箭根酮內(nèi)酯環(huán)糊精包合物及其制備方法，以及一種藥物組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其設(shè)及一種箭根酬內(nèi)醋環(huán)糊精包合物及其制備 方法，W及一種藥物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 20世紀(jì)90年代，W紫杉醇為代表的微管穩(wěn)定劑是治療乳腺癌、卵巢癌和其他實體 瘤最有效的藥物，它們可W通過促進(jìn)微管蛋白聚集，阻斷微管蛋白的解聚，從而破壞快速分 化的腫瘤細(xì)胞的有絲分裂，最終使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生調(diào)亡。但是，由于其水溶性差、易產(chǎn)生多藥 耐藥性等問題，限制了其應(yīng)用。于是，尋找新型微管穩(wěn)定劑成了各國學(xué)者廣泛關(guān)注的熱點。
[0003] 20世紀(jì)80年代，陳仲良等從廣西產(chǎn)裂果馨的根莖中最先分離得到了一系列具 有新型五環(huán)醬體28碳骨架的箭根馨酬內(nèi)醋類化合物，其中，箭根馨酬內(nèi)醋A的含量達(dá)到 了 0. 15%。21世紀(jì)初美國學(xué)者M(jìn)ooberry等研究發(fā)現(xiàn)箭根馨酬內(nèi)醋類化合物具有穩(wěn)定 微管蛋白的作用，但是與紫杉醇類微管穩(wěn)定劑相比，它們并不是直接作用于微管，而是 具有一個特殊的作用祀點和完全不同的微管穩(wěn)定作用機(jī)制[Tinley化，etal.Cancer Research, 2003, 63:3211 - 3220.]，另外，體內(nèi)藥效學(xué)研究發(fā)現(xiàn)該類化合物對紫杉醇耐 藥瘤株具有較強(qiáng)的抑瘤活性，從而顯示出一定的應(yīng)用開發(fā)前景[RisingerA^Mooberry SL,CancerLetters, 2010, 291:14-19;RisingerAL,GilesFJ,MooberrySI,Cancer TreatmenReviews, 2009, 35:255-261]。
[0004]目前，箭根酬內(nèi)醋類化合物已經(jīng)分離得到30多個。箭根馨屬植物在我國有六種， 其中較常見并作藥用的有長須果和裂果馨（又稱水田屯）。長須果生長于濱、桂、粵、瓊溝谷 熱帶雨林，藥性苦辛、涼，有小毒，具有清熱解毒、理氣止痛等功效，用于治療瀉頻、胃痛、咽 痛、肺炎、追疾、瘡傷、燒傷等。裂果馨產(chǎn)于濱、桂、粵、瓊、湘南、議南等地區(qū)，藥性苦寒，具有 清熱解毒、散疲止痛等功效，用于治療咽喉痛、癡腫、牙痛、腸炎、肺瘍、胃痛、跌打和燒傷等。
[0005] 但是由于箭根酬內(nèi)醋衍生物為脂溶性化合物，其制劑應(yīng)用尤其是注射給藥受到限 審IJ;并且箭根酬內(nèi)醋類衍生物在水溶液中非常不穩(wěn)定，進(jìn)一步限制了其臨床應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合 物及其制備方法，W及一種藥物組合物，制備的箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物具有良好 的水溶性W及穩(wěn)定性。
[0007] 本發(fā)明提供了一種箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物，箭根酬內(nèi)醋衍生物與環(huán)糊精 的摩爾比為1 : (3~100)。
[000引優(yōu)選的，所述箭根酬內(nèi)醋衍生物與環(huán)糊精的摩爾比為1 : (10~30)。
[0009] 優(yōu)選的，所述箭根酬內(nèi)醋衍生物選自式（3)~式（5)所示化合物中的任意一種，
[0010]
[0011] 優(yōu)選的，所述箭根酬內(nèi)醋衍生物為式（4)所示化合物。
[0012] 優(yōu)選的，所述環(huán)糊精選自0-環(huán)糊精或其衍生物，丫-環(huán)糊精或其衍生物中的任意 一種。
[0013] 優(yōu)選的，所述環(huán)糊精為徑丙基-0 -環(huán)糊精或徑丙基-丫-環(huán)糊精。
[0014] 本發(fā)明還提供了一種上述箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物的制備方法，包括：在 40°C~78°C條件下，將環(huán)糊精化合物與箭根酬內(nèi)醋衍生物在乙醇中混合、反應(yīng)至溶液澄清， 除去溶劑得到箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物。
[0015] 優(yōu)選的，除去溶劑得到箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物后，還包括對得到的包合 物進(jìn)行冷凍干燥。
[0016] 本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，包括上述箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物或上 述制備方法制備得到的箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物，W及藥學(xué)上可接受的載體、賦形 劑、稀釋劑、輔劑、媒介物或它們的組合。
[0017] 優(yōu)選的，所述組合物的劑型為片劑、膠囊劑或注射劑。
[0018] 本發(fā)明還提供了一種上述箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物或按照上述制備方法 制備得到的箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物或上述藥物組合物來制備用于穩(wěn)定微管蛋白 的藥品的用途。
[0019] 本發(fā)明還提供了一種使用上述箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物或按照上述制備 方法制備得到的箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物或上述藥物組合物來制備用于治療腎癌 的藥品的用途。
[0020] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物，箭根酬內(nèi) 醋衍生物與環(huán)糊精的摩爾比為1 : (3~100)。本發(fā)明通過將箭根酬內(nèi)醋與環(huán)糊精化合物進(jìn) 行包合得到箭根酬內(nèi)醋環(huán)糊精包合物，大大提高了箭根酬內(nèi)醋的水溶性W及穩(wěn)定性，對腫 瘤細(xì)胞株A498、769-P、Caki-UACHN、A2780、胎pG2、胎P-3B、Huh-7、肥K-293 和 786-0 的增 值均具有較強(qiáng)抑制活性。
【附圖說明】
[002。 圖1是0小時化合物4的20%乙醇溶液的蒸發(fā)光散射她LC-ELSD)圖；
[002引圖2是6小時化合物4的20%乙醇溶液的蒸發(fā)光散射她LC-ELSD)圖；
[002引圖3是0小時化合物4的徑丙基-0 -環(huán)糊精包合物（1:20)在水中的HPLC-ELSD圖；
[0024] 圖4是6小時化合物4的徑丙基-e-環(huán)糊精包合物（I: 20)在水中的HPLC-ELSD 圖；
[002引圖5是0小時化合物4的徑丙基-0 -環(huán)糊精包合物（1:30)在水中的HPLC-ELSD圖；
[0026] 圖6是6小時化合物4的徑丙基-0 -環(huán)糊精包合物（1:30)在水中的HPLC-ELSD 圖；
[0027] 圖7是實施例10給藥期間各組動物相對腫瘤體積曲線圖；
[0028] 圖8是實施例10試驗結(jié)束時各組動物瘤重柱形圖。
【具體實施方式】
[0029] 本發(fā)明提供了一種箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物，箭根酬內(nèi)醋衍生物與環(huán)糊精 的質(zhì)量比為1 : (3~100)。
[0030] 本發(fā)明通過將箭根酬內(nèi)醋與環(huán)糊精化合物進(jìn)行包合得到箭根酬內(nèi)醋環(huán)糊精包合 物，大大提高了箭根酬內(nèi)醋的水溶性W及穩(wěn)定性，對腫瘤細(xì)胞株A498、769-P、Caki-I、ACHN、 A2780、HepG2、Hep-3B、Huh-7、肥K-293和786-0的增值均具有較強(qiáng)抑制活性。
[0031] 本發(fā)明所提供的箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物，箭根酬內(nèi)醋衍生物與環(huán)糊精的 摩爾比優(yōu)選為1 : (3~100)，更優(yōu)選為1 : (10~30)，更優(yōu)選為1 : (20~30)，在一些具體實 施例中，箭根酬內(nèi)醋衍生物與環(huán)糊精的摩爾比優(yōu)選為1:20或1:30。
[0032] 本發(fā)明所述的箭根酬內(nèi)醋衍生物優(yōu)選為式（3)~式（5)所示化合物中的任意一 種，更優(yōu)選為式（4)所示化合物：
[0034] 本發(fā)明上述箭根酬內(nèi)醋化合物優(yōu)選按照W下方法進(jìn)行制備：
[0035] 將水田屯根部用甲醇水溶液浸提、大孔樹脂分離純化得到式（1)所示化合物和式 (2)所示化合物。具體的，大孔樹脂分離純化步驟，選取80%甲醇/水洗脫液，濃縮后，大孔 樹脂吸附，甲醇洗脫，洗脫液濃縮即可得到式（1)所示化合物，W及式（2)所示化合物浸膏。 優(yōu)選的，式（2)所示化合物浸膏經(jīng)過柱色譜分離，即可得到式（2)所示化合物。
[0036]
[0037] 然后將式（I)所示化合物與間氯過苯甲酸反應(yīng)，即可得到式（3)所示化合物。所 述反應(yīng)的溶劑優(yōu)選為二氯甲燒，反應(yīng)溫度優(yōu)選為室溫，反應(yīng)時間優(yōu)選為4h~化，反應(yīng)結(jié)束 后，優(yōu)選的，采用硅膠柱色譜法對反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行分離純化。
[0038] 將式（2)所示化合物與間氯過苯甲酸反應(yīng)，即可得到式（4)所示化合物。所述反 應(yīng)的溶劑優(yōu)選為二氯甲燒，反應(yīng)溫度優(yōu)選為室溫，反應(yīng)時間優(yōu)選為地~化，反應(yīng)結(jié)束后，優(yōu) 選的，采用硅膠柱色譜法對反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行分離純化。
[0039] 將式（4)所示化合物與下二酸酢、DABC0(=乙締二胺）反應(yīng)，得到白色固體；所 述反應(yīng)的溶劑優(yōu)選為二氯甲燒，反應(yīng)溫度優(yōu)選為室溫，反應(yīng)時間優(yōu)選為0.化~比，反應(yīng) 結(jié)束后，優(yōu)選的，采用硅膠柱色譜法對反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行分離純化。然后將得到的白色固體與 HATU(2-(7-偶氮苯并S氮挫）-N，N，N'，N' -四甲基脈六氣憐酸醋），N-甲基贓嗦反應(yīng)，即可 得到式（5)所示化合物；所述反應(yīng)的溶劑優(yōu)選為二氯甲燒，反應(yīng)溫度優(yōu)選為室溫，反應(yīng)時間 優(yōu)選為IOmin~30min，反應(yīng)結(jié)束后，優(yōu)選的，采用硅膠柱色譜法對反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行分離純化。
[0040] 本發(fā)明所述的環(huán)糊精優(yōu)選為0 -環(huán)糊精或其衍生物，丫-環(huán)糊精或其衍生物中的 任意一種。其中，所述0-環(huán)糊精衍生物，丫-環(huán)糊精衍生物中的取代基獨立的選自Cl燒 基或徑烷基。
[0041] 在本發(fā)明的一些實施例中，所述環(huán)糊精為徑丙基0 -環(huán)糊精或徑丙基-丫 -環(huán)糊 精。
[0042] 本發(fā)明還提供了一種上述箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物的制備方法，包括：在 40°C~78°C條件下，將環(huán)糊精化合物與箭根酬內(nèi)醋衍生物在乙醇中混合、反應(yīng)至溶液澄清， 除去溶劑，得到箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物。所述除去溶劑的方法可W為本領(lǐng)域公知 的方法，本發(fā)明優(yōu)選為減壓濃縮。
[0043] 所述環(huán)糊精化合物的物質(zhì)的量與乙醇的體積比優(yōu)選為Immol:巧血~15mL)。
[0044] 本發(fā)明優(yōu)選的，在上述得到箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物后，還可W對所述包 合物進(jìn)行冷凍干燥，具體的，在上述包合物中加入適量水?dāng)埌柚敝脸吻澹缓筮M(jìn)行冷凍干 燥。
[0045] 本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，包括上述箭根酬內(nèi)醋衍生物環(huán)糊精包合物或按 照上述制備方法制備得到的包合物，還包括藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、稀釋劑、輔劑、媒 介物或它們的組合。
[0046] 其中，本發(fā)明所提供的組合物可W是本領(lǐng)域公知的劑型，如片劑、膠囊