一種從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于化工與制藥領(lǐng)域，涉及一種從穿心蓮提取物中分離純化穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法。穿心蓮藥材粉碎，加入無水甲醇回流提取，將提取液過濾、減壓濃縮得浸膏。將穿心蓮浸膏再用甲醇溶解，經(jīng)過濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱為SpherigelC18色譜柱，流動(dòng)相為超臨界流體，改性劑為甲醇。本發(fā)明純化過程中使用超臨界二氧化碳，不使用對(duì)環(huán)境有危害的有機(jī)溶劑，生產(chǎn)過程綠色環(huán)保，所得產(chǎn)品無有害物質(zhì)殘留。
【專利說明】
一種從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的 方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于化工與制藥領(lǐng)域，具體是涉及一種從穿心蓮提取物中分離純化穿心蓮 內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的超臨界流體色譜方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 穿心蓮為爵床科植物穿心蓮Andrographis paniculata(Burm.f ·) Nees ·的干燥 地上部分，具有清熱解毒、涼血、消腫等功效，常用于治療感冒發(fā)熱、咽喉腫痛等癥。另外，穿 心蓮在臨床上主要用于治療呼吸道感染、急性菌痢、腸胃炎等疾病，還具有防治心血管疾 病、抗腫瘤、保肝利膽、免疫調(diào)節(jié)等多重功效。
[0003] 目前，對(duì)穿心蓮中二萜內(nèi)酯類成分的分離純化主要采用硅膠柱層析法或大孔樹脂 分離純化法。硅膠柱層析法工藝成熟，但操作繁瑣;大孔樹脂分離純化法需對(duì)大孔樹脂進(jìn)行 預(yù)處理，操作復(fù)雜。此外，硅膠柱層析法和大孔樹脂分離純化法均需要消耗大量的有機(jī)溶 劑，有機(jī)溶劑回收成本高，回收再利用較困難，產(chǎn)品中有機(jī)試劑殘留嚴(yán)重。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種操作簡(jiǎn)便、分離量大、綜合成本 低、綠色環(huán)保的快速純化制備穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，通過一步分離純化即 可從穿心蓮提取物中得到高純度穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯單體化合物。
[0005] 本發(fā)明的方案如下： 一種從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，步驟如下： 步驟1:穿心蓮藥材粉碎，加入無水甲醇回流提取，將提取液過濾、減壓濃縮得穿心蓮浸 膏。
[0006] 步驟2:將穿心蓮浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱分 別為SpherigelCis色譜柱、KromasilMfe色譜柱和二醇基色譜柱，流動(dòng)相為超臨界流體，改性 劑為有機(jī)溶劑。分離過程由紫外檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)檢測(cè)信號(hào)收集目標(biāo)組分餾分。
[0007] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟1中無水甲醇回流提取乙醇與藥材的比例是 5:1~20:1，最優(yōu)為10:1;提取的次數(shù)為3次，回流時(shí)間為0.5-2小時(shí)。
[0008] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中過濾所用濾膜為0.45 μπι濾膜。
[0009] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中色譜柱的種類為譜柱、 KromasilMfc色譜柱和二醇基色譜柱，最優(yōu)為SpherigelCis色譜柱。
[0010] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中改性劑的種類為甲醇、乙醇、異丙醇和乙 臆，最優(yōu)為甲醇。
[0011] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中改性劑甲醇的比例為4 %~6 %，最優(yōu)為 5.5%〇
[0012] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中超臨界流體為超臨界二氧化碳，超臨界 二氧化碳的壓力為11~15MPa，最優(yōu)為12MPa;超臨界二氧化碳的流速為1-10倍柱體積/分鐘， 最優(yōu)為3倍柱體積/分鐘。
[0013] 前面所述的方法，優(yōu)選的方案是，步驟2中色譜柱溫度為30~50° C，最優(yōu)為45° C。
[0014] 本發(fā)明一種從穿心蓮提取物中分離純化穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，具 有如下優(yōu)勢(shì)： (1)所得到的穿心蓮提取物中有效成分含量高(從圖1可以看出）。
[0015] (2)不需要像已有技術(shù)一樣對(duì)樣品進(jìn)行多次分離純化，只需要一個(gè)分離步驟即可 得到兩種高純度化合物，經(jīng)過一步分離純化就可以得到穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯。
[0016] (3)純化過程中使用超臨界二氧化碳，不使用對(duì)環(huán)境有危害的有機(jī)溶劑，生產(chǎn)過程 綠色環(huán)保，所得產(chǎn)品無有害物質(zhì)殘留。
[0017] (4)二氧化碳回收利用容易，能耗低，生產(chǎn)成本低。
[0018] (5)方法操作簡(jiǎn)單，易于自動(dòng)化控制，效率高，工藝周期短。
【附圖說明】
[0019] 圖1是實(shí)施例1超臨界流體色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合實(shí)施例和附圖詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但保護(hù)范圍不被此限制。實(shí) 施例中所用設(shè)備或原材料皆可從市場(chǎng)獲得。所用試劑均為分析純，購(gòu)自天津試劑四廠，所用 二氧化碳為高純二氧化碳。
[0021] 實(shí)施例1 稱取穿心蓮200克，用粉碎機(jī)粉碎，放入玻璃容器中，加入2000ml無水甲醇回流提取0.5 小時(shí)，提取3次，將提取液過濾、減壓濃縮得浸膏。
[0022] 將穿心蓮浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱為 SpherigelC18色譜柱，色譜柱溫度為45°C。流動(dòng)相為超臨界二氧化碳，流速為3倍柱體積/分 鐘，壓力為12MPa。改性劑為甲醇，其比例為5.5%。分離過程由紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為 225nm，根據(jù)檢測(cè)信號(hào)收集目標(biāo)組分餾分，分別得到穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯。
[0023] 實(shí)施例2 稱取穿心蓮200克，用粉碎機(jī)粉碎，放入玻璃容器中，加入1000ml無水甲醇回流提取1小 時(shí)，提取3次，將提取液過濾、減壓濃縮得浸膏。
[0024]將穿心蓮浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱為 SpherigelC18色譜柱，色譜柱溫度為40°C。流動(dòng)相為超臨界二氧化碳，流速為2倍柱體積/分 鐘，壓力為llMPa。改性劑為甲醇，其比例為4%。分離過程由紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為 225nm，根據(jù)檢測(cè)信號(hào)收集目標(biāo)組分餾分，分別得到穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯。
[0025] 實(shí)施例3 稱取穿心蓮200克，用粉碎機(jī)粉碎，放入玻璃容器中，加入3000ml無水甲醇回流提取2小 時(shí)，提取3次，將提取液過濾、減壓濃縮得浸膏。
[0026]將穿心蓮浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱為 SpherigelC18色譜柱，色譜柱溫度為50°C。流動(dòng)相為超臨界二氧化碳，流速為2倍柱體積/分 鐘，壓力為13MPa。改性劑為甲醇，其比例為4.5%。分離過程由紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為 225nm，根據(jù)檢測(cè)信號(hào)收集目標(biāo)組分餾分，分別得到穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯。
[0027]經(jīng)HPLC面積歸一化法分析測(cè)試，實(shí)施例1-3所得到的各個(gè)組分的純度很高，均在 98%以上。
[0028]經(jīng)NMR、MS鑒定，圖1中A為脫水穿心蓮內(nèi)酯，B為穿心蓮內(nèi)酯，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征是，步驟如 下： 步驟1:穿心蓮藥材粉碎，加入無水甲醇回流提取，將提取液過濾、減壓濃縮得穿心蓮浸 膏； 步驟2:將穿心蓮浸膏用甲醇溶解，經(jīng)過濾后，進(jìn)行超臨界流體色譜分離，色譜柱分別為 Spher igelCis色譜柱、KromasilMfc色譜柱和二醇基色譜柱，流動(dòng)相為超臨界流體，改性劑為 有機(jī)溶劑;分離過程由紫外檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)檢測(cè)信號(hào)收集目標(biāo)組分餾分。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟1中無水甲醇回流提取乙醇與藥材的比 例是5:1~20:1，最優(yōu)為10:1;提取的次數(shù)為3次，回流時(shí)間為0.5-2小時(shí)。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中過濾所用濾膜為0.45 μπι濾膜。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中色譜柱的種類為SpherigelC18色譜 柱、Kromas i IMfc色譜柱和二醇基色譜柱，最優(yōu)為SpherigelCis色譜柱。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中改性劑的種類為甲醇、乙醇、異丙醇 和乙臆，最優(yōu)為甲醇。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中改性劑甲醇的比例為4%~6%，最優(yōu)為 5.5% 〇7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中超臨界流體為超臨界二氧化碳，超臨 界二氧化碳的壓力為11~15MPa，最優(yōu)為12MPa;超臨界二氧化碳的流速為1-10倍柱體積/分 鐘，最優(yōu)為3倍柱體積/分鐘。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中色譜柱溫度為30~50° C，最優(yōu)為45° C。
【文檔編號(hào)】C07D307/58GK105884722SQ201610267846
【公開日】2016年8月24日
【申請(qǐng)日】2016年4月27日
【發(fā)明人】秦秀秀, 孫愛玲, 李愛峰, 王延翠, 柳仁民
【申請(qǐng)人】聊城大學(xué)