一種格列本脲的藥物組合物及其醫(yī)藥用圖
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種格列本脲的藥物組合物及其醫(yī)藥用途，本發(fā)明提供的格列本脲的藥物組合物中含有格列本脲和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，格列本脲、化合物(Ⅰ)單獨(dú)作用時(shí)，具有抗炎鎮(zhèn)痛作用；格列本脲和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時(shí)，抗炎鎮(zhèn)痛效果進(jìn)一步提高，可以開(kāi)發(fā)成抗炎鎮(zhèn)痛藥物，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種格列本脲的藥物組合物及其醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及格列本脲的新用途，具體涉及一種格列本脲的藥 物組合物及其醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 格列本脲通過(guò)增加門(mén)靜脈胰島素水平或?qū)Ω闻K直接作用，抑制肝糖原分解和糖原 異生作用，肝生成和輸出葡萄糖減少；口服吸收快，蛋白結(jié)合率很高，為95%，口服后2~5小 時(shí)血藥濃度達(dá)峰值，持續(xù)作用24小時(shí)。T1/2為10小時(shí)。在肝內(nèi)代謝，由肝和腎排出各約50%。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種格列本脲的藥物組合物，該藥物組合物中含有格列本 脲和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，格列本脲和該天然產(chǎn)物可以協(xié)同抗炎鎮(zhèn)痛。
[0004] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0005] 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0007] -種格列本脲的藥物組合物，包括格列本脲、如權(quán)利要求1所述的化合物（I)和藥 學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。
[0008] 進(jìn)一步地，藥學(xué)上可以接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、 崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體或潤(rùn)滑劑。
[0009] 進(jìn)一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0010] 上述化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將地骨皮粉碎，用70~90%乙 醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃 取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇取物用 大孔樹(shù)脂除雜，先用20 %乙醇洗脫12個(gè)柱體積，再用80 %乙醇洗脫15個(gè)柱體積，收集80 %洗 脫液，減壓濃縮得80%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中80%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分 離，依次用體積比為80 :1、40:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」4個(gè)組分；（(1)步 驟(c)中組分3用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為25:1、20:1和15:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積 百分濃度為65%的甲醇水溶液等度洗脫，收集13~17個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得 到化合物(I)。
[0011]進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)用80%乙醇熱回流提取，合并提取 液。
[0012]進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，所述大孔樹(shù)脂為D101型大孔吸附樹(shù)脂。
[0013]進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯進(jìn)行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0014] 上述化合物(I)在制備抗炎鎮(zhèn)痛的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 上述格列本脲的藥物組合物在制備抗炎鎮(zhèn)痛的藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0017] 本發(fā)明提供的格列本脲的藥物組合物中含有格列本脲和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn) 物，格列本脲和該天然產(chǎn)物單獨(dú)作用時(shí)，具有抗炎鎮(zhèn)痛作用；二者聯(lián)合作用時(shí)，抗炎鎮(zhèn)痛作 用進(jìn)一步提高，可以開(kāi)發(fā)成抗炎鎮(zhèn)痛的藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性?xún)?nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0019] 實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0020]分離方法：（a)將地骨皮(2kg)粉碎，用80%乙醇熱回流提?。?5LX 3次），合并提取 液，濃縮至無(wú)醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水飽和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔樹(shù)脂除雜，先用20 %乙醇洗脫12個(gè)柱體積，再用80 %乙醇洗 脫15個(gè)柱體積，收集80%洗脫液，減壓濃縮得80%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中80%乙醇 洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1 (10個(gè)柱體積）、40:1 (8個(gè)柱體積）、20:1 (8個(gè)柱體積)和10:1(9個(gè)柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組 分3用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為25:1(7個(gè)柱體積）、20:1(8個(gè)柱體積)和15:1(7 個(gè)柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵 合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為65 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集13~17個(gè)柱體積 洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物（I) (HPLC歸一化純度大于98% )。
[0021] 結(jié)構(gòu)確證:冊(cè)431-]\^顯示[]\?^]+為111/2 257.1528，結(jié)合核磁特征可得分子式為 〇15出202，不飽和度為5。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)5(1( ??111，0130-(16,50(^?。?1-1(2.15，111)，!1-2 (6.24，m)，H-3(6.23，m)，H-4(2.31，m)，H-5(1.49，m)，H-6(0.34，t，J=9.4)，H-7(0.76，q，J = 9.4)，H-8(1.75，m，2H)，H-9(2.27，dd，J = 6.5,6.0)，H-12(1.08，s)，H-13(3.37，d，J = 10.9)，H-13(3.24，d，J=10.9)，H-14(1.23，s)，H-15(0.89，d，J = 6.8);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) Sc(ppm，DMS0-d6，125MHz):60.8(CH，l-C)，133.5(CH，2-C)，133.6(CH，3-C)，44.7(CH，4-C)， 32.3(CH，5-C)，19.3(CH，6-C)，20.4(CH，7-C)，29.1(CH2,8-C)，62.4(CH，9-C)，62.7(C，10-C)，25.8(C，n-C)，11.5(CH 3，12-C)，73.3(CH2，13-C)，27.6(CH3，14-C)，16.1(CH3，15-C)。 13C-匪R譜顯示了 15個(gè)碳信號(hào)，包括三個(gè)甲基，兩個(gè)亞甲基（一個(gè)含氧亞甲基），八個(gè)次甲基 (兩個(gè)烯屬次甲基，一個(gè)含氧次甲基）以及兩個(gè)季碳(一個(gè)含氧季碳）。兩個(gè)烯屬質(zhì)子信號(hào)S H6.24(m，H-2)和6.23(m，H-3)表明C-2和C-3之間為雙鍵。兩個(gè)高場(chǎng)次甲基質(zhì)子信號(hào)δΗ0.34 (t，J = 9.4Hz，Η-6)和0.76 (q，J = 9.4Hz，Η-7)表明該化合物含有一個(gè)環(huán)丙烷基。通過(guò)核磁數(shù) 據(jù)可知高場(chǎng)季碳C-l 1位連有一個(gè)羥甲基;HMBC譜中羥甲基質(zhì)子信號(hào)（δΗ3.37和3.24)與C-6 0(：19.3)、(：-70〇2〇.4)和(：-110〇25.8)的相關(guān)性驗(yàn)證了上述推論。此外，甲基質(zhì)子信號(hào)]^-12(δΗ1.08)與環(huán)丙烷次甲基C-6和C-7以及C-13(SC73.3)的相關(guān)性表明C-11位還連有一個(gè) 甲基。兩個(gè)含氧碳信號(hào)（SC62.4和62.7)表明該化合物含有一個(gè)9,10-環(huán)氧基團(tuán)；HMBC譜中 Me-14與C-10和C-9，H-9與C-10的相關(guān)性驗(yàn)證了上述推論。NOESY譜中，H-6與Me-14,以及H-7 與Me-14的相關(guān)性表明H-6，H-7和Me-14為β構(gòu)型。這些數(shù)據(jù)同時(shí)反應(yīng)了 H-1和H-5為相反的立 體構(gòu)型。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和NOESY譜，以及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類(lèi)型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定 該化合物如下所示，立體構(gòu)型進(jìn)一步通過(guò)ECD試驗(yàn)確定，理論值與實(shí)驗(yàn)值基本一致。該化合 物化學(xué)式及碳原子編號(hào)如下：
〇
[0023] 實(shí)施例2:藥理作用 [0024] 1、材料與方法
[0025] 1.1動(dòng)物
[0026]昆明種小白鼠，雌雄各半(個(gè)別實(shí)驗(yàn)用雄性），體質(zhì)量(20±2)g;WiStar大鼠，雄性， 體質(zhì)量(200 ± 20) g，均由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
[0027] 1.2試劑與樣品
[0028] 格列本脲購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所?；衔铮↖)自制，制備方法見(jiàn)實(shí)施例1。阿 司匹林腸溶片(河南新匯制藥有限公司產(chǎn)品）；二甲苯、冰醋酸等化學(xué)試劑均為分析純，雞蛋 清溶液為新鮮配制。
[0029] 1.3儀器
[0030] 自制足趾腫脹測(cè)定儀
[0031] 1.4二甲苯所致小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)
[0032]取小鼠50只，雄性，按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，每組10只，各組分別為空白對(duì)照組、陽(yáng) 性對(duì)照組(阿司匹林，500mg · kg-4和格列本脲組(80mg · kg-4、化合物（I)組(80mg · kg-4、 格列本脲與化合物（I)組合物組【40mg · kg^1格列本脲+40mg · kg^1化合物（I)】。空白對(duì)照組 灌服等量生理鹽水，其余按照藥物給藥，灌胃給藥連續(xù)3天。末次給藥30min后，立即在小鼠 左耳前后兩面涂抹二甲苯〇.〇5mL，lh后將小鼠脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下左右兩耳片，用 6mm直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片，稱(chēng)兩耳重量，計(jì)算耳腫脹度。
[0033] 1.5蛋清所致大鼠足腫脹實(shí)驗(yàn)
[0034]取大鼠 50只，雄性，按體質(zhì)量隨機(jī)分成5組(分組同1.4)，每組10只。實(shí)驗(yàn)前在各鼠 右后足踝關(guān)節(jié)處作標(biāo)記，用容積測(cè)定法測(cè)定各鼠右后足容積兩次，取平均值作為正常足容 積。空白對(duì)照組灌服等量生理鹽水，其余按照藥物給藥，連續(xù)3天，末次給藥30min后每只大 鼠右后足跖部皮下注射10%新鮮雞蛋清生理鹽水溶液O.lmL致炎，于致炎后2.Oh測(cè)定大鼠 足容積，連續(xù)2次，平均值為測(cè)定值，計(jì)算各鼠致炎前后右后足跖容積變化值、腫脹率及抑制 率。
[0035] 1.6醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)
[0036]取小鼠 50只，雌雄各半，按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組(分組及給藥量同1.4)，每組10只， 各組連續(xù)3天灌胃給藥，末次給藥30min后腹腔注射0.3%HAc溶液0. lmL/10g，觀察注射后 15min內(nèi)小鼠出現(xiàn)扭體的次數(shù)。
[0037] 1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0038]以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差（I 土s)表示，數(shù)據(jù)處理用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行成組設(shè)計(jì)t檢 驗(yàn)。
[0039] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0040] 2.1對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響
[0041]腫脹程度=每鼠左耳片質(zhì)量一右耳片質(zhì)量
[0042]與空白對(duì)照組比，陽(yáng)性對(duì)照組小鼠耳腫脹程度顯著降低(P<0.01);與空白對(duì)照組 比，格列本脲組、化合物（I)組小鼠耳腫脹程度降低(P<〇.05);與空白對(duì)照組比，格列本脲 組和化合物（I)組合物組小鼠耳腫脹程度顯著降低(P<〇. 01)。結(jié)果見(jiàn)表1。
[0043] 2.2對(duì)蛋清所致大鼠足腫脹的影響
[0044] 腫脹率=(致炎后足跖容積一致炎前足跖容積)/致炎前足跖容積X 100% ;
[0045] 抑制率=(空白對(duì)照組腫脹率一給藥組腫脹率)/空白對(duì)照組腫脹率X 100%。
[0046]與空白對(duì)照組比，陽(yáng)性對(duì)照組大鼠足腫脹度顯著降低（P<0.01);與空白對(duì)照組 比，格列本脲組、化合物（I)組大鼠足腫脹度降低(P<〇.05);與空白對(duì)照組比，格列本脲組 和化合物（I)組合物組大鼠足腫脹度顯著降低(p<0.01)。結(jié)果見(jiàn)表1。
[0047] 2.3對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響
[0048]與空白對(duì)照組比，陽(yáng)性對(duì)照組小鼠扭體次數(shù)顯著降低（P<0.01);與空白對(duì)照組 比，格列本脲組、化合物（I)組小鼠扭體次數(shù)降低(P<〇.05);與空白對(duì)照組比，格列本脲組 和化合物（I)組合物組小鼠扭體次數(shù)顯著降低(p<0.01)。結(jié)果見(jiàn)表1。
[0049]表1對(duì)小鼠耳腫脹、大鼠足腫脹、小鼠扭體反應(yīng)的影響
[0050]
[0051] 上述結(jié)果表明，格列本脲、化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)，具有抗炎鎮(zhèn)痛作用;格列本脲和 化合物(I)聯(lián)合作用時(shí)，抗炎鎮(zhèn)痛效果進(jìn)一步提高，可以開(kāi)發(fā)成抗炎鎮(zhèn)痛藥物。
[0052] 上述實(shí)施例的作用在于說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性?xún)?nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的仆,合物α) ·2. -種格列本脲的藥物紐_甘物，兵狩世仕t:迅估份列I脲、卯儀利要求1所述的化合 物(I)和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的格列本脲的藥物組合物，其特征在于:藥學(xué)上可以接受的載體 包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體 或潤(rùn)滑劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的格列本脲的藥物組合物，其特征在于:所述劑型包括片劑、膠 囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、 栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含以下操作步驟：（a)將地 骨皮粉碎，用70~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹(shù)脂除雜，先用20%乙醇洗脫12個(gè)柱體積，再用80%乙醇洗脫 15個(gè)柱體積，收集80%洗脫液，減壓濃縮得80%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中80%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、40:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分3用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為25:1、20:1 和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為65%的甲醇水溶液等度洗脫，收集13~17個(gè)柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)用80%乙醇熱回 流提取，合并提取液。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹(shù)脂為DlOl型 大孔吸附樹(shù)脂。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)中用二氯甲烷代 替乙酸乙酯進(jìn)行萃取，得到二氯甲烷萃取物。9. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備抗炎鎮(zhèn)痛的藥物中的應(yīng)用。10. 權(quán)利要求2~4任一所述的格列本脲的藥物組合物在制備抗炎鎮(zhèn)痛的藥物中的應(yīng) 用。
【文檔編號(hào)】A61K31/64GK105884716SQ201610335081
【公開(kāi)日】2016年8月24日
【申請(qǐng)日】2016年5月19日
【發(fā)明人】王昌榮
【申請(qǐng)人】王昌榮