倍半萜化合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從番石榴葉中分離得到的一種倍半萜化合 物，含其的藥物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 植物番石植（PsidiumguajavaLinn.)是桃金娘科（Myrtaceae)番石植屬植物， 為落葉喬木，高5-10m。樹皮淺黃褐色，嫩枝四方形，具白色短毛，老則脫落；芽密被白色短 毛。單葉互生，稀有輪生，矩圓狀橢圓形至卵圓形，長5-12cm，寬3-5cm，揉之有香氣，革質(zhì)， 先端圓或短尖，基部鈍至圓形，全緣，上面深綠色，葉脈微凹或平坦，嫩時疏生短毛，下面淺 綠色，疏生小腺體，密被短柔毛，主脈隆起，側(cè)脈7-11對，亦隆起，斜出將近葉緣而彎曲；叫 柄長4mm。花兩性，腋生1-4朵；萼5片，綠色，卵圓形；花瓣白色，卵形，長2-2. 5cm;雄蕊多 數(shù)，與花瓣等長，花絲白色，花藥淺黃色，縱裂；雌蕊1，花柱長于花絲，柱頭圓形，子房下位， 3室，胚珠多數(shù)。漿果球形、卵圓形或洋梨狀，長2. 5-8cm，徑3-5cm，果肉通常黃色，也有白 色或胭脂紅色。種子卵圓形，淡白色?；ㄆ?-8月。果期8-11月。番石榴葉為番石榴的干 燥葉及帶葉嫩枝，別名雞矢茶、番桃葉、那拔葉等。番石榴葉性平、味甘澀，入脾、胃、大腸、肝 經(jīng)，有燥濕健脾，清熱解毒的功效，是民間治療糖尿病，腸炎痢疾，創(chuàng)傷出血的常用藥物。
[0003] 番石榴葉化學成分多樣，主要包括酚酸類、黃酮類、三萜類和倍半萜類。近 年來，番石榴葉中的倍半萜類成分因其良好的生物活性引起了廣泛關(guān)注。倍半萜類 (sesquiterpenoids)是由3個異戊二稀單位構(gòu)成、含15個碳原子的化合物類群。倍半砲廣 泛存在于植物、微生物、海洋生物及某些昆蟲中，很多具有重要的生物功能和生理活性，特 別是倍半萜內(nèi)酯，有抗菌、抗腫瘤、抗病毒、細胞毒、免疫抑制、植物毒、昆蟲激素、昆蟲拒食 劑等活性，也有一些具有神經(jīng)系統(tǒng)活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種從番石榴葉中分離得到的一種倍半萜化合物，含其的藥 物組合物及其制備方法和應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0006] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I):
[0007]
[0008] 所述的藥物組合物，其中含有治療有效量的化合物（I)和藥學上可接受的載體。
[0009] 所述的化合物（I)的制備方法，操作步驟如下：(a)干燥的番石榴葉粉碎，用 95%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正 丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)將步驟（a)中乙 酸乙酯萃取物用正相硅膠分離，依次用體積比為60:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脫得到4個組；（c)將步驟（b)中的組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為 20:1、15:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分（d)將步驟（c)中的組分2用 十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，先用體積百分濃度為65%的甲醇水溶液沖洗6個柱體 積，再用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8個柱體積，濃縮，冷凍干燥得 到純的化合物（I)。
[0010] 所述的化合物I在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0011] 所述的組合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0012] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。該藥物 組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物I，其余為藥物學上可接受的、對人和動物無毒和 惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0013] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0014] 說明書附圖
[0015] 圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式。
【具體實施方式】
[0016] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0017] 1?主要試劑
[0018] 乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷和甲醇均為分析純，購自上海凌峰化學 試劑有限公司。
[0019] 2?材料和儀器
[0020] 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株U251購自于上海麥莎生物科技有限公司；實驗動物裸鼠，購 自南方醫(yī)科大學實驗動物中心，為4~6周齡的雄性BALB/c，nu/nu小鼠，體質(zhì)量12~15g。 化合物I為自制，含量98%以上。5-氟尿嘧啶（5-Fu)購于南通制藥廠；胰蛋白酶購于美 國Amresco公司；不完全DMEM培養(yǎng)基購于GibeoBRL公司；胎牛血清購于杭州四季青公司； 十二烷基硫酸鈉、乙二胺四乙酸、過硫酸胺、甘油、二甲基亞礬購于Sigma公司；蛋白酶K購 自Merka公司；P-琉基乙醇購自廣州威佳公司；苯甲基磺酞氟購自廣州威佳公司；亮抑酶 膚購自廣州威佳公司；抑蛋白酶膚購自廣州威佳公司；丙烯酞胺購自上海生工生物工程公 司；雙丙烯酞胺購自上海生工生物工程公司。
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[0022] 實施例1
[0023] (a)干燥的番石榴葉（7Kg)粉碎，用95%乙醇熱回流提取，20LX3次，每次2小時， 合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚（1.5LX3次）、乙酸乙酯（1.5LX3次）和水飽 和的正丁醇（1.5LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（195g)和正丁醇 萃取物；(b)步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用正相硅膠分離，依次用體積比為60:1、30:1、15:1 和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（c)步驟（b)中組分3(37g)用正相硅膠 進一步分離，依次用體積比為20:1、15:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組 分；（d)步驟（c)中組分2 (Ilg)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，先用體積百分濃度 為65%的甲醇水溶液沖洗6個柱體積，再用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫， 收集8個柱體積，濃縮，冷凍干燥得到純的化合物I(45mg)。
[0024] 結(jié)構(gòu)確證：白色針狀的結(jié)晶，易溶于氯仿、丙酮和甲醇，不溶于水；HR-ES頂S顯 示[M+H]+為m/z259. 1026，結(jié)合核磁特征可得分子式為C15H1404。核磁共振氫譜數(shù)據(jù) SH (ppm,CDCl3, 600MHz) :5. 85 (1H，s，3-H)，3. 44 (1H，d，5-H)，4. 73 (1H，dd，6-H)，3. 39 (1H， dd，7-H)，5. 42(1H，dd，8-H)，5. 42(1H，d，9-H)，6. 28(1H，d，13-Ha)，5. 73(1H，d，13-Hb)， I. 05 (3H，s，14-H)，2. 09 (3H，s，15-H);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)Sc (ppm，CDCl3, 150MHz) :86. 4 (C， l-c)，205. 4 (C，2-C)，133. 2 (CH，3-C)，177. 5 (C，4-C)，50. 4 (CH，5-C)，80. 5 (CH，6-C)， 37. 3 (CH，7-C)，136. 8 (CH，8-C)，132. 0 (CH，9-C)，54. 2 (C，10-C)，139. 6 (C，11-C)，170. 0 (C， 12-C)，123. 7 (CH2,13-C)，1