一種加巴噴丁的藥物組合物及其醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種加巴噴丁的藥物組合物及其醫(yī)藥用途，本發(fā)明提供的加巴噴丁的藥物組合物中含有加巴噴丁和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，加巴噴丁和該天然產(chǎn)物單獨(dú)作用時(shí)，對(duì)脫發(fā)具有治療作用；二者聯(lián)合作用時(shí)，對(duì)脫發(fā)的治療效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療脫發(fā)的藥物。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【專利說明】
一種加巴噴丁的藥物組合物及其醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及加巴噴丁的新用途，具體涉及加巴噴丁的藥物組 合物及其在脫發(fā)中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 加巴噴丁在各種動(dòng)物模型中均顯示預(yù)防癲癇的作用，另外，在動(dòng)物痙攣、鎮(zhèn)痛和肌 萎縮性側(cè)索硬化模型中也顯示作用。加巴噴丁對(duì)腦組織的新穎結(jié)合點(diǎn)有高的親和性，它能 通過氨基酸轉(zhuǎn)移體通過體內(nèi)一些屏障，同其它抗驚厥藥相比，加巴噴丁具有較小的行為和 心血管副作用。加巴噴丁對(duì)腦組織的新穎結(jié)合點(diǎn)有高的親和性，它能通過氨基酸轉(zhuǎn)移體通 過體內(nèi)一些屏障，同其他抗驚厥藥相比，加巴噴丁具有較小的行為和心血管副作用。
[0003] 加巴噴丁常用于常規(guī)抗癲癇藥不能滿意控制或不能耐受的局限性發(fā)作的癲癇患 者，以及局限性發(fā)作并繼而全身化的癲癇患者的附加治療。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種加巴噴丁的藥物組合物，該藥物組合物中含有加巴噴 丁和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，加巴噴丁和該天然產(chǎn)物可以協(xié)同治療脫發(fā)。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0006] 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0008] -種加巴噴丁的藥物組合物，包括加巴噴丁、如權(quán)利要求1所述的化合物（I)和藥 學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。
[0009] 進(jìn)一步地，藥學(xué)上可以接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、 崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體或潤(rùn)滑劑。
[0010] 進(jìn)一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0011] 上述化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將忍冬藤粉碎，用75~85%乙 醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃 取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇取物用 大孔樹脂除雜，先用25 %乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70 %乙醇洗脫12個(gè)柱體積，收集70 %洗 脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分 離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步 驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積 百分濃度為72%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得 到化合物(I)。
[0012] 進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)用80%乙醇熱回流提取，合并提取 液。
[0013] 進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂。
[0014]進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯進(jìn)行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0015] 上述化合物(I)在制備治療脫發(fā)的藥物中的應(yīng)用。
[0016] 上述加巴噴丁的藥物組合物在制備治療脫發(fā)的藥物中的應(yīng)用。
[0017]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0018] 本發(fā)明提供的加巴噴丁的藥物組合物中含有加巴噴丁和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn) 物，加巴噴丁和該天然產(chǎn)物單獨(dú)作用時(shí)，對(duì)脫發(fā)具有治療作用；二者聯(lián)合作用時(shí)，對(duì)脫發(fā)的 治療效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療脫發(fā)的藥物。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實(shí) 質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0020] 實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0021] 分離方法：（a)將忍冬藤(2kg)粉碎，用80%乙醇熱回流提取（15LX3次），合并提取 液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水飽和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫 12個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1 (10個(gè)柱體積）、45:1 (8個(gè)柱體積）、25:1 (10 個(gè)柱體積)和15:1 (8個(gè)柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分 4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1 (10個(gè)柱體積）、15:1 (8個(gè)柱體積)和1:1 (6個(gè) 柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為72 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物（I) (HPLC歸一化純度大于98% )。
[0022] 結(jié)構(gòu)確證:冊(cè)431-]\^顯示[]\?^]+為111/2 549.2308，結(jié)合核磁特征可得分子式為 C33H34〇6，不飽和度為 17。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ρρπι，DMS〇-d6，500MHz): H-2 (6 · 47，s)，H-6 (6.42，s)，H-a(6.71，d，J=16.2)，H-0(6.85，d，J=16.2)，H-2'，6'（7.71，d，J = 8.5)，H-3'， 5'（7.12，d，J = 8.5)H-3"（6.49，d，J = 2.3)，H-5"（6.42，dd，J = 8.2,2.3)，H-6"（7.18，d，J = 8·2)，Η-α'（2·34，πι，2Η)，Η-β'（2·21，πι，2Η)，Η-γ，（4.39，t，J = 8.2)，H-2" '，6" '（7.15，d，J = 8.2)，H-3" '，5" '（6.57，d，J = 8.2)，3-0CH3(3.71，s)，4'-0CH3(3.82，s)，2"-0CH 3(3.73， s)，4"-OCH3(3 · 84，s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)δ。(ppm，DMS〇-d6，125MHz): 130 · 1 (C，1-C)，105 · 6 (CH，2-C)，157.4(C，3-C)，118.8(C，4-C)，157.6(C，5-C)，105.7(CH，6-C)，126.5(CH，a-C)， 127.9(CH，0-C)，137.1(C，1'-C)，128.2(CH，2'，6'-C)，116.1(CH，3'，5'-C)，157.6(C，4'-C)，123.5(C，1"-C)，159.3(C，2"-C)，99.2(CH，3"-C)，157.0(C，4"-C)，107.1(CH，5"-C)， 130.6(CH，6"-C)，29.4(CH 2，a'-C)，34.1(CH2，P'-C)，40.6(CH，γ，-C)，138.0(C，l" '-C)， 129.7(CH，2" '，6" '-C)，114.8(CH，3" '，5" '-C)，155.3(C，4" '-C)，55.7(CH3,3-0CH3)，55.6 (CH3，4 ' -OCH3)，56 · 2 (CH3，2" -OCH3)，55 · 7 (CH3，4" -OCH3)。h-NMR和1H-1!! COSY譜顯示出兩對(duì) 雙質(zhì)子雙峰[SH7.71(2H，d，J = 8.5Hz)，7.12(2H，d，J = 8.5Hz)，7.15(2H，d，J = 8.2Hz)，6.57 (2H，d，J = 8.2Hz)]，表明該化合物含有兩個(gè)1，4-二取代芳環(huán)。此外，觀察到一組ABX的耦合 信號(hào) SH6.49(lH，d，J = 2.3Hz)，6.42(lH，dd，J = 8.2,2.3Hz)和 7.18(1!1，(1，了 = 8.2!^)，表明 該化合物含有一個(gè)1，2，4-三取代芳環(huán)。另一對(duì)雙質(zhì)子單峰信號(hào)δΗ6.47(1H，s)和6.42(1H， s)，說明含有一個(gè)1，3,4,5_四取代芳香環(huán)。除了芳族質(zhì)子，還有兩個(gè)反式烯烴質(zhì)子信號(hào)δ !16.71(1!1，(1，1=16.2泡）和6.85(1!1，(1，1=16.2泡），兩個(gè)亞甲基脂肪族質(zhì)子信號(hào)[6!12.34 (111，2!0,2.21(111，2!0]，一個(gè)次甲基信號(hào)[6!14.39(1!1，^ = 8.2抱）]，以及四個(gè)甲氧基信號(hào)[6 H3.71，3.73,3.82,3.84(3H，s)]。13C-NMR和HSQC譜顯示了 33個(gè)碳信號(hào)，包括六個(gè)含氧季碳， 五個(gè)芳香族季碳，十三個(gè)芳香族次甲基碳，三個(gè)脂族次甲基碳，兩個(gè)脂族亞甲基碳，四個(gè)甲 氧基碳。HMBC譜中，反式烯烴質(zhì)子與對(duì)-甲氧基苯和四取代苯環(huán)的相關(guān)性表明該化合物為共 輒芪類化合物。HMBC譜中C-3、C-4和C-5與脂肪族次甲基質(zhì)子信號(hào)的相關(guān)性表明chalcane單 元與C-4相連。HMBC譜中各甲氧基信號(hào)分別與C-3，C-4 '，C-2"和C-4"的相關(guān)性表明(：-3，(：-4 '，C-2"和C-4"各連有一個(gè)甲氧基基團(tuán)。此外，通過HMBC和N0ESY實(shí)驗(yàn)確認(rèn)了亞甲基碳C-α ' 與三取代苯環(huán)的C-Γ相連，C-γ '與對(duì)-羥基苯環(huán)連接。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和N0ESY譜， 以及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下所示，立體構(gòu)型進(jìn)一步通過ECD 試驗(yàn)確定，理論值與實(shí)驗(yàn)值基本一致。
[0023]該化合物化學(xué)式及碳原子編號(hào)如下：
[0025] 實(shí)施例2:藥理作用
[0026]脫發(fā)是一種最常見皮膚疾病。長(zhǎng)期以來，人們一直致力于尋找和研發(fā)治療脫發(fā)的 藥物，如糖皮質(zhì)激素、米諾地爾等。然而到目前為止，尚沒有一種藥物能完全治愈脫發(fā)，且存 在較大的不良反應(yīng)。因此，開發(fā)療效確切、無不良反應(yīng)的防治脫發(fā)的藥物具有重要的社會(huì)意 義和經(jīng)濟(jì)意義。本實(shí)施例采用環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide，CTX)建立小鼠脫毛模型，觀察 藥物對(duì)改善脫毛小鼠毛發(fā)生長(zhǎng)的作用。
[0027] 1、材料與方法
[0028] 1.1動(dòng)物
[0029] SPF級(jí)，雄性C57BL/6小鼠，體質(zhì)量18~20g，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。飼養(yǎng)環(huán) 境:室溫控制在24~26°C，光線每12h明暗交替，自由進(jìn)食，隔日更換墊料。
[0030] 1.2試劑與樣品
[0031] 加巴噴丁購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。化合物（I)自制，制備方法見實(shí)施例1。環(huán) 磷酰胺(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司）<XBA檢測(cè)試劑盒(美國(guó)，BD公司）、CD4檢測(cè)試劑盒(上 海穎心實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司）、CD8檢測(cè)試劑盒(上海穎心實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司）。
[0032] 1.3儀器
[0033] JEM-1010型電鏡（日本，日本電子公司）、C6型流式細(xì)胞儀(美國(guó)，BD公司）、MK3型酶 標(biāo)儀(美國(guó)，Thermo公司）。
[0034] 1.4小鼠分組及模型制備
[0035] C57BL/6小鼠用麻醉機(jī)麻醉。麻醉后，將松香和石蠟按1:1的比例混合加熱融化，并 均勻涂抹于項(xiàng)背部，凝固變硬后揭去，誘導(dǎo)生長(zhǎng)期毛發(fā)，每只小鼠脫毛面積約為2. OcmX 2.0cm。注意不要燙傷小鼠皮膚。脫毛后9天(小鼠背部皮膚誘導(dǎo)生長(zhǎng)期毛囊產(chǎn)生），根據(jù)隨機(jī) 數(shù)字表，將小鼠分為5組，每組20只，分別是空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、加巴噴丁組（280mg· kg-0、化合物（I)組(280mg · kg-4、加巴噴丁與化合物（I)組合物組【140mg · kg-1加巴噴丁+ 140mg · kg<化合物（I)】。所有小鼠脫毛區(qū)皮下注射CTX150mg/kg后，模型組任其自然生長(zhǎng)， 空白對(duì)照組給予生理鹽水(l〇〇mg/kg)灌胃治療，其他各組藥物灌胃治療，持續(xù)8周。
[0036] 1.5組織取材
[0037] 分別在給藥后1、2、4、8周，每組隨機(jī)選取小鼠各5只，行眼眶采血，每只1~2mL。用 于ELISA檢測(cè)：每組取2個(gè)血樣，加入EDTA抗凝，3000r/min離心30min取上清，于一 20 °C保存 備用。用于流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè):每組取3個(gè)血樣，分離血清，于-70°C保存?zhèn)溆?。所有?dòng)物取血后 立即處死，取其脫毛區(qū)域皮膚組織。經(jīng)10%福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，石蠟切片，切片厚 4~5ym，-80°C下保存?zhèn)溆谩?br>[0038] 1.6ELISA檢測(cè)外周血CD4+、CD8+表達(dá)水平
[0039]樣本室溫下平衡20min。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔?？瞻卓资裁炊疾患?，標(biāo)準(zhǔn) 品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50此。待測(cè)樣本先加樣本稀釋液40yL，再加待測(cè)樣本10yL，隨后 標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體l〇〇yL，用封板膜封 住反應(yīng)孔，37 °C恒溫箱孵育60min。棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加洗滌液，靜置lmin，甩去 洗滌液，吸水紙上拍干，重復(fù)5次。所有孔加入底物A、B各50yL，37°C避光孵育15min。加終止 液50yL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔0D值。統(tǒng)計(jì)CD4和CD8的0D值，將CD4/CD8均值作為 結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
[0040] 1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0041] 結(jié)果以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差U±s)表示。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，組間比較應(yīng) 用單因素方差分析。
[0042] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0043] 2.1體質(zhì)量變化和毛發(fā)生長(zhǎng)情況
[0044] 小鼠經(jīng)CTX誘導(dǎo)脫毛至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，各組小鼠體質(zhì)量無明顯差異(P>0.05)。脫毛小 鼠經(jīng)加巴噴丁、化合物（I)、加巴噴丁與化合物（I)組合物給藥后1~2周，各組小鼠脫毛區(qū)局 部皮膚由粉色逐漸轉(zhuǎn)變成灰黑色，小鼠脫毛區(qū)皮膚灰黑色區(qū)域明顯比模型組和生理鹽水組 要大;給藥至4~8周，各組小鼠脫毛區(qū)呈黑色，且有毛發(fā)逐漸長(zhǎng)出、伸長(zhǎng)。給藥組毛發(fā)相對(duì)于 模型組和生理鹽水組，毛發(fā)更為致密。
[0045] 2.2對(duì)脫毛小鼠外周血⑶47⑶8+比值表達(dá)水平的影響
[0046] 加巴噴丁組、化合物（I)組、加巴噴丁組與化合物（I)組合物組外周血⑶4+/CD8+比 值隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，呈下降趨勢(shì)。1、2、3、4周，與模型對(duì)照組比，加巴噴丁組與化合物（I)組 合物組外周血⑶47⑶8+比值顯著下降(P<0.01);與模型對(duì)照組比，加巴噴丁組、化合物（I) 組外周血CD4+/CD8+比值下降(P<0.05)。
[0047] 試驗(yàn)結(jié)果見表1。
[0048] 表1對(duì)脫毛小鼠外周血⑶47⑶8+比值表達(dá)水平的影響
[0050] 脫毛模型最常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為C57BL/6小鼠，由于其為有色種屬，皮膚顏色隨毛囊的 發(fā)育而表現(xiàn)不同的顏色，是研究毛囊發(fā)育和再生一種很好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
[0051] 目前關(guān)于脫發(fā)的病理生理機(jī)制尚未明確，可能的原因主要與局部感染、神經(jīng)毒物、 精神抑郁、內(nèi)分泌因素等因素相關(guān)。近年來隨著遺傳、基因、分子水平的不斷發(fā)展，國(guó)內(nèi)外諸 多學(xué)者認(rèn)為脫發(fā)主要是一種由T細(xì)胞免疫介導(dǎo)的自身免疫性炎癥疾病，由于毛囊異常暴露 于潛在免疫活性的免疫系統(tǒng)，再通過毛囊的抗原物質(zhì)激活強(qiáng)大的免疫系統(tǒng)，誘發(fā)釋放大量 炎癥，繼而引起脫發(fā)。CD4+和CD8+T細(xì)胞在脫發(fā)患者毛囊內(nèi)及周圍的浸潤(rùn)是引起毛發(fā)脫落的 關(guān)鍵，CD8+T細(xì)胞一直被認(rèn)為對(duì)毛囊發(fā)揮直接的細(xì)胞毒作用，而CD4+T細(xì)胞起輔助細(xì)胞作用， 在脫發(fā)的發(fā)病過程中兩者是共同發(fā)揮作用的。
[0052]加巴噴丁、化合物（I )、加巴噴丁組與化合物（I)組合物維持治療對(duì)脫毛小鼠具有 明顯療效，顯著改善了小鼠脫毛區(qū)的毛發(fā)生長(zhǎng)情況，通過下調(diào)外周血⑶4+/CD8+比值來發(fā)揮 作用，為臨床脫發(fā)的藥物治療提供了新的治療方案。其中，加巴噴丁和化合物（I)聯(lián)合作用 時(shí)，對(duì)毛發(fā)生長(zhǎng)的改善作用效果顯著，優(yōu)于加巴噴丁或化合物（I)單獨(dú)的作用效果，可以開 發(fā)成防治脫發(fā)的藥物。
[0053]上述實(shí)施例的作用在于說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物α)，2. -種加巴噴丁的藥物組合物，其特征在于:包括加巴噴丁、如權(quán)利要求1所述的化合 物(I)和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的加巴噴丁的藥物組合物，其特征在于:藥學(xué)上可以接受的載體 包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體 或潤(rùn)滑劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的加巴噴丁的藥物組合物，其特征在于:所述劑型包括片劑、膠 囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、 栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含以下操作步驟：（a)將忍 冬藤粉碎，用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫 12個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、15:1 和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的 反相硅膠分離，用體積百分濃度為72 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)用80%乙醇熱回 流提取，合并提取液。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為D101型 大孔吸附樹脂。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)中用二氯甲烷代 替乙酸乙酯進(jìn)行萃取，得到二氯甲烷萃取物。9. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療脫發(fā)的藥物中的應(yīng)用。10. 權(quán)利要求2~4任一所述的加巴噴丁的藥物組合物在制備治療脫發(fā)的藥物中的應(yīng) 用。
【文檔編號(hào)】A61K31/195GK105949042SQ201610402169
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年6月7日
【發(fā)明人】王昌榮
【申請(qǐng)人】王昌榮