一種治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物及其用圖
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種藥物組合物及其用于制備治療腦膠質(zhì)瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明藥物組合物以欖香烯和泊馬度胺為藥物活性成分，其中欖香烯和泊馬度胺的比例優(yōu)選為0.003?100：1，進(jìn)一步優(yōu)選為0.01?50：1。本發(fā)明通過(guò)大量的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，欖香烯和泊馬度胺在治療腦膠質(zhì)瘤方面具有顯著的協(xié)同作用，能夠顯著減小腫瘤體積，降低瘤重，延長(zhǎng)生存期。本發(fā)明藥物組合物治療腦膠質(zhì)瘤時(shí)療效確切、毒副作用小，具有很好的醫(yī)學(xué)應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】
-種治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物及其用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，設(shè)及一種治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物及其用途，具體設(shè)及 包含攬香締和泊馬度胺的組合物及其用于制備治療腦膠質(zhì)瘤藥物中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 膠質(zhì)瘤是發(fā)生于神經(jīng)外胚層的腫瘤，故亦稱神經(jīng)外胚層腫瘤或神經(jīng)上皮腫瘤。腦 膠質(zhì)瘤是一種高復(fù)發(fā)的腦部腫瘤疾病，具有發(fā)病率、復(fù)發(fā)率、死亡率高和治愈率低等"Ξ高 一低"的特點(diǎn)，其發(fā)病病因至今仍不明確。腦膠質(zhì)瘤(腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤)約占煩內(nèi)腫瘤的46%， 發(fā)病率為3~10人/10萬(wàn)人，發(fā)病年齡高峰在30-40歲，或10-20歲。腦膠質(zhì)瘤占全身惡性腫瘤 的1%~3%，手術(shù)加放化療的平均生存期僅為8~11個(gè)月。膠質(zhì)細(xì)胞瘤的生長(zhǎng)特點(diǎn)為浸潤(rùn)性 生長(zhǎng)，與正常腦組織無(wú)明顯界限，多數(shù)不限于一個(gè)腦葉，向腦組織外呈指狀深入破壞腦組 織，偏良性者生長(zhǎng)緩慢，病程較長(zhǎng)，自出現(xiàn)癥狀至就診時(shí)間平均兩年，惡性者瘤體生長(zhǎng)快，病 程短，自出現(xiàn)癥狀到就診時(shí)多數(shù)在3個(gè)月之內(nèi)，70-80%多在半年之內(nèi)。
[0003] 腦膠質(zhì)瘤是一種浸潤(rùn)性生長(zhǎng)腫瘤，傳統(tǒng)多采用手術(shù)治療，但由于其呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)， 大多與正常腦組織無(wú)明顯分界，手術(shù)難W做到徹底切除，生存率較低。采用手術(shù)治療為主， 術(shù)后輔W放療、化療等綜合治療方案可W提高療效。腦膠質(zhì)瘤的化療工作作為術(shù)后輔助治 療，關(guān)鍵是研制特效的藥物。
[0004]泊馬度胺(pomalidomide，商品名:Pomalyst)是新一代免疫調(diào)節(jié)劑，是沙利度胺類 似物，比沙利度胺和來(lái)那度胺更有效、毒性更小。泊馬度胺為膠囊劑，有l(wèi)mg、2mg、3mg和4mg 四種規(guī)格，推薦起始劑量為每日4mg，28d為一個(gè)周期，前21d用藥，直到病情惡化?？蒞與地 塞米松聯(lián)合使用[3]。美國(guó)食品和藥物管理局(FDA)2013年2月批準(zhǔn)泊馬度胺用于曾接受至 少兩種治療(包括來(lái)那度胺和棚替佐米)之后疾病仍然進(jìn)展，W及對(duì)治療無(wú)效且在最后一種 治療60d內(nèi)發(fā)生疾病進(jìn)展的MM。攬香締化lemene)是從傳統(tǒng)中草藥姜科植物溫郁金(溫義術(shù)） 中提取獲得的祗締類化合物。攬香締注射液we-攬香締為主要成分，并含有少量T-和S-攬 香締及其它祗類化合物，通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究和臨床試驗(yàn)已于1994年作為國(guó)家二類抗腫瘤新藥上 市應(yīng)用。多年來(lái)，有關(guān)攬香締注射液進(jìn)一步的基礎(chǔ)研究層出不窮，研究結(jié)果充分表明該藥對(duì) 多種腫瘤細(xì)胞具有顯著的抑殺作用，能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡和分化，逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多藥耐 藥和抗腫瘤轉(zhuǎn)移，與放化療聯(lián)合具有增敏減毒、提高機(jī)體免疫力W及毒副反應(yīng)輕微等顯著 特點(diǎn)。
[0005] 經(jīng)檢索，目前在治療腦膠質(zhì)瘤的臨床藥物方面尚無(wú) W攬香締和泊馬度胺為活性成 分的抗腦膠質(zhì)瘤藥物組合物用于腦膠質(zhì)瘤治療的臨床報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對(duì)現(xiàn)有腦膠質(zhì)瘤治療過(guò)程中缺乏有效的化療藥物，且現(xiàn)有的化療藥物毒副作用 大的缺陷，本發(fā)明提供一種安全有效的治療腦膠質(zhì)瘤藥物，進(jìn)一步增加腦膠質(zhì)瘤患者的臨 床用藥選擇，該藥物組合物W攬香締和泊馬度胺為藥物活性成分，其對(duì)于腦膠質(zhì)瘤的治療 效果好、毒副作用小，有很好的臨床應(yīng)用前景。
[0007] 本發(fā)明人經(jīng)過(guò)大量的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)驚奇地發(fā)現(xiàn)攬香締和泊馬度胺聯(lián)合應(yīng)用在治療 腦膠質(zhì)瘤方面具有顯著地協(xié)同作用，本發(fā)明藥效部分實(shí)施例1表明含有攬香締和泊馬度胺 的藥物組合物對(duì)大鼠腦膠質(zhì)瘤模型具有很好的治療作用，其能夠顯著抑制大鼠腦膠質(zhì)瘤生 長(zhǎng)，降低腦膠質(zhì)瘤瘤重，明顯延長(zhǎng)大鼠生存期。本發(fā)明藥效部分實(shí)施例2表明含有攬香締和 泊馬度胺的藥物組合物對(duì)裸鼠腦膠質(zhì)瘤模型具有很好的治療作用，能夠顯著抑制裸鼠腦膠 質(zhì)瘤生長(zhǎng)，減小腫瘤體積。本發(fā)明藥物組合物治療腦膠質(zhì)瘤的效果不僅顯著優(yōu)于兩種藥物 單獨(dú)使用時(shí)的效果，更優(yōu)于兩者效果的加和。兩種藥物聯(lián)合使用可W明顯減少各自用量，減 少不良反應(yīng)發(fā)生。
[0008] 本發(fā)明目的之一是提供一種用于治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，該藥物組合物的藥 物活性成分由攬香締和泊馬度胺組成。發(fā)明人通過(guò)大量藥理實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該藥物組合物中攬 香締和泊馬度胺在廣泛的比例范圍內(nèi)均可W起到治療腦膠質(zhì)瘤的協(xié)同治療效果。根據(jù)藥物 組合物的治療腦膠質(zhì)瘤的效果和協(xié)同作用的強(qiáng)弱，本發(fā)明藥物組合物中攬香締與泊馬度胺 的重量比優(yōu)選為0.003-100:1，進(jìn)一步優(yōu)選為0.01-50:1。
[0009] 本發(fā)明還提供了含有上述藥物組合物的藥物制劑，本發(fā)明藥物組合物可W根據(jù)需 要制備成合適的藥物制劑用于腦膠質(zhì)瘤的治療，如微乳制劑、注射制劑、片劑、膠囊劑等。所 述微乳制劑所選用的輔料可W為薄荷油、聚氧乙締-23-月桂基酸、1,2-丙二醇、氨化挪油甘 油脂、月桂酷基聚乙二醇-32-甘油醋、聚乙二醇3350、辛酸油酸乙醋、聚乙二醇8000、留蘭香 油、十甘油單硬脂酸醋、聚氧乙締藍(lán)麻油化-40中的部分或全部。上述制劑的所用輔料及制 備方法均可采用其常規(guī)的輔料和制備方法制得。
[0010] 本發(fā)明目的之二是提供上述藥物組合物的醫(yī)藥用途，即該藥物組合物用于制備治 療腦膠質(zhì)瘤藥物中的用途。本發(fā)明的藥物組合物在臨床上可用于治療腦膠質(zhì)瘤。上述所述 的醫(yī)藥用途中，根據(jù)動(dòng)物病情W及用藥部位可W將攬香締和泊馬度胺藥物組合物制備成合 適的藥物制劑W方便用藥，對(duì)于本發(fā)明治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物的給藥時(shí)間和給藥次數(shù) 需要根據(jù)病情的具體診斷結(jié)果而定，運(yùn)在本領(lǐng)域技術(shù)人員掌握的技術(shù)范圍之內(nèi)。例如，將對(duì) 大鼠腦膠質(zhì)瘤的治療方案應(yīng)用于人身上，所有藥物對(duì)人的有效劑量可W通過(guò)該藥物對(duì)大鼠 的有效劑量進(jìn)行換算，運(yùn)對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的。
[0011] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明藥物組合物在治療腦膠質(zhì)瘤方面具有如下突出的優(yōu)勢(shì)：
[0012] (1)與單獨(dú)給藥攬香締或泊馬度胺相比，本發(fā)明含有攬香締和泊馬度胺的藥物組 合物對(duì)大鼠腦膠質(zhì)瘤模型治療效果更好，并且兩種藥物活性成分在降低腦膠質(zhì)瘤瘤重和延 長(zhǎng)患者存活時(shí)間方面體現(xiàn)出很好的協(xié)同增效作用。與單獨(dú)給藥攬香締或泊馬度胺相比，本 發(fā)明含有攬香締和泊馬度胺的藥物組合物對(duì)裸鼠腦膠質(zhì)瘤模型治療效果更好，并且兩種藥 物活性成分在減小腫瘤體積方面體現(xiàn)出很好的協(xié)同增效作用。
[0013] (2)本發(fā)明藥物組合物含有泊馬度胺和攬香締，二者聯(lián)合用藥在具有協(xié)同作用的 同時(shí)，可W顯著降低二者用量，從而顯著降低患者用藥時(shí)的毒副作用，減少不良反應(yīng)發(fā)生。
[0014] (3)本發(fā)明藥物組合物W固定組合的形式治療腦膠質(zhì)瘤，與同時(shí)服用單藥相比服 用更佳方便，提高了患者的順應(yīng)性和依從性，一定程度上增強(qiáng)了對(duì)疾病的治療效果。
【具體實(shí)施方式】
[0015] W下通過(guò)具體實(shí)施方法進(jìn)一步描述本發(fā)明，但本發(fā)明的應(yīng)用范圍不僅僅限于下列 實(shí)施例。在本發(fā)明的內(nèi)容、精神和/或范圍內(nèi)，對(duì)本發(fā)明技術(shù)特征的替換和/或組合，對(duì)本領(lǐng) 域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的，且包含在本發(fā)明之中。
[0016] 第一部分本發(fā)明藥物組合物制劑及其制備方法
[0017] 實(shí)施例1微乳濃縮物 [001引處方 糖香嫌 0 Ig 泊馬度胺 30g 薄荷油 40甚
[0019] 辛酸油酸乙驅(qū) 巧g 1，2-丙二醇 斗游 聚己二醇3350 40g
[0020] 制備工藝:稱取處方量薄荷油、辛酸油酸乙醋、1,2-丙二醇、聚乙二醇3350,混合后 攬拌均勻，然后加入攬香締、泊馬度胺溶解，也可W超聲波處理W加速溶解，得澄清濃縮液， 即為攬香締與泊馬度胺微乳濃縮物。激光粒度測(cè)定儀測(cè)定其粒徑，平均粒徑為40nm。上述微 乳濃縮物可進(jìn)一步稀釋用于注射或口服。
[0021] 實(shí)施例2微乳濃縮物 [0022] 處方 攬香婦 20g 泊馬度胺 lOg 薄荷油 靴g
[0023] 辛酸油酸乙醋 55g 1:，2-丙二醇 45g 聚己二醇巧50 40g
[0024] 制備工藝同實(shí)施例1。激光粒度測(cè)定儀測(cè)定其粒徑，平均粒徑為20nm。上述微乳濃 縮物可進(jìn)一步稀釋用于注射或口服。
[0025] 實(shí)施例3微乳濃縮物 [002引處方 攬香嫌 lOg 泊馬度胺 O.lg 薄荷油 4化
[0027] 辛酸油酸己醋 55g 1,，2-丙二醇 45g 聚乙二醇巧50 4好g
[0028] 制備工藝同實(shí)施例1。激光粒度測(cè)定儀測(cè)定其粒徑，平均粒徑為33nm。上述微乳濃 縮物可進(jìn)一步稀釋用于注射或口服。
[0029] 實(shí)施例4微乳濃縮物 [0030] 處方 攬香婦 〇.3g 泊馬度胺 lOg
[0031] 薄荷油 3麵 聚氧石締 -23-月桂基酸 60g 1，2-巧二醇 30g
[0032] 制備工藝:稱取處方量薄荷油、聚氧乙締-23-月桂基酸、1,2-丙二醇，混合后攬拌 均勻，然后加入攬香締、泊馬度胺溶解，也可W超聲波處理W加速溶解，得澄清濃縮液，即為 攬香締與泊馬度胺微乳濃縮物。激光粒度測(cè)定儀測(cè)定其粒徑，平均粒徑為45nm。上述微乳濃 縮物可進(jìn)一步稀釋用于注射或口服。
[0033] 實(shí)施例5微乳濃縮物
[OOW 處方 繼香嫌 越 泊馬度胺 O.ig
[003引薄荷油 35g 聚氧藝締 -23-月桂基髓 60貸 1，2-巧二酶： 30g
[0036] 制備工藝同實(shí)施例4。激光粒度測(cè)定儀測(cè)定其粒徑，平均粒徑為75nm。上述微乳濃 縮物可進(jìn)一步稀釋用于注射或口服。
[0037] 實(shí)施例6微乳濃縮物 [00測(cè)處方 植香婦 D.5g 泊馬度胺 lOg
[0039] 薄荷油 35g 聚敏乙締 -23-月桂基職 60g 1，2-丙二醇 30g
[0040] 制備工藝同實(shí)施例4。激光粒度測(cè)定儀測(cè)定其粒徑，平均粒徑為50nm。上述微乳濃 縮物可進(jìn)一步稀釋用于注射或口服。
[0041 ]實(shí)施例7微乳濃縮物 [0042] 處方 攬香婦 巧:g 巧馬度肢 么5g
[0043] 月桂醜基聚藝二醇-32-甘油醋 20g 聚氧乙締蘆麻油6以40 3始 1，2-丙二醇 ]5g
[0044] 制備工藝：
[0045] 稱取處方量月桂酷基聚乙二醇-32-甘油醋、聚氧乙締藍(lán)麻油化-40、1,2-丙二醇， 混合后攬拌均勻，然后加入攬香締、泊馬度胺溶解，也可W超聲波處理W加速溶解，得澄清 濃縮液，即為攬香締與泊馬度胺的微乳濃縮物。激光粒度測(cè)定儀測(cè)定其粒徑，平均粒徑為 63nm。上述微乳濃縮物可進(jìn)一步稀釋用于注射或口服。
[0046] 實(shí)施例8片劑
[0047] 處方 槐香稀 llg 泊馬度胺 0.5g 微晶纖維素 52g
[004引預(yù)膠化淀粉 4礎(chǔ) 交聯(lián)錢(qián)甲基纖維素鋼 15g 硬脂酸鎮(zhèn) 2.5g 10%淀粉漿 5.5g
[0049] 制備工藝:將藥物和輔料分別過(guò)80目篩，將攬香締與3?微晶纖維素、30g預(yù)膠化淀 粉和Ug交聯(lián)簇甲基纖維鋼充分混合，10%淀粉漿制軟材，18目篩制粒，60°C下干燥，得顆粒 1。將泊馬度胺與1始微晶纖維素、12g預(yù)膠化淀粉和2g交聯(lián)簇甲基纖維鋼充分混合，10%淀 粉漿制軟材，18目篩制粒，60°C下干燥，得顆粒2。按等量遞增原則，將顆粒1和顆粒2充分混 合，16目篩整粒，加入硬脂酸儀，混勻，壓片。
[0050] 實(shí)施例9膠囊劑
[0051 ] 處方 攬香稀 llg 泊馬度胺 0,確 淀粉 69g
[0052]乳糖 20g 交聯(lián)竣甲基纖維素銷 15g 硬脂酸漢 么罐 7%PVP溶液 10 5g
[0053]制備工藝:將藥物和輔料分別過(guò)80目篩，將攬香締與49g淀粉和13g交聯(lián)簇甲基纖 維素鋼充分混合，7%PVP溶液制軟材，18目篩制粒，60°C下干燥，得顆粒1。將泊馬度胺與20g 乳糖、20g淀粉和2g交聯(lián)簇甲基纖維素鋼充分混合，7%PVP溶液制軟材，18目篩制粒，60°C下 干燥，得顆粒2。按等量遞增原則，將顆粒1和顆粒2充分混合，16目篩整粒，加入硬脂酸儀，混 勻，灌膠囊。
[0化4] 實(shí)施例10注射液 [0055] 處方 攬香締 〇.2g 泊馬度朦 25g
[0化6] 氯化鋼 〇.85g 1，丙二醇 1.5g
[0057]制備工藝:取處方量的攬香締和泊馬度胺，加入適量的蒸饋水，再加入丙二醇進(jìn)行 充分溶解，加入氯化鋼，過(guò)濾、灌封，100攝氏度滅菌30min即得。
[005引實(shí)施例11注射液
[0059] 處方 攬香締 lOg 泊馬度胺 〇.lg
[0060] 氯化輛 0.85g 1，2-丙二醇 1.5g
[0061] 制備工藝同實(shí)施例10。
[0062] 實(shí)施例12注射液
[0063] 處方 攬香締 0,5各 泊馬度胺 5g
[0064] 氯化鋼 0 iS5g 1，2-丙 ^一醇 1.5g
[00化]制備工藝同實(shí)施例10。
[0066] 第二部分藥效學(xué)實(shí)施例部分
[0067] 實(shí)施例1組合物對(duì)Wistar大鼠體內(nèi)C6細(xì)胞的抑制作用實(shí)驗(yàn)
[0068] UWistar大鼠腦膠質(zhì)瘤模型的建立：
[0069] 選用健康雄性Wistar大鼠90只，體重250~280g。腫瘤細(xì)胞采用C6腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 (細(xì)胞濃度為1.0 X lo^ul，細(xì)胞存活率為95% W上）。2%戊己比妥鋼(40mg/kg)腹腔注射全 身麻醉后，將大鼠頭部固定在立體定向儀上，接種祀點(diǎn)座標(biāo)選定右側(cè)尾狀核(座標(biāo):前畫(huà)中 點(diǎn)前1.0cm，矢狀縫右旁3.0cm，硬膜下6.0cm)。將備用細(xì)胞懸液3ul W lu V3分鐘速度注射祀 點(diǎn)，注射完畢后留針5分鐘，使細(xì)胞充分沉積。拔針后用骨蠟封閉骨孔，術(shù)后連續(xù)3天注射青 霉素4萬(wàn)U/日。分籠飼養(yǎng)，每天觀察大鼠的存活狀態(tài)及手術(shù)切口情況。將種植腫瘤后12天的 大鼠用于實(shí)驗(yàn)。
[0070] 2、實(shí)驗(yàn)分組與給藥終濃度如下：
[0071 ]模型對(duì)照組:灌胃給予等體積的賦形劑
[0072] 攬香締低量組:灌胃給予0.1 mg/kg攬香締
[0073] 攬香締高量組:灌胃給予10.0 mg/kg攬香締
[0074] 泊馬度胺低組:灌胃給予0.1 mg/kg泊馬度胺
[0075] 泊馬度胺高組:灌胃給予30.0 mg/kg泊馬度胺
[0076] 組合物A組:灌胃給予10.0 mg/kg攬香締+0.1 mg/kg泊馬度胺
[0077] 組合物B組:灌胃給予1. Omg/kg攬香締+1. Omg/kg泊馬度胺
[0078] 組合物C組:灌胃給予0.1 mg/kg攬香締+30.0 mg/kg泊馬度胺 [00巧]3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)如下：
[0080] 給藥前用DMS0溶解各藥物有效成分，每天灌胃給藥1次?；熀竺芮杏^察大鼠的狀 態(tài)，發(fā)現(xiàn)狀態(tài)不佳立刻處死，記錄生存期，在處死動(dòng)物之前，向屯、腔注射0.5 %亞甲蘭酒精溶 液，使瘤組織與腦組織分界較清楚。取出鼠腦，分離出瘤體，稱重后，-70°C冰箱保存?zhèn)溆?。?組取3只鼠腦10%甲醒液固定，用于病理學(xué)檢查。
[0081] 計(jì)算腫瘤抑制率：
[0082] 腫瘤抑瘤率=(對(duì)照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對(duì)照組平均瘤重X 100%
[0083] 表1組合物對(duì)Wistar大鼠腦膠質(zhì)瘤大小的影響
[0084]
[0085] 與攬香締低量組相比嚴(yán)p<0.01;與攬香締高量組相比Λ<0.05嚴(yán)p<0.01;
[0086] 與泊馬度胺低量組相比，$9<0.05，$$9<0.01;與泊馬度胺高量組相比，￥口< 0.05;
[0087] 通過(guò)上述表1的結(jié)果可W看出，各治療組與模型對(duì)照組相比均有顯著差異（p< 0.05)，組合物A組、B組和C組與攬香締低劑量組相比具有極顯著性差異(p<0.01)，與攬香 締高劑量組相比也具有顯著性差異(P<〇. 05)，與泊馬度胺的兩個(gè)劑量組相比具有顯著性 差異或極顯著性差異。運(yùn)表明，攬香締與泊馬度胺聯(lián)合后體內(nèi)抑制腫瘤生長(zhǎng)具有協(xié)同增效 作用，即可W顯著抑制腦膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)、降低瘤重。
[0088] 此外，組合物A組、B組和C組在降低腦膠質(zhì)瘤瘤重方面，具有更好的治療效果。
[0089] 表2組合物對(duì)Wistar大鼠存活時(shí)間的影響
[0090]
[0091] 與攬香締低量組相比嚴(yán)p<0.01;與攬香締高量組相比Λ<0.05嚴(yán)p<0.01;
[0092] 與泊馬度胺低量組相比，$9<0.05，$$9<0.01;與泊馬度胺高量組相比，￥口< 0.05;
[0093] 通過(guò)上述表2的結(jié)果可W看出，各治療組與模型對(duì)照組相比均有顯著差異（p< 0.05)，組合物A組、B組和C組與攬香締低劑量組相比具有極顯著性差異(p<0.01)，與攬香 締高劑量組相比也具有顯著性差異(P<〇. 05)，與泊馬度胺的兩個(gè)劑量組相比具有顯著性 差異或極顯著性差異。運(yùn)表明，攬香締與泊馬度胺聯(lián)合后具有協(xié)同增效作用，能夠顯著延長(zhǎng) 患者的生存期。
[0094] 綜上，攬香締與泊馬度胺聯(lián)用，與單藥相比，具有顯著的協(xié)同增效作用，能夠顯著 抑制患者腦膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)，降低瘤重，延長(zhǎng)患者生存期。并且，兩藥聯(lián)用具有更好的治療效果。 運(yùn)在臨床應(yīng)用上具有十分重要的意義。
[00M]實(shí)施例2組合物對(duì)裸鼠體內(nèi)C6細(xì)胞的抑制作用實(shí)驗(yàn)
[0096] 1、裸鼠腦膠質(zhì)瘤模型的建立：
[0097] 1.1 U87細(xì)胞體外培養(yǎng)及接種前準(zhǔn)備口脈了膠質(zhì)瘤細(xì)胞在含10%胎牛血清的DMEM培 養(yǎng)基中培養(yǎng)，計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞懸液濃度為1〇8個(gè)細(xì)胞/ml,錐蟲(chóng)（臺(tái)吩)藍(lán)染色檢測(cè)活細(xì)胞比 率>95%。
[009引 1.2立體定向裸鼠腦內(nèi)種植U87細(xì)胞□選用健康Nu/Nu裸小鼠，體重20~25g。裸鼠麻 醉后固定于腦立體定向儀上。消毒后沿中線縱向切開(kāi)頭皮約1cm，暴露前因，用直徑1mm的牙 科鉆小屯、鉆穿煩骨。煩骨開(kāi)窗的中屯、位于前因中點(diǎn)前1 mm，矢狀縫右旁開(kāi)2mm，W lOul化milton注射器抽取配好的U87細(xì)胞懸液5ul(5X105個(gè)細(xì)胞），緩慢垂直煩骨進(jìn)針 2.5mm，回退0.5mm，Wlul/m in的速度注入細(xì)胞懸液。留針5min后緩慢拔針。用聚氯乙締膜 封閉骨孔，縫合頭皮，常規(guī)飼養(yǎng)，每天觀察裸鼠的存活狀態(tài)及手術(shù)切口情況。造模7天后，將 裸鼠隨機(jī)分成8組，每組10只。
[0099] 2、實(shí)驗(yàn)分組與給藥終濃度如下：
[0100]模型對(duì)照組:皮下注射等體積的賦形劑 [0101 ]攬香締低量組:皮下注射0.06mg/kg攬香締 [01 02]攬香締高量組:皮下注射6. Omg/kg攬香締
[0103] 泊馬度胺低組:皮下注射0.06mg/kg泊馬度胺
[0104] 泊馬度胺高組:皮下注射18.Omg/kg泊馬度胺
[010日]組合物A組:皮下注射6. Omg/kg攬香締+0.06mg/kg泊馬度胺
[0106] 組合物B組:皮下注射1 .Omg/kg攬香締+1 .Omg/kg泊馬度胺
[0107] 組合物C組:皮下注射0.06mg/kg攬香締+18. Omg/kg泊馬度胺
[0108] 3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)如下：
[0109] 給藥前用DMS0溶解各藥物有效成分，每天皮下注射1次。定期觀察裸鼠精神、飲食 和排便，用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫瘤結(jié)節(jié)的最長(zhǎng)徑(a)和最短徑(b)，根據(jù)公式計(jì)算腫瘤體積，V = l/63iab2，計(jì)算腫瘤體積的平均值。
[0110] U87膠質(zhì)細(xì)胞種植后第21天處死動(dòng)物，并取腫瘤組織固定于10%福爾馬林溶液中， 石蠟包埋，組織切片，肥染色，進(jìn)行組織病理檢查。
[0111] 表3組合物對(duì)裸鼠腦膠質(zhì)瘤大小的影響
[0112]
[0113]
[0114] 與攬香締低量組相比嚴(yán)p<0.01;與攬香締高量組相比嚴(yán)p<0.01;
[0115] 與泊馬度胺低量組相比，$9<0.05，$$9<0.01;與泊馬度胺高量組相比，￥口< 0.05。
[0116] 通過(guò)上述表3的結(jié)果可W看出，各治療組與模型對(duì)照組相比均有顯著差異（p< 0.05)，組合物A組、B組和C組與攬香締低劑量組相比具有極顯著性差異(p<0.01)，與攬香 締高劑量組相比也具有極顯著性差異(P<〇.01)，與泊馬度胺的兩個(gè)劑量組相比具有顯著 性差異或極顯著性差異。運(yùn)表明，攬香締與泊馬度胺聯(lián)合后體內(nèi)抑制腫瘤生長(zhǎng)具有協(xié)同增 效作用，即可W顯著抑制腦膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)、減小腫瘤體積。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種治療腦膠質(zhì)瘤的藥物組合物，其特征在于其藥物活性成分由欖香烯和泊馬度胺 組成。2. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物中欖香烯和泊馬度胺 的重量比為0.003-100:1。3. 如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物中欖香烯和泊馬度胺 的重量比為0.01-50:1。4. 如權(quán)利要求1-3中所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物為口服制劑。5. 如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于所述口服制劑為口服微乳、片劑、膠囊 劑。6. 如權(quán)利要求1-3中所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物為注射制劑。7. 如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于所述注射制劑為注射液、注射微乳。8. 如權(quán)利要求1所述的藥物組合物在制備治療腦膠質(zhì)瘤藥物中的用途。
【文檔編號(hào)】A61K31/015GK105998019SQ201610497971
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年6月29日
【發(fā)明人】王傳秀
【申請(qǐng)人】青島云天生物技術(shù)有限公司