專利名稱：帶有修飾的內(nèi)酯環(huán)的喜樹堿的制作方法
這里描述的本發(fā)明涉及用作藥物的化合物，特別是具有內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)修飾的喜樹堿的衍生物，涉及它們的制備方法，涉及它們作為具有拓撲異構(gòu)酶I抑制活性的活性試劑的用途，和涉及含有這些化合物作為活性成分的藥物組合物。
背景技術(shù)：
喜樹堿是由Wall等(J.Am.Chem.Soc.，88，3888-3890(1966))第一次從屬于紫樹(Nyssaceae)科的中國本生植物喜樹(Camptothecaacuminata)樹中分離的一種生物堿。該分子由E環(huán)中帶有內(nèi)酯的五環(huán)結(jié)構(gòu)構(gòu)成，其對于細胞毒性是必需的。
有關(guān)喜樹堿和涉及它們用作藥物的問題以及多種這樣問題的解決的綜述，參見以申請人名義申請的歐洲專利EP 1044977。
關(guān)于使喜樹堿能發(fā)揮其藥學(xué)活性所必需的分子的一部分的內(nèi)酯環(huán)的問題，已經(jīng)完全解決的一個方面是環(huán)本身的穩(wěn)定性，進而對藥物的半衰期起作用。
以Societède Conseils de Recherches et d′ApplicationsScientifiques的名義在1997年1月9日公開的專利申請WO 97/00876中描述了喜樹堿，其中內(nèi)酯環(huán)從其原來的α-羥基內(nèi)酯結(jié)構(gòu)被修飾成β-羥基內(nèi)酯結(jié)構(gòu)(高喜樹堿(homocamptothecins))，使得內(nèi)酯環(huán)從六個成環(huán)原子變?yōu)槠邆€成環(huán)原子。這些化合物抑制拓撲異構(gòu)酶I DNA松弛活性并且被賦予抗幾種腫瘤系的細胞毒性活性。β-羥基內(nèi)酯結(jié)構(gòu)被定義為α-羥基內(nèi)酯結(jié)構(gòu)中羧基碳原子和帶有α-羥基的碳原子之間增加一個碳原子的內(nèi)酯。為了提高內(nèi)酯環(huán)的穩(wěn)定性，發(fā)明人建議在增加的碳原子上有取代基，并且指出的取代基是低級烷基和低級烷氧基、鹵原子或羥基。在提到的專利申請中沒有提供內(nèi)酯環(huán)穩(wěn)定性改善的證據(jù)。在隨后的專利申請中，1998年7月2日公開的WO 98/28304，同一申請人描述了帶有β-羥基內(nèi)酯結(jié)構(gòu)的其他喜樹堿，其中用能在體內(nèi)使之復(fù)原的基團將羥基官能化，從而有效提供前面專利申請中描述的分子的前體藥物，并且還解決了現(xiàn)有技術(shù)中存在的產(chǎn)品的嚴重副作用問題。在這個申請中，同樣沒有提供已經(jīng)解決技術(shù)難題的實驗證據(jù)。在J.Med.Chem.，1998，Vol 41，No 27，5410-5419中，和上面提到的專利申請相同的發(fā)明人指出了其中描述為用作提高內(nèi)酯環(huán)的穩(wěn)定性并從而用作制備其他喜樹堿衍生物的有用模型的手段的位置7上的內(nèi)酯。還可見Bioorg.Med.Chem.Lett.，9，(1999)2599-2602；Biochemistry，1999，38，15556-15563；Cancer Research，59，2939-2943。高喜樹堿A和B環(huán)上的其他修飾描述于WO 00/61146，University of Pittsburgh等，2000年10月19日公開，和J.Med.Chem.，1999，42，3018-3022，所謂的″homosilatecans″，其是有效的穩(wěn)定的拓撲異構(gòu)酶I抑制劑。具有其他修飾的高喜樹堿描述于J.Med.Chem.，2000，43，2285-2289，An-cancer Drug Design，(2001)，12，9-19，其中由于A環(huán)的氟化而提高了抗癌活性。關(guān)于用氯在12位的取代作用還可見Anti-canner DrugDesign，(2001)，16，27-36。
2001年9月18日公開的University of Kentucky的US 6,291,676中描述了高喜樹堿的水溶性問題，其中利用7位(多)烷基胺型的各種取代作用。
然而新的藥物各種問題的設(shè)計中很多都遭遇物理化學(xué)性質(zhì)，例如分子在血漿中的穩(wěn)定性或者用于配制目的的水溶性，對于更好的治療指數(shù)存在不斷的探索。
發(fā)明概述現(xiàn)在令人驚奇地發(fā)現(xiàn)帶有修飾的內(nèi)酯環(huán)的取代的7-肟喜樹堿被賦予強的抗癌活性并且在血漿中是穩(wěn)定的。這些化合物具有更好的治療指數(shù)。
因此這里描述的本發(fā)明的目的是通式(I)和(II)的化合物
其中R1是氫或-C(R5)＝N-O-R4基團，其中R4是氫或直鏈或支鏈的C1-C5烷基或C1-C5鏈烯基，或C3-C10環(huán)烷基，或直鏈或支鏈的(C3-C10)環(huán)烷基-(C1-C5)烷基，或C6-C14芳基，或直鏈或支鏈的(C6-C14)芳基-(C1-C5)烷基，或雜環(huán)基團或直鏈或支鏈的雜環(huán)-(C1-C5)烷基，所述雜環(huán)基團含有至少一個選自氮原子的雜原子，其任選地被(C1-C5)烷基取代，和/或選自氧和/或硫原子的雜原子；所述烷基，鏈烯基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，芳基，芳基-烷基，雜環(huán)或雜環(huán)-烷基任選地被選自下面的一個或多個基團取代鹵原子，羥基，(C1-C5)烷基，(C1-C5)烷氧基，苯基，氰基，硝基和-NR6R7，其中R6和R7，相同或不同，是氫、直鏈或支鏈(C1-C5)烷基、-COOH基團，或者其藥學(xué)可接受酯中的一種；或者-CONR8R9基團，其中R8和R9相同或不同，是氫、直鏈或支鏈(C1-C5)烷基；或者R4是(C6-C10)芳酰基或(C6-C10)芳基磺?；鶜埢?，任選地被選自下面的一個或多個基團取代鹵原子，羥基，直鏈或支鏈(C1-C5)烷基，直鏈或支鏈(C1-C5)烷氧基，苯基，氰基，硝基，-NR10R11，其中R10和R11相同或不同，是氫、直鏈或支鏈(C1-C5)烷基，或者R4是多氨基烷基殘基；或者R4是糖基殘基；R5是氫，直鏈或支鏈的C1-C5烷基，直鏈或支鏈的C1-C5鏈烯基，C3-C10環(huán)烷基，直鏈或支鏈的(C3-C10)環(huán)烷基-(C1-C5)烷基，C6-C14芳基，直鏈或支鏈的(C6-C14)芳基-(C1-C5)烷基；R2和R3相同或不同，是氫、羥基、直鏈或支鏈(C1-C5)烷氧基；n＝1或2，Z選自氫，直鏈或支鏈的C1-C4烷基；N1-氧化物，外消旋混合物，它們各自的對映異構(gòu)體，它們各自的非對映異構(gòu)體，它們的混合物，和它們的藥學(xué)可接受鹽，前提是，在式(I)中，R1，R2和R3不能同時是氫。
本發(fā)明包括上面提到的式(I)和(II)的化合物作為藥物、特別是用作拓撲異構(gòu)酶I抑制劑的藥物的活性成分的用途。源自拓撲異構(gòu)酶I抑制作用的治療應(yīng)用中，我們應(yīng)該提到腫瘤和寄生蟲或病毒感染的治療。
本發(fā)明包括含有與藥學(xué)可接受載體和賦形劑混合的作為活性成分的式(I)和/或式(II)的化合物的藥物組合物。
本發(fā)明還包括式(I)和(II)的化合物以及關(guān)鍵中間體產(chǎn)物的制備方法。
本發(fā)明的詳細描述在本發(fā)明的框架內(nèi)，理解直鏈或支鏈的C1-C5烷基的例子包括甲基，乙基，丙基，丁基，戊基和它們的可能的異構(gòu)體，例如異丙基，異丁基，和叔丁基。
直鏈或支鏈的C1-C5鏈烯基的例子是次甲基，亞乙基，乙烯基，烯丙基，炔丙基，丁烯，和戊烯，其中碳-碳雙鍵可以處于亞烷基環(huán)的各種可能的位置，在允許的異構(gòu)情況下其也可以是支化的。
C3-C10環(huán)烷基的例子是環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)辛基，和多環(huán)基團，例如，金剛烷基。
直鏈或支鏈的(C3-C10)環(huán)烷基-(C1-C5)烷基的例子是環(huán)丙基甲基，2-環(huán)丙基乙基，1-環(huán)丙基乙基，3-環(huán)丙基丙基，2-環(huán)丙基丙基，1-環(huán)丙基丙基，環(huán)丁基甲基，2-環(huán)丁基乙基，1-環(huán)丁基乙基，3-環(huán)丁基丙基，2-環(huán)丁基丙基，1-環(huán)丁基丙基，環(huán)己基甲基，2-環(huán)己基乙基，1-環(huán)己基乙基，3-環(huán)己基丙基，2-環(huán)己基丙基，1-環(huán)己基丙基，5-環(huán)己基戊基，3-環(huán)己基戊基，3-甲基-2-環(huán)己基丁基，1-金剛烷基乙基，2-金剛烷基乙基，金剛烷基甲基。
直鏈或支鏈的(C6-C14)芳基或(C6-C14)芳基-(C1-C5)烷基的例子是苯基，1-或2-萘基，蒽基，芐基，2-苯基乙基，1-苯基乙基，3-苯基丙基，2-蒽基丙基，1-蒽基丙基，萘基甲基，2-萘基乙基，1-萘基乙基，3-萘基-丙基，2-萘基丙基，1-萘基丙基，環(huán)己基甲基，5-苯基戊基，3-苯基戊基，3-甲基-2-苯基丁基。
直鏈或支鏈的雜環(huán)或雜環(huán)-(C1-C5)烷基的例子是噻吩基，喹啉基，吡啶基，N-甲基哌啶基，5-四唑基，2-(4，5-二氫噁唑基)，1，2，4-噁二唑烷-3-基-5-酮，嘌呤和嘧啶堿基，例如尿嘧啶基，任選地根據(jù)在上面一般定義中指明的被取代。
(C6-C10)芳?；睦邮潜郊柞；洼良柞；?。
(C6-C10)芳基磺酰基的例子是甲苯磺?；捅郊柞；酋；?br> 鹵原子的例子是氟，氯，溴和碘。
取代基的例子是五氟苯基，4-苯基芐基，2，4-二氟芐基，4-氨基丁基，4-羥基丁基，二甲基氨基乙基，p-硝基苯甲酰基，p-氰基苯甲酰基。
多氨基烷基殘基的例子是-(CH2)m-NR12-(CH2)p-NR13-(CH2)q-NH2，其中m，p和q是包括2-6的整數(shù)，而R12和R13是直鏈或支鏈(C1-C5)烷基，例如4-氨基丁基-2-氨基乙基，3-氨基-丙基-4-氨基丁基，3-氨基丙基-4-氨基丁基-3-氨基丙基。
糖基殘基的例子是6-D-半乳糖基和6-D-葡糖基。
藥學(xué)可接受鹽的例子是，在堿性是氮原子的情況下，與藥學(xué)可接受酸的鹽，無機酸和有機酸，例如，鹽酸，硫酸，乙酸，或者，在酸基的情況下，例如羧基，與藥學(xué)可接受堿的鹽，例如，堿金屬和堿土金屬氫氧化物，氫氧化銨和胺類，包括雜環(huán)胺。
第一組優(yōu)選的化合物包括其中內(nèi)酯環(huán)是7-或8-元，特別是7-元的式(I)化合物。
第二組優(yōu)選的化合物包括其中內(nèi)酯環(huán)是5-元的式(II)化合物。
在上面提到的兩組優(yōu)選的化合物中，優(yōu)選的那些是式(I)化合物，其中R4不為氫，并且特別是直鏈或支鏈的C1-C5烷基或C1-C5鏈烯基，或C3-C10環(huán)烷基，或(C3-C10)環(huán)烷基-(C1-C5)烷基，或直鏈或支鏈的C6-C14芳基，或(C6-C14)芳基-(C1-C5)烷基，或直鏈或支鏈的雜環(huán)基團或雜環(huán)-(C1-C5)烷基，所述雜環(huán)基團含有至少一個選自氮原子的雜原子，其任選地被(C1-C5)烷基取代，和/或氧和/或硫原子的雜原子；所述烷基，鏈烯基，環(huán)烷基，芳基，芳基-烷基，雜環(huán)或雜環(huán)-烷基任選地被選自下面的一個或多個基團取代鹵原子，羥基，(C1-C5)烷基，(C1-C5)烷氧基，苯基，氰基，硝基，-NR6R7，其中R6和R7相同或不同，是直鏈或支鏈(C1-C5)烷基，-COOH基團，或者其藥學(xué)可接受酯中的一種；或者-CONR8R9基團，其中R8和R9相同或不同，是氫，直鏈或支鏈(C1-C5)烷基；根據(jù)的是上面作為例子描述的定義。
最初一組特別優(yōu)選的化合物由帶有7-元內(nèi)酯環(huán)的式(I)化合物組成，其中，特別是R，S-7-甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-乙氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-異丙氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(2-甲基丁氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(1-叔丁氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿(ST2127)；R，S-7-(4-羥基丁氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-三苯基甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-羧基甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-氨基乙氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(N，N-二甲基氨基乙氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-烯丙氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-環(huán)己基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-環(huán)己基甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-環(huán)辛基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-環(huán)辛基甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿(ST2143)；
R，S-7-(芐基氧基)亞氨基苯基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(1-芐基氧基)亞氨基乙基-高喜樹堿；R，S-7-(1-叔丁氧基)亞氨基乙基-高喜樹堿；R，S-7-對-硝基芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-對-甲基芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-五氟芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-對-苯基芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(2，4-二氟芐基甲氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(4-叔丁基苯基甲氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(1-金剛烷基氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(1-金剛烷基甲氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(2-萘基氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(9-蒽基甲氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(6-尿嘧啶基)甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(4-吡啶基)甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-(2-噻吩基)甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-[(N-甲基)-3-哌啶基]甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；R，S-7-羥基亞氨基苯基甲基-高喜樹堿。
這些化合物中，最優(yōu)選的那些是R，S-7-(1-叔丁氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿(ST2127)和R，S-7-芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿(ST2143)。
第二組特別優(yōu)選的化合物由帶有5-元內(nèi)酯環(huán)的式(II)化合物組成，并且具有和前面基團R1一樣的定義。
這些化合物中，最優(yōu)選的那些是{10-[(E)-(叔丁氧基亞氨基)甲基]-3-乙基-1，13-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并(furo)[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基}乙酸(ST2196)，(10-{(E)-[(芐氧基)亞氨基]甲基}-3-乙基-1，13-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并(furo)[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基)乙酸(ST2285)和(3-乙基-1，13-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并(furo)[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基)乙酸(ST2085)。
在本發(fā)明第一個優(yōu)選的實施方案中，就通式(I)化合物而言，其中內(nèi)酯環(huán)是7-或8-元的。在本發(fā)明第二個優(yōu)選的實施方案中，就通式(II)化合物而言，其中內(nèi)酯環(huán)是5-元的。
用下面描述的并且對于根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選化合物舉例說明的方法能制備式(I)化合物。
對式(I)和(II)涵蓋的所有的化合物應(yīng)用下面的反應(yīng)流程圖對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的，因為其充分描述了，一方面，帶有7-/8-元內(nèi)酯環(huán)，另一方面，帶有5-元環(huán)的兩類化合物的制備方法。兩個結(jié)構(gòu)式涵蓋的各種化合物的制備在于7位的取代基不同。
在上面提到的EP 104977中充分而完全地描述了這種制備。
關(guān)于其中R1是氫的式(I)和(II)化合物，起始化合物是喜樹堿，根據(jù)上面針對R2和R3的定義在8和9位任選地被取代。
在其中R1不是氫的式(I)和(II)化合物的情況下，在喜樹堿原內(nèi)酯環(huán)修飾之前不能發(fā)生獲得最終化合物的7位的官能化作用，擴展到7或8元的情況和限制到5元的情況都是如此。為了這個目的，證明發(fā)現(xiàn)用于合成途徑的合適的中間體產(chǎn)物是必需的。這種關(guān)鍵中間體是7-(二烷氧基甲基)喜樹堿。這種新的化合物是本發(fā)明的另一個目的。其中，優(yōu)選的化合物是7-(二甲氧基甲基)喜樹堿。在無機酸例如硫酸，和合適的氧化系統(tǒng)，例如硫酸鐵/過氧化氫，然后另一種氧化劑，例如二氧化錳的存在下，喜樹堿與也能用作反應(yīng)介質(zhì)的期望的醇反應(yīng)，獲得7-(二烷氧基甲基)喜樹堿。
使喜樹堿，或者其7-(二烷氧基甲基)衍生物在19位的羰基經(jīng)歷選擇性還原，獲得相應(yīng)的19，20-二羥基衍生物。在室溫至50℃的溫度下，在醇溶劑的存在下，在還原劑例如混合的Al或B的氫化物，并且如方案中例示的氫硼化鈉1至10當(dāng)量的存在下，進行還原作用1-16小時。接著蒸發(fā)溶劑，并且在下面的步驟中使用粗產(chǎn)物，其中用1至10當(dāng)量的氧化劑，例如高碘酸鹽或乙酸鉛使19，20-二羥基衍生物形式的E環(huán)開環(huán)。該反應(yīng)方便地在有機溶劑中進行，例如甲苯，二氯甲烷或乙酸，反應(yīng)時間是1至24小時，溫度范圍是室溫至50℃。真空去除溶劑，并且通過色譜法或一些其他等價方法最后純化產(chǎn)物。接著將這樣獲得的中間產(chǎn)物溶解于合適的溶劑介質(zhì)，優(yōu)選溶劑的混合物，然后使進行公知的Reformatsky反應(yīng)，其中ω-溴代羧酸合適地被選作式(I)或(II)針對的n值的官能。在這一點上，在涉及式(I)化合物的本發(fā)明的實施方案的上下文中，向溶解于合適的溶劑混合物，例如二氯甲烷，乙酸和二甲基甲酰胺，任選地在酸(例如，三氟乙酸或路易斯酸)的存在下和在縮合劑(二環(huán)己基碳化二亞胺-DCC-或1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽)或脫水劑(例如，硫酸鈉或鎂，或分子篩)的存在下，向Reformatsky反應(yīng)的產(chǎn)物加入1至10當(dāng)量的合適的羥胺NH2OR4，其也是鹽的形式，其中R4具有上述定義，時間范圍是1至24小時，溫度范圍是室溫至溶劑沸點，獲得最后的式(I)化合物。提高去除溶劑和通過色譜法進行最后的純化來分離最終產(chǎn)物。或者，在本發(fā)明第二個優(yōu)選的實施方案的上下文中，即其中內(nèi)酯環(huán)是5-元的式(II)化合物，Reformatsky反應(yīng)的產(chǎn)物溶解于有機溶劑的混合物，例如二氯甲烷，乙酸和乙腈之后，在0℃至溶劑的沸點的溫度范圍用1至10當(dāng)量的氧化劑(例如，鉻酸，吡啶鎓重鉻酸鹽-PDC-氧化錳，Na2RuO4)處理30分鐘至24小時。然后真空去除溶劑并且通過色譜法純化產(chǎn)物。將得到的化合物溶解于合適的有機溶劑，例如，二氯甲烷或者含水溶劑，并且用有機或無機酸酸解，例如三氟乙酸，鹽酸，或高氯酸，時間范圍是1至24小時，溫度范圍是0℃至溶劑的沸點。然后去除后者并且通過結(jié)晶分離產(chǎn)物。如果期望，如上所述產(chǎn)物最后與羥胺NH2OR4反應(yīng)。如果期望得到式(II)化合物，其中Z是氫，則將通過上述方法獲得的化合物進行合適的處理，根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員常見的常規(guī)酯解方法釋放羧基功能。
上面提到的專利EP 1044977中充分描述了與羥胺NH2OR4的反應(yīng)，這是制備可能的N-氧化物。
用文獻中報道的常規(guī)方法獲得藥學(xué)可接受鹽，不需要任何進一步描述。
本發(fā)明描述的化合物是拓撲異構(gòu)酶I抑制劑，因此用作藥物，特別用于治療因抑制所述拓撲異構(gòu)酶受益的疾病。特別地，根據(jù)本發(fā)明的化合物顯示抗增殖活性，因此由于其治療活性而被使用并且具有使得它們適合藥物組合物配制的物理化學(xué)性質(zhì)。
藥物組合物含有產(chǎn)生顯著治療作用量的至少一種作為活性成分的式(I)和/或式(II)化合物。本發(fā)明包括的組合物完全是常規(guī)的并且用制藥工業(yè)常規(guī)操作的方法獲得。根據(jù)選擇的給藥途徑，組合物是固體或液體形式，適合口服，腸胃外，或靜脈內(nèi)給藥。根據(jù)本發(fā)明的組合物和活性成分一起含有至少一種藥學(xué)可接受載體或賦形劑。特別有用的是配藥佐劑，例如增溶劑、分散劑、懸浮劑和乳化劑。
式(I)化合物還可以與其他活性成分混合使用，例如，其他抗癌藥物或者具有抗寄生蟲或抗病毒活性的其他藥物，以分開的和單一劑量形式。
根據(jù)本發(fā)明的化合物用作具有抗癌活性的藥物，例如，治療肺癌，例如非-微小細胞瘤肺癌，或結(jié)腸直腸癌或前列腺癌或神經(jīng)膠質(zhì)瘤。
在人腫瘤細胞系統(tǒng)中，利用抗增殖活性試驗作為評價細胞毒性可能性的方法，分析了根據(jù)本發(fā)明的化合物的細胞毒性活性。
使用的細胞系是稱作NCI H460的非-微小細胞瘤肺腺癌，屬于NSCLC(非小細胞肺癌)類。
抗癌活性為了評價根據(jù)本發(fā)明的化合物的作用，評價它們的抗非-微小細胞瘤肺癌細胞系(NCI-H460)的細胞毒性。在含有10％胎牛血清和50微克/毫升濃度硫酸慶大霉素的RPMI 1640(GIBCO)的培養(yǎng)物中維持培養(yǎng)從美國典型培養(yǎng)物中心(ATCC)獲得的細胞。
將細胞接種到96-孔板中250微升體積中并且在37℃下溫育24小時。第二天，以1μM至0.004μM標量濃度加入研究化合物，并且在含有5％CO2的潮濕氣氛下將細胞在37℃下又溫育2小時。將細胞清洗三次，每次顛倒平板并且加入PBS。加入200微升/孔的含有10％FCS的RPMI 1640，并且將平板在37℃下又溫育72小時。第5天，反轉(zhuǎn)平板去除生長培養(yǎng)基，并且加入200微升/孔的PBS和50微升的80％冷的TCA。平板在冰中溫育至少1小時。通過反轉(zhuǎn)去除TCA；通過浸入蒸餾水中將板清洗3次，并且首先在吸水紙(blotting paper)上干燥之后置于熱風(fēng)噴射器(jet of hot air)下。向所有的孔中加入200微升的1％乙酸中的0.4％sulforodamine B。平板在室溫下又溫育30分鐘。通過反轉(zhuǎn)去除sulforodamine B；通過在1％乙酸中浸入三次清洗平板，然后首先在吸水紙上干燥之后置于熱風(fēng)噴射器下。向所有的孔中加入200微升的Tris堿10mM，并且將平板攪動至少20分鐘。使用Multiskan分光光度計在540nm下測定光密度。
表1代表對于測試的各個化合物的IC50值，也就是能抑制50％細胞存活的濃度，使用ALLFIT軟件處理。
表1產(chǎn)物 NCI-H460IC50(μM)ST2084＞1ST2085＞1ST21270.026ST21430.007ST2196＞1ST2285＞1參照上面給出的流程圖，下面的實施例進一步詳細描述本發(fā)明。
制備17-(二甲氧基甲基)喜樹堿(ST2337)的合成攪拌下用冰浴冷卻下，向1.53g(4.4毫摩爾)的喜樹堿在92毫升甲醇中的懸浮液中緩慢加入9.2毫升的H2SO496％，將混合物的溫度保持低于50℃。將這樣獲得的懸浮液加熱至回流溫度；達到50℃時，加入46毫克的FeSO4·7H2O之后滴加3毫升的H2O230％，將反應(yīng)保持在回流溫度。將反應(yīng)攪拌2小時，通過TLC檢查起始物的消失。反應(yīng)完全時，將懸浮液冷卻至25℃并且加入2.8毫升的MnO2；將混合物攪拌2小時，通過TLC檢查中間體產(chǎn)物的消失。然后讓懸浮液通過Gooch過濾器上放置的一層硅藻土層過濾。將濾液濃縮至25毫升之后傾入NaHCO3的水溶液中使得獲得pH6的溶液。過濾沉淀并且在硅膠色譜柱上純化(洗脫劑CH2Cl2/MEOH 99/1)。獲得1.02g(2.42毫摩爾，55％)產(chǎn)物，其為黃色固體。
C23H22N2O6(422，4)；m.p.(分解)＝201℃；Rf＝0.5(CH2Cl2/MeOH 92/8)。
MS(IS)[M+Na]+＝445；[M-1]-＝421，元素分析計算值C 65.40，H 5.21，N 6.64；實測值C65.37，H 5.22，N 6.67。
1H NMR(CDCl3)δ＝1.00-1.06(t，3H，CH3)，1.82-1.97(m，2H，CH2)，3.40(s，3H，CH3)，3.43(s，3H，CH3)，5.28-(5.33-5.72)-5.78(dd，2H，CH2)，5.47(s，2H，CH2)，6.24(s，1H，CH)，7.62-7.70(m，2H，CH+CHAr)，7.78-7.84(t，1H，CHAr)，8.23-8.33(m，2H，CHAr)。
13C NMR(CDCl3)δ＝8.0；31.9；52.1；52.9；53.2；66.7；72.9；98.1；100.5；119.0；124.6；125.9；127.8；128.4；130.5；138.4；146.2；149.4；150.2；152.7；158.0；174.1。
制備2中間產(chǎn)物2a的合成向70毫升的MeOH中2.12g(56毫摩爾，3.3當(dāng)量)的NaBH4的溶液加入7.2g(17毫摩爾)的7-二甲基乙縮醛喜樹堿(1a)將這樣獲得的混合物在室溫下攪拌1小時。在這項操作之后加入丙酮破壞過量的NaBH4，并且將溶液干燥。通過在硅膠上的急驟層析來純化粗反應(yīng)產(chǎn)物(洗脫梯度CH2Cl2/MeOH 92/8 CH2Cl2/MeOH 7/3)，得到3.7g(8.7毫摩爾，51％)的產(chǎn)物，其為黃色固體。
C23H24N2O6(424.5)；Rf＝0.41(第一種異構(gòu)體)，0.35(第二種異構(gòu)體)(CH2Cl2/MeOH 92/8)。
MS(IS)[MH]+＝425；[M+Na]+＝447；[M-1]-＝423。
元素分析計算值C 65.09，H 5.66，N 6.60；實測值C 65.12，H 5.68，N 6.57。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝0.84-0.90(t，3H，CH3)，1.65-1.73(m，2H，CH2)，3.38(s，6H，CH3)，4.43-(4.50-4.57)4.64(dd，2H，CH2)，4.98(s，1H，CH)，5.28(s，2H，CH2)，6.32(s，1H，CH)，7.38(s，1H，CH)，7.66-7.73(t，1H，CHAr)，7.8-7.88(t，1H，CHAr)，8.14-8.17(d，1H，CHAr)，8.3-8.33(d，1H，CHAr)。
13C NMR(DMSO-d6)δ＝7.6；32.4；50.7；53.1；53.5；58.2；70.1；78.3；92.5；96.0；98.4；100.3；123.1；124.9；127.3；129.4；129.9；137.6；142.3；148.3；150.1；153.1；157.1。
制備3中間產(chǎn)物3a的合成向100毫升的CH3COOH中5.52g(1 3毫摩爾)的2a的溶液加入4.17g的NaIO4(19.5毫摩爾，1.5當(dāng)量)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?6小時；在這項操作之后，將溶液濃縮并且用CH2Cl2稀釋，然后用NaHCO3萃取至中性pH。有機相用Na2SO4干燥并且蒸發(fā)至干。通過在硅膠上的急驟層析來進行純化(洗脫劑CH2Cl2/MeOH 98/2)，得到3.58g(8.48毫摩爾，65％)的產(chǎn)物，其為黃色固體。
C23H22N2O6(422.4)；m.p.(分解)＝150℃；Rf＝0.6(CH2Cl2/MeOH 95/5)。
元素分析計算值C 65.40，H 5.21，N 6.64；實測值C 65.39，H 5.23，N 6.61。
MS(IS)[MH]+＝423；[M+Na]+＝445。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝1.07-1.2(t，3H，CH3)，2.96-3.3(m，2H，CH2)，3.37(s，6H，CH3)，5.12(s，2H，CH2)，5.18(s，2H，CH2)，6.37(s，1H，CH)，7.38(s，1H，CH)，7.73-7.79(t，1H，CHAr)，7.86-7.92(t，1H，CHAr)，8.16-8.20(d，1H，CHAr)，8.27(s，1H，CH)，8.33-8.37(d，1H，CHAr)。
制備4中間產(chǎn)物4a的合成保持在氬氣下和攪拌下，通過滴加0.87毫升(6.8毫摩爾)的氯代三甲基甲硅烷將60毫升無水(蒸餾)Et2O中7.6g(116毫摩爾)鋅的懸浮液活化。將懸浮液攪拌15分鐘，然后提高到回流溫度。去除油浴，以一定速度滴加17.5毫升(118毫摩爾)的溴乙酸叔丁酯使得混合物保持在回流溫度下得到無色溶液?；謴?fù)加熱之后，將反應(yīng)在回流溫度下保持1小時；在該階段結(jié)束之后，加入45毫升無水(蒸餾)THF中的2.3g(5.45毫摩爾)3a的懸浮液，將反應(yīng)保持在氬氣下。1小時之后，混合物變成黃色溶液，加入200毫升的飽和氯化銨溶液并且用CH2Cl2萃??；有機相用Na2SO4干燥，蒸發(fā)溶劑并且通過在硅膠上的急驟層析來純化粗產(chǎn)物(洗脫梯度CH2Cl2→CH2Cl2/MeOH 98/2)，得到1.6g(3.14毫摩爾，58％)的產(chǎn)物，其為黃色固體。
C28H34N2O7(510.6)；m.p.(分解)＝190℃；Rf＝0.3(CH2Cl2/MeOH 98/2)；Rf＝0.5(CH2Cl2/MeOH 95/5)。
MS(IS)[MH]+＝511；[M+Na]+＝533；[M-1]-＝509。
元素分析計算值C 65.88，H 6.67，N 5.49；實測值C 66.00，H 6.68，N 5.47。
1H NMR(CDCl3)δ＝0.90-0.95(t，3H，CH3)，1.38(s，9H，t-Bu)，1,93-2,08(m，2H，CH2)，2,8-(2,86-3,08)3，14(dd，2H，CH2)，3.4(s，6H，CH3)，5.06-(5.01-5.13)-5.17(d，2H，CH2)，5.47(s，2H，CH2)，6.24(s，1H，CH)，7.47(s，1H，CH)，7.64-7.69(t，1H，CHAr)，7.79-7.84(t，1H，CHAr)，8.23-8.32(m，2H，CHAr)。
13C NMR(CDCl3)δ＝8.4；28.2；34.8；45.5；52.0；53.0；53.1；59.1；82.7；100.6；101.0；124.8；125.9；128.0；128.2；130.0；130.4；130.5；138.6；142.4；148.9；152.9；155.2；162.6；172.6。
制備5中間產(chǎn)物5a的合成將383毫克(0.75毫摩爾)的4a和564毫克(1.5毫摩爾，2當(dāng)量)的PDC懸浮于4毫升的無水CH2Cl2中；攪拌下將這樣獲得的混合物置于室溫下。16小時之后通過蒸發(fā)去除溶劑并且通過在硅膠柱上的急驟層析來純化這樣獲得的粗產(chǎn)物(洗脫劑CH2Cl2/MeOH 99/1)，得到280毫克(0.55毫摩爾，74％)的產(chǎn)物。
C28H30N2O7(506.5)；m.p.(分解)＝210℃；Rf＝0.64(CH2Cl2/MeOH 95/5)MS(IS)[M+Na]+＝529；[M-1]-＝505。
元素分析計算值C 66.40，H 5.93，N 5.53；實測值C 66.42，H 5.96，N 5.53。
1H NMR(CDCl3)δ＝0.83-0.90(t，3H，CH3)，1.33(s，9H，CH3)，1.97-(2.06-2.15)2.24(雙重峰，2H，CH2)，2.90-(2.95-3.00)3.05(dd，2H，CH2)，3.42(s，6H，CH3)，5.58(s，2H，CH2)，6.28(s，1H，CH)，7.39(s，1H，CH)，7.68-7.76(t，1H，CHAr)，7.82-7.88(t，1H，CHAr)，8.23-8.27(d，1H，CHAr)，8.33-8.37(d，1H，CHAr)。
13C NMR(CDCl3)δ＝7.6；28.1；31.6；43.8；52.5；53.1；53.2；82.2；85.0；93.8；100.5；114.3；124.9；126.4；129.1；130.5；130.9；139.1；149.4；151.8；152.4；156.2；167.0；167.4；169.9。
實施例1{10-[(E)-(叔丁氧基亞氨基)甲基]-3-乙基-1，13-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并(furo)[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基}乙酸(ST2196)向1.4毫升的CH3COOH中71毫克(0.14毫摩爾)5a溶液加入44毫克(0.35毫摩爾，2.5當(dāng)量)的tBuONH2·HCl；將這樣獲得的混合物在80℃下攪拌并且避光16小時。然后通過蒸發(fā)去除CH3COOH。這樣獲得的粗產(chǎn)物避光保存，通過在硅膠柱上的層析來純化(洗脫梯度CH2Cl2→CH2Cl2/MeOH 85/15)，得到45毫克(0.09毫摩爾，68％)的產(chǎn)物。
C26H25N3O6(475.5)；m.p.(分解)＝228℃；Rf＝0.3(CH2Cl2/MeOH 9/1)。
MS(IS)[MH]+＝476；[M+Na]+＝498；[M-1]-＝474。
元素分析計算值C 65.68，H 5.26，N 8.84；實測值C65.70，H 5.29，N 8.83。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝0.63-0.7(t，3H，CH3)，1.5(s，9H，tBu)，2.07-2.17(m，2H，CH2)，2.97-(3.03-3.23)3.29(dd，2H，CH2)，5.36(s，2H，CH2)，7.64(s，1H，CH)，7.73-7.79(t，1H，CHAr)，7.89-7.96(t，1H，CHAr)，8.16-8.20(d，1H，CHAr)，8.60-8.63(d，1H，CHAr)，9.30(s，1H，CHAr)。
13C NMR(CDCl3)δ＝7.6；27.8；29.9；31.2；42.6；53.1；81.9；85.2；94.2；114.2；123.2；125.8；127.1；129.0；130.8；130.9；132.8；142.2；149.8；151.7；152.7；156.2；167.2；170.1。
實施例2(10-{(E)-[(芐氧基)亞氨基]甲基}-3-乙基-1，1 3-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并(furo)[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基)乙酸(ST2285)向2毫升的CH3COOH中102毫克(0.2毫摩爾)5a溶液加入80毫克(0.5毫摩爾，2.5當(dāng)量)的PhCH2-ONH2·HCl；將溶液在80℃下攪拌并且避光16小時。然后通過蒸發(fā)去除CH3COOH。這樣獲得的粗產(chǎn)物避光保存，通過在硅膠柱上層析來純化(洗脫梯度CH2Cl2→CH2Cl2/MeOH 8/2)，得到62毫克(0.12毫摩爾，61％)的產(chǎn)物。
C29H23N3O6(509.5)；m.p.(分解)＝188℃；Rf＝0.53(CH2Cl2/MeOH 9/1)。
MS(IS)[M+Na]+＝532；[M-1]-＝508。
元素分析計算值C 68.37，H 4.52，N 8.25；實測值C68.41，H 4.50，N 8.27。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝0.64-0.70(t，3H，CH3)，2.05-2.17(m，2H，CH2)，2.84-(2.90-3.12)3.18(dd，2H，CH2)，5.2(s，2H，CH2)，5.4(s，2H，CH2)，7.36-7，58(m，5H，CHAr)，7.62(s，1H，CH)，7.72-7.78(t，1H，CHAr)，7.85-7.90(t，1H，CHAr)，8.12-8.16(d，1H，CHAr)，8.54-8.58(d，1H，CHAr)，9.32(s，1H，CHAr)。
13C NMR(CDCl3)δ＝7.0；30.6；42.1；52.6；77.8；84.8；93.6；113.5；122.6；125.2；126.7；128.2；128.5；128.6；128.9；130.2；130.3；131.2；136.0；143.2；149.1；151.0；152.0；155.6；166.9；169.7；170.1。
實施例3R，S-7-(1-叔丁氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿(ST2127)向10毫升的CH3COOH中510毫克(1毫摩爾)4a溶液加入314毫克(2.5毫摩爾，2.5當(dāng)量)的tBuO.NH2·HCl；溶液在80℃下避光保持16小時。然后通過蒸發(fā)去除CH3COOH。這樣獲得的粗產(chǎn)物溶解于CH2Cl2并且避光，用水洗滌。有機相用Na2SO4干燥，蒸發(fā)溶劑，并且通過在硅膠柱上的層析來純化粗產(chǎn)物，保持避光(洗脫劑CH2Cl2/二噁烷9/1)，得到160毫克(0.35毫摩爾，34％)的固體黃色產(chǎn)物。
C26H27N3O5(461,5)；m.p.(分解)＝284℃；Rf＝0.4(CH2Cl2/MeOH 95/5)。
MS(IS)[MH]+＝462；[M+Na]+＝484；[M-1]-＝460。
元素分析計算值C 67.68，H 5.86，N 9.11；實測值C67.65，H 5.88，N 9.13。
1H NMR(CDCl3)δ＝0.87-1.03(t，3H，CH3)，1.55(s，9H，CH3)，1.7-1.9(broad，1H，OH)，1.92-2.1(m，2H，CH2)，3.26-(3.32-3.38)3.44(dd，2H，CH2)，5.13-(5.21-5.36)5.44(dd，2H，CH2)，5.35-(5.41-5.62)5.68(dd，2H，CH2)，7，43-7，50(m，2H，CH+CHAr)，7，60-7，65(t，1H，CHAr)，7.88-7.95(t，2H，CH)，8.86(s，1H，CHAr)。
13C NMR(CDCl3)δ＝8.3；27.9；35.8；42.7；53.4；62.4；73.9；82；101.1；122.9；123.4；125.1；125.5；128.3；130.1；130.4；132.5；142.1；144.7；149.0；151.6；156.4；160.0；1716。
使用圓二色性檢測器在手性柱上對(R，S)ST 2127的HPLC分析表明，分離了兩種對映異構(gòu)體。
用下面的條件，經(jīng)HPLC通過在手性柱上的制備型色譜法分離(R，S)ST 2127的對映異構(gòu)體柱子(S，S)-DACH-DNB 5/100；洗脫劑CH2Cl2/n-HEXANE(80/20)+1％MetOH；流速1ml/min；T22℃；λ360nm UV檢測器。
第一個洗出的級分e.e.99.46％，相應(yīng)于(+)ST2127＝ST2522，通過與具有正[α]D的喜樹堿類比，對R構(gòu)型進行歸屬。
IC50＝18nM±0.2(H460)。
第二個洗出的級分e.e.99.46％，相應(yīng)于(-)ST2127＝ST2523，[α]D＝-48.11±0.15(c＝1.17；CHCl3-MetOH 4∶1)。
通過與具有負[α]D的喜樹堿類比，S構(gòu)型歸于ST2523。
IC50＝＞200nM(H460)。
實施例4R，S-7-芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿(ST2143)向10毫升的CH3COOH中510毫克(1毫摩爾)4a溶液加入400毫克(2.5毫摩爾)的PhCH2ONH2·HCl；溶液在80℃下避光攪拌16小時。然后通過蒸發(fā)去除CH3COOH。這樣獲得的粗產(chǎn)物通過在硅膠柱上的層析來純化(洗脫劑CH2Cl2/二噁烷9/1)，得到223毫克(0.45毫摩爾，45％)的固體黃色產(chǎn)物。
C29H25N3O5(495.5)；m.p.(分解)＝263℃；Rf＝0.48(CH2Cl2/MeOH 95/5)。
MS(IS)[MH]+＝496；[M+Na]+＝518；[M-1]-＝494。
元素分析計算值C 70.30，H 5.05，N 8.48；實測值；C70.33，H 5.09，N 8.47。
1H NMR(CDCl3)δ＝0.95-1.02(t，3H，CH3)，1.99-2.06(m，2H，CH2)，3，04-(3，08-3，18)3，42(dd，2H，CH2)，5，32(s，2H，CH2)，5.42-(5.44-5.63)5.70(dd+s，4H，CH2+CH2)，7.33-7.56(m，5H，CHAr)，7.63-7.69 (m，2H，CH+CHAr)，7.80-7.84(t，1H，CHAr)，8.16-8.22(m，2H，CHAr)，9.10(s，1H，CH)。
13C NMR(CDCl3)δ＝8.4；36.5；42.6；52.9；62.2；73.6；78.1；101.1；123.0；123.1；125.3；126.2；128.3；128.5；128.8；129.1；130.3；130.4；131.4；136.5；144.0；144.4；149.2；152.5；156.4；159.7；172.1。
實施例5(3-乙基-1，1 3-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并(furo)[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基)乙酸叔丁酯(ST2084)向10毫升無水CH2Cl2中1g(2.3毫摩爾)4b的溶液加入1.73g(4.6毫摩爾，2當(dāng)量)的PDC。將混合物在室溫下攪拌16小時。這個階段結(jié)束時將反應(yīng)干燥，并且通過在硅膠柱上的急驟層析來純化(洗脫劑CH2Cl2/MeOH 95/5)。得到726毫克(1.68毫摩爾，73％)黃色固體產(chǎn)物。
C25H24N2O5(432.5)；m.p.(分解)＝190℃；Rf＝0.5(CH2Cl2/MeOH 95/5)。
MS(IS)[MH]+＝432；[M+Na]+＝455。
元素分析計算值C 69.44，H 5.56，N 6.48；實測值C69.46，H 5.55，N 6.51。
1H NMR(CDCl3)δ＝0.83-0.88(t，3H，CH3)，1.35(s，9H，t-Bu)，1.95-2.27(m(double multiplet)，2H，CH2)，2.91-(2.96-3.01)3.06(dd，2H，CH2)，5.38(s，2H，CH2)，7.36(s，1H，CH)，7.68-7.75(t，1H，CHAr)，7.83-7.90(t，1H，CHAr)，7.97-8.00(d，1H，CHAr)，8.22-8.25(d，1H，CHAr)，8.46(s，1H，CHAr)。
13C NMR(CDCl3)δ＝7.5；28.1；31.6；43.7；50.6；82.2；85.2；94.0；114.3；128.5；128.9；130.1；131.2；131.7；149.3；151.8；153.0；167.4；170.2。
實施例6
(3-乙基-1，13-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并(furo)[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基)乙酸(ST2085)將110毫克(0.25毫摩爾)的EM 21/2溶解于1.5毫升的1∶1CH2Cl2/TFA混合物中。將混合物在室溫下攪拌16小時。然后蒸發(fā)溶劑至干，得到94毫克產(chǎn)物，為黃色固體(0.25毫摩爾，定量產(chǎn)率)。
C21H16N2O5(376.4)；m.p.(分解)＝242℃；Rf＝0.25(CH2Cl2/MeOH 95/5)。
MS(IS)[MH]+＝377；[M+Na]+＝399；[M-1]-＝375。
元素分析計算值C 67.02，H 4.26，N 7.45；實測值C 67.05，H 4.28，N 7.49。
1H NMR(DMSO-d6)δ＝0.64-0.70(t，3H，CH3)，2.03-2.16(m，2H，CH2)，3.05-(3.10-3.30)3.35(dd，2H，CH2)，4.00-4.75(broad，1H，OH)，5.33(s，2H，CH2)，7.65(s，1H，CH)，7.73-7.78(t，1H，CHAr)，7.84-7.90(t，1H，CHAr)，8.15-8.18(d，2H，CHAr)，8.73(d，1H，CHAr)。
13C NMR(CDCl3)δ＝7.7；31.2；41.6；51.5；85.3；94.5；113.5；129.0；129.1；129.4；129.8；131.4；131.9；132.6；148.8；152.5；153.5；156.0；167.4；170.5；170.6。
權(quán)利要求
1.式(I)或式(II)的化合物 其中R1是氫或-C(R5)＝N-O-R4基團，其中R4是氫或直鏈或支鏈的C1-C5烷基或C1-C5鏈烯基，或C3-C10環(huán)烷基，或直鏈或支鏈的(C3-C10)環(huán)烷基-(C1-C5)烷基，或C6-C14芳基，或直鏈或支鏈的(C6-C14)芳基-(C1-C5)烷基，或雜環(huán)基團或直鏈或支鏈的雜環(huán)-(C1-C5)烷基，所述雜環(huán)基團含有至少一個選自氮原子的雜原子，其任選地被(C1-C5)烷基取代，和/或選自氧和/或硫原子的雜原子；所述烷基，鏈烯基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，芳基，芳基-烷基，雜環(huán)或雜環(huán)-烷基任選地被選自下面的一個或多個基團取代鹵原子，羥基，(C1-C5)烷基，(C1-C5)烷氧基，苯基，氰基，硝基和-NR6R7，其中R6和R7相同或不同，是氫、直鏈或支鏈(C1-C5)烷基、-COOH基團，或者其藥學(xué)可接受酯中的一種；或者-CONR8R9基團，其中R8和R9相同或不同，是氫、直鏈或支鏈(C1-C5)烷基；或者R4是(C6-C10)芳?；?C6-C10)芳基磺?；鶜埢?，任選地被選自下面的一個或多個基團取代鹵原子，羥基，直鏈或支鏈(C1-C5)烷基，直鏈或支鏈(C1-C5)烷氧基，苯基，氰基，硝基，-NR10R11，其中R10和R11相同或不同，是氫、直鏈或支鏈(C1-C5)烷基，或者R4是多氨基烷基殘基；或者R4是糖基殘基；R5是氫，直鏈或支鏈的C1-C5烷基，直鏈或支鏈的C1-C5鏈烯基，C3-C10環(huán)烷基，直鏈或支鏈的(C3-C10)環(huán)烷基-(C1-C5)烷基，C6-C14芳基，直鏈或支鏈的(C6-C14)芳基-(C1-C5)烷基；R2和R3相同或不同，是氫、羥基、直鏈或支鏈(C1-C5)烷氧基；n＝1或2，Z選自氫，直鏈或支鏈的C1-C4烷基；N1-氧化物，外消旋混合物，它們各自的對映異構(gòu)體，它們各自的非對映異構(gòu)體，它們的混合物，和它們的藥學(xué)可接受鹽，前提是，在式(I)中，R1，R2和R3不能同時是氫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中在式(I)中，n是1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中在式(II)中，n是1。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，選自-R，S-7-甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-乙氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-異丙氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(2-甲基丁氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(1-叔丁氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(4-羥基丁氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-三苯基甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-羧基甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-氨基乙氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(N，N-二甲基氨基乙氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-烯丙氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-環(huán)己基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-環(huán)己基甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-環(huán)辛基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-環(huán)辛基甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(芐基氧基)亞氨基苯基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(1-芐基氧基)亞氨基乙基-高喜樹堿；-R，S-7-(1-叔丁氧基)亞氨基乙基-高喜樹堿；-R，S-7-對-硝基芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-對-甲基芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-五氟芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-對-苯基芐基氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(2，4-二氟芐基甲氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(4-叔丁基苯基甲氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(1-金剛烷基氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(1-金剛烷基甲氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(2-萘基氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(9-蒽基甲氧基)亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(6-尿嘧啶基)甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(4-吡啶基)甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-(2-噻吩基)甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-[(N-甲基)-3-哌啶基]甲氧基亞氨基甲基-高喜樹堿；-R，S-7-羥基亞氨基苯基甲基-高喜樹堿。
5.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，選自-{10-[(E)-(叔丁氧基亞氨基)甲基]-3-乙基-1，13-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基}乙酸-(10-{(E)-[(芐氧基)亞氨基]甲基}-3-乙基-1，13-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基)乙酸-(3-乙基-1，13-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基)乙酸-(3-乙基-1，13-二氧-11，13-二氫-1H，3H-呋喃并[3′，4′6，7]中氮茚并[1，2-b]喹啉-3-基)乙酸叔丁酯。
6.其中R1是氫并且R2和R3如上定義的根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物的制備方法，包括a)將任選地被針對R2和R3定義取代的喜樹堿的19位的酮基還原，得到19，20-二羥基衍生物；b)用高碘酸鹽和乙酸處理步驟a)中獲得的衍生物，以獲得E環(huán)開環(huán)；c)對步驟b)中獲得的衍生物進行Reformatsky反應(yīng)；d)形成其中n是1或2的E環(huán)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的式(I)化合物的制備方法，其中R1是-C(R5)＝N-O-R4基團并且R2，R3，R4和R5如上定義，包括a)將任選地被R2和R3定義取代的喜樹堿轉(zhuǎn)化為7-(二-甲氧基甲基)喜樹堿；b)將7-(二-甲氧基甲基)喜樹堿19位的酮基還原，產(chǎn)生衍生的19，20-二羥基；c)用高碘酸鹽和乙酸處理步驟b)中獲得的衍生物，以獲得E環(huán)開環(huán)；d)對步驟c)中獲得的衍生物進行Reformatsky反應(yīng)；e)用式R4ONH2肟處理步驟d)中獲得的化合物并且同時形成其中n是1或2的E環(huán)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的式(II)化合物的制備方法，其中R1是氫并且R2和R3如上定義，包括a)將任選地被針對R2和R3定義取代的喜樹堿19位的酮基還原，產(chǎn)生衍生的19，20-二羥基；b)用高碘酸鹽和乙酸處理步驟a)中獲得的衍生物，以獲得E環(huán)開環(huán)；c)對步驟b)中獲得的衍生物進行Reformatsky反應(yīng)；d)用PDC處理步驟c)中獲得的衍生物并且形成E環(huán)，如果期望這樣的話；e)將Z基團轉(zhuǎn)化為氫。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的式(II)化合物的制備方法，其中R1是-C(R5)＝N-O-R4基團并且R2，R3，R4和R5如上定義，包括a)將任選地被針對R2和R3定義取代的喜樹堿轉(zhuǎn)化為7-(二-甲氧基甲基)喜樹堿；b)將任選地被針對R2和R3定義取代的7-(二-甲氧基甲基)喜樹堿19位的酮基還原，產(chǎn)生衍生的19，20-二羥基；c)用高碘酸鹽和乙酸處理步驟b)中獲得的衍生物，以獲得E環(huán)開環(huán)；d)對步驟c)中獲得的衍生物進行Reformatsky反應(yīng)；e)用式PDC處理步驟c)中獲得的衍生物并且形成E環(huán)；f)用式R4ONH2肟處理步驟d)中獲得的化合物，如果期望這樣的話，g)將Z基團轉(zhuǎn)化為氫。
10. 7-(二甲氧基甲基)喜樹堿。
11. 7-(二甲氧基甲基)喜樹堿作為根據(jù)權(quán)利要求7和9的方法中的中間產(chǎn)物的用途。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項的化合物作為藥物。
13.含有與藥學(xué)可接受載體和賦形劑混合的治療有效量的至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-5的化合物的藥物組合物。
14.含有與藥學(xué)可接受載體和賦形劑混合的治療有效量的至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-5的化合物并且任選地含有另一種活性成分的藥物組合物。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的藥物組合物，其中所述另一種活性成分是抗癌劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項的化合物用于制備具有拓撲異構(gòu)酶I抑制活性的藥物的用途。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，用于制備治療腫瘤的藥物。
18.根據(jù)權(quán)利要求16的用途，用于制備治療寄生蟲或病毒感染的藥物。
全文摘要
本發(fā)明描述了式(I)或(II)的化合物其中的基團在下面的說明書中定義，它們的外消旋混合物，它們各自的對映異構(gòu)體，它們各自的非對映異構(gòu)體，它們的混合物，和它們的藥學(xué)可接受鹽。所述化合物是拓撲異構(gòu)酶I抑制劑。
文檔編號A61P33/00GK1656100SQ03812543
公開日2005年8月17日 申請日期2003年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月31日
發(fā)明者M·馬爾齊, E·馬拉斯托尼, S·彭科, C·皮薩諾, M·O·廷蒂, L·韋希, F·祖尼諾, D·韋爾加尼, W·卡布里, M·阿爾佩賈尼, M·G·帕特里西奧, T·達內(nèi)利 申請人:希格馬托制藥工業(yè)公司, 研究和治療腫瘤國家研究所