專利名稱：2－取代的4－雜芳基－嘧啶的治療用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及2-取代的4-雜芳基-嘧啶的新的治療用途。
背景技術(shù)：
一些具有抗哮喘性質(zhì)的4，5，6-取代的-N-(取代的-苯基)-2-嘧啶胺公開在EP-A-233,46l中。一些具有抗增生性質(zhì)以及抑制蛋白激酶C、表皮生長(zhǎng)因子受體-相關(guān)的酪氨酸蛋白激酶(EGF-R-TPK)以及CDKl/細(xì)胞周期蛋白B活性的的4-雜芳基-N-(3-取代的-苯基)-2-吡啶胺已經(jīng)公開在WO95/09847中，其中例示的雜芳基為吡啶基和吲哚基。
J.Med.Chem.(1993)Vol.36，第2716-2725頁(yè)，Paul，R.等公開了另一類具有消炎活性的苯基氨基-嘧啶化合物。這些化合物包括在嘧啶環(huán)4-位的單-取代的2-噻吩基以及在該位置的二甲基-3-呋喃基。
我們先前公開了一些抗增生的噻唑并-和吡咯并-苯胺基嘧啶(WO01/072745，Cyclacel Limited；WO 02/079193，Cyclacel Limited)。令人吃驚地發(fā)現(xiàn)那里公開的化合物對(duì)蛋白激酶C不具有抑制活性。
本發(fā)明涉及以前沒有公開的2-取代的4-雜芳基-嘧啶類化合物的治療用途。
發(fā)明公開本發(fā)明第一方面涉及式I化合物或其可藥用鹽在制備用于治療糖尿病的藥物中的用途，
其中(A)X和Y之一為S，并且另一個(gè)是N；或X和Y之一為NH或N-R5，并且另一個(gè)是C-R6；“a”為單鍵；“b”、“c”、“d”、“e”和“f”為單或雙鍵以形成雜芳基環(huán)；R1為R7，條件是R1不是H或Me；或(B)X和Y之一為S，并且另一個(gè)是NH或N-R5；“a”和“d”各為雙鍵；“b”、“c”、“e”和“f”各為單鍵；R1為氧代基團(tuán)；以及R2、R3、R4、R5和R6各自獨(dú)立地是H或R7；R7為基團(tuán)(CH2)n-R8，其中n為0、1、2、3或4，并且其中R8選自烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)烷基、F、Cl、Br、I、CF3、NO2、CN、OH、O-烷基、O-芳基、O-雜芳基、O-雜環(huán)烷基、CO-烷基、CO-芳基、CO-雜芳基、CO-雜環(huán)烷基、COO-烷基、NH2、NH-烷基、NH-芳基、N(烷基)2、NH-雜芳基、NH-雜環(huán)烷基、COOH、CONH2、CONH-烷基、CON(烷基)2、CONH-芳基、CONH-雜芳基、CONH-雜環(huán)烷基、SO3H、SO2-烷基、SO2-芳基、SO2-雜芳基、SO2-雜環(huán)烷基、SO2NH2、SO2NH-烷基、SO2N(烷基)2、SO2NH-芳基、SO2NH-雜芳基或SO2NH-雜環(huán)烷基，其中所述的烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)烷基任選被一或多個(gè)選自鹵素、NO2、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代。
本發(fā)明第二方面涉及如上定義的式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療CNS疾病的藥物中的用途。
本發(fā)明第三方面涉及如上定義的式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療心血管疾病的藥物中的用途。
本發(fā)明第四方面涉及如上定義的式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療中風(fēng)的藥物中的用途。
本發(fā)明第五方面涉及如上定義的式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療禿發(fā)癥的藥物中的用途。
本發(fā)明第六方面涉及一種治療GSK3-依賴性疾病的方法，所述的方法包括以足以抑制GSK3的量對(duì)需要的對(duì)象施用如上定義的式I化合物，或其可藥用鹽。
發(fā)明詳述這里使用的術(shù)語(yǔ)“烷基”包括飽和的直鏈和支鏈烷基，其可被取代(單-或多-)或不被取代。優(yōu)選地，烷基為C1-20烷基，更優(yōu)選地C1-15，更優(yōu)選地C1-12烷基，更優(yōu)選地C1-6烷基，更優(yōu)選地C1-3烷基。特別優(yōu)選的烷基包括，例如，甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基和己基。
這里使用的術(shù)語(yǔ)“芳基”指取代的(單-或多-)或未取代的單芳香或多芳香體系，其中所述的多芳香體系可為稠合的或未被稠合的。優(yōu)選地，術(shù)語(yǔ)“芳基”包括具有6～10個(gè)碳原子的基團(tuán)，例如苯基、萘基等。更優(yōu)選地，芳基包含6個(gè)碳原子，例如，苯基。術(shù)語(yǔ)“芳基”與術(shù)語(yǔ)“芳香”同義。
這里使用的術(shù)語(yǔ)“雜芳基”指5-和6-員芳香環(huán)，包含至多4個(gè)各自獨(dú)立地選自N、O、和S的雜原子。優(yōu)選的雜芳基包括吡咯、吡唑、嘧啶、吡嗪、吡啶、喹啉、噻唑、噻吩以及呋喃。
這里使用的術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)烷基”指飽和的或不飽和的5-和6-員環(huán)體系，包含至多4個(gè)各自獨(dú)立地選自N、O和S的雜原子。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式Ia化合物，或其可藥用鹽，在制備用于治療糖尿病的藥物中的用途， 其中X和Y之一為N，并且另一個(gè)是S；或X和Y之一為NH或N-R5并且另一個(gè)是C-R6；R1為R7，條件是R1不是H或Me；R2、R3、R4、R5和R6各自獨(dú)立地是H或R7；R7為基團(tuán)(CH2)n-R8，其中n為0、1、2、3或4，并且其中R8選自烷基，芳基、雜芳基、雜環(huán)烷基、F、Cl、Br、I、CF3、NO2、CN、OH、O-烷基、O-芳基、O-雜芳基、O-雜環(huán)烷基、CO-烷基、CO-芳基、CO-雜芳基、CO-雜環(huán)烷基、COO-烷基、NH2、NH-烷基、NH-芳基、N(烷基)2、NH-雜芳基、NH-雜環(huán)烷基、COOH、CONH2、CONH-烷基、CON(烷基)2、CONH-芳基、CONH-雜芳基、CONH-雜環(huán)烷基、SO3H、SO2-烷基、SO2-芳基、SO2-雜芳基、SO2-雜環(huán)烷基、SO2NH2、SO2NH-烷基、SO2N(烷基)2、SO2NH-芳基、SO2NH-雜芳基或SO2NH-雜環(huán)烷基，其中所述的烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)烷基任選被一或多個(gè)選自鹵素、NO2、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物包括下面顯示的式Id、Ie、If、Ig、Ih和Ii化合物。
對(duì)于式Ia化合物，在第一優(yōu)選的實(shí)施方案中，X為N且Y為S；或X為NH或N-R5且Y為C-R6。
優(yōu)選地，對(duì)于所述的第一優(yōu)選的實(shí)施方案R1選自CN、CONH2、NO2、鹵素、CH2N(烷基)2、O-烷基、NH2和NH-烷基；R2選自NO2、H、OH、鹵素和烷基；R3選自H、鹵素、OH、CF3、烷基、N(烷基)2、O-烷基、雜環(huán)烷基和COO-烷基；R4為烷基；R5為H或烷基；以及R6為烷基。
甚至更優(yōu)選地，對(duì)于所述的第一優(yōu)選的實(shí)施方案R1選自CN、CONH2、NO2、Br、Cl、CH2NMe2、OMe、NH2和NHMe；R2選自NO2、H、OH、I、Me、F和Cl；R3選自H、F、OH、CF3、I、Me、Cl、NMe2、OMe、嗎啉代和COOEt；R4為Me；R5為H或Me；以及R6為Me。
對(duì)于式Ia化合物，在第二優(yōu)選的實(shí)施方案中，X為NH或N-R5且Y為C-R6。
優(yōu)選地，在所述的第二優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1選自CN、CONH2、NO2、鹵素和CH2N(烷基)2；R2選自NO2、H、OH、鹵素和烷基；R3選自H、鹵素、OH、CF3、烷基和N(烷基)2；R4為烷基；R5為H或烷基；以及R6為烷基。
甚至更優(yōu)選地，在所述的第二優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1選自CN、CONH2、NO2、Br、Cl和CH2NMe2；R2選自NO2、H、OH、I、Me和F；R3選自H、F、OH、CF3、I、Me、Cl和NMe2；R4為Me；R5為H或Me；以及R6為Me。
更優(yōu)選地，在所述的第二優(yōu)選的實(shí)施方案中，
R1為CN或CONH2；R2為NO2或H；以及R3為F或Me。
在本發(fā)明的第三優(yōu)選實(shí)施方案中，X為N且Y為S。
對(duì)于所述的第三優(yōu)選實(shí)施方案，優(yōu)選地，R1選自鹵素、NH2和NH-烷基；R2選自NO2、H、OH、鹵素和烷基；R3選自H、鹵素、OH、烷基、N(烷基)2、O-烷基、雜環(huán)烷基和COO-烷基；R4為烷基。
更優(yōu)選地，在所述的第三優(yōu)選實(shí)施方案中，R1選自Cl、NH2和NHMe；R2選自NO2、H、OH、Me和Cl；以及R3選自H、F、OH、Me、Cl、NMe2、OMe、嗎啉代和COOEt；R4為Me。
更優(yōu)選地，在所述的第三優(yōu)選實(shí)施方案中，R2為H或NO2；以及R3為Cl或F。
另一替代的本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施方案涉及式Ib化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療糖尿病的藥物中的用途， 其中X和Y之一為S，并且另一個(gè)是NH或N-R5；以及R2-5如上述對(duì)式I中相應(yīng)基團(tuán)的定義；在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，Y為S且X為NH或NR5。
優(yōu)選地，對(duì)式Ib化合物R2選自H、OH、NO2和烷基；
R3選自H、鹵素、烷氧基、烷基、N-(烷基)2和OH；以及R4和R5各自獨(dú)立地是烷基。
更優(yōu)選地，對(duì)于式Ib化合物R2選自H、OH、NO2和Me；R3選自H、Cl、F、OMe、Me、NMe2和OH；以及R4和R5都為Me。
在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，式I的化合物選自下面列出的化合物[1]-[26]和[28]-[39]。
本發(fā)明另一方面涉及一或多種下述化合物在制備用于治療GSK-依賴性疾病的藥物中的用途3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[1]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[2]；4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[3]；3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[4]；4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[5]；4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[6]；3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[7]；4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[8]；4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[9]；4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[10]；4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[11]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[12]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺[13]；[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[14]；N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[15]；[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[16]；[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[17]；[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[18]；-(4-氟-苯基)-胺[19]；4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[20]；N4-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N1，N1-二甲基-2-硝基-苯-1，4-二胺[21]；4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[22]；5-[2-(4-氯-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[23]；5-[2-(4-甲氧基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[24]；5-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[25]；5-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[26]；(4-氟-苯基)-[4-(2-甲基-4-苯基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[27]；5-[2-(4-氟-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[28]；2-氯-4-[4-(4-甲基-2-甲基氨基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲酸乙基酯[29]；[4-(2-氨基-4-甲基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[30]；3，4-二甲基-5-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[32]；5-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[33]；5-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[34]；[4-(2-氯-4-甲基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[35]；3，4-二甲基-5-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[36]；5-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[37]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[38]；以及4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[39]。
更優(yōu)選地，所述的式I化合物選自下述化合物3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[1]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[2]；
4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[6]；3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[7]；4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[11]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[12]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺[13]；4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[22]；(4-氟-苯基)-[4-(2-甲基-4-苯基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[27]；3，4-二甲基-5-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[32]；5-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[34]；3，4-二甲基-5-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[36]；5-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[37]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[38]；以及4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[39]。
甚至更優(yōu)選地，所述的式I化合物選自下述化合物3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[7]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺[13]；(4-氟-苯基)-[4-(2-甲基-4-苯基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[27]；3，4-二甲基-5-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[32]；3，4-二甲基-5-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[36]；5-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[37]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[38]；以及4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[39]。
最優(yōu)選地，所述的式I化合物選自下述化合物4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[20]；以及N4-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N1，N1-二甲基-2-硝基-苯-1，4-二胺[21]。
在一個(gè)特別優(yōu)選的本發(fā)明的實(shí)施方案中，式I的化合物能抑制GSK3β。優(yōu)選地，利用GSK3β激酶分析測(cè)量，所述的式I化合物顯示的IC50值小于1μM。在伴隨的實(shí)施例部分描述了合適的GSK3β激酶分析的細(xì)節(jié)。優(yōu)選地，所述的化合物選自[1]-[3]、[6]、[7]、[10]、[11]、[13]-[15]、[17]、[20]-[23]和[25]-[29]。更優(yōu)選地，所述的式I化合物顯示的IC50值小于0.1μM。更優(yōu)選地，所述的化合物選自[7]、[13]、[20]、[21]、[23]、[25]、[28]、[32]、[33]、[34]、[35]、[36]、[37]和[39]。甚至更優(yōu)選地，所述的化合物式I顯示的IC50值小于0.01μM。甚至更優(yōu)選地，所述的化合物選自[20]、[28]、[32]和[35]。甚至更優(yōu)選地，所述的化合物式I顯示的IC50值小于0.001μM。甚至更優(yōu)選地，所述的化合物選自[32]和[35]。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，利用合適的激酶分析測(cè)量，所述的化合物式顯示對(duì)GSK3β的抑制選擇性高于CDKs，例如CDK2/E。優(yōu)選地，所述的化合物顯示IC50(CDK2/E)/(GSK3β)為2或更高的選擇性。優(yōu)選地，所述的化合物選自[7]、[13]、[20]-[23]、[25]-[28]、[32]、[33]和[35]-[39]。更優(yōu)選地，所述的化合物顯示IC50(CDK2/E)/(GSK3β)為5或更高的選擇性。更優(yōu)選地，所述的化合物選自[7]、[20]、[23]、[27]、[28]、[32]、[33]、[35]、[38]和[39]。甚至更優(yōu)選地，所述的化合物顯示IC50(CDK2/E)/(GSK3β)為10或更高的選擇性。更優(yōu)選地，所述的化合物選自[7]、[20]、[23]、[27]、[28]、[32]和[35]。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，用適當(dāng)?shù)姆治鰷y(cè)量，式I的化合物能誘導(dǎo)細(xì)胞糖原合成酶(GS)活性。優(yōu)選地，所述的化合物選自[1]-[3]、[6]、[7]、[11]-[13]、[20]-[22]、[27]、[32]、[34]和[36]-[39]。更優(yōu)選地，相對(duì)于對(duì)照樣品，所述的化合物顯示3-倍或更高的細(xì)胞GS活性。更優(yōu)選地，所述的化合物選自[1]、[2]、[6]、[7]、[21]、[32]、[36]、[37]和[39]。
治療應(yīng)用這里使用的短語(yǔ)“藥物的制備”包括將式I化合物直接用作藥物的用途以及其在用于其他的治療劑的篩選過程(screening programme)中的用途或在所述藥物的制備的任何階段的用途。
式I化合物在治療在治療糖尿病、CNS疾病(如阿耳茨海默氏病和雙相性精神障礙)、中風(fēng)、心血管疾病以及禿發(fā)癥中有治療用途。
申請(qǐng)人及進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)證實(shí)式I化合物能抑制糖原合成酶激酶3(GSK3)。糖原合成酶激酶3為Ser/Thr蛋白激酶，包括兩種在催化結(jié)構(gòu)域中高度同源的同工型(α和β)。有關(guān)GSK3生物學(xué)的近期評(píng)論，參見Frame，S.；Cohen，P.Biochem.J.，2001，359，1。
已知有一些CDK抑制劑，包括例如hymenialdisine(Meijer，L.；Thunnissen，A.-M.W.H.；White，A.W.；Garnier，M.；Nikolic，M.；Tsai，L.-H.；Walter，J.；Cleverley，K.E.；Salinas，P.C.；Wu，Y.-Z.；Biernat，J.；Mandelkow，E.M.；Kim，S.-H.；Pettit，G.R.Chem.Biol.，2000，7，51)、paullones(Leost，M.；Schultz，C.；Link，A.；Wu，Y.-Z.；Biernat，J.；Mandelkow，E.-M.；Bibb，J.A.；Snyder，G.L.；Greengard，P.；Zaharevitz，D.W.；Gussio，R.；Senderowicz，A.M.；Sausville，E.A.；Kunick，C.；Meijer，L.Eur.J.Biochem.，2000，267，5983)以及靛玉紅類(Leclerc，S.；Garnier，M.；Hoessel，R.；Marko，D.；Bibb，J.A.；Snyder，G.L.；Greengard，P.；Biernat，J.；Wu，Y.-Z.；Mandelkow，E.-M.；Eisenbrand，G.；Meijer，L.J.Biol.Chem.，2001，276，251)也抑制GSK3。另一方面，其他的一些CDK抑制劑分子不抑制GSK3，例如，roscovitine(Havlicek，L.；Hanus，J.；Vesel y，J.；Leclerc，S.；Meijer，L.；Shaw，G；Strnad，M.J.Med.Chem.，1997，40，408)以及其他的基于嘌呤的抑制劑(Chang，Y.T.；Gray，N.S.；Rosania，G R.；Sutherlin，D.P.；Kwon，S.；Norman，T.C.；Sarohia，R.；Leost，M.；Meije r，L.；Schultz，P.G Chem.Biol.，1999，6，361)。
本發(fā)明一方面涉及涉及式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療糖尿病的藥物中的用途。
在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述的糖尿病為II型糖尿病。
GSK3為磷酸化糖原合成酶(GS)的數(shù)種蛋白激酶中的一種。骨骼肌中胰島素對(duì)糖原合成的刺激源自GS的去磷酸化以及活化。因此，GSK3對(duì)GS的作用導(dǎo)致后者的失活并因此抑制肌肉中葡萄糖向糖原的轉(zhuǎn)化。
II型糖尿病(非-胰島素依賴性糖尿病)是一種多因素疾病。高血糖癥是由于肝臟、肌肉以及其他組織中的胰島素抗性以及受損的胰島素分泌導(dǎo)致的。骨骼肌是胰島素-刺激的葡萄糖攝取的主要部位，在那里其離開循環(huán)或轉(zhuǎn)化成糖原。肌肉糖原沉積是葡萄糖調(diào)節(jié)平衡作用中的主要決定環(huán)節(jié)，并且II型糖尿病具有缺乏的肌肉糖原貯存。有證據(jù)表明GSK3活性活性的增加在II型糖尿病中很重要[Chen，Y.H.；Hansen，L.；Chen，M.X.；Bjorbaek，C.；Vestergaard，H.；Hansen，T.；Cohen，P.T.；Pedersen，O.Diabetes，1994，43，1234]。此外，已經(jīng)證實(shí)GSK3在II型糖尿病的肌肉細(xì)胞中過表達(dá)并且在骨骼肌GSK3活性和胰島素作用之間存在逆相關(guān)[Nikoulina，S.E.；Ciaral di，T.P.；Mudaliar，S.；Mohideen，P.；Carter，L.；Henry，R.R.Diabetes，2000，49，263]。
因此，GSK3的抑制在治療糖尿病尤其是II型糖尿病以及糖尿病神經(jīng)病變中有治療意義。
本發(fā)明另一方面涉及一種治療糖尿病的方法，包括通過對(duì)需要的對(duì)象施用治療有效量的式I化合物，或其可藥用鹽抑制GSK3以治療糖尿病。
本發(fā)明另一方面涉及抑制細(xì)胞中GSK3的方法，包括將所述的細(xì)胞與一定量的式I化合物，或其可藥用鹽接觸，以抑制所述的細(xì)胞中的GSK3。
已知GSK3磷酸化除GS以外的許多底物，并因此參與多種生化通路的調(diào)節(jié)。例如，GSK在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中高表達(dá)。
因此本發(fā)明另一方面涉及式I化合物，或其可藥用鹽，在制備用于治療CNS疾病例如神經(jīng)退行性疾病的藥物中的用途。
優(yōu)選地，CNS疾病為阿耳茨海默氏病。
Tau為參與阿耳茨海默氏病的病因?qū)W的GSK-3底物。在健康的神經(jīng)細(xì)胞中，Tau與微管蛋白共聚成微管。但是，在阿耳茨海默氏病中，tau形成了大的絲狀纏結(jié)，破壞了神經(jīng)細(xì)胞中的微管結(jié)構(gòu)，從而損壞營(yíng)養(yǎng)的傳輸以及神經(jīng)信息的傳遞。
希望不被理論所局限，相信GSK3抑制劑能預(yù)防和/或逆轉(zhuǎn)微管-相關(guān)蛋白tau的異常高度磷酸化，后者是阿耳茨海默氏病以及許多其他的神經(jīng)退行性疾病如進(jìn)行性核上性麻痹、皮質(zhì)基質(zhì)變性以及皮克氏病的不變特征。tau基因中的突變引起額顳癡呆的遺傳形式，進(jìn)一步支持tau蛋白功能障礙與神經(jīng)退行性變化之間的關(guān)系[Goedert，M.Curr.Opin.Gen.Dev.，2001，11，343]。
本發(fā)明另一方面涉及式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療雙相性精神障礙的藥物中的用途。
本發(fā)明另一方面涉及式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療中風(fēng)的藥物中的用途。
降低神經(jīng)元細(xì)胞凋亡是頭外傷、中風(fēng)、癲癇癥以及運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病中的一個(gè)重要的治療目標(biāo)[Mattson，M.P.Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.，2000，1，120]。因此，作為神經(jīng)元細(xì)胞中的促細(xì)胞凋亡因子，GSK3使該蛋白激酶成為設(shè)計(jì)用于治療這些疾病的抑制性藥物中有吸引力的治療靶標(biāo)。
本發(fā)明另一方面涉及式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療心血管疾病的藥物中的用途。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，心血管疾病為心肌梗塞。
本發(fā)明另一方面涉及式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療禿發(fā)癥的藥物中的用途。
毛發(fā)生長(zhǎng)受Wnt信號(hào)通路尤其是Wnt-3信號(hào)通路的控制。在皮膚的組織培養(yǎng)模型體系中，β-聯(lián)蛋白的不可降解的突變體的表達(dá)導(dǎo)致推定的干細(xì)胞的數(shù)量的顯著增加，其具有更大的增殖活性[Zhu，A.J.；Watt，F(xiàn).M.Development，1999，126，2285]。這種干細(xì)胞群體表達(dá)高水平的非-鈣粘蛋白-相關(guān)的β-聯(lián)蛋白[DasGupta，R.；Fuchs，E.Development，1999，126，4557]，其可促進(jìn)高的增殖活性。此外，皮膚中過量表達(dá)截短的β-聯(lián)蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)生全新的發(fā)-囊形態(tài)發(fā)生，正常情況下只在胚胎形成中才發(fā)生。因此GSK3抑制劑的異常使用可用于治療光禿并可用于化療誘導(dǎo)的禿發(fā)癥的頭發(fā)生長(zhǎng)的恢復(fù)。
本發(fā)明另一方面涉及一種治療GSK3-依賴性疾病的方法，所述的方法包括對(duì)需要的對(duì)象以足以抑制GSK3的量施用如上定義的式I化合物或其可藥用鹽。
優(yōu)選地，式I的化合物或其可藥用鹽，以足以抑制GSK3β的量給予。
優(yōu)選地，所述的GSK3-依賴性疾病選自糖尿病、CNS疾病(如阿耳茨海默氏病或雙相性精神障礙)、中風(fēng)、心血管疾病以及禿發(fā)癥。
鹽/酯本發(fā)明的化合物可以鹽或酯尤其是藥物可接受的鹽或酯的形式提供。
本發(fā)明化合物(第一方面和第二方面)的藥物可接受鹽包括它們合適的酸加成鹽或堿加成鹽。合適藥物鹽的綜述可見Berge等人的J.Pharm Sci，66，1-19(1977)。鹽為與例如以下酸形成的鹽強(qiáng)無機(jī)酸，如礦物酸，例如硫酸、磷酸或氫鹵酸；強(qiáng)有機(jī)羧酸，如未取代或取代(如被鹵代)的1至4個(gè)碳原子的鏈烷羧酸，例如乙酸；飽和或不飽和的二元羧酸，例如草酸、丙二酸、丁二酸、馬來酸、富馬酸、鄰苯二甲酸或四鄰苯二甲酸(tetraphthalic)；羥基羧酸，例如抗壞血酸、羥基乙酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸或檸檬酸；氨基酸，例如天冬氨酸或谷氨酸；苯甲酸；或與有機(jī)磺酸，如未取代或取代(如被鹵代)的(C1-C4)烷基磺酸或芳基磺酸，如甲磺酸或?qū)妆交撬帷?br> 取決于被酯化的官能團(tuán)，使用有機(jī)酸或醇/氫氧化物形成酯。有機(jī)酸包括羧酸，如未取代或取代(如被鹵代)的1至12個(gè)碳原子的鏈烷羧酸，例如乙酸；飽和或不飽和的二元羧酸，例如草酸、丙二酸、丁二酸、馬來酸、富馬酸、鄰苯二甲酸或四鄰苯二甲酸；羥基羧酸，例如抗壞血酸、羥基乙酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸或檸檬酸；氨基酸，例如天冬氨酸或谷氨酸；苯甲酸；或與有機(jī)磺酸，如未取代或取代(如被鹵代)的(C1-C4)烷基磺酸或芳基磺酸，如甲磺酸或?qū)妆交撬?。合適的氫氧化物包括無機(jī)氫氧化物，如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鋁。醇包括未取代或取代(如被鹵代)的1至12個(gè)碳原子的鏈烷醇。
對(duì)映異構(gòu)體/互變異構(gòu)體在前述討論的本發(fā)明的所有方面中，本發(fā)明還適當(dāng)?shù)匕ㄊ絀化合物的全部對(duì)映異構(gòu)體和互變異構(gòu)體。本領(lǐng)域的技術(shù)人員能認(rèn)識(shí)到具有光學(xué)性質(zhì)(一個(gè)或多個(gè)手性碳原子)或互變異構(gòu)特征的化合物。可通過本領(lǐng)域中已知的方法分離/制備相應(yīng)的對(duì)映異構(gòu)體和/或互變異構(gòu)體。
多晶型物本發(fā)明還涉及用于本發(fā)明的化合物的各種結(jié)晶形式、多晶型形式和無水/水合形式。眾所周知，在藥物工業(yè)中可通過稍微改變這種化合物合成制備中所用溶劑的純化方法和或分離形式來分離得到化合物的任意這類形式。
前體藥物本發(fā)明還包括用于本發(fā)明的化合物的前體藥物形式。這種前體藥物通常為一個(gè)或多個(gè)適當(dāng)基團(tuán)已被修飾以使在對(duì)人或哺乳動(dòng)物對(duì)象給藥后所述的修飾可被逆轉(zhuǎn)的式I化合物。雖然為了實(shí)現(xiàn)體內(nèi)逆轉(zhuǎn)可與這種前體藥物一起給藥第二種藥劑，但通常通過在這類對(duì)象中天然存在的酶實(shí)現(xiàn)這種逆轉(zhuǎn)。這類修飾的例子包括酯(例如上述那些中的任一種)，其中可通過酯酶等進(jìn)行逆轉(zhuǎn)。其它這類系統(tǒng)為本領(lǐng)域中那些技術(shù)人員所熟知。
藥物組合物本發(fā)明也包括包含本發(fā)明化合物的藥物組合物的用途。在這方面，并且尤其是用于人治療的時(shí)候，甚至盡管本發(fā)明的化合物(包括其可藥用鹽、酯以及可藥用溶劑合物)可單獨(dú)給藥，通常它們與根據(jù)要使用的給藥途徑以及標(biāo)準(zhǔn)的制藥規(guī)范進(jìn)行選擇的可藥用載體、賦形劑或稀釋劑一起給藥。
因此，本發(fā)明還涉及藥物組合物的用途，所述的藥物組合物包括一或多種式I化合物或其可藥用鹽或其酯，以及至少一種可藥用賦形劑、稀釋劑或載體。
例如，在本發(fā)明的藥物組合物中，用于本發(fā)明的化合物可與任何合適的粘合劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、包衣劑和/或助溶劑進(jìn)行混合。對(duì)這里記載的各種不同形式的藥物組合物合適的賦形劑的實(shí)例可見于“Handbook ofPharmaceutical Excipients，2ndEdition，(1994)，由A Wade和PJ Weller編著。
給藥可使本發(fā)明的藥物組合物適于口服、直腸、陰道、腸胃外、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、支氣管內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、鼻、口腔或舌下給藥途徑。
對(duì)于口服給藥，特別利用壓縮片劑、藥丸、片劑、凝膠(gellules)、滴劑和膠囊。優(yōu)選地，這些組合物每劑包含1-250mg和更優(yōu)選10-100mg的有效成分。
其它給藥形式包括溶液或乳液，它們可經(jīng)靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)或肌內(nèi)給藥，并由無菌或可滅菌溶液制備。本發(fā)明的藥物組合物還可為栓劑、陰道栓劑、混懸劑、乳液、洗液、軟膏、乳膏劑、凝膠、噴霧劑、溶液或撲粉(dusting powder)的形式。
經(jīng)皮給藥的替代方式是利用皮膚貼片。例如，可將有效成分摻入到由聚乙二醇含水乳液或液體石蠟組成的乳膏劑內(nèi)。還可以1-10wt％的濃度將有效成分摻入到由白蠟或白色軟石蠟基質(zhì)與所需要的穩(wěn)定劑和防腐劑共同組成的軟膏內(nèi)。
可注射形式每劑可包含10-1O00mg、優(yōu)選10-250mg的有效成分。
組合物可被配制成單元?jiǎng)┬?，即包含單元?jiǎng)┝炕騿卧獎(jiǎng)┝康亩嘀貑挝换騺唵挝坏男问降碾x散部分。
劑量本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員不用額外試驗(yàn)就可容易地確定對(duì)患者給藥的本發(fā)明的組合物的適宜劑量。典型地，醫(yī)師會(huì)確定對(duì)個(gè)體患者最適合的實(shí)際劑量，并且根據(jù)具體病人的年齡、體重以及反應(yīng)進(jìn)行調(diào)整。本文公開的劑量為一般情況的示例。當(dāng)然也可有有益的較高或較低劑量范圍個(gè)別情況，這都在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在示例性的實(shí)施方案中，對(duì)病人施用一或多劑10～150mg/天用于治療病毒性疾病。
優(yōu)選地，所述的式I化合物以足以抑制GSK3的量給予。
甚至更優(yōu)選地，所述的式I化合物以足以抑制GSK3β的量給予。
組合在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，一或多種本發(fā)明的化合物與一或多種其他的藥理活性劑組合給藥。在這種情況下，本發(fā)明的化合物可連續(xù)地、同時(shí)地或先后地與一或多種藥理活性劑組合給藥。
本領(lǐng)域中公知許多藥物在組合使用的時(shí)候更有效。尤其地，組合療法可以避免主要毒性作用、作用機(jī)制以及耐藥機(jī)制的重疊。此外，也可以以最大耐受劑量，并在這些劑量之間以最小的時(shí)間間隔施用大多數(shù)藥物。治療藥物組合的主要優(yōu)勢(shì)在于可能通過生化相互作用促進(jìn)加和的或可能的協(xié)同作用，并且也可能降低在用單個(gè)藥劑進(jìn)行初期治療的耐藥性的出現(xiàn)。
可通過研究受試化合物與已知的或認(rèn)為在最初治療具體疾病中有價(jià)值的化合物的藥理活性而暗示有利的組合。這種方法也可用于測(cè)定施用藥劑的順序，即，之前、同時(shí)或之后給藥。
本發(fā)明現(xiàn)在通過舉例進(jìn)行說明，并參考伴隨的附圖，其中

圖1顯示了實(shí)施例化合物[20]和[21]對(duì)HEK293細(xì)胞(上)、3T3小鼠脂肪細(xì)胞細(xì)胞(中)以及L6大鼠肌細(xì)胞細(xì)胞(下)中的細(xì)胞糖原合成酶活性的激活作用，利用酶的級(jí)分反應(yīng)速率測(cè)量(0.1和10mM葡萄糖-6磷酸底物濃度活性之間的比值)。
圖2顯示了化合物[20]處理的ZDF大鼠中的血葡萄糖水平(mmol/L)隨時(shí)間(分鐘)的變化。
實(shí)施例表1顯示了例示的化合物的結(jié)構(gòu)以及化學(xué)名稱。
實(shí)施例13，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈將氰基乙酸乙基酯(10mL，94mmol)用AcOH(20mL)稀釋，并將溶液冷卻至-10℃(冰-MeOH浴)。將NaNO2(6.5g，94mmol)溶解在H2O(10mL)中，并用40分鐘滴加溶液，保持內(nèi)溫低于0℃。加畢后，將反應(yīng)混合物在冷卻下攪拌1小時(shí)。然后溫?zé)嶂潦覝夭⒃贁嚢?小時(shí)。將混合物用AcOH(50mL)和H2O(50mL)稀釋。加入戊烷-2，4-二酮(10.6mL，103mmol)，并將混合物加熱至約75℃。用30分鐘以保持內(nèi)溫＜90℃的速度向該反應(yīng)混合物中分批加入Zn粉(6.9g，105mmol)。然后將反應(yīng)混合物再加熱30分鐘然后傾入至H2O(1L)中。從反應(yīng)混合物中過濾出為灰白色固體的標(biāo)題化合物(3.67g)。將濾液用EtOAc萃取(3×500mL)。將合并的有機(jī)萃取物洗滌(鹽水)并干燥(MgSO4)。蒸發(fā)溶劑褐色的油狀物，經(jīng)色譜純化(100g SiO2，用4∶1庚烷/EtOAc洗脫)得到為淺黃色固體的該產(chǎn)物的另一部分(4.41g)(總產(chǎn)率72％)。
4-乙?；?3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈將3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈(1.2g，10mmol)溶解在無水1，2-二氯乙烷(15mL)中，并分批加入AlCl3(2.93g，22mmol)。將反應(yīng)容器中充入N2，并在冰浴上冷卻。滴加AcCl(0.71mL，10mmol)，并將混合物在冷卻下攪拌1小時(shí)，并在室溫下攪拌3小時(shí)。小心地加入2M aq HCl中止反應(yīng)混合物。加入NaHCO3調(diào)節(jié)混合物的酸性為約pH6。分出有機(jī)相，將水相用EtOAc萃取(3×100mL)。將合并的有機(jī)相洗滌(H2O，然后鹽水)，干燥(MgSO4)，并過濾。蒸發(fā)溶劑得到淺褐色固體的標(biāo)題化合物(1.42g，88％)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.44(s，3H，CH3)，2.45(s，3H，CH3)，2.54(s，3H，CH3)，8.75(br.s，1H，NH)。
4-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈將4-乙?；?3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈(1.38g，8.51mmol)懸浮在1，1-雙-二甲基氨基-3，3-二甲基-丁-2-酮(1.3mL)中，并在75℃加熱42小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，并將殘留物經(jīng)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc)得到淺褐色固體的標(biāo)題化合物(1.2g，65％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.21(s，3H，CH3)，2.31(s，3H，CH3)，3.32(s，6H，CH3)，5.22(d，1H，J＝12.4Hz，CH)，7.47(d 1H，J＝12.4Hz，CH)，11.96(br.s，1H，NH)。
3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[1]向4-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈(1.0mmol，0.22g)和3-硝基苯基胍硝酸鹽(1.5mmol，0.36g)在2-甲氧基乙醇(5mL)中的混合物中加入K2CO3(138mg，1.0mmol)。將反應(yīng)混合物在N2氣氛中在120℃加熱18小時(shí)。蒸發(fā)溶劑至干，并將殘留物經(jīng)快速色譜純化(1∶2EtOAc/庚烷)得到亮黃色固體的標(biāo)題化合物。
M.p.258-259℃。MS[M+H]+＝336.1(C17H14N6O2理論值334.3)。
1H-NMR(CD3OD)δ2.39(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，6.94(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.50(t，1H，J＝8.3Hz，Ph-H)，7.81(m，1H，Ph-H)，7.94(m，1H，Ph-H)，8.45(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.94(t，1H，J＝2.2Hz，Ph-H)。
下述化合物以類似于上述方法的方式進(jìn)行制備4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-比咯-2-腈[2]MS[M+H]+＝307.7(C17H14FN5理論值307.3)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H，CH3)，2.40(s，3H，CH3)，6.84(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，7.00(m，2H，Ph-H)，7.73(m，2H，Ph-H)，8.40(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，9.46(s，1H，NH)，12.19(br.s，1H，NH)。
4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[3]M.p.272-276℃。MS[M+H]+＝305.8(C17H15N5O理論值305.3)。
1H-NMR(CD3OD)δ2.33(s，3H，CH3)，2.41(s，3H，CH3)，6.74-6.56(m，3H，嘧啶基-H/Ph-H)，7.36(d，2H，J＝8.5Hz，Ph-H)，8.25(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)。
3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[4]M.p.195.6-198.9℃。MS[M+H]+＝357.7(C18H14F3N5理論值357.3)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.33(s，3H，CH3)，2.44(s，3H，CH3)，6.75(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.20(br.s，1H，NH)，7.50(d，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，7.71(d，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，8.39(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基)，8.40(br.s，1H，NH)。
4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[5]M.p.178.3-181.2℃。MS[M+H]+＝416.6(C18H14IN5理論值415.2)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.39(s，3H，CH3)，2.49(s，3H，CH3)，6.76(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.10(br.s，1H，NH)，7.44(d，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，7.61(d，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，8.42(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.45(br.s，1H，NH)。
4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[6]M.p.247-250℃。MS[M+H]+＝305.8(C17H15N5O理論值305.3)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.31(s，3H，CH3)，2.41(s，3H，CH3)，6.33(m，1H，Ph-H)，6.82(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.01(t，1H，J＝8.1Hz，Ph-H)，7.11(m，1H，Ph-H)，7.33(t，1H，J＝2.1Hz，Ph-H)，8.40(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.18(s，1H)，9.30(s，1H)，12.20(br.s，1H，NH)。
3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[7]M.p.233-237℃。MS[M+H]+＝350.0(C18H16N6O2理論值348.6)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.31(s，3H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)，2.44(s，3H，CH3)，6.92(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.39(d，1H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.87(dd，1H，J＝8.1，1.7Hz，Ph-H)，8.48(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.63(d，1H，J＝1.7Hz，Ph-H)，9.87(s，1H，NH)，12.21(br.s，1H，NH)。
4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[8]M.p.189.5-191.7℃。MS[M+H]+＝431.5(C18H16IN5理論值429.6)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.29(s，3H，CH3)，2.32(s，3H，CH3)，2.43(s，3H，CH3)，6.85(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.20(d，1H，J＝8.1Hz，Ph-H)，7.57(m，1H，ph-H)，8.41-8.43(m，2H，Ph-H，嘧啶基-H)，9.48(s，1H，NH)，12.20(br.s，1H，NH)。
4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[9]M.p.194.2-197.9℃。MS[M+H]+＝338.0(C18H16ClN5理論值337.8)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.27(s，3H，CH3)，2.31(s，3H，CH3)，2.41(s，3H，CH3)，6.86(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.28(d，1H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.61(dd，1H，J＝8.8，2.4Hz，Ph-H)，7.73(d，1H，J＝2.7Hz，Ph-H)，8.43(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.51(s，1H，NH)，12.21(br.s，1H，NH)。
4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[10]M.p.221-225℃。MS[M+H]+＝320.9(C18H17N5O理論值319.4)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.03(s，3H，CH3)，2.29(s，3H，CH3)，2.40(s，3H，CH3)，6.78(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，6.89(d，1H，J＝8.1Hz，Ph-H)，7.02(dd，1H，J＝8.3，1.7Hz，Ph-H)，7.29(d，1H，J＝0.7Hz，Ph-H)，8.37(d，1H，J＝4.9Hz，嘧啶基-H)，9.08(s，1H)，9.20(s，1H)，12.17(br.s，1H，NH)。
4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[11]M.p.161.3-164.1℃。
MS[M+H]+＝321.6(C18H16FN5理論值321.4)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.19(s，3H，CH3)，2.30(s，3H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)，6.82(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.03(t，1H，J＝9.3Hz，Ph-H)，7.53(m，1H，Ph-H)，7.61(dd，1H，J＝7.1，2.4Hz，Ph-H)，8.39(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.36(s，1H，NH)，12.20(br.s，1H，NH)。
4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[12]M.p.190.6-193.7℃。MS[M+H]+＝334.7(C19H20N6理論值332.4)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.36(s，3H，CH3)，2.46(s，3H，CH3)，2.94(br.s，6H，CH3)，6.66(d，1H，J＝5.6Hz，嘧啶基-H)，6.79-6.80(m，2H，Ph-H)，7.05(br.s，1H，NH)，7.40-7.43(m，2H，Ph-H)，8.34(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.52(br.s，1H，NH)。
實(shí)施例24-(3-二甲基氨基-丙烯酰基)-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺將1-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(1.1g，10mmol)部分地溶解在2MNH3的MeOH溶液中，并用40分鐘滴加H2O2(10mL，27％w/w的H2O溶液)，加入的速度以使內(nèi)溫≤30℃。將混合物在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。將形成的白色固體過濾，并從EtOAc中重結(jié)晶得到4-乙?；?3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺(1.06g)。將部分產(chǎn)物(720mg，4mmol)懸浮在N2-充填的燒瓶中的1，1-雙-二甲基氨基-3，3-二甲基-丁-2-酮(2mL，9.6mmol)中，并在75℃加熱48小時(shí)。將粗混合物冷卻，并經(jīng)純化SiO2色譜(EtOAc/MeOH梯度洗脫)。得到淺黃色固體的標(biāo)題化合物(449mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H，CH3)，2.46(s，3H，CH3)，2.90(br.s，2H，NH)。3.09(s，3H，CH3)，3.13(s，3H，CH3)，5.23(d，1H，J＝12.4Hz，CH)，7.38(d，1H，J＝12.7Hz，CH)，10.97(br.s，1H，NH)。
4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺[13]將4-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺(100mg，0.43mmol)、4-氟苯基胍硝酸鹽(139mg，0.65mmol)和K2CO3(94mg，0.68mmol)部分地溶解在2-甲氧基乙醇(5mL)中，并在120℃加熱18小時(shí)。將混合物真空濃縮并經(jīng)SiO2色譜純化(EtOAc/MeOH梯度洗脫)。將粗產(chǎn)物在iPr2O中研磨得到淺黃色固體的標(biāo)題化合物(31mg)。
M.p.93.5-96.8℃。MS[M+H+]＝326.9(C17H16FN5O理論值325.3)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.36(s，3H，CH3)，2.39(s，3H，CH3)，6.79(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，6.92(br.s，2H，NH)，7.07(t，2H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.76-7.78(m，2H，Ph-H)，8.36(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.41(s，1H，NH)，11.24(br.s，1H，NH)。
實(shí)施例33-二甲基氨基-1-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-丙烯酮在室溫下將HNO3(0.28mL，69％w/v水溶液，4.37mmol)滴加至Ac2O(5mL)中，保持內(nèi)溫≤25℃。將硝基化的混合物在室溫?cái)嚢?5分鐘然后冷卻至-40℃。將1-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(500mg，3.64mmol)溶解在Ac2O(6mL)中并且然后滴加，保持內(nèi)溫≤-30℃。將混合物在-40℃攪拌30分鐘然后在-10℃再攪拌30分鐘。將混合物傾入到冰-水(50mL)中，并萃取至Et2O中(3×60mL)。將合并的有機(jī)萃取物洗滌(鹽水)，干燥(Na2SO4)，過濾并真空蒸發(fā)得到黑棕色的固體。將其從MeOH中重結(jié)晶得到1-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(158mg)。將部分(150mg，0.82mmol)懸浮在在N2-充填過的燒瓶中的1，1-雙-二甲基氨基-3，3-二甲基-丁-2-酮(0.42mL，2.02mmol)中，并在70℃加熱18小時(shí)。將混合物在EtOAc中研磨得到褐色固體的標(biāo)題化合物(119mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H，CH3)，2.40(s，3H，CH3)，2.80(br.s，3H，CH3)，3.07(br.s，3H，CH3)，5.19(d，1H，J＝12.7Hz，CH)，7.45(d，1H，J＝12.4Hz，CH)，12.76(br，1H，NH)。-(4-氟-苯基)-胺[14]將3-二甲基氨基-1-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-丙烯酮(110mg，0.46mmol)、4-氟苯基胍硝酸鹽(150mg，0.7mmol)以及K2CO3(193mg，1.4mmol)部分地溶解在2-甲氧基乙醇中，并在120℃加熱18小時(shí)。將混合物真空濃縮并經(jīng)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)。將粗產(chǎn)物在iPr2O中研磨得到淺橙色固體的標(biāo)題化合物(22mg)。
M.p.166.3-170.1℃。MS[M+H]+＝329.3(C16H14FN5O2理論值327.3)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.49(s，3H，CH3)，2.59(s，3H，CH3)，6.73(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.04(t，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，7.07(br.s，1H，NH)，7.55-7.58(m，2H，Ph-H)，8.44(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.40(br.s，1H，NH)。
下述化合物按照類似的方式進(jìn)行制備N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[15]M.p.265-268℃。MS[M+H]+＝353.0(C18H20N6O2理論值352.4)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.39(s，3H，CH3)，2.48(br.s，6H，CH3)，2.82(s，3H，CH3)，6.69(d，2H，J＝9.0Hz，Ph-H)，6.74(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.50(d，2H，J＝9.0Hz，Ph-H)，8.38(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.18(s，1H，NH)，13.00(br.s，1H，NH)。
實(shí)施例4[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[16]將[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺(80mg，0.28mmol)溶解在THF(4mL)中，并冷卻至-50℃。將N-溴代琥珀酰亞胺(55mg，0.31mmol)溶解在THF(2mL)中并滴加，保持內(nèi)溫≤-40℃。將混合物在冷卻下攪拌1小時(shí)然后真空蒸發(fā)。將殘留物用H2O(10mL)處理并用EtOAc(3×10mL)萃取。將合并的有機(jī)萃取物洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)，過濾，并真空蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物經(jīng)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)，從iPr2O中重結(jié)晶后得到橙色固體的標(biāo)題化合物(19mg)。
M.p.181.4-183.3℃。MS[M+H]+＝362.9(C16H14BrFN4理論值361.2)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.10(s，3H，CH3)，2.36(s，3H，CH3)6.56(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，6.97(t，2H，J＝8.3Hz，Ph-H)，7.00(br.s，1H，NH)，7.79-7.52(m，2H，Ph-H)，8.85(br.s，1H，NH)，8.26(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)。
下述化合物按照類似的方式進(jìn)行制備[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[17]M.p.198.1-203℃。MS[M+H]+＝389.3(C16H14BrN5O4理論值361.2)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.49(s，3H，CH3)，2.59(s，3H，CH3)6.73(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.04(t，2H，J＝8.8Hz，Ph-H)，7.57(m，2H，Ph-H)，7.90(br.s，1H，NH)，8.44(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，9.40(br.s，1H，NH)。
實(shí)施例5[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[18]將[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺(80mg，0.28mmol)溶解在THF(4mL)中，并冷卻至-60℃。將N-氯代琥珀酰亞胺(41mg，0.31mmol)溶解在THF(2mL)中，并滴加，保持內(nèi)溫≤-50℃。將混合物在冷卻下攪拌30分鐘然后真空蒸發(fā)。將殘留物用H2O(10mL)處理并用EtOAc萃取(3×10mL)。將合并的有機(jī)萃取物洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)，過濾，并真空蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物經(jīng)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)，從iPr2O中重結(jié)晶后得到橙色固體的標(biāo)題化合物(37mg)。
M.p.200-203℃。MS[M+H]+＝317.7(C16H14ClFN4理論值316.8)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.17(s，3H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)6.77(d，1H，J＝5.9Hz，嘧啶基-H)，7.02-7.06(m，3H，Ph-h，NH)，7.54-7.56(m，2H，Ph-H)，7.95(br.s，1H，NH)，8.25(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)。
實(shí)施例6[4-(5-二甲基氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[19]將二甲基胺(40μL，0.31mmol)用甲醇(0.5mL)稀釋并加入甲醛(30μL，37％w/w水溶液，0.37mmol)。以小部分加入[4-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺(87mg，0.31mmol)，并將混合物加熱回流。1.5小時(shí)后，將混合物用H2O(10mL)稀釋。過濾出產(chǎn)生的沉淀，并在2M aq HCl中研磨。將混合物過濾，并將濾液用2M aq NaOH洗滌。將濾液用EtOAc萃取(3×15mL)。將合并的有機(jī)萃取物洗滌(鹽水)，干燥(MgSO4)，過濾，并真空蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物經(jīng)SiO2色譜純化(庚烷/EtOAc梯度洗脫)，從iPr2O中重結(jié)晶后得到橙色固體的標(biāo)題化合物(36mg)。
M.p.88.4-91.6℃。
MS[M+H]+＝340.6(C19H22FN5理論值339.4)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.18(s，3H，CH3)，2.56(s，6H，CH3)，2.42(s，3H，CH3)，3.38(s，2H，CH2)，6.75(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，7.00(t，2H，J＝8.6Hz，Ph-H)，7.13(br.s，1H，NH)，7.56-7.59(m，2H，Ph-H)，8.31(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，8.55(br.s，1H，NH)。
實(shí)施例74-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[20]該化合物利用4-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈和N-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基)-胍硝酸鹽進(jìn)行反應(yīng)而得到。粗產(chǎn)物從PhMe中重結(jié)晶得到黃色固體(21％)。
1H NMR(CD3OD)δ2.38(s，3H，CH3)，2.51(s，3H，CH3)，2.86(s，6H，CH3)，6.76(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.02(s，1H，Ph-H)，7.04(m，1H，Ph-H)，7.49(m，1H，Ph-H)，8.29(d，1H，J＝2.7Hz，Ph-H)，8.40(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，8.94(t，1H，J＝2.2Hz，Ph-H)。
MS m/z 378.71(M+H)+(C19H19N7O2理論值377.40)。
實(shí)施例8N4-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N1，N1-二甲基-2-硝基-苯-1，4-二胺[21]該化合物利用3-二甲基氨基-1-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-丙烯酮和N-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基)-胍硝酸鹽進(jìn)行反應(yīng)而制備得到。
1H-NMR(CDCl3)δ2.52(s，3H，CH3)，2.59(s，3H，CH3)，2.87(s，6H，CH3)，6.76(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.05(m，2H，Ph-H & NH)，7.48(m，1H，Ph-H)，8.32(br.s，1H，Ph-H)，8.44(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)。
實(shí)施例94-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[22]該化合物按照實(shí)施例1中記載的一般方法進(jìn)行制備。
M.p.177.7-179.9℃。
MS[M+H]+＝322.5(C18H16FN5理論值321.3)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.15(s，3H，CH3)，2.30(s，3H，CH3)，2.43(s，3H，CH3)，6.86(d，1H，J＝5.1Hz，嘧啶基-H)，7.13(t，1H，J＝9.0Hz，Ph-H)，7.36(dd，1H，J＝8.1，1.7Hz，Ph-H)，7.75(dd，1H，J＝12.9，1.5Hz，Ph-H)，8.43(d，1H，J＝5.4Hz，嘧啶基-H)，9.56(s，1H，NH)，12.21(br.s，1H，NH)。
實(shí)施例105-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[34]向冰冷的硫氰酸鉀(5.67g，58mmol)在Me2CO(45mL)的溶液中滴加3-氯-戊烷-2，4-二酮(6.95mL，58mmol)。加畢后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒗^續(xù)攪拌6小時(shí)。蒸發(fā)溶劑至干。將殘留物溶解在EtOH(30mL)中，并加入HCl(濃水溶液，15mL)。將混合物加熱回流14小時(shí)。濃縮并收集沉淀，用冷MeOH洗滌并且然后用Et2O洗滌得到9.1g淺色的固體。將該化合物用N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛(13mL)在100-110℃處理8小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，并將殘留物經(jīng)SiO2快速色譜純化(EtOAc/PE)得到5-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮。
1H-NMR(CDCl3)δ2.50(s，3H，CH3)，3.07(s，3H，CH3)，3.21(s，6H，CH3)，5.09(d，1H，J＝12.0Hz，CH)，7.59(d，1H，J＝12.0Hz，CH)。
將5-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮(0.23g，1.0mmol)在2-甲氧基乙醇(3mL)中的溶液用N-(4-羥基-苯基)-胍硝酸鹽(0.42g，2.0mmol)處理。回流20小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮并經(jīng)SiO2快速色譜純化(EtOAc)。從EtOAc中重結(jié)晶得到褐色晶體的標(biāo)題化合物(25mg)。
分析RP-HPLCtR＝11.8分鐘(0-60％MeCN的0.1％aq CF3COOH溶液，20分鐘，1mL/分鐘，純度＞95％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.52(s，3H，CH3)，3.27(s，3H，CH3)，6.68(d，2H，J＝8.9Hz，Ph-H)，6.81(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，7.44(d，2H，J＝8.9Hz，Ph-H)，8.34(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，9.12(br.s，1H，OH/NH)，9.24(br.s，1H，NH/OH)。
下述化合物利用類似于上述描述的步驟進(jìn)行制備5-[2-(4-氯-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[23]亮黃色固體；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.55(s，3H，CH3)，3.29(s，3H，CH3)，6.97(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，7.32(d，2H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.76(d，2H，J＝9.0Hz，Ph-H)，8.44(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，9.75(br.s，1H，NH)。
5-[2-(4-甲氧基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[24]亮黃色固體；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.54(s，3H，CH3)，3.28(s，3H，CH3)，3.71(s，3H，CH3)，6.86(m，3H，嘧啶基-H & Ph-H)，7.59(d，2H，J＝9.0Hz，Ph-H)，8.37(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，9.39(br.s，1H，NH)。
5-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[25]亮黃色固體；分析RP-HPLCtR＝15.4分鐘(0-60％MeCN的0.1％aq VF3COOH溶液洗脫20分鐘，1mL/分鐘，純度＞95％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.55(s，3H，CH3)，3.26(s，3H，CH3)，6.36(m，1H，Ph-H)，6.90(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，7.03(t，1H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.16(m，1H，Ph-H)，7.22(s，1H，Ph-H)，8.40(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，9.39(br.s，1H，NH)。
5-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[26]黃色固體；分析RP-HPLCtR＝19.6分鐘(0-60％MeCN的0.1％aq CF3COOH溶液洗脫20分鐘，1mL/分鐘，純度＞95％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.83(s，3H，CH3)，2.90(s，6H，CH3)，3.08(s，3H，CH3)，6.73(m，2H，Ph-H)，6.81(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，7.03(m，1H，Ph-H)，7.50(m，1H，Ph-H)，8.32(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，9.24(br.s，1H，NH)。
5-[2-(4-氟-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[28]褐色固體；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.42(s，3H，CH3)，2.81(s，3H，CH3)，6.36(m，1H，Ph-H)，6.91(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，7.31(m，1H，Ph-H)，8.33(m，1H，Ph-H)，8.48(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，8.52 & 9.68(br.s，1H，NH)。
3，4-二甲基-5-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[32]褐色晶體。
分析RP-HPLCtR＝17.8分鐘(0-60％MeCN的0.1％aq CF3COOH溶液洗脫20分鐘，1mL/分鐘，純度＞97％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.42(s，3H，CH3)，3.16(s，3H，CH3)，6.92(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，7.42(d，1H，J＝8.0Hz，Ph-H)7.65(m，1H，Ph-H)，7.88(m，1H，Ph-H)，8.37(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，8.72(br.s，1H，NH)。
5-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[33]灰色固體；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.92(s，3H，CH3)，3.67(s，3H，CH3)，7.32(d，1H，J＝5.0Hz，密啶基-H)，7.51(m，2H，Ph-H)，8.11(m，2H，Ph-H)，8.80(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)。
3，4-二甲基-5-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[36]黃色固體；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.44(s，3H，CH3)，2.55(s，3H，CH3)，3.27(s，3H，CH3)，7.03(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，7.40(t，1H，J＝8.5Hz，Ph-H)，7.84(m，1H，Ph-H)，8.48(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，8.59(s，1H，Ph-H)，9.99(br.s，1H，NH)。
5-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[37]灰色固體；1H-NMR(DMSO-d6)δ2.21(s，3H，CH3)，2.55(s，3H，CH3)，3.26(s，3H，CH3)，6.92(d，1H，J＝5.0Hz，嘧啶基-H)，7.04(t，1H，J＝9.0Hz，Ph-H)，7.48(m，1H，Ph-H)，7.68(m，1H，Ph-H)，8.40(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，9.54(br.s，1H，NH)。
實(shí)施例112-氯-4-胍基-苯甲酸乙基酯將2-氯-4-苯基胍基-苯甲酸(1.17g，4.0mmol)在無水EtOH(4mL)中的溶液用濃H2SO4(1mL)處理?；亓?小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻并傾入到冰水(5mL)中。將溶液用氨水(1mL)處理。收集形成的沉淀并用Et2O洗滌得到為灰白色固體的標(biāo)題化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.31(t，3H，J＝7.1Hz，CH3)，4.31(m，2H，CH2)，7.29(m，1H，Ph-H)，7.43(s，1H，Ph-H)，7.68(br.s，2H，NH2)和7.85(m，1H，Ph-H)。
2-氯-4-[4-(4-甲基-2-甲基氨基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲酸乙基酯[29]將2-氯-4-胍基-苯甲酸乙基酯(0.76g，3.0mmol)和3-二甲基氨基-1-(4-甲基-2-甲基氨基-噻唑-5-基)-丙烯酮(0.43g，2.0mmol)在2-甲氧基乙醇(5mL)中的混合物用NaOH(80mg)處理。回流24小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮。收集形成的沉淀并從MeOH中重結(jié)晶得到灰色固體的標(biāo)題化合物(149mg)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.35(t，3H，J＝7.1Hz，CH3)，4.36(m，2H，CH2)，6.94(d，1H，J＝5.5Hz；嘧啶基-H)，7.41-7.51(m，2H，Ph-H)，7.90(s，1H，Ph-H)，9.36(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)和9.56(br.s，1H，NH)。
實(shí)施例121-(2-氨基-4-甲基-噻唑-5-基)-乙酮將硫脲(5.18g，0.068mol)在干燥MeOH(20mL)中的混合物攪拌，并在冰浴上冷卻。加入吡啶(2mL)，然后滴加3-氯-2，4-戊二酮(9.15g，0.068mol)。加畢后，將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒗^續(xù)攪拌4小時(shí)。過濾出沉淀并用EtOAc洗滌得到白色固體的標(biāo)題化合物。
N′-[5-(3-二甲基氨基-丙烯酰基)-4-甲基-噻唑-2-基]-N，N-二甲基-甲脒在N2氣氛下，將1-(2-氨基-4-甲基-噻唑-5-基)-乙酮(3.35g，0.021mol)在N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛(10mL)中的溶液回流4-6小時(shí)。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干。將EtOAc加入到殘留物中，并經(jīng)過濾收集沉淀并用EtOAc/PE(5∶1，v/v)洗滌，得到橙色固體的標(biāo)題化合物(50-79％)。
1H-NMR(CDCl3)δ2.64(s，3H，CH3)，3.08(s，6H，CH3)，3.11(s，6H，CH3)，5.35(d，1H，J＝12.2Hz，CH)，7.67(d，1H，J＝12.2Hz，CH)，8.23(s，1H，N＝CH)。
DE MALDI-TOF MS[M+H]+＝267.49(C12H18N6OS理論值266.36)。-(3-硝基-苯基)-胺[30]將N′-[5-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-4-甲基-噻唑-2-基]-N，N-二甲基-甲脒(2.19g，8.2mmol)和3-硝基苯基胍硝酸鹽(2.00g 8.2mmol)在2-甲氧基乙醇(10mL)中的混合物用NaOH(0.33g)處理。在N2氣氛下回流20小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮并經(jīng)硅膠色譜純化，利用EtOAc/PE(7∶1)洗脫，然后從EtOAc/MeOH中重結(jié)晶得到亮黃色固體的標(biāo)題化合物(1.95g，72％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.13(s，3H，CH3)，7.02(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，7.59(m，4H，Ph-H and NH2)，7.82(m，1H，Ph-H)，8.16(m，1H，Ph-H)，8.44(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，8.86(br.s，1H，NH)。
實(shí)施例13[4-(2-氯-4-甲基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[35]將[4-(2-甲氧基-4-甲基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺(0.71g，2.0mmol)在CHCl3(2mL)和DMF(0.14mL)中的溶液在冰浴上冷卻并用SOCl2(1.5mL)處理。將反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并且然后加熱回?.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮，傾入到水(3mL)中，并用CH2Cl2萃取。將有機(jī)相用鹽水洗滌，在MgSO4上干燥，并過濾。蒸發(fā)溶劑，并將殘留物從CH2Cl2中重結(jié)晶得到亮黃色固體的標(biāo)題化合物(61mg)。
分析RP-HPLCtR＝22.7分鐘(0-60％MeCN的0.1％aq CF3COOH溶液洗脫20分鐘，1mL/分鐘，純度＞95％)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.56(s，3H，CH3)，6.61(d，1H，J＝5.5Hz，嘧啶基-H)，7.31(t，1H，J＝8.2Hz，Ph-H)，7.54(m，1H，Ph-H)，7.81(m，1H，Ph-H)和8.32(m，2H，嘧啶基-H和Ph-H)。
實(shí)施例144-乙?；?3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈在-5℃，將氯磺?；惽杷狨?1.60mL，18.38mmol)的乙腈(10mL)溶液緩慢加入至1-(2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-乙酮(1.87g，13.63mmol)在無水乙腈(15mL)和二甲基甲酰胺(5.0mL)中的懸浮液中。將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)，然后溫?zé)嶂潦覝剡^夜。然后將反應(yīng)混合物從冰/水(100mL)中萃取進(jìn)入乙酸乙酯(4×100mL)中。合并有機(jī)物，用鹽水洗滌，在無水硫酸鎂上干燥并濃縮得到淺褐色的固體，從乙醚中重結(jié)晶得到標(biāo)題化合物(1.52g，72％)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ2.29(3H，s，CH3)，2.34(3H，s，CH3)，2.41(3H，s，COCH3)，12.34(1H，s，NH)。
4-乙?；?1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈將4-乙酰基-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈(0.567g，3.5mmol)的四氫呋喃溶液(5mL)加入至冷卻的(0℃)氫化鈉(0.168g，7.0mmol)在四氫呋喃(5mL)中的淤漿中。將反應(yīng)混合物加熱至40℃，并加入碘甲烷(350μL，5.25mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)。冷卻后，用飽和的碳酸鈉水溶液(50mL)終止反應(yīng)，并萃取到乙酸乙酯(3×50mL)中，然后在無水硫酸鎂上干燥，去除溶劑后得到黃色油狀的標(biāo)題化合物(0.443g，72％)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ2.32(3H，s，CH3)，2.37(3H，s，CH3)，2.45(3H，s，COCH3)，3.58(3H，s，NCH3)。
4-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈將4-乙酰基-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈(0.352g，2mmol)溶解在叔丁氧雙(二甲基氨基)甲烷(496μL，2.40mmol)中，并在75℃加熱22小時(shí)。將反應(yīng)混合物溶解在甲醇(10mL)中，并濃縮得到黑色的油狀物。加入乙醚(20mL)后，過濾得到黑褐色的固體產(chǎn)物的標(biāo)題化合物(0.442g，95％)。
1H NMR(d6-DMSO)δ2.20(3H，s，CH3)，2.32(3H，s，CH3)，2.80 & 3.07(6H，s，N(CH3)2)，3.54(3H，s，NCH3)，5.17(1H，d，C＝CH，J＝12.5Hz)，7.45(1H，d，C＝CH，J＝12.5Hz)。
4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[38]將4-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈(0.115g，0.5mmol)、N-(4-二甲基氨基-苯基)-胍硝酸鹽(0.120g，0.5mmol)和碳酸鉀(0.139g，1.0mmol)在2-甲氧基乙醇(4mL)中混合，并將混合物在115℃加熱22小時(shí)。冷卻后，濾出無機(jī)物，并將濾液濃縮至干。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化得到標(biāo)題化合物(53mg，31％)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ2.27(3H，s，CH3)，2.42(3H，s，CH3)，2.83(6H，s，N(CH3)2)，3.63(3H，s，NCH3)，6.68(2H，d，ArH，J＝8.8Hz)，6.71(1H，d，ArH，J＝5.4Hz)，7.51(2H，d，ArH，J＝8.8Hz)，8.35(1H，d，ArH，J＝5.4Hz)，9.11(1H，s，NH)。ESI-MSm/z 347(M++1)。
4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[39]將4-(3-二甲基氨基-丙烯?；?-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈(0.115g，0.5mmol)、N-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基)-胍硝酸鹽(0.143g，0.5mmol)和碳酸鉀(0.139g，1.0mmol)在2-甲氧基乙醇(4mL)中混合，并將混合物在115℃加熱22小時(shí)。冷卻后，濾出無機(jī)物，并將濾液濃縮至干。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化得到標(biāo)題化合物(76mg，39％)。
1H-NMR(d6-DMSO)δ2.29(3H，s，CH3)，2.43(3H，s，CH3)，2.74(6H，s，N(CH3)2)，3.64(3H，s，NCH3)，6.84(1H，d，ArH，J＝4.9Hz)，7.23(1H，d，ArH，J＝8.8Hz)，7.78(1H，dd，ArH，J＝8.8，2.9Hz)，8.38(1H，d，ArH，J＝2.9Hz)，8.45(1H，d，ArH，J＝4.9Hz)，9.66(1H，s，NH)。ESI-MSm/z 392(M++1)。
實(shí)施例15GSK-3β激酶分析GSK-3從New England Biolabs(UK)Ltd.，Hitchin，Herts得到。重組的酶從帶有來自兔骨骼肌cDNA文庫(kù)表達(dá)GSK-3的克隆的E.coli株分離得到[Wang，Q.M.；Fiol，C.J.；DePaoli-Roach，A.A.；Roach，P.J.J.Biol.Chem.，1994，269，14566]。GSK-3功能的抑制通過測(cè)量在受試化合物存在下CREB磷酸肽KRREILSRRPphosphoSYR的磷酸化進(jìn)行測(cè)量。利用96-孔分析形式，將GSK3(7.5U)在多種濃度的受試化合物的存在下在30℃孵育30分鐘，總體積25μL的20mM MOPS pH7.2，25mM β-甘油磷酸，5mM EGTA，1mMDTT，1mM Na3VO3，40μM CREB肽，15mM MgCl2和100μM ATP(包含0.25μCi[γ-32P]-ATP)。將樣品轉(zhuǎn)移到96-孔p81濾板(Whatman Polyfiltronics，Kent，UK)上，將板用200μL/孔的75mM正磷酸水溶液洗滌4次。將閃爍液體(50μL)加入到各孔中，并利用閃爍計(jì)數(shù)器(TopCount，PackardInstruments，Pangbourne，Berks，UK)測(cè)定各樣品摻入的放射活性。
CDK/細(xì)胞周期蛋白激酶分析考察化合物對(duì)CDK2/細(xì)胞周期蛋白E、CDK2/細(xì)胞周期蛋白A、CDK1/細(xì)胞周期蛋白B以及CDK4/細(xì)胞周期蛋白D1的抑制活性。His6-標(biāo)記的重組人細(xì)胞周期蛋白-依賴性激酶CDK1/細(xì)胞周期蛋白B1、CDK2/細(xì)胞周期蛋白E、CDK2/細(xì)胞周期蛋白A以及CDK4利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)在sf9昆蟲細(xì)胞中表達(dá)。重組的細(xì)胞周期蛋白D1在E.coli中表達(dá)。利用金屬螯合親和色譜純化蛋白至大于90％的同質(zhì)性。利用重組CDK/細(xì)胞周期蛋白，在96-孔板中進(jìn)行激酶分析。在分析緩沖液(25mM β-甘油磷酸，20mM MOPS，5mM EGTA，1mMDTT，1mM Na3VO3，pH7.4)中進(jìn)行分析，向其中加入2-4μg的活性酶以及適當(dāng)?shù)牡孜?對(duì)CDK1和CDK2而言為純化的組蛋白H1，對(duì)于CDK4而言為重組的GST-眼癌蛋白(殘基773-928))。加入Mg/ATP混合物(15mM MgCl2+100μM ATP以及30-50kBq/孔的[γ-32P]-ATP)啟動(dòng)反應(yīng)，并將混合物按照需要在30℃孵育10-45分鐘。在冰上終止反應(yīng)，然后濾過p81或GF/C濾板(對(duì)于CDK4)(Whatman Polyfiltronics，Kent，UK)。用75mM正磷酸水溶液洗滌3次后，干燥板，加入閃爍體，并在閃爍計(jì)數(shù)器(TopCount，Packard Instruments，Pangbourne，Berks，UK)上測(cè)量摻入的放射活性。用于激酶分析的化合物配制成10mM的DMSO儲(chǔ)存液并用分析緩沖液稀釋成10％DMSO的溶液。利用曲線擬合軟件(GraphPad Prism version 3.00for Windows，GraphPad Software，San Diego California USA)分析數(shù)據(jù)以確定IC50值(50％抑制激酶活性的測(cè)試化合物的濃度)。
實(shí)施例16L6大鼠肌細(xì)胞和3T3小鼠脂肪細(xì)胞的分化將大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞L6/G8.C5以2.4×105細(xì)胞/10cm培養(yǎng)皿的密度接種在包含青霉素/鏈霉素的DMEM 10％胎牛血清(FCS)中。當(dāng)達(dá)到90％融合的時(shí)候，將培養(yǎng)基用αMEM替換，后者補(bǔ)充2％FCS和青霉素/鏈霉素。每48小時(shí)更新一次培養(yǎng)基并且4-7天后，形成了肌細(xì)胞。
小鼠前脂肪細(xì)胞3T3-F442A以9×105細(xì)胞/10cm培養(yǎng)皿的密度接種在包含青霉素/鏈霉素的DMEM 10％FCS中。當(dāng)達(dá)到90％融合的時(shí)候，相同的培養(yǎng)基補(bǔ)充1μg/mL的胰島素。3-5天后(當(dāng)大部分細(xì)胞分化)撤去胰島素，4天后，細(xì)胞可以使用。
糖原合成酶(GS)分析在10cm培養(yǎng)皿上的細(xì)胞(人胚腎(HEK)293細(xì)胞、L6大鼠肌細(xì)胞，或3T3小鼠脂肪細(xì)胞)用不同濃度的GSK3-抑制劑或DMSO溶媒處理90分鐘。去除培養(yǎng)基并將細(xì)胞用冰冷的磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌，然后在冰上在50mMHEPES，pH7.5，10mM EDTA，100mM NaF，5mM DTT，蛋白酶抑制劑混合物(Sigma)中裂解。凍/融循環(huán)后，將樣品超聲10秒并在4℃在15,000g離心10分鐘。將裂解上清液在液氮上快速凍結(jié)并在-80℃儲(chǔ)存。在緩沖液(50mM Tris-HCl，pH7.8，20mM EDTA，25mM NaF，5mM DTT，1％糖原，0.3mMUDP-葡萄糖和0.06μCi的[14C]-UDP-葡萄糖中在0.1或10mM葡萄糖-6-磷酸存在下分析裂解液的糖原合成酶活性。將反應(yīng)在30℃進(jìn)行30分鐘。將70μL的反應(yīng)混合物(總體積90μL)轉(zhuǎn)移至GFC 96-孔濾板(底部用箔片密封)中，濾板包含140μL的96％乙醇。將GFC板在冰上孵育1小時(shí)并且然后用66％乙醇洗滌。向各孔中，加入100μL液體閃爍體，并利用閃爍計(jì)數(shù)器(Topcount，HP)測(cè)量樣品的放射活性。數(shù)據(jù)表示為相對(duì)于對(duì)照樣品的糖原合成酶活性比值增加的倍數(shù)。
例示的化合物的生物活性總結(jié)在表2中。實(shí)施例化合物[20]和[21]對(duì)細(xì)胞糖原合成酶活性的激活顯示在圖1中。
化合物[20]和[21]增加了HEK293、大鼠肌細(xì)胞以及小鼠脂肪細(xì)胞中的糖原合成酶活性，利用酶的級(jí)分反應(yīng)速率測(cè)量(0.1和10mM葡萄糖-6磷酸底物濃度活性之間的比值)。兩種化合物都以劑量依賴的方式增加GS的活性。在1μM濃度的時(shí)候，兩種化合物化合物在肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞中分別誘導(dǎo)2-和4-倍的GS激活。
實(shí)施例18口服葡萄糖耐量測(cè)試(OGTT)對(duì)于OGTT，使用雄性ZDF fa/fa大鼠(Charles River，USA)，10-11周齡。禁食15小時(shí)后，動(dòng)物經(jīng)靜脈給藥5mg/kg受試化合物在給藥溶媒中的溶液或給藥溶媒(10％DMSO，90％PEG-400)，只在-270和-30分鐘給藥。在0分鐘，大鼠經(jīng)口強(qiáng)飼2g/kg葡萄糖。在OGTT之前以及之后每15分鐘采集血漿樣品測(cè)定血糖。結(jié)果顯示在圖2中。
化合物[20]顯著改善ZDF大鼠中的葡萄糖耐量?；衔颷20]分別降低反應(yīng)性和絕對(duì)AUC的39和22％。用化合物[20]處理后，胰島素水平也下降，暗示葡萄糖降低效果是由于胰島素抗性的改善而不是由于胰島素水平的增加。該結(jié)果證實(shí)了建議的GSK3抑制劑的作用機(jī)制。
在不偏離本發(fā)明的范圍和精神情形下，描述的本發(fā)明方面的各種修飾以及變體對(duì)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言是顯而易見的。盡管本發(fā)明結(jié)合具體的優(yōu)選的實(shí)施方案進(jìn)行了描述，應(yīng)該理解為要求保護(hù)的本發(fā)明不應(yīng)該過度地限制到所述的具體的實(shí)施方案。實(shí)際上，對(duì)化學(xué)領(lǐng)域或相關(guān)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言明顯的實(shí)施本發(fā)明的多種修飾都包括在下述權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。
表1例示的化合物





表2例示的化合物的生物活性
aIC50(CDK2/E)/IC50(GSK3β)bHEK293細(xì)胞，[化合物]＝5μM
權(quán)利要求
1.式I化合物，或其可藥用鹽在制備用于治療糖尿病的藥物中的用途， 其中(A)X和Y之一為S，并且另一個(gè)是N；或X和Y之一為NH或N-R5，并且另一個(gè)是C-R6；“a”為單鍵；“b”、“c”、“d”、“e”和“f”為單或雙鍵以形成雜芳基環(huán)；R1為R7，條件是R1不是H或Me；或(B)X和Y之一為S，并且另一個(gè)是NH或N-R5；“a”和“d”各為雙鍵；“b”、“c”、“e”和“f”各為單鍵；R1為氧代基；以及R2、R3、R4、R5和R6各自獨(dú)立地是H或R7；R7為基團(tuán)(CH2)n-R8，其中n為0、1、2、3或4，并且其中R8選自烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)烷基、F、Cl、Br、I、CF3、NO2、CN、OH、O-烷基、O-芳基、O-雜芳基、O-雜環(huán)烷基、CO-烷基、CO-芳基、CO-雜芳基、CO-雜環(huán)烷基、COO-烷基、NH2、NH-烷基、NH-芳基、N(烷基)2、NH-雜芳基、NH-雜環(huán)烷基、COOH、CONH2、CONH-烷基、CON(烷基)2、CONH-芳基、CONH-雜芳基、CONH-雜環(huán)烷基、SO3H、SO2-烷基、SO2-芳基、SO2-雜芳基、SO2-雜環(huán)烷基、SO2NH2、SO2NH-烷基、SO2N(烷基)2、SO2NH-芳基、SO2NH-雜芳基或SO2NH-雜環(huán)烷基，其中所述的烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)烷基任選被一或多個(gè)選自鹵素、NO2、OH、O-甲基、NH2、COOH、CONH2和CF3的基團(tuán)取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中所述的化合物為式Ia化合物， 其中X和Y之一為N并且另一個(gè)是S；或X和Y之一為NH或N-R5并且另一個(gè)是C-R6；R1為R7，條件是R1不是H或Me，R1-7如權(quán)利要求1中定義。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的用途，其中X為N且Y為S；或X為NH或N-R5且Y為C-R6。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3的用途，其中R1選自CN、CONH2、NO2、鹵素、CH2N(烷基)2、O-烷基、NH2和NH-烷基；R2選自NO2、H、OH、鹵素和烷基；R3選自H、鹵素、OH、CF3、烷基、N(烷基)2、O-烷基、雜環(huán)烷基和COO-烷基；R4為烷基；R5為H或烷基；以及R6為烷基。
5.根據(jù)權(quán)利要求2～4中任一項(xiàng)的用途，其中R1選自CN、CONH2、NO2、Br、Cl、OMe、CH2NMe2、NH2和NHMe；R2選自NO2、H、OH、I、Me、F和Cl；R3選自H、F、OH、CF3、I、Me、Cl、NMe2、OMe、嗎啉代和COOEt；R4為Me；R5為H或Me；以及R6為Me。
6.根據(jù)權(quán)利要求2～5中任一項(xiàng)的用途，其中X為NH或N-R5且Y為C-R6。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的用途，其中R1選自CN、CONH2、NO2、鹵素和CH2N(烷基)2；R2選自NO2、H、OH、鹵素和烷基；R3選自H、鹵素、OH、CF3、烷基和N(烷基)2；R4為烷基；R5為H或烷基；以及R6為烷基。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的用途，其中R1選自CN、CONH2、NO2、Br、Cl和CH2NMe2；R2選自NO2、H、OH、I、Me和F；R3選自H、F、OH、CF3、I、Me、Cl和NMe2；R4為Me；R5為H或Me；以及R6為Me。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其中R1為CN或CONH2；R2為NO2或H；以及R3為F或Me。
10.根據(jù)權(quán)利要求2～5中任一項(xiàng)的用途，其中X為N且Y為S。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的用途，其中R1選自鹵素、NH2和NH-烷基；R2選自NO2、H、OH、鹵素和烷基；R3選自H、鹵素、OH、烷基、N(烷基)2、O-烷基、雜環(huán)烷基和COO-烷基；以及R4為烷基。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的用途，其中R1選自Cl、NH2和NHMe；R2選自NO2、H、OH、Me和Cl；以及R3選自H、F、OH、Me、Cl、NMe2、OMe、嗎啉代和COOEt；以及R4為甲基。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的用途，其中R2為H或NO2；以及R3為Cl或F。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中所述的化合物為式Ib化合物 其中X和Y之一為S，并且另一個(gè)是NH或N-R5；以及R2-5如權(quán)利要求1中定義。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的用途，其中R2選自H、OH、NO2和烷基；R3選自H、鹵素、烷氧基、烷基、N-(烷基)2和OH；以及R4和R5各自獨(dú)立地是烷基。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的用途，其中R2選自H、OH、NO2和Me；R3選自H、Cl、F、OMe、Me、NMe2和OH；以及R4和R5者為Me。
17.根據(jù)權(quán)利要求1～16中任一項(xiàng)的用途，其中所述的式I化合物選自下述化合物3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[1]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[2]；4-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[3]；3，5-二甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[4]；4-[2-(4-碘-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[5]；4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[6]；3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[7]；4-[2-(3-碘-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[8]；4-[2-(4-氯-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[9]；4-[2-(3-羥基-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[10]；4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[11]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[12]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺[13]；[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[14]；N-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N′，N′-二甲基-苯-1，4-二胺[15]；[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[16]；[4-(5-溴-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[17]；[4-(5-氯-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[18]；[4-(5-二甲基氨基甲基-2，4-二甲基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-(4-氟-苯基)-胺[19]；4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[20]；N4-[4-(2，4-二甲基-5-硝基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-N1，N1-二甲基-2-硝基-苯-1，4-二胺[21]；4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[22]；5-[2-(4-氯-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[23]；5-[2-(4-甲氧基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[24]；5-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[25]；5-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[26]；(4-氟-苯基)-[4-(2-甲基-4-苯基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[27]5-[2-(4-氟-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[28]；2-氯-4-[4-(4-甲基-2-甲基氨基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲酸乙基酯[29]；[4-(2-氨基-4-甲基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[30]；3，4-二甲基-5-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[32]；5-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[33]；5-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[34]；[4-(2-氯-4-甲基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基]-(3-硝基-苯基)-胺[35]；3，4-二甲基-5-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[36]；(4-氟-3-甲基-苯基)-[4-(2-甲氧基-4-甲基-噻唑-5-基)-嘧啶-2-基]-胺[37]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[38]；以及4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[39]。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的用途，其中所述的化合物選自下述化合物3，5-二甲基-4-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[1]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[2]；4-[2-(3-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[6]；3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[7]；4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[11]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[12]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺[13]；4-[2-(3-氟-4-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-腈[22]；(4-氟-苯基)-[4-(2-甲基-4-苯基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[27]；3，4-二甲基-5-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[32]；5-[2-(4-羥基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[34]；3，4-二甲基-5-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[36]；5-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[37]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[38]；以及4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[39]。
19.根據(jù)權(quán)利要求17的用途，其中所述的化合物選自下述化合物3，5-二甲基-4-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1H-吡咯-2-腈[7]；4-[2-(4-氟-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，5-二甲基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺[13]；(4-氟-苯基)-[4-(2-甲基-4-苯基-1H-吡咯-3-基)-嘧啶-2-基]-胺[27]；3，4-二甲基-5-[2-(3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[32]；3，4-二甲基-5-[2-(4-甲基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3H-噻唑-2-酮[36]；5-[2-(4-氟-3-甲基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-3，4-二甲基-3H-噻唑-2-酮[37]；4-[2-(4-二甲基氨基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[38]；以及4-[2-(4-二甲基氨基-3-硝基-苯基氨基)-嘧啶-4-基]-1，3，5-三甲基-1H-吡咯-2-腈[39]。
20.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的用途，其中所述的糖尿病為II型糖尿病。
21.如權(quán)利要求1～19中任一項(xiàng)定義的式I化合物、或其可藥用鹽在制備用于治療CNS疾病的藥物中的用途。
22.根據(jù)權(quán)利要求21的用途，其中CNS疾病為阿耳茨海默氏病。
23.根據(jù)權(quán)利要求21的用途，其中CNS疾病為雙相性精神障礙。
24.如權(quán)利要求1～19中任一項(xiàng)定義的式I化合物或其可藥用鹽在制備用于治療心血管疾病的藥物中的用途。
25.根據(jù)權(quán)利要求24的用途，其中心血管疾病為心肌梗塞。
26.如權(quán)利要求1～19中任一項(xiàng)定義的式I化合物或其可藥用鹽在制備用于治療中風(fēng)的藥物中的用途。
27.如權(quán)利要求1～19中任一項(xiàng)定義的式I化合物或其可藥用鹽在制備用于治療禿發(fā)癥的藥物中的用途。
28.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的用途，其中所述的式I化合物或其可藥用鹽與可藥用稀釋劑、賦形劑或載體混合。
29.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的用途，其中所述的式I化合物與一或多種其他的活性劑組合給藥。
30.一種治療GSK3-依賴性疾病的方法，所述的方法包括對(duì)需要的對(duì)象以足以抑制GSK3的量施用如權(quán)利要求1～19中任一項(xiàng)定義的式I化合物或其可藥用鹽。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中式I的化合物或其可藥用鹽以足以抑制GSK3β的量給予。
32.根據(jù)權(quán)利要求30或31的方法，其中GSK3-依賴性疾病選自糖尿病、CNS疾病、心臟疾病、中風(fēng)和禿發(fā)癥。
33.一種抑制細(xì)胞中GSK3的方法，包括將所述的細(xì)胞與一定量的式I化合物或其可藥用鹽接觸以使所述的細(xì)胞中的GSK3被抑制。
34.一種治療糖尿病的方法，包括通過對(duì)需要的對(duì)象施用治療有效量的式I化合物或其可藥用鹽抑制GSK3，以治療糖尿病。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I化合物或其可藥用鹽在制備用于治療糖尿病的藥物中的用途，其中(A)X和Y之一為S，并且另一個(gè)是N；或X和Y之一為NH或N－R
文檔編號(hào)A61P17/14GK1720049SQ200380104697
公開日2006年1月11日 申請(qǐng)日期2003年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月19日
發(fā)明者王淑東, 克里斯托弗·米德斯, 加文·伍德, 肯尼思·鄧肯, 達(dá)尼拉·澤維拉, 彼得·費(fèi)希爾 申請(qǐng)人:西克拉塞爾有限公司