Hplc測(cè)定穿心蓮片中脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種HPLC測(cè)定穿心蓮片中脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，旨在提供一種檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好的HPLC測(cè)定穿心蓮片中脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法；該方法是取樣品粉末1g，置于10mL萃取池中，用乙腈對(duì)樣品在溫度60℃，靜態(tài)提取5min，重復(fù)提取2次，提取完成后將提取液用乙腈定容至20mL，吸取1mL于離心管中，漩渦2min，離心3min，收集上清液，混勻過0.22微米的濾膜，取濾液注入Agilent?1200高效液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)；屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明提供一種測(cè)定脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，具體地說，是一種HPLC測(cè)定穿心蓮片中脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法;屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 穿心蓮片收載于《中國(guó)藥典》2005年版一部，其檢查項(xiàng)為片劑制劑通則中規(guī)定的內(nèi)容。中藥口服固體制劑多以藥物粉末或提取物為材料，有效成分必須通過崩解及溶出的過程釋放，吸收進(jìn)入血液而起到治療作用。
[0003] 照高效液相色譜法(2010年版藥典一部附錄VID)測(cè)定方法如下。
[0004] 1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
[0005] 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇一水(60:40)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為 254nm。理論板數(shù)按脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
[0006] 2、對(duì)照品溶液的制備
[0007] 取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.lmg的溶液，即得。
[0008] 3、供試品溶液的制備
[0009] 取本品20片(小片)或10片(大片)，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取0.5g，精密稱定， 置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，浸泡1小時(shí)，超聲處理(功率250W，頻率33kHz) 30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液 l〇ml (剩余的續(xù)濾液備用)，加在中性氧化鋁柱(200?300目，5g，內(nèi)徑為1.5cm)上，用甲醇 20ml洗脫，收集洗脫液，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。
[0010] 4、測(cè)定
[0011] 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
[0012] 本品每片含脫水穿心蓮內(nèi)酯(C20H2804)，小片不得少于4.0mg，大片不得少于 8.0mg

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 針對(duì)上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)精度高，省時(shí)高效的HPLC 測(cè)定穿心蓮片中脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法。
[0014] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下:
[0015] —種HPLC測(cè)定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，該方法依次包括下述步驟:脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于，該方法依次包括下述步驟:取本品15片，除去包衣，研細(xì)，精密稱定粉末lg，置于10mL萃取池中，用乙腈對(duì)樣品在溫度60°C，靜態(tài)提取 5min，重復(fù)提取2次，提取完成后將提取液用乙腈定容至20mL，吸取lmL于離心管中，漩渦 2min，離心3min，收集上清液，混勾過0.22微米的濾膜，取濾液注入Agi lent-1200高效液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)；
[0016]所述的色譜條件如下:
[0017]色譜柱:AgiIentEcl ipseXDB-Cis ；
[0018]流動(dòng)相:甲醇A-0.1 %磷酸水溶液B;
[0019]梯度洗脫程序:0?111^11，80%厶、20%8;1?711^11，85%?15%厶、15%?85%8;7?12min，50%A、50%B;在 50%A、50%B 下平衡 3min;
[0020]流速0.8mL/min;
[0021]波長(zhǎng):287nm;
[0022]柱溫:35Γ;
[0023]進(jìn)樣量:10μ1。
[0024]進(jìn)一步的，上述的的HPLC測(cè)定脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，所述的色譜柱規(guī)格:250mmX4.6mm，5um0
[0025]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案建立了HPLC測(cè)定穿心蓮片中脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確可靠，重復(fù)性好，可用于穿心蓮片的質(zhì)量控制。
【具體實(shí)施方式】
[0026]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0027]本發(fā)明所涉及的到百分含量濃度，除特殊說明外，溶質(zhì)為液體的均為體積濃度，溶質(zhì)為固體的均為質(zhì)量濃度。
[0028]實(shí)施例1
[0029 ] 一種HPLC測(cè)定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，該方法依次包括下述步驟:取樣品粉末lg，置于1mL萃取池中，用乙腈對(duì)樣品在溫度60°C，靜態(tài)提取5min，重復(fù)提取2次，提取完成后將提取液用乙腈定容至20mL，吸取ImL于離心管中，漩渦2min，離心3min，收集上清液，混勾過0.22微米的濾膜，取濾液注入Agi lent_1200高效液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)；
[0030]所述的色譜條件如下:
[0031 ]色譜柱:AgilentEclipseXDB-Ci8(250mmX4.6mm，5ym)；
[0032]流動(dòng)相:甲醇A-0.1 %磷酸水溶液B;
[0033]梯度洗脫程序:0?111^11，80%厶、20%8;1?711^11，85%?15%厶、15%?85%8;7?12min，50%A、50%B;在 50%A、50%B 下平衡 3min;
[0034]流速0.8mL/min;
[0035]波長(zhǎng):287nm;
[0036]柱溫:35°C;
[0037]進(jìn)樣量:10μ1。
[0038]取同一份樣品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算穿心蓮內(nèi)酯峰面積的RSD= 0.5 %，脫水穿心蓮內(nèi)酯的峰面積RSD = 0.3 %，表明該方法精密度良好
[0039]取供試品溶液，于O，2，4，8，12，24h測(cè)定。結(jié)果24h內(nèi)穿心蓮內(nèi)酯的峰面積RSD =
0.48% (n = 6)，脫水穿心蓮內(nèi)酯的峰面積RSD = 0.3% (n = 6)，表明本品穩(wěn)定性良好。
[0040]取同一批樣品粉末5份，按本申請(qǐng)?zhí)峁┑姆椒y(cè)定，測(cè)得脫水穿心蓮內(nèi)酯平均含量分別為49.6mg.g—1，RSD分別為 I.48 % %。
[0041]對(duì)照品溶液:各取穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品、脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品適量，加甲醇制成含脫水穿心蓮內(nèi)酯10.2g.mL—I的對(duì)照品溶液，即得。
[0042]取上述已知含量的樣品粉末約0.042g，精密稱定，精密加入脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品2mL(1.02mg.mL—工)，同法處理，按上述色譜條件進(jìn)樣，分別于287nm處測(cè)定吸收度，脫水穿心蓮內(nèi)酯平均回收率99.7%，RSD1.35%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種HPLC測(cè)定穿心蓮片中脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于，該方法依次包括下 述步驟:取樣品粉末lg，置于10mL萃取池中，用乙腈對(duì)樣品在溫度60°C，靜態(tài)提取5mi n，重 復(fù)提取2次，提取完成后將提取液用乙腈定容至20mL，吸取lmL于離心管中，漩渦2mi n，離心 3mi n，收集上清液，混勻過0.22微米的濾膜，取濾液注入Agi 1 ent-1200高效液相色譜儀 進(jìn)行檢測(cè)； 所述的色譜條件如下: 色譜柱:Agi 1 entEc 1 ipseXDB-Cis; 流動(dòng)相:甲醇A-0.1 %磷酸水溶液B; 梯度洗脫程序:〇 ?lmi n，80%A、20%B;l ?7mi n，85% ?15%A、15% ?85%B;7 ? 12mi n，50%A、50%B;在50%A、50%B下平衡3mi η; 流速〇.8mL/mi η； 波長(zhǎng):287nm; 柱溫:35°C; 進(jìn)樣量:10μ1。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC測(cè)定脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于，所述的色譜柱 規(guī)格:250mm X 4.6mm，5ym。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK105954396SQ201610259590
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年4月25日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 陳江濤, 廖強(qiáng), 梁慧敏, 李亞, 李澄
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所