專利名稱：咪唑并吡啶衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及用作藥物、特別是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制劑和抗癌劑的咪唑并吡啶衍生物。
背景技術：
磷脂酰肌醇(以下稱為“PI”)是細胞膜磷脂之一，已知它起著細胞內(nèi)信息傳遞的作用。已經(jīng)很好地了解到，特別是PI(4，5)二磷酸(PI(4，5)P2)因磷脂酶C而分解成二?；视秃图〈?1，4，5)三磷酸，引起蛋白激酶C的活化和細胞內(nèi)鈣動員[MJ Berridge等，Nature(自然)，312，315，(1984)，Y Nishizuka，Science(科學)，225，1365(1984)]。
另一方面，1980年代后半期，鑒定了PI3K是使PI類肌醇環(huán)的3位磷酸化的酶[D Whitman等.，Nature，332，664(1988)]。
PI3K在當初發(fā)現(xiàn)時曾經(jīng)被認為是單一的酶。近年，確定了PI3K存在亞型，按體外底物特性而分成以下3類[B Vanhaesebroeck，Trend in Biol.Sci.，22，267(1997)]。
第I類酶以PI、PI(4)P、PI(4，5)P2為底物，但在細胞內(nèi)最好的底物是PI(4，5)P2。第I類酶根據(jù)活化機理又分為兩類(第Ia類、第Ib類)。第Ia類被酪氨酸激酶體系活化，包括p110α、p110β和p110δ亞型。第Ib類包括被G蛋白偶聯(lián)的受體活化的p110γ亞型。
第II類酶以PI，PI(4)P為底物，但不以PI(4，5)P2為底物。這種酶包括PI3K C2α、C2β和C2γ亞型，其特征是C末端有C2區(qū)域，這說明它們由鈣離子控制活性。第III類酶只以PI為底物。尚不清楚這種酶的活化機理。各亞型都有本身的活性調(diào)節(jié)機理，因此認為它們會響應固有的刺激而活化。
PI3K亞型中研究進行得最多的是第Ia亞型。第Ia類的亞型是由110kDa的催化劑亞單位(subunit)和85/55kDa的調(diào)節(jié)亞單位構成的。調(diào)節(jié)亞單位含有SH2結構域，并可與由具有酪氨酸激酶活性的生長因子受體或癌基因產(chǎn)物磷酸化的酪氨酸殘基結合。結果，引發(fā)了p110催化亞單位的PI3K活性。因此，認為第Ia亞型與細胞增殖·致癌有關。此外，第Ia類PI3K和活性型ras結合，表現(xiàn)出酶活性，已確定活性型ras存在于多種癌中，這說明第Ia類PI3K與細胞的癌變有關。
如上所述，預期PI3K抑制劑可作為新型的用于細胞增殖性疾病的藥物、特別是抗癌劑。作為PI3K抑制劑，已知有wortmannin[H Yano等，J Biol Chem.，263，16178，1993]和下式所表示的LY294002[CJ Vlahos等，J Biol Chem.，269，5241，1994]，但迫切希望開發(fā)出具有更強的癌細胞增殖抑制作用的PI3K抑制劑。
分別有特開平9-176165號公報披露了具有ACAT抑制作用的咪唑并吡啶衍生物；WO93/25553號公報披露了具有動脈硬化癥(atherosclerosis)和高膽固醇血癥(hyperchlolesterolemia)的治療作用的咪唑并吡啶衍生物；US4713381號公報披露了合成中間體形式的咪唑bing吡啶衍生物。但是，結構都和本發(fā)明化合物不同，而且，它們d PI3K抑制活性和抗癌作用既沒有披露也沒有說明。
分別有匈牙利專利公報HU43066A2公報和Eur.J.Med.Chem.(1989)，24(1)，97-9披露了具有強心作用(cardiotonic activity)的被取代氨基取代的1，3，5-三嗪基所取代的咪唑并吡啶衍生物；Arch.Pharm.(Weinheim，Ger..)(1992)，325(9)，623-4披露用作抗驚厥劑(anticonvulsants)的被取代氨基取代的1，3，4-噁二唑基所取代的咪唑并吡啶衍生物。還有Maybridge目錄(序號.SPB-04848)披露了被烷基硫取代的嘧啶基所取代的咪唑并吡啶衍生物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明者深入研究了對PI3K有抑制作用的化合物，發(fā)現(xiàn)新穎的咪唑并吡啶衍生物有良好的PI3K抑制作用和癌細胞增殖抑制作用，可成為良好的PI3K抑制劑和抗癌劑，從而完成了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明涉及作為PI3K抑制劑和抗癌劑的有用的、由下示通式(I)所表示的新型咪唑并吡啶衍生物或其鹽。
(式中的記號表示以下含義R1-H、-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-環(huán)烷基、-環(huán)烯基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-ORa、-SRa、-SO2Ra、-SORa、-CO2Ra、-CO-Ra、-芳基、-低級亞烷基-芳基、-O-低級亞烷基-芳基、-CONRaRb、-CO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-SO2NRaRb、-SO2-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-SO3H、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-NRaRb、-CONRa-低級亞烷基-ORb、-CONRa-低級亞烷基-NRbRc、-CONRa-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-O-低級亞烷基-ORa、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-ORa、-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-O-低級亞烷基-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-NRc-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-OCO-NRaRb、-OCO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-NRa-SO2Rb、-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-NRc-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-N(低級亞烷基-NRaRb)2、-N(低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán)))2、-CONRa-ORb、-NRa-CORb、-NRa-CO-NRbRc、-NRa-CO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、或-OCORa，Ra、Rb和Rc可相同也可不同，為-H、-低級烷基或-芳基TN或CR1a，UN或CR3，n＝1～3，Y1…Y2…Y3i)…一邊為單鍵，另一邊為單鍵或雙鍵；Y1CR5或CR5aR5b；Y2N、NH、CR4a或CR4bR4c；Y3NR6、CR4d或CR4eR4f，但當Y2為CR4a或CR4bR4c時，Y3表示NR6，或者ii)Y1和Y3可通過2～3個原子連接并和鄰接的Y2相連成B環(huán)，此處B環(huán)表示含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5-6元單環(huán)雜芳環(huán)、含氮飽和雜環(huán)或芳環(huán)，B環(huán)還可被1～2個R4基所取代，XS、SO或SO2，但當Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連成B環(huán)時，X也可為NR7、CO或亞甲基，
A鍵、低級亞烷基、低級亞烯基或低級亞炔基，R2-可帶有取代基的低級烷基、-可帶有取代基的低級烯基、-可帶有取代基的低級炔基、-可帶有取代基的環(huán)烷基、-可帶有取代基的環(huán)烯基、-N＝O、-可帶有取代基的芳基或可帶有取代基的雜芳基，R1a、R3、R4a、R4b、R4c、R4d、R4e、R4f、R5a和R5b可相同也可不同，為R1所定義的基團，或者R4b和R4c、R4e和R4f、或R5a和R5b相連成氧代基(＝O)，R4R1所定義的基團或氧代基(＝O)，R5、R6和R7可相同也可不同，為-H、-可帶有取代基的低級烷基、-可帶有取代基的低級烯基、-可帶有取代基的低級炔基；而且，當X為NR7，且R2為鄰位有取代基的芳基時，R7可與芳基鄰位上的取代基相連成C2-3低級亞烷基鏈，并形成與R2的芳環(huán)稠合的5～7元含氮雜環(huán)，但是，(1)當Y1…Y2…Y3基通過N原子連接時，或Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成1，3，5-三嗪或1，3，4-噁二唑環(huán)時，X表示除NR7以外的基團；(2)當Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成嘧啶環(huán)時，X表示SO、SO2、CO或亞甲基。以下相同。)本發(fā)明還涉及醫(yī)藥組合物、特別是PI3K抑制劑和抗癌劑，它包含上述通式(I)所表示的新穎咪唑并吡啶衍生物或其鹽與制藥學上允許的載體。
本發(fā)明還涉及與PI3K有關的疾病(特別是癌)的治療方法，它包括給人或動物使用有效量的通式(I)所表示的新穎咪唑并吡啶衍生物或其鹽。
下面進一步說明通式(I)的化合物。
本說明書中，術語“低級”是指碳原子數(shù)為1～10個、優(yōu)選為1～6個、更優(yōu)選為1～3個的直鏈或支鏈的烴鏈。
“低級烷基”優(yōu)選是碳原子數(shù)為1～6個的烷基，特別優(yōu)選是甲基和乙基?！暗图壪┗眱?yōu)選是乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、異丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基和3-丁烯基等?！暗图壢不眱?yōu)選是乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基等?！碍h(huán)烷基”和“環(huán)烯基”優(yōu)選是碳原子數(shù)為3～8個的環(huán)烷基和環(huán)烯基，特別優(yōu)選是環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)戊烯基?！暗图墎喭榛眱?yōu)選是亞甲基、亞乙基、三亞甲基和2，2-二甲基三亞甲基?！暗图墎喯┗眱?yōu)選是亞乙烯基?！暗图墎喨不眱?yōu)選是亞乙炔基。
本說明書中，“芳基”是指芳香族烴環(huán)基，優(yōu)選是碳原子數(shù)為6～14個的芳基，它可部分飽和。優(yōu)選的是苯基和萘基。而且，Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成的B環(huán)中的芳環(huán)優(yōu)選是苯或萘環(huán)。
本說明書中，“雜芳基”是指含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5～6元單環(huán)雜芳基、及其和苯環(huán)稠合成的2環(huán)式雜芳基，它們可部分和。此處，含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5～6元單環(huán)雜芳基優(yōu)選是呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基和吡嗪基；2環(huán)式雜芳基優(yōu)選是苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、吲哚基、異吲哚基、吲唑基、喹啉基、異喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基和苯并間二氧雜環(huán)戊烯基(benzodioxolyl)。部分飽和的雜芳基可例舉的有1，2，3，4-四氫喹啉基等。R2中的雜芳基特別優(yōu)選的是噻吩基、吡唑基、噻唑基、異噁唑基、吡啶基、苯并噻二唑基、和喹啉基。
Y1和Y3通過2～3個原子連接并與Y2相連形成的B環(huán)中，“含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5～6元單環(huán)雜芳環(huán)”是形成前述“含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5～6元單環(huán)雜芳基”的雜芳環(huán)，優(yōu)選是呋喃、噻吩、吡咯、咪唑、吡唑、噻唑、異噻唑、噁唑、異噁唑、三唑、四唑、噻二唑、吡啶、嘧啶、噠嗪和吡嗪環(huán)。更優(yōu)選是5元單環(huán)雜芳環(huán)；還要優(yōu)選是吡咯、咪唑、吡唑、噻唑、噁唑和三唑環(huán)，特別優(yōu)選是吡唑和噻唑環(huán)。
“鹵素”可例舉有F、Cl、Br和I原子。“鹵代低級烷基”是可被一個以上的前述鹵原子取代的前述低級烷基，優(yōu)選是-CF3。
本說明書中，“含氮飽和雜環(huán)基”是環(huán)原子上包含1～2個N原子、還可含有1個O或S原子、也可帶有橋聯(lián)的5～7元含氮飽和環(huán)基。優(yōu)選是1-吡咯烷基、1-哌嗪基、哌啶子基和嗎啉代。此外，“X為NR7，且R2是鄰位有取代基的芳基時，R7和芳基鄰位的取代基相連成C2-3低級亞烷基鏈，并與R2的芳環(huán)稠合形成5～7元含氮雜環(huán)”是指和芳環(huán)稠合的前述“含氮飽和雜環(huán)”，優(yōu)選為1-吡咯烷基或哌啶基與苯環(huán)的稠合環(huán)。Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成的B環(huán)中，“含氮飽和雜環(huán)”優(yōu)選是吡咯烷、咪唑烷和吡唑烷環(huán)，更優(yōu)選是吡咯烷環(huán)。
“-可帶有取代基的的低級烷基”、“-可帶有取代基的低級烯基”和“可帶有取代基的低級炔基”中的取代基是1～5個選自以下D組的取代基。
D組-鹵素、NO2、-CN、-OH、-O-低級烷基、-O-鹵代低級烷基、-SH、-S-低級烷基、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CO-低級烷基、-CONH2、-NH2、-NH-低級烷基、-N(低級烷基)2、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-芳基、-雜芳基、-環(huán)烷基和-環(huán)烯基。以下相同。
R2基的“-可帶有取代基的環(huán)烷芳基”、“-可帶有取代基的環(huán)烯基”、“-可帶有取代基的芳基”和“-可帶有取代基的雜芳基”中，取代基優(yōu)選是-可被1～5個選自D組的取代基取代的低級烷基、-可被1～5個選自D組的取代基取代的低級烯基、-可被1～5個選自D組的取代基取代的低級炔基、-可被1～5個選自E組的取代基取代的環(huán)烷基、-可被1～5個選自E組的取代基取代的環(huán)烯基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-O-鹵代低級烷基、-OH、-O-低級烷基、-SH、-S-低級烷基、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CHO、-CO-低級烷基、-SO3H、-Ar1、-O-Ar1、-S-Ar1、-CO-Ar1、-SO2-Ar1、-低級亞烷基-Ar1、-O-低級亞烷基-Ar1、-CONH2、-CONH-低級烷基、-CON(低級烷基)2、-SO2NH2、-SO2NH-低級烷基、-SO2N(低級烷基)2、-CO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-SO2-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-NH2、-NH-低級烷基、-N(低級烷基)2、-NHCO-低級烷基、-NHCO-Ar1、-NHSO2-低級烷基、-NHSO2-Ar1、-疊氮基和-N＝N-Ar1。此處，E組表示-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基和前述D組的取代基，Ar1表示可被1～5個選自E組的取代基取代的芳基或雜芳基。以下相同。
n為2或3時，多個R1基可相同也可不同。當存在兩個R4基時，各R4基可相同也可不同。
R3、R4a、R4b、R4c、R4d、R4e和R4f優(yōu)選為-H、-OH或低級烷基，或者R4b和R4c相連形成氧代基(＝O)。R4優(yōu)選是-低級烷基、＝O、-COOH、-COO-低級烷基、-CO-低級烷基和-SO3H。R5和R7優(yōu)選為-H或低級烷基，R6優(yōu)選是可被選自以下的取代基取代的低級烷基或低級烯基-H或-O-低級烷基、-S-低級烷基、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CO-低級烷基、-CONH2、-NH2、-NH-低級烷基、-N(低級烷基)2、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))和-芳基。
本發(fā)明化合物中，優(yōu)選的化合物如下。
(1)化合物中，R1是-H、-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-環(huán)烷基、-環(huán)烯基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-OH、-O-低級烷基、-O-芳基、-SH、-S-低級烷基、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CO-低級烷基、-芳基、-CO-芳基、-低級亞烷基-芳基、-O-低級亞烷基-芳基、-CONH2、-SO2NH2、-SO3H、-含氮飽和雜環(huán)、-NH2、-NH-低級烷基或-N(低級烷基)2；T為CR1a；U為CR3；Y1…Y2…Y3是i)…的一邊為單鍵，另一邊為單鍵或雙鍵；Y1為CR5或CHR5a；Y2為N、CR4a或CHR4b；Y3為NR7、CR4d或CHR4e，或ii)Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成B環(huán)，此處的B環(huán)是含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5～6元單環(huán)雜芳環(huán)或芳環(huán)，B環(huán)還可被1～2個R4基所取代；R2為-H、-鹵代低級烷基、-N＝O、-可帶有取代基的芳基或可帶有取代基的雜芳基；R1a、R3、R4、R4a、R4b、R4d和R4e可相同也可不同，為R1所定義的基團；R5、R5a、R6和R7可相同也可不同，表示-H或-低級烷基；但當X為NR7、R2為鄰位有取代基的芳基時，R7可與鄰位的取代基連形成C2-3低級亞烷基鏈，并形成與R2的芳環(huán)稠合的5～7元含氮雜環(huán)，(2)化合物中，n為1；R1為-低級烷基、-鹵素、-CN、-NO2、-鹵代低級烷基、-ORa、-O-低級亞烷基-芳基、-CO2Ra、-CONRa-低級亞烷基-ORb、-CONRaRb、-CO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-CONRa-低級亞烷基-NRbRc、-CONRa-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))或-芳基，(3)化合物中，A為鍵；并且R2為可帶有取代基的芳基或可帶有取代基的雜芳基，(4)化合物中，R2為可被1個以上選自以下的取代基取代的苯基-(可被OH取代的低級烷基)、-低級烯基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-O-鹵代低級烷基、-OH、-O-低級烷基、-CO-低級烷基、-SO2-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CONH2、-SO2NH2、-CO-芳基、-SO2-芳基、-NH2、-NH-低級烷基、-N(低級烷基)2、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-NHCO-低級烷基、-可被1～5個選自E組的取代基取代的芳基和可被1～5個選自E組的取代基取代的雜芳基，(5)化合物中，T為CH；并且U為CH或C-(低級烷基)，(6)化合物中，X為SO2，(7)化合物中，Y1…Y2…Y3基為i)CR5＝N-NR6、CR5aR5b-NH-NR6、CR5aR5b-CR4bR4c-NR6，或ii)Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成5～6元單環(huán)雜芳環(huán)，該5～6元單環(huán)雜芳環(huán)可被1～2個R4基取代，(8)Y1…Y2…Y3基中的鏈狀結構或單環(huán)雜芳環(huán)的部分結構具有“C＝N-N”、“C＝N-C”或“C-N＝C”骨架的化合物，特別優(yōu)選是具有“C＝N-N”骨架的化合物，(9)化合物中，Y1…Y2…Y3基為CR5＝N-NR6；R5為-H或-低級烷基；并且R6為可被選自以下的取代基取代的低級烷基或低級烯基-H、-O-低級烷基、-S-低級烷基、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CO-低級烷基、-CONH2、-NH2、-NH-低級烷基、-N(低級烷基)2、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))和-芳基，(10)化合物中，Y1…Y2…Y3基中的Y1和Y3通過2個原子連接并與相鄰的Y2相連形成5元單環(huán)雜芳環(huán)，該5元單環(huán)雜芳環(huán)可被選自以下的1～2個R4基取代-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CO-低級烷基和-SO3H，以及(11)后述實驗例3中所示的黑素瘤細胞增殖抑制實驗中抑制活性(IC50)為5μM(微摩爾)以下的化合物。
本發(fā)明化合物中優(yōu)選的化合物列舉如下。
3-(6-溴-2-甲基咪唑并[1，2-a](3-比啶基)-1H-(1-吡唑基)2-甲基-5-硝基苯基砜；3-(6-溴吡唑并[1，2-a](3-吡啶基)-1H-(1-吡唑基)2-甲基-5-硝基苯基砜；2’-[(6-溴咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-1’，2-二甲基-5-硝基苯磺酰肼；2’-[(6-溴咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-2-乙基-1’-甲基-5-硝基苯磺酰肼；3-({2-[(6-溴咪唑并[1，2-a](3-比啶基)亞甲基]-1-甲基肼基}磺?；?-4-甲基芐腈；2’-[(6-氟咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-1’，2-二甲基-5-硝基苯磺酰肼；2-氨基-2’-[(6-氯咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-1’-甲基-5-硝基苯磺酰肼；2’-[(6-氯咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-1’-甲基-5-硝基-2-(2，2，2-三氟乙氧基)苯磺酰肼；6-氯-3-[2-(2-甲基-5-硝基苯磺?；?(4-噻唑基]咪唑并[1，2-a]吡啶；6-溴-3-{[(2-甲基-5-硝基苯磺?；?(2-嗎啉代乙基)亞肼基]甲基}咪唑并[1，2-a]吡啶；6-氯-3-{[(甲基)(2-甲基-5-硝基苯磺酰)亞肼基]甲基}咪唑并[1，2-a]吡啶；3-{[(甲基)(2-甲基-5-硝基苯磺?；?亞肼基]甲基}咪唑并[1，2-a]吡啶-6-腈；5-氰基-2’-[(6-氟咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-1’，2-二甲基苯磺酰肼；5-氰基-2’-[(6-氰基咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-1’，2-二甲基苯磺酰肼；1’，2-二甲基-2’-[(6-甲基咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-5-硝基苯磺酰肼；2’-[(6-氯咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-2-(1H-(1-咪唑基))-1’-甲基-5-硝基苯磺酰肼；2’-[(6-氯咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞甲基]-2-二甲基氨基-1’-甲基-5-硝基苯磺酰肼；和它們的鹽。
本發(fā)明化合物根據(jù)取代基的種類，有時存在幾何異構體或互變異構體，而本發(fā)明包括經(jīng)分離的這些異構體或它們的混合物。而且，本發(fā)明化合物有時存在手性碳原子，因此存在基于手性碳原子的異構體。本發(fā)明包括這些光學異構體的混合物和它們經(jīng)分離的物質(zhì)。
此外，本發(fā)明化合物有時會形成鹽。只要制藥學上允許的鹽，則沒有特別的限制，酸加成鹽可例舉的具體有鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸鹽；甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、天冬氨酸、谷氨酸等有機酸鹽。堿鹽可例舉的有含有鈉、鉀、鎂、鈣、鋁等金屬的無機堿鹽；或甲胺、乙胺、乙醇胺、賴氨酸、鳥氨酸等有機堿鹽以及銨鹽等。此外，本發(fā)明包括化合物(I)及其鹽的各種水合物、溶劑合物和多晶形物質(zhì)。
(制造方法)以下說明本發(fā)明化合物的典型制造方法。根據(jù)官能團的種類，有時在原料或中間體階段用適當?shù)谋Ｗo基(即容易轉化成該官能團的基團)置換該官能團，這在制造技術上是有效的。然后，必要時除去保護基，就能獲得所需的化合物。這樣的官能團可例舉例如氨基、羥基、羧基等；它們的保護基可例舉例如Greene和Wuts著的“Protective Groups in Organic Synthesis(有機合成中的保護基)”第2版中記載的保護基，可根據(jù)反應條件適當使用這些保護基。
第一制造方法
(式中，B1環(huán)表示可被1～2個R4基取代、Y3為N原子的含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5～6元單環(huán)雜芳環(huán)或含氮飽和雜環(huán)，L表示離去基團。以下相同。)本發(fā)明化合物(Ia)、(Ib)和(Ic)分別可由通式(II)所表示的雜環(huán)衍生物按照常規(guī)方法經(jīng)磺?；Ⅴ０坊蛲榛母鞣N修飾反應而合成。
上式中，L表示離去基團，包括鹵素(氟、氯、溴、碘等)或磺酰氧基(例如甲磺酰氧基、三氟甲磺酰氧基、甲苯磺酰氧基、苯磺酰氧基等)，優(yōu)選是氯、溴、碘、三氟甲苯磺酰氧基。這些脫離基團可根據(jù)原料或反應種類來適當選擇。
磺?；磻赏ㄟ^常規(guī)方法由雜環(huán)衍生物(II)與磺酸的反應性衍生物反應而進行?；撬岬姆磻匝苌锟闪信e的有磺酰氯是最常見的，其它還有磺酰溴、酸酐(由2分子的磺酸制成的磺酸酐)、酰疊氮等。這樣的磺酸的反應性衍生物，根據(jù)通常的常規(guī)方法，可容易地從相應的磺酸得到。合成磺酰氯的具體例子可例舉有例如J.Chem.Soc.Pak.，8(1)，11-17(1986)、Bull.Chem.Soc.Jpn.，59(2)，465-70(1986中記載的方法。合成磺酰氯的其它方法可例舉有用氯磺酸作為反應劑的方法，例如Org Synth.，1941，I，85.，J.Med.Chem.，33(9)，2569-78(1990)中記載的方法，重氮鹽經(jīng)Sandmeyer反應的方法，例如Tetrahedron Lett.，31(26)，3715-18(1990)、J.Am.Chem.Soc.，112(12)，4976-7(1990)中記載的方法。
用作為反應性衍生物的酰鹵化物進行磺酰化時，優(yōu)選在堿(氫氧化鈉、氫化鈉等的無機堿或吡啶、三乙胺(TEA)、二異丙基乙胺等有機堿)的存在下進行。在與酸酐、酰疊氮等反應性衍生物反應時，也可不在堿的存在下進行。根據(jù)情況，在氫氧化鈉、TEA、吡啶、2，6-二甲基吡啶等堿的存在下進行較好。反應溫度根據(jù)磺酸反應性衍生物的種類等適當選擇。溶劑可例舉的有吡啶等堿性溶劑；苯、甲苯等芳香族烴類溶劑；四氫呋喃(THF)、1，4-二噁烷等醚類溶劑；二氯甲烷、氯仿等鹵代烴類溶劑；N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N-二甲基乙酰胺等酰胺類溶劑；丙酮、甲基乙基酮等酮類溶劑等。這些溶劑可單獨使用，也可兩種以上混合使用。溶劑可根據(jù)原料化合物的種類等適當選擇。
酰胺化反應可按常規(guī)方法進行，優(yōu)選的是使羧酸轉化為反應性衍生物，例如酰鹵化物(酰氯等)或酸酐，再與雜環(huán)衍生物(II)反應。使用羧酸的反應性衍生物時，優(yōu)選加入前述的堿。此外，酰胺化反應也可用羧酸在縮合劑(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(EDCI)、1，1-羰基二-1H-咪唑(CDI)等)的存在下進行反應。此時，可加入1-羥基苯并三唑(HOBt)等添加劑。反應溫度可根據(jù)原料化合物來適當選擇。溶劑可例舉對反應呈惰性的溶劑，例如和前述磺?；磻嗤娜軇?。溶劑可根據(jù)原料化合物的種類等來適當選擇，可單獨使用也可兩種以上混合使用。
烷基化反應可按常規(guī)方法進行，優(yōu)選在碳酸鉀、氫氧化鈉、氫化鈉等前述堿的存在下進行。烷基化劑可用鹵烷或磺酸酯等(對甲苯磺酸酯、三氟甲磺酸酯等)烷基化劑。反應可在冷卻或加熱下進行，所用的溶劑是反應惰性的溶劑，可例舉例如和前述的磺酰化反應相同的常用溶劑。溶劑可根據(jù)原料化合物的種類等來適當選擇，可單獨使用也可兩種以上混合使用。而且，烷基化反應中，所得的化合物為單烷基化物時，可根據(jù)所需再按常規(guī)方法進行烷基化反應，從而使之轉化為二烷基化物。其它合適的烷基化方法可例舉的有例如以各種醛或酮為反應劑時，用硼氫化鈉、三乙酰氧基硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉等作為還原劑，進行還原烷基化反應，或者用分水器(dehydrator)等脫水裝置，形成亞胺，然后使之與作為還原劑的硼氫化鈉等反應的方法。
為雜環(huán)衍生物的原料化合物(II)可根據(jù)雜環(huán)種類由相應的常規(guī)方法制成。
典型的制造方法如下。
(Alk表示烷基，R’表示烷基或芳基)吡唑衍生物(IIa)是由酰基化合物(3)和N，N-二甲基甲酰胺縮二甲醇等反應，轉化成二甲基氨基烯酮化合物等，再與肼加成進行環(huán)化反應而合成的。反應可在溶劑不存在下或在不參與反應的有機溶劑中于冷卻下或加熱下進行。U為CR3的酰基化合物(3)可由氨基化合物(1)和二酮化合物(2)反應而成，或由Synthesis，263-265(1984)記載的用鹵代酮使N-吡啶基脒烷基化的方法合成。酰基化合物(3)還可通過對咪唑并吡啶衍生物(5)進行Friede-Crafts型的?；磻铣伞ｕ；磻砂闯Ｒ?guī)方法進行，例如可參考J.Med.Chem.，13，1048(1970)的方法?；衔?5)可按常規(guī)方法由氨基吡啶衍生物(1)和α-鹵代羰基化合物(4)容易地制備。
U為N的?；衔?3)例如可用臭氧分解使烯烴化合物(8)的雙鍵氫化斷裂而合成。此時，根據(jù)原料化合物和反應條件，可分離出諸如縮半酮等的酮等價體等。在這種情況下，使用適宜、適當?shù)姆磻獥l件，可轉化成所需的?；衔?。烯烴化合物(8)例如可通過在乙酸中加熱酰肼(7)而合成。酰肼化合物(7)可用常規(guī)方法使肼(6)進行酰化而合成。
原料化合物(IIb)例如可通過在乙酸中加熱酰肼化合物(9)進行環(huán)化反應而合成，酰肼化合物(9)可按常規(guī)方法由肼化合物(6)?；铣伞?br> 原料化合物(IIc-1)可按常規(guī)方法使烯酮化合物(11)與甲苯磺?；谆?TosMIC)反應而合成，(11)可按常規(guī)方法使化合物(10)進行Horner-Emmons-Wadsworth反應而合成?；衔?10)基本上可參考前述化合物(3)的合成方法。不同之處在于當U為C-R3時對化合物(5)進行的?；磻捎媒?jīng)Vilsmeier反應的進行甲酰化，還在于當化合物(1)與二酮反應形成咪唑并吡啶環(huán)時用鹵代丙二醛作為反應劑。Vilsmeier反應的例子可例舉前述J.Med.Chem.，13，1048(1970)記載的方法。當U為N時，在(3)的合成中用R5為H的化合物為原料，可合成(10)。原料化合物(IIc-2)可通過使酯化合物(IIc-1)進行水解反應并在加熱條件下進行脫羧反應而合成。
第二制造方法 (式中，R61為除H以外的R6定義的基團。以下相同。)本制造方法，是按常規(guī)方法使通式(III)所表示的腙衍生物進行磺酰化或酰胺化的修飾反應而合成本發(fā)明化合物(Id)和(If)的方法。R6為H時，可根據(jù)需要對本發(fā)明化合物(Id)和(If)適當實施烷基化等公知的取代基轉化方法等，使之轉化為本發(fā)明化合物(Ie)和(Ig)。
這種磺?；?、酰胺化或烷基化，可與第一制造方法記載的方法相同地進行。
為腙衍生物的原料化合物(III)可按常規(guī)方法合成，即通過使酰基化合物(3)或(10)與NH2NHR6所表示的肼化合物或其水合物優(yōu)選在甲醇、乙醇等醇類溶劑中于冷卻或加熱下反應而合成。
第三制造方法 本制造方法是使通式(IV)所表示的α-鹵代酮等與硫脲進行環(huán)化反應獲得氨基噻唑衍生物(Ih)的方法。
本環(huán)化反應可按常規(guī)方法進行?？衫e的有例如使作為原料化合物的α-鹵代酮等(IV)與硫脲化合物在溶劑中或不用溶劑并于冷卻或加熱下反應的方法，溶劑優(yōu)選使用甲醇、乙醇、異丙醇等醇類溶劑；以及前述的羰基系溶劑、醚類溶劑、鹵代烴類溶劑、酰胺類溶劑等。溶劑可根據(jù)原料化合物的種類等適當選擇，可單獨使用也可兩種以上混合使用。反應時，通過加入堿(碳酸鉀、碳酸鈉、TEA等)，可使反應順利進行。
為α-鹵代酮衍生物的原料化合物(IV)可通過用常規(guī)方法對酰基化合物(3a)進行鹵代來合成。鹵化劑可例舉的有例如氯、溴、碘、溴化銅(II)、碘酸鉀、三溴化芐基三甲基銨、三溴化苯基三甲基銨、三溴化四丁基銨、硫磺酰氯、三甲基甲硅烷基氯、三甲基甲硅烷基溴、5，5-二溴巴比妥酸等，溶劑可例舉反應惰性的溶劑，例如乙酸、氫溴酸/乙酸等酸性溶劑；前述的醇類溶劑；醚類溶劑。反應溫度可在冷卻下或加熱下進行。
而且，可根據(jù)取代基的種類，適當實施公知的取代基轉化反應由此制成所需的原料化合物。
第四制造方法 本制造方法使將式(V)所表示的α-鹵代酮等與硫脲進行環(huán)化反應獲得本發(fā)明化合物(Ii)的方法。環(huán)化反應用和第三制造方法相同的方法進行。并且，原料化合物(V)也可用和原料化合物(IV)相同的方法合成。
第五制造方法 (式中，B2環(huán)表示可被1～2個R4基取代、Y3為C原子的含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5～6元單環(huán)雜芳環(huán)、含氮飽和雜環(huán)或芳環(huán)。以下相同。)本制造方法是使式(VI)所表示的氨基化合物進行烷基化反應或芳基化反應而獲得本發(fā)明化合物(Ij)的方法。烷基化可按常規(guī)方法進行，例如可與第一制造方法相同。而且，根據(jù)需要，可適當實施N-烷基化等公知的取代基轉化方法等。芳基化反應的例子可例舉有例如Acc.Chem.Res.，31，805，(1998)，ibid，31，852(1998)中記載的偶合反應，以及例如J.Org.Chem.，63(18)，6338(1998)中記載的本位取代反應等。原料的氨基化合物(VI)可按常規(guī)方法合成，例如，在B2環(huán)為咪唑時，可用前述的α-鹵代酮(IV)作為原料按照常規(guī)方法合成，例如可按J.Org.Chem.59(24)7299-7305(1994)中記載的方法制造。在B2環(huán)是噻唑環(huán)時，可用前述的第四制造方法以未取代的硫脲作為反應劑來制造。
第六制造方法 (式中，Y21表示NH或CR4aR4b。以下相同。)本制造方法是使用常規(guī)方法對通式(VII)所表示的胺衍生物進行磺?；蝓０坊瘉砗铣杀景l(fā)明化合物(Ik)和(Im)的方法。而且，可根據(jù)需要對本發(fā)明化合物(Ik)和(Im)適當實施烷基化等公知的取代基轉化等，使其轉化為本發(fā)明化合物(In)和(Ip)?；酋；?、酰胺化和烷基化可按照和第一制造方法中記載的方法相同地進行。原料化合物(VII)例如可用合成路線圖如下的方法容易地合成。
原料(VIIa)可按照日本化學會編的《實驗化學講座)(丸善)中記載的還原反應由腈化合物(15)容易地合成。腈化合物(15)可按常規(guī)方法、例如J.Med.Chem.12，122(1969)中記載的方法由前述?；衔?3)制成。(VIIb)可由肼化合物在室溫或加熱下與酯化合物(16)反應而合成。(VIIc)可按常規(guī)方法用硼氫化鈉等還原α-鹵代酮衍生物(IV)，使其轉化為環(huán)氧化物或鹵代醇化合物，然后進行氨基化來合成。
第七制造方法 (式中，B環(huán)表示可帶有1～2個R4基的含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5～6元單環(huán)雜芳環(huán)、含氮飽和雜環(huán)或芳環(huán)。以下相同。)本制造方法是通過將通式(VIII)所表示的硫醇化合物轉化為本發(fā)明化合物(Iq)、必要時再進行氧化反應來合成式(Ir)或(Is)所表示的亞砜衍生物或砜衍生物的方法。以硫醇化合物(VIII)為原料來合成硫醚化合物(Iq)的方法可例舉的有在-A-R2基為烷基或芳烷基時按常規(guī)方法在堿的存在下與鹵代烷基或鹵代芳烷基反應的方法。在-A-R2基為芳基或雜芳基時，可用與鹵代芳基的偶合反應來獲得硫醚化合物(Iq)。偶合反應在鹵素為氟時例如可用J.Org.Chem.1993，58(12)，3229-3230，Synth Commun.1982，12(13)，1071的方法，在鹵素為溴時例如可參考Synthesis 11，892(1981)的方法，在鹵素為碘時例如可參考Chem.Lett.11，1363(1980)的方法。此外，也可用使(VIII)的硫醇鹽與重氮鹽反應的方法、和使帶有適當離去基團的芳基與硫醇鹽在室溫下或加熱下進行本位取代反應的方法。反應條件例如可參考特開2000-53635和TetrahedronLett.，26，6365(1985)中記載的方法等。
由(Iq)轉化為(Ir)或(Is)的氧化反應可按常規(guī)方法進行，例如可用m-氯苯甲酸、過氧化氫、過乙酸、高錳酸鉀、臭氧、高碘酸鈉等氧化劑。如果存在難以進行氧化的化合物，例如可參考例如J.Heterocyclic Chem.，28，577(1991)、Tetrahetron Lett.，35，4955(1994)中記載的反應條件。此外，進行氧化反應時，為了使硫醚以外的部位也被氧化，例如在轉化為N-氧化物時，可按常規(guī)方法用適當還原劑進行脫氧。
原料化合物(VIII)可按常規(guī)方法合成，在B環(huán)是雜芳基時，例如是噻唑可參考Bioorganic & Medicinal Chemistry，5，601(1997)、J.Org.Chem，13，722(1948)中記載的方法；是咪唑可參考J.Am.Chem.Soc.，71，4000(1949)、J.Indian Chem.Soc，52(12)，1117(1981)、Chem.Pharm.Bull.，32(7)，2536(1984)中記載的方法；是噁唑可參考Fr1450443(1965)、JCS Perkin Trans.1，3，435(1984)、Chem.Pharm.Bull.，40，245(1992)、Bull.Soc.Chim.Belges，70，745(1961)中記載的方法；是噻二唑可參考Chem.Ber.，94，2043(1961)中記載的方法合成。為其它環(huán)時，例如可按照Datritzky、Rees編的《Comprehensive HeterocyclicChemistry(綜合雜環(huán)化學)》、A.Weissberger、E.C.Taylor編的《The Chemistryof Heterocyclic Compounds(雜環(huán)化合物化學)》或A.R.Katritzky編的《Advancedin Heterocyclic Chemistry(雜環(huán)化學的發(fā)展)》中記載的環(huán)化反應構成B環(huán)來合成。
第八制造方法 (式中，Hal表示鹵素。)本制造方法是按常規(guī)方法使通式(IX)和通式(X)所表示的鹵代芳基化合物進行偶合反應而獲得本發(fā)明化合物(It)的方法。偶合反應可按常規(guī)方法進行。進行偶合反應時，優(yōu)選在(IX)或(X)中的任何一個按常規(guī)方法轉化為芳基金屬試劑、芳基硼酸衍生物或芳基錫化合物等反應性衍生物后，在鈀、鎳、銅等催化劑的存在下進行。這種偶合反應的例子可例舉的有，例如有前述的《實驗化學講座》中記載的方法。原料化合物(IV)例如可按照前述《Comprehensive Heterocyclic Chemistry》、《The Chemistry of Heterocyclic Compounds》和《Advanced in HeterocyclicChemistry》中記載的環(huán)化反應構成B環(huán)，必要時還可用第七制造方法進行烷基化反應、偶合反應、氧化反應和脫氧反應來合成。
此外，根據(jù)取代基的種類，適當實施公知的取代基轉化等方法，就能制成所需的本發(fā)明化合物。反應次序等可根據(jù)所需化合物、采用的反應種類而適當變更。
其它的本發(fā)明化合物和原料化合物也可用和前述制造方法相同的方法或用本領域中技術人員公知的方法由適當原料容易地制成。
由此制成的本發(fā)明化合物，可以直接以游離體形式、也可以經(jīng)常規(guī)方法進行成鹽處理而以鹽形式進行分離·提純。分離·提純通過萃取、濃縮、蒸餾、結晶化、過濾、再結晶、各種色譜法等通常的化學操作來適當進行。
各種異構體可利用異構體之間的物理化學性質(zhì)差異用常規(guī)方法來分離。例如，外消旋化合物通?？捎霉鈱W拆分法(例如，將其轉化為常用光學活性酸(酒石酸等)的非對映體鹽、進行光學拆分的方法等)，轉化成立體的純異構體。非對映體的混合物例如可通過分別結晶或色譜法等分離。光學活性的化合物可由適當?shù)墓鈱W活性原料制成。
工業(yè)實用性本發(fā)明化合物具有激酶抑制活性、特別是PI3K抑制活性，因此能用于抑制與PI3K有關的異常細胞增殖。所以，它用作因PI3K而異常細胞增殖所引起的疾病例如再狹窄、動脈硬化、骨骼疾病、類風濕關節(jié)炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病、牛皮癬、前列腺肥大、動脈粥樣硬化癥、炎癥、血管生成、免疫疾病、胰腺炎、腎病、癌等的治療劑。特別是本發(fā)明化合物具有良好的癌細胞增殖抑制作用，滿意地所有實體癌和淋巴瘤、特別是白血病、皮膚癌、膀胱癌、乳癌、子宮癌、卵巢癌、前列腺癌、肺癌、腸癌、胰腺癌、腎癌、胃癌、腦腫瘤等的治療中都有用。
通過以下藥理實驗，確定了本發(fā)明化合物的藥理作用。
實驗例1 PI3K(p110α亞型)的抑制實驗測定用桿狀病毒表達系(expression system)中值得的酶(牛p110α)進行。酶的配制按照I Hiles等的《Cell(細胞)》，70，419，1992進行。將評價化合物配制成二甲基亞砜(DMSO)溶液，連續(xù)用DMSO稀釋。評價化合物(0.5微升)和酶在25微升緩沖液(40mM Tris-HCl(pH 7.4)，200mM NaCl，2mM二硫蘇糖醇，5mM MgCl2)中混合后，加入含有10微克PI(Sigma)、2μCi(微居里)[γ-32P]ATP(Amersham Pharmacia)、80μM非放射性ATP(Sigma)的5mM Tris-HCl(pH7.4)緩沖液25微升，開始反應。于37℃反應15分鐘后，加入200微升的1MHCl，400微升的CHCl3/MeOH(1∶1)、攪拌、離心分離。用150微升的MeOH/1MHCl(1∶1)再萃取有機層兩次，用Cerenkov光測定其放射活性。
化合物的抑制活性IC50，是以單添加DMSO時的放射活性為100％，沒有酶時的放射活性為0％，算出50％抑制時實驗化合物的濃度。
本發(fā)明化合物具有良好的抑制活性。例如，化合物6具有比公知的P13K抑制劑LY294002高10倍以上的抑制活性。
實驗例2 大腸癌細胞的增殖抑制實驗大腸癌細胞株HCT116細胞在含有10％Fetal Bovine Serum(胎牛血清)的McCoy 5A培養(yǎng)基(GIBCO)中培養(yǎng)。將HCT116(5000個細胞/穴)在96穴板(wellplate)上接種，培養(yǎng)一晚。在其中加入以培養(yǎng)基稀釋的化合物至最終濃度為0.1-30μM(最終DMSO濃度，1％)，培養(yǎng)72小時后，加入Alamar Blue試劑。2小時后，由激發(fā)波長530納米與發(fā)射波長590納米的熒光強度比求出抑制活性IC50。
本發(fā)明的化合物5、6、8和9有良好的癌細胞增殖抑制作用。
實驗例3黑素瘤細胞的增殖抑制實驗黑素瘤細胞株A375細胞在含有10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)皿(GIBCO)中培養(yǎng)。A375細胞預先在含有1微升/穴(最終濃度0.001-30μM)的96穴板上以10000個細胞/100微升接種。培養(yǎng)46小時后，加入Alamar Blue試劑(10微升/穴)。2小時后，用和上述相同的方法，由激發(fā)波長530納米和消光波長590納米的熒光強度比確定實驗化合物的IC50。
本發(fā)明的化合物6、30、43、53、54、57、59、60、65、77、88、93、95、96、99、112和113具有良好的黑素瘤細胞增殖抑制作用。其IC50值不到1μM。而作為公知的PI3K抑制劑的LY294002的值為8.39μM。
除了上述癌細胞株以外，本發(fā)明化合物對宮頸癌細胞株HeLa細胞、肺癌細胞株A549和H460細胞、大腸癌細胞株COLO 205、WiDr和Lovo細胞、前列腺癌細胞株PC3和LNCaP細胞、卵巢癌細胞株SKOV-3、OVCAR-3和CH1細胞、神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株U87MG細胞、胰腺癌細胞株BxPC-3細胞也有良好的癌細胞增殖抑制作用。
實驗例4 體內(nèi)癌增殖抑制實驗將人宮頸癌細胞株HeLaS3株的細胞5×106個移植到雌性Balb/c裸小鼠的背側部皮下。當腫瘤體積達到100～200毫米3時，將評價化合物進行2周每天1次的腹腔內(nèi)給藥。還在對照組中將20％羥丙基-β-環(huán)糊精/鹽水進行腹腔內(nèi)給藥。用游標卡尺測量腫瘤直徑，到最終給藥的第二天為止進行經(jīng)時測量。由以下計算式算出腫瘤體積。
腫瘤體積(毫米3)＝1/2×短徑(毫米)2×長徑(毫米)本實驗中，本發(fā)明化合物表現(xiàn)出比對照組更良好的癌增殖抑制作用。
本發(fā)明的藥物，可用1種或兩種以上的通式(I)所示的本發(fā)明化合物、通常制成制劑所用的藥劑用載體、賦形劑和其它添加劑按照常用的方法配制而成。給藥可以片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、液劑等口服形式；靜脈注射、肌肉注射等注射劑形式；或栓劑、經(jīng)鼻、經(jīng)粘膜、經(jīng)皮等非口服形式中的任何形式進行。
本發(fā)明用于口服的固體組合物可用片劑、散劑、顆粒劑等形式。這樣的固體組合物中，一種或以上的活性物質(zhì)可與至少一種惰性稀釋劑混合，例如乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶纖維素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、偏硅酸鋁鎂。組合物還可按常規(guī)方法，含有除惰性的稀釋劑以外的添加劑，例如硬脂酸鎂這樣的潤滑劑和纖維素乙醇酸纖維素鈣這樣的崩解劑、谷氨酸或天冬氨酸這樣的助溶劑。片劑或丸劑必要時還可用蔗糖、明膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯這樣的糖衣或者胃溶性或腸溶性物質(zhì)的膜作為包衣。
用于口服的液體組合物，可含有藥劑上允許的乳劑、溶液劑、懸浮劑、糖漿劑、酏劑等；常用的惰性稀釋劑，例如純水、乙醇。該組合物還可含有除惰性稀釋劑以外的潤濕劑、懸浮劑這樣的助劑、甜味劑、調(diào)味劑、芳香劑、防腐劑。
非口服的注射劑包括無菌的水性或非水性溶液劑、懸浮劑、乳劑。水性的溶液劑、懸浮劑含有例如注射用蒸餾水和生理鹽水。非水溶性的溶液劑、懸浮劑包括例如丙二醇、聚乙二醇；橄欖油這樣的植物油；乙醇這樣的醇類；聚山梨醇酯80等。這些組合物還可含有防腐劑、潤濕劑、乳化劑、分散劑、穩(wěn)定劑、助溶劑這樣的助劑。例如通過將它們經(jīng)除菌濾器過濾，摻入殺菌劑或經(jīng)照射，可使之無菌?；蛘撸谑褂们坝脽o菌水或無菌的注射用溶劑溶解，將它們制成無菌的固體組合物。
通?？诜r，每天的給藥量按體重約為0.0001～50毫克/千克、優(yōu)選約0.001～10毫克/千克、更優(yōu)選約0.01～1毫克/千克是適宜的，可1次給藥，也可分2～4次給藥。靜脈給藥時，每天的給藥量按體重約0.0001～1毫克/千克、優(yōu)選約0.0001～0.1毫克/千克是適宜的，可每天1次或分幾次給藥。給藥量應考慮癥狀、年齡、性別等，根據(jù)個別情況適當決定。
本發(fā)明化合物可單獨使用也可和其它治療方法(例如放射療法和外科手術)結合使用。此外，還可和其它抗癌劑，例如烷基化劑(順鉑、卡鉑等)、代謝拮抗劑(氨甲喋呤、5-FU等)、抗癌性抗生素(阿霉素、博來霉素等)、抗癌性生物減(紅豆杉醇、依托泊等)、抗癌性激素劑(地塞米松、他莫昔芬)、抗癌性免疫類藥劑(干擾素α、β、γ等)等結合使用。
發(fā)明的最佳實施方式下面，參照實施例更詳細地說明本發(fā)明。本發(fā)明化合物不限于下述記載的化合物。
表1～3示出了實施例中使用的原料化合物，表4～19示出了典型的本發(fā)明化合物及其物理化學性質(zhì)。具有表17～19所示的化學結構式的本發(fā)明化合物，用和實施例或制造方法中記載的方法大致相同的方法、或用本領域中技術人員知道的若干改良方法，容易地制成。
表中省略記號的含義分別如下，rco原料化合物的化合物編號；Co本發(fā)明化合物的化合物編號；Str結構式；Sal鹽；Syn制造方法(數(shù)字表示后述實施例標號，表示用該實施例記載的方法或與其相同的方法制造該化合物。)；Dat物理化學性質(zhì)(FFAB-MS(M+H)+；FNFAB-MS(M-H)-；EEI-MS；M熔點[℃]；N1NMR(DMSO-d6，TMS內(nèi)標)的特征峰δ(ppm)；N2NMR(CDCl3，TMS內(nèi)標)的特征峰δppm；HPLCHPLC分析時的化合物的保留時間[分][HPLC條件；柱Wakosil-II 5C18AR，4.6×30毫米，檢測波長254納米，柱溫35℃，流速1.0毫升/分，洗脫液5mM TFA甲醇溶液/5mM TFA水溶液＝5/95＜0分＞-100/0＜30分線性梯度＞-100/0＜35分＞])；以及Ph苯基；Naph2-萘基；Ac乙酰；Bh芐基；3，5-CF3-Ph3，5-二(三氟)苯基；Boc叔丁氧基羰基；Bz苯甲酰；iPr異丙基。而且，取代基前面的數(shù)字表示取代位置，例如，4-OMe表示4位被甲氧基取代)。
表1
表2
表3
表4
表5
表6
表7 表8
表9
表10
表11 表12
表13
表14
表15


表16


表17 表18
表19 以下說明前述表1～3所示的原料化合物的制造方法。
化合物a1在2-氨基-5-溴吡啶的乙醇溶液中，加入3-氯乙酰丙酮，加熱回流17小時。濃縮反應液，用柱色譜法對所得殘渣提純，獲得化合物a1。
化合物b1將化合物a1、苯基硼酸、碳酸鈉和四(三苯膦)鈀于水和二甲氧基乙烷的混合溶劑中，加熱回流5小時。冷卻后，加入水和鹽水，用氯仿萃取。并在減壓下濃縮合并的有機層，用硅膠柱色譜法對殘渣提純，獲得化合物b1。
化合物c1在化合物a1中，加入N，N-二甲基甲酰胺縮二甲醇，于油浴溫度130℃下加熱攪拌2天。冷卻后，過濾掉不溶物，并在減壓下濃縮濾液。在所得的殘渣中加入肼一水合物和乙醇，加熱回流1.5小時。冷卻后，濾取析出的結晶，從而獲得化合物c1。
化合物d1在2-氨基-5-甲基吡啶的乙醇溶液中，加入3-氯乙酰丙酮，進行加熱回流。濃縮反應液，在所得的殘渣中加入N，N-二甲基甲酰胺縮二甲醇，進行加熱攪拌。冷卻后，過濾掉不溶物，并在減壓下濃縮濾液。在所得的殘渣中加入肼一水合物和乙醇，進行加熱回流。冷卻后，濾取析出的結晶，從而獲得化合物d1。
化合物e1在氧氯化磷和DMF的混合液中，滴入6-溴咪唑并[1，2-a]吡啶的DMF溶液。對反應混合物在油浴溫度125℃下攪拌0.5小時，在油浴溫度80℃下攪拌3小時，在油浴溫度100℃下攪拌3小時。再將反應物倒入粉碎的冰中，用氫氧化鈉中和。用乙酸乙酯和少量THF進行萃取操作，在減壓下濃縮有機層。用氯仿洗滌所得的固體，獲得化合物e1。
化合物f1氬氣氣氛下，于冰冷下在6-溴咪唑并[1，2-a]吡啶和氯化鋁(III)的混合物中滴入乙酰氯，于4℃攪拌4小時。用氯仿稀釋該反應溶液后，緩慢加水。使溶液呈堿性后，用硅藻土過濾，再用乙酸乙酯萃取濾液。在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法對所得的殘渣提純，從而獲得化合物f1。
化合物g1室溫下，在化合物f1的25％溴化氫/乙酸懸浮液中滴入溴，于室溫下攪拌12小時，濾取不溶物，從而獲得化合物g1。
化合物h1對化合物a1、乙醇、肼一水合物的混合物加熱回流2天。在減壓下濃縮反應液，用氯仿稀釋，然后用水洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機層，并在減壓下濃縮。用硅膠柱色譜法對所得的殘渣提純，從而獲得化合物h1。
化合物i1冰冷下，在N-異丙基-2-甲基-5-硝基苯胺的氯仿溶液中，滴入異硫氰酸苯甲酰酯。于室溫下將反應溶液攪拌20小時，然后在減壓下濃縮。將殘渣溶解于40％甲胺/甲醇中，在封管中于100℃攪拌24小時。濃縮反應液，用硅膠柱色譜法對殘渣提純，從而獲得化合物i1。
化合物j1冰冷下，在6-硝基-2，3-二氫-1H-吲哚的氯仿溶液中，滴入異硫氰酸苯甲酰酯。于室溫下將反應溶液攪拌2小時，然后濾取不溶物。在所得的固體中加入40％甲胺/甲醇，于室溫下攪拌3小時，于50℃攪拌19小時。將反應液冷卻到室溫，濾取不溶物，從而獲得化合物j1。
化合物k1冰冷下，在氯磺酸中加入4-甲基-苯甲酸甲酯，攪拌5小時。將反應液倒入冰水中，濾取沉淀物，從而獲得化合物k1。
化合物m1在濃硫酸中加入4-氰基-2-甲基苯甲酸甲酯，于-10℃下加入亞硝酸鈉的水溶液，攪拌30分鐘。冰冷卻下，在預先于氯化銅存在下用二氧化硫氣體飽和的乙酸中加入該反應液，于室溫下攪拌18小時。在減壓下將反應液濃縮到三分之一的程度，再加水，濾取生成的沉淀物，獲得化合物m1。
化合物n1在吡咯-3-羧酸的二氯甲烷溶液中，加入3-氯-6-肼基吡嗪和EDCI鹽酸鹽，攪拌20小時。在減壓下濃縮反應液，再用水洗滌，獲得化合物n1。
化合物p1于100℃對化合物n1的乙酸溶液加熱4小時。在減壓下濃縮反應液，再用水洗滌，獲得化合物p1。
化合物q1對化合物n3的乙酸溶液加熱回流2天。在減壓下濃縮反應液，將殘渣溶解于乙醇中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯，濾取生成的沉淀物。將其溶解于甲醇中，于-78℃吹入臭氧1小時，然后加入甲硫醚，于室溫下再攪拌10分鐘。濃縮反應液，用硅膠柱色譜法提純，獲得化合物q1。
化合物r1于100℃對化合物n5的乙酸溶液加熱18小時。在減壓下濃縮反應液，再用乙酸乙酯稀釋，加水，用乙酸乙酯萃取，然后用無水硫酸鈉干燥萃取液，并在減壓下濃縮。將殘渣從乙醇中再結晶，接著溶解于甲醇中，于-78℃吹入臭氧1小時，然后加入甲硫醚，于室溫下再攪拌1小時。濾取體系內(nèi)生成的沉淀物，獲得化合物r1。
化合物s1在6-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-3-甲醛(carboaldehyde)的DMF溶液中，依次加入二乙基膦酰乙酸甲酯和碳酸鉀，于90℃攪拌4小時。然后，將反應液倒入水中，濾取生成的沉淀物，獲得化合物s1。
化合物t1室溫下，在60％氫化鈉的二乙醚懸浮液中，緩慢滴入s1化合物和甲苯磺酰甲基胩的DMSO-二乙醚混合溶液。對反應液攪拌1小時后，進行減壓濃縮，依次用水和乙醚洗滌殘渣，獲得化合物t1。
化合物u1在化合物g2的甲醇懸浮液中，加入硼氫化鈉，于室溫下攪拌2小時。蒸餾掉溶劑，在殘渣中加入乙酸乙酯和水。分液后，濃縮有機層，用乙醚和氯仿使殘渣結晶。向其加入40％甲胺/甲醇溶液，于室溫下攪拌4小時。濃縮后，將殘渣溶解于氯仿和少量甲醇中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后濃縮有機層。用硅膠柱色譜法對所得的殘渣提純，獲得化合物u1。
化合物v1在6-溴-2-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-3-羧酸乙酯中，加入乙醇和肼一水合物，于室溫下攪拌19小時。濃縮反應液，然后加水，濾取生成的固體，從而獲得化合物v1。
化合物w1于-70℃，在叔丁醇鉀的THF懸浮液中，緩緩加入甲苯磺酰甲基胩，攪拌30分鐘后，于-60℃下將6-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-3-甲醛一次加入。在用干冰-乙腈冷卻的條件下，攪拌0.5小時，然后加入甲醇，加熱回流1小時。濃縮反應液后，用乙酸中和，再加水，用氯仿萃取。用無水硫酸鎂干燥有機層后，用硅膠柱色譜法提純，從而獲得化合物w1。
化合物x1在化合物v1的THF和氯仿懸浮液中，加入異硫氰酸甲酯。于70℃攪拌2小時后，濃縮反應液，在殘渣中加入2M的氫氧化鈉，加熱回流3小時。冷卻到室溫后，用12M的鹽酸中和，濾取生成的固體，從而獲得化合物x1。
化合物y1在化合物g1的甲醇懸浮液中，加入二硫代氨基甲酸銨，于室溫下攪拌15分鐘。在濾取的固體中加入乙酸，加熱回流2.5小時。冷卻后，用熱甲醇洗滌濾取的固體，然后過濾獲得y1。
表1～3中所示的原料化合物中，化合物a2～a6用和化合物a1相同的方法獲得，化合物c2～c8用和化合物c1相同的方法獲得，化合物g2～g4用和化合物g1相同的方法獲得，化合物j2用和化合物j1相同的方法獲得，化合物m2～m4用和化合物m1相同的方法獲得，化合物n2～n5用和化合物n1相同的方法獲得，化合物p2用和化合物p1相同的方法獲得，化合物y2～y3用和化合物y1相同的方法獲得，化合物b2用和化合物b1相同的方法獲得。
實施例1在化合物c4(0.10克)和吡啶(2.5毫升)的混合物中，加入苯磺酰氯(0.10克)，于100℃攪拌4小時。在減壓下濃縮反應液后，用乙酸乙酯萃取生成物，再用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌萃取液，用無水硫酸鎂干燥。在減壓下濃縮有機層，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝100∶0-99∶1)對所得的殘渣提純，從而獲得化合物1(0.11克)。
實施例2在2-甲基-5-硝基苯甲酸(500毫克)中加入亞硫酰氯(5毫升)。對反應混合物加熱回流1小時后，進行減壓濃縮，并進行真空干燥。在所得的固體中，加入THF(10毫升)、氯仿(10毫升)、TEA(2克)、化合物c1(440毫克)，于室溫下攪拌3小時。用氯仿進行稀釋，用水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。再用無水硫酸鎂干燥所得的有機層，進行減壓干燥。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝200∶1)對所得的固體提純，從而獲得化合物31(72毫克)。
實施例3室溫下，在化合物h1(1.2克)中，加入吡啶(10毫升)、5-硝基-2-甲基苯磺酰氯(1.1克)，攪拌5小時。在減壓下濃縮反應溶液，用氯仿稀釋殘渣，再用水洗滌。用無水硫酸鎂干燥所得的有機層，并進行減壓濃縮。用氯仿使所得的殘渣結晶，濾取粗結晶。用熱甲醇洗滌所得的粗結晶，從而獲得化合物32(1.47克)。
實施例4對(2-甲基-5-硝基苯基)硫脲(350毫克)、化合物g2(430毫克)、乙醇(10毫升)的混合物加熱回流2小時。冷卻后，加入乙醇(5毫升)，濾取不溶物。用甲醇使所得的固體重結晶，從而獲得化合物33(181毫克)。
實施例5對化合物f1(2.01克)、肼一水合物(5.0克)、乙醇(20毫升)的混合物加熱回流15小時。濃縮反應混合物，用乙酸乙酯稀釋后，用飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機層，并進行減壓干燥，從而獲得呈固體的1-(6-溴咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)亞乙基肼的粗精制物。室溫下，在所得的固體中依次加入吡啶(20毫升)、5-硝基-2-甲基苯磺酰氯(2.4克)，攪拌1小時。在減壓下濃縮反應液，用乙酸乙酯稀釋殘渣，再依次用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥所得的有機層，并進行減壓干燥。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝100∶1)提純，獲得1.06克固體。用熱乙醇洗滌其中的320毫克，獲得化合物34(205毫克)。
實施例6對i1(390毫克)、化合物g1(590毫克)、乙醇(5毫升)、甲醇(3毫升)的混合物加熱回流24小時。濃縮反應混合物，在所得的泡狀殘渣中加入乙醇。過濾掉不溶物，并將濾液濃縮。用乙醇和乙酸乙酯使殘渣結晶，用乙醇和乙醚使其再結晶。為使結晶性高的雜質(zhì)分解，將所得的粗結晶溶解于甲醇(50毫升)中，于室溫下加入硼氫化鈉(100毫克)。對反應液攪拌15分鐘，并進行減壓濃縮。用乙酸乙酯稀釋殘渣，再依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥后，進行減壓濃縮。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝100∶1)對殘渣提純，在收集的含有所需化合物的洗脫液中，加入4M鹽酸/乙酸乙酯(0.3毫升)，進行減壓濃縮。用乙醇-乙醚使所得的殘渣結晶，從而獲得化合物35(146毫克)。
實施例7在60％氫化鈉(50毫克)的DMF(10毫升)懸浮液中，依次加入化合物32(500毫克)和甲基碘(198毫克)。于室溫下攪拌10分鐘后，用乙酸乙酯稀釋反應溶液，依次用水和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機層，并進行減壓濃縮。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿)對殘渣提純，再用熱甲醇洗滌所得的固體，從而獲得化合物36(230毫克)。
實施例8在化合物c1(698毫克)的DMF(10毫升)溶液中，加入3-溴甲基芐腈(543毫克)和碳酸鉀(383毫克)，于室溫下攪拌1.5小時，再加入3-溴甲基芐腈(270毫克)和碳酸鉀(200毫克)，于室溫下攪拌1小時。蒸餾該反應溶液，用乙酸乙酯稀釋，然后加入水，用乙酸乙酯萃取，再用飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥后，在減壓下蒸餾掉溶劑，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝99∶1)對所得的殘渣提純，通過再結晶(用乙醇)獲得化合物37(439毫克)。
實施例9在化合物c1(698毫克)的DMF(20毫升)溶液中，加入3-硝基苯基乙酸(375毫克)、1-羥基苯并三唑(280毫克)和EDCI鹽酸鹽(397毫克)，于室溫下攪拌16小時。在該反應溶液中加水，濾取粗結晶，用水和二乙醚洗滌該結晶。使所得的粗結晶再結晶(用氯仿)，獲得0.2水合物形式的化合物38(93毫克)。
實施例10在60％氫化鈉(165毫克)的DMF(30毫升)懸浮液中，加入化合物41(1.5克)，于室溫下攪拌1小時。在反應液中加入甲基碘(540毫克)，于室溫下攪拌2小時。在反應液中加入水和乙酸乙酯，用飽和鹽水洗滌分離的有機層，再用無水硫酸鎂干燥。蒸餾掉溶劑后，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝50∶1)對殘渣提純，在收集的含有所需化合物的溶液中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(0.9毫升)，進行減壓濃縮。用甲醇使所得的固體再結晶，獲得化合物46(982毫克)。
實施例11在化合物u1(1.15克)的吡啶(10毫升)溶液中，加入2-甲基-5-硝基苯磺酰氯(950毫克)，于室溫下攪拌一晚，濃縮反應液。用乙酸乙酯稀釋，再用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌。用無水硫酸鈉干燥有機層，并進行濃縮。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝100∶1)對殘渣提純。獲得450毫克的泡狀物質(zhì)，用氯仿-乙醚使泡狀物質(zhì)中的250毫克結晶，從而獲得化合物47(146毫克)。
實施例12在化合物w1(450毫克)的甲醇(20毫升)和THF(20毫升)溶液中，加入雷內(nèi)鎳(raney nickel)的乙醇(20毫升)懸浮液和濃氨水(5毫升)，在常壓的氫氣氣氛下攪拌9小時。過濾掉不溶物后，進行濃縮。將所得的殘渣溶解于吡啶(20毫升)中，加入2-甲基-5-硝基苯磺酰氯(400毫克)，于室溫下攪拌一晚，濃縮反應液。加入氯仿和飽和碳酸氫鈉水溶液，進行分液。用無水硫酸鈉干燥有機層，并進行濃縮。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝50∶1)對殘渣提純。將所得的殘渣溶解于THF和甲醇中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(0.2毫升)，進行減壓濃縮。用甲醇使殘渣再結晶，獲得化合物48(156毫克)。
實施例13在化合物41(200毫克)的DMF(2毫升)溶液中，加入碳酸銫(400毫克)和烯丙基溴(110毫克)，攪拌3小時。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝20∶1)對反應液提純，在收集的含有所需化合物的溶液中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，并進行減壓干燥。用乙醇洗滌所得的殘渣，獲得化合物49(150毫克)。
實施例14在化合物e1(1.0克)的乙醇(20毫升)溶液中，加入肼一水合物(3.5毫升)，加熱回流1小時。在減壓下濃縮反應液，將所得的殘渣溶解于吡啶(15毫升)中，加入3-氯磺酰-4-甲基苯甲酸甲酯(1.2克)，攪拌3小時。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝20∶1)對反應液提純，然后制成DMF(2.0毫升)溶液，再加入碳酸鉀(140毫克)和甲基碘(100毫克)，攪拌18小時。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝20∶1)對反應液提純，在收集的含有所需化合物的溶液中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行減壓濃縮。用乙醇使所得的殘渣再結晶，獲得化合物50(98毫克)。
實施例15在化合物50(1.1克)中，加入甲醇(30毫升)和10M氫氧化鈉水溶液(4.0毫升)，攪拌18小時。濾取體系內(nèi)生成的不溶物，用乙醇洗滌，獲得化合物51(260毫克)。
實施例16在化合物51(700毫克)中，加入甲醇(10毫升)和4M氯化氫/乙酸乙酯(5.0毫升)，濾取生成的沉淀物。在其中加入THF(5.0毫升)和CDI(330毫克)，于70℃攪拌1小時，然后于室溫下加入濃氨水(1.0毫升)。濃縮反應液后，用水洗滌，接著將其溶解于甲醇(10毫升)中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行減壓濃縮。用乙醇洗滌所得的殘渣，獲得化合物52(190毫克)。
實施例17在化合物85(670毫克)的DMF(3.0溶液)溶液中，加入碳酸鉀(410毫克)和甲基碘(230毫克)，攪拌2小時。將反應液倒入水中，濾取生成的沉淀物，然后將其溶解于甲醇(10毫升)中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行減壓濃縮。用乙醇洗滌所得的殘渣，獲得化合物53(64毫克)。
實施例18在化合物52的游離體(free form)(300毫克)中，加入氧氯化磷(5.0毫升)，于60℃攪拌2小時。濃縮反應液后，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行減壓濃縮。用乙醇使所得的殘渣再結晶，獲得化合物54(118毫克)。
實施例19在化合物83(300毫克)的THF(10毫升)溶液中，加入三甲基甲硅烷氧基鉀(130毫克)，攪拌12小時。在反應液中加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行減壓濃縮，依次用甲醇和水洗滌所得的殘渣，獲得化合物55(250毫克)。
實施例20在6-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-3-甲醛(400毫克)的乙醇(5.0毫升)溶液中，加入甲肼(80毫克)，于60℃加熱2小時。在減壓下濃縮反應液，將所得的殘渣溶解于吡啶(5.0毫升)中，加入2-甲基-5-氨磺酰苯磺酰氯(590毫克)，攪拌2小時。在減壓下濃縮反應液，在所得的殘渣中加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，然后進行減壓濃縮，用乙醇洗滌，獲得化合物56(740毫克)。
實施例21在2-氨基-5-氟吡啶(500毫克)的乙醇(5.0毫升)溶液中，加入2-溴丙二醛(1.4克)，加熱回流2小時。在減壓下濃縮反應液，用乙酸乙酯洗滌所得的殘渣，然后加入乙醇(10毫升)和甲肼(140毫克)，于60℃加熱2小時。在減壓下濃縮反應液，將所得的殘渣溶解于吡啶(5.0毫升)中，加入2-甲基-5-硝基苯磺酰氯(800毫克)，攪拌12小時。在減壓下濃縮反應液，在所得的殘渣中加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，然后進行減壓濃縮，用乙醇洗滌，獲得化合物57(150毫克)。
實施例22在化合物100(220毫克)中，加入甲醇(10毫升)和4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，濾取生成的沉淀物。在其中加入THF(5.0毫升)和CDI(330毫克)，攪拌3小時，然后于室溫下加入2-氨基乙基氨基甲酸叔丁酯(160毫克)。濃縮反應液，然后將其溶解于甲醇(2.0毫升)中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(2.0毫升)，攪拌0.5小時。濾取體系內(nèi)生成的沉淀物，依次用甲醇和乙醚洗滌，獲得化合物58(230毫克)。
實施例23在化合物108游離體(150毫克)的THF(5.0毫升)溶液中，加入濃％氨水(1.0毫升)，于60℃攪拌7小時，在減壓下濃縮反應液。用水洗滌所得的殘渣，然后將其溶解于甲醇(2.0毫升)中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行減壓濃縮，用甲醇洗滌殘渣，獲得化合物59(69毫克)。
實施例24在化合物108(130毫克)的THF(5.0毫升)溶液中，加入2，2，2-三氟乙醇(50毫克)和0％氫化鈉(20毫克)，攪拌2小時，然后在減壓下濃縮反應液。用水洗滌所得的殘渣，接著將其溶解于甲醇(2.0毫升)中，加入氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行減壓濃縮，用甲醇洗滌殘渣，獲得化合物60(61毫克)。
實施例25在60％氫化鈉(110毫克)的DMF(20毫升)懸浮液中，加入化合物x1(808毫克)和2-氟-5-硝基甲苯(430毫克)。于70℃攪拌6小時后，加入2-氟-5-硝基甲苯(400毫克)，于90℃攪拌18小時。濃縮反應液，加入飽和碳酸氫鈉水溶液和乙酸乙酯。分離有機層，用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥有機層，并進行濃縮，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿)對殘渣提純。將所得殘渣730毫克中的215毫克溶解于氯仿和甲醇中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(0.125毫升)，進行減壓濃縮。用乙醇使殘渣結晶，用甲醇-乙醇洗滌，從而獲得化合物61(143毫克)。
實施例26在化合物117游離體(561毫克)中，加入乙醇(20毫升)、THF(10毫升)、甲醇(10毫升)和1M氫氧化鈉水溶液(2.0毫升)，加熱回流30分鐘。用1M鹽酸(2.0毫升)中和，并進行濃縮。濾取生成的結晶后，濃縮濾液，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝10∶1)對殘渣提純。將其與預先過濾出的結晶混合，加入THF(10毫升)和1M硼烷·THF溶液(2毫升)，加熱回流1小時。冷卻后，冰冷卻下用甲醇和水使反應停止，濃縮反應液。在所得的殘渣中加入甲醇(50毫升)和1M鹽酸(20毫升)，于80℃加熱。冷卻后，蒸餾掉溶劑，將殘渣溶解于甲醇和氯仿中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(75微升)，進行濃縮。用乙醇使所得的殘渣結晶，從而獲得化合物62(100毫克)。
實施例27在2-甲基-5-硝基苯胺(2克)的6M鹽酸懸浮液中滴入亞硝酸鈉(930毫克)的水溶液(5毫升)，同時冷卻至0℃以下。在相同溫度下攪拌30分鐘后，加入四氟硼酸鈉(2克)的水溶液(10毫升)，在冰冷下攪拌30分鐘，然后濾取生成的重氮鹽。在60％氫化鈉(192毫克)的DMSO(30毫升)懸浮液中，加入化合物x1(1.5克)和預先濾取的重氮鹽。攪拌15分鐘后，由于反應混合物的粘性增加，加入DMSO(20毫升)。攪拌30分鐘后，加入乙酸乙酯和水，再加入飽和碳酸氫鈉水溶液。濾取生成的結晶，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿→氯仿∶甲醇＝10∶1)提純。將所得的固體溶解于氯仿和甲醇中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(0.25毫升)，進行濃縮。用甲醇使所得的固體再結晶，獲得化合物63(180毫克)。
實施例28在化合物118游離體(200毫克)的甲醇(20毫升)懸浮液中，加入臭氧(商品名aldrich社制造)(300毫克)。于室溫下攪拌18小時后，加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鎂干燥有機層，并進行濃縮，用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿→氯仿∶甲醇＝100∶1)提純。在收集的含有所需化合物的溶液中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(0.25毫升)，進行濃縮。用熱甲醇洗滌所得的固體，獲得化合物64(87毫克)實施例29在化合物127游離體(900毫克)的乙酸(20毫升)溶液中，加入30％過氧化氫(20毫升)，于70℃加熱攪拌11小時。冷卻后，用氯仿稀釋，再用水、5％硫代硫酸鈉水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥。在有機層中加入硅膠(9毫升)，進行濃縮，接著用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝100∶1)提純。在收集的含有所需化合物的溶液中加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行濃縮。用甲醇-乙醚洗滌所得的固體，獲得化合物65(350毫克)。
實施例30在化合物Y2(400毫克)的DMF(10毫升)溶液中，加入碳酸鉀(450毫克)和2-甲氧基-5-硝基芐基溴(480毫克)，于室溫下攪拌5.5小時。用氯仿稀釋反應液，再用水洗滌，用無水硫酸鎂干燥。濃縮所得的有機層后，用乙醚-己烷使之結晶，從而獲得化合物66(558毫克)。
實施例31在化合物r1(1.8克)的甲醇(30毫升)溶液中，加入甲肼(460毫克)，攪拌6小時。在減壓下濃縮反應液，用水洗滌所得的殘渣，然后將其溶解于吡啶(5.0毫升)中，加入2-甲基-5-硝基苯磺酰氯(700毫克)，攪拌18小時。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝20∶1)對反應液提純，在收集的含有所需化合物的溶液中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(3.0毫升)，濾取生成的沉淀物，獲得化合物67(150毫克)。
實施例32在三氟乙酸(1.5毫升)中，加入化合物p2(250毫克)，攪拌2小時。在減壓下濃縮反應液，用乙醇共沸。在其中加入THF(3.0毫升)和60％氫化鈉(80毫克)，攪拌15分鐘，然后加入2-甲基-5-硝基苯磺酰氯(240毫克)，攪拌4小時。在減壓下濃縮反應液，用水洗滌，再將其溶解于甲醇(2.0毫升)中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行減壓濃縮，用甲醇洗滌殘渣，獲得化合物68(140毫克)。
實施例33在化合物t1(800毫克)的水-甲醇(5.0-5.0毫升)混合溶液中，加入氫氧化鉀(1.6克)，于90℃攪拌3小時。在反應液中加入1M鹽酸，進行中和，然后進行減壓濃縮。在所得的殘渣中加入乙醇，過濾掉不溶物，接著對濾液進行3次減壓濃縮操作。將所得的殘渣溶解于乙醇胺(5.0毫升)中，于200℃攪拌1小時，然后將其倒入水中，濾取生成的沉淀物。再于它的THF(5.0毫升)溶液中，依次加入60％氫化鈉(60毫克)、2-甲基-5-硝基苯磺酰氯(350毫克)，攪拌4小時。用硅膠柱色譜法(洗脫液；氯仿∶甲醇＝20∶1)對反應液提純，在收集的含有所需化合物的溶液中，加入4M氯化氫/乙酸乙酯(1.0毫升)，進行減壓濃縮。用乙醇洗滌所得的殘渣，獲得化合物69(170毫克)。
實施例34在化合物n4(1.45克)中，加入乙酸(15毫升)，于75℃攪拌一晚。冷卻后，濃縮反應液，用乙醇使之結晶，從而獲得化合物70(1.17克)。
權利要求
1.咪唑并吡啶衍生物或其鹽，它由下示通式(I)表示 式中的記號表示以下含義R1-H、-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-環(huán)烷基、-環(huán)烯基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-ORa、-SRa、-SO2Ra、-SORa、-CO2Ra、-CO-Ra、-芳基、-低級亞烷基-芳基、-O-低級亞烷基-芳基、-CONRaRb、-CO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-SO2NRaRb、-SO2-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-SO3H、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-NRaRb、-CONRa-低級亞烷基-ORb、-CONRa-低級亞烷基-NRbRc、-CONRa-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-O-低級亞烷基-ORa、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-ORa、-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-O-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-O-低級亞烷基-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-O-低級亞烷基-NRc-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-OCO-NRaRb、-OCO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-NRa-SO2Rb、-NRc-低級亞烷基-NRaRb、-NRc-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-N(低級亞烷基-NRaRb)2、-N(低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán)))2、-CONRa-ORb、-NRa-CORb、-NRa-CO-NRbRc、-NRa-CO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、或-OCORa，Ra、Rb和Rc可相同也可不同，為-H、-低級烷基或-芳基TN或CR1a，UN或CR3，n＝1～3，Y1…Y2…Y3Y1和Y3可通過2～3個原子連接并和鄰接的Y2相連成B環(huán)，此處B環(huán)表示含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5-6元單環(huán)雜芳環(huán)、含氮飽和雜環(huán)或芳環(huán)，B環(huán)還可被1～2個R4基所取代，XS、SO、SO2、NR7、CO或亞甲基A鍵、低級亞烷基、低級亞烯基或低級亞炔基，R2-可帶有1～5個選自D組的取代基的低級烷基、-可帶有1～5個選自D組的取代基的低級烯基、-可帶有1～5個選自D組的取代基的低級炔基、-可帶有1～5個選自G組的取代基的環(huán)烷基、-可帶有1～5個選自G組的取代基的環(huán)烯基、-N＝O、-可帶有1～5個選自G組的取代基的芳基或可帶有1～5個選自G組的取代基的雜芳基，D組-鹵素、NO2、-CN、-OH、-O-低級烷基、-O-鹵代低級烷基、-SH、-S-低級烷基、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CO-低級烷基、-CONH2、-NH2、-NH-低級烷基、-N(低級烷基)2、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-芳基、-雜芳基、-環(huán)烷基和-環(huán)烯基，G組-可被1～5個選自D組的取代基取代的低級烷基、-可被1～5個選自D組的取代基取代的低級烯基、-可被1～5個選自D組的取代基取代的低級炔基、-可被1～5個選自E組的取代基取代的環(huán)烷基、-可被1～5個選自E組的取代基取代的環(huán)烯基、鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-O-鹵代低級烷基、-OH、-O-低級烷基、-SH、-S-低級烷基、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CHO、-CO-低級烷基、-SO3H、-Ar1、-O-Ar1、-S-Ar1、-CO-Ar1、-SO2-Ar1、-低級亞烷基-Ar1、-O-低級亞烷基-Ar1、-CONH2、-CONH-低級烷基、-CON(低級烷基)2、-SO2NH2、-SO2NH-低級烷基、-SO2N(低級烷基)2、-CO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-SO2-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-NH2、-NH-低級烷基、-N(低級烷基)2、-NHCO-低級烷基、-NHCO-Ar1、-NHSO2-低級烷基、-NHSO2-Ar1、-疊氮基和-N＝N-Ar1。E組-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基和前述D組的取代基，Ar1表示可被1～5個選自E組的取代基取代的芳基或雜芳基，R1a和R3可相同也可不同，為R1所定義的基團，R4R1所定義的基團或氧代基(＝O)，R7-H、-可帶有1～5個選自D組的取代基的低級烷基、-可帶有1～5個選自D組的取代基的低級烯基、-可帶有1～5個選自D組的取代基的低級炔基；而且，當X為NR7，且R2為鄰位有取代基的芳基時，R7可與芳基鄰位上的取代基相連成C2-3低級亞烷基鏈，并與R2的芳環(huán)形成稠合的5～7元含氮雜環(huán)，但是，(1)當Y1…Y2…Y3基通過N原子與X結合時，或Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成1，3，5-三嗪、1，3，4-噁二唑環(huán)、噻唑或苯環(huán)時，X表示除NR7以外的基團；(2)當Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成嘧啶環(huán)時，X表示SO、SO2、CO或亞甲基。(3)8-氯-3-[4-氯-2-氟-5-(甲硫基)苯基]-6-(三氟甲基)-1，2，4-三唑并[4，3-a]吡啶除外。
2.如權利要求1所述的咪唑并吡啶衍生物或其鹽，其特征在于，其中R1是-H、-低級烷基、-低級烯基、-低級炔基、-環(huán)烷基、-環(huán)烯基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-OH、-O-低級烷基、-O-芳基、-SH、-S-低級烷基、-SO2-低級烷基、-SO-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CO-低級烷基、-芳基、-CO-芳基、-低級亞烷基-芳基、-O-低級亞烷基-芳基、-CONH2、-SO2NH2、-SO3H、-含氮飽和雜環(huán)、-NH2、-NH-低級烷基或-N(低級烷基)2；T為CR1a；U為CR3；Y1…Y2…Y3中，Y1和Y3可通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成B環(huán)，此處的B環(huán)是含有1～4個選自N、S、O的雜原子的5～6元單環(huán)雜芳環(huán)或芳環(huán)，B環(huán)還可被1～2個R4基所取代；R2為-鹵代低級烷基、-N＝O、-可帶有1～5個選自G組的取代基的芳基或可帶有1～5個選自G組的取代基的雜芳基；R1a、R3和R4可相同也可不同，為R1所定義的基團；R7表示-H或-低級烷基；而且，當X為NR7，且R2為鄰位有取代基的芳基時，R7可與芳基鄰位上的取代基相連成C2-3低級亞烷基鏈，并與R2的芳環(huán)形成稠合的5～7元含氮雜環(huán)。
3.如權利要求1所述的咪唑并吡啶衍生物或其鹽，其特征在于，其中n為1；R1為-低級烷基、-鹵素、-CN、-NO2、-鹵代低級烷基、-ORa、-O-低級亞烷基-芳基、-CO2Ra、-CONRa-低級亞烷基-ORb、-CONRaRb、-CO-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-CONRa-低級亞烷基-NRbRc、-CONRa-低級亞烷基-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))或-芳基。
4.如權利要求1所述的咪唑并吡啶衍生物或其鹽，其特征在于，其中A為鍵；并且R2為可帶有1～5個選自G組的取代基的芳基或可帶有1～5個選自G組的取代基的雜芳基。
5.如權利要求4所述的咪唑并吡啶衍生物或其鹽，其特征在于，其中R2為可被1個以上選自以下的取代基取代的苯基-(可被OH取代的低級烷基)、-低級烯基、-鹵素、-NO2、-CN、-鹵代低級烷基、-O-鹵代低級烷基、-OH、-O-低級烷基、-CO-低級烷基、-SO2-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CONH2、-SO2NH2、-CO-芳基、-SO2-芳基、-NH2、-NH-低級烷基、-N(低級烷基)2、-(可被低級烷基取代的含氮飽和雜環(huán))、-NHCO-低級烷基、-可被1～5個選自E組的取代基取代的芳基和可被1～5個選自E組的取代基取代的雜芳基。
6.如權利要求1所述的咪唑并吡啶衍生物或其鹽，其特征在于X為SO2。
7.如權利要求1所述的咪唑并吡啶衍生物或其鹽，其特征在于，其中Y1…Y2…Y3基為，Y1和Y3通過2～3個原子連接并與相鄰的Y2相連形成5～6元單環(huán)雜芳環(huán)，該5～6元單環(huán)雜芳環(huán)可被1～2個R4基取代。
8.如權利要求7所述的咪唑并吡啶衍生物或其鹽，其特征在于，其中Y1…Y2…Y3基中的Y1和Y3通過2個原子連接并與相鄰的Y2相連形成5元單環(huán)雜芳環(huán)，該5元單環(huán)雜芳環(huán)可被選自以下的1～2個R4基取代-低級烷基、-COOH、-COO-低級烷基、-CO-低級烷基和-SO3H。
9.如權利要求1所述的咪唑并吡啶衍生物或其鹽，其特征在于它選自3-(6-溴-2-甲基咪唑并[1，2-a](3-吡啶基)-1H-(1-吡唑基)2-甲基-5-硝基苯基砜、3-(6-溴吡唑并[1，2-a](3-吡啶基)-1H-(1-吡唑基)2-甲基-5-硝基苯基砜、6-氯-3-[2-(2-甲基-5-硝基苯磺酰)(4-噻唑基]咪唑并[1，2-a]吡啶。
10.醫(yī)藥組合物，它含有權利要求1～9中任何一項所述的咪唑并吡啶衍生物或其鹽和制藥學上允許的載體。
11.如權利要求10所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于它是磷脂酰肌醇3-激酶抑制劑。
12.如權利要求10所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于它是抗癌劑。
全文摘要
提供了作為藥物、特別是抗癌劑具有磷脂酰肌醇3－激酶(PI3K)抑制作用的有效新穎化合物。提供了具有良好的PI3K抑制作用和癌細胞增殖抑制作用的新穎的3－(咪唑并[1，2－a](3－吡啶基)衍生物或其鹽，它作為PI3K抑制劑和抗癌劑是有效的。
文檔編號A61P35/00GK1600783SQ20041004745
公開日2005年3月30日 申請日期2001年4月26日 優(yōu)先權日2000年4月27日
發(fā)明者早川昌彥, 貝澤弘行, 川口賢一, 松田光陽, 石川典子, 小泉智信, 山野真由美, 岡田稔, 太田光昭 申請人:山之內(nèi)制藥株式會社, 路德維格癌癥研究所, 癌癥研究技術有限公司