專利名稱：脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及脂肪酸類化合物，特別涉及脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用。
背景技術(shù)：
近年來，伴隨著藥學和生命科學研究的飛速進展，惡性腫瘤細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導、細胞凋亡、血管生成以及細胞與胞外基質(zhì)的相互作用等各種基本過程正漸被闡明。以一些與腫瘤細胞分化增殖相關(guān)的細胞信號轉(zhuǎn)導通路的關(guān)鍵酶(如蛋白酪氨酸激酶)作為藥物篩選靶點，發(fā)現(xiàn)選擇性作用于特定靶位的高效、低毒、特異性強的新型抗腫瘤藥，即分子靶向藥(molecular targeted drugs)和抗體革巴向藥(antibody targeted drugs),已成為當今抗癌藥研發(fā)的重要方向(1、張石革.腫瘤靶向 治療藥物的進展與臨床評價.中國醫(yī)院用藥評價與分析.2009; 9 (I): 4-7)。在癌癥的起始和發(fā)展過程中，蛋白酪氨酸磷酸化起著非常重要的作用。而蛋白酪氨酸磷酸化水平取決于蛋白酪氨酸激酶(PTKs)和蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)之間的平衡。蛋白酪氨酸激酶(PTKs)是當今公認的腫瘤治療的重要靶點，在癌癥的治療中起著非常重要的作用。與PTKs的作用相反，PTPs能夠促進腫瘤的生長。所以，PTPs抑制劑的發(fā)現(xiàn)將對癌癥的治療提供廣闊前景(2、Scott LM, Chen Lff, Daniel KG, Brooks WH, GuidaWCj Lawrence HR, et al.Shp2protein tyrosine phosphatase inhibitor activityof estramustine phosphate and its triterpenoid analogs.Bioorg Med ChemLett.2011;21 (2):730-733)。PTP-SHP2，是一種非受體蛋白酪氨酸磷酸酶，它由PTPNll基因編碼，在人體內(nèi)多種器官廣泛表達。它由N端的2個SH2結(jié)構(gòu)域，中間的PTP結(jié)構(gòu)域及C末端組成。在癌細胞中，SHP2通常會被一些生長因子受體激活，進而調(diào)節(jié)下游蛋白的磷酸化，促進細胞生長。在原癌基因引起的惡性腫瘤中，PTP-SHP2通常被激活?？傊琍TP-SHP2在細胞信號調(diào)節(jié)中發(fā)揮正調(diào)控作用，促進細胞生長。隨著癌癥的靶點治療越來越得到大家的認可，PTP-SHP2也成為了大家研究的熱點。如今，它已經(jīng)成為人們公認的尋找抗癌藥物的重要革巴標。一些合成的PTP-SHP2特異性抑制劑也已被發(fā)現(xiàn)，如phenylhydrazonopyrazolonesulfonate (3、Hellmuth K,Grosskopf S，Lum CT, Wurtele M, Roder N，von Kries JP, etal.Specific inhibitors of the protein tyrosine phosphatase Shp2identified byhigh-throughput docking.Proc Natl Acad Sci U S A.2008;105 (20):7275-7280)和 8_hydroxy-7- (6-sulfonaphthalen-2-yl)diazenyl-quinoline-5-sulfonicacid(NSC-87877)(4、Chen L, Sung SS, Yip ML, Lawrence HR, Ren Y, Guida WC, et al.Discovery of a novelshp2protein tyrosine phosphatase inhibitor.Mol Pharmacol.2006;70(2):562-570)。中國傳統(tǒng)中藥(TCM)在已有幾千年的藥用歷史，它具有化學成分多樣和結(jié)構(gòu)復雜雙重優(yōu)勢，是尋找PTP-SHP2特異性抑制劑的良好資源，這是化學合成藥無法匹敵的。Caspases是一組存在于胞質(zhì)溶膠中的結(jié)構(gòu)上相關(guān)的半胱氨酸蛋白酶，目前已確定至少存在11種caspase,其中，caspasel和caspasell,以及可能還有caspase4被認為不直接參與凋亡信號的轉(zhuǎn)導，它們主要參與白介素前體的活化；而caspase2，caspase8，caspase9和caspase 10參與細胞凋亡的起始；參與細胞凋亡執(zhí)行的則是caspase3,caspase6和caspase7,其中caspase3和7具有相近的底物和抑制劑特異性，它們降解PARP, DFF-45 (DNA fragmentation factor-45),導致 DNA 修復的抑制并啟動 DNA 的降解。目前認為細胞凋亡的起始者(caspase2，8，9和10)和執(zhí)行者(caspase3，6，7)之間存在著上下游關(guān)系，即起始者活化執(zhí)行者(5、朱愿，馬勇，陳立軍.Caspase與細胞凋亡.武警醫(yī)學院學報.2004; 13 (4): 346-348)。caspase-3在細胞凋亡中起著不可替代的作用，最主要的底物是多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP (poly (ADP-ribose) polymerase)，該酶與DNA修復、基因完整性監(jiān)護有關(guān)。在細胞凋亡啟動時，116kD的PARP在Asp216-Gly217之間被caspase-3剪切成31kD和85kD兩個片段，使PARP中與DNA結(jié)合的兩個鋅指結(jié)構(gòu)與羧基端的催化區(qū)域分離，不能發(fā)揮正常功能。結(jié)果使受PARP負調(diào)控影響的Ca2+/Mg2+依賴性核酸內(nèi)切酶的活性增高，裂解核小體間的DNA，引起細胞凋亡。caspase-8具有FADD樣DED結(jié)構(gòu)域，并且能夠通過DED結(jié)構(gòu)域與FADD結(jié)合，所以caspase-8可以在凋亡過程中間接與細胞膜受體發(fā)生聯(lián)系，從而將細胞膜事件轉(zhuǎn)化為細胞衆(zhòng)事件。caspase-8在死亡受體介導的細胞凋亡中起著重要作用。而caspase_9在線粒體途徑中對細胞凋亡有重要作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用。所述肪酸類化合物包括:化合物I，化合物I為油狀物，化學名為10Z，13Z-十九碳二烯酸，分子式為C19H34O2,分子量為294,結(jié)構(gòu)式為:`
權(quán)利要求
1.脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于所述肪酸類化合物包括: 化合物1，化合物I為油狀物，化學名為10Z，13Z-十九碳二烯酸，分子式為C19H34O2,分子量為294,結(jié)構(gòu)式為:
2.如權(quán)利要求1所述的脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于所述脂肪酸類化合物的制備方法，包括以下步驟: 1)使用乙醇對白芷進行煮沸回流，過濾，收集濾液，即得白芷提取液； 2)將所得白芷提取液進行萃取，萃取所得溶液進行真空干燥，即得白芷粗提物； 3)將白芷粗提物進行硅膠柱層析，再進行反相硅膠柱層析，分別得化合物1，化合物2，化合物3。
3.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于在步驟I)中，所述乙醇的濃度為60%，所述乙醇體積與白芷質(zhì)量的比例為IOL: Ikg,其中乙醇以體積計，白芷以質(zhì)量計。
4.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于在步驟I)中，所述煮沸回流的時間為2 3h。
5.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于在步驟2)中，所述萃取的溶劑為乙酸乙酯。
6.如權(quán)利要求5所述的脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于所述萃取的溶劑與白芷提取液的體積之比為1:1。
7.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于在步驟3)中，所述硅膠柱層析的具體步驟:將白芷粗提物，加入硅膠，干燥得到硅膠層析樣品；將硅膠層析樣品置于硅膠柱頂部，以體積之比為100: 0,99: 1,98: 2,95: 5，10: 1,5: 1,0: 100的氯仿-甲醇溶液為洗脫劑，進行硅膠柱梯度洗脫，收集氯仿-甲醇體積比為99: I和95: 5的洗脫液，蒸干，即得白芷柱層析樣品；所得白芷柱層析樣品再經(jīng)硅膠柱色譜和ODS柱色譜即得化合物1，化合物2和化合物3。
8.如權(quán)利要求2所述的脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于在步驟2)中，所述反相硅膠柱層析的流動相為甲醇-水或乙腈-水溶液。
9.如權(quán)利要求8所述的脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于所述甲醇-水或乙腈-水的體積比為(0.25 9): I。
10.如權(quán)利要求9所述的脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，其特征在于所述甲醇-水或乙腈- 水的體積比為(0.4 4): 1，最好為1.85: I。
全文摘要
脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用，涉及脂肪酸類化合物。提供脂肪酸類化合物在制備預防和治療肝癌藥物中的應用。使用乙醇對白芷進行煮沸回流，過濾，收集濾液，即得白芷提取液；將所得白芷提取液進行萃取，萃取所得溶液進行真空干燥，即得白芷粗提物；將白芷粗提物進行硅膠柱層析，再進行反相硅膠柱層析，分別得化合物1，化合物2，化合物3。所述脂肪酸類化合物可制備成PTP-SHP2的特異性抑制劑，通過抑制蛋白酪氨酸磷酸酶從而發(fā)揮抗癌以及預防和治療與蛋白酪氨酸磷酸酶PTP-SHP2相關(guān)的人類疾病的作用。所述脂肪酸類化合物在制備預防和治療癌癥藥物中具有廣泛的應用。
文檔編號A61P35/00GK103181918SQ201310112138
公開日2013年7月3日 申請日期2011年5月4日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月4日
發(fā)明者陳海峰, 呂忠顯, 陳全成, 劉東萍, 崔傳文, 孔桂萍, 李陽 申請人:廈門大學