專利名稱：吡咯烷衍生物的制備方法
本申請是CN92111069.3的分案申請。原申請的申請日為1992年8月20日;原申請的發(fā)明名稱為“吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物。
本發(fā)明有關(guān)新的具有廣泛抗菌譜的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物，含有該碳代青霉烯衍生物的抗菌劑，用作生產(chǎn)碳代青霉烯衍生物的中間體的新的吡咯烷衍生物，以及生產(chǎn)吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物和吡咯烷衍生物的方法。
幾種化合物為已知的碳代青霉烯，一種β-內(nèi)酰胺抗生素。例如，如下所示的imipenem，meropenem，其甲磺酰化物(甲磺酰胺)，和碳代青霉烯的脲衍生物是已知的。
所有這些化合物都具有廣泛的抗菌譜，并且對于革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌均有效。具有更廣泛的抗菌譜和更強的抗菌活性的碳代青霉烯衍生物一直是人們所期望的。
本發(fā)明的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物由式Ⅰ表示 其中R1是氫或低級烷基;R2，R3，R4獨立地是氫，可被取代的低級烷基或氨基保護基，或者R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個飽和或不飽和環(huán)基，或者R2和R4，或R3和R4與硫酰胺基中的兩個氮原子和一個硫原子一起形成一個飽和或不飽和環(huán)狀基團;每個環(huán)狀基團可進一步包括至少一個選自由氧，硫和氮組成的一類原子，而且每個環(huán)狀基都可被取代;X1是氫或羥基保護基;X2是氫，羧基保護基，銨基，堿金屬或堿土金屬;而Y2是氫或氨基保護基。
在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明的吡咯烷衍生物由式Ⅱ表示 其中R2，R3和R4獨立地是氫，可被取代的低級烷基，或氨基保護基，或者R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成飽和或不飽和的環(huán)狀基，或R2和R4，或R3和R4與硫酰胺基中的兩個氮原子和一個硫原子形成飽和或不飽和環(huán)狀基;每個環(huán)狀基可進一步包括至少一個選自由氧，硫和氮原子組成的一類原子，并且每個環(huán)狀基都可被取代;Y1是氫或巰基保護基;Y2是氫或氨基保護基。
另一方面，本發(fā)明提供生產(chǎn)由式Ⅱ表示的吡咯烷衍生物的方法 其中R2，R3和R4獨立地為氫，可被取代的低級烷基，或氨基保護基，或者R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成飽和或不飽和的環(huán)狀基團，或者R2和R4，或R3和R4與硫酰胺基中的兩個氮原子和一個硫原子一起形成飽和或不飽和環(huán)狀基團;每個環(huán)狀基團可進一步包括至少一個選自由氧，硫和氮原子組成的一類原子，并且每個環(huán)狀基都可被取代;Y1是氫或巰基保護基;而Y2是氫或氨基保護基;并且該方法包含的步驟為將4-羥基吡咯烷-2-羧酸衍生物4-位的羥基轉(zhuǎn)變成巰基;2-位的羧基轉(zhuǎn)化成羥甲基;將羥甲基中的羥基轉(zhuǎn)化成氨基或氨磺酰基;將氨基轉(zhuǎn)化成氨磺?；?。
另外，本發(fā)明提供包括如下步驟的生產(chǎn)吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的方法使碳代青霉烯衍生物與式Ⅱ的吡咯烷衍生物反應(yīng)得到式Ⅰ的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物;該碳代青霉烯衍生物由Ⅲ表示
其中R1是氫或低級烷基;X1是氫或羥基保護基;X2是氫，羧基保護基，銨基，堿金屬或堿土金屬;而X3是離去基團(例如，羥基的活性酯基，烷基亞磺?；⒎蓟鶃喕酋；榛酋；?，或芳基磺?；?。
這樣，這里所描述的本發(fā)明使如下優(yōu)點成為可能(1)提供具有強的抗菌活性和廣泛抗菌譜的新的碳代青霉烯衍生物，生產(chǎn)該碳代青霉烯衍生物的方法;(2)提供新的用作生產(chǎn)碳代青霉烯衍生物的中間體的吡咯烷衍生物，及生產(chǎn)該吡咯烷衍生物的方法;和(3)提供含有該碳代青霉烯衍生物的抗菌劑。
在閱讀和理解了下面的詳細敘述之后，本發(fā)明的這些和另外的優(yōu)點將變得明顯。
下面是這里所用的縮寫Ac乙酰基Alz烯丙氧羰基Boc叔丁氧羰基Et乙基Ft鄰苯二甲?；鵐e甲基Ms甲磺酰基NPrc被保護的氨基
Ph苯基PMB對甲氧基芐基Pmz對甲氧基芐氧羰基PNB對硝基芐基Pnz對硝基芐氧羰基Tr三苯甲基Ts對甲苯磺?；@里各基團優(yōu)選的范圍如下“低級烷基”的碳原子數(shù)為1至6。這類烷基的例子包括甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，叔丁基，戊基和己基。低級烷基的碳原子數(shù)優(yōu)選地為1至4，最優(yōu)選的低級烷基是甲基或乙基?！叭〈牡图壨榛钡娜〈睦影u基，烷氧基，氨基，酰氨基，低級烷基氨基，氨基甲?；图壨榛被柞；?，氨基甲酰氧基，低級烷基氨基甲酰氧基和氰基?！胺纪榛钡奶荚訑?shù)為7至15。“氨基保護基”和“羥基保護基”的例子包括低級烷氧羰基，低級鏈烯氧羰基，鹵代烷氧羰基，芳烷氧羰基，三烷基甲硅烷基和重氮基。低級烷氧羰基的例子包括叔丁氧羰基;低級鏈烯氧羰基的例子包括烯丙氧羰基;鹵代烷氧羰基的例子包括2-碘代乙基氧基羰基和2，2，2-三氯乙基氧基羰基;芳烷氧羰基的例子包括芐氧羰基，對甲氧基芐氧羰基，鄰硝基芐氧羰基，對硝基芐氧羰基和二苯基甲氧基羰基;三烷基甲硅烷基的例子包括三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基。
在如下表示的基團的定義中
由R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成的飽和或不飽和環(huán)狀基可以是飽和或不飽和的3至8員殘基，如果需要可進一步含有一個或多個氮，硫和/或氧原子，而包括一個雜原子的5或6員單環(huán)殘基是優(yōu)選。其例子包括吡咯烷-1-基，吡咯-1-基，咪唑烷-1-基，咪唑-1-基，吡唑烷-1-基，吡唑-1-基，哌啶子基，二氫或四氫吡啶-1-基，哌嗪子基，在4-位有一取代基的哌嗪-1-基，嗎啉代和硫代嗎啉代。這些基團可被一元或多元取代，優(yōu)選地為一或二元，取代基包括氨基，被保護的氨基，氨基甲?；?，低級烷基，羥基，被保護的羥基，低級烷氧基，氧代，低級烷基磺?；?，羥基低級烷基，氨基甲?；图壨榛图壨檠豸驶颓杌?。而且，當環(huán)狀基為咪唑烷-1-基，吡唑烷-1-基或哌嗪-1-基時，其亞氨基部分可用本專業(yè)已知的亞氨基保護基保護。
在基團Ⅱa的定義中，由R2和R4，或R3和R4形成的飽和或不飽和的環(huán)狀基可以是具有2至3個氮原子和一個硫原子，如果需要，具有另一個例如氧原子的雜原子的5至7員飽和或不飽和的殘基，而包括一個雜原子的5至6員單環(huán)殘基是優(yōu)選的。如果需要，這類殘基可包括一個取代基，例如低級烷基，鹵素，低級烷氧基，酰氧基，羥基，氨基，低級烷基氨基，?；被脱醮?或不飽和鍵。其例子包括1，1-二氧代噻二嗪基，1，1-二氧代二氫噻二嗪基，1，1，3-三氧代二氫噻二嗪基，1，1-二氧代噻二唑烷基(1，1-dioxothiadiazolizinyl)，1，1-二氧代噻二唑啉基，和1，1，3-三氧代噻二唑啉基。
“羧基保護基”選自本專業(yè)熟悉的那些，其功能是當反應(yīng)在分子的其它部位進行時，將羧基封閉。這類基團一般含有少于19個碳原子，并可逆地連接在羧基上而不影響分子的其它部分。典型的例子包括如下基團任意取代的C1-C8烷基，例如，甲基，甲氧基甲基，乙基，乙氧基甲基，碘甲基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，乙氧基乙基，甲硫基乙基，甲磺?；一纫一?，叔丁基，及類似物;任意取代的C3-C8鏈烯基，例如，丙烯基，烯丙基，異丙烯基，己烯基，苯基丙烯基，二甲基己烯基，和類似物;任意取代的C7-C19芳烷基，例如，芐基，甲基芐基，二甲基芐基，甲氧基芐基，乙氧基芐基，硝基芐基，氨基芐基，二苯基甲基，苯乙基，三苯甲基，二叔丁基羥基芐基，2-苯并[C]呋喃酮基，苯甲酰甲基，和類似物;任意取代的C6-C12芳基，例如，苯基，甲苯甲酰基二異丙基苯基，二甲苯基，三氯苯基，五氯苯基，2，3-二氫化茚基，等等;任意取代的C1-C12氨基，它是例如，與丙酮肟，苯乙酮肟，乙縮醛肟，N-羥基琥珀酰亞胺，N-羥基鄰苯二甲酰亞胺的酯，或其類似物;任意取代的C3-C12烴代甲錫烷基，例如，三甲基甲錫烷基，等等。另外的羧基保護基是藥學(xué)活性的酯形成基。這類基團的例子包括如下基團1-(氧取代的)-C2至C15烷基，例如，直鏈的，支鏈的，環(huán)狀的，或部分環(huán)化的鏈烷酰氧烷基，如乙酰氧甲基，乙酰氧乙基，丙酰氧甲基，新戊酰氧甲基，新戊酰氧乙基，環(huán)己基乙酰氧乙基，環(huán)己基羰基氧基環(huán)己基甲基，及其類似物;C3-C15烷氧羰氧基烷基如乙氧羰氧基乙基，等;C2-C8烷氧烷基，如甲氧基甲基，甲氧基乙基，等等;C4-C82-噁環(huán)烷基，如四氫吡喃基，四氫呋喃基等等;取代的C8-C12芳烷基，例如，苯甲酰甲基，2-苯并[C]呋喃酮基等等;C6-C12芳基，例如，苯基，二甲苯基，2，3-二氫化茚基，及類似物;C2-C12鏈烯基，例如，烯丙基，異戊二烯基(isoprenyl)，2-氧代-1，3-二氧雜環(huán)戊烯-4-基甲基，和類似物。在上面，在反應(yīng)時用于封閉羧基的保護基通常在反應(yīng)的最后一步除去，因而其結(jié)構(gòu)并非要點。這樣，作為一個熟悉本專業(yè)的人員可以容易地懂得，羧基保護基可以選自各種等價基團，包括酰胺，與碳酸或羧酸形成的酸酐，及類似物只要目標羧基被適當?shù)乇Ｗo。
低級烷基的例子包括叔丁基;低級鏈烯基的例子包括烯丙基，異戊烯基和2-丁烯基;鹵代低級烷基的例子包括2-碘乙基和2，2，2-三氯乙基;低級烷氧甲基的例子包括甲氧基甲基，乙氧基甲基和異丁氧基甲基;低級脂族酰氧基甲基的例子包括乙酰氧基甲基，丙酰氧基甲基，丁酰氧基甲基和新戊酰氧基甲基;1-低級烷氧羰基氧基乙基的例子包括1-甲氧羰基氧基乙基和1-乙氧羰氧基乙基;芳烷基的例子包括芐基，對甲氧基芐基，鄰硝基芐基，對硝基芐基和二苯基甲基?！皦A金屬”的例子包括鋰，鈉和鉀，而鈉和鉀是優(yōu)選的?！皦A土金屬”的例子包括鎂和鈣。
作為“巰基保護基”，普通的包括例如，酰基和芳基取代的低級烷基如芐基，苯乙基，三苯甲基和二苯甲基。作為“羥基的活性酯基”，普通的包括例如殘基如取代或未取代的芳基磺酰氧基，低級烷基磺酰氧基，鹵代低級烷基磺酰氧基，二烷基膦酰氧基，二芳基磷酰氧基和鹵素。芳基磺酰氧基的例子包括苯磺酰氧基，對甲苯磺酰氧基，對硝基苯磺酰氧基和對溴苯磺酰氧基;低級烷基磺酰氧基的例子包括甲磺酰氧基和乙磺酰氧基;鹵代低級烷基磺酰氧基的例子包括三氟甲磺酰氧基;二烷基磷酰氧基的例子包括二乙基磷酰氧基;二芳基磷酰氧基的例子包括二苯基磷酰氧基;鹵素的例子包括氯、溴和碘。
“烷基亞磺?；钡睦影谆鶃喕酋；?，而“芳基亞磺?；钡睦影ū交鶃喕酋；?。
本發(fā)明的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物由下面式Ⅰ表示 其中R1為氫或低級烷基;R2，R3和R4獨立地為氫，可被取代的低級烷基或氨基保護基，優(yōu)選地R4為氫，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成一個飽和或不飽和的環(huán)狀基，或R2和R4，或R3和R4與硫酰胺基中的兩個氮原子和一個硫原子一起形成一個飽和或不飽和的環(huán)狀基，每一個環(huán)狀基可進一步包括至少一個選自由氧，硫和氮組成的一類原子，每個環(huán)狀基可被取代;X1為氫或羥基保護基;X2為氫，羧基保護基，銨基，堿金屬或堿土金屬;而Y2為氫或氨基保護基。
當上面的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物Ⅰ具有游離的-OH，-COOH，氨基，亞氨基，或取代的氨基時，吡咯烷硫基碳代青霉烯也包括其藥學(xué)上可接受的鹽。對于用于合成吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的中間體化合物如式Ⅱ表示的吡咯烷衍生物也是一樣。藥學(xué)上可接受的鹽的例子包括與堿的鹽，與酸的鹽，與堿性或酸性氨基酸的鹽，和分子間或分子內(nèi)的四級鹽。與堿的鹽的例子包括堿金屬鹽如鈉鹽和鉀鹽;堿土金屬鹽如鈣鹽和鎂鹽;銨鹽;有機胺鹽如三乙胺鹽，吡啶鹽，甲基吡啶鹽，乙醇胺鹽，三乙醇胺鹽，二環(huán)己基胺鹽，N，N′-二芐基亞乙基二胺鹽和二芐基胺鹽。與酸的鹽的例子包括無機酸加成鹽如鹽酸鹽，氫溴酸鹽，硫酸鹽和磷酸鹽;有機酸加成鹽如甲酸鹽，乙酸鹽，三氟乙酸鹽，馬來酸鹽，酒石酸鹽，甲磺酸鹽，苯磺酸鹽和甲苯磺酸鹽。與氨基酸的鹽的例子包括與精氨酸，天冬氨酸和谷氨酸的鹽。
本發(fā)明的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物(Ⅰ)可用如下步驟生產(chǎn)通過用，例如，4-羥基吡咯烷-2-羧酸或其衍生物作原料，得到下式表示的吡咯烷衍生物Ⅱ 其中R2，R3和R4獨立地為氫，可被取代的低級烷基，或被保護的氨基，而R4優(yōu)選地為氫或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成飽和或不飽和的環(huán)狀基，或R2和R4，或R3和R4與硫酰胺中的兩個氮原子和一個硫原子一起形成飽和或不飽和的環(huán)狀基;每個環(huán)狀基可進一步含有一個選自由氧，硫和氮組成的一類原子;且每個環(huán)狀基可被取代;Y1為氫或巰基保護基;而Y2為氫或氨基保護基;并且使所得的吡咯烷衍生物Ⅱ與下面式Ⅲ表示的碳代青霉烯衍生物反應(yīng) 其中R1為氫或低級烷基;X1為氫或羥基保護基;X2為氫，羧基保護基，銨基，堿金屬或堿土金屬;而X3為離去基(例如，羥基的活性酯，烷基亞磺?；?，芳基亞磺酰基，烷基磺酰基，或芳基磺?；?。
本發(fā)明也包括由下面式Ⅱ代表的吡咯烷衍生物 其中R2，R3和R4獨立地為氫，可被取代的低級烷基取代基，或氨基保護基，而R4優(yōu)選地為氫，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成飽和的或不飽和的環(huán)狀基，或R2和R4，或R3和R4與硫酰胺基中的兩個氮原子和一個硫原子一起形成一個飽和的或不飽和的環(huán)狀基團;每個環(huán)狀基可進一步含有至少一個選自由氧，硫和氮組成的一類原子;且每個環(huán)狀基可被取代;Y1為氫或巰基保護基;而Y2為氫或氨基保護基。
吡咯烷衍生物Ⅱ根據(jù)如下步驟制備將4-羥基吡咯烷-2-羧酸衍生物4-位的羥基轉(zhuǎn)化成巰基;將2-位的羧基轉(zhuǎn)化成羥甲基;直接將羥甲基中的羥基硫酰胺化或?qū)⑵滢D(zhuǎn)化成氨基后再氨基磺?；?如果需要除去保護基Y1。這些步驟的順序可適當?shù)馗淖儭?br> 吡咯烷衍生物Ⅱ的合成吡咯烷衍生物Ⅱ可用，例如(但并不限于)，如下方法合成。
途徑1 在上述圖解中，R2、R3和R4的定義與式Ⅰ相同，而R5是與羧基一起形成酯的基團如低級烷基。Y1和Y2的定義與式Ⅰ和Ⅱ的定義相同，但在反應(yīng)途徑的中間體中分別表示巰基保護基和氨基保護基。
在此方法中，例如，首先提供4-羥基吡咯烷-2-羧酸衍生物Ⅳ。甲磺?；蝾愃莆锉灰牖衔铫?-位的羥基上，然后被保護的巰基如三苯甲硫基被引入4-位。這樣得到化合物Ⅴ。然后，通過還原2-位的羧酸酯基得化合物Ⅵ。疊氨基被引入化合物Ⅵ，并且疊氮基被轉(zhuǎn)化成氨基，或?qū)⑧彵蕉柞啺放c化合物Ⅵ反應(yīng)，所形成的鄰苯二甲?；鶑幕衔铫鲋谐?，這樣就在化合物Ⅵ的羥基位引入了一個氨基。如此得到化合物Ⅶ。再將氨磺?；牖衔铫鞯玫交衔铫?。
進一步地，途徑1可有各種改進。例如，在化合物Ⅳ的4-位引入被保護的巰基之后，羧酸酯基被還原，然后引入硫酰胺基得到化合物Ⅱ。另外，在還原化合物Ⅳ之后，相繼引入被保護的巰基和硫酰胺基得到化合物Ⅱ。
途徑2
在上面的圖解中，R2，R3和R4的定義與式Ⅰ相同，而R5是與羧基一起形成酯的基團如低級烷基。Y1和Y2的定義與式Ⅰ和Ⅱ相同，但在反應(yīng)途徑的中間體中分別代表巰基保護基和氨基保護基。X4是羥基保護基。
在此方法中，例如，甲磺?；蝾愃莆?由X4表示)首先被引入4-羥基吡咯烷-2-羧酸衍生物Ⅳ的4-位，然后象途徑1中那樣將羧酸酯基還原成羥甲基得到化合物Ⅷ。然后將被保護的氨基如鄰苯二甲酰亞胺基引入到羥甲基的羥基位。得到化合物Ⅸ。在引入保護的氨基時，在化合物Ⅷ的羥基上引入一個離去基團以增加反應(yīng)活性是有效的。接著，由硫代乙酸酯保護的巰基和類似物(由Y1S表示)被引入到4-位(見化合物Ⅹ)，除去保護得化合物Ⅺ。通過往化合物Ⅺ引入氨磺酰基，得到化合物Ⅱ-1(其中吡咯烷環(huán)2-位的SY′為SH的式Ⅱ的化合物)。
而且，途徑2的方法可有各種改進。例如，通過在化合物Ⅷ的4-位引入一個保護的巰基，再引入氨磺?；⑷ケＷo，得到化合物Ⅱ-1。
途徑3 在上面圖解中，R2，R3和R4的定義與式Ⅰ相同。Y2的定義與式Ⅰ相同但在反應(yīng)途徑的中間體中表示氨基保護基。
在此方法中，先使氯代甲酸酯或類似物與吡咯烷環(huán)上具有被保護的氮原子的4-羥基吡咯烷-2-羧酸Ⅳ-1反應(yīng)。然后將2-位的羧基通過還原轉(zhuǎn)化成羥甲基。接著，在將羥甲基中的羥基轉(zhuǎn)化成活性酯之后，引入保護的氨基，通過去保護得到化合物Ⅻ。將氨磺?；牖衔铫螽a(chǎn)生化合物ⅩⅣ，然后往4-位的羥基部位引入保護的巰基。通過除去巰基的保護得到化合物Ⅱ-1。
吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成如果需要，將吡咯烷衍生物4-位的保護除去得SH化合物，然后，使吡咯烷衍生物與下面式Ⅲ表示的碳代青霉烯衍生物反應(yīng)給出本發(fā)明的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物Ⅰ
其中R1為氫或低級烷基;X1為氫或羥基保護基;X2為氫，羧基保護基，銨基，堿金屬或堿土金屬;X3為離去基團(例如，羥基的活性酯基，烷基亞磺?；蓟鶃喕酋；榛酋；蚍蓟酋；?。
如果需要，從化合物Ⅰ去保護給出具有游離羧基，羥基和/或氨基的化合物。
含有吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的抗菌劑含有本發(fā)明吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物(包括其藥學(xué)上可接受的鹽)的藥物組合物可作為抗菌劑給藥。給藥的方法為口服給藥或非腸道給藥;如注射劑(在安瓿或小瓶中的制劑，液體，懸浮液或類似物，用于靜脈內(nèi)注射，肌肉內(nèi)注射液，滴注，或皮下注射液)，外部或局部給藥劑(滴耳劑，滴鼻劑，眼用溶液，軟膏，乳劑，霧劑，栓劑和類似物)，及口服制劑。優(yōu)選地，該組合物可通過皮膚或粘膜注射給藥。該藥物組合物包括至少0.01%重量的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物并進一步包括合適的賦形劑，輔助劑，穩(wěn)定劑，濕潤劑，乳化劑，和其它依賴于給藥方法的添加劑。這些添加劑必須是藥學(xué)上和藥理上可接受的物質(zhì)，并不抑制吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的功效，不對病人顯示副作用。例如，乳糖，硬脂酸，硬脂酸鎂，粘土，蔗糖，谷淀粉，滑石粉，明膠，瓊脂，果膠，花生油，橄欖油，可可脂，乙二醇，酒石酸，檸檬酸和富馬酸可含于口服制劑中。對于非腸道給藥，溶劑(如，醇，緩沖液，油酸甲酯，水等等)，緩沖溶液，分散劑，助溶劑，穩(wěn)定劑(例如，對羥基苯甲酸甲酯，對羥基苯甲酸乙酯，山梨酸等)，促吸收劑(一或二辛酸甘油酯)，抗氧化劑，香料，止痛劑，分散劑，副作用抑制劑，作用增效劑(用于調(diào)節(jié)吸收和排除，酶分解抑制，β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，和其它類型的抗菌劑)及類似物可含于制劑中。
本發(fā)明吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的劑量依賴于病人的年齡，疾病的類型和病癥以及所用化合物的種類。一般地，日劑量的范圍為1mg/病人至約4000mg/病人，但如果需要可更多地給藥。例如，1mg(外部應(yīng)用)的劑量一天給藥4次，1000mg(靜脈內(nèi)注射)的劑量一天給藥2至4次以治療感染。
吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的特性本發(fā)明吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物作為抗菌劑的特性現(xiàn)在將以相同的已知化合物對比而描述。
(1)抗菌活性本發(fā)明吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的最小生長的抑制濃度和防止細菌感染的效果分別與meropenem(日本公開特許公開號60-233076)和imipenem(日本公開特許公開號55-9090)相比發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的衍生物在抗革蘭氏陽性菌方面優(yōu)于meropenem，而在抗革蘭氏陰性菌方面優(yōu)于imipenem。本發(fā)明的衍生物對于綠銅假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)，一種革蘭氏陰性菌，具有抗菌效力，相當于或兩倍于imipenem，meropenem和碳代青霉烯的甲磺酰胺衍生物(日本公開特許公開號63-179876)的效力。當與碳代青霉烯的脲衍生物(日本公開特許公開號62-155279)相比時，該衍生物對于革蘭氏陽性菌的抗菌具有相當或兩倍的效力，對于革蘭氏陰性細菌具有兩倍的效力，而對于綠銅假單胞菌具有二至八倍的效力。
(2)兔子腎毒性試驗以兔子每1Kg體重250mg本發(fā)明衍生物給藥顯示無毒性。meropenem給藥也得到同樣結(jié)果。當以150mg/Kgimipenem給藥時，顯示出中等的腎毒性。在尿中發(fā)現(xiàn)糖和蛋白質(zhì)，而在腎中發(fā)現(xiàn)白色微粒變化。
(3)由小鼠腎臟脫氫肽酶Ⅰ的分解速率本發(fā)明吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物通過腎脫氫肽酶Ⅰ的酶分解速率是imipenem的76%，meropenem的40%，顯示出更高的穩(wěn)定性。
(4)在水中的溶解性本發(fā)明衍生物在水中的溶解度為10%或更高，為游離酸形式，可以靜脈內(nèi)注射。相反，imipenem和meropenem的溶解度為約2%，除滴注外不能給藥。
(5)體內(nèi)藥物動力學(xué)
當本發(fā)明衍生物被靜脈內(nèi)注射到彌猴屬猴(10mg/Kg)時，半衰期為1.1小時，從尿中回收率為62.2%，血液中濃度的積分值為24.9μg·hr/ml。為meropenem的半衰期的1.44倍，從尿中回收率的1.36倍，血液中濃度的積分值(曲線下的面積AUC)的1.44倍。為imipenem半衰期的1.87倍，從尿中回收率的1.93倍，而AUC為1.87倍。
當該衍生物被靜脈內(nèi)注射給小鼠(20mg/Kg)時，從尿中回收率為36.3%，而血液中濃度的積分值為12.1μg·hr/ml。從尿中回收率是meropenem的2.18倍，而AUC是2.32倍。從尿中回收率是imipenem的1.15倍，而AUC是1.37倍。從尿中回收率是meropenem甲磺酸衍生物的1.48倍。
這樣，本發(fā)明提供具有廣泛抗菌譜和對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌都具有強抗菌活性的新吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物，含有該碳代青霉烯衍生物的抗菌劑(組合物)，和制備該碳代青霉烯衍生物的方法。而且提供了作為制備碳代青霉烯衍生物的中間體的新吡咯烷衍生物及其制備方法。
分別將本發(fā)明吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的最小細菌生長抑制濃度和防止細菌感染的效力與meropenem和imipenem相比較，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明衍生物在抗革蘭氏陽性菌方面優(yōu)于meropenem，而在抗革蘭氏陰性菌方面優(yōu)于imipenem。本發(fā)明衍生物具有對綠銅假單胞菌，一種革蘭氏陰性菌，的抗菌效力，相當于或兩倍于imipenem，meropenem和碳代青霉烯的甲磺酰氨基衍生物。當與碳代青霉烯的脲衍生物相比時，該衍生物具有相當于或兩倍于它們對革蘭氏陽性菌的抗菌效力，兩倍于對革蘭氏陰性菌的抗菌效力以及二至八倍于對綠銅假單胞菌的抗菌效力。吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物與普通碳代青霉烯衍生物相比對機體的毒性小。因為該衍生物在體內(nèi)分解緩慢，故其抗菌作用持續(xù)更長的時間周期。而且，由于該衍生物與普通碳代青霉烯衍生物相比在水中具有更高溶解度，它可用于注射。
下面實施例用于展示本發(fā)明，但并不限制其范圍。
吡咯烷衍生物的制備實施例1
步驟1.O-甲磺?；衔锏闹苽湓?30℃，攪拌下，往(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基吡咯烷-2-羧酸甲酯(227.2g∶0.735mol)的二氯甲烷(1.3升)溶液中加入三乙胺(112.5ml∶1.1當量)和甲磺酰氯(56.8ml∶1當量)?；旌衔镌谙嗤瑴囟认聰嚢?5分鐘。反應(yīng)混合物相繼用稀鹽酸和水洗，硫酸鎂干燥，真空濃縮給出(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(280.1g)，產(chǎn)率98%。
NMR δ(CDCl3)ppm3.02，3.04(2xs，3H)，3.56，3.78(2xs，3H)，3.81(s，3H)，4.98，5.08(ABq，J＝12Hz，1H)，5.04，5.12(ABq，J＝12Hz，1H).
IR (CHCl3)cm-11755，1709，1620.
步驟2.三苯甲硫基化合物的制備在0℃攪拌下，往三苯基甲硫醇(107.02g∶1.5當量)的二甲基甲酰胺(350ml)的溶液中加入含60%氫化鈉(13.42g∶1.3當量)的油懸浮液?；旌衔镌谑覝財嚢?小時。在0℃，攪拌下，將反應(yīng)混合物與(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(100g∶0.258mol)的二甲基甲酰胺(70ml)的溶液混合?；旌衔镌?0℃攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物倒入冷的稀鹽酸中，用乙酸乙酯提取。提取液相繼用水和食鹽水洗滌，干燥，真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝5∶1)純化，給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-羧酸甲酯(127.1g)。產(chǎn)率87%。
NMR δ(CDCl3)ppm3.50，3.71(2xs，3H)，3.78，3.84(2xs，3H)，4.87，5.13(ABq，J＝12Hz，1H)，4.89，5.13(ABq，J＝12Hz，1H).
IR (CHCl3)cm-11750，1700，1618.
步驟3.羥甲基化合物的制備在室溫下，攪拌下，往(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-羧酸甲酯(127.1g∶0.224mol)的四氫呋喃(1升)溶液中加入硼氫化鋰(4.88g∶1當量)?；旌衔镌?0℃攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物冷至室溫，在攪拌下小批量加入(100ml)。過濾形成的沉淀，將濾液真空濃縮。剩余物溶于二氯甲烷，硫酸鎂干燥，減壓濃縮。剩余物用乙醚洗滌給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇白色晶體(82.3g)。產(chǎn)率68%。
NMR δ(CDCl3)ppm3.84(s，3H)，4.93，4.99(ABq，J＝12Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13400，1668，1610.
步驟4.甲磺酰基化合物的制備(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇(22.33g∶41.37mol)的溶液用二氯甲烷(300ml)沖稀，混合物冷卻至-30℃。往此混合物中加入三乙胺(6.92ml∶1.2當量)和甲磺酰氯(3.52ml∶1.1當量)，混合物攪拌20分鐘。反應(yīng)混合物相繼用稀鹽酸和水洗滌，硫酸鎂干燥，過濾。將濾液真空濃縮給出粗的(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇甲磺酸酯(27.81g∶45.02mmol)。產(chǎn)率100%。
NMRδ(CDCl3)ppm2.89(s，3H)，3.81，3.83(2xs，3H)，4.85-5.07(m，2H).
IR (CHCl3)cm-11725，1690，1610.
步驟5.疊氮化合物的制備往(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇甲磺酸酯(27.81g)的二甲基甲酰胺(120ml)溶液中加入疊氮化鈉(3.50g∶53.8mmol)的水溶液(12ml)。混合物在80℃攪拌8小時。將反應(yīng)混合物倒入冰水中并用乙酸乙酯提取。提取液相繼用水和食鹽水洗滌并濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜純化給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-疊氮甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(17.27g∶30.64mmol)。步驟4和5的總產(chǎn)率74%。
NMRδ(CDCl3)ppm3.84(s，3H)，4.82-5.15(m，2H).
IR (CHCl3)cm-12105，1685.
步驟6.氨基化合物的制備(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-疊氮甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(17.27g∶30.64mmol)于乙酸乙酯(150ml)，甲醇(200ml)，和乙酸(2.63ml∶46mmol)混合物中的溶液在5%Pd/C(5g)上進行常規(guī)氫化。反應(yīng)后，濾除催化劑，將濾液真空濃縮給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-氨甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷乙酸酯(17.33g)殘渣。殘渣溶于二氯甲烷，用碳酸氫鈉水溶液洗滌，濃縮給出(2S，4S)-2-氨基甲基-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷(16.82g)。
步驟7.鄰苯二甲酰亞胺基化合物的制備以與前面步驟4所提到的相同方法從(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇(96.24g∶178mmol)產(chǎn)生的粗(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇甲磺酸酯(115.4g)溶于二甲基甲酰胺(1升)。加入鄰苯二甲酰亞胺化鉀(65.94g∶2當量)之后，混合物在100℃攪拌1小時。將反應(yīng)混合物倒入冰水中，用乙酸乙酯提取。提取液相繼用水和食鹽水洗滌，濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯)純化給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-鄰苯二甲酰亞胺基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(99.4g)。產(chǎn)率83.5%。
NMRδ(CDCl3)ppm3.78，3.84(2xs，3H)，4.65-5.00(m，2H).
IR (CHCl3)cm-11770，1712，1693，1611.
步驟8.除去鄰苯二甲酰基往(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-鄰苯二甲酰亞胺基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(752mg∶1.124mmol)于二氯甲烷(3ml)和甲醇(12ml)的混合物的溶液中加入水合肼(109μl∶2當量)?；旌衔锛訜?小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮。剩余物溶于二氯甲烷(5ml)并濾除固體。濾液用水洗并真空濃縮。剩余物用二氯甲烷和甲醇的混合物重結(jié)晶給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-氨基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(471mg)。產(chǎn)率78%。mp165至167℃。
NMRδ(CDCl3∶CD3OD＝2∶1)ppm3.46(s，3H)，4.96，4.89(ABq，J＝12Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-11683，1610.
步驟9.二甲基氨基磺?；衔锏闹苽鋵?2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-氨基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(12.44g∶23.13mmol)的二氯甲烷(70ml)溶液冷卻至-78℃。加入三乙胺(4.21ml∶1.3當量)和二甲基氨基磺酰氯(2.73ml∶1.1當量)之后，混合物在約1小時溫?zé)嶂潦覝?。反?yīng)混合物相繼用稀鹽酸和食鹽水洗滌，濃縮給出粗的(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-N，N-二甲基氨磺酰氨基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(15.02g)。產(chǎn)率100%。
步驟10.通過去保護制備巰基化合物在冰冷卻下，往(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-N，N-二甲基氨磺酰氨基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(3.55g∶5.5mmol)于二氯甲烷(70ml)和甲醇(35ml)的混合物的溶液中加入吡啶(0.66ml∶1.5當量)和硝酸銀(1.40g∶1.5當量)的水(3.5ml)溶液?；旌衔飻嚢?0分鐘。將反應(yīng)混合物倒入水中并用二氯甲烷提取。提取液用硫酸鎂干燥，通入硫化氫，濾除固體。真空濃縮濾液，剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯)純化給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-N，N-二甲基氨磺酰基氨基甲基-4-巰基吡咯烷(1.93g)。產(chǎn)率87.0%。
NMRδ(CDCl3)ppm∶2.77(s，6H)，3.81(s，3H)，5.00至5.12(m，2H).
IR (CHCl3)cm-13380，1690，1610.
步驟11.氨磺?；衔锏闹苽湓?50℃，往氯磺?；惽杷狨?3.95ml∶45.4mmol)的二氯甲烷(70ml)溶液中加入對甲氧基芐醇(5.66ml∶45.4mmol)?；旌衔镌?50℃攪拌15分鐘。產(chǎn)生的對甲氧基芐氧羰基氨磺酰氯溶液在-78℃被加入(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-氨基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(在上面步驟6或8中得到)(12.21g∶22.7mmol)和三乙胺(6.38ml∶45.6mmol)的二氯甲烷(300ml)溶液中，混合物攪拌10分鐘，相繼用稀鹽酸和食鹽水洗滌，并真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜純化給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-對甲氧基芐氧羰基氨磺?；被谆?4-三苯甲硫基吡咯烷(16.31g)。產(chǎn)率91.6%。
NMRδ(CDCl3)ppm∶3.78(s，3H)，3.81，3.83(2xs，3H)，4.98，4.89(ABq，J＝12Hz，2H)，5.09，5.03(ABq，J＝12Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13390，1740，1685.
步驟12.通過去保護制備巰基化合物在冰冷卻下，往(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-對甲氧基芐氧羰基氨磺?；被谆?4-三苯甲硫基吡咯烷(2.35g∶3.13mmol)于二氯甲烷(60ml)和甲醇(30ml)混合物的溶液中加入吡啶(0.38ml∶4.75mmol∶1.5當量)和硝酸銀(0.80g∶1.5當量)的水(2ml)溶液?；旌衔飻嚢?0分鐘。將反應(yīng)混合物倒入水中，并用二氯甲烷提取。提取液用硫酸鎂干燥并過濾。將硫化氫通過濾液，并濾除產(chǎn)生的沉淀。真空濃縮濾液，剩余物通過硅膠柱色譜純化給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-2-對甲氧基芐氧羰基氨磺?；被谆?4-巰基吡咯烷(1.56g)。產(chǎn)率92.4%。
NMRδ(CDCl3)ppm∶2.42-2.58(m，1H)，3.80(s，6H)，5.08，5.02(ABq，J＝12Hz，2H)，5.12，5.07(ABq，J＝16Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13380，1740，1685，1610.
步驟13.N-甲基化合物的制備在冰冷卻，攪拌下，往(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基-2-(對甲氧基芐氧羰基氨基磺?；被谆?吡咯烷(2.06g∶2.63mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液中加入1M二(三甲基甲硅烷基)氨化鋰的四氫呋喃溶液(2.76ml∶1.05當量)。攪拌1小時后，加入碘甲烷(491μl∶3當量)?；旌衔镌谙嗤瑴囟认聰嚢?小時。將反應(yīng)混合物倒入乙酸乙酯和亞硫酸鈉水溶液的混合物中，分出乙酸乙酯層。有機層相繼用水和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜純化(甲苯∶乙酸乙酯＝4∶1)給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基-2-(N-對甲氧基芐氧羰基-N-甲基氨基磺?；被?甲基吡咯烷(1.51g)。產(chǎn)率72%。
NMRδ(CDCl3)ppm∶1.4-1.6(m，1H)，1.9-2.1(m，1H)，2.5-3.3(m，4H)，3.23(s，3H)，3.5-3.8(m，1H)，3.76(s，3H)，3.81(s，3H)，4.93(ABq，J＝10.4Hz，2H)，5.10(ABq，J＝15.2Hz，2H)，6.35-6.55(m，1H)，6.8-7.5(m，23H).
IR (CHCl3)cm-11727，1695.
步驟14.通過去保護制備巰基化合物在冰冷卻下，攪拌下，往(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-三苯甲硫基-2-(N-對甲氧基芐氧羰基-N-甲基氨基磺?；?氨基甲基吡咯烷(1.5g∶1.88mmol)于二氯甲烷(4ml)和甲醇(10ml)混合物的溶液中加入吡啶(381μl∶2.5當量)和硝酸銀(640mg∶2當量)的水(6ml)溶液?；旌衔镌谙嗤瑴囟葦嚢?0分鐘。反應(yīng)混合物用二氯甲烷沖稀，水洗，硫酸鎂干燥，真空濃縮至約5ml。剩余物溶于甲醇(10ml)并通入硫化氫。濾除固體后的混合物真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝2∶1)純化給出(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-巰基-2-(N-對甲氧基芐氧羰基-N-甲基氨基磺?；?氨基甲基吡咯烷(866mg)。產(chǎn)率83%。
NMRδ(CDCl3)ppm∶1.6-1.8(m，1H)，2.3-2.6(m，1H)，2.9-3.4(m，5H)，3.3(s，3H)，3.8(s，6H)，3.8-4.2(m，1H)，6.3-6.6(m，1H)，6.88(d，J＝8.6Hz，2H)，7.2-7.4(m，2H).
IR (CHCl3)cm-11690.
吡咯烷衍生物的制備實施例2 步驟1.O-甲磺?；衔锏闹苽湓?20℃攪拌下，往(2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-4-羥基吡咯烷-2-羧酸甲酯(59.44g∶0.183mol)的二氯甲烷(150ml)溶液中加入三乙胺(30.5ml∶1.2當量)和甲磺酰氯(17ml∶1當量)。混合物在相同溫度下攪拌35分鐘。往混合物中加入冰水和乙酸乙酯。將有機層分出，水洗，硫酸鎂干燥，真空濃縮給出(2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(74.05g)。產(chǎn)率定量。
NMRδ(CDCl3)ppm2.20-2.42(m，1H)，2.55-2.85(m，1H)，3.07(s，3H)，3.67(s，1.5H)，3.78(s，1.5H)，3.80-4.05(m，2H)，4.53(t，J＝7Hz，1H)，5.06-5.40(m，3H)，7.47(d，J＝9Hz，1H)，7.51(d，J＝9Hz，1H)，8.23(d，J＝9Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-11748，1712，1608.
步驟2.三苯甲硫基化合物的制備在0℃，攪拌下，往三苯甲硫醇(37.69g∶1.5當量)的四氫呋喃(180ml)溶液中加入含60%氫化鈉(4.73g∶1.3當量)的油懸浮體。混合物在室溫攪拌過夜。在0℃，攪拌下，將(2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(36.58g∶90.9mmol)的四氫呋喃(180ml)溶液加入反應(yīng)混合物中，混合物在60℃攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物被倒入冷的稀鹽酸中并用乙酸乙酯提取。提取液相繼用水和食鹽水洗滌，干燥，真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝9∶1至4∶1)純化給出(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-羧酸甲酯(25.48g)。產(chǎn)率48.1%。
NMRδ(CDCl3)ppm1.63-2.35(m，2H)，2.68-3.50(m，3H)，3.60(s，1.5H)，3.72(s，1.5H)，4.02-4.15(m，1H)，4.95-5.28(m，2H)，7.10-7.52(m，17H)，8.17(d，J＝9Hz，1H)，8.24(d，J＝9Hz，1H).
IR (CHCl3)cm-11747，1704，1607.
步驟3.羧甲基化合物的制備在冰冷卻，攪拌下，往(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-羧酸甲酯(5g∶9.01mmol)的四氫呋喃(180ml)溶液中加入硼氫化鈉(2.3g∶1.4當量)的乙醇溶液和氯化鋰(2.76g∶1.5當量)的四氫呋喃(60ml)溶液?；旌衔镌谑覝財嚢?小時。將反應(yīng)混合物倒入冰水和乙酸乙酯的混合物中，并用乙酸乙酯提取。提取液相繼用冷的稀鹽酸，碳酸氫鈉水溶液，飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空濃縮。剩余物用甲醇重結(jié)晶，給出(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇(15.9g)。產(chǎn)率65.9%。mp.122至125℃。
NMRδ(CDCl3)ppm1.32-1.53(m，1H)，1.90-2.12(m，1H)，2.65-3.05(m，3H)，3.32-3.84(m，3H)，5.08，5.17(ABq，J＝12Hz，2H)，7.08-7.55(m，17H)，8.26(d，J＝9Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13400br，1681，1607.
步驟4.甲磺酰基化合物的制備在-15℃，攪拌下，往(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇(5.0g∶9.01mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入三乙胺(1.63ml∶1.3當量)和甲磺酰氯(0.85ml∶1.1當量)?；旌衔镌?15℃至-10℃攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物倒入水中并用二氯甲烷提取。提取液相繼用稀鹽酸，碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝9∶1)純化給出(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇甲磺酸酯(4.86g)。產(chǎn)率85.2%。
NMRδ(CDCl3)ppm1.65-1.93(m，1H)，2.00-2.26(m，1H)，2.68-2.92(m，3H)，2.96(s，3H)，3.78-3.98(m，1H)，4.16-4.30(m，1H)，4.38-4.52(m，1H)，5.11(brs，2H)，7.08-7.52(m，17H)，8.24(d，J＝9Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-11699，1606.
步驟5.鄰苯二甲酰亞胺基化合物的制備將(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-4-三苯甲硫基吡咯烷-2-甲醇甲磺酸酯(4.39g∶6.93mmol)和鄰苯二甲酰亞胺基鉀(2.57g∶2當量)的二甲基甲酰胺(30ml)溶液在70℃攪拌6小時。將反應(yīng)混合物倒入冰水中并濾出沉淀。將沉淀溶于乙酸乙酯，用飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯)純化給出(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-鄰苯二甲酰亞胺基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(3.12g)。產(chǎn)率64.3%。
NMRδ(CDCl3)ppm1.40-2.30(m，2H)，2.60-3.08(m，2H)，3.10-3.40(m，1H)，3.55-4.23(m，3H)，4.92，5.06(ABq，J＝12Hz，2H)，7.08-7.50(m，17H)，7.60-7.82(m，4H)，8.10(d，J＝9Hz，1H)，8.19(d，J＝9Hz，1H).
IR (CHCl3)cm-11720，1701，1607.
步驟6.除去鄰苯二甲酰基往(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-鄰苯甲酰亞胺基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(10.46g∶15.31mmol)于二氯甲烷(80ml)和甲醇(160ml)混合物的溶液中加入水合肼(1.53ml∶2當量)，通過溫?zé)岷突亓?小時和15分鐘將混合物濃縮除去二氯甲烷。將反應(yīng)混合物真空濃縮。剩余物用二氯甲烷稀釋并濾除固體。濾液用水洗，硫酸鎂干燥，真空濃縮給出粗的(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-氨基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(7.71g)。產(chǎn)率91%。
NMRδ(CDCl3∶CD3OD＝2∶1)ppm1.46-3.76(m，10H)，5.04，5.12(ABq，J＝15Hz，2H)，7.10-7.56(m，17H)，8.12-8.30(m，2H).
IR (CHCl3)cm-11695，1606.
步驟7.N-氨基磺?；衔锏闹苽鋵?2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-氨基甲基-4-三苯甲硫基吡咯烷(4.7g∶8.49mmol)溶于二氯甲烷(45ml)的溶液冷卻到-70℃。往混合物中加入二異丙基乙胺(3.4ml∶2.3當量)和1M叔丁氧羰基氨基磺酰氯(在處理前從氯磺?；惽杷狨ズ褪宥〈贾苽?的二氯甲烷(21ml)溶液，將混合物攪拌1小時并用冰水沖稀。反應(yīng)混合物相繼用稀鹽酸和碳酸氫鈉水溶液洗滌，硫酸鎂干燥，并濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯)純化給出(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-叔丁氧羰基氨基磺?；被谆?4-三苯甲硫基吡咯烷(1.49g)。產(chǎn)率24%。
NMRδ(CDCl3)ppm1.40-2.30(m，2H)，1.44(s，9H)，2.60-3.40(m，5H)，3.71-3.95(m，1H)，5.08，5.13(ABq，J＝12Hz，2H)，6.27(brs，1H)，7.07-7.55(m，17H)，8.21(d，J＝7Hz，1H)，8.26(d，J＝7Hz，1H).
IR (CHCl3)cm-13390，1737，1695，1606.
步驟8.除去叔丁氧羰基在冰冷卻下，往(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-叔丁氧羰基氨基磺?；被谆?4-三苯甲硫基吡咯烷(1.46g∶2mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中加入茴香醚(2.4ml)和三氟乙酸(3.9ml)?；旌衔镌谑覝財嚢?小時。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯和冰水沖稀，并用乙酸乙酯提取。提取液相繼用水和飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。剩余物用正己烷重結(jié)晶給出(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-氨磺?；被谆?4-三苯甲硫基吡咯烷(1.4g)。產(chǎn)率幾乎定量。
NMRδ(CDCl3)ppm1.43-1.70(m，1H)，2.08-2.30(m，1H)，2.65-3.50(m，5H)，3.74-4.00(m，1H)，5.03，5.13(ABq，J＝15Hz，2H)，5.73(brs，1H)，7.00-7.60(m，17H)，8.25(d，J＝9Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13334br，1688，1607.
步驟9.通過去保護制備巰基化合物在冰冷卻下，往(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-氨磺?；被谆?4-三苯甲硫基吡咯烷(668mg∶0.95mmol)的四氫呋喃(6ml)溶液中加入吡啶(0.254ml∶2.7當量)和硝酸銀(403mg∶2.5當量)的水(2ml)溶液。混合物在室溫攪拌1小時。反應(yīng)混合物用二氯甲烷(3ml)和甲醇(3ml)沖稀，并在冰冷卻下通入硫化氫10分鐘。濾去產(chǎn)生的沉淀。濾液用二氯甲烷稀釋，水洗，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯)純化給出(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-氨磺?；被谆?4-巰基吡咯烷(233mg)。產(chǎn)率63%。
NMRδ(CDCl3-CD3OD)ppm1.42(t，J＝7Hz，1H)，1.65-1.93(m，1H)，2.48-2.70(m，1H)，3.05-3.63(m，4H)，3.93-4.16(m，2H)，5.22(s，2H)，7.53(d，J＝8Hz，2H)，8.23(d，J＝8Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13276br，1692，1607.
吡咯烷衍生物制備實施例3
步驟1.羥甲基化合物的制備在0℃，攪拌下，往(2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(79.4g∶0.197mmol)于乙醇(300ml)和四氫呋喃(150ml)混合物的溶液中小批量加入硼氫化鈉(10.44g∶1.4當量)?；旌衔镌?℃攪拌1.5小時，室溫攪拌5小時。在冰冷卻下往反應(yīng)混合物中加入5N鹽酸(100ml)。混合物用水稀釋，乙酸乙酯提取。提取液用食鹽水洗，硫酸鈉干燥，并真空濃縮。剩余物用二氯甲烷和乙醚的混合物重結(jié)晶給出(2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(51.9g)。產(chǎn)率70%。
NMRδ(CDCl3)ppm1.93-2.14(m，1H)，2.32-2.48(m，1H)，3.06(s，3H)，3.53-4.28(m，6H)，5.26(s，2H)，7.53(d，J＝9Hz，2H)，8.24(d，J＝9Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13404，1698，1607.
步驟2.甲苯磺?；衔锏闹苽渫?2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(28.8g∶77mmol)的二氯甲烷(150ml)溶液中在冰冷卻下加入對甲苯磺酰氯(19.11g∶1.3當量)，三乙胺(10.4ml∶1.3當量)和二甲基氨基吡啶(0.94g∶0.1當量)?；旌衔镌?5℃攪拌7小時。將反應(yīng)混合物用冰水稀釋。分出產(chǎn)生的有機層，相繼用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。剩余物用正己烷重結(jié)晶給出(2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇對甲苯磺酸酯(37.7g)。產(chǎn)率93%。
NMRδ(CDCl3)ppm2.20-2.50(m，1H)，2.44(s，3H)，3.05(s，3H)，3.45-4.60(m，5H)，5.18(s，2H)，5.26(brs，1H)，7.34(d，J＝8Hz，2H)，7.50(d，J＝8Hz，2H)，7.75(d，J＝8Hz，2H)，8.23(d，J＝8Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-11700，1599.
步驟3.鄰苯二甲酰亞胺基化合物的制備將(2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇對甲苯磺酸酯(25g∶47.3mmol)和鄰苯二甲酰亞胺化鉀(17.52g∶2當量)于二甲基甲酰胺(250ml)的混合物在60℃攪拌7小時。反應(yīng)混合物倒入冰水中并過濾。產(chǎn)生的沉淀溶于乙酸乙酯，用飽和食鹽水洗，硫酸鎂干燥，真空濃縮。剩余物用甲醇重結(jié)晶給出(2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-2-鄰苯二甲酰亞胺基甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷(18.76g)。產(chǎn)率79%。熔點121至123℃。
NMRδ(CDCl3)ppm2.03-2.60(m，2H)，3.02(s，3H)，3.50-4.15(m，4H)，4.40-4.63(m，1H)，5.10，5.29(ABq，J＝15Hz，2H)，5.10-5.30(m，1H)，7.46(d，J＝9Hz，1H)，7.57(d，J＝9Hz，1H)，7.63-7.88(m，4H)，8.20(d，J＝9Hz，2H)IR (CHCl3)cm-11773，1715，1605.
步驟4.乙酰硫基化合物的制備將(2S，4R)-1-對硝基芐氧羰基-2-鄰苯二甲酰亞胺基甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷(10g∶19.88mmol)和硫代乙酸鉀(4.54g∶2當量)的二甲基甲酰胺(60ml)溶液在60℃攪拌3小時。反應(yīng)混合物倒入冰水(200ml)中并過濾。將沉淀溶于乙酸乙酯，硫酸鎂干燥，真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯)純化給出(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-鄰苯二甲酰亞胺基甲基-4-乙酰硫基吡咯烷(8.7g)。產(chǎn)率90%。
NMRδ(CDCl3)ppm1.65-1.97(m，1H)，2.47-2.67(m，1H)，3.24-3.34(q，1H)，3.73-4.24(m，4H)，4.30-4.54(m，1H)，5.02(dd，J＝14Hz，J＝7Hz，1H)，5.20(d，J＝14Hz，1H)，7.42(d，J＝9Hz，1H)，7.45(d，J＝9Hz，1H)，7.60-8.86(m，4H)，8.17(d，J＝9Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-11773，1714，1605.
步驟5.除去鄰苯二甲酰基和乙?；?2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-鄰苯二甲酰亞胺基甲基-4-乙酰硫基吡咯烷(4.92g∶10.18mmol)于二氯甲烷(15ml)和甲醇(75ml)混合物的溶液中加入水合肼(1.53ml∶3當量)。將混合物溫?zé)岢ザ燃淄椴⒓訜嶂粱亓?小時10分鐘。反應(yīng)混合物真空濃縮。剩余物用二氯甲烷稀釋并過濾。濾液用水洗，硫酸鎂干燥，真空濃縮給出粗的(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-氨基甲基-4-巰基吡咯烷(3.3g)。產(chǎn)率定量。
NMRδ(CDCl3)ppm1.63-1.90(m，1H)，2.48-2.68(m，1H)，2.86-3.43(m，4H)，3.65-4.23(m，2H)，5.22(s，2H)，7.52(d，J＝9Hz，2H)，8.23(d，J＝9Hz，2H).
步驟6.N-氨磺酰基化合物的制備在-78℃，往粗的(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-氨基甲基-4-巰基吡咯烷(3.3g∶10.18mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液中滴加三乙胺(2.84ml∶2.2當量)和三甲基氯代甲硅烷(3.12ml∶2.2當量)。攪拌20分鐘后，將三乙胺(4.25ml∶3當量)和于二氯甲烷中的1M氨磺酰氯(25ml∶2.5當量)滴加到混合物中。攪拌20分鐘后，將反應(yīng)混合物用鹽酸酸化，溫?zé)嶂潦覝?，并用二氯甲烷提取。提取液用水洗，往里面加?N鹽酸(10ml)和甲醇(30ml)。此溶液在室溫攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物用水洗，硫酸鎂干燥，真空濃縮。剩余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯)純化給出(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-氨磺?；被谆?4-巰基吡咯烷(2.65g)。產(chǎn)率66.7%。
NMRδ(CDCl3-CD3OD)ppm1.42(t，J＝7Hz，1H)，1.65-1.93(m，1H)，2.48-2.70(m，1H)，3.05-3.63(m，4H)，3.93-4.16(m，2H)，5.22(s，2H)，7.53(d，J＝8Hz，2H)，8.23(d，J＝8Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13276br，1692，1607.
吡咯烷衍生物的制備實施例4 步驟1.叔丁氧羰基化合物的制備向于水(300ml)和叔丁醇(100ml)混合物中的反式-4-羥基-L-脯氨酸(50g)的懸浮液中加入含水碳酸氫鈉(32.3g)、二叔丁基二碳酸酯(104g)和二噁烷(200ml)。將混合物于室溫下攪拌過夜。除去有機溶劑，用甲基乙基酮和乙酸乙酯將獲得的水溶液分層，并于冰浴下用濃鹽酸(34.5ml)酸化。分出有機層，用飽和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥并真空濃縮。殘余物于乙酸乙酯-甲苯中重結(jié)晶得反式-1-叔丁氧羰基-4-羥基-L-脯氨酸(82.9g)，無色結(jié)晶。產(chǎn)率94%。mp.126-128℃。
NMRδ(CDCl3)ppm1.43，1.46(2xs，9H)，1.95-2.36(m，2H)，3.36-3.6(m，2H)，4.23-4.44(m，2H).
IR (CHCl3)cm-13360，1735，1656.
元素分析 (C10H17NO5)
計算值.C，51.94;H，7.41;N，6.06;
實驗值C，51.65;H，7.38;N，5.99.
步驟2.具有甲磺酰氧基和甲氧羰基基團的化合物的制備于-30℃向反式-1-叔丁氧羰基-4-羥基-L-脯氨酸(8.5g)的四氫呋喃(110ml)溶液中加入三乙胺(12.8ml)和甲磺酰氯(6.27ml)。將混合物于相同的溫度下攪拌30分鐘。向混合物中加入三乙胺(5.13ml)和甲醇(30ml)，將混合物攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物用1N鹽酸(37ml)酸化并用乙酸乙酯萃取，萃取液連續(xù)用水，碳酸氫鈉水溶液、水和飽和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化并于甲苯-石油醚中重結(jié)晶得(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(9.16g)，無色結(jié)晶。產(chǎn)率77%。mp.86-87℃。
NMRδ(CDCl3)ppm1.42，1.47，1.50(3xs，9H)，2.19-2.35(m，1H)，2.48-2.75(m，1H)，3.06，3.07，3.26(3xs，3H)，3.59-4.12(m，5H)，4.35-4.60(m，1H)，5.18-5.32(m，1H).
IR (CHCl3)cm-11748，1698.
步驟3.羥甲基化合物的制備冰冷卻和攪拌下向(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(8.11g)的四氫呋喃(49ml)溶液中加入硼氫化鈉(2.36g)和甲醇(20ml)。將混合物于室溫攪拌25分鐘并于60℃攪拌25分鐘，混合物用冰冷卻并過濾。將濾液濃縮，用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌，硫酸鈉干燥，并真空濃縮。殘余物于石油醚-乙醚中重結(jié)晶得(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(5.96g)，無色結(jié)晶。產(chǎn)率80%。mp.95-96℃。
NMRδ(CDCl3)ppm1.48(s，9H)，1.78-2.02(m，1H)，2.3-2.48(m，1H)，3.05(s，3H)，3.5-3.65(m，2H)，3.65-4.0(m，2H)，4.03-4.25(m，1H)，5.2(s，1H).
IR (CHCl3)cm-13460，1680.
步驟4.甲苯磺?；衔锏闹苽浔鋮s和攪拌下向(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(12.0g)的二氯甲烷(180ml)溶液中連續(xù)加入三乙胺(6.23ml)，對甲苯磺酰氯(8.52g)和N，N-二甲氨基吡啶(993mg)。將混合物加熱回流3小時，補加三乙胺(0.57ml)和對甲苯磺酰氯(775mg)，并加熱回流1小時。反應(yīng)混合物用稀鹽酸酸化。分出有機層，用水洗滌，硫酸鈉干燥并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化并于正己烷中重結(jié)晶，得(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇對甲苯磺酸酯(16.8g)。產(chǎn)率92%。mp.65-66℃。
NMRδ(CDCl3)ppm1.42(s，9H)，2.15-2.55(m，2H)，2.45(s，3H)，3.03(s，3H)，3.3-4.5(m，5H)，5.1-5.25(m，1H)，7.35(d，J＝8.0Hz，2H)，7.76(d，J＝8.0Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-11693.
步驟5.苯二甲酰亞氨基化合物的制備向(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇對甲苯磺酸酯(20.78g)的二甲基甲酰胺(200ml)溶液中加入苯鄰二甲酰亞胺鉀(9.61g)。將混合物于70℃攪拌3小時，反應(yīng)混合物傾入水和乙酸乙酯混合物中。分出有機層，連續(xù)地用稀氫氧化鈉水溶液和水洗滌，硫酸鈉干燥，并真空濃縮。殘余物通過5%濕硅膠柱色譜純化，得(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-2-苯二甲酰亞氨基甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷(11.17g)。產(chǎn)率60%。無色泡沫。
NMR δ (CDCl3)ppm1.33，1.42(2xs，9H)，2.0-2.55(m，2H)，3.02(s，3H)，3.4-4.6(m，5H)，5.15-5.3(m，1H)，7.6-7.95(m，4H).
IR (CHCl3)cm-11775，1716，1693.
步驟6.乙酰硫基化合物的制備向(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-2-苯二甲酰亞氨基甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷(3g)的二甲基甲酰胺(30ml)溶液中加入硫代乙酸鉀(1.65g)。將混合物于60℃攪拌3.5小時，反應(yīng)混合物傾入乙酸乙酯和稀鹽酸的混合物中。分出有機層，用水洗滌，硫酸鈉干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-2-苯二甲酰亞氨基甲基-4-乙酰硫基吡咯烷(2.12g)。產(chǎn)率74%。桔黃色糖漿。
NMR δ (CDCl3)ppm1.30，1.39(2xs，9H)，1.6-2.0(m，1H)，2.34(s，3H)，2.4-2.67(m，1H)，3.15-3.3(m，1H)，3.65-4.55(m，5H)，7.6-8.0(m，4H).
IR (CHCl3)cm-11774，1715，1688.
步驟7.鄰苯二甲酰基和乙?；鶊F的脫除向(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-2-苯二甲酰亞氨基甲基-4-乙酰硫基吡咯烷(8.58g)的二氯甲烷(26ml)和甲醇(129ml)混合物的溶液中加入水合肼(4.11ml)。將混合物加熱回流2小時45分鐘并過濾，真空下濃縮濾液。將殘余物溶于二氯甲烷，用水洗滌，硫酸鈉干燥，并真空濃縮，得粗品(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-2-氨基甲基-4-巰基吡咯烷(4.1g)，黃色糖漿。
步驟8.氨磺?；衔锏闹苽涞獨饬?70℃下向粗品(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-2-氨甲基-4-巰基吡咯烷(4.1g)的二氯甲烷(250ml)溶液中加入三乙胺(8.87ml)和三甲基氯甲硅烷(6.73ml)。將混合物攪拌1小時40分鐘，與三乙胺(8.87ml)和1M氨磺酰氯的二氯甲烷(64ml)溶液混合，并攪拌1小時。反應(yīng)混合物用稀鹽酸酸化。分出有機層，用1N鹽酸(21ml)和甲醇(50ml)稀釋，于室溫攪拌35分鐘，并傾入水中。分出有機層，用水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-2-氨磺?；奔谆?4-巰基吡咯烷(4.57g)。產(chǎn)率69%。無色糖漿。
NMR δ (CDCl3)ppm1.46(s，9H)，1.5-1.8(m，1H)，1.71(d，J＝6.6Hz，1H)，2.5-2.67(m，1H)，3.0-3.46(m，4H)，3.85-4.2(m，2H)，4.6(brs，2H).
IR (CHCl3)cm-13420，3340，3270，1679.
吡咯烷衍生物的制備實施例5 步驟1.羥甲基化合物的制備冰冷卻下向(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-羧酸甲酯(79.4g∶205mmole)的四氫呋喃(200ml)和乙醇(300ml)混合物的溶液中分幾批加入硼氫化鈉(14g)。將混合物于室溫攪拌4小時，反應(yīng)混合物用濃硫酸中和，真空濃縮至約一半體積，用水稀釋，并用乙酸乙酯萃取。萃取液連續(xù)用碳酸氫鈉水溶液、水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶2)純化，得(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(58.7g)。產(chǎn)率81.7%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.8-2.2(m，1H)，2.3-2.5(m，1H)，3.01(s，3H)，3.57(d，J＝4.4Hz，1H)，3.64(d，J＝4.4Hz，1H)，3.81(s，3H)，3.82-4.3(m，3H)，5.09(s，2H)，5.21(brs，1H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，7.31(d，J＝8.8Hz，2H).
步驟2.甲苯磺酰基化合物的制備向(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(8.7g∶24.2mmole)的二氯甲烷(80ml)溶液中加入三乙胺(4.05ml)、對甲苯磺酰氯(5.08g)和二甲氨基吡啶(148mg)。將混合物于室溫攪拌過夜。反應(yīng)混合物用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶1)純化，得(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇對甲苯磺酸酯(11.75g)。產(chǎn)率95%。
NMR δ (CDCl3)ppm2.2-2.5(m)，2.44(s，3H)，2.98(s，3H)，3.4-3.6(m，2H)，3.82(s，3H)，3.8-4.6(m)，5.03，4.95(ABq，J＝12Hz，2H)，5.2(brs，1H)，6.89(d，J＝8.6Hz，2H)，7.18-7.4(m，4H)，7.6-7.8(m，2H).
IR (CHCl3)cm-11698，1612.
步驟3.苯二甲酰亞氨基化合物的制備向(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇對甲苯磺酸酯(6.35g;12.27mmol)的二甲基甲酰胺(60ml)溶液中加入苯鄰二甲酰亞胺鉀(2.7g)。混合物于70℃攪拌4小時。將反應(yīng)混合物傾入冰水中并用乙酸乙酯萃取。萃取液連續(xù)用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝2∶1)純化，得(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-苯二甲酰亞氨基甲基吡咯烷(4.65g)。產(chǎn)率77.5%。
NMR δ (CDCl3)ppm2-2.3(m，1H)，2.4-2.6(m，1H)，2.95，2.97(2xs，3H)，3.43-4.2(m，5H)，3.80(s，3H)，[5.01(s)+5.07，4.96(ABq，12.2Hz)，2H]，5.13-5.3(m，1H).
IR (CHCl3)cm-11774，1716，1613.
步驟4.乙酰硫基化合物的制備向(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-苯二甲酰亞氨基甲基吡咯烷(4.0g∶8.19mmole)的二甲基甲酰胺(40ml)溶液中加入硫代乙酸鉀(2.1g)?；旌衔镉?0℃攪拌3小時。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，連續(xù)地用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝2∶1)純化，得(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-乙酰硫基-2-苯二甲酰亞氨基甲基吡咯烷(3.2g)。產(chǎn)率78%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.7-1.9(m，1H)，2.4-2.7(m，1H)，3.21，3.26(2xd，J＝7Hz，2H)，3.8(s，3H)，3.7-4.2(m)，4.2-4.5(m，1H)，[4.95(s)+5.04，4.83(ABq，J＝12Hz)，2H]，6.83(d，J＝7.6Hz，2H)，7.18-7.3(m，2H)，7.6-7.9(m，4H).
IR (CHCl3)cm-11773，1714.
步驟5.乙?；袜彵蕉柞；鶊F的脫除以及氨磺?；鶊F的引入向(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-乙酰硫基-2-苯二甲酰亞氨基甲基吡咯烷(4.3g∶9.18mmole)的二氯甲烷(13ml)和甲醇(65ml)混合物的溶液中加入水合肼(1.78ml)。將混合物加熱回流4小時，反應(yīng)混合物于真空下濃縮。殘余物溶于二氯甲烷并于氮氣流下過濾以除去固體。濾液用水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。將獲得的含有(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-巰基-2-氨基甲基吡咯烷的殘余物用二氯甲烷(100ml)稀釋，于-78℃加入三乙胺(2.63g)和三甲基氯甲硅烷(2.4ml)，并攪拌20分鐘。向反應(yīng)混合物中加入三乙胺(2.63ml)和1M氨磺酰氯的二氯甲烷溶液(16.5ml)，將混合物攪拌20分鐘。反應(yīng)混合物用稀鹽酸稀釋，與1N鹽酸(9ml)和甲醇(20ml)混合，并于室溫攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物連續(xù)地用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶2)純化，得(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-巰基-2-氨磺酰氨甲基吡咯烷(2.71g)。產(chǎn)率78.6%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.6-2.0(m，2H)，2.4-2.7(m，1H)，3.1-3.8(m，4H)，3.81(s，3H)，3.9-4.2(m，2H)，4.6-5.0(m，2H)，5.04(s，2H)，5.97(br s，1H)，6.89(d，J＝8.6Hz，2H)，7.30(d，J＝8.6Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13668，3424，1683.
吡咯烷衍生物的制備實施例6 步驟1.羥甲基化合物的制備向反式-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基脯氨酸(105.5g∶357.5mmole)的四氫呋喃(1升)溶液中加入三乙胺(54.8ml)。于-30℃滴加氯代甲酸乙酯(35.9ml)后，攪拌混合物20分鐘。于-15至-5℃溫度范圍內(nèi)向反應(yīng)混合物中滴加硼氫化鈉(33.25g)水(120ml)溶液，用濃鹽酸中和，并真空濃縮。向殘余物中加入乙酸乙酯，用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮得(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基-吡咯烷-2-甲醇。
NMR δ (CDCl3)ppm1.6-1.8(m，1H)，1.95-2.2(m，1H)，3.4-3.8(m，4H)，3.8(s，3H)，4.0-4.3(m，1H)，4.37(br s，1H)，5.07(s，2H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，7.30(d，J＝8.8Hz，2H).
步驟2.甲苯磺酰基化合物的制備向(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基吡咯烷-2-甲醇(64g∶227.6mmole)的吡啶(350ml)溶液中加入對甲苯磺酰氯(48g)?；旌衔镉谑覝財嚢?小時，將反應(yīng)混合物傾入冰水中并用乙酸乙酯萃取，萃取液連續(xù)地用水，稀鹽酸和碳酸氫鈉水溶液洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基吡咯烷-2-甲醇對甲苯磺酸酯(60g)。
NMR δ (CDCl3)ppm2.0-2.4(m，2H)，2.44(s，3H)，3.3-3.7(m，2H)，3.82(s，3H)，3.9-4.6(m，4H)，4.8 to 5.1(m，2H)，6.88(d，J＝8.6Hz，2H)，7.2-7.4(m，4H)，7.6-7.8(m，2H).
IR (CHCl3)cm-13446，1693.
步驟3.氨基前體(-NProc＝疊氮基)的制備1)向(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基吡咯烷-2-甲醇對甲苯磺酸酯(8.7g∶20mmole)的二甲基甲酰胺(60ml)溶液中加入疊氮化鈉(1.56g)的水(6ml)溶液?；旌衔镉?0℃攪拌過夜，將反應(yīng)混合物傾入冰水中并用乙酸乙酯萃取。萃取液連續(xù)地用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮，得粗品(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基-2-疊氮甲基吡咯烷(5.6g)。產(chǎn)率92%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.95-2.1(m，2H)，3.2-3.8(m，3H)，3.81(s，3H)，3.83-4.6(m，3H)，5.07(s，2H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，7.31(d，J＝8.8Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13420，2100，1689.
2)向如此獲得的(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基-2-疊氮甲基吡咯烷(5.57g∶18.18mmole)的甲醇(30ml)溶液中加入5%鈀/炭(560mg)和甲酸銨(2.3g)?；旌衔镉?5℃攪拌2小時，將反應(yīng)混合物用二氯甲烷(50ml)稀釋，過濾除去催化劑，并真空濃縮。殘余物于二氯甲烷和乙醚的混合液中結(jié)晶并用乙醚洗滌，得(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基-2-氨甲基吡咯烷甲酸鹽(4.28g)。產(chǎn)率72%。
NMR δ (CDCl3-CD3OD)ppm1.6-1.82(m，1H)，2.1-2.3(m，1H)，2.7-3.7(m，4H)，3.81(s，3H)，4.1-4.4(m，2H)，5.04(s，2H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，7.28(d，J＝8.8Hz，2H)，8.47(s，1H).
IR (CHCl3)cm-13678，3412，1678，1602.
步驟4.引入被保護的氨基，脫保護，并引入氨磺?；鶊F(-NProc二苯二甲酰亞氨基)1)向(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基吡咯烷-2-甲醇對甲苯磺酸酯(24g∶55.1mmole)的二甲基甲酰胺(200ml)溶液中加入鄰苯二甲酰亞胺鉀(15.3g)?；旌衔镉?0℃攪拌4小時，將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，連續(xù)地用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶2)純化，得(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基-2-苯二甲酰亞氨基甲基吡咯烷(18.1g)。產(chǎn)率80%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.9-2.2(m，2H)，3.4-4.05(m，5H)，3.80(s，3H)，4.3-4.6(m，2H)，4.8-5.1(m，2H)，6.83(d，J＝8.2Hz，2H)，7.25(d，J＝8.2Hz，2H)，7.6-7.9(m，4H).
IR (CHCl3)cm-13458，1773，1712.
2)向(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基-2-苯二甲酰亞氨基甲基吡咯烷(5.13g∶12.5mmole)的二氯甲烷(15ml)和甲醇(50ml)混合物的溶液中加入水合肼(1.0ml)?；旌衔锛訜峄亓?小時并真空濃縮。殘余物用二氯甲烷稀釋，過濾除去固體，用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮，得含有主要組分(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基-2-氨甲基吡咯烷的殘余物。
3)于-70℃向上述殘余物的二氯甲烷(70ml)溶液中加入三乙胺(4.6ml)和三甲基氯甲硅烷(3.7ml)。混合物攪拌20分鐘，向反應(yīng)混合物中加入三乙胺(5.5ml)和1M氨磺酰氯的二氯甲烷(34ml)溶液?；旌衔飻嚢?5分鐘，反應(yīng)混合物用稀鹽酸洗滌，與甲醇(50ml)混合，然后于冰冷卻下加入4N鹽酸(3.3ml)混合?；旌衔飻嚢韬?，加入碳酸氫鈉水溶液。分出有機層，用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮，得粗品(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基-2-氨磺酰氨基甲基吡咯烷(3.96g)。
NMR δ (CDCl3)ppm1.8-2.25(m，2H)，3-4.5(m，7H)，3.79(s，3H)，5.03(s，2H)，5.2-5.8(m，2H)，6.08(brs，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，7.29(d，J＝8.8Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13456，1689.
步驟5.甲磺酰基化合物的制備于-70℃向步驟4中獲得的粗品(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-羥基-2-氨磺酰氨基甲基吡咯烷(1.8g∶5mmole)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入三乙胺(0.77ml)和甲磺酰氯(0.39ml)?；旌衔飻嚢?5分鐘，將反應(yīng)混合物用稀鹽酸中和，連續(xù)地用水和鹽水洗滌，并真空濃縮，得粗品(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-氨磺酰氨基甲基吡咯烷(2.26g)。
NMR δ (CDCl3)ppm2-2.5(m，2H)，2.99(s，3H)，3.0-4.3(m，5H)，3.79(s，3H)，4.8-5.3(m，3H)，5.05(s，2H)，5.7-5.85(m，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，7.29(d，J＝8.8Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13606，3416，1690.
步驟6.乙酰硫基化合物的制備向步驟5中獲得的粗品(2S，4R)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-甲磺酰氧-2-氨磺酰氨基甲基吡咯烷(2.26g)的二甲基甲酰胺(12ml)溶液中加入硫代乙酸鉀(1.7g)?；旌衔镉?0℃攪拌5小時，反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，連續(xù)地用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶2)純化，得(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-乙酰硫基-2-氨磺酰氨基甲基吡咯烷(971mg)。
NMR δ (CDCl3)ppm1.8(brs，1H)，2.33(s，3H)，2.4-2.7(m，1H)，3.1-3.5(m)，3.81(s，3H)，3.9-4.2(m，2H)，5.05(s，2H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，7.30(d，J＝8.8Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13414，3276，1688.
步驟7.乙?；鶊F的脫除冰冷卻下向(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-乙酰硫基-2-氨磺酰氨基甲基吡咯烷(982mg∶2.35mmole)的二氯甲烷(2ml)和甲醇(10ml)混合物的溶液中加入1N氫氧化鈉(2.8ml)?；旌衔飻嚢?5分鐘，將反應(yīng)混合物用水稀釋并乙酸乙酯萃取。萃取液連續(xù)地用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶2)純化，得(2S，4S)-1-對甲氧基芐氧羰基-4-巰基-2-氨磺酰氨基甲基吡咯烷(783mg)。產(chǎn)率89%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.6-2.0(m，2H)，2.4-2.7(m，1H)，3.1-3.8(m，4H)，3.81(s，3H)，3.9-4.2(m，2H)，4.6-5.0(m，2H)，5.04(s，2H)，5.97(brs，1H)，6.89(d，J＝8.6Hz，2H)，7.30(d，J＝8.6Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13668，3424，1683.
吡咯烷衍生物的制備實施例7-A
步驟A-1.酯化合物的制備氮氣氛冰冷卻下向順式-4-羥基-D-脯氨酸(16.46g∶125.5mmole)的甲醇(66ml)懸浮液中加入亞硫酰氯(9.16ml∶125.5mmole)，并將混合物于室溫攪拌30分鐘。于40℃將混合物再攪拌反應(yīng)4小時，得(2R，4R)-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷鹽酸化物粗結(jié)晶(25.74g)，產(chǎn)率113%，無色結(jié)晶。
NMR δ (D2O)ppm2.3-2.6(m，2H)，3.33(s，1H)，3.4-3.5(m，2H)，3.84(s，3H)，4.6-4.7(m，2H).
IR (KBr)cm-13320，2980，1728.
步驟A-2.叔丁氧羰基化合物的制備氮氣氛冰冷卻下向(2R，4R)-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷鹽酸化物(25.64g∶125mmole)的二氯甲烷(125ml)懸浮液中滴加三乙胺(19.11ml∶137.5mmole)，將混合物于室溫攪拌5分鐘。然后，滴加二碳酸二叔丁基酯(34.11g∶156.3mmole)的二氯甲烷(125ml)溶液，并將混合物于室溫攪拌40分鐘，得(2R，4R)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷(26.85g)，產(chǎn)率88%，無色結(jié)晶。
NMR δ (CDCl3)ppm1.46(d，J＝8.4Hz，9H)，2.0-2.2(m，1H)，2.2-2.5(m，1H)，3.4-3.8(m，2H)，3.79(d，J＝3.0Hz，3H)，4.2-4.5(m，2H).
IR (KBr)cm-13460，1730，1680.
步驟A-3.甲磺酰基化合物的制備氮氣氛冰冷卻下向(2R，4R)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷(9.81g∶40mmole)的二氯甲烷(49ml)溶液中加入三乙胺(6.67ml∶48mmole)和甲磺酰氯(3.70ml∶48mmole)，將混合物攪拌20分鐘，得(2R，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷油狀粗品(13.05g)，產(chǎn)率101%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.46(d，J＝9.6Hz，9H)，2.5(m，2H)，3.02(s，3H)，3.76(s，3H)，3.8(m，2H)，4.3-4.6(m，1H)，5.2-5.3(m，1H).
步驟A-4.羥甲基化合物的制備氮氣氛冰冷卻下向(2R，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷(11.21g∶34.4mmole)的四氫呋喃(34ml)和乙醇(51ml)混合物的溶液中加入硼氫化鈉(5.21g∶137.7mmole)，混合物于室溫攪拌75分鐘，得(2R，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(8.47g)，產(chǎn)率83%，無色結(jié)晶。
NMR δ (CDCl3)ppm1.48(s，9H)，1.9-2.2(m，1H)，2.3-2.5(m，1H)，3.06(s，3H)，3.65(dd，J＝11.2Hz，J＝4.0Hz，1H)，3.5-3.9(m，2H)，3.84(dd，J＝11.2Hz，J＝7.6Hz，1H)，4.1(m，1H)，5.2(m，1H).
IR (KBr)cm-13490，1688.
步驟A-5.乙酰硫基化合物的制備將(2R，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(即底物)和硫代乙酸鉀(KSAc)溶于二甲基甲酰胺(DMF)中，并攪拌混合物，此反應(yīng)條件如表1，步驟A-5所示。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并加入冰水。分出有機層，連續(xù)地用氫氧化鈉水溶液、鹽酸、水和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得(2R，4S)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-甲醇。
NMR δ (CDCl3)ppm1.47(s，9H)，2.05(t，2H)，2.34(s，3H)，3.0-3.3(m，1H)，3.40(dd，J＝11.6Hz，J＝5.2Hz，1H)，3.5-3.9(m，3H)，3.9-4.2(m，2H).
步驟A-6.硫酰氨基的引入a)N-叔丁氧羰基硫酰胺的制備將叔丁醇(4.72ml∶50mmole)的乙酸乙酯(100ml)溶液冷卻至-40℃，向其中滴加氯磺?；惽杷狨?4.35ml∶50mmole)，并將混合物于-18℃攪拌20分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至-72℃，攪拌下通入氨氣(2mole)，并將混合物攪拌50分鐘同時溫?zé)嶂?0℃。反應(yīng)混合物用5N鹽酸(30ml)酸化并將生成的沉淀過濾。分出有機層，連續(xù)地用水和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并減壓濃縮。結(jié)晶殘余物用己烷-乙酸乙酯(1∶5，90ml)洗滌并于乙酸乙酯-己烷中重結(jié)晶，得N-叔丁氧羰基硫酰胺(8.81g)，產(chǎn)率89%，無色結(jié)晶。mp.130-131℃。
NMR δ (CD3SOCD3)ppm1.43(s，9H)，7.27(s，2H).
IR (Nujol)cm-13360，3270，1718，1548.
Elemental Analysis(C5H12N2O4S)Calcd.C，30.60;H，6.17;N，14.28;S，16.34.
FoundC，30.39;H，6.11;N，14.30;S，16.30.
b)硫酰胺化合物的制備冰冷卻下向(2R，4S)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-甲醇(即底物)的四氫呋喃(THF)溶液中連續(xù)加入三苯膦(pph3)、N-叔丁氧羰基硫酰胺(BSMD)和偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)，此反應(yīng)條件如表2，步驟A-6所示。反應(yīng)混合物用甲苯稀釋，濃縮，用甲苯稀釋，并將生成的結(jié)晶濾除。將濾液濃縮，殘余物通過硅膠柱色譜純化，得(2R，4S)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷。
NMR δ (CDCl3)ppm1.41(s，9H)，1.55(s，9H)，1.9-2.0(m，2H)，2.35(s，3H)，3.32(dd，J＝11.4Hz，J＝8.2Hz，1H)，3.6-3.9(m，3H)，3.9-4.1(m，1H)，4.5(m，1H)，6.15(s，2H).
IR (KBr)cm-13420，3320，1706，1686，1666.
步驟A-7.乙?；拿摮?2R，4S)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷(即底物)的二氯甲烷溶液中加入4.92M甲醇中的甲醇鈉(NaOMe)，攪拌混合物，此反應(yīng)條件如表3，步驟A-7所示。將反應(yīng)混合物用水稀釋，分出水層，向其中加入甲苯，并于冰冷卻下用濃鹽酸酸化。分出有機層，連續(xù)地用水和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮，得(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷。mp.90.0-91.5℃。
NMR δ (CDCl3)ppm1.43(s，9H)，1.52(s，9H)，1.72(d，J＝7.0Hz，1H)，1.9-2.0(m，2H)，3.2-3.8(m，5H)，4.5(m，1H)，6.11(s，2H).
IR (KBr)cm-13220，1698，1683.
元素分析 (C15H29O6N3S2)計算值.C43.78，H7.10，N10.21，S15.58.
實驗值.C43.55，H7.11，N10.37，S15.75.
吡咯烷衍生物的制備實施例7-B
步驟B-1.甲酰氧基取代氮氣氛冰冷卻下向(2R，4R)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷(2.45g∶10mmole)的四氫呋喃(10ml)溶液中相繼地加入甲酸(453μl∶12mmole)、三苯膦(3.15g∶12mmole)的偶氮二甲酸二乙酯(1.89ml∶12mmole)，將混合物于相同溫度下攪拌30分鐘，得(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷(2.17g)，產(chǎn)率79%，無色油。
NMR δ (CDCl3)ppm1.44(d，J＝7.8Hz，9H)，2.1-2.6(m，2H)，3.5-3.9(m，5H)，4.4(m，1H)，5.4(m，1H)，8.0(s，1H).
步驟B-2.甲?；拿摮鋮s下向(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷(2.08g∶7.6mmole)的甲醇(21.0ml)溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(7.6ml)，將混合物于相同溫度下攪拌25分鐘，得(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷(1.86g)。產(chǎn)率100%，無色油。
NMR δ (CDCl3)ppm1.44(d，J＝9.2Hz，9H)，1.9-2.4(m，2H)，3.4-3.7(m，2H)，3.74(s，3H)，4.3-4.6(m，2H).
步驟B-3.甲磺酰基化合物的制備氮氣氛冰冷卻下向(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷(3.17g∶12.9mmole)的二氯甲烷(16ml)溶液中加入三乙胺(2.15ml∶15.5mmole)和甲磺酰氯(1.19ml∶15.5mmole)，將混合物攪拌反應(yīng)30分鐘，得油狀(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷(4.13g)，產(chǎn)率99%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.46(d，J＝8.4Hz，9H)，2.3(m，1H)，2.5-2.8(m，1H)，3.08(s，3H)，3.8-4.0(m，5H)，4.3-4.6(m，1H)，5.3(m，1H).
步驟B-4.羥甲基化合物的制備氮氣氛冰冷卻下向(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷(3.96g∶12.2mmole)的四氫呋喃(12ml)和乙醇(18ml)混合物的溶液中加入硼氫化鈉(1.85g∶48.8mmole)，將混合物于室溫攪拌45分鐘，得(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(2.97g)，產(chǎn)率83%，無色結(jié)晶。mp.95-96℃。
NMR δ (CDCl3)ppm1.49(s，9H)，1.7-2.1(m，1H)，2.3-2.5(m，1H)，3.06(s，3H)，3.4-3.7(m，2H)，3.7-4.0(m，2H)，4.0-4.3(m，1H)，5.2(m，1H).
IR (KBr)cm-13400，3420，1648.
步驟B-5.乙酰硫基基團取代在表1所示步驟B-5的條件下令(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(即底物)如制備實施例7-A中步驟A-5相同的方法反應(yīng)，得(2R，4R)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-甲醇。
NMR δ (CDCl3)ppm1.47(s，9H)，2.34(s，3H)，2.4-3.2(m，2H)，3.58-4.1(m，6H).
IR (CHCl3)cm-13380，1690.
步驟B-6.硫酰氨基的引入如制備實施例7-A中步驟A-6(a)相同的方法制備N-叔丁氧羰基硫酰胺。在表2所示步驟B-6的條件下，令(2R，4R)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-甲醇(即底物)如制備實施例7-A中步驟A-6(b)相同的方法與獲得的N-叔丁氧羰基硫酰胺反應(yīng)，得(2R，4R)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷。
NMR δ (CDCl3)ppm1.43(s，9H)，1.53(s，9H)，2.34(s，3H)，2.5(m，1H)，3.15(dd，J＝12.2Hz，J＝6.2Hz，1H)，3.58(dd，J＝14.8Hz，J＝3.2Hz，1H)，3.8-4.1(m，2H)，4.16(dd，J＝12.2Hz，J＝7.8Hz，1H)，4.4-4.7(m，1H)，6.11(s，2H).
IR (CHCl3)cm-13360，3200，1710，1688.
步驟B-7.乙酰基的脫除在表3所示步驟B-7條件下，如制備實施例7-A中步驟A-7相同的方法將(2R，4R)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷(即底物)脫乙酰化，得(2R，4R)-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷。mp.92-93℃。
NMR δ (CDCl3)ppm1.2-1.5(m，1H)，1.42(s，9H)，1.54(s，9H)，1.82(d，J＝6.2Hz，1H)，2.5-2.7(m，1H)，4.09，3.05(ABX，J＝12.0Hz，J＝7.4Hz，J＝8.2Hz，2H)，4.06，3.62(ABX，J＝15.0Hz，J＝10.8Hz，J＝3.2Hz，2H)，4.2-4.6(m，1H)，6.08(s，2H).
IR (CHCl3)cm-13380，3220，1718，1680.
吡咯烷衍生物的制備實施例7-C 步驟C-1.酯化合物的制備氮氣氛冰冷卻下向反式-4-羥基-L-脯氨酸(200g∶1.525mole)的甲醇(800ml)懸浮液中滴加乙酰氯(163ml∶2.288mole)。將混合物溫?zé)嶂潦覝?，與亞磺酰氯(55.7ml∶0.763mole)混合，并于40℃攪拌4小時，得(2S，4R)-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷鹽酸化物(244.27g)，產(chǎn)率88%，無色結(jié)晶。
NMR δ (D2O)ppm1.8-2.0(m，1H)，2.0-2.2(m，1H)，2.9-3.1(m，1H)，3.17(dd，J＝12.6Hz，J＝3.6Hz，1H)，3.49(s，3H)，4.2-4.4(m，2H).
IR (KBr)cm-13380，3330，2695，2960，1742.
步驟C-2.叔丁氧羰基化合物的制備氮氣氛冰冷卻下，向(2S，4R)-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷鹽酸化物(12.71g∶70mmole)的二氯甲烷(70ml)懸浮液中滴加三乙胺(10.7ml∶77mmole)，將混合物于室溫攪拌5分鐘。向其中滴加二碳酸二叔丁基酯(19.10g∶87.5mmole)的二氯甲烷(72ml)溶液，并將混合物于室溫攪拌45分鐘，得(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷(14.06g)，產(chǎn)率82%，無色油。
NMR δ (CDCl3)ppm1.44(d，J＝9.6Hz，9H)，1.9-2.4(m，3H)，3.4-3.7(m，2H)，3.74(s，3H)，4.3-4.6(m，2H).
步驟C-3.甲酰氧基取代氮氣氛冰冷卻下，向(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷(7.36g∶30mmole)的四氫呋喃(30ml)溶液中連續(xù)加入甲酸(1.36ml∶36mmole)。三苯膦(9.44g∶36mmole)和偶氮二甲酸二乙酯(5.67ml∶36mmole)，將混合物于相同溫度下攪拌反應(yīng)40分鐘，得(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷(5.38g)，產(chǎn)率66%，無色結(jié)晶。
NMR δ (CDCl3)ppm1.45(d，J＝8.6Hz，9H)，2.2-2.4(m，1H)，2.4-2.7(m，1H)，3.5-3.9(m，2H)，3.75(s，3H)，4.3-4.6(m，1H)，5.3-5.5(m，1H)，7.98(s，1H).
IR (KBr)cm-13420，1748，1712，1681.
步驟C-4.甲?；拿摮鋮s下向(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷(5.12g∶18.7mmole)的甲醇(51.0ml)溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(18.7ml)。將混合物于相同溫度下攪拌20分鐘，得(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷(4.09g)，產(chǎn)率89%，無色結(jié)晶。
NMR δ (CDCl3)ppm1.44(d，J＝8.2Hz，9H)，2.0-2.2(m，1H)，2.2-2.5(m，1H)，3.2-3.8(m，3H)，3.79(d，J＝2.8Hz，3H)，4.2-4.5(m，2H).
IR (KBr)cm-13460，1728，1677.
步驟C-5.甲磺酰基化合物的制備按照制備實施例7-A中步驟A-3相似的方法，在氮氣氛冰冷卻下將(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷在二氯甲烷中與三乙胺和甲磺酰氯甲磺?；?，得(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷。mp.90.0-91.5℃。
步驟C-6.羥甲基化合物的制備按照制備實施例7-A中步驟A-4相似的方法，令(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷反應(yīng)，得(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇。
步驟C-7.乙酰硫基化合物的制備在表1所示步驟C-7條件下，按照制備實施例7-A中步驟A-5相似的方法令(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(即底物)反應(yīng)得(2S，4R)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-甲醇。
NMR δ (CDCl3)ppm1.47(s，9H)，2.05(t，2H)，2.34(s，3H)，3.0-3.3(m，1H)，3.40(dd，J＝11.6Hz，J＝5.2Hz，1H)，3.5-3.9(m，3H)，3.9-4.2(m，2H).
步驟C-8.硫酰氨基的引入按照制備實施例7-A中步驟A-6(a)相同的方法制備N-叔丁氧羰基硫酰胺。在表2所示步驟C-8條件下，按照制備實施例7-A中步驟A-6(b)相同的方法令(2S，4R)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-甲醇(即底物)與N-叔丁氧羰基硫酰胺反應(yīng)，得(2S，4R)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷。
NMR δ (CDCl3)ppm1.41(s，9H)，1.55(s，9H)，1.9-2.0(m，2H)，2.35(s，3H)，3.32(dd，J＝11.4Hz，J＝8.2Hz，1H)，3.6-3.9(m，3H)，3.9-4.1(m，1H)，4.5(m，1H)，6.15(s，2H).
IR (KBr)cm-13420，3320，1706，1686，1666.
步驟C-9.乙?；拿摮诒?所示步驟C-9條件下，按照制備實施例7-A中步驟A-7相似的方法令(2S，4R)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷(即底物)反應(yīng)，得(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷。mp.90.0-91.5℃。
NMR δ (CDCl3)ppm1.43(s，9H)，1.52(s，9H)，1.72(d，J＝7.0Hz，1H)，1.9-2.0(m，2H)，3.2-3.8(m，5H)，4.5(m，1H)，6.11(s，2H).
IR (KBr)cm-13220，1698，1683.
吡咯烷衍生物的制備實施例7-D 步驟D-1.N-叔丁氧羰基化合物的制備于-20℃向反式-4-羥基-L-脯氨酸(50g∶0.381mole)的甲醇(250ml)懸浮液中加入4N氫氧化鈉(95.4ml∶0.381mole)和二碳酸二叔丁酯(91.6g∶0.42mole)的甲醇(55ml)溶液，將混合物于20℃攪拌3小時。將反應(yīng)混合物濃縮并用甲苯(100ml)稀釋并振搖。分出水層，并于冰冷卻下與濃鹽酸(36ml)、飽和鹽水(100ml)和乙酸乙酯(800ml)混合。分出有機層，用飽和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并減壓濃縮。殘余物由甲苯-乙酸乙酯混合液中重結(jié)晶，得(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-2-羧基-4-羥基吡咯烷(84.7g)，產(chǎn)率96%，無色結(jié)晶。mp.126-128℃。
NMR δ (CDCl3)ppm1.43，1.46(2xs，9H)，1.95-2.36(m，2H)，3.36-3.6(m，2H)，4.23-4.44(m，2H).
IR (CHCl3)cm-13360，1735，1656.
步驟D-2.羧基的保護于-30℃氮氣氛下向(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-羥基-L-脯氨酸(84.5g∶0.365mole)的二氯甲烷(1.27升)溶液中加入三乙胺(61.1ml∶0.438mole)和氯甲酸乙酯(38.4ml∶0.402mole)，并將混合物攪拌40分鐘。
步驟D-3.O-甲磺?；衔锏闹苽鋵⒉襟ED-2所得的含有(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-2-乙氧羰氧羰基-4-羥基吡咯烷的最終反應(yīng)混合物冷至-40℃，加入三乙胺(61.1ml∶0.438mole)和甲磺酰氯(31.1ml∶0.402mole)，并將混合物攪拌40分鐘。
步驟D-4.還原將步驟D-3所得的含有(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-2-乙氧羰氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷的最終反應(yīng)混合物冷至-40℃，加入溴化四正丁基銨(11.8g∶0.0365mole)和硼氫化鈉(52.5g∶1.35mole)的水(55ml)溶液，令混合物溫至-10℃并攪拌1小時。水層用稀鹽酸酸化至PH3，分出有機層，連續(xù)地用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，硫酸鎂干燥，并減壓濃縮。殘余物由甲苯-己烷混合液中重結(jié)晶，得(2S，4R)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(101.3g)，產(chǎn)率94%，無色結(jié)晶。mp.95-96℃。
NMR δ (CDCl3)ppm1.48(s，9H)，1.78-2.02(m，1H)，2.3-2.48(m，1H)，3.05(s，3H)，3.5-3.65(m，2H)，3.65-4.0(m，2H)，4.03-4.25(m，1H)，5.2(s，1H).
IR (CHCl3)cm-13460，1680.
步驟D-5.乙酰硫基取代于65℃將(2R，4S)-1-叔丁氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(即底物)(11.8g∶40mmole)和硫代乙酸鉀(5.94g∶52mmole)的二甲基甲酰胺(120ml)的溶液攪拌3.75小時。將反應(yīng)混合物與乙酸乙酯(330ml)、冰水(100ml)和1N鹽酸(20ml)混合以調(diào)節(jié)水層至pH4。分出有機層，連續(xù)地用水和飽和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯-乙酸乙酯＝2∶1)純化，得(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-甲醇(9.48g)，產(chǎn)率86%，淺桔黃色油。
NMR δ (CDCl3)ppm1.47(s，9H)，2.34(s，3H)，2.4-3.2(m，2H)，3.58-4.1(m，6H).
IR (CHCl3)cm-13380，1690.
步驟D-6.硫酰胺基的引入按照制備實施例7-A中步驟A-6(a)相同的方法制備N-叔丁氧羰基硫酰胺。冰冷卻下，向(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-甲醇(即底物)(9.04g∶32.8mmole)的四氫呋喃(THF)(95ml)溶液中連續(xù)地加入三苯膦(PPh3)(10.16g∶38.7mmole)、N-叔丁氧羰基硫酰胺(BSMD)(9.66g∶49.2mmole)和偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)(6.20ml∶39.4mmole)，此反應(yīng)條件如表2，步驟D-6所示。將反應(yīng)混合物用甲苯(30ml)稀釋，濃縮，用甲苯(60ml)稀釋，并將生成的結(jié)晶濾掉，將濾液濃縮。
步驟D-7.乙酰基的脫除將步驟D-6中獲得的殘余物溶于甲苯(95ml)，然后于-35℃加入4.92M甲醇(20ml∶98.4mmole)中的甲醇鈉，并將混合物攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物用水(100ml)稀釋，分出水層，加入乙酸乙酯(300ml)，冰冷卻下與濃鹽酸(10ml)混合，并攪拌混合物，分出有機層，連續(xù)地用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化。獲得的無色油于甲苯-己烷混合液中重結(jié)晶，得(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷(9.32g)，產(chǎn)率69%，無色結(jié)晶。mp.92-93℃。
NMR δ (CDCl3)ppm1.2-1.5(m，1H)，1.42(s，9H)，1.54(s，9H)，1.82(d，J＝6.2Hz，1H)，2.5-2.7(m，1H)，4.09，3.05(ABX，J＝12.0Hz，J＝7.4Hz，J＝8.2Hz，2H)，4.06，3.62(ABX，J＝15.0Hz，J＝10.8Hz，J＝3.2Hz，2H)，4.2-4.6(m，1H)，6.08(s，2H).
IR (CHCl3)cm-13380，3220，1718，1680.
元素分析 (C15H29N3O6S2)計算值C，43.78;H，7.10;N，10.21;S，15.58實驗值C，43.64;H，7.10;N，10.19;S，15.34表1KSAcDMF溫度.時間產(chǎn)率步驟當量.a)體積.b)℃ 分. %A-51.5520倍709075B-51.205倍7030081C-71.3010倍6510570D-51.3010倍6522586a)對底物的摩爾比b)對底物重量(g)的溶劑的體積(ml)
表2THF PPh3BSMD DEAD 溫度. 時間產(chǎn)率步驟體積.c)當量.d)當量.d)當量.d)分. %A-620倍1.341.201.3045℃15076B-67倍1.501.661.500℃30084C-810倍1.281.501.30室溫24082D-6 11倍 1.18 1.50 1.20 室溫 180 --e)c)對底物重量(g)的溶劑的體積(ml)d)對底物的摩爾比e)未檢測表3NaOMe 溶劑g)溫度. 時間產(chǎn)率步驟當量.f)體積.h)℃ 分. %A-71.515fold-4012072B-72.05fold-106070C-93.04fold-353085D-73.011fold-353069f)對底物的摩爾比g)在步驟A-7、B-7、C-9中使用二氯甲烷和在步驟D-7中使用甲苯h)對底物重量(g)的溶劑的體積(ml)吡咯烷衍生物的的制備實施例8
步驟1.對氯苯磺?；衔锏闹苽涞獨夥帐覝叵孪?2S，4R)-1-烯丙氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(13.4g∶50mmole)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入對氯苯磺酰氯(12.66g∶60mmole)并再滴加三乙胺(8.69ml∶62.5mmole)的二氯甲烷(10ml)溶液。將混合物于室溫攪拌過夜。反應(yīng)混合物連續(xù)地用碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空濃縮，并通過硅膠色譜(甲苯-乙酸乙酯)純化，得油狀粗品(2S，4R)-1-烯丙氧羰基-2-對氯苯磺酰氧基甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷(23.73g)，產(chǎn)率105%。
NMR δ (CDCl3)ppm2.2-2.6(m，2H)，3.04(s，3H)，3.58(dd，J＝5.0Hz，J＝11.4Hz，1H)，3.8-4.0(m，1H)，4.1-4.3(m，3H)，4.5(m，3H)，5.1-5.4(m，3H)，5.7-6.0(m，1H).
步驟2.苯二甲酰亞氨基化合物的制備氮氣氛下向(2S，4R)-1-烯丙氧羰基-2-對氯苯磺酰氧甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷(23.7g∶約50mmole)的二甲基甲酰胺(50ml)溶液中加入鄰苯二甲酰亞胺鉀(10.2g∶55mmole)，并將混合物于60℃攪拌3.5小時。將反應(yīng)混合物傾入攪拌的冰水(500ml)和乙酸乙酯(500ml)的混合液中，有機層連續(xù)地用水(4次)和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物于正己烷和甲苯的混合液中重結(jié)晶，濾除固體并將濾液通過硅膠色譜(甲苯-乙酸乙酯)純化，得粗品(2S，4R)-1-烯丙氧羰基-2-苯二甲酰亞氨基甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷(12.41g)，產(chǎn)率61%，無色油。
步驟3.乙酰硫基化合物的制備于攪拌下60℃將(2S，4R)-1-烯丙氧羰基-2-苯二甲酰亞氨基甲基-4-甲磺酰氧基吡咯烷(12.4g∶30.46mmole)和90%硫代乙酸鉀(5.22g∶45.69mmole)的二甲基甲酰胺(130ml)溶液加熱4小時。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(200ml)和冰水(200ml)稀釋。分出有機層，連續(xù)地用水(3次)和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得粗品(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-苯二甲酰亞氨基甲基吡咯烷(9.33g)，產(chǎn)率81%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.7-1.9(m，1H)，2.33(s，3H)，2.4-2.7(m，1H)，3.25(dd，J＝6.8Hz，J＝11.4Hz，1H)，3.7-4.0(m，2H)，4.0-4.2(m，2H)，4.3-4.6(m，3H)，5.0-5.3(m，2H)，5.7-5.9(m，1H)，7.7(m，2H)，7.85(m，2H).
步驟4.鄰苯二甲?；鸵阴；拿摮虼制?2S，4S)-1-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-苯二甲酰亞氨基甲基吡咯烷(5.61g∶14.90mmole)的二氯甲烷(5.4ml)和甲醇(5.4ml)溶液中加入一水合肼(2.17ml∶44.7mmole)，將混合物于60℃攪拌4小時。濾除反應(yīng)混合物中的固體，用二氯甲烷(70ml)洗滌并將洗液與濾液合并。將混合物濃縮，得粗品(2S，4S)-2-氨甲基-1-烯丙氧羰基-4-巰基吡咯烷(2.80g)，產(chǎn)率68%，油。
步驟5.氨磺酰基化合物的制備于-50℃15分鐘內(nèi)向(2S，4S)-2-氨甲基-1-烯丙氧羰基-4-巰基吡咯烷(2.80g∶約13.14mmole)的二氯甲烷(66ml)溶液中滴加三乙胺(4.02ml∶28.91mmole)和三甲基氯甲硅烷(3.76ml∶28.91mmole)，將混合物于相同溫度下攪拌20分鐘。于-70℃20分鐘內(nèi)向反應(yīng)混合物中滴加三乙胺(0.92ml∶6.57mmole)和氨磺酰氯(19.37mmole)的二氯甲烷(6.8ml)溶液，并將混合物攪拌30分鐘。于-50℃1小時內(nèi)再向反應(yīng)混合物中加入三乙胺(3.84ml∶27.59mmole)，于相同溫度下將反應(yīng)混合物靜置過夜并真空濃縮。殘余的油通過硅膠柱色譜(乙酸乙酯)純化，得(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷(2.64g)，產(chǎn)率68%，白色粉未。
NMR δ (CDCl3)ppm1.4-1.6(m，1H)，1.83(d，J＝6.2Hz，1H)，2.5-2.7(m，1H)，3.11(dd，J＝8.2Hz，J＝11.6Hz，1H)，3.3-3.4(m，1H)，3.71(dd，J＝2.9Hz，J＝15.2Hz，1H)，4.13(dd，J＝7.3Hz，J＝11.7Hz，1H)，4.16(dd，J＝10.3，14.9Hz，1H)，4.3-4.6(m，3H)，4.7(m，2H)，5.2-5.4(m，4H)，5.8-6.0(m，2H)，6.0(m，2H).
IR (CHCl3)cm-1L684，1158.
吡咯烷衍生物的制備實施例9 步驟1.N-被保護的和O-甲磺酰基化合物的制備氮氣氛冰冷卻下向(2S，4R)-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷鹽酸化物(17.0g∶100mmole)的二氯甲烷(200ml)懸浮液中加入三乙胺(29.2ml∶210mmole)，混合物于室溫攪拌5分鐘，滴加并與氯甲酸烯丙酯(11.2ml∶100mmole)的二氯甲烷(20ml)溶液混合，于室溫攪拌1小時，并用水(250ml)稀釋。分出有機層，連續(xù)地用水和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮，得油狀(2S，4R)-1-烯丙氧羰基-4-羥基-2-甲氧羰基吡咯烷(21.82g)。氮氣氛冰冷卻下，向此產(chǎn)物的二氯甲烷(100ml)溶液中加入三乙胺(16.7ml∶120mmole)和甲磺酰氯(9.2ml∶120mmole)，將混合物攪拌10分鐘。反應(yīng)混合物連續(xù)地用碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空濃縮，并通過硅膠色譜(甲苯-乙酸乙酯)純化，得油狀(2S，4R)-1-烯丙氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷(27.62g)，產(chǎn)率90%。
NMR δ (CDCl3)ppm2.2-2.4(m，1H)，2.2-2.5(m，1H)，2.5-2.8(m，2H)，3.06(s，3H)，3.74＆3.77(2 x s，3H)，3.8-4.0(m，2H)，4.4-4.7(m，3H)，5.2-5.4(m，3H)，5.8 to 6.0(m，1H).
步驟2.羥甲基化合物的制備氮氣氛冰冷卻下，向(2S，4R)-1-烯丙氧羰基-4-甲磺酰氧基-2-甲氧羰基吡咯烷(27.12g∶74.0mmole)的四氫呋喃(94ml)和乙醇(140ml)混合物的溶液中加入硼氫化鈉(12g∶31.7mmole)，混合物于室溫攪拌4小時。冰冷卻下向反應(yīng)混合物中滴加濃硫酸(8.8ml∶158.4mmole)，真空下將反應(yīng)混合物濃縮至一半體積，并用乙酸乙酯(100ml)和冰水(100ml)稀釋。分出有機層，連續(xù)地用碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮，得(2S，4R)-1-烯丙氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(19.33g)，產(chǎn)率77%，無色油。
NMR δ (CDCl3)ppm1.9-2.1(m，1H)，2.3-2.5(m，1H)，3.05(s，3H)，3.5-3.7(m，2H)，3.7-4.1(m，2H)，4.1-4.3(m，1H)，4.6(m，2H)，5.2-5.4(m，3H)，5.8-6.1(m，1H).
步驟3.乙酰硫基化合物的制備攪拌下65℃將(2S，4R)-1-烯丙氧羰基-4-甲磺酰氧基吡咯烷-2-甲醇(19.32g∶69.17mmole)和90%硫代乙酸鉀(10.73g∶89.9mmole)的二甲基甲酰胺(217ml)的溶液加熱5小時，向反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯(200ml)和冰水(200ml)。分出有機層，連續(xù)地用0.05N氫氧化鈉水溶液、0.1N鹽酸、水和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠色譜純化，得(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基吡咯烷-2-甲醇(15.34g)，產(chǎn)率90%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.5-1.7(m，1H)，2.34(s，3H)，2.4-2.6(m，1H)，3.19(dd，J＝8.0Hz，J＝11.5Hz，1H)，3.6-3.8(m，2H)，3.8-4.0(m，1H)，4.0-4.2(m，2H)，4.6(m，2H)，5.2 to 5.4(m，2H)，5.8 to 6.1(m，1H).
步驟4.硫酰胺化合物的制備冰冷卻下向(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基吡咯烷-2-甲醇(8.02g∶約30mmole)的乙酸乙酯(83ml)溶液中連續(xù)地加入三苯膦(9.44g∶13.6mmole)、N-烯丙氧羰基硫酰胺(3.12g∶15.9mmole)和偶氮二甲酸二乙酯(5.67ml∶36mmole)，混合物于冰冷卻下攪拌55分鐘并于室溫攪拌4小時。將反應(yīng)混合物溶于甲苯(60ml)，濃縮，用甲苯(60ml)稀釋，過濾分離除去結(jié)晶，并將濾液濃縮。殘余物通過硅膠色譜純化，得(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-(N-氨磺?；?N-烯丙氧羰基氨基)甲基吡咯烷(6.74g)，產(chǎn)率55%，無色油。
NMR δ (CDCl3)ppm1.5-1.7(m，1H)，2.35(s，3H)，2.5-2.7(m，1H)，3.19(dd，J＝6.3Hz，J＝11.5Hz，1H)，3.68(dd，J＝3.8Hz，J＝14.5Hz，1H)，3.9-4.3(m，3H)，4.3-4.7(m，5H)，5.2-5.4(m，4H)，5.8-6.1(m，4H).
步驟5.乙?；拿摮?30℃向(2S，4S)-4-乙酰硫基-1-烯丙氧羰基-2-(N-氨磺?；?N-烯丙氧羰基氨基)甲基吡咯烷(6.70g∶16.4mmole)的甲苯(50ml)溶液中加入4.92M甲醇中的甲醇鈉(5.0ml∶24.7mmole)，將混合物攪拌30分鐘，并用水(55ml)稀釋。分出有機層，用甲苯(50ml)稀釋，冰冷卻下濃鹽酸(2.3ml)酸化，攪拌。分出有機層，連續(xù)地用水和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥并真空濃縮。殘余的油通過硅膠色譜(甲苯-乙酸乙酯)純化，得(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(N-氨磺?；?N-烯丙氧羰基氨基)甲基-4-巰基吡咯烷(4.89g)，產(chǎn)率78%，無色油。
NMR δ (CDCl3)ppm1.5-1.7(m，1H)，2.35(s，3H)，2.5-2.7(m，1H)，3.19(dd，J＝6.3Hz，J＝11.5Hz，1H)，3.68(dd，J＝3.8Hz，J＝14.5Hz，1H)，3.9-4.3(m，3H)，4.3-4.7(m，5H)，5.2-5.4(m，4H)，5.8-6.1(m，4H).
IR (CHCl3)cm-11718，1684，1179，1160.
實施例

實施例1.(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備于-25℃向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-氧代-1-甲基-1-碳代青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(1.45g)的乙腈(15ml)溶液中連續(xù)加入二苯基磷酰氯(0.953ml)和二異丙基乙胺(0.872ml)，將混合物于室溫攪拌1小時，冰冷卻下向此混合物中加入2-氨磺酰氨基甲基-1-叔丁氧羰基-4-巰基吡咯烷(1.69g)和二異丙基乙胺(0.945ml)，并將混合物攪拌22小時。將反應(yīng)混合物與1N鹽酸(15ml)混合并用乙酸乙酯稀釋。分出有機層，用水洗滌，硫酸鈉干燥并濃縮。殘余物通過10%濕硅膠柱色譜純化，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-氨磺酰氨基甲基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(1.61g)，產(chǎn)率60%，淺黃色泡沫。
NMR δ (CDCl3)ppm1.25(d，J＝7.2Hz，3H)，1.32(d，J＝6.4Hz，3H)，1.47(s，9H)，1.75-2.0(m，1H)，2.4-2.65(m，1H)，2.61(brs，4H)，3.1-3.7(m，6H)，3.81(s，3H)，3.75-4.25(m，4H)，5.19，5.25(ABq，J＝12.1Hz，2H)，6.89(d，J＝8.6Hz，2H)，7.39(d，J＝8.6Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13400，3290，1770，1682.
步驟2.脫保護于-60℃向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-氨磺酰氨基甲基-1-叔丁氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(1.083g)的二氯甲烷(16.5ml)、苯甲醚(1.52ml)和硝基甲烷(3.1ml)混合物的溶液中滴加1.0M氯化鋁的硝基甲烷(12.93ml)溶液。將混合物攪拌2小時慢慢溫?zé)嶂?40℃，反應(yīng)混合物傾入乙酸鈉(3.18g)的水(24ml)溶液中，連續(xù)地用乙醚和乙醚-石油醚洗滌，脫鹽并通過苯乙烯-二乙烯苯共聚物樹脂柱色譜純化，并將目的組分冷凍干燥，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-氨磺酰氨基甲基-1-吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(0.429g)，產(chǎn)率67%，淺黃色泡沫。
NMR δ (D2O)ppm1.22(d，J＝7.2Hz，3H)，1.27(d，J＝6.3Hz，3H)，1.64-1.82(m，1H)，2.62-2.80(m，1H)，3.26 to 3.59(m，5H)，3.63-3.76(m，1H)，3.84-4.10(m，2H)，4.16-4.29(m，2H).
IR (KBr)cm-13400，1750.
MIC( /ml)金黃色葡萄球菌菌株362625，釀膿鏈球菌 C203＜0.003.
實施例2.(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的偶合2步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備冰冷卻下向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-二苯氧磷酰氧基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對硝基芐基酯(3.04g∶5.12mmole)的乙腈(30ml)溶液中加入二異丙基乙胺(1.16ml∶1.3當量)和2-氨磺酰氨基甲基-1-對硝基芐氧羰基-4-巰基吡咯烷(2.4g∶1.2當量)的乙腈(20ml)溶液，冰冷卻下將混合物攪拌140分鐘。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，連續(xù)地用水和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥并濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯)純化，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-氨磺酰氨基甲基-1-對硝基芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對硝基芐基酯(3.35g)，產(chǎn)率89%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.28(d，J＝7Hz，3H)，1.37(d，J＝6Hz，3H)，4.68(s，2H)，5.22，5.50(ABq，J＝14Hz，2H)，5.23(s，2H)，7.52(d，J＝9Hz，2H)，7.65(d，J＝9Hz，2H)，8.21(d，J＝2.5Hz，2H)，8.26(d，J＝2.5Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-11773，1720，1704.
步驟2.脫保護向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-氨磺酰氨基甲基-1-對硝基芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對硝基芐基酯(3g)的四氫呋喃(60ml)和0.1M-MES緩沖液(pH7.0)混合物的溶液中加入催化劑10%鈀/炭(2g)，于大氣壓氫氣流下將混合物振搖4小時。將反應(yīng)混合物過濾以除去催化劑，用乙酸乙酯洗滌以除去中性物質(zhì)，濃縮。殘余的水溶液通過苯乙烯-二乙烯苯共聚物樹脂柱色譜純化。將用5-10%乙醇水洗脫的組分冷凍干燥，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-氨磺酰氨基甲基-1-吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(1.42g)，產(chǎn)率84.8%。
實施例3.(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成冰冷卻下向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-二苯氧磷酰氧基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(1mmole)的乙腈(10ml)溶液中加入二異丙基乙胺(1.2mmol)和2-對甲氧芐氧羰基氨磺酰氨基甲基-1-對甲氧基芐氧基羰基-4-巰基吡咯烷(1mmole)，令混合物靜置過夜。將反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，連續(xù)地用稀鹽酸、水、碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，干燥并濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-對甲氧芐氧基羰基氨磺酰氨基甲基-1-對甲氧芐氧基羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯，產(chǎn)率50-80%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.20(d，J＝6.4Hz，3H)，1.34(d，J＝6.1Hz，3H)，3.79(s，9H)，5.00-5.12(m，4H)，5.23，5.15(ABq，J＝14.0Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13390，1770，1740，1693，1610.
步驟2.脫保護于-40℃向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-對甲氧芐氧基羰基氨磺酰氨基甲基-1-對甲氧芐氧基羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(1mmole)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入苯甲醚(10mmole)和2M氯化鋁的硝基甲烷(3-4ml)溶液，混合物于相同溫度下攪拌1-1.5小時。將反應(yīng)混合物傾入乙酸鈉(19-25mmole)水(100ml)溶液中，用二氯甲烷洗滌以除去中性物質(zhì)。水層通過苯乙烯-二乙烯苯聚合物樹脂柱色譜純化。將目的洗脫液冷凍干燥，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-氨磺酰氨基甲基-1-吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸，產(chǎn)率60-70%。
實施例4.(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備于-30℃向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-二苯氧磷酰氧基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(700mg)乙腈(4ml)溶液中加入二異丙基乙胺(182μl)和1-對甲氧芐氧羰基-4-巰基-2-(N-對甲氧芐氧基羰基-N-甲氨磺酰氨基甲基)吡咯烷(401mg)的乙腈(3ml)溶液，冰冷卻下將混合物攪拌90分鐘。將反應(yīng)混合物傾入乙酸乙酯和稀鹽酸的混合液中，分出乙酸乙酯層，連續(xù)地用水、碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜(甲苯∶乙酸乙酯＝1∶2)純化，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-1-對甲氧芐氧羰基-5-(N-對甲氧芐氧基羰基-N-甲氨磺酰氨基甲基)吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(512mg)。
NMR δ (CDCl3)ppm1.22(d，J＝7.0Hz，3H)，1.34(d，J＝6.4Hz，3H)，1.6-1.9(m，1H)，2.25-2.5(m，1H)，3-3.6(m，7H)，3.778(s，3H)，3.783(s，3H)，3.788(s，3H)，5.05(s，2H)，5.13(s，2H)，5.2(ABq，J＝12Hz，2H)，6.3-6.5(m，1H)，6.8-7.0(m，6H)，7.2-7.4(m，6H).
IR (CHCl3)cm-11767，1697.
步驟2.脫保護于-40℃攪拌下向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-1-對甲氧芐氧羰基-5-(N-對甲氧芐氧羰基-N-甲基氨磺酰氨基甲基)吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(610mg)的二氯甲烷(6ml)。硝基甲烷(2ml)和苯甲醚(4ml)混合物的溶液中加入2M氯化鋁的硝基甲烷(2.6ml∶7.5當量)溶液，混合物于-35±5℃下攪拌1小時30分鐘。將反應(yīng)混合物傾入乙酸鈉(1.34g)、水(20ml)和二氯甲烷(20ml)的混合液中。分出水層，進行苯乙烯-二乙烯苯共聚物樹脂柱色譜，并將用8%乙醇洗脫的組分冷凍干燥，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-N-甲氨磺酰氨基-甲基-吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(206mg)，產(chǎn)率68.6%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.22(d，J＝7.0Hz，3H)，1.27(d，J＝6.4Hz，3H)，1.5-1.8(m，1H)，2.63(s，3H)，2.6-2.8(m，1H)，3.1-3.6(m，5H)，3.65，3.72(dd，J＝6.6Hz，J＝7.6Hz，1H)，3.8-4.4(m，4H).
IR (CHCl3)cm-11750，1585.
MIC( /ml)金黃色葡萄球菌菌株 362625，釀膿鏈球菌 C203＜0.003.
實施例5.(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成冰冷卻下向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-二苯氧磷酰氧基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(1mmole)的乙腈(10ml)溶液中加入二異丙基乙胺(1.2mmole)和2-N，N-二甲氨磺酰氨基甲基-1-對甲氧芐氧羰基-4-巰基吡咯烷(1mmole)，令混合物靜置過夜。反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，連續(xù)地用稀鹽酸和水洗滌，干燥，并濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-N，N-二甲氨磺酰氨基甲基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯，產(chǎn)率50-80%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.22(d，J＝7.2Hz，3H)，1.34(d，J＝6.2Hz，3H)，2.76(s，6H)，3.79(s，3H)，3.81(s，3H)，5.06(s，2H)，5.24，5.18(ABq，J＝12Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-13390，1770，1725，1690，1610.
步驟2.脫保護于-40℃向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-N，N-二甲氨磺酰氨基甲基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(1mmole)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入苯甲醚(10mmole)和2M氯化鋁的硝基甲烷(3-4ml)溶液，于相同溫度下將混合物攪拌1-1.5小時。將反應(yīng)混合物傾入乙酸鈉(19-25mmole)的水(100ml)溶液中，并用二氯甲烷洗滌以除去中性物質(zhì)。水層通過苯乙烯-二乙烯苯共聚物樹脂柱色譜純化并將目的組分冷凍干燥，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-N，N-二甲氨磺酰氨基甲基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸，產(chǎn)率60-70%。
NMR δ (D2O)ppm1.2(d，J＝7.4Hz，3H)，1.28(d，J＝6.4Hz，3H)，1.65-1.80(m，1H)，2.65-2.80(m，1H)，2.81(s，6H)，3.29-3.55(m，5H)，3.65-3.75(m，1H)，3.80-4.10(m，2H)，4.16-4.30(m，2H).
IR (KBr)cm-13400，1750.
MIC( /ml)金黃色葡萄球菌菌株 362625，釀膿鏈球菌 C203＜0.003.
實施例6.(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備冰冷卻下向(1R，5S，6S)-2-二苯氧磷酰氧基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸二苯甲基酯(6.88g∶11mmole)的二氯甲烷(70ml)溶液中加入三甲基氯甲硅烷(1.81ml∶14.3mmole)和三乙胺(1.99ml∶14.3mmole)，將混合物攪拌25分鐘。將反應(yīng)混合物傾入到碳酸氫鈉水溶液中，分出有機層，用水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并減壓濃縮。將含有產(chǎn)物(1R，5S，6S)-2-二苯氧磷酰氧基-1-甲基-6-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧乙基]-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸二苯甲基酯的殘余物溶于乙腈(70ml)中，冰冷卻下向其中加入(2S，4S)-1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷(5.43g∶13.2mmole)，將獲得的混合物攪拌4.5小時。向含有產(chǎn)物(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷-3-基]硫代-1-甲基-6-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧乙基]-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸二苯甲基酯的反應(yīng)混合物中加入1N鹽酸(5.5ml)，并將混合物攪拌20分鐘，用乙酸乙酯(150ml)稀釋，并將混合物傾入冰水中。分出有機層，連續(xù)地用碳酸氫鈉水溶液、水和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，并減壓濃縮。殘余物于甲苯中重結(jié)晶，得(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸二苯甲基酯(7.53g)，產(chǎn)率87%，無色結(jié)晶，mp.163-164℃。
NMR δ (CDCl3)ppm1.27(d，J＝7.2Hz，3H)，1.39(s，9H)，1.42(s，9H)，2.45-2.65(m，1H)，3.1-3.35(m，2H)，3.28(dd，J＝7.2Hz，J＝2.6Hz，1H)，3.5-3.77(m，2H)，3.9-4.15(m，2H)，4.26(dd，J＝7.0Hz，J＝2.6Hz，1H)，4.2-4.37(m，1H)，4.45-4.66(m，1H)，6.07(s，2H)，6.95(s，1H)，7.2-7.6(m，10H).
IR (CHCl3)cm-13385，3230，1778，1715，1685.
元素分析 (C38H50N4O10S2)計算值.C，57.99;H，6.40;N，7.12;S，8.15.
實測值C，57.87;H，6.46;N，6.99;S，7.93.
步驟2.脫保護于-40℃向氯化鋁(3.20g∶24mmole)的苯甲醚(24ml)和二氯甲烷(24ml)混合物的溶液中逐漸滴加(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸二苯甲基酯(2.36g∶3mmole)的二氯甲烷(12ml)溶液，將混合物于-25--30℃劇烈攪拌3.5小時。將反應(yīng)混合物傾入乙酸鈉(5.91g∶72mmole)水(48ml)溶液中。分出水層，用二氯甲烷洗滌，真空濃縮以除去殘留的有機溶劑并進行苯乙烯-二乙烯苯共聚物樹脂柱色譜，將用甲醇-水(1∶9)洗脫的組分冷凍干燥，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-硫酰氨基甲基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(910mg)，產(chǎn)率72%，無色泡沫。
NMR δ (D2O)ppm1.22(d，J＝7.2Hz，3H)，1.27(d，J＝6.3Hz，3H)，1.64-1.82(m，1H)，2.62-2.80(m，1H)，3.26-3.59(m，5H)，3.63-3.76(m，1H)，3.84-4.10(m，2H)，4.16-4.29(m，2H).
IR (KBr)cm-13400，1750.
MIC( /ml)金黃色葡萄球菌菌株 362625.
血液濃度小鼠 i.v.， 15分鐘后( /ml)9.8.
尿回收小鼠i.v.，(%)36.3.
實施例7.(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備冰冷卻下向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-2-氧代-1-碳代青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(277mg)的乙腈(4ml)溶液中連續(xù)加入二苯基磷酰氯(198μl)和二異丙基乙胺(166μl)，將混合物于室溫攪拌1小時。冰冷卻下向含有產(chǎn)物(1R，5S，6S)-2-二苯氧基磷酰氧基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯的反應(yīng)混合物中加入(2S，4S)-2-(2-羥乙基)氨磺酰氨基甲基-1-對甲氧芐氧羰基-4-巰基吡咯烷(344mg)和二異丙基乙胺(166μl)，并將混合物于相同溫度下攪拌2小時。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，連續(xù)地用水、稀鹽酸、水，碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，硫酸鎂干燥并濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-(2-羥乙基)氨磺酰氨基甲基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(156mg)，產(chǎn)率26%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.22(d，J＝7.0Hz，3H)，1.34(d，J＝6.2Hz，3H)，3.79(s，3H)，3.80(s，3H)，5.05(s，2H)，5.17，5.24(ABq，J＝12.2Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-11775，1690.
步驟2.脫保護氮氣氛-40℃下向(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-(2-羥乙基)氨磺酰氨基甲基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(148mg)的二氯甲烷(3ml)和硝基甲烷(750μl)混合物的溶液中加入1.0M氯化鋁的硝基甲烷(1.8ml)溶液和苯甲醚(258μl)，混合物于相同溫度下攪拌1.5小時。將反應(yīng)混合物傾入乙酸鈉(454mg)水(8ml)溶液中并用乙醚-己烷混合液洗滌。將水層于真空下濃縮至4ml，并通過苯乙烯-二乙烯苯共聚物樹脂柱色譜純化，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-(2-羥乙基)氨磺酰氨基甲基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(42mg)，產(chǎn)率46%。
NMR δ (D2O)ppm1.21(d，J＝7.4Hz，3H)，1.28(d，J＝6.4Hz，3H)，1.66-1.81(m，1H)，2.66-2.81(m，1H)，3.15(t，J＝5.6Hz，2H)，3.32-3.54(m，5H)，3.65-3.75(m，3H)，3.87-4.07(m，2H)，4.18-4.27(m，2H).
IR (KBr)cm-13400，1750.
血液濃度小鼠 i.v.， 15分鐘后( /ml)29.3.
實施例8.(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備冰冷卻下向(1R，5S，6S)-2-二苯氧磷酰氧基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(456mg)的乙腈(3ml)溶液中加入二異丙基乙胺(165μl)和(2S，4S)-2-(1，1-二氧代-2-對甲氧芐氧羰基-1，2，5-噻二唑烷-5-基)甲基-4-巰基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷(445mg)，令混合物于0℃靜置過夜。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，連續(xù)地用水、稀鹽酸和水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠色譜純化，得(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-5-(1，1-二氧代-2-對甲氧芐氧羰基-1，2，5-噻二唑烷-5-基)甲基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥甲基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(510mg)，產(chǎn)率72%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.22(d，J＝7.4Hz，3H)，1.34(d，J＝6.2Hz，3H)，5.04(s，2H)，5.23(s，2H)，5.18，5.24(ABq，J＝11.9Hz，2H).
IR (CHCl3)cm-11773，1735，1700.
步驟2.脫保護氮氣氛-40℃下向(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-5-(1，1-二氧代-2-對甲氧芐氧羰基-1，2，5-噻二唑烷-5-基)甲基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(500mg)的二氯甲烷(8ml)和硝基甲烷(3ml)混合物的溶液中加入苯甲醚(729μl)和1.0M氯化鋁的硝基甲烷溶液(5.03ml)，混合物于相同溫度下攪拌1.5小時。將反應(yīng)混合物傾入乙酸鈉(1.28g)水(50ml)溶液中，然后分出水層，并用乙醚-己烷混合液洗滌。減壓下將水層濃縮至約15ml，并通過苯乙烯-二乙烯苯共聚物樹脂柱色譜純化，得(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-5-(1，1-二氧代-1，2，5-噻二唑烷-5-基)甲基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(180mg)，產(chǎn)率72%。
NMR δ (D2O)ppm1.21(d，J＝7.4Hz，3H)，1.28(d，J＝6.4Hz，3H)，1.68-1.84(m，1H)，2.71-2.85(m，1H)，3.28-3.77(m，10H)，3.94-4.12(m，2H)，4.17-4.31(m，2H).
IR (KBr)cm-13400，1750.
MIC( /ml)金黃色葡萄球菌菌株 362625.
血液濃度小鼠i.v.， 15分鐘后( /ml)31.8.
實施例9.(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備冰冷卻下向(1R，5S，6S)-2-二苯氧磷酰氧基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(638mg)的乙腈(6ml)溶液中加入二異丙基乙胺(230μl)和(2S，4S)-2-(1，1-二氧代-2-對甲氧芐氧羰基-3，4，5，6-四氫-1，2，6-噻二嗪-6-基)甲基-4-巰基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷(700mg)，混合物于5℃攪拌2小時并于室溫攪拌1小時。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，連續(xù)地用水、稀鹽酸、水、碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠色譜純化，得(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-5-(1，1-二氧代-2-對甲氧芐氧羰基-3，4，5，6-四氫-1，2，6-噻二嗪-6-基)甲基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(640mg)，產(chǎn)率64%。
NMR δ (CDCl3)ppm1.22(d，J＝7.4Hz，3H)，1.34(d，J＝6.4Hz，3H)，5.04(s，2H)，5.17，5.25(ABq，J＝12.3Hz，2H)，5.19(s，2H).
IR (CHCl3)cm-11700，1770.
步驟2.脫保護氮氣氛-40℃下向(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-5-(1，1-二氧代-2-對甲氧芐氧羰基-3，4，5，6-四氫-1，2，6-噻二嗪-6-基)甲基-1-對甲氧芐氧羰基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸對甲氧芐基酯(600mg)的二氯甲烷(9ml)和硝基甲烷(3.5ml)混合物的溶液中加入苯甲醚(861μl)和1.0M氯化鋁的硝基甲烷(5.94ml)溶液，混合物于相同溫度下攪拌1.5小時。將反應(yīng)混合物傾入乙酸鈉(1.52g)水(50ml)溶液中，并用乙醚和己烷的混合物洗滌。將水層真空濃縮至約15ml，并將混合物通過苯乙烯-二乙烯苯共聚物樹脂柱色譜純化，得(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-5-(1，1-二氧代-3，4，5，6-四氫-1，2，6-噻二嗪-6-基)甲基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(190mg)，產(chǎn)率63%。
NMR δ (D2O)ppm1.20(d，J＝7.2Hz，3H)，1.27(d，J＝6.4Hz，3H)，1.65-1.80(m，3H)，2.65-2.80(m，1H)，3.27-3.56(m，9H)，3.64-3.74(m，1H)，3.91-4.10(m，2H)，4.15-4.30(m，2H).
IR (KBr)cm-13400，1750.
MIC( /ml)金黃色葡萄球菌菌株 362625. 血液濃度小鼠 i.v.， 15分鐘后( /ml)28.4.
實施例10-12.(3R，5R)、(3R，5S)和(3S，5R)吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的合成 步驟1.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備冰冷卻下向(1R，5S，6S)-2-二苯氧磷酰氧基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸二苯甲基酯(即底物)和1-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷(Pyld)的乙腈(MeCN)溶液中滴加二異丙基乙胺(HNPr-i)，在表4所示條件下將混合物攪拌反應(yīng)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，并向其中加入冰水。分出有機層，連續(xù)地用水和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜純化，得(1R，5S，6S)-2-[1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸二苯甲基酯。
表4Pyld Pyldj)HNPr-ij)MeCNk)溫度時間產(chǎn)率實施例的構(gòu)型當量當量體積分%實施例103R5R1.171.307冰冷卻24086倍實施例113R5S1.201.307冰冷卻12088倍實施例123S5R1.141.277冰冷卻27073倍i)吡咯烷環(huán)的構(gòu)型j)對底物的摩爾比k)對底物重量(g)的溶劑的體積(ml)
產(chǎn)物的物理特性(3R，5R)異構(gòu)體NMR δ (CDCl3)ppm1.26(d，J＝7.2Hz，3H)，1.39(d，J＝6.2Hz，3H)，1.43(s，9H)，1.51(s，9H)，2.5(m，1H)，3.1-3.9(m，6H)，4.0-4.7(m，4H)，6.1(m，1H)，6.98(s，1H)，7.1-7.6(m，10H).
IR (KBr)cm-13400，3240，1770，1710，1670.(3S，5R)異構(gòu)體NMR δ (CDCl3)ppm1.28(d，J＝7.0Hz，3H)，1.36(s，9H)，1.40(d，J＝6.2Hz，3H)，1.52(s，9H)，2.0(m，1H)，3.2-3.9(m，7H)，4.2-4.4(m，2H)，4.4-4.6(m，1H)，6.01(s，2H)，6.94(s，1H)，7.1-7.6(m，10H).
IR (KBr)cm-13400，3240，1772，1708，1682.
(3R，5S)異構(gòu)體NMR δ (CDCl3)ppm1.76(d，J＝7.2Hz，3H)，1.3-1.5(m，12H)，1.52(s，9H)，1.9-2.1(m，1H)，3.2-3.9(m，7H)，4.1-4.4(m，2H)，4.4-4.6(m，1H)，6.04(s，2H)，6.94(s，1H)，7.1-7.6(m，10H).
IR (KBr)cm-13420，1770，1710.
步驟2.脫保護氮氣氛下將(1R，5S，6S)-2-[1-叔丁氧羰基-5-(N-叔丁氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸二苯甲基酯(即底物)的二氯甲烷(DCM)溶液加到氯化鋁(AlCl3)的二氯甲烷(DCM)和苯甲醚(PhOMe)混合物的溶液中，在表5所示條件下將混合物攪拌反應(yīng)。向反應(yīng)混合物中加入乙酸鈉水溶液。分出水層，用二氯甲烷洗滌，并通過苯乙烯-二乙烯苯共聚物樹脂柱色譜純化，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[5-磺酰氨基甲基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸。
表5Pyldl)AlCl3m)DCMn)PhOMen)溫度時間產(chǎn)率實施例的構(gòu)型當量體積體積℃分%(倍)(倍)實施例103R5R8.01610-3030086實施例113R5S8.01710-3015088實施例123S5R8.01710-3015073l)吡咯烷環(huán)的構(gòu)型m)對底物的摩爾比n)對底物重量(g)的溶劑的體積(ml)
產(chǎn)物的物理特性(3R，5R)異構(gòu)體NMR δ (D2O)ppm1.18(d，J＝7.2Hz，3H)，1.27(d，J＝6.2Hz，3H)，1.9(m，1H)，2.7(m，1H)，3.2-3.6(m，5H)，3.6-3.8(m，1H)，3.8-4.1(m，2H)，4.2(m，2H).
IR (KBr)cm-13360，1750.
(3S，5R)異構(gòu)體NMR δ (CD3SOCD3)ppm1.09(d，J＝7.0Hz，3H)，1.14(d，J＝6.2Hz，3H)，1.7-2.0(m，1H)，1.9-2.2(m，1H)，2.9(m，1H)，3.0-3.3(m，4H)，3.3 to 3.6(m，1H)，3.6-3.8(m，2H)，3.9(m，1H)，4.1(m，1H).
IR (KBr)cm-13340，1765，1740，1620，1575，1548.
(3R，5S)異構(gòu)體NMR δ (D2O)ppm0.86(d，J＝7.4Hz，3H)，0.93(d，J＝6.4Hz，3H)，2.43(d，J＝6.4Hz，3H)，1.90(dd，J＝9.0Hz，J＝4.4Hz，2H)，2.9-3.3(m，5H)，3.48(dd，J＝13.2Hz，J＝7.2Hz，1H)，3.7-3.8(m，2H)，3.8-4.0(m，2H)，4.47DHO.
IR (KBr)cm-13400，1750，1585.
實施例13.利用-烯丙氧羰基中間體合成(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物
步驟1.三甲基甲硅烷基化合物的制備冰冷卻下向(3S，4S)-3-[(1R)-1-羥乙基]-4-[(1R)-1-苯硫羰基乙基]-1-烯丙氧羰基甲基-2-氮雜環(huán)丁烷酮(5.04g∶13.35mmole)的甲苯(40ml)溶液中加入吡啶(1.51ml∶18.69mmole)并滴加三甲基氯甲硅烷(2.26ml∶17.36mmole)，混合物于室溫攪拌1.5小時。向反應(yīng)混合物中加入水(80ml)，并用甲苯萃取水層，將萃取液和有機層合并，用水(2次)和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮，得油狀殘余物粗品(3S，4S)-3-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧基乙基]-4-[(1R)-1-苯硫羰基乙基]-1-烯丙氧羰基甲基-2-氮雜環(huán)丁烷酮(5.614g)，產(chǎn)率94%。
步驟2.合環(huán)于-60℃向步驟1獲得的粗品(3S，4S)-3-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧乙基]-4-[(1R)-1-苯硫羰基乙基]-1-烯丙氧羰基甲基-2-氮雜環(huán)丁烷酮(5.60g∶12.454mmole)的四氫呋喃(62ml)溶液中滴加1M叔丁醇鉀(24.9mmole)的四氫呋喃(24.9ml)溶液，將混合物攪拌10分鐘。加入碘甲烷(0.48ml∶14.94mmole)并于相同溫度下攪拌20分鐘后，向其中加入二苯基磷酰氯(2.73ml∶12.45mmole)。1小時內(nèi)令其溫至冰水溫度后，將反應(yīng)混合物用甲苯(120ml)和水(120ml)稀釋。水層用甲苯萃取，將萃取液和有機層合并，連續(xù)地用水(2次)、碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，并真空濃縮，得油狀殘余物粗品(1R，5S，6S)-2-二苯氧磷酰氧基-6-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(3.795g)，產(chǎn)率104%。
IR (CHCl3)cm-13008，1778，1722，1636，1589，1489.
NMR δ (CDCl3)ppm0.12(9H，s)，1.19(3H，d，J＝7.2Hz)，1.25(3H，d，J＝6.2Hz)，3.24(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝6.8Hz)，3.3-3.6(1H，m)，4.11(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝10.2Hz)，4.1-4.3(1H，m)，4.6-4.7(2H，m)，5.1-5.5(2H，m)，5.7-6.0(1H，m)，7.1-7.5(10H，m).
步驟3.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備冰冷卻下向步驟2獲得的粗品(1R，5S，6S)-2-二苯氧磷酰氧基-6-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(2.56g∶4.2mmole)和(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷(1.48g∶5.0mmole)的乙腈(13ml)溶液中滴加二異丙基乙胺(0.95ml∶5.46mmole)，并將混合物于相同溫度下攪拌7.5小時。反應(yīng)混合物用1N鹽酸(6.3ml)酸化，于相同溫度下攪拌30分鐘，向其中加入乙酸乙酯(80ml)和冰水(80ml)。分出有機層，連續(xù)地用水和飽和鹽水洗滌，硫酸鎂干燥并真空濃縮。殘余物通過硅膠色譜(甲苯-乙酸乙酯)純化，得(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-1-烯丙氧羰基-5-(N-氨磺酰氨基)甲基-吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(1.63g)，產(chǎn)率71%。
IR (CHCl3)cm-11772，1691，1410.
1HNMR δ (CDCl3)ppm1.26(3H，d，J＝7.0Hz)，1.35(3H，d，J＝6.0Hz)，1.7-2.7(3H，m)，3.1-3.5(5H，m)，3.5-3.8(1H，m)，3.9-4.4(4H，m)，4.5-4.9(4H，m)，5.0-5.5(5H，m)，5.8-6.1(2H，m).
步驟4.脫保護向(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-1-烯丙氧羰基-5-(N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-碳代-2-青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(379mg∶0.695mmole)的丙酮(14ml)溶液中加入三苯膦(55mg∶0.21mmole)和氫化三正丁基錫(0.424ml∶1.53mmole)，冰冷卻下再加入鈀四(三苯膦)(81mg∶0.07mmole)。于相同溫度下攪拌45分鐘和于室溫攪拌1小時后，向反應(yīng)混合物中加入水(35ml)和二氯甲烷(50ml)。分出水層，用二氯甲烷洗滌并冷凍干燥，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-氨磺酰氨基甲基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(238mg)，產(chǎn)率82%。(HPLC純度85%)NMR δ (D2O)ppm1.22(d，J＝7.2Hz，3H)，1.27(d，J＝6.3Hz，3H)，1.64-1.82(m，1H)，2.62-2.80(m，1H)，3.26-3.59(m，5H)，3.63-3.76(m，1H)，3.84-4.10(m，2H)，4.16-4.29(m，2H).
IR (KBr)cm-11340，1750.
實施例14.利用二烯丙氧羰基中間體合成(3S，5S)-吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物 步驟1.三甲基甲硅烷基化合物的制備按照實施例13步驟1相同的方法將(3S，4S)-3-[(1R)-1-羥乙基]-4-[(1R)-1-苯硫羰基乙基]-1-烯丙氧羰基甲基-2-氮雜環(huán)丁烷酮進行三甲基甲硅烷基化，得(3S，4S)-3-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧乙基]-4-[(1R)-1-苯硫羰基乙基]-1-烯丙氧羰基甲基-2-氮雜環(huán)丁烷酮。
步驟2.合環(huán)按照實施例13步驟2相似的方法令步驟1獲得的粗品(3S，4S)-3-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧乙基]-4-[(1R)-1-苯硫羰基乙基]-1-烯丙氧羰基甲基-2-氮雜環(huán)丁烷酮反應(yīng)合環(huán)，得粗品(1R，5S，6S)-2-二苯氧磷酰氧基-6-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
步驟3.保護的吡咯烷硫基碳代青霉烯衍生物的制備在相似的反應(yīng)條件下，將步驟2獲得的粗品(1R，5S，6S)-2-二苯氧磷酰氧基-6-[(1R)-1-三甲基甲硅烷氧乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(5.05g∶8.3mmole)和(2S，4S)-1-烯丙氧羰基-2-(N-烯丙氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷(3.77g∶9.94mmole)反應(yīng)，得(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-1-烯丙氧羰基-5-(N-烯丙氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(3.65g)，產(chǎn)率70%。
IR (CHCl3)cm-11777，1718，1686，1395.
NMR δ (CDCl3)ppm1.27(3H，d，J＝7.2Hz)，1.37(3H，d，J＝6.2Hz)，2.5-2.7(1H，m)，3.1-3.3(3H，m)，3.6-3.8(2H，m)，4.0-4.3(4H，m)，4.4-4.9(6H，m)，5.2-5.5(6H，m)，5.7-6.1(5H，m).
步驟4.脫保護在與實施例13步驟4相似的反應(yīng)條件下，用三苯膦(83mg∶0.32mmole)，氫代三正丁基錫(0.64ml∶2.3mmole)和鈀四(三苯膦)(122mg∶0.11mmole)將(1R，5S，6S)-2-[(3S，5S)-1-烯丙氧羰基-5-(N-烯丙氧羰基-N-氨磺酰氨基)甲基吡咯烷-3-基]硫基-6-[(1R)-1-羥乙基]-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(369mg∶0.586mmole)脫保護，得(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-硫酰氨基甲基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(206mg)，產(chǎn)率84%。(HPLC純度85%)NMR δ (D2O)ppm1.22(d，J＝7.2Hz，3H)，1.27(d，J＝6.3Hz，3H)，1.64-1.82(m，1H)，2.62-2.80(m，1H)，3.26-3.59(m，5H)，3.63-3.76(m，1H)，3.84-4.10(m，2H)，4.16-4.29(m，2H).
IR (KBr)cm-13400，1750.
實施例15將PH7.0的(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-硫酰氨基甲基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(0.5g)的碳酸氫鈉水溶液(5ml)裝入小瓶(10ml)中并冷凍干燥。在應(yīng)用之前，將冷凍干燥物溶于注射用水(5ml)中并給由敏感的金黃色葡萄球菌株引起的患有泌尿道感染的患者每日三次靜脈內(nèi)注射以治愈此疾病。
實施例16.
將PH7.0的(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-(甲氨磺?；?氨基甲基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(0.5g)的碳酸氫鈉水溶液(5ml)裝入小瓶(10ml)中并冷凍干燥。在應(yīng)用之前，將冷凍干燥物溶于注射用水(5ml)中并給由敏感的肺炎桿菌菌株引起的患有肺炎的患者每日三次靜脈內(nèi)注射以治療此疾病。
實施例17.
將PH7.0的(1R，5S，6S)-6-[(1R)-1-羥乙基]-2-[(3S，5S)-5-(2-羥乙基氨磺?；?氨基甲基吡咯烷-3-基]硫基-1-甲基-1-碳代-2-青霉烯-3-羧酸(2.0g)的碳酸氫鈉水溶液(10ml)裝入小瓶(100ml)中并冷凍干燥。使用前將冷凍干燥物溶于注射用水(50ml)中并給由敏感的陰溝腸桿菌菌株引起的患有嚴重呼吸道感染的患者通過每日四次靜脈輸注施藥以治愈此疾病。
不脫離本發(fā)明范圍和精神的各種其它的變換是顯而易見的并且本領(lǐng)域技術(shù)人員可以很容易地實現(xiàn)。因此，不能認為此處所附加的權(quán)利要求書的范圍是對前述內(nèi)容的限制，而應(yīng)對權(quán)利要求書有更廣義的解釋。
權(quán)利要求
1.一種生產(chǎn)由式Ⅱ表示的吡咯烷衍生物的方法 其中R2，R3和R4獨立地為氫，可被取代的低級烷基，或氨基保護基，或R2和R3與它們所連接的氮原子一起形成飽和或不飽和環(huán)狀基團，或R2和R4，或R3和R4與硫酰胺基中的兩個氮原子和一個硫原子一起形成一個飽和或不飽和環(huán)狀基團；每個環(huán)狀基可進一步包括至少一個選自由氧，硫和氮組成的一類原子，且每個環(huán)狀基都可被取代；Y1為氫或巰基保護基；而Y2為氫或氨基保護基；該方法包括如下步驟將4-羥基吡咯烷-2-羧酸衍生物4-位的羥基轉(zhuǎn)化成巰基；將2-位的羧基轉(zhuǎn)化成羥甲基；將羥甲基中的羥基轉(zhuǎn)化成氨基；以及將氨基轉(zhuǎn)化成硫酰胺基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R4為氫。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中Y2為氫。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中R2和R3為氫;R2為甲基，R3為氫;R2和R3兩者均為甲基;或R2為羥乙基，R3為氫。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R3為氫，而R2和R4互相連接形成-CH2-CH2-。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R3為氫，而R2和R4互相連接形成-CH2-CH2-CH2-。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中R2，R3，R4和Y2中至少有一個選自由叔丁氧羰基，烯丙氧羰基，對硝基苯氧基羰基，對甲氧基芐氧基羰基和重氮基組成的一類基團。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項的方法，其中Y1為氫。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項的方法，其中Y1為芐基，苯乙基，三苯甲基或二苯甲基。
全文摘要
一種生產(chǎn)由式(II)表示的吡咯烷衍生物的方法，該方法包括的步驟將4-羥基吡咯烷-2-羧酸衍生物4-位的羥基轉(zhuǎn)化成巰基；將2-位的羧基轉(zhuǎn)化成羥甲基；將羥甲基中的羥基轉(zhuǎn)化成氨基；以及將氨基轉(zhuǎn)化成硫酰胺基。如式(II)。其中R
文檔編號A61K31/397GK1113233SQ9510483
公開日1995年12月13日 申請日期1995年4月21日 優(yōu)先權(quán)日1991年8月20日
發(fā)明者西谷康宏, 入江忠司, 西野豐 申請人:鹽野義制藥株式會社