專利名稱：稠合雜芳基衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用作藥物、特別是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制劑和抗癌劑的稠合雜芳基衍生物。
背景技術(shù)：
磷脂酰肌醇(以下稱為“PI”)是細胞膜磷脂之一，已知它起著細胞內(nèi)信息傳遞的作用。特別是已經(jīng)很好地了解到，PI(4，5)二磷酸(PI(4，5)P2)因磷脂酶C而分解成二?；视秃图〈?1，4，5)三磷酸，引起蛋白激酶C的活化和細胞內(nèi)鈣動員[MJBerridge等，Nature(自然)，312，315，(1984)，Y Nishizuka，Science(科學(xué))，225，1365(1984)]。
另一方面，1980年代后半期，鑒定了PI3K是使PI類肌醇環(huán)的3位磷酸化的酶[D Whitman等.，Nature，332，664(1988)]。
PI3K在當(dāng)初發(fā)現(xiàn)時曾經(jīng)被認為是單一的酶。近年，確定了PI3K存在亞型，按體外底物特異性而分成以下3類[B Vanhaesebroeck，Trend in Biol.Sci.，22，267(1997)]。
第I類酶以PI、PI(4)P、PI(4，5)P2為底物，但在細胞內(nèi)最好的底物是PI(4，5)P2。第I類酶根據(jù)活化機理又分為兩類(第Ia類、第Ib類)。第Ia類被酪氨酸激酶體系活化，包括p110α、p110β和p110δ亞型。第Ib類包括被G蛋白偶聯(lián)的受體活化的p110γ亞型。
第II類酶以PI，PI(4)P為底物，但不以PI(4，5)P2為底物。這種酶包括PI3K C2α、C2β和C2γ亞型，其特征是C末端有C2區(qū)域，這說明它們由鈣離子控制活性。第III類酶只以PI為底物。尚不清楚這種酶的活化機理。各亞型都有本身的活性調(diào)節(jié)機理，因此認為它們會響應(yīng)固有的刺激而活化。
PI3K亞型中研究進行得最多的是第Ia亞型。第Ia類的亞型是由110kDa的催化亞單位(subunit)和85/55kDa的調(diào)節(jié)亞單位構(gòu)成的。調(diào)節(jié)亞單位含有SH2結(jié)構(gòu)域，可由與具有酪氨酸激酶活性的生長因子受體或癌基因產(chǎn)物磷酸化的酪氨酸殘基結(jié)合。結(jié)果，引發(fā)了p110催化亞單位的PI3K活性。因此，認為第Ia亞型與細胞增殖·致癌有關(guān)。此外，第Ia類PI3K和活性型ras結(jié)合，表現(xiàn)出酶活性，已確定活性型ras存在于多種癌中，這說明第Ia類PI3K與細胞的癌變有關(guān)。
如上所述，預(yù)期PI3K抑制劑可作為新型的用于細胞增殖性疾病的藥物、特別是抗癌劑。作為PI3K抑制劑，已知有wortmannin[H Yano等，J Biol Chem.，263，16178，1993]和下式所表示的LY294002[CJ Vlahos等，J Biol Chem.，269，5241，1994]，但迫切希望開發(fā)出具有更強的癌細胞增殖抑制作用的PI3K抑制劑。
特開平6-220059號公報中，披露了具有降血糖作用的下式(a)所表示的稠合雜芳基衍生物。此外，分別有Indian J.Chem.，Sect.B(1993)，32B(9)，965-8披露了下式(b)所表示的化合物，J.Heterocycl.Chem.(1992)，29(7)，1693-702披露了下式(c)所表示的化合物的合成方法，還有Al-Azharbull.Sci.(1992)，3(2)，767-75披露了下式(d)所表示的具有抗菌活性的化合物。但是，這些已有文獻對于PI3K抑制作用既沒有披露也沒有說明。
((a)式中，Z表示O、S或N-R0、R1表示可帶有取代基的氨基或可帶有取代基的雜環(huán)基等，R2表示氰基、可帶有取代基的氨基或可帶有取代基的雜環(huán)基。其它的定義參照該公報。(b)和(c)式中，R表示(取代)氨基或(取代)含氮飽和雜環(huán)基。)WO98/23613號公報中，披露了用作具有酪氨酸激酶受體抑制作用的抗癌劑等的稠合嘧啶衍生物，如4位上有特定的雜芳基取代的氨基、苯基取代的氨基或1-吲哚基、2位上未取代的7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶衍生物。
此外，后述通式(I)所表示的A環(huán)為如(b)所表示的環(huán)的化合物如下，(1)4-(4-嗎啉基)-2-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶，它用作具有消炎、解痙作用(antiinflammatory，spasmolytic)的化合物，述于Ann.Pharm，F(xiàn)r.(1974)，32(11)，575-9，(2)4-(4-嗎啉基)-2-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(1H)-酮，它用作具有利尿作用(diuretic activity)的化合物，述于Chem.Pharm.Bull.(1976)，24(9)，2057-77，(3)4-(4-嗎啉基)-2-苯基-6-喹唑啉醇和6-甲氧基-4-(4-嗎啉基)-2-苯基喹唑啉，它用作具有抗菌活性(antibiotic)的化合物，述于Khim.Farm.Zh.(1993)，7(7)，16-19和Khim.Geterotsiki.Soedin.(1971)，7(3)，418-20，(4)2，4-二氨基-6-苯基-8-哌啶代嘧啶并[5，4-d]嘧啶，它用作具有腦缺血預(yù)防·治療作用(celebral ischemia)的化合物，述于WO2000/41697公報，(5)后述通式(Ib)中B為苯環(huán)、W為N、n為2或3、存在的R1都為-OMe、并且R4b為未取代或被選自以下的1～3個取代基取代的苯基的化合物-鹵素、-NO2、-低級烷基、-O-低級烷基、-鹵代低級烷基和-CONRaRc，它用作心血管疾病藥物(cardiovascular)，述于WO99/32460，(6)后述通式(Ib)中B為苯環(huán)、W為N、n為1、R1為-鹵素或-低級烷基、并且R4b為-(可帶有取代基的咪唑基)的化合物，它用作抗寄生蟲藥(antiparasitics)，述于BE 841669號公報，(7)后述通式(Ib)中B為噻吩環(huán)并且W為CH的化合物，它用作抗焦慮藥(antianxiety)，述于WO99/43682號公報，(8)后述通式(Ib)中B為咪唑環(huán)并且W為N的化合物，它具有消炎作用和血小板凝集抑制作用等，述于特開昭62-10085號公報和61-158983號公報，(9)后述通式(Ib)中B為吡啶環(huán)并且R4b為未取代的苯基、未取代的吡啶基或-低級亞烷基-(可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基)的化合物，它具有解痙作用、利尿作用(spasmolytic、diuretic)或降血壓作用(hypotensive activity)，述于US3873545號公報和Act Pol.Pharm.(1994)，51(4-5)，359-63，(10)后述通式(Ib)中B為吡嗪環(huán)并且R4b為未取代的苯基或芐基的化合物，它具有血管擴張和鎮(zhèn)靜作用(coronary dilating，sedative acitivity)，述于US2940972號公報，(11)后述通式(Ib)中B為苯環(huán)并且R4b為苯乙烯基或2-(5-硝基-2-呋喃基)乙烯基的化合物，它具有消炎作用或抗菌活性，述于US 3753981號公報和德國專利第2140280號公報，以及(12)后述通式(Ib)中B為苯環(huán)、W為CH并且R2和R3是與鄰接的-N原子相連成為-(可帶有取代基的哌啶基)或-(可帶有取代基的哌嗪基)的化合物，分別在Eur.J.Med.Chem.(1996)，31(5)，417-425中，用作苯二氮_受體配體(benzodiazepine receptor ligand)，在US 4560692號公報中，用作具有解痙作用和安定作用等的化合物，還在特開平2-129169號公報中，用作具有脂質(zhì)過氧化抑制作用等的化合物。
此外，后述通式(Ib)中B為吡啶環(huán)并且n為0的化合物，披露于以下文獻特開平51-138689號公報(抗寄生蟲藥)、特開平56-120768號公報(熱敏記錄材料的色素組分)、Antimicrob.Agents Chemother.，(1975)，8(2)，216-19(抗菌作用)、Cancer Res.(1975)，35(12)，3611-17(誘變作用)、CA6419608c、Collect.Czech.Chem.Commun.，(1994)，59(6)，1463-6、美國專利第5304554號公報(抗HIV(艾滋病病毒)作用)、Chem.Pharm.Bull.，(1982)，30(6)，1974-9，以及J.Heterocycl.Chem.(1980)，17(5)，1029-34。但是，這些已有文獻中對PI3K抑制作用和抗癌作用既沒有披露也沒有說明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明者深入研究了對PI3K有抑制作用的化合物，發(fā)現(xiàn)新穎的稠合雜芳基衍生物有良好的PI3K抑制作用和癌細胞增殖抑制作用，可成為良好的PI3K抑制劑和抗癌劑，從而完成了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明涉及作為PI3K抑制劑或抗癌劑的醫(yī)藥組合物，它包含下示通式(I)所表示的稠合雜芳基衍生物或其鹽和制藥學(xué)上允許的載體。
(式中的記號表示以下含義 或 B苯環(huán)、或含有選自O(shè)、S和N的1～2個雜原子的5-6元單環(huán)雜芳環(huán)，R1-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-環(huán)烷基、-可帶有取代基的芳基、可帶有取代基的雜芳基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-ORb、-SRb、-SO2-Rb、-SO-Rb、-COORb、-CO-Rb、-CONRaRb、-SO2NRaRb、-NRaRb、-NRa-CORb、-NRa-SO2Rb、-O-CO-NRaRb或-NRaCO-COORb、-CO-含氮飽和雜環(huán)、-CONRa-低級亞烷基-ORb、-CONRa-低級亞烷基-NRbRc、-O-低級亞烷基-ORb、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-ORb、-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-N(低級亞烷基-NRaRb)2、-CONRa-ORb、-NRa-CO-NRbRc、或-OCORb，R2和R3可相同也可不同，為-H、-低級烷基、-低級亞烷基-ORa或-低級亞烷基-NRaRc，或者R2和R3與鄰接的N原子相連成可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基即-NR2R3，Ra和Rc可相同也可不同，為-H或-低級烷基，Rb為-H、-低級烷基、環(huán)烷基、可帶有取代基的芳基或可帶有取代基的雜芳基，n0、1、2或3，W和X可相同也可不同，為N或CH，YO、S或NH，R4為-H、-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-(可帶有取代基的芳基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的芳基)、-低級亞烯基-(可帶有取代基的芳基)、-低級亞炔基-(可帶有取代基的芳基)、-(可帶有取代基的環(huán)烷基)、-(可帶有取代基的環(huán)烯基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的環(huán)烷基)、-低級亞烯基-(可帶有取代基的環(huán)烷基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基)、-低級亞烯基-(可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基)、-(可帶有取代基的雜芳基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的雜芳基)或-低級亞烯基-(可帶有取代基的雜芳基)。以下相同。)本發(fā)明化合物(I)包括該定義所含的前述背景技術(shù)中記載的已知化合物以及后述實施例表中記載的化合物Z等市售化合物。
本發(fā)明還涉及通式(Ia)或(Ib)所表示的新穎稠合雜芳基衍生物或其鹽，以及包含該化合物或其鹽和制藥學(xué)上允許的載體的新穎醫(yī)藥組合物。
(式中的記號表示以下含義R1-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-環(huán)烷基、-可帶有取代基的芳基、可帶有取代基的雜芳基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-ORb、-SRb、-SO2-Rb、-SO-Rb、-COORb、-CO-Rb、-CONRaRb、-SO2NRaRb、-NRaRb、-NRa-CORb、-NRa-SO2Rb、-O-CO-NRaRb或-NRaCO-COORb、-CO-含氮飽和雜環(huán)、-CONRa-低級亞烷基-ORb、-CONRa-低級亞烷基-NRbRc、-O-低級亞烷基-ORb、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-ORb、-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-N(低級亞烷基-NRaRb)2、-CONRa-ORb、-NRa-CO-NRbRc、或-OCORb，R2和R3可相同也可不同，為-H或-低級烷基，或者R2和R3與鄰接的N原子相連成可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基即-NR2R3，Ra和Rc可相同也可不同，為-H或-低級烷基，Rb為-H、-低級烷基、環(huán)烷基、可帶有取代基的芳基或可帶有取代基的雜芳基，n0、1、2或3，XN或CH，YO、S或NH，R4a為-(可帶有取代基的芳基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的芳基)、-低級亞烯基-(可帶有取代基的芳基)、-低級亞炔基-(可帶有取代基的芳基)、-(可帶有取代基的環(huán)烷基)、-(可帶有取代基的環(huán)烯基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的環(huán)烷基)、-低級亞烯基-(可帶有取代基的環(huán)烷基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基)、-低級亞烯基-(可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基)、-(可帶有取代基的雜芳基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的雜芳基)或-低級亞烯基-(可帶有取代基的雜芳基)。
但以下化合物除外，(1)X為N、Y為S、n為3、R1為-CN、-OEt(氧乙基)和苯基的組合、并且R4a為2-硝基苯基的化合物，(2)X為CH、并且R4a為-(可帶有取代基的雜芳基)的化合物，(3)X為CH、Y為O、n為0、并且R4a為未取代苯基的化合物，以及(4)X為N、Y為S、n為2、R1都為未取代苯基、并且R4a為4-甲氧基苯基或未取代苯基的化合物。以下相同。)
(式中的記號表示以下含義B苯環(huán)、或含有選自O(shè)、S和N的1～2個雜原子的5-6元單環(huán)雜芳環(huán)，R1-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-環(huán)烷基、-可帶有取代基的芳基、可帶有取代基的雜芳基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-ORb、-SRb、-SO2-Rb、-SO-Rb、-COORb、-CO-Rb、-CONRaRb、-SO2NRaRb、-NRaRb、-NRa-CORb、-NRa-SO2Rb、-O-CO-NRaRb、-NRaCO-COORb、-NRaCOORb、-NRaCO-低級亞烷基-芳基、-NRa-SO2-低級亞烷基-芳基、-NRa-低級亞烷基-芳基、-低級亞烷基-ORb、-低級亞烷基-NRaRb、-CO-含氮飽和雜環(huán)、-CONRa-低級亞烷基-ORb、-CONRa-低級亞烷基-NRcRb、-CONRa-低級亞烷基-含氮飽和雜環(huán)、-O-低級亞烷基-ORb、-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-含氮飽和雜環(huán)、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-ORb、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-N(低級亞烷基-NRaRb)2、-CONRa-ORb、-NRa-CO-NRbRc或-OCORb，R2和R3與鄰接的N原子相連成可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基即-NR2R3，Ra和Rc可相同也可不同，為-H或-低級烷基，Rb為-H、-低級烷基、環(huán)烷基、可帶有取代基的芳基或可帶有取代基的雜芳基，n0、1、2或3，但是B為苯環(huán)時n為1、2或3，W為N或CH，R4b為-(可帶有取代基的芳基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的芳基)、-低級亞烯基-(可帶有取代基的芳基)、-低級亞炔基-(可帶有取代基的芳基)、-(可帶有取代基的環(huán)烷基)、-(可帶有取代基的環(huán)烯基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的環(huán)烷基)、-低級亞烯基-(可帶有取代基的環(huán)烷基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基)、-低級亞烯基-(可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基)、-(可帶有取代基的雜芳基)、-低級亞烷基-(可帶有取代基的雜芳基)或-低級亞烯基-(可帶有取代基的雜芳基)。
但以下化合物除外，(1)4-(4-嗎啉基)-2-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶，
(2)4-(4-嗎啉基)-2-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(1H)-酮，(3)4-(4-嗎啉基)-2-苯基-6-喹唑啉醇和6-甲氧基-4-(4-嗎啉基)-2-苯基喹唑啉，(4)2，4-二氨基-6-苯基-8-哌啶代嘧啶并[5，4-d]嘧啶，(5)B為苯環(huán)、W為N、n為2或3、存在的R1都為-OMe(氧甲基)、并且R4b為未取代或被選自以下的1～3個取代基取代的苯基的化合物-鹵素、-NO2、-低級烷基、-O-低級烷基、-鹵代低級烷基和-CONRaRc，(6)B為苯環(huán)、W為N、n為1、R1為-鹵素或-低級烷基、并且R4b為-(可帶有取代基的咪唑基)的化合物，(7)B為噻吩環(huán)并且W為CH的化合物，(8)B為咪唑環(huán)并且W為N的化合物，(9)B為吡啶環(huán)并且R4b為未取代的苯基、未取代的吡啶基或-低級亞烷基-(可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基)的化合物，(10)B為吡嗪環(huán)并且R4b為未取代的苯基或芐基的化合物，(11)B為苯環(huán)并且R4b為苯乙烯基或2-(5-硝基-2-呋喃基)乙烯基的化合物，以及(12)B為苯環(huán)、W為CH并且R2和R3是與鄰接的N原子相連成為-(可帶有取代基的哌啶基)或-(可帶有取代基的哌嗪基)的化合物。以下相同。)此外，本發(fā)明還提供了與PI3K有關(guān)的疾病(特別是癌)的治療方法，它包括給人或動物服用有效量的通式(I)、(Ia)或(Ib)所表示的稠合雜芳基衍生物或其鹽，還提供了該稠合雜芳基衍生物或其鹽在制造與PI3K有關(guān)的疾病的治療用藥物(特別是抗癌劑)中的用途。
發(fā)明的最佳實施方式下面進一步說明通式(I)、(Ia)和(Ib)的化合物。
本說明書中，術(shù)語“低級”是指碳原子數(shù)為1～10個、優(yōu)選1～6個、更優(yōu)選1～3個的直鏈或支鏈烴鏈。
作為“低級烷基”，優(yōu)選是碳原子數(shù)為1～6個的烷基，特別優(yōu)選是甲基和乙基。作為“低級烯基”，優(yōu)選是乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、異丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基和3-丁烯基等。作為“低級炔基”，優(yōu)選是乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基等。作為“低級亞烷基”、“低級亞烯基”和“低級亞炔基”，是前述低級烷基、低級烯基和低級炔基的二價基，優(yōu)選是亞甲基、亞乙基、亞乙烯基、亞丙烯基、亞乙炔基、和亞丙炔基。作為“環(huán)烷基”和“環(huán)烯基”，優(yōu)選是碳原子數(shù)為3～8個的環(huán)烷基和環(huán)烯基，特別優(yōu)選是環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)戊烯基。
作為“鹵素”，可例舉的有F、Cl、Br和I原子。作為“鹵代低級烷基”，是可被一個以上的前述鹵原子取代的前述低級烷基，優(yōu)選是-CF3。
本說明書中，“含氮飽和雜環(huán)基”是環(huán)原子包含1～2個N原子、還可含有1個O或S原子的環(huán)原子、也可帶有橋聯(lián)的5-7元含氮飽和雜環(huán)基，可與苯環(huán)稠合。優(yōu)選是吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基和嗎啉基。此外，-NR2R3形成的含氮飽和雜環(huán)基，優(yōu)選是1-吡咯烷基、1-哌嗪基、哌啶子基和嗎啉代，特別優(yōu)選是嗎啉代。
本說明書中，術(shù)語“芳基”是指芳香族烴環(huán)基，優(yōu)選是碳原子數(shù)為6～14個的芳基，更優(yōu)選是苯基和萘基。
本說明書中，“雜芳基”是指含有1-4個選自N、S、O的雜原子的5-6元單環(huán)雜芳基及其和苯環(huán)稠合而成的2環(huán)式雜芳基，它可以是部分飽和的。這里，作為單環(huán)雜芳基，優(yōu)選是呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基；作為2環(huán)式雜芳基，優(yōu)選是苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、吲哚基、異吲哚基、吲唑基、喹啉基、異喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、苯并間二氧雜環(huán)戊烯基(benzodioxolyl)。作為部分飽和的雜芳基，可例舉的有1，2，3，4-四氫喹啉基等。特別優(yōu)選的是5-6元單環(huán)雜芳基，其中更好的是咪唑基、噻唑基、三唑基、吡啶基和吡嗪基。
B中，作為“含有選自O(shè)、S和N的1～2個雜原子的5-6元單環(huán)雜芳環(huán)”，可例舉的有呋喃、噻吩、吡咯、咪唑、吡唑、噻唑、異噻唑、噁唑、吡啶、嘧啶、噠嗪和吡嗪環(huán)。優(yōu)選是吡啶、吡嗪、噻吩環(huán)；更優(yōu)選是吡啶環(huán)。
“可帶有取代基的芳基”、“可帶有取代基的雜芳基”、“可帶有取代基環(huán)烷基”、“可帶有取代基的環(huán)烯基”、“可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)”中，作為取代基，有1～5個可相同也可不同的任意取代基。優(yōu)選是選自以下A組的取代基。此外，R、R’和R”可相同也可不同，表示H或低級烷基。以下相同。
A組-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-鹵素、-鹵代低級烷基、-低級亞烷基-OR、-NO2、-CN、＝O、-OR、-O-鹵代低級烷基、-O-低級亞烷基-NRR’、-O-低級亞烷基-OR、-O-低級亞烷基-芳基、-SR、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOR、-COO-低級亞烷基-芳基、-COR、-CO-芳基、-芳基、-CONRR’、-SO2NRR’、-NRR’、-NR”-低級亞烷基-NRR’、-NR’-低級亞烷基-OR、-NR-低級亞烷基-芳基、-NRCO-低級烷基、-NRSO2-低級烷基、-環(huán)烷基和-環(huán)烯基。
但是，R4、R4a和R4b中，作為“可帶有取代基的芳基”和“可帶有取代基的雜芳基”的取代基，優(yōu)選是選自以下a)～c)中例舉的取代基的可相同也可不同的1～5個取代基。
a)-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-鹵素、-鹵代低級烷基、-低級亞烷基-OR、-NO2、-CN、＝O、-O-鹵代低級烷基、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOR、-COO-低級亞烷基-芳基、-COR、-CO-芳基、-CONRR’、-SO2NRR’、-Cyc或-Alp-Cyc(此處，Alp表示低級亞烷基、低級亞烯基或低級亞炔基，Cyc表示-可被1～5個選自A組的取代基取代的芳基，-可被1～5個選自A組的取代基取代的雜芳基、-可被1～5個選自A組的取代基取代的含氮飽和雜環(huán)基、-可被1～5個選自A組的取代基取代的環(huán)烷基或-可被1～5個選自A組的取代基取代的環(huán)烯基。以下相同。)。
b)-NR-E-F(此處，E表示-CO-、-COO-、-CONR’、-SO2NR’-或-SO2-；F表示-Cyc或-(可被選自以下的基團取代的低級烷基、低級烯基或低級炔基-鹵素、-NO2、-CN、-OR、-O-低級亞烷基-NRR’、-O-低級亞烷基-OR、-SR、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOR、-COR、-CO-芳基、-CONRR’、-SO2NRR’、-NRCO-低級烷基、-NRR’、-NR’-低級亞烷基-OR、-NR”-低級亞烷基-NRR’和-Cyc)以下相同。)c)-Z-R’、-Z-Cyc、-Z-Alp-Cyc、-Z-Alp-Z’-R’或-Z-Alp-Z’-Cyc(此處，Z和Z’可相同也可不同，表示O、S或NR。以下相同。)特別優(yōu)選的是，-低級亞烷基-OR、CONRR’、-NR-CO-Cyc1(此處，Cyc1表示-可被1～5個選自A組的取代基取代的芳基、-可被1～5個選自A組的取代基取代的雜芳基或-可被1～5個選自A組的取代基取代的含氮飽和雜環(huán)基，以下相同)、-NR-SO2-Cyc1、-OR、-NRR’、-O-低級亞烷基-NRR’和-O-低級亞烷基-(可被1～5個選自A組的取代基取代的含氮飽和雜環(huán)基)。
當(dāng)n為2～4時，多個R1可相同也可不同。
本發(fā)明的通式(I)、(Ia)和(Ib)所表示的化合物中，作為優(yōu)選的化合物有
(1)R2和R3形成的-NR2R3為可帶有選自-OH、＝O和-低級烷基的1～2個取代基的含氮飽和雜環(huán)基的化合物，(2)R2和R3形成的-NR2R3為嗎啉代的化合物，(3)W為N的化合物，(4)R4、R4a和R4b為-(可帶有取代基的芳基)或-(可帶有取代基的雜芳基)的化合物，(5)B為苯環(huán)；R1為-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-環(huán)烷基、-可帶有取代基的芳基、-可帶有取代基的雜芳基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-ORb、-SRb、-SO2-Rb、-SO-Rb、-COORb、-CO-Rb、-CONRaRb、-SO2NRaRb、-NRaRb、-NRa-CORb、-NRa-SO2Rb、-O-CO-NRaRb或-NRaCO-COORb的化合物，(6)B為吡啶、吡嗪或噻吩環(huán)并且n為0的化合物，(7)X為N、Y為O并且n為0的化合物，(8)R4、R4a和R4b為帶有選自以下取代基的芳基的化合物-低級亞烷基-OR、-CONRR’、-NR-CO-Cyc1、-NR-SO2-Cyc1、-OR、-NRR’、-O-低級亞烷基-NRR’和-O-低級亞烷基-(可被1～5個選自A組的取代基取代的含氮飽和雜環(huán)基)，和(9)后述實驗例3中所示的黑素瘤細胞增殖抑制實驗中具有5μM(微摩爾)以下抑制活性(IC50)的化合物。
作為通式(Ia)所表示的特別優(yōu)選的化合物，是R4a為帶有選自以下的至少一個取代基的苯基的化合物-OH、-NH2、-NH-低級烷基、-N(低級烷基)2、-O-低級亞烷基-NH2和-O-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán)基)。
此外，作為通式(Ib)所表示的特別優(yōu)選的化合物有(1)W為N、R4b為-(可帶有取代基的芳基)、并且R2和R3形成的-NR2R3為嗎啉代的化合物，(2)B為苯環(huán)、n為1或2、R1為-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-ORb、-SRb、-NRaRb、-NRa-CORb或-NRa-SO2Rb的化合物，以及(3)B為吡啶、吡嗪或噻吩環(huán)、n為0、并且R4b為可被選自-OH、-CH2OH和-CONH2的至少一個取代基取代的苯基的化合物，本發(fā)明化合物中，作為合適的化合物，作為通式(Ia)所表示的化合物，有(Co17)6-氨基-3’-(4-嗎啉代吡啶并[3’，2’4，5]呋喃并[3，2-d](2-嘧啶基)煙酰苯胺；(Co33)4-(4-嗎啉代吡啶并[3’，2’4，5]呋喃并[3，2-d](2-嘧啶基)苯胺；(Co50)3-(4-嗎啉代吡啶并[3’，2’4，5]呋喃并[3，2-d](2-嘧啶基))苯酚；(Co69)4-嗎啉代-2-[3-(2-(1-哌嗪基)乙氧基)苯基]吡啶并[3’，2’4，5]呋喃并[3，2-d]嘧啶；(Co73)3’-(4-嗎啉代吡啶并[3’，2’4，5]呋喃并[3，2-d](2-嘧啶基)丙烯酰苯胺；以及它們的鹽。此外，作為通式(Ib)所表示的化合物，有(co-144)N-[2-(3-苯磺酰胺基苯基)-4-嗎啉代(6-喹唑啉基)]乙酰胺；(co-164)3-(4-嗎啉代吡啶并[4，3-d](2-嘧啶基))苯酚；(Co 172)3-(4-嗎啉代吡啶并[3，2-d](2-嘧啶基)苯酚；(Co-174)3-(4-嗎啉代吡啶并[3，4-d](2-嘧啶基)苯酚；(Co186)3-(6-甲氧基-4-嗎啉代(2-喹唑啉基))苯酚；(Co190)3-(4-嗎啉代噻吩并[3，2-d](2-嘧啶))苯酚；(Co-191)3-(4-嗎啉代(2-蝶啶基)苯酚；以及它們的鹽。
本發(fā)明化合物根據(jù)取代基的種類，有時存在幾何異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，而本發(fā)明包括經(jīng)分離的這些異構(gòu)體或它們的混合物。而且，本發(fā)明化合物有時存在手性碳原子、因此存在基于手性碳原子的異構(gòu)體。本發(fā)明包括這些光學(xué)異構(gòu)體的混合物和它們經(jīng)分離的物質(zhì)。
此外，本發(fā)明化合物有時會形成鹽。只要制藥學(xué)上允許的鹽，則沒有特別的限制，作為酸加成鹽，可例舉的具體有鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸鹽；甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、天冬氨酸、谷氨酸等有機酸鹽。作為堿鹽，可例舉的有含有鈉、鉀、鎂、鈣、鋁等金屬的無機鹽；或甲胺、乙胺、乙醇胺、賴氨酸、鳥氨酸等有機堿鹽以及銨鹽等。此外，本發(fā)明包括化合物(I)、(Ia)或(Ib)及其鹽的各種水合物、溶劑合物和多晶形物質(zhì)。
(制造方法)下面說明本發(fā)明化合物的典型制造方法。根據(jù)官能團的種類，有時在沒有原料或中間體階段用適當(dāng)?shù)谋Ｗo基(即容易轉(zhuǎn)化成該官能團的基團)取代該官能團，這在制造技術(shù)上是有效的。然后，根據(jù)需要除去保護基，就能獲得所需的化合物。作為這樣的官能團，可例舉例如氨基、羥基、羧基等；作為它們的保護基，可例舉例如Greene和Wuts著的“Protective Groups in OrganicSynthesis(有機合成中的保護基)”第2版中記載的保護基，可根據(jù)反應(yīng)條件適當(dāng)使用這些保護基。
第1制造方法 (式中，L表示離去基團。以下相同。)本制造方法，是在用常規(guī)方法將通式(II)所表示的化合物轉(zhuǎn)化為反應(yīng)性衍生物(III)之后使其與胺(IV)反應(yīng)來獲得本發(fā)明化合物(I)的方法。在反應(yīng)性衍生物(III)中A環(huán)或取代基R4上也存在具有離去基團L的反應(yīng)部位的情況下，根據(jù)需要，可再與相同或不同的胺(IV)反應(yīng)。同樣，在發(fā)明化合物(I)中A環(huán)或R4上存在氯基、氟基等離去基團L的情況下，按照J.Am.Chem.Soc.，68，1288(1946)中記載的方法，進行水解反應(yīng)，或者按照tetrahedron Lett.，40，675(1999)中記載的方法以醇鹽為反應(yīng)劑經(jīng)本位置換反應(yīng)等，就能進行官能團轉(zhuǎn)換。
作為L所表示的離去基團，優(yōu)選是鹵素或者甲磺酰氧基、對甲苯磺酰氧基等有機磺酸殘基等。
獲得活性中間體(III)的反應(yīng)可按照常規(guī)方法進行。離去基團為氯原子時，在冷卻或加熱下使化合物(II)與氧氯化磷、草酰氯、或亞硫酰二氯在反應(yīng)惰性的溶劑中或無溶劑時進行反應(yīng)。作為反應(yīng)惰性的溶劑，可例舉苯、甲苯等芳香族烴類溶劑；四氫呋喃(THF)、1，4-二噁烷等醚類溶劑；二氯甲烷、氯仿等鹵代烴類溶劑；吡啶、三甲基吡啶等堿性溶劑。這些溶劑可單獨使用也可兩種以上混合使用。溶劑可根據(jù)原料化合物的種類等適當(dāng)選擇。反應(yīng)時，可用堿(優(yōu)選是二烷基苯胺、三乙胺、氨、二甲基吡啶、三甲基吡啶等)或氯化磷(例如五氯化磷)、季銨鹽(例如氯化四乙銨)、N，N-二烷基酰胺化合物(例如二甲基甲酰胺(DMF))作為反應(yīng)促進劑。離去基團為磺酰氧基時，可由相應(yīng)的磺酰氯按照常規(guī)方法合成，例如可按照Tetrahedron Lett.23(22)，2253(1982)、TetrahedronLett.27(34)，4047(1986)中記載的方法進行。
反應(yīng)性衍生物(III)與胺(IV)作用獲得化合物(I)的反應(yīng)，可通過在反應(yīng)惰性的溶劑存在或不存在下于冷卻或加熱下使胺(IV)與化合物(III)反應(yīng)來進行。作為溶劑，可例舉和前述相同的物質(zhì)，它們可單獨使用也可兩種以上混合使用。溶劑可根據(jù)原料化合物的種類等適當(dāng)選擇。反應(yīng)中，在氫化鈉等無機堿或三乙胺(TEA)、吡啶、2，6-二甲基吡啶等有機堿的存在下反應(yīng)時，有時會促進反應(yīng)。
第2制造方法 (式中，Rd表示-可帶有取代基的低級烷基，Rb的含義和前述相同。以下相同。)本制造方法，是按照常規(guī)方法使通式(Ia)或(Ic)所表示的羥基取代的化合物進行O-烷基化反應(yīng)獲得(Ib)或(Id)。反應(yīng)方法有，例如三乙胺、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸銫、氫氧化鈉、氫化鈉、叔丁醇鉀等堿的存在下，例如以鹵代烷基或磺酸酯等作為烷基化試劑與化合物(Ia)和(Ic)反應(yīng)。反應(yīng)溫度可在冷卻下或加熱下進行，根據(jù)原料化合物的種類等適當(dāng)選擇。O-烷基化反應(yīng)中用水作為溶劑、或者使用加水的反應(yīng)條件時，例如在硫酸氫四正丁基銨等相轉(zhuǎn)移催化劑的存在下進行反應(yīng)，有時會促進反應(yīng)。
作為O-烷基化反應(yīng)的其它方法，可例舉光延反應(yīng)(Mitsunobu reaction)等，例如可用Synthesis，1(1981)中記載的方法及其改良方法。而且，對羥基進行羥乙基化時，使用[1，3]二氧戊烷-2-酮的碳酸酯的方法也是有效的，例如可用J.Am.Chem.Soc.，68，781(1946)中記載的方法。
此外，本發(fā)明化合物(Ib)、(Id)中Rb、Rd上存在反應(yīng)性官能團時，可用公知的反應(yīng)進行官能團轉(zhuǎn)換。例如，Rb、Rd上存在羥基時，可進行前述的O-烷基化反應(yīng)；存在鹵素等離去基團時，可通過與適當(dāng)醇或胺反應(yīng)進行前述方法中的O-烷基化或后述第4制造方法記載的方法中的N-烷基化。存在酯基時，可用后述第3制造方法記載的方法使官能團轉(zhuǎn)化成羧酸、羥甲基、酰胺基。
本制造方法的原料化合物(Ia)和(Ic)，可用羥基被?；惐Ｗo基(例如乙酰基、甲苯磺酰基等)所保護的原料化合物按照前述第1制造方法記載的方法制成。而且，用氧氯化磷作為合成反應(yīng)性衍生物(III)的反應(yīng)試劑、然后和所需的氨基反應(yīng)來合成(I)時，根據(jù)原料、保護基的種類、反應(yīng)條件和后處理方法，可除去羥基的保護基，有時生成O-磷酰胺化合物。此時，可用例如Chem.Pharm.Bull.，37，2564(1989)中記載的方法除去磷酰胺基。此外，通常的引入保護基·脫保護可用前述的“Protective Groups in Organic Synthesis(有機合成中的保護基)”中記載的方法進行。
第3制造方法 (式中，Rf表示低級烷基，Rg表示可帶有取代基的低級烷基。以下相同。)本制造方法，是通過使通式(Ie)所表示的本發(fā)明酯化合物進行官能團轉(zhuǎn)化反應(yīng)來分別獲得本發(fā)明的其它化合物羥甲基化合物(If)、羧酸衍生物(Ig)、酰胺衍生物(Ih)的方法。各種方法都可按照常規(guī)方法進行，例如日本化學(xué)會編的《實驗化學(xué)講座》(丸善)、前述的《Protective Groups in OrganicSynthesis(有機合成中的保護基)》中記載的方法。
優(yōu)選的，轉(zhuǎn)化為羥甲基化合物(If)的還原反應(yīng)可通過在醚類溶劑、芳香族烴類溶劑等反應(yīng)惰性溶劑中使用氫化鋰鋁、硼氫化鋰、硼氫化鋅、硼烷、Vitride等還原劑來進行。轉(zhuǎn)化為羧酸衍生物(Ik)的水解反應(yīng)可通過在甲醇、乙醇、THF、水等溶劑中單獨使用或兩種以上混合使用氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀等來進行。轉(zhuǎn)化為化合物(Ih)的酰胺化反應(yīng)可通過在轉(zhuǎn)化為羧酸的反應(yīng)性衍生物例如酰鹵化物(酰氯等)或酸酐之后使之與胺反應(yīng)來進行。與胺反應(yīng)時，優(yōu)選在反應(yīng)惰性的溶劑中于堿(氫氧化鈉等無機堿；或TEA、二異丙基乙胺、吡啶等有機堿)的存在下進行。更優(yōu)選的是，酰胺化反應(yīng)也可通過在縮合劑(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(EDCI)、1，1’-羰基二-1H-咪唑(CDI)等)的存在下于反應(yīng)惰性的溶劑中與羧酸反應(yīng)來進行。此時，還可加入1-羥基苯并三唑(HOBt)等添加劑。反應(yīng)溫度和溶劑可根據(jù)原料化合物來適當(dāng)選擇。
第4制造方法 (式中，R’為前述的含義，Rh表示-可帶有取代基的低級烷基，Ri表示-Cyc或-可帶有取代基的Alp。C環(huán)表示-可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)，Rj表示-H、-低級烷基、-芳基等。以下相同。)本制造方法包括，在通式(Ii)所表示的本發(fā)明硝基化合物經(jīng)還原反應(yīng)轉(zhuǎn)化為氨基化合物(Ij)之后，進行N-烷基化、酰胺化、磺酰胺化、脲化、氨基甲?；Ⅴ啺坊虬被邕蚧雀鞣N修飾反應(yīng)，分別獲得本發(fā)明的其它化合物(Ik)、(Im)、(In)、(Io)、(Ip)、(Iq)或(Ir)。此外，根據(jù)所需，可再對這些產(chǎn)物適當(dāng)進行N-烷基化等公知的取代基轉(zhuǎn)化。
各種反應(yīng)都可按照常規(guī)方法進行。例如可用前述的《實驗化學(xué)講座》、《有機合成中的保護基》中記載的方法。以下例舉了優(yōu)選的方法。
硝基化合物的還原反應(yīng)可在氫氣氣氛下于甲醇等醇類溶劑中在靶-炭(Pd-C)等催化劑的存在下進行。
以各種醛為原料時，N-烷基化反應(yīng)可以通過使用硼氫化鈉、三乙酰氧基硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉等作為還原劑的還原胺化反應(yīng)來進行、或者通過使用Dean-Stark脫水裝置等形成亞胺然后使之與作為還原劑的硼氫化鈉等反應(yīng)的方法來進行。而用碘代甲基、溴芐等鹵代烷基作為原料、以硫酸二甲酯等為烷基化試劑時，可于冷卻或加熱下，在DMF、乙腈、甲苯等不參與反應(yīng)的溶劑中，于碳酸鉀、氫氧化鈉、氫化鈉等堿的存在下進行反應(yīng)。單烷基化反應(yīng)可通過在用三氟乙?；仁棺鳛樵系陌坊衔秕；笤儆名u代烷基按照常規(guī)方法進行烷基化來有效地進行。然后將?；摫Ｗo。二烷基化反應(yīng)可用2當(dāng)量以上的鹵代烷基進行反應(yīng)，也可例如在二甲基化反應(yīng)時通過在室溫或加熱下使福爾馬林于甲酸中反應(yīng)來進行。
酰胺化反應(yīng)可按照和前述第3制造方法相同的方法進行?；酋０坊磻?yīng)可用作為反應(yīng)衍生物的酰鹵化物(酰氯等)或酸酐在反應(yīng)惰性的溶劑中進行。脲化反應(yīng)可通過在冷卻或加熱下于芳香族烴類溶劑等不參與反應(yīng)的溶劑中與各種異氰酸酯反應(yīng)來進行。氨基甲酸化反應(yīng)可通過在冷卻或加熱下于反應(yīng)惰性的溶劑中與各種氯甲酸酯衍生物反應(yīng)來進行。酰亞胺化可用琥珀酸酐、馬來酸酐等來實施。
氨基噻唑化反應(yīng)可通過在氨基化合物(Ij)轉(zhuǎn)化為硫脲衍生物后與α-鹵代酮等反應(yīng)來進行。作為轉(zhuǎn)化為硫脲衍生物的方法，可例舉例如Synth Commun1998，28(8)，1451.J Org Chem，1984，49(6)，997.Org Synth，1963，IV，180.J.Am.Chem.Soc，1934，56 1408等。硫脲衍生物向噻唑的轉(zhuǎn)化可通過在冷卻或加熱下于乙醇等醇類溶劑或甲基乙基酮等羰基類溶劑中與α-鹵代酮類反應(yīng)而進行。反應(yīng)時，通過加入堿(碳酸鉀、碳酸鈉等)，可使反應(yīng)順利進行。
第5制造方法 (式中，Rk和Rm表示-可帶有取代基的低級烷基。)
本制造方法，是在由通式(Is)所表示的本發(fā)明硝基化合物轉(zhuǎn)化成氨基化合物(It)后，進行各種修飾反應(yīng)，獲得本發(fā)明的其它化合物。各反應(yīng)按和第4制造方法相同的方法進行。
其它制造方法其它本發(fā)明化合物可用和上述相同的制造方法制成，也可用常規(guī)方法的各種反應(yīng)制成。各種反應(yīng)可適當(dāng)使用例如前述《實驗化學(xué)講座》、《有機合成中的保護基》中記載的方法。
例如，通過使帶有甲氧基的化合物脫甲基來獲得酚衍生物時，可用《有機合成中的保護基》中記載的方法，即在室溫或加熱下于二甲基亞砜(DMSO)等溶劑中與作為脫甲基試劑的氰化鈉、氰化鉀等反應(yīng)的方法。
原料化合物的制造方法本發(fā)明化合物的原料化合物(II)可用下示合成路徑圖所示的反應(yīng)按照常規(guī)方法進行。
(制造方法1) (式中，Rn表示低級烷基。以下相同。)原料化合物(IIc)可通過為酰胺化合物的中間體(5)的閉環(huán)反應(yīng)或者通過為鄰氨基苯甲酸衍生物的原料化合物(1)經(jīng)亞胺酸酯(6)作用的閉環(huán)反應(yīng)來進行合成。所用的閉環(huán)反應(yīng)是嘧啶環(huán)形成反應(yīng)的常規(guī)方法，例如，中間體(5)的閉環(huán)反應(yīng)，有Chem.Pharm.Bull.，39(2)352(1991)中記載的方法；中間體(1)和(6)作為原料的反應(yīng)，有J.Med.Chem.，9，408(1966)中記載的方法。而且，為酰胺化合物的中間體(5)可由苯胺衍生物(4)按照常規(guī)方法經(jīng)酰胺化來合成，或者按照常規(guī)方法依次對(1)進行羧酸的酯化、氨基的?；⒑王セD(zhuǎn)化為酰胺基來合成。例如，可采用參照J.Med.Chem.，33，1722(1990)、Eur.J.Med.Chem.-Chim.Ther.，9(3)，305(1974)等的方法。以(2)為原料經(jīng)?；@得(3)時，根據(jù)原料的種類和反應(yīng)條件，可進行二?；?。此時，通過在堿性條件下進行處理，就能獲得所需的單?；?3)。
(制造方法2) 原料化合物(IId)可由作為酰胺化合物的中間體(12)的閉環(huán)反應(yīng)或者用酰胺化合物(10)作用于作為酯衍生物的中間體(7)的閉環(huán)反應(yīng)來合成。中間體(12)的閉環(huán)反應(yīng)和前述相同，作為原料的中間體(7)和(10)的反應(yīng)，例如可按照J.Med.Chem.，37，2106(1994)中記載的方法進行。為酰胺化合物的中間體(12)可通過用常規(guī)方法使酯化合物(7)進行官能團轉(zhuǎn)化來得到。為2環(huán)酯化合物的中間體(9)可通過在堿的存在下用使腈化合物(7)與酯化合物(8)作用的5元環(huán)形成反應(yīng)來合成。例如，可按照J.Org.Chem.37，3224(1972)或J.Heterocycl.Chem.11(6)，975(1974)等方法來合成。
(制造方法3) 原料化合物(IIe)例如可由原料化合物(14)的閉環(huán)反應(yīng)合成。作為適當(dāng)?shù)臈l件，可例舉在二苯醚等高沸點溶劑中或不用溶劑對化合物(14)加熱的方法。原料化合物(14)可按照常規(guī)方法合成。例如由相應(yīng)的苯胺(13)和化合物(15)進行縮合反應(yīng)來合成。
由此制成的本發(fā)明化合物，可以直接以游離體形式，也可以經(jīng)常規(guī)方法進行成鹽處理而作為其鹽進行分離·提純。分離·提純通過適當(dāng)進行萃取、濃縮、蒸餾、結(jié)晶化、過濾、再結(jié)晶、各種色譜法等通常的化學(xué)操作來進行。
各種異構(gòu)體可利用異構(gòu)體間的物理化學(xué)性質(zhì)差異用常規(guī)方法來分離。例如，外消旋化合物可由通常的光學(xué)拆分法(例如，用常用的光學(xué)活性酸(酒石酸等)轉(zhuǎn)化為非對映體鹽，進行光學(xué)拆分的方法)，轉(zhuǎn)化成立體的純異構(gòu)體。非對映體的混合物例如可通過分別結(jié)晶或色譜法等分離。光學(xué)活性的化合物可由適當(dāng)?shù)墓鈱W(xué)活性原料制成。
工業(yè)實用性本發(fā)明化合物具有激酶抑制活性、特別是PI3K抑制活性，因此能用于抑制與PI3K有關(guān)的異常細胞增殖。所以，它對因PI3K而異常細胞增殖所引起的疾病例如再狹窄、動脈硬化、骨骼疾病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病、牛皮癬、前列腺肥大、動脈粥樣硬化癥、炎癥、血管生成、胰腺炎、腎病、癌等的治療劑是有用的。特別是本發(fā)明化合物具有良好的癌細胞增殖抑制作用，對癌良好地在所有的實體癌和淋巴瘤、特別是白血病、皮膚癌、膀胱癌、乳癌、子宮癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、大腸癌、胰腺癌、腎癌、胃癌、腦腫瘤的治療中都有用。
通過以下藥理實驗，確定了本發(fā)明化合物的藥理作用。
實驗例1 PI3K(p110α亞型)的抑制實驗測定用桿狀病毒表達系(expression system)制得的酶(牛p110α)進行。酶的配制按照I Hile等的《Cell(細胞)》，70，419，1992進行。將評價化合物配制成10mM(毫摩爾)的DMSO溶液，連續(xù)用DMSO稀釋。
評價化合物(0.5微升)和酶在25微升緩沖液(40mM Tris-HCl(pH 7.4)，200mM NaCl，2mM二硫蘇糖醇，5mM MgCl2)中混合后，加入含有10微克PI(Sigma)、2μCi(微居里)[γ-32P]ATP(Amersham Pharmacia)、80μM(微摩爾)非放射性ATP(Sigma)的5mM Tris-HCl(pH 7.4)緩沖液25微升，開始反應(yīng)。于37℃反應(yīng)15分鐘后，加入200微升的1M HCl，400微升的CHCl3/MeOH(1∶1)、攪拌、離心分離。用150微升的MeOH/1M HCl(1∶1)再萃取有機層兩次，用Cerenkov光測定其放射活性。
化合物的抑制活性IC50，是以單添加DMSO時的放射活性為100％，沒有酶時的放射活性為0％，算出50％抑制時實驗化合物的濃度。
本發(fā)明化合物具有良好的p110α亞型抑制活性。例如，化合物(以下簡稱為Co)10、Co 17和Co 24具有1μM以下的IC50。
而且，用和上述相同的方法，確定本發(fā)明化合物還具有對其它亞型(例如C2β亞型)的抑制活性。
實驗例2 腸癌細胞的增殖抑制實驗?zāi)c癌細胞株HCT116細胞在含有10％胎牛血清的McCoy 5A培養(yǎng)基(GIBCO)中培養(yǎng)。將HCT116(5000個細胞/穴)在96穴板(well plate)上接種，培養(yǎng)一晚。在其中加入以培養(yǎng)基稀釋的化合物至最終濃度為0.1-30μM(最終DMSO濃度，1％)，培養(yǎng)72小時后，加入Alamar Blue試劑。2小時后，由激發(fā)波長530納米與發(fā)射波長590納米的熒光強度比求出抑制活性IC50。本發(fā)明的Co 14、Co 24、Co 25、Co 31、Co 46和Co 47的化合物具有良好的癌細胞增殖抑制作用。
實驗例3 黑素瘤細胞的增殖抑制實驗黑素瘤細胞株A375細胞在含有10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基(GIBCO)中培養(yǎng)。A375細胞預(yù)先在含有1微升/穴(最終濃度0.001-30μM)的96穴板上以10000個細胞/100微升接種。培養(yǎng)46小時后，加入Alamar Blue試劑(10微升/穴)。2小時后，用和上述相同的方法，由激發(fā)波長530納米和發(fā)射波長590納米的熒光強度比確定實驗化合物的IC50。
本發(fā)明化合物具有良好的增殖抑制活性。例如，Co 17、Co 33、Co 50、Co 69、Co 164、Co 172、Co 174、Co 186、Co 190和Co 191具有良好的黑素瘤細胞增殖抑制作用。其IC50值為0.33-4.26μM。而作為公知PI3K抑制劑的LY294002的值為8.39μM。
除了上述癌細胞株以外，本發(fā)明化合物對宮頸癌細胞株HeLa細胞、肺癌細胞株A549、H460細胞、腸癌細胞株COLO 205、WiDr、Lovo細胞、前列腺癌細胞株P(guān)C3、LNCaP細胞、卵巢癌細胞株SKOV-3、OVCAR-3、CH1細胞、神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株U87MG細胞、胰腺癌細胞株BxPC-3細胞也有良好的癌細胞增殖抑制作用。
實驗例4 體內(nèi)癌細胞增殖抑制實驗將人宮頸癌細胞株HeLaS3株的細胞5×106個移植到雌性Balb/c裸小鼠的背側(cè)部皮下。當(dāng)腫瘤體積達到100～200毫米3時，將評價化合物每天1次腹腔內(nèi)給藥2周。還在對照組中將20％羥丙基-β-環(huán)糊精/鹽水進行腹腔內(nèi)給藥。用游標(biāo)卡尺測量腫瘤直徑，到最終給藥的第二天為止進行經(jīng)時測量。由以下計算式算出腫瘤體積。
腫瘤體積(毫米3)＝1/2×短徑(毫米)2×長徑(毫米)本實驗中，本發(fā)明化合物表現(xiàn)出比對照組更良好的癌增殖抑制作用。
本發(fā)明的藥物，可用1種或兩種以上的通式(I)、(Ia)或(Ib)所示的本發(fā)明化合物、通常制成制劑所用的藥劑用載體、賦形劑和其它添加劑按照常用的方法配制而成。給藥可以片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、液劑等口服形式；靜脈注射、肌肉注射等注射劑形式；或栓劑、經(jīng)鼻、經(jīng)粘膜、經(jīng)皮等非口服形式中的任何形式進行。
作為本發(fā)明用于口服的固體組合物，可用片劑、散劑、顆粒劑等形式。這樣的固體組合物中，一種或以上的活性物質(zhì)可混有至少一種惰性稀釋劑，例如乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶纖維素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、偏硅酸鋁鎂。組合物還可按常規(guī)方法，含有除惰性的稀釋劑以外的添加劑，例如硬脂酸鎂這樣的潤滑劑和纖維素乙醇酸鈣這樣的崩解劑、谷氨酸或天冬氨酸這樣的助溶劑。片劑或丸劑必要時還可用蔗糖、明膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯這樣的糖衣或者胃溶性或腸溶性物質(zhì)的膜作為包衣。
用于口服的液體組合物，可包括藥劑上允許的乳劑、溶液劑、懸浮劑、糖漿劑、酏劑等；常用的惰性稀釋劑，例如純水、乙醇。該組合物還可含有除惰性稀釋劑以外的潤濕劑、懸浮劑這樣的助劑、甜味劑、調(diào)味劑、芳香劑、防腐劑。
作為非口服的注射劑，包括無菌的水性或非水性溶液劑、懸浮劑、乳劑。作為水性的溶液劑、懸浮劑，含有例如注射用蒸餾水和生理鹽水。作為非水溶性的溶液劑、懸浮劑，例如包括丙二醇、聚乙二醇；橄欖油這樣的植物油；乙醇這樣的醇類；聚山梨醇酯80等。這些組合物還可含有防腐劑、潤濕劑、乳化劑、分散劑、穩(wěn)定劑、助溶劑這樣的助劑。例如通過將它們經(jīng)除菌濾器過濾，摻入殺菌劑或經(jīng)照射，可使之無菌。或者，在使用前用無菌水或無菌的注射用溶劑溶解，將它們制成無菌的固體組合物。
通?？诜r，每天的給藥量約0.0001～50毫克/千克、優(yōu)選約0.001～10毫克/千克、更優(yōu)選約0.01～1毫克/千克是適宜的，可1次給藥，也可分2～4次給藥。靜脈給藥時，每天的給藥量約0.0001～1毫克/千克、優(yōu)選約0.0001～0.1毫克/千克是適宜的，可每天1次或分幾次給藥。給藥量應(yīng)考慮癥狀、年齡、性別等，根據(jù)個別情況適當(dāng)決定。
本發(fā)明化合物可單獨使用也可和其它治療方法(例如放射療法和外科手術(shù))合用。此外，還可和其它抗癌劑，例如烷基化劑(順鉑、卡鉑等)、代謝拮抗劑(氨甲喋呤、5-FU等)、抗癌性抗生素(阿霉素、博來霉素等)、抗癌性生物減(紫杉醇、依托泊等)、抗癌性激素劑(地塞米松、他莫昔芬等)、抗癌性免疫類藥劑(干擾素α、β、γ等)等合用。
實施發(fā)明的最佳方式下面，參照實施例更詳細地說明本發(fā)明。本發(fā)明化合物不限于下述記載的化合物。
表1～3和13～16示出實施例中使用的原料化合物，表4～11和17～24示出本發(fā)明典型的化合物物理化學(xué)性質(zhì)。具有表12和25～26所示的化學(xué)結(jié)構(gòu)式的本發(fā)明化合物，可用和實施例或制造方法中記載的方法大致相同的方法、或用本領(lǐng)域中技術(shù)人員知道的若干改良方法，容易地制成。
表中省略記號的含義分別如下，Rco原料化合物的化合物號；Rex參考例化合物的制造方法(數(shù)字表示后述參考例編號，表示用該參考例記載的方法或預(yù)期相同的方法制造該化合物)；Co本發(fā)明化合物的化合物編號；Str結(jié)構(gòu)式；Sal鹽；Syn制造方法(數(shù)字表示后述實施例號，表示用該實施例記載的方法或與其相同的方法制造該化合物。)；DAT物理化學(xué)性質(zhì)(FFAB-MS(M+H)+；FNFAB-MS(M-H)-；EEI-MS；M熔點[℃]；(dec.)分解；N1NMR(DMSO-d6，TMS內(nèi)標(biāo))的特征峰δ(ppm)；Ac乙?；?；Bn芐基；Ph苯基；Ts4-甲苯磺?；?；Ms甲磺?；?；Me甲基；Et乙基。而且，有多個位置可被取代基取代時，取代基的前面記載了取代位置(如，6-MeO-7-HO表示6-甲氧基-7-羥基)。
表1
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表6
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表8
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表10 表11
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表13
表14
表15
表16
表17
表18
表19
表20
表21
表22
表23
表24
表25 表26 以下參考例說明了前述各表所示的原料化合物的制造方法。
參考例1將2-氯-3-氰基吡啶、乙醇酸乙酯和碳酸鈉的3-甲基-1-丁醇懸浮液加熱回流3天。蒸餾掉溶劑后，在所得的殘渣中加入水，使之結(jié)晶，獲得參考例化合物(Refernce Example Compound，以下簡稱為Rco)1。
參考例2將2-氯-3-氰基吡啶、甘氨酸乙酯一鹽酸鹽和碳酸鈉的3-甲基-1-丁醇懸浮液加熱回流6天。蒸餾掉溶劑后，對所得的殘渣用乙酸乙酯和水稀釋，過濾掉不溶物，減壓下濃縮所得的有機層。將殘渣溶解于乙醇中，加入乙醇鈉，于室溫下攪拌15分鐘。濃縮該反應(yīng)液，加入乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液，進行分液操作。對該有機層在減壓下蒸餾掉溶劑，并用硅膠柱色譜法對殘渣提純，獲得Rco 3。
參考例3在3-氨基噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸乙酯的吡啶溶液中，加入二甲基氨基吡啶和苯甲酰氯，在室溫下攪拌18小時，濃縮反應(yīng)液，加入1M(摩爾)鹽酸水溶液，用氯仿萃取。在減壓下濃縮有機層，用硅膠柱色譜法對所得的殘渣提純，獲得Rco 4。
參考例4于-15℃下在Rco 49和4-硝基苯甲酸的吡啶溶液中加入氧氯化磷，于-15℃攪拌15分鐘。在該反應(yīng)液中加冰、再加水，濾取析出的結(jié)晶，獲得Rco 11。
參考例5在Rco 4的甲醇溶液中加入1M氫氧化鈉水溶液，于室溫下攪拌2小時。加入1M鹽酸水溶液，濾取析出的結(jié)晶，獲得Rco 13。
參考例6在Rco 13中加入亞硫酰氯，加熱回流2小時。冷卻后，濃縮反應(yīng)液，在所得的殘渣中加入DMF和氨水，于室溫下攪拌2小時。加水、用氯仿萃取。在減壓下濃縮有機層，獲得Rco 21。
參考例7在Rco 1中加入甲酰胺，于200℃攪拌2小時。冷卻后，濾取析出的結(jié)晶，獲得Rco 29。
參考例8在Rco 21的甲醇溶液中加入2M氫氧化鉀水溶液，于100℃攪拌1小時。冷卻后，加入鹽酸，濾取析出的結(jié)晶，獲得Roc 30。
參考例9在Rco 36中加入乙酸和48％氫溴酸水溶液，加熱回流17小時。在減壓下濃縮反應(yīng)液，然后加入二乙醚，再減壓濃縮。在所得的殘渣中加入乙酸鈉和乙酸酐，于110℃攪拌2小時。冰浴冷卻下，在該反應(yīng)液中加冰，再加水，濾取析出的結(jié)晶，獲得Rco 38。
參考例10在3-氰基苯甲酸甲酯的氯仿溶液中，加入乙醇，于0℃吹入氯化氫氣體15分鐘。然后密封，于0℃攪拌17小時。濃縮反應(yīng)液，加入乙醚，濾取析出的結(jié)晶，獲得Rco 50。
參考例11在5-乙酰胺基鄰氨基苯甲酸、3-硝基苯甲亞胺酸乙酯鹽酸鹽和甲醇鈉的混合物中，加入2-丙醇，回流3天。使反應(yīng)混合物冷卻到室溫，濾取固體，獲得Rco 52。
參考例12室溫下，在2-氨基-5-甲氧基苯甲酰胺、二甲基氨基吡啶的吡啶溶液中，滴加環(huán)己烷甲酰氯的苯溶液，攪拌2小時。濃縮反應(yīng)液，將殘渣溶解于乙酸乙酯中。用1M鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液依次洗滌有機層，然后濃縮有機層，將所得的殘渣溶解于甲醇中，加入2M氫氧化鈉水溶液。在使反應(yīng)混合物加熱回流2小時后，用12M鹽酸中和，蒸餾掉溶劑，濾取結(jié)晶，獲得Rco 67。
參考例132-氨基-5-甲氧基苯甲酰胺、EDCI鹽酸鹽、HOBt、吡嗪羧酸的混合物中，加入THF(四氫呋喃)和DMF(二甲基甲酰胺)，于室溫下攪拌3天。蒸餾掉溶劑，濾取結(jié)晶。將其溶解于甲醇和2M氫氧化鈉水溶液中，加熱回流3小時。用12M鹽酸中和反應(yīng)混合物，濾取生成的結(jié)晶，獲得Roc 72。
參考例14在Rco 55的氯仿懸浮液中，加入二甲基氨基吡啶、TEA(三乙胺)、乙醇、甲苯磺酰氯，室溫攪拌12小時。加DMSO形成均勻的溶液，然后攪拌12小時，再加二甲基氨基吡啶、TEA、甲苯磺酰氯，攪拌18小時。濃縮反應(yīng)液，用乙酸乙酯稀釋殘渣，用常用方法提純，獲得Rco 74。
參考例15在Rco 70的乙酸溶液中，加入48％氫溴酸水溶液，加熱回流2天。冷卻后，濃縮反應(yīng)液，在所得的殘渣中加入乙酸鈉和乙酸酐，加熱回流3小時。冷卻后，濃縮反應(yīng)液，加入乙醚，濾取結(jié)晶，獲得Rco 77。
參考例16在Rco 60中加入乙酸鈉和乙酸酐，加熱回流40分鐘。冷卻后，濾取析出的結(jié)晶，獲得Rco 83。
參考例17在3-羥基苯甲亞胺酸乙酯鹽酸鹽和5-羥基鄰氨基苯甲酸的甲醇溶液中，加入甲醇鈉，加熱回流30分鐘。冷卻后，濾取析出的粗產(chǎn)物，向其加入乙酸鈉和乙酸酐，加熱回流30分鐘。冷卻后，濾取析出的結(jié)晶，獲得Rco 92。
參考例18將Rco 52加入濃鹽酸中，于80℃下攪拌。冷卻后過濾，在減壓下蒸餾濾液，獲得6-氨基-2-(3-硝基苯基)-3H-喹唑啉-4-酮鹽酸鹽。將所得的化合物中和后，加入吡啶和二甲基氨基吡啶，再加入甲磺酰氯，于室溫下攪拌20小時。蒸餾掉溶劑，濾取結(jié)晶，獲得Roc 95。
參考例19在2-氯-3-氰基吡啶和乙醇酸乙酯的乙醇溶液中，加入1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]-7-十一烯(DBU)，加熱回流21小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，用乙酸乙酯稀釋，然后用水和飽和鹽水洗滌。在減壓下濃縮有機層，使之結(jié)晶，獲得Rco49。
參考例20在Rco 96的甲醇溶液中，加入氨水，于室溫下攪拌3小時。在減壓下蒸餾掉反應(yīng)液中的甲醇，濾取結(jié)晶，獲得Rco 116。
參考例21在Rco 98的甲醇溶液中，加入氨水，于室溫下攪拌一晚。在減壓下蒸餾掉反應(yīng)液中的甲醇，濾取結(jié)晶，獲得Rco 117。
參考例22在3-乙酰氧基苯甲酸的DMF溶液中，加入EDCI鹽酸鹽和HOBt，于室溫下攪拌10分鐘。然后加入2-氨基-5-甲氧基苯甲酰胺，于室溫下攪拌1小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，加入水和THF，用乙酸乙酯萃取，然后用飽和鹽水洗滌。在減壓下蒸餾掉溶劑，再結(jié)晶，獲得Rco 119。
參考例23在Rco 105和乙酸鈉中，加入乙酸酐，于110℃攪拌1小時15分鐘。冷卻下，濾取析出的結(jié)晶，獲得Rco 121。
參考例24在Rco 99的二噁烷溶液中，加入氨水，于室溫下攪拌13天。在減壓下蒸餾掉溶劑，濾取結(jié)晶，獲得3-(3-甲氧基苯甲酰胺基)噻吩-2-羧酰胺和Rco 122的混合物。在該混合物的2-丙醇溶液中，加入2M氫氧化鈉水溶液，加熱回流21小時。冷卻后中和，濾取析出的結(jié)晶，獲得Rco 122。
實施例1在Rco 33中，加入氧氯化磷，加熱回流20分鐘。在減壓下濃縮反應(yīng)液，與甲苯共沸。在所得的殘渣中加入嗎啉，加熱回流10分鐘。在減壓下濃縮反應(yīng)液，用氯仿和水洗滌所得的結(jié)晶，獲得化合物(Compound，以下簡稱為Co)1。
實施例2在Co 31游離體(Free form)的DMF溶液中，加入哌啶-1，2-二羧酸1-芐酯、HOBt和EDCI鹽酸鹽，于室溫下攪拌7小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，用乙酸乙酯稀釋，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法對所得的殘渣提純，使之結(jié)晶，獲得Co3。
實施例3冰浴冷卻下，在Co 31游離體(13.6克)的吡啶(480毫升)溶液中，加入苯磺酰氯(6.02毫升)，于室溫下攪拌1.5小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，將所得的殘渣溶解于乙酸乙酯中，再用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝96∶4)對所得的殘渣提純，使之再結(jié)晶(乙醇)，獲得Co 8(15.6克)。
實施例4冰浴冷卻下，在Co 31游離體(15.3克)的THF(1升)溶液中，加入吡啶甲酰氯(picolinoyl chloride)一鹽酸鹽(9.40克)和TEA(14.7毫升)，于室溫下攪拌1.5小時。然后，再加入吡啶甲酰氯一鹽酸鹽(4.00克)，于室溫下攪拌30分鐘。在減壓下濃縮反應(yīng)液，用乙酸乙酯溶解，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝96∶4)對所得的殘渣提純，使之再結(jié)晶(乙醇)，獲得Co10(15.4克)。
實施例5在Co 31游離體(300毫克)的DMF(20毫升)溶液中，加入3-羥基吡啶甲酸(140毫克)、EDCI鹽酸鹽(190毫克)和HOBt135毫克)，于室溫下攪拌2小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，將所得的殘渣溶解于乙酸乙酯和THF中，用水、飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機層后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝100∶1)對所得的殘渣提純，在所得殘渣的氯仿、甲醇溶液中加入4M氯化氫/乙酸乙酯。在減壓下蒸餾掉溶劑，用甲醇使之結(jié)晶，獲得Co 12(207毫克)。
實施例6于100℃下攪拌Co 31游離體(300毫克)和琥珀酸酐(519毫克)以及乙酸(1毫升)的懸浮液30分鐘。在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對所得的殘渣提純，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得Co 24(106毫克)。
實施例7在Co 18(300毫克)的THF(12毫升)和乙醇(12毫升)溶液中，加入10％Pd-C(35毫克)，在常壓的氫氣氣氛下，于室溫攪拌4小時。用硅藻土過濾反應(yīng)液，減壓濃縮濾液，然后用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2～80∶20)對所得的殘渣提純，獲得Co 25游離體(178毫克)。在該游離體(153毫克)的THF(35毫升)和甲醇(20毫升)溶液中，加入1M鹽酸(1.00毫升)，于室溫下攪拌，然后在減壓下蒸餾掉溶劑，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得二鹽酸鹽形式的Co 25(119毫克)。
實施例8于100℃將Co 31游離體(300毫克)和琥珀酸酐(519毫克)的乙酸(1毫升)的懸浮液攪拌30分鐘。在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對所得的殘渣提純，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得Co 29(57毫克)。
實施例9在Co 31游離體(346毫克)的THF(60毫升)溶液中，加入N-乙氧羰基鄰苯二甲酰亞胺(262毫克)和TEA(0.166毫升)，于80℃攪拌1天。冷卻后，在反應(yīng)液中加水，然后過濾，獲得Co 30游離體(374毫克)。在該游離體(371毫克)的THF(200毫升)溶液中，加入1M鹽酸(1.55毫升)，于室溫下攪拌，濾取析出的結(jié)晶，獲得一鹽酸鹽形式的Co 30(287毫克)。
實施例10將Co 1(22.4克)和氯化銨(1.59克)懸浮于乙醇(717毫升)和水(269毫升)的混合液中，然后加入還原鐵(33.2克)，加熱回流9小時。趁反應(yīng)液熱時，加入熱的THF，使粗產(chǎn)物溶解，用硅藻土過濾。在減壓下蒸餾掉濾液的大部分，然后濾取析出的結(jié)晶，用二乙醚洗滌，獲得Co 31游離體(18.9克)。該游離體(101毫克)的THF(25毫升)溶液中，加入1M鹽酸(0.870毫升)，于室溫下攪拌。濾取析出的結(jié)晶，用甲醇洗滌，獲得二鹽酸鹽形式的Co 31(75毫克)。
實施例11將Rco 1(1.03克)的甲酰胺溶液(12毫升)加熱回流2小時。冷卻后濾取生成的固體，獲得Rco 29的粗產(chǎn)物(648毫克)。在Rco 29粗產(chǎn)物(630毫克)的吡啶(3.5毫升)溶液中，加入氧氯化磷(7毫升)，加熱回流2.5小時。冷卻后，蒸餾掉溶劑。在所得的殘渣中加入甲苯(7毫升)，冰浴冷卻下緩慢滴加嗎啉(7毫升)，然后加熱回流3.5小時。再加入THF(3毫升)和嗎啉(20毫升)，加熱回流5天。在減壓下濃縮反應(yīng)液，用乙酸乙酯稀釋，然后濾取粗結(jié)晶，用乙酸乙酯、飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌，使之再結(jié)晶(乙醇)，獲得Co 34(372毫克)。
實施例12在Rco 32(396毫克)中加入氧氯化磷(5毫升)，加熱回流50分鐘。在減壓下蒸餾掉溶劑。冰浴冷卻下對所得的殘渣緩慢滴加嗎啉(10毫升)，加熱回流30分鐘。在減壓下濃縮反應(yīng)液，用乙酸乙酯和水洗滌所得的結(jié)晶，使之再結(jié)晶(用乙醇)，獲得Co 35(411毫克)。
實施例13在Co 11(303毫克)中，加入乙二胺(1.85毫升)，于90℃攪拌2小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝80∶20)對所得的殘渣提純，使之結(jié)晶(用甲醇)，獲得Co 40游離體(269毫克)。對該游離體(266毫克)進行和實施例7相同的成鹽反應(yīng)，使所得的殘渣再結(jié)晶(用甲醇)，獲得二鹽酸鹽形式的Co 40(153毫克)。
實施例14在Co 11(285毫克)中，加入DMF(10毫升)，于110℃攪拌2小時，于80℃攪拌27小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，將所得的殘渣溶解于乙酸乙酯和THF中，用碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對所得的殘渣提純，獲得Co 44游離體(167毫克)。在該游離體(70毫克)的THF(5毫升)和甲醇(10毫升)溶液中，加入1M鹽酸(0.283毫升)，于室溫下攪拌，濾取析出的結(jié)晶，獲得二鹽酸鹽形式的Co 44(72毫克)。
實施例15冰浴冷卻下，在Co 31游離體(297毫克)的吡啶(20毫升)溶液中，加入苯甲酰氯(0.118毫升)，于室溫下攪拌20分鐘。在減壓下蒸餾掉溶劑，將所得的殘渣溶解于乙酸乙酯和THF，用碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，使所得的殘渣再結(jié)晶(用甲醇)，獲得Co 45游離體(301毫克)。使該游離體(287毫克)進行和實施例7相同的成鹽反應(yīng)，獲得一鹽酸鹽結(jié)晶形式的Co 45(249毫克)。
實施例16在Co 48游離體(171毫克)的甲醇(60毫升)和THF(30毫升)溶液中，分2次加入1M氫氧化鈉水溶液(11毫升)，于室溫下攪拌2.5小時。用1M鹽酸使該反應(yīng)液呈酸性，在減壓下蒸餾掉有機溶劑，濾取析出的結(jié)晶，用水和乙醚洗滌。使所得的粗結(jié)晶再結(jié)晶(用甲醇/二乙醚)，獲得Co 49(116毫克)。
實施例17在Rco 38(452毫克)中，加入氧氯化磷(5毫升)，加熱回流30分鐘。冷卻后，在減壓下濃縮反應(yīng)液。冰浴冷卻下，在所得的殘渣中加入THF(5毫升)，緩慢滴加嗎啉(4毫升)，然后除去冰浴，加熱回流1小時。冷卻后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用水和二乙醚洗滌所得的粗結(jié)晶。用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對所得的粗結(jié)晶提純，獲得Co 50游離體(411毫克)。使該游離體(183毫克)進行和實施例7相同的成鹽反應(yīng)，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得一鹽酸鹽形式的Co 50(129毫克)。
實施例18在Co 50游離體(956毫克)的DMF(35毫升)溶液中，加入4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(1.53克)和碳酸鉀(1.90克)，于70℃攪拌2.5天。冷卻后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用水和二乙醚洗滌所得的粗結(jié)晶。用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對所得的粗結(jié)晶提純，使之結(jié)晶(用甲醇)，獲得Co 54游離體(1.16克)。在該游離體(1.05克)的THF(140毫升)和甲醇(70毫升)的溶液中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.14毫升)，于室溫下攪拌。在減壓下蒸餾掉該溶劑后，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得二鹽酸鹽結(jié)晶形式的Co 54(1.18克)。
實施例19在2-苯基-3H-喹唑啉-4-酮(450毫克)中，加入氧氯化磷(5毫升)，加熱回流3小時。濃縮反應(yīng)液，然后加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鎂干燥有機層后，在減壓下蒸餾掉溶劑。將所得的無色結(jié)晶溶解于苯(10毫升)中。加入嗎啉(325毫克)。對反應(yīng)液加熱回流一晚。過濾掉不溶物，用乙酸乙酯稀釋。用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機層，再用無水硫酸鎂干燥，然后在減壓下濃縮。用硅膠柱色譜法(苯∶乙酸乙酯＝5∶1)對所得的殘渣提純，使之再結(jié)晶(用己烷-苯)，獲得Co 82(136毫克)。
實施例20在Co 84(190毫克)的DMSO(5毫升)溶液中，加入氰化鈉(132毫克)，于180℃攪拌2小時。冷卻后，在反應(yīng)液中加水，用乙酸乙酯萃取，用飽和鹽水洗滌有機層，用無水硫酸鈉干燥，然后過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。使所得的殘渣再結(jié)晶(己烷/乙酸乙酯)，獲得Co 92(40毫克)。
實施例21在Co 85(500毫克)的乙酸(12毫升)溶液中，加入鐵(415毫克)，于105℃攪拌1小時。冷卻后，在反應(yīng)液中加入氯仿和1摩爾氫氧化鈉水溶液。用硅藻土過濾，用氯仿萃取。有機層用飽和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，并過濾，然后在減壓下蒸餾掉溶劑。在所得的殘渣中加入1M鹽酸(10毫升)，于85℃攪拌90分鐘。冷卻后，加入1M氫氧化鈉水溶液，用氯仿萃取，用飽和鹽水洗滌有機層。用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝50∶1)對所得的殘渣提純，使之再結(jié)晶(氯仿/己烷)，獲得Co 97(374毫克)。
實施例22在Co 97(149毫克)的甲酸(3毫升)溶液中，加入乙酸酐(3毫升)，于室溫下攪拌2小時。加水，用乙酸乙酯萃取，用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌有機層。用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝50∶1)對殘渣提純，使之再結(jié)晶(用氯仿/己烷)，獲得Co 98(46毫克)。
實施例23在Rco 74(270毫克)中，加入氧氯化磷(3毫升)，加熱回流0.5小時。減壓濃縮反應(yīng)液，加入嗎啉(10毫升)。對反應(yīng)液加熱回流1小時，然后減壓濃縮，以乙酸乙酯進行稀釋。用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機層，用無水硫酸鎂干燥，然后進行減壓濃縮。用硅膠柱色譜法(洗脫液；己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)提純，加入乙醇(2毫升)、20％氫氧化鉀水溶液(100毫克)，在室溫下攪拌40分鐘。用乙酸乙酯萃取，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機層。用無水硫酸鎂干燥后，進行減壓濃縮。用乙酸乙酯-己烷的混合溶劑洗滌所得的結(jié)晶，然后使之再結(jié)晶(用乙酸乙酯/己烷)，獲得Co 99(30毫克)。
實施例24在Co 86(95毫克)的甲苯(15毫升)溶液中，加入氫氧化鈉(43毫克)、碳酸鉀(37毫克)和硫酸氫四正丁基銨(2毫克)，于35℃攪拌30分鐘。再加入硫酸二甲酯(34毫克)，于35℃攪拌2小時。過濾反應(yīng)液，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝20∶1)對殘渣提純，使之再結(jié)晶(用氯仿/己烷)，獲得Co 105(62毫克)。
實施例25在Co 97(200毫克)的氯仿(6毫升)溶液中，加入對甲苯磺酰氯(124毫克)和吡啶(1毫升)，于室溫下攪拌45分鐘。加入1M鹽酸，用乙酸乙酯萃取，用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌有機層。用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。使殘渣再結(jié)晶(用氯仿/己烷)，獲得Co 106(165毫克)。
實施例26在Co 97(250毫克)中，加入35％的嗎啉水溶液(5毫升)和甲酸(5毫升)，于100℃攪拌90分鐘。冷卻后，加入1M氫氧化鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取，用飽和鹽水洗滌有機層。用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)對殘渣提純，使之再結(jié)晶(用氯仿/己烷)，獲得Co 107(133毫克)。
實施例27在Rco 76(6.2克)中，加入氧氯化磷(50毫升)，加熱回流1小時。減壓濃縮反應(yīng)液后，將其溶解于氯仿。用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌氯仿層2次，用無水硫酸鎂干燥，然后減壓濃縮，獲得6.0克結(jié)晶。在其中的802毫克中，加入硫代嗎啉(500毫克)、苯(10毫升)。于70℃對反應(yīng)液加熱攪拌1小時后，用乙酸乙酯稀釋。用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌有機層，再用無水硫酸鎂干燥，然后進行減壓濃縮。用硅膠柱色譜法(己烷-乙酸乙酯＝5∶1)提純，獲得對甲苯磺酸4-硫代嗎啉代-2-苯基(6-喹唑啉基)酯(828毫克)。將其中的802毫克溶解于甲醇(10毫升)和THF(10毫升)中，加入20％的氫氧化鉀水溶液(1.0克)，于70℃攪拌1小時。加入水和1M鹽酸進行中和，然后用乙酸乙酯萃取。用飽和鹽水洗滌有機層。再用無水硫酸鎂干燥后，進行減壓濃縮。使之再結(jié)晶(用乙酸乙酯-己烷)，獲得Co 108(151毫克)。
實施例28在乙酸2-甲基-4-氧代-4H-苯并[d][1，3](6-噁嗪基)酯(3克)中，加入乙酸銨(1.2克)，于150℃攪拌30分鐘。冷卻到80℃后，加入甲醇，于80℃攪拌1小時。冷卻后，濾取析出的結(jié)晶，用甲醇洗滌，獲得結(jié)晶(930毫克)。在所得結(jié)晶(918毫克)的DMSO(10毫升)/氯仿(5毫升)溶液中，加入甲苯磺酰氯(1毫升)、TEA(1毫升)和催化量的二甲基氨基吡啶，于室溫下攪拌8小時。用乙酸乙酯萃取，用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌有機層。用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。在所得的殘渣中加入氧氯化磷(15毫升)，加熱回流15小時。冷卻后，在減壓下蒸餾掉氧氯化磷。用氯仿萃取，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機層。用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝50∶1)對殘渣提純，獲得液體產(chǎn)物(577毫克)。在其甲苯(20毫升)溶液中，加入嗎啉(2克)，加熱回流16小時。冷卻后，在減壓下蒸餾掉溶劑。在所得殘渣的乙醇(15毫升)溶液中，加入20％氫氧化鉀水溶液(1毫升)，于室溫下攪拌1小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝20∶1)對殘渣提純，使之再結(jié)晶(用氯仿/甲醇/己烷)，獲得Co 109(207毫克)。
實施例29在Rco 78(590毫克)中，加入氧氯化磷(10毫升)，加熱回流0.5小時。濃縮反應(yīng)液，用氯仿稀釋，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機層后，在減壓下蒸餾掉溶劑。在所得的無色結(jié)晶中加入嗎啉(10毫升)，加熱回流12小時。反應(yīng)液以氯仿稀釋，以水、飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌后，用無水硫酸鎂干燥。在減壓下濃縮所得的有機層，用氯仿-甲醇使殘渣結(jié)晶。再結(jié)晶(用乙酸乙酯-己烷)，獲得Co 110(126毫克)。
實施例30在Rco 67(957毫克)中，加入乙酸(20毫升)、48％氫溴酸水溶液(20毫升)，于油浴溫度135℃下攪拌13小時。冷卻到室溫后，濾取為原料和脫甲基化體的混合物的結(jié)晶。在所得的結(jié)晶中加入乙酸酐(30毫升)、乙酸鈉(112毫克)，加熱回流30分鐘。冷卻后，濾取結(jié)晶。在所得的結(jié)晶中加入氧氯化磷(10毫升)，加熱回流30分鐘。進行減壓濃縮，將所得的殘渣溶解于氯仿中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。用無水硫酸鎂干燥后，進行減壓濃縮。在所得的殘渣中加入嗎啉(20毫升)，加熱回流15小時。減壓濃縮反應(yīng)液。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝50∶1)提純，用氯仿-乙醚的混合溶劑洗滌所得的結(jié)晶，獲得Co127(193毫克)。
實施例31在Co 111(500毫克)的乙酸(12毫升)溶液中，加入鐵(396毫克)，于105℃攪拌45分鐘。冷卻后，在反應(yīng)液中加入氯仿和1M氫氧化鈉水溶液。用硅藻土過濾，再用氯仿萃取。用飽和鹽水洗滌有機層，再用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝10∶1)對所得殘渣提純，使之再結(jié)晶(氯仿/甲醇/己烷)，獲得Co 129(120毫克)。
實施例32在Co 116(564毫克)的乙醇(8毫升)/THF(8毫升)溶液中，加入1M氫氧化鈉水溶液(8毫升)，于室溫下攪拌15小時。加入1M鹽酸(8毫升)，用乙醚萃取。用飽和鹽水洗滌有機層，再用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。使殘渣再結(jié)晶(甲醇/乙醚/己烷，獲得Co 130(163毫克)。
實施例33在Co 117(325毫克)的THF(40毫升)溶液中，加入氫化鋰鋁(67毫克)，于0℃攪拌2小時。依次加入水(0.1毫升)、1M氫氧化鈉水溶液(0.1毫升)和水(0.3毫升)。于室溫下攪拌30分鐘。用無水硫酸鈉干燥后，通過硅膠過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。使殘渣再結(jié)晶(用THF/己烷)，獲得Co 131(158毫克)。
實施例34將Co 112(860毫克)溶解于THF(30毫升)、甲醇(30毫升)和乙醇(30毫升)的混合溶劑中，加入10％的Pd-C(130毫克)，在常壓氫氣氣氛下，于室溫下攪拌2小時。過濾掉不溶物，蒸餾掉溶劑，獲得780毫克的固體。使其中的202毫克再結(jié)晶(用乙醇/甲醇)，獲得Co 133(148毫克)。
實施例35將Co 133(202毫克)溶解于吡啶(10毫升)中，于室溫下加入甲磺酰氯(96毫克)。攪拌15小時后，在減壓下蒸餾掉溶劑。將所得的殘渣溶解于乙酸乙酯中，用水洗滌有機層。用無水硫酸鎂干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(氯仿-甲醇＝100∶1)對所得的粗結(jié)晶提純，使之再結(jié)晶(用乙醇-乙酸乙酯-己烷)，獲得Co 135。
實施例36在Co 131(177毫克)的DMF(12毫升)溶液中，加入HOBt(75毫克)和EDCI鹽酸鹽(106毫克)，于0℃攪拌30分鐘，于室溫下攪拌30分鐘。加入氨水(2毫升)，于室溫下攪拌3小時。用氯仿萃取，用水洗滌有機層。用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿/甲醇＝10∶1)對殘渣提純，使之再結(jié)晶(氯仿/甲醇/己烷)，獲得Co 136(39毫克)。
實施例37在Rco 87(1.1克)中，加入氧氯化磷(15毫升)，加熱回流1小時。冷卻后，在減壓下蒸餾掉氧氯化磷。用氯仿萃取，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機層。用無水硫酸鈉干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。在所得殘渣的甲苯(40毫升)溶液中加入嗎啉(5克)，加熱回流17小時，冷卻后，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝30∶1)對殘渣提純，使之再結(jié)晶(氯仿/乙醚/己烷)，獲得Co 138(869毫克)。
實施例38在Co 129(457毫克)的DMF(10毫升)溶液中，加入乙酸酐(0.75毫升)和吡啶(1毫升)，于室溫下攪拌1小時。加入1M氫氧化鈉水溶液(15毫升)和水，用氯仿萃取。用無水硫酸鈉干燥有機層后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝10∶1)對殘渣提純，使之再結(jié)晶(用氯仿/甲醇/己烷)，再用乙醚洗滌，獲得Co 139(358毫克)。
實施例39在Co 133(476毫克)中，依次加入苯(10毫升)、苯甲醛(249毫克)和THF(10毫升)，緩慢蒸餾掉溶劑，同時加熱回流2小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，將所得的殘渣溶解于甲醇(20毫升)中。冰浴冷卻下，加入硼氫化鈉(50毫克)，于室溫下攪拌1小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，將殘渣溶解于乙酸乙酯中。有機層依次用水、飽和鹽水洗滌，然后以無水硫酸鎂干燥。再于減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝100∶1)對殘渣提純，使之再結(jié)晶(乙酸乙酯/己烷)，獲得Co 140(259毫克)。
實施例40將Co 133(3.0克)溶解于吡啶(50毫升)中，于室溫下加入苯磺酰氯(1.9克)。攪拌2小時后，在減壓下蒸餾掉溶劑。在所得的殘渣中加入乙酸乙酯和水，用飽和鹽水洗滌有機層3次。用無水硫酸鎂干燥所得的有機層后，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝100∶1)對所得的粗結(jié)晶提純，使之再結(jié)晶(用乙醇)，獲得Co 141(3.0克)。
實施例41在Co 133(540毫克)中，加入THF(15毫升)、異氰酸苯酯(207毫克)。加熱回流3小時，再次加入異氰酸苯酯(500毫克)，加熱回流4小時。加入1M氫氧化鈉水溶液(5毫升)，攪拌15分鐘后，加入1M鹽酸(5毫升)進行中和。用氯仿萃取反應(yīng)液，用無水硫酸鎂干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝50∶1)對所得的殘渣提純，使之再結(jié)晶(用2-丙醇/二乙醚/己烷)，獲得Co 148(180毫克)。
實施例42在Co 133(440毫克)中，加入THF(15毫升)和TEA(520毫克)。于室溫下滴加氯甲酸苯酯(498毫克)，于室溫下攪拌2小時。加入甲醇后，冰浴冷卻下加入1摩爾氫氧化鈉(5毫升)，攪拌20分鐘，加入1M鹽酸(5毫升)進行中和，用氯仿萃取反應(yīng)液，再用無水硫酸鎂干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝50∶1)對所得的殘渣提純，使之再結(jié)晶(乙酸乙酯)，獲得Co 149(189毫克)。
實施例43在Co 133(253毫克)的THF(10毫升)溶液中，加入異煙酰氯鹽酸鹽(280毫克)和吡啶(0.127毫升)，于室溫下攪拌5.5小時，再加入TEA(0.1毫升)，于室溫下攪拌2.5小時。此后，加入1M氫氧化鈉水溶液(0.786毫升)和甲醇(4毫升)，于室溫下攪拌30分鐘，使酯水解。中和后，在減壓下蒸餾掉大部分溶劑，濾取析出的粗結(jié)晶，用乙酸乙酯和水洗滌結(jié)晶，使所得的粗結(jié)晶再結(jié)晶(用乙醇)，獲得Co 150(71毫克)。
實施例44在Co 97(285毫克)的氯仿(12毫升)溶液中，加入氯氧代乙酸乙酯(190毫克)和TEA(1毫升)，于室溫下攪拌16小時。用氯仿萃取，用水洗滌有機層。用無水硫酸鎂干燥后，進行過濾，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝50∶1)對殘渣提純，使之再結(jié)晶(用氯仿/甲醇/己烷)，獲得Co 159(103毫克)。
實施例45冰浴冷卻下，在Co 97(1.2克)的氯仿(30毫升)溶液中，加入異硫氰酸苯甲酰酯(1.2毫升)，于室溫下攪拌3小時。濾取生成的結(jié)晶。在所得的結(jié)晶中加入40％的甲胺/甲醇溶液，于室溫下攪拌1小時。減壓濃縮反應(yīng)液，用硅膠柱色譜法提純，獲得1-(4-嗎啉代-2-苯基(6-喹唑啉基)硫脲(1.1克)。在其中的266毫克中，加入乙醇(5毫升)、甲醇(3毫升)和40％的氯乙醛水溶液(300毫克)，攪拌4天。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)液，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥。用硅膠柱色譜法(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)對殘渣提純后，使之再結(jié)晶(用乙醇/己烷)，獲得Co 160(49毫克)。
實施例46在Co 91(500毫克)中，加入乙酸(5毫升)、48％氫溴酸水溶液(5毫升)，加熱回流13小時。蒸餾掉溶劑，用1M氫氧化鈉水溶液和飽和碳酸氫鈉水溶液中和后，用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鎂干燥有機層后，進行減壓濃縮。用硅膠柱色譜法(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)對所得的粗結(jié)晶提純，使之再結(jié)晶(用乙醇)，獲得Co 162(112毫克)。
實施例47在偶氮二羧酸二乙酯(0.101毫升)和三苯膦(168毫克)的THF(20毫升)溶液中，加入3-嗎啉代丙醇(93毫克)和CO 50的游離體(203毫克)，于60℃下攪拌13小時。再加入偶氮二羧酸二乙酯(0.1毫升)和三苯膦(170毫克)以及3-嗎啉代丙醇(93毫克)，于60℃下攪拌。再次進行該操作。冷卻后，加入水和乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉水溶液使反應(yīng)液呈堿性。用乙酸乙酯萃取后，用飽和鹽水洗滌。再用無水硫酸鈉干燥，然后在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對所得殘渣提純，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得Co 58游離體(174毫克)。使該游離體(71毫克)進行和實施例18相同的成鹽反應(yīng)，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得鹽酸鹽形式的Co 58(68毫克)。
實施例48在Co 61(1.48克)的甲醇(15毫升)和水(15毫升)的混合溶液中，加入碳酸鉀(1.10克)，于80℃攪拌后，再加入甲醇(8毫升)和水(8毫升)，于80℃攪拌12小時。冷卻后，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對濾取所得的粗結(jié)晶提純，使之結(jié)晶(用甲醇)，獲得Co 59游離體(1.13克)。使該游離體(160毫克)進行和實施例18相同的成鹽反應(yīng)，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得二鹽酸鹽形式的Co 59(146毫克)。
實施例49冰浴冷卻下，在Co 31游離體(2.21克)的吡啶(70毫升)溶液中，加入三氟乙酸酐(1.07毫升)和二甲基氨基吡啶(78毫克)，攪拌1小時后，再加入三氟乙酸酐(0.5毫升)和二甲基氨基吡啶(30毫克)，于冰浴冷卻下攪拌1小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，加入水和乙酸乙酯，濾取析出的結(jié)晶，用乙酸乙酯洗滌，獲得Co 60(2.66克)。
實施例50在Co 50游離體(1.29克)中，加入水(0.645毫升)、二溴乙烷(1.11毫升)、硫酸氫四丁基銨(22毫克)和2M氫氧化鈉水溶液(2.58毫升)，于60℃攪拌6小時。在反應(yīng)液中加入氯仿，過濾掉不溶物，用氯仿萃取濾液，然后用飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對所得的殘渣提純，獲得Co 62(376毫克)。
實施例51在Co 62(211毫克)的DMF(5毫升)溶液中，加入1-甲基哌嗪(139毫克)和碳酸鉀(256毫克)，于60℃攪拌4小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，在所得的殘渣中加入水和THF，用乙酸乙酯萃取后，在減壓下蒸餾掉溶劑。用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝97∶3～95∶5)對所得的殘渣提純，獲得Co 64游離體(198毫克)。使該游離體(198毫克)進行和實施例18相同的成鹽反應(yīng)，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得三鹽酸鹽形式的Co 64(160毫克)。
實施例52在Co 62(232毫克)的DMF(5毫升)溶液中，加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(285毫克)和碳酸鉀(282毫克)，于60℃攪拌17小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，在所得的殘渣中加水，用乙酸乙酯萃取，然后用飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝99∶1)對所得的殘渣提純，獲得粗結(jié)晶(227毫克)。在該粗結(jié)晶(212毫克)的二噁烷(3毫升)和甲醇(3毫升)溶液中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1毫升)，于室溫下攪拌4小時。濃縮反應(yīng)液，使殘渣再結(jié)晶(用甲醇)，獲得Co 69(144毫克)。
實施例53在Co 59游離體(216毫克)的THF(3毫升)溶液中，加入多聚甲醛(15毫克)和乙酸(81毫升)，于室溫下攪拌10分鐘，然后加入三乙酰氧基硼氫化鈉(199毫克)，于室溫下攪拌21小時。此后，分3次加入甲醛液體(0.44毫升)、乙酸(5.5毫升)和三乙酰氧基硼氫化鈉(704毫克)，于室溫下攪拌4天。用2M氫氧化鈉水溶液中和反應(yīng)液，再加入THF，用乙酸乙酯萃取后，用飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥，然后在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對所得的殘渣提純，獲得Co 70游離體(162毫克)。使該游離體(48毫克)進行和實施例18相同的成鹽反應(yīng)，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得二鹽酸鹽形式的Co 70(53毫克)。
實施例54于100℃將Co 50游離體(322毫克)、1，3-二氧戊環(huán)-2-酮(814毫克)和碳酸鉀(192毫克)攪拌2小時，再加入1，3-二氧戊環(huán)-2-酮(680毫克)，于100℃攪拌17小時。此后，加入DMF(3毫升)攪拌2小時，再加入1，3-二氧戊環(huán)-2-酮(670毫克)，于100℃攪拌20小時。冷卻后，在減壓下蒸餾掉溶劑，加水，接著加入1摩爾鹽酸水溶液直到不產(chǎn)生氣泡。濾取析出的粗結(jié)晶，使之再結(jié)晶(用甲醇)，獲得Co 77(164毫克)。
實施例55在Rco 48(1.07克)中，加入氧氯化磷(10毫升)，加熱回流2.5小時。在減壓下蒸餾掉溶劑，與甲苯共沸。在所得的殘渣中，加入THF(15毫升)，冰浴冷卻下緩慢滴加嗎啉(10毫升)，然后除去冰浴，加熱回流30分鐘。在反應(yīng)液中加入乙酸乙酯和THF，用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝98∶2)對所得的殘渣提純，獲得2-(4-嗎啉代吡啶并[3’，2’4，5]呋喃并[3，2-d](2-嘧啶基)苯基膦酸二(嗎啉代酰胺)(594毫克)。在該化合物(360毫克)中加入甲酸(4毫升)，于100℃攪拌3天。在減壓下蒸餾掉溶劑，加入乙酸乙酯和水，在冰浴冷卻下用飽和碳酸氫鈉水溶液中和。濾取析出的結(jié)晶，獲得結(jié)晶(162毫克)。使所得的結(jié)晶(123毫克)再結(jié)晶(用甲醇-THF)，獲得Co 79(122毫克)。
實施例56在Co 80(220毫克)中，加入二噁烷(3.9毫升)和6M鹽酸(5.5毫升)，加熱回流3天。冷卻后中和，用乙酸乙酯和THF的混合溶液萃取，用飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝96∶4)對所得的殘渣提純，獲得結(jié)晶(83毫克)。使所得的結(jié)晶(81毫克)再結(jié)晶(用THF-甲醇)，獲得Co 81(53毫克)。
實施例57冰浴冷卻下使Co 168游離體(151毫克)的吡啶(9毫升)溶液冷卻，加入乙酸酐(4.5毫升)，在冰浴冷卻下攪拌。反應(yīng)完畢后，將反應(yīng)液注入冰水，用乙酸乙酯萃取，再用飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，獲得Co 183游離體(158毫克)。使該游離體(156毫克)進行和實施例18相同的成鹽反應(yīng)，使獲得的結(jié)晶再結(jié)晶(用甲醇)，獲得一鹽酸鹽形式的Co 169(93毫克)。
實施例58在60％氫化鈉(63毫克)的DMF(5毫升)溶液中，滴加2-嗎啉代乙醇(806毫克)，于室溫下攪拌15分鐘。接著加入Co 179游離體(285毫克)，于60℃攪拌23小時。此后，在60％氫化鈉(63毫克)的DMF(1毫升)溶液中，滴加2-嗎啉代乙醇(806毫克)，于室溫下攪拌15分鐘，另外制備反應(yīng)液，滴加該反應(yīng)液至上述反應(yīng)混合物中，于60℃攪拌。進行3次該操作。在減壓下蒸餾掉溶劑，在所得的殘渣中加入水和THF，用乙酸乙酯萃取后，用飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥，然后在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(氯仿∶甲醇＝95∶5)對所得的殘渣提純，獲得Co 192游離體(529毫克)。使該游離體(404毫克)進行和實施例18相同的成鹽反應(yīng)，使所得的結(jié)晶再結(jié)晶(用甲醇)，獲得二鹽酸鹽形式的Co 192(320毫克)。
權(quán)利要求
1.由以下通式(Ib)表示的稠合雜芳基衍生物或其鹽， 式中的記號表示以下含義B苯環(huán)、或含有選自O(shè)、S和N的1～2個雜原子的5-6元單環(huán)雜芳環(huán)，R1-C1～6烷基、-C2～6烯基、-C2～6炔基、-環(huán)烷基、-可帶有1～5個選自A組的取代基的芳基、可帶有1～5個選自A組的取代基的雜芳基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代C1～6烷基、-ORb、-SRb、-SO2-Rb、-SO-Rb、-COORb、-CO-Rb、-CONRaRb、-SO2NRaRb、-NRaRb、-NRa-CORb、-NRa-SO2Rb、-O-CO-NRaRb、-NRaCO-COORb、-NRaCOORb、-NRaCO-C1～6亞烷基-芳基、-NRa-SO2-C1～6亞烷基-芳基、-NRa-C1～6亞烷基-芳基、-C1～6亞烷基-ORb、-C1～6亞烷基-NRaRb、-CO-含氮飽和雜環(huán)、-CONRa-C1～6亞烷基-ORb、-CONRa-C1～6亞烷基-NRcRb、-CONRa-C1～6亞烷基-含氮飽和雜環(huán)、-O-C1～6亞烷基-ORb、-O-C1～6亞烷基-NRaRb、-O-C1～6亞烷基-含氮飽和雜環(huán)、-O-C1～6亞烷基-O-C1～6亞烷基-ORb、-O-C1～6亞烷基-O-C1～6亞烷基-NRaRb、-O-C1～6亞烷基-NRc-C1～6亞烷基-NRaRb、-NRc-C1～6亞烷基-NRaRb、-N(C1～6亞烷基-NRaRb)2、-CONRa-ORb、-NRa-CO-NRbRc或-OCORb，A組包括-C1～6烷基、-C2～6烯基、-C2～6炔基、-鹵素、-鹵代C1～6烷基、-C1～ 6亞烷基-OR、NO2、-CN、＝O、-OR、-O-鹵代C1～6烷基、-O-C1～6亞烷基-NRR’、-O-C1～6亞烷基-OR、-O-C1～6亞烷基-芳基、-SR、-SO2-C1～6烷基、-SO-C1～6烷基、-COOR、-COO-C1～6亞烷基-芳基、-COR、-CO-芳基、-芳基、-CONRR’、-SO2NRR’、-NRR’、-NR”-C1～6亞烷基-NRR’、-NR’-C1～6亞烷基-OR、-NR-C1～6亞烷基-芳基、-NRCO-C1～6烷基、-NRSO2-C1～6烷基、-環(huán)烷基和-環(huán)烯基；其中R、R’和R”可相同也可不同，表示H或C1～6烷基，R2和R3與鄰接的N原子相連成的-NR2R3為可帶有1～2個選自-OH、＝O和C1～ 6烷基的取代基的含氮飽和雜環(huán)基，Ra和Rc可相同也可不同，為-H或-C1～6烷基，Rb為-H、-C1～6烷基、環(huán)烷基、可帶有1～5個選自A組的取代基的芳基、或可帶有1～5個選自A組的取代基的雜芳基，n0、1、2或3，但是B為苯環(huán)時n為1、2或3，W為N或CH，R4b為-(可帶有1～5個選自A4組的取代基的芳基)、-C1～6亞烷基-(可帶有1～5個選自A4組的取代基的芳基)、-C2～6亞烯基-(可帶有1～5個選自A4組的取代基的芳基)、-C2～6亞炔基-(可帶有1～5個選自A4組的取代基的芳基)、-(可帶有1～5個選自A組的取代基的環(huán)烷基)、-(可帶有1～5個選自A組的取代基的環(huán)烯基)、-C1～6亞烷基-(可帶有1～5個選自A組的取代基的環(huán)烷基)、-C2～6亞烯基-(可帶有1～5個選自A組的取代基的環(huán)烷基)、-C1～6亞烷基-(可帶有1～5個選自A組的取代基的含氮飽和雜環(huán)基)、-C2～6亞烯基-(可帶有1～5個選自A組的取代基的含氮飽和雜環(huán)基)、-(可帶有1～5個選自A4組的取代基的雜芳基)、-C1～6亞烷基-(可帶有1～5個選自A4組的取代基的雜芳基)、或-C2～6亞烯基-(可帶有1～5個選自A4組的取代基的雜芳基)，A4組包括a)-C1～6烷基、-C2～6烯基、-C2～6炔基、-鹵素、-鹵代C1～6烷基、-C1～6亞烷基-OR、-NO2、-CN、＝O、-O-鹵代C1～6烷基、-SO2-C1～6烷基、-SO-C1～6烷基、-COOR、-COO-C1～6亞烷基-芳基、-COR、-CO-芳基、-CONRR’、SO2NRR’、-Cyc或-Alp-Cyc，此處，Alp表示C1～6亞烷基、C2～6亞烯基或C2～6亞炔基，Cyc表示可被1～5個選自A組的取代基取代的芳基，可被1～5個選自A組的取代基取代的雜芳基、可被1～5個選自A組的取代基取代的含氮飽和雜環(huán)基、可被1～5個選自A組的取代基取代的環(huán)烷基、或可被1～5個選自A組的取代基取代的環(huán)烯基，b)-NR-E-F，此處，E表示-CO-、-COO-、-CONR’-、-SO2NR’-或-SO2-；F表示-Cyc或-可被選自以下的基團取代的C1～6烷基、C2～6烯基或C2～6炔基-鹵素、-NO2、-CN、-OR、-O-C1～6亞烷基-NRR’、-O-C1～6亞烷基-OR、-SR、-SO2-C1～ 6烷基、-SO-C1～6烷基、-COOR、-COR、-CO-芳基、-CONRR’、SO2NRR’、-NRCO-C1～6烷基、-NRR’、-NR’-C1～6亞烷基-OR、-NR”-C1～6亞烷基-NRR’和-Cyc，和c)-Z-R’、-Z-Cyc、-Z-Alp-Cyc、-Z-Alp-Z’-R’或-Z-Alp-Z’-Cyc，此處，Z和Z’可相同也可不同，表示O、S或NR；但以下化合物除外(1)4-(4-嗎啉基)-2-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶，(2)4-(4-嗎啉基)-2-苯基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(1H)-酮，(3)4-(4-嗎啉基)-2-苯基-6-喹唑啉醇和6-甲氧基-4-(4-嗎啉基)-2-苯基喹唑啉，(4)2，4-二氨基-6-苯基-8-哌啶代嘧啶并[5，4-d]嘧啶，(5)B為苯環(huán)、W為N、n為2或3、存在的R1都為-OMe、并且R4b為未取代或被選自以下的1～3個取代基取代的苯基的化合物-鹵素、-NO2、-C1～6烷基、-O-C1～ 6烷基、-鹵代C1～6烷基和-CONRaRc，(6)B為苯環(huán)、W為N、n為1、R1為-鹵素或-C1～6烷基、并且R4b為-(可帶有取代基的咪唑基)的化合物，(7)B為噻吩環(huán)并且W為CH的化合物，(8)B為咪唑環(huán)并且W為N的化合物，(9)B為吡啶環(huán)并且R4b為未取代的苯基、未取代的吡啶基或-C1～6亞烷基-(可帶有取代基的含氮飽和雜環(huán)基)的化合物，(10)B為吡嗪環(huán)并且R4b為未取代的苯基或芐基的化合物，(11)B為苯環(huán)或吡啶環(huán)，并且R4b為苯乙烯基或2-(5-硝基-2-呋喃基)乙烯基的化合物，(12)B為苯環(huán)、W為CH，R4b為雜芳環(huán)或聯(lián)苯的化合物，(13)B表示苯環(huán)、W表示N、n為1、R1表示-OH、R4b表示未取代苯基并且R2和R3與相鄰的N原子相連成哌啶子基或4-甲基-1-哌嗪基的化合物，(14)B表示苯環(huán)、W表示N、R4b表示2-氯苯基并且R2和R3與相鄰的N原子相連成1-哌嗪基的化合物，(15)4-(1-吡咯烷基)-2-(5-硝基-2-呋喃基)嘧啶并[4，5-d]嘧啶，(16)4-(4-嗎啉基)-2-苯基噻吩并[2，3-d]嘧啶，和(17)B表示噻吩環(huán)、n為0、并且R2和R3與相鄰的N原子相連成1-哌嗪基的化合物。
2.如權(quán)利要求1所述的稠合雜芳基衍生物或其鹽，其特征在于，所述的W為N，R4b為-(可帶有1～5個選自A4組的取代基的芳基)，并且R2和R3所形成的NR2R3為-嗎啉代。
3.如權(quán)利要求2所述的稠合雜芳基衍生物或其鹽，其特征在于，所述的R1為-C1～6烷基、-C2～6烯基、-C2～6炔基、-環(huán)烷基、-可帶有1～5個選自A組的取代基的芳基、可帶有1～5個選自A組取代基的雜芳基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代C1～6烷基、-ORb、-SRb、-SO2-Rb、-SO-Rb、-COORb、-CO-Rb、-CONRaRb、-SO2NRaRb、-NRaRb、-NRa-CORb、-NRa-SO2Rb、-O-CO-NRaRb、或-NRaCO-COORb。
4.如權(quán)利要求3所述的稠合雜芳基衍生物或其鹽，其特征在于，所述的n為1或2，R1為-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代C1～6烷基、-ORb、-SRb、-NRaRb、-NRa-CORb或-NRa-SO2Rb。
5.如權(quán)利要求1所述的稠合雜芳基衍生物或其鹽，其特征在于，所述的B為吡啶、吡嗪或噻吩環(huán)。
6.如權(quán)利要求5所述的稠合雜芳基衍生物或其鹽，其特征在于，所述的R4b為可被選自-OH、-CH2OH和-CONH2的至少一個取代基取代的苯基。
7.如權(quán)利要求1所述的稠合雜芳基衍生物或其鹽，其特征在于，它選自N-[2-(3-苯磺酰胺基苯基)-4-嗎啉代(6-喹唑啉基)]乙酰胺；3-(4-嗎啉代吡啶并[4，3-d](2-嘧啶基))苯酚；3-(4-嗎啉代吡啶并[3，2-d](2-嘧啶基)苯酚；3-(4-嗎啉代吡啶并[3，4-d](2-嘧啶基)苯酚；3-(6-甲氧基-4-嗎啉代(2-喹唑啉基))苯酚；3-(4-嗎啉代噻吩并[3，2-d](2-嘧啶基))苯酚；和3-(4-嗎啉代(2-蝶啶基)苯酚。
8.醫(yī)藥組合物，它包含權(quán)利要求1所述的稠合雜芳基衍生物或其鹽和制藥學(xué)上允許的載體。
全文摘要
提供了用作磷脂酰肌醇3－激酶(PI3K)抑制劑和抗癌劑的醫(yī)藥組合物，并且還提供了具有良好的PI3K抑制作用和癌細胞增殖抑制作用的新穎二環(huán)稠合雜芳基衍生物或其鹽。
文檔編號A61K31/4355GK1629145SQ200410055760
公開日2005年6月22日 申請日期2001年4月26日 優(yōu)先權(quán)日2000年4月27日
發(fā)明者早川昌彥, 貝沢弘行, 森友博幸, 川口賢一, 小泉智信, 山野真由美, 松田光陽, 岡田稔, 太田光昭 申請人:山之內(nèi)制藥株式會社, 路德維格癌癥研究所, 癌癥研究技術(shù)有限公司