專利名稱：嘌呤衍生物在制備藥物中的用途的制作方法
嘌呤衍生物在制備藥物中的用途本發(fā)明涉及嘌呤衍生物在制備用于治療病理學(xué)狀態(tài)的藥物中的用途，在所述病理 學(xué)狀態(tài)中牽涉細(xì)胞分裂和細(xì)胞凋亡之間的平衡失調(diào)，更特別地其中過(guò)度的細(xì)胞凋亡是所述 病理學(xué)狀態(tài)的原因。本發(fā)明還涉及這些嘌呤衍生物中的一些。特別地，所述其中牽涉細(xì)胞分裂和細(xì)胞凋亡之間的平衡失調(diào)的病理學(xué)狀態(tài)為慢性 淋巴細(xì)胞白血病，和腎臟疾病例如多發(fā)性囊腫病。慢性淋巴細(xì)胞白血病(leuc6mielymph0'idechronique，LLC)是性質(zhì)不同的一組以 CD5+單克隆B細(xì)胞在血液、骨髓和造血器官中的積累為特征的疾病。該疾病為其中單克隆B細(xì)胞不經(jīng)歷或很少經(jīng)歷天然的細(xì)胞凋亡(細(xì)胞死亡)并且 包括低份額的參與細(xì)胞周期的B細(xì)胞的疾病。在這個(gè)意義上，這種疾病是有一些不同于下 述疾病的疾病其中觀察到單克隆細(xì)胞不停地過(guò)量增殖，其中單克隆細(xì)胞高度參與細(xì)胞周 期，和其中對(duì)于細(xì)胞凋亡(細(xì)胞死亡)的抗性構(gòu)成次要致病性的現(xiàn)象的疾病。一般地，將LLC分類為不同的類別，包括B淋巴細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血病和T型淋 巴細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血病。一般地，LLC是指B淋巴細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血病(LLCB)。B譜系的慢性淋巴細(xì)胞白血病(稱為L(zhǎng)LC-B)為造成下列狀況的B淋巴細(xì)胞的疾 病具有淋巴細(xì)胞形態(tài)并且表達(dá)該疾病的特征性膜抗原例如CD5和CD23分子的B淋巴細(xì) 胞，在血液中積累，從而導(dǎo)致淋巴細(xì)胞增多癥；在骨髓中積累，從而導(dǎo)致骨髓功能不全；和 在淋巴結(jié)中積累，從而導(dǎo)致多腺病。LLC-B被表征為具有可變的發(fā)展性的單一生物學(xué)實(shí)體。Binet預(yù)后分類允許將該疾病的發(fā)展特性曲線確定為三個(gè)階段A、B和C。在處于該疾病的階段A中的受試者之中，41%向著階段B和C發(fā)展。在生物學(xué)參 數(shù)中，淋巴細(xì)胞加倍時(shí)間短于6個(gè)月、可溶性CD23的水平升高或者血清胸苷激酶活性提高 被認(rèn)為表明了不良的預(yù)后。在不良預(yù)后的經(jīng)完全鑒定的遺傳參數(shù)中，包括該疾病的非突變 的形式(在14q32上的種系位置處的免疫球蛋白重鏈基因)，llq、17p染色體缺失異常，或 者額外的12q+類型的染色體異常。攜帶LLC-B并表現(xiàn)出這些生物學(xué)特征的患者具有短的 進(jìn)展時(shí)間因而，50 %的非突變的患者在24個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)發(fā)展；50 %的呈現(xiàn)出17p-、Ilq-或 12q+的患者在15個(gè)月時(shí)出現(xiàn)發(fā)展。如果階段A的患者表現(xiàn)出這些嚴(yán)重性的生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，那 么階段B和C的患者應(yīng)當(dāng)會(huì)從積極的治療態(tài)度中得到好處。盡管目前的治療致使該疾病緩解，但所有的患者都會(huì)復(fù)發(fā)，并且目前存在的共識(shí) 認(rèn)為L(zhǎng)LC仍舊是無(wú)法治愈的疾病。現(xiàn)在存在的真正問(wèn)題在于，在該疾病的階段A中，確定呈現(xiàn)出發(fā)展至嚴(yán)重狀態(tài)的 生物學(xué)可能性的患者。LLC-B的最佳的第一線治療仍有待確定。在LLC-B中，嘌呤的類似物，特別是氟達(dá)拉濱，仍是顯然研究最多的。單獨(dú)的氟達(dá) 拉濱誘導(dǎo)出比采用綜合化學(xué)療法(包括烷化劑和皮質(zhì)激素療法(corticothSrapie))更好 的總體應(yīng)答水平。氟達(dá)拉濱誘導(dǎo)出比CH0P、CAP (苯丁酸氮芥)類型的綜合化學(xué)療法更多的完全的血液學(xué)緩解(7至40%)。雖然用氟達(dá)拉濱觀察到最好的應(yīng)答，但是在總體存活方面所觀察到的益處仍是處 于邊緣的。目前的治療嘗試是將氟達(dá)拉濱與常規(guī)的化學(xué)療法相聯(lián)合，例如氟達(dá)拉濱+環(huán)磷 酰胺，尤其是在該疾病的難治的形式中。在用氟達(dá)拉濱難治的患者中，存活預(yù)期僅為12個(gè) 月。然而，這些聯(lián)用會(huì)使得治療毒性提高，尤其是血液學(xué)毒性。在50%的用氟達(dá)拉濱和環(huán)磷酰胺的聯(lián)合進(jìn)行治療的患者中，觀察到感染。在25% 的經(jīng)治療的患者中，在治療過(guò)程中觀察到有文獻(xiàn)作依據(jù)的膿毒癥或肺??；在其余的25% 中，觀察到?jīng)]有文獻(xiàn)作依據(jù)的發(fā)熱和/或住院。通過(guò)治療性抗體的到來(lái)而達(dá)到了治療革命。在LLC-B中，出現(xiàn)了兩種治療性抗體 利妥昔單抗和阿侖珠單抗。在LLC-B中，在LLC的B淋巴細(xì)胞上的靶(抗原CD20)的低表 達(dá)阻礙了利妥昔單抗的活性。在LLC-B中以與嘌呤類似物和/或環(huán)磷酰胺相協(xié)同的方式使 用利妥昔單抗(在用氟達(dá)拉濱難治的患者(其中僅有5%的完全應(yīng)答)中，用氟達(dá)拉濱-環(huán) 磷酰胺_利妥昔單抗的聯(lián)合觀測(cè)到59%的總體應(yīng)答)。針對(duì)在LLC的白細(xì)胞和白血病B淋巴細(xì)胞上表達(dá)的抗原(其中該抗原的膜密度 的異質(zhì)性很大)的阿侖珠單抗的活性，受到其強(qiáng)的免疾抑制活性以及在治療期間或之后巨 細(xì)胞感染和機(jī)會(huì)感染的再激活的高發(fā)生率阻礙該抗體呈現(xiàn)出強(qiáng)的T免疫抑制活性。對(duì)于 阿侖珠單抗的血液學(xué)應(yīng)答為33%，該抗體能夠破壞在血液和骨髓中的克隆B淋巴細(xì)胞，但 是在淋巴結(jié)中不太有效。這幾點(diǎn)限制了該抗體在該適應(yīng)癥中的應(yīng)用。用與釔-90相偶聯(lián)的 抗-⑶20 (Zeval in)來(lái)進(jìn)行的放射免疫療法在LLC-B中引起低的緩解百分比，并且是造成顯 著的骨髓抑制的原因。專利US 6812232就其抑制細(xì)胞增殖的活性而描述了與本發(fā)明的那些接近的嘌呤 類似物。然而，在LLC中，過(guò)度的細(xì)胞增殖已經(jīng)停止。而專利申請(qǐng)W02005/002584提出，在慢性淋巴細(xì)胞白血病，更特別是B譜系的慢性 淋巴細(xì)胞白血病的治療中使用Roscovitine，優(yōu)選地以其(R)絕對(duì)構(gòu)型。Roscovitine為具有下式的嘌呤 然而，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，在治療其中牽涉細(xì)胞分裂和細(xì)胞凋亡之間的平衡失調(diào)的病理學(xué) 狀態(tài)中，Roscovitine的衍生物比Roscovitine具有高得多的活性；而且在某些情況下， Roscovitine的衍生物還具有比Roscovitine更好的溶解度。因此，本發(fā)明提出至少一種下述式I的化合物
式I其中· X 為 C 或 N，· Y 為 CH3 或 0H，并且· Z 為 H 或 CH3,或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、酯或異構(gòu)體在制備藥物中的用途，所述藥物用 于治療其中牽涉細(xì)胞分裂和細(xì)胞凋亡之間的平衡失調(diào)的病理學(xué)狀態(tài)。在本發(fā)明的第一個(gè)變化形式中，所述病理學(xué)狀態(tài)為慢性淋巴細(xì)胞白血病。更特別地，所述病理學(xué)狀態(tài)為B譜系的慢性淋巴細(xì)胞白血病。在本發(fā)明的第二個(gè)變化形式中，所述病理學(xué)狀態(tài)為腎臟疾病，更特別是多發(fā)性囊 腫病。在制備用于治療其中牽涉細(xì)胞分裂和細(xì)胞凋亡之間的平衡失調(diào)的病理學(xué)狀態(tài)的 藥物中所使用的優(yōu)選的鹽為式I的化合物的草酸鹽。優(yōu)選地，所使用的所述至少一種化合物具有下述式1-1，其相應(yīng)于其中X為N的式 式1-1。這是因?yàn)?，這些化合物在慢性淋巴細(xì)胞白血病和腎多發(fā)性囊腫病的細(xì)胞模型中的 活性是其中X為C的其相應(yīng)物的4至5倍，并且在水性介質(zhì)中的溶解度是其中X為C的其相應(yīng)物的5至10倍，正如在下文中將會(huì)看到的。但是，更優(yōu)選地，所使用的所述至少一種化合物具有下述式1-11，其相應(yīng)于其中X 為N，并且Y為OH的式I 式1-11。具有結(jié)構(gòu)I-II的化合物呈現(xiàn)出與I-I衍生物相當(dāng)?shù)幕钚?，但是其在水性介質(zhì)中的 溶解度進(jìn)一步增加。更特別地并且在第一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，在制備用于治療這些病理學(xué)狀態(tài)的藥 物中所使用的所述至少一種化合物是其中X為N，Y為CH3,并且Z為H的式I的化合物。該 化合物具有(R)絕對(duì)構(gòu)型并且具有下述式Ia 式la。在本發(fā)明的第二個(gè)十分特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述至少一種化合物具有(S)絕 對(duì)構(gòu)型。該化合物具有下述式Ib 式 lb。這是特別令人驚訝的，因?yàn)樵谙扔屑夹g(shù)中，一般是(R)絕對(duì)構(gòu)型的化合物允許獲 得最好的結(jié)果。在本發(fā)明的第三個(gè)十分特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，式Ia或Ib的所述至少一種化合 物以其草酸鹽的形式存在。但是，在本發(fā)明的第四個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，在制備用于治療其中牽涉細(xì)胞分裂 和細(xì)胞凋亡之間的平衡失調(diào)的病理學(xué)狀態(tài)的藥物中所使用的所述至少一種化合物是其中X 為C，Y為CH3,并且Z為H的式I的化合物。該化合物具有下述式Ic 式 Ic。該化合物可以以其⑶或(R)絕對(duì)構(gòu)型，以及以它們的混合物形式進(jìn)行使用。但是，在本發(fā)明的第五個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所使用的所述至少一種化合物是其 中X為N，Y為0H，并且Z為H的式I的化合物。該化合物具有下述式Id 式 Id?？梢匀缦旅鎸?shí)施例1中所描述的來(lái)獲得化合物Id。實(shí)施例1 化合物Id的制備依照下述流程，從二氯嘌呤開(kāi)始，以3個(gè)步驟來(lái)獲得該化合物 試劑和條件a :4-(2-吡啶基)芐胺，n-BuOH，110°C ;b :2_ 溴丙烷，K2CO3, DMSO ；c 絲氨醇，160°C 加熱，8小時(shí)。步驟1 :2-氯-6-[4-(2_吡啶基)苯基甲基氨基]嘌呤(IIIa)向2，6- 二氯嘌呤(2. 3g，IOmmol)在20mL n-BuOH中所形成的溶液之中添加 (2. Og, 1. 05mmol)的4_(2_吡啶基芐胺)和3mL的NEt30在110°C下加熱3小時(shí)后，將該混 合物冷卻至20°C，并過(guò)濾出固體和用5mL冷的丁醇進(jìn)行洗滌，隨后在真空中進(jìn)行干燥。產(chǎn) 率 85%。熔點(diǎn) > 250°C。1H NMR (d6-DMS0) δ 4. 80 (s，2H，CH2) ；7· 20 (m，1H，H 比聢基)；7. 45 (d, 2H，H 苯基)；7· 72 (m，2H，H _基)；7. 95 (m，3H，H 苯基和 H-8)，8. 54 (d，1H，J = 4. 8Hz，H _基)。步驟2 :2_氯-9-異丙基-6-[4-(2-吡啶基)苯基甲基氨基]-嘌呤(IVa)
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于18-20°C，向2-氯-6-[4-(2-吡啶基)苯基甲基氨基]-嘌呤(8mmol)在 IOmLDMSO中所形成的溶液之中添加K2CO3 (3. 5g,24mmol)和1. 9mL (20mmol) 2-溴丙烷。在 18-20°C下攪拌5小時(shí)后，再次添加2-溴丙烷(0. 5mL)，并在20°C下繼續(xù)攪拌5小時(shí)。在 添加50mL冷水(5°C )后，該混合物用EtOAc (3 X IOmL)進(jìn)行萃取，并且將有機(jī)相用鹽水 (3X IOmL)進(jìn)行洗滌，通過(guò)Na2SO4進(jìn)行干燥。通過(guò)蒸發(fā)溶劑來(lái)使衍生物IVa結(jié)晶。將其用 2mL 2-丙醇進(jìn)行研磨，并過(guò)濾。產(chǎn)率86 %。1H NMR(CDCl3) δ 1. 58(d，6H) ；4. 79 (七重，1H) ；4. 85 (寬 s，2H)； 6. 59 (寬 s, 1H) ；7. 20-7. 23 (m, 1H) ；7. 49(d，2H) ；7. 73-7. 71 (m，2H) ；7. 79 (s, 1H) ；7. 98 (d, 2H) ;8.71(d，lH)。步驟3 :2-(l，3-二羥基丙-2-基氨基)-6-[4-(2_吡啶基)苯基甲基氨基]_9_異 丙基嘌呤。Id在N2下，于160°C，將化合物IVa(IOmmol)和絲氨醇(2-氨基丙烷-1，3_ 二 醇)(2mL)的混合物加熱8小時(shí)。在冷卻至20°C后，添加20mL水，并且將該混合物用 EtOAc (4X IOmL)進(jìn)行萃取。有機(jī)溶液用2 X 20mL水進(jìn)行洗滌，干燥，并蒸發(fā)。通過(guò)用Et2O 進(jìn)行研磨來(lái)使衍生物Id結(jié)晶。熔點(diǎn)114-117 "C。產(chǎn)率 74 %。1H NMR(CdCl3) δ 1. 52(d,6H) ；3.78(m，4H)； 3. 96 (mlH) ；4. 55(七重，1H) ；4. 76(s，2H) ；5. 40(s，lH) ；6. 20(s，lH) ；7. 12(m，lH) ；7.38 (d， 2H) ；7.48 (s，1H) ；7. 62(m，2H) ；7. 90(d，2H) ；8. 60(d，lH)。在本發(fā)明的第六個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所使用的所述至少一種化合物是其中X為 N，Y為CH3,并且Z為CH3的式I的化合物。該化合物具有下述式Ie 式 Ie。在本發(fā)明的第七個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所使用的所述至少一種化合物是式Ie的 化合物的草酸鹽。該化合物具有下述式If 式If。應(yīng)當(dāng)注意，嘌呤的氮之一可以參與鹽的形成，這相應(yīng)于一個(gè)分子的嘌呤與該二酸 相結(jié)合。在本發(fā)明的第八個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所使用的所述至少一種化合物是下述式Ig 的化合物 式Ig。該化合物是(1札21 )-(1，3-二羥基-丁-2-基氨基)-6-[4-(2-吡啶基)苯基甲 基氨基]-9-異丙基嘌呤。Ig它是以與產(chǎn)物Id相同的方式而獲得的，但是在最后的步驟中用L-蘇氨醇或(1R， 2R) -2-氨基丁烷-1，3- 二醇代替氨基丙二醇。它具有下述的通過(guò)NMR測(cè)量的特征NMR 1. 2(d,3H) ； 1.4(d，6H) ；3.70(m，4H) ；4. 10 (m, 1H) ；4. 52(七重，1H) ；4.72 (寬 s，2H) ；5.50 (s，1H) ；6. 2(寬 s，lH) ；7. 15(m，lH) ；7.4(d，2H) ；7. 42 (s, 1H) ； 7. 55 (m, 2H)； 7. 85(d，2H) ；8. 60 (d, 1H)。在本發(fā)明的第九個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所使用的所述至少一種化合物是下述式Ih 的化合物 式 Ih。應(yīng)當(dāng)注意，嘌呤的氮之一可以參與鹽的形成，這相應(yīng)于一個(gè)分子的嘌呤與該二酸 相結(jié)合。可以使用酒石酸的三種異構(gòu)體。該化合物是2_(1，3- 二羥基丙-2-基氨基)-6-[4-(2-吡啶基)苯基甲基 基]-9-異丙基嘌呤的酒石酸鹽(Ih)。它通過(guò)下述方式獲得。向溶解在異丙醇(ImL)中的2mmol Id的溶液(加熱至70_80°C )之中，添加溶解 在異丙醇(ImL)中的2. Immol酒石酸。在冷卻后，通過(guò)過(guò)濾來(lái)分離出Id的酒石酸鹽。有利地，還可以使用式Ia、Id和Ig的化合物的鹽(例如富馬酸鹽、鹽酸鹽)、水合 物、酯，以及式Ic和Ig的化合物的異構(gòu)體。特別地，式I的化合物的酯也是本發(fā)明的一部分。式I的化合物的優(yōu)選的酯是?；?，例如乙?；?，煙酰基酯，和L系列或D系列 的氨基酸的酯。其他優(yōu)選的酯是從氨基酸例如纈氨酸或亮氨酸開(kāi)始而形成的。特別優(yōu)選的酯具有下述式II-I至II-4 式II-I
式 II-2
式 II-4C這是因?yàn)?，這些酯是式I的產(chǎn)物的前體(前藥)。本發(fā)明的目標(biāo)還在于它們?cè)谥苽渌幬镏械挠猛?，所述藥物用于治療其中牽涉?xì)胞 分裂和細(xì)胞凋亡之間的平衡失調(diào)的病理學(xué)狀態(tài)。通過(guò)閱讀下面的經(jīng)參考附圖而作出的解釋性描述，將會(huì)更好地理解本發(fā)明，并且 本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)將會(huì)更清楚地顯現(xiàn)。在所述附圖中-所附的

圖1顯示了式Ia的化合物以及式Ia的化合物的草酸鹽在慢性淋巴細(xì)胞 白血病的細(xì)胞中對(duì)于細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)，相比于由Roscovitine所導(dǎo)致的細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)；-圖2顯示了式Ie和If的化合物在慢性淋巴細(xì)胞白血病的細(xì)胞中對(duì)于細(xì)胞死亡 的誘導(dǎo)。在激酶測(cè)定法中，以各種不同的濃度測(cè)試了 Roscovitine以及式Ia的化合物、其 草酸鹽的效應(yīng)。
ml ο
這些測(cè)試如下進(jìn)行 緩沖液
緩沖液 A IOmM MgCl2, ImM EGTA, ImM DTT,25mM Tris-HCl ρΗ 7. 5，50 μ g 肝素 緩沖液C 60mM磷酸甘油，15mM磷酸對(duì)硝基苯酯，25mM MOPS (pH7. 2)，5mMEGTA, 15mM MgCl2, ImM DTT，ImM 釩酸鈉，ImM 磷酸苯酯。激酶的制備和測(cè)定于30°C，在ATP的終濃度為15 μ M的條件下，在緩沖液A或C中測(cè)定激酶的活性。 用二甲亞砜的合適稀釋液來(lái)進(jìn)行對(duì)照。如在Leclerc S.等人，J Biol Chem 2001 ；276 251~60 中所描述的，制備 CDKl/ 細(xì)胞周期蛋白Β(海星的M期卵母細(xì)胞，天然的)和CDK5/P25 (人的，重組的)，并進(jìn)行測(cè)定。 在 30μ 1 的終體積中，在15“] [￥-3節(jié)從1 (3，000(^/111111016 ； 10mCi/ml)存在下，用 Img 組蛋 白Hl/ml進(jìn)行測(cè)定。在30°C下溫育30分鐘后，將上清液的25 μ 1等分試樣置于2. 5X3cm 大小的Whatman P8磷酸纖維素紙上，然后在20秒之后在IOml磷酸/升的溶液中將過(guò)濾器 洗滌5次。然后，在Iml ACS(Amersham)存在下對(duì)過(guò)濾器進(jìn)行計(jì)數(shù)如CDKl 一樣，對(duì)CDK2/細(xì)胞周期蛋白A和CDK2/細(xì)胞周期蛋白E(人的，重組的， 在昆蟲(chóng)細(xì)胞中表達(dá)的)進(jìn)行測(cè)定。
如CDKl/細(xì)胞周期蛋白B 一樣,對(duì)⑶K9/細(xì)胞周期蛋白T (人的，重組的，在昆蟲(chóng)細(xì) 胞中表達(dá)的)進(jìn)行測(cè)定，其中使用PRB片段(AA773-928) (3. 5 μ g/測(cè)定)作為底物。如CDKl/細(xì)胞周期蛋白B —樣，對(duì)GSK-3 α/β (豬腦，天然的，經(jīng)親和 純化的)進(jìn)行測(cè)定，但是在緩沖液A中進(jìn)行并且使用特異的GSK-3底物(GS-1 YRRAAVPPSPSLSRHSSPHQSpEDEEE) (Bach S.等人，J. Biol. Chem.，2005 ；280，31208-19)。如CDKl/細(xì)胞周期蛋白B —樣，對(duì)CKl δ /e (豬腦，天然的，經(jīng)親和純化的)進(jìn)行 測(cè)定，但是在緩沖液A中進(jìn)行并且使用特異的底物RRKHAAIGSpAYSITA (ReinhardtJ.等人， Protein Expr&Purif, 2007 ；54 101-9)。如⑶Kl/細(xì)胞周期蛋白B 一樣，對(duì)DYRKlA(人的，重組的，在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá) 的)進(jìn)行測(cè)定。從劑量-應(yīng)答曲線計(jì)算出平均抑制濃度IC5tl值，并且以μ M列于下表1中表1 從表1中可以看出，對(duì)于所有蛋白激酶，(S)構(gòu)型的式Ib的化合物呈現(xiàn)出對(duì)于不 同激酶的抑制活性，該活性接近于Roscovitine的活性，并且略低于式Ia的化合物(即(R) 絕對(duì)構(gòu)型的其同系物)的活性。 但是，當(dāng)在B譜系的慢性淋巴細(xì)胞白血病的細(xì)胞(其取自具有這種類型的慢性淋巴細(xì)胞白血病的患者)上對(duì)式Ia的化合物及其草酸鹽以及式Ie和If的化合物進(jìn)行測(cè)試 時(shí)，令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，這些化合物對(duì)于LLC的細(xì)胞具有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的活性，該活性非常 高，為Roscovitine的活性的50至100倍，正如在圖1和2中所看到的。此外，將化合物la、lb、Ic、Id、Ie和If以及化合物Ia的草酸鹽對(duì)于誘導(dǎo)來(lái)自患者 的B2淋巴細(xì)胞的細(xì)胞死亡的效應(yīng)與(R)R0sc0Vitine對(duì)于該相同誘導(dǎo)的效應(yīng)進(jìn)行了比較。B2淋巴細(xì)胞是在B2譜系的慢性淋巴細(xì)胞白血病中所牽涉的淋巴細(xì)胞。通過(guò)3- (4，5- 二甲基噻唑-2-基)-5- (3-羧基甲氧基苯基)_2_ (4_磺基苯 基)-2H-四唑鐺(MTS)的還原來(lái)測(cè)定細(xì)胞生存力。通過(guò)測(cè)量在細(xì)胞裂解期間所釋放的乳酸脫氫酶(LDH)的活性水平來(lái)測(cè)定 細(xì)胞死亡。這兩種方法詳細(xì)描述于“Ribas J. , Boix J. , Cell differentiation, caspaseinhibit ion, and macromoIecuIar synthesis blockage, but not BCL_2or BCL-XLproteins protect SH—SY5Y cells from apoptosis triggered by two CDKinhibitory drugs. Exp. Cell Res.，2004 ;295，9-24”。所獲得的結(jié)果顯示在下表2中表2 在表2中，所顯示的值是以μΜ表示的平均抑制濃度IC5tl值。還在MDCK系上測(cè)試了本發(fā)明的化合物Ib和Id對(duì)于腎多發(fā)性囊腫病的效應(yīng)，相比 于(R) Roscovitineo化合物Ib和Id的活性是Roscovitine的50至60倍。已經(jīng)說(shuō)到過(guò)，本發(fā)明的其中X為N的化合物在水中的溶解度是其中X為C的化合 物的5至10倍。因而，其中X為C的式Ic的化合物在水中的溶解度是0. 5 μ g/mL,而其中X為N的 相應(yīng)化合物(即式Ib的化合物)在水中的溶解度是3. 3 μ g/mL。
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式lb至Ih的化合物本身也是本發(fā)明的目標(biāo)。式I的化合物的酯也是本發(fā)明的一部分。式I的化合物的優(yōu)選的酯是?；?，例如乙酰基酯，煙?；ィ蚅系列或D系列 的氨基酸的酯。優(yōu)選的酯是從氨基酸例如纈氨酸或亮氨酸開(kāi)始而形成的。特別優(yōu)選的酯具有下述式II-1至II-4 式II-1 式 II-3
式 II-4C這是因?yàn)?，這些酯是式I的產(chǎn)物的前體(前藥)。因此，本發(fā)明的化合物對(duì)于在制備用于治療慢性淋巴細(xì)胞白血病的藥物中使用來(lái) 說(shuō)是特別有效的。它們還特別適合于在治療患有慢性淋巴細(xì)胞白血病的患者的方法中進(jìn)行 施用。它們對(duì)于在制備用于治療腎臟疾病(特別是多發(fā)性囊腫病)的藥物中使用來(lái)說(shuō)也 是特別有效的。同樣地，它們特別適合于在治療患有腎臟疾病(特別是多發(fā)性囊腫病)的 患者的方法中進(jìn)行施用。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)容易地理解本發(fā)明的化合物可以以它們之間的混合(兩種 或更多種)形式，和還可以與其他在慢性淋巴細(xì)胞白血病或腎臟疾病例如多發(fā)性囊腫病的 治療中具有治療活性的化合物相聯(lián)合地，和/或與任何在藥學(xué)上可接受的賦形劑相聯(lián)合地 用于制備藥物；并且這些聯(lián)合和混合也是本發(fā)明的一部分。
權(quán)利要求
至少一種下述式I的化合物式I其中●X為C或N，●Y為CH3或OH，并且●Z為H或CH3，或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、酯或異構(gòu)體在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療其中牽涉細(xì)胞分裂和細(xì)胞凋亡之間的平衡失調(diào)的病理學(xué)狀態(tài)。FPA00001151593300011.tif
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其特征在于，所述病理學(xué)狀態(tài)為腎臟疾病，例如多發(fā)性囊腫病。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其特征在于，所述病理學(xué)狀態(tài)為慢性淋巴細(xì)胞白血病，更特 別是B譜系的慢性淋巴細(xì)胞白血病。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述在藥學(xué)上可接受的鹽為草酸 鹽或酒石酸鹽或鹽酸鹽或富馬酸鹽。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的用途，其特征在于所述至少一種式I的化合物，其中X 為N。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物是其中X為 N，并且Y為OH的式I的化合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物是其中X為 N，Y為CH3,并且Z為H的式I的化合物，其具有下述式Ia 式Ia或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或酯。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物是其中X為 N，Y為CH3,并且Z為H的式I的化合物，其具有下述式Ib的⑶絕對(duì)構(gòu)型 式Ib或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或酯。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其特征在于，所述至少一種化合物是式Ib的化合物的草酸鹽。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物是其中X 為N，Y為0H，并且Z為H的式I的化合物，其具有下述式Ic 式Ic或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或異構(gòu)體。
11.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物是其中X 為C，Y為CH3,并且Z為H的式I的化合物，其具有下述式Id 式Id或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、酯。
12.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物是其中X 為N，Y為CH3,并且Z為CH3的式I的化合物，其具有下述式Ie 式Ie或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或酯。
13.根據(jù)權(quán)利要求1至4和12中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物是其 中X為N，Y為CH3,并且Z為CH3的式I的化合物的草酸鹽，其具有下述式If 式If。
14.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物具有下述 式Ig 式Ig或者其藥學(xué)上可接受的水合物或異構(gòu)體。
15.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物具有下式 式Ih。
16.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的用途，其特征在于，所述至少一種化合物是酯，其選 自下述式II-I至II-4的化合物
17.下述式Ib的化合物 或者其鹽、水合物或酯。
18.下述式Ic的化合物 或者其鹽、水合物、酯或異構(gòu)體t
19.下述式Id的化合物式Id 或者其鹽、水合物、酯或異構(gòu)體t
20.下述式Ie的化合物式Ie 或者其鹽、水合物或酯。
21.下述式If的化合物
22.下述式Ig的化合物 或者其鹽、水合物、酯或異構(gòu)體t
23.下述式Ih的化合物
24.化合物，其特征在于，其具有下述式II-I至II-全文摘要
本發(fā)明涉及嘌呤衍生物在制備用于治療病理學(xué)狀態(tài)的藥物中的用途，在所述病理學(xué)狀態(tài)中牽涉細(xì)胞分裂和細(xì)胞凋亡之間的平衡失調(diào)，更特別地其中過(guò)度的細(xì)胞凋亡是所述病理學(xué)狀態(tài)的原因。根據(jù)本發(fā)明，使用式I的嘌呤衍生物。本發(fā)明可應(yīng)用于制藥領(lǐng)域。
文檔編號(hào)A61K31/52GK101918000SQ200880106727
公開(kāi)日2010年12月15日 申請(qǐng)日期2008年9月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年9月12日
發(fā)明者C·博修, H·加隆斯, K·萊斯特, K·貝塔耶布, L·梅耶, N·歐瑪塔 申請(qǐng)人:國(guó)家科研中心;雷恩第一大學(xué);笛卡爾巴黎大學(xué);西布列塔尼大學(xué);布雷斯特大學(xué)醫(yī)療中心