)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Orn(Nδ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Orn(Nδ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Orn(Nδ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dab(Nγ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dab(Nγ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-P-Trp-Dap(Nβ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dap(Nβ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dap(Nβ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Dap(Nβ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Dap(Nβ-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Dap(Nβ-Aha))然后與辛酸酐反應(yīng)得到下列物質(zhì)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Lys(Nε-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys(Nε-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Lys(Nε-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Cys(S-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dab(Nγ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Cys(S-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tpr-D-Cys(S-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Lys(Nε-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Lys(Nε-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Lys(Nε-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Cys(S-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-Dab(Nγ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Cys(S-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Cys(S-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Orn(Nδ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Orn(Nδ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Orn(Nδ-Oct-Aha)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Orn(Nδ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Orn(Nδ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Orn(Nδ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dab(Nγ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dab(Nγ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dap(Nβ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dap(Nβ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dap(Nβ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Dap(Nβ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Dap(Nβ-Oct-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Dap(Nβ-Oct-Aha))。
采用類似的方法，將化合物“A”與FCA-N-琥珀酰亞胺酯反應(yīng)得到下列物質(zhì)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Lys(Nε-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys(Nε-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Lys(Nε-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Cys(S-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dab(Nγ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Cys(S-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Cys(S-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Lys(Nε-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Lys(Nε-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Lys(Nε-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Cys(S-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-Dab(Nγ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Cys(S-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Cys(S-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Orn(Nδ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Orn(Nδ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Orn(Nδ-FCA-Aha)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Orn(Nδ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Orn(Nδ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Orn(Nδ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dab(Nγ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dab(Nγ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dap(Nβ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dap(Nβ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dap(Nβ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Dap(Nβ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Dap(Nβ-FCA-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Dap(Nβ-FCA-Aha))。
采用類似的方法，將化合物“A”與O-乙?；畻钏?N-琥珀酰亞胺酯反應(yīng)得到下列物質(zhì)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Lys(Nε-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys(Nε-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Lys(Nε-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Cys(S-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dab(Nγ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Cys(S-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Cys(S-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Lys(Nε-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Lys(Nε-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Lys(Nε-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Cys(S-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Phe-Dab(Nγ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Trp-D-Cys(S-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Tyr-D-Cys(S-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Orn(Nδ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Orn(Nδ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Orn(Nδ-Ac-Sal-Aha)環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Orn(Nδ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Orn(Nδ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Orn(Nδ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dab(Nγ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dab(Nγ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-Dap(Nβ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Dap(Nβ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Dap(Nβ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Trp-D-Dap(Nβ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-D-Dap(Nβ-Ac-Sal-Aha))環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-D-Dap(Nβ-Ac-Sal-Aha))還能夠得到脫乙?；衔?，這些化合物是在進行常規(guī)色譜分離時同時分離到的。實施例5將環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-TrtSEtCO))用TFA/苯硫酚脫去三苯甲基，然后經(jīng)常規(guī)處理步驟，得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-HSEtCO))×TFA；RT[B]18.54；FAB 692。實施例6將2.0g的琥珀酸N-琥珀酰亞胺酯單甲酯和0.5g三乙胺加入到3.05g環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)的100ml二氯甲烷溶液中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時，經(jīng)過“常規(guī)處理步驟”得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-H3COCO(CH2)2CO))。用氫氧化鉀水解所得酯產(chǎn)物，得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-HOCO(CH2)2CO))。隨后，與HONSu在乙酸乙酯中反應(yīng)，得到產(chǎn)物環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-SuN-O-CO(CH2)2CO))。采用與實施例1類似的方法，將上述產(chǎn)物與環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Gly)反應(yīng)得到下面的化合物環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-CO(CH2)2CO-R2))，其中R2是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys(Nε-)-Gly)。實施例70.5ml乙酸與0.5g的鈀/活性炭加入到1.17g環(huán)-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Lys(CBZ))的50ml二甲基乙酰胺溶液中，混合物在氫氣環(huán)境中攪拌2小時。將催化劑分離并經(jīng)常規(guī)處理步驟后得到環(huán)-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Lys)(“B”)；RT[A，30-80％乙腈]l8.6。
0.075g琥珀酸酐加入到0.3g“B”物質(zhì)的15ml DMF溶液中，混合物在室溫下攪拌12小時。經(jīng)常規(guī)處理步驟，得到0.26g的環(huán)-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Lys(Nε-CO(CH2)2-COOH))(“C”)；RT[A，30-80％乙腈]19.2；FAB 972。
將0.1gEDCl×HCl、0.075gHOBt和0.3g“B”的15ml DMF溶液加入到0.23g“B”的20ml DMF溶液中，將混合物攪拌12小時。經(jīng)常規(guī)處理步驟，得到環(huán)-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Lys)2(COCH2CH2CO)(“D”)；RT[A，30-80％乙腈]26.6；FAB 1826。
由85.5％TFA、2％水、2.5％乙二硫醇、5％苯酚、5％苯硫基甲烷和0.25g“D”組成的混合溶液在室溫下攪拌24小時。將常規(guī)處理步驟后，得到環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)2(COCH2CH2CO)；RT[A，10-50％乙腈]20.2；FAB 1289。
下列化合物是通過類似方法得到環(huán)-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-Lys(CBZ))與二硫代二丙酸酐(DTDB-OH)反應(yīng)，得到雙-Nε-環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)-DtDP；RT 20.73；FAB 1382。
下列實施例涉及新化合物的藥物制劑。制劑例A瓶裝注射劑將100g結(jié)構(gòu)式I所示活性化合物和5g磷酸氫二鈉的3升雙蒸水溶液用2n鹽酸調(diào)至pH值為6.5，過濾滅菌并灌裝到注射瓶中；將溶液冷凍干燥，隨后將瓶在無菌條件下封口。每個注射瓶中含有5mg活性化合物。制劑例B栓劑將20g的結(jié)構(gòu)式I所示活性化合物與100g大豆卵磷脂和1400g可可酯的混合物熔融，傾入到模具內(nèi)并冷卻。各栓劑含有20mg活性化合物。制劑例C溶液將1g結(jié)構(gòu)式I所示活性化合物、9.38gNaH2PO4·2H2O、28.48gNa2HPO4·12H2O和0.1g苯扎氯銨與940ml雙蒸水制成溶液。將該溶液的pH值調(diào)至6.8，體積加至1升并且進行照射滅菌。該溶液可作為滴眼液。制劑例D軟膏劑500mg結(jié)構(gòu)式I所示活性化合物與99.5g凡士林在無菌條件下混合。制劑例E片劑1kg結(jié)構(gòu)式I所示活性化合物、4kg乳糖、1.2kg馬鈴薯淀粉、0.2kg滑石和0.1kg硬脂酸鎂采用常規(guī)方法壓制成片劑，這種片劑中每片含有10mg活性化合物。制劑例F包衣片劑采用與制劑例E類似的方法壓制出片劑，然后用常規(guī)方法將片劑包衣，包衣由蔗糖、馬鈴薯淀粉、滑石、黃耆膠和染料組成。制劑例G膠囊將2kg結(jié)構(gòu)式I所示活性化合物采用常規(guī)方法填充到明膠硬膠囊中，各膠囊含有20mg的活性化合物。制劑例H安瓿將1kg結(jié)構(gòu)式I所示活性化合物溶解在60升雙蒸水中，該溶液經(jīng)過濾滅菌，灌裝到安瓿中；將溶液冷凍干燥，然后將安瓿在無菌條件下封口。每個安瓿中含有10mg的活性化合物。制劑例I吸入噴劑14g結(jié)構(gòu)式I所示活性化合物溶解中10升的等滲NaCl溶液中，將溶液灌裝到可從市場上買到的帶有泵壓裝置的噴罐中。這種溶液可以噴入到口腔或鼻腔中。每撳噴量(約0.1ml)中相應(yīng)地含有約0.14mg劑量的活性化合物。
權(quán)利要求
1.式I所示的化合物和其鹽R1-Q1-X-Q2-R2其中Q1、Q2在任何情況下相互獨立，在通式中它們可以不存在，也可以是基團-NH-(CH2)n-CO-，R1、R2在任何情況下都相互獨立，在通式中它們既可以不存在，也可以是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-Z)，其中，Z通過側(cè)鏈與Q1或Q2鍵合，當Q1和/或Q2不存在時Z直接與X連接，及其中R1或R2中至少有一個必須存在，X是-CO-R18-CO-，并且，若R1-Q1或R2-Q2-不存在時，它是R10、R13、R16、Het-CO、或一個通過-CONH-、-COO-、-NH-C(＝S)NH-、-NH-C-(O)-NH、-SO2NH-、或-NHCO-鍵連接的熒光染料基團，Z在各種情況下都彼此獨立，它是氨基酸殘基或二、三或四肽殘基；其中各氨基酸彼此獨立，分別選自一組由Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr、Val或M組成的氨基酸組，其中，上述氨基酸也可以是氨基酸衍生物，或是以肽方式通過α-氨基和α-羧基的相互連接起來的多個氨酸酸殘基，以及其中，M是必不可少的基團，M是NH(R8)-CH(R3)-COOH，R3是-R5-R4、-R6-R4、或-R7-R4，R4是OH、NH2、SH或COOH，R5是含有1-6個碳原子的亞烷基，R6是含有7-14個碳原子的亞烷基亞苯基，R7是含有8-15個碳原子的亞烷基苯基亞烷基，R8是H、A或含有7-12個碳原子的亞烷基苯基，A是含有1-6個碳原子的烷基，R10是含有1-18個碳原子的鏈烷酰基，該鏈烷酰基不被取代或被基團COOH、COOA、SR11或NR12R12’取代一次，R11是H或三苯甲基、吡啶基-2-硫基或含有1-6個碳原子的烷基硫基，R12、R12’在任何情況下都相互獨立，可以是H、含有1-8個碳原子的烷基或氨基保護基團，R13是含有7-11個碳原子的芳?；摲减；槐蝗〈?，或被一個或兩個含有1-6個碳原子的烷基、含有1-4個碳原子的烷氧基、含有1-8個碳原子的烷?；al、SR14或NR15R15’取代，R14是H或A，R15、R15’在任何條件都相互獨立，且是基團H或A，R16是含有7-19個碳原子的芳烷酰基，該芳烷?；梢圆槐蝗〈蚍蓟糠直灰粋€、兩個或三個Hal、含有1-6個碳原子的烷氧基或OH取代，而芳基部分還可以是基團
E是CH2或O，D是羰基或[C(R17R17’)]m，R17、R17’在任何情況下相互獨立，且是基團H或A，R18不存在，或是R19、R20、R19-R20-R19、或亞苯基，該亞苯基可以是非取代的，或被一個或兩個R5取代，取代基R5的鏈長度在各種條件下都彼此獨立，R19是含有1-8個碳原子的亞烷基，其中1個或2個亞甲基可以被S、-CH＝CH-或-C≡C-替代，R20是含有3-7個碳原子的環(huán)亞烷基，Hal是F、Cl、Br或IHet是含有1-4個N、O和/或S原子并且通過N或C原子鍵合的單核或多核飽和或不飽和或芳香的雜環(huán)，該雜環(huán)可不被取代，或可以被一個、兩個或三個Hal、A、R3、NR4R4’、CN、NO2和/或羰氧基取代，n是1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，m是1或2，其中，如果這些基團是光學活性氨基酸和氨基酸衍生物，則包括D和L形式。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的式I化合物R1-Q1-X-Q2-R2a)其中，Q1、Q2和R2不存在，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)，和X 是乙酰基；b)其中，Q1、Q2和R2不存在，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)，和X 是-CO-(CH2)2-SH；c)其中，Q1、Q2和R2不存在，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)，和X 是水楊?；籨)其中，Q1和Q2不存在，R1和R2是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)，和X 是-CO-(CH2)n-CO-；e)其中，Q2和R2不存在，Q1是-NH-(CH2)5-CO-，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)，和X是乙?；?；f)其中，Q2和R2不存在，Q1是-NH-(CH2)5-CO-，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)，和X 是熒光素?；?；g)其中，Q2和R2不存在，Q1是-NH-(CH2)5-CO-，R1是環(huán)-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys)，和X 是叔丁氧基羰基；以及上述化合物的生理無毒性鹽。
3.制備權(quán)利要求1中的結(jié)構(gòu)式I所示化合物及其鹽的方法，其特征在于(a)結(jié)構(gòu)式II所示的化合物H-Q1-R1II其中Q1和R1定義如權(quán)利要求1所述，與結(jié)構(gòu)式III所示化合物進行?；磻?yīng)，X-L III其中，X定義如權(quán)利要求1所述，和L是Cl、Br、I或一個自由羥基或被官能團修飾的反應(yīng)活性羥基，或(b)結(jié)構(gòu)式IV所示化合物H-Q2-R2IV其中Q2、R2與權(quán)利要求1中的定義相同，該化合物與結(jié)構(gòu)式V所示化合物進行?；磻?yīng)，R1-Q1-X-L V其中R1、Q1、X、L具有已給出的定義，或(c)結(jié)構(gòu)式II所示化合物H-Q1-R1II其中Q1和R1的定義如權(quán)利要求1所述，與結(jié)構(gòu)式VI所示化合物進行加成反應(yīng)，X-U VI其中X的定義如權(quán)利要求1所述，并且L是-N＝C＝O、-N＝C＝S或馬來酰亞胺基或d)經(jīng)溶劑解試劑或氫解試劑處理，結(jié)構(gòu)式I所示化合物及其鹽從它們的官能衍生物中釋放出來，和/或結(jié)構(gòu)式I所示堿性或酸性化合物經(jīng)酸或堿處理后轉(zhuǎn)化成它們的鹽。
4.一種制備藥物制劑的方法，其特征在于將權(quán)利要求1的結(jié)構(gòu)式I所示化合物和/或其可生理用鹽與至少一種固體、液體、或半固體載體物質(zhì)或輔料結(jié)合，制成適當?shù)膭┬汀?br> 5.藥物制劑，其特征在于至少含有一種權(quán)利要求1的結(jié)構(gòu)式I所示的化合物和/或其可以生理用鹽。
6.權(quán)利要求1的結(jié)構(gòu)式I所示化合物和它們的可生理用鹽作為整聯(lián)蛋白抑制劑，這些抑制劑用于控制病理性的血管生成性疾病、血栓形成、心臟梗塞、冠心病、動脈硬化、腫瘤、骨質(zhì)疏松癥、炎癥和感染。
7.權(quán)利要求1的結(jié)構(gòu)式I所示化合物和/或它們的可生理用鹽的應(yīng)用，其特征在于它們用于制備藥物。
8.權(quán)利要求1的結(jié)構(gòu)式I所示化合物和/或它們的可生理用鹽的應(yīng)用，其特征在于它們用來控制疾病。
9.權(quán)利要求1的結(jié)構(gòu)式I所示化合物的應(yīng)用，其中的基團X是一個通過-CONH-、-COO-、-NH-C(＝S)-NH-、-NH-C-(＝O)-NH-、-SO2NH-或-NHCO-鍵連接的熒光染料基團，其特征在于這種化合物在FACS分析法和熒光顯微法中作為診斷標記物。
10.權(quán)利要求1的結(jié)構(gòu)式I所示化合物的應(yīng)用，其特征在于它們用于親和色譜中。
全文摘要
一種結(jié)構(gòu)式Ⅰ所示的化合物及其鹽:R
文檔編號A61P35/00GK1202907SQ96198432
公開日1998年12月23日 申請日期1996年10月14日 優(yōu)先權(quán)日1995年10月18日
發(fā)明者A·喬恩茨克, S·L·古德里, B·戴芬巴克, A·蘇特, H·凱斯勒 申請人:默克專利股份有限公司