專利名稱：咪唑三嗪酮類衍生物及其對抗炎癥進(jìn)程和/或免疫疾病的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及7-(4-叔丁基-環(huán)己基)-咪唑三嗪酮類、其制備方法及其在藥物，尤其是用于炎癥進(jìn)程和/或免疫疾病的治療和/或預(yù)防的藥物中的用途。
磷酸二酯酶(PDEs)是負(fù)責(zé)細(xì)胞內(nèi)第二信使cAMP(環(huán)腺苷酸)和cGMP(環(huán)鳥苷酸)的新陳代謝的一個(gè)酶家族。PDE4，作為cAMP特異性PDE，催化cAMP轉(zhuǎn)化為AMP且如果不是唯一就是主要的存在于炎性和免疫細(xì)胞型中的磷酸二酯酶的同工型。對該酶的抑制造成cAMP的蓄積，由此在這些細(xì)胞中導(dǎo)致一定范圍的促炎功能的抑制。炎癥介體的失控生成可引起急性和慢性炎癥、組織損傷、多器官衰竭和死亡。另外，吞噬細(xì)胞cAMP的升高導(dǎo)致氧自由基生成的抑制。這種細(xì)胞功能比其他例如凝集或酶釋放更加敏感。
目前認(rèn)識(shí)到哮喘和COPD(慢性阻塞性肺病)是慢性炎性肺病。在哮喘的情形中嗜曙紅細(xì)胞為支配性浸潤細(xì)胞。超氧化物自由基的隨后釋放以及這些浸潤細(xì)胞對陽離子型蛋白的損傷必然在該疾病的進(jìn)程和呼吸道超反應(yīng)性的惡化中起作用。
形成對照地，在COPD中中性粒細(xì)胞是在肺患者內(nèi)發(fā)現(xiàn)的支配性炎癥細(xì)胞類型。相信肺環(huán)境中釋放的介體和蛋白酶的作用導(dǎo)致了COPD中觀察到的不可逆性呼吸道阻塞。特別是蛋白酶在降解肺基質(zhì)中的作用產(chǎn)生少許氣泡且似乎是該疾病中觀察到的加速長期肺功能衰退的主要原因。
使用PDE 4抑制劑的治療希望減輕這些疾病中肺的炎性細(xì)胞負(fù)擔(dān)[M. S. Barnette，″PDE 4 inhibitors in asthma and chronicobstructive pulmonary disease″，在Progress in Drug Research，Birkhauser Verlag，Basel，1999，pp. 193-229中；H. J. Dyke&J. G.Montana，″The therapeutic potential of PDE 4 inhibitors″，Exp. Opin. Invest. Drugs 8，1301-1325(1999)]。
雖然PDE 4-抑制劑也常常產(chǎn)生副作用如嘔吐，已經(jīng)證明這些副作用與對環(huán)戊苯吡酮的高親和性結(jié)合位點(diǎn)的親和力有關(guān)，并且對該結(jié)合位點(diǎn)親和力減弱的化合物減輕嘔吐(J. Med. Chem.1996，39，120-125)。
WO 99/24433和WO 99/67244描述了2-苯基-咪唑三嗪酮類作為合成2-(氨基磺?；?苯基)-咪唑三嗪酮類的合成中間體產(chǎn)物cGMP-代謝性磷酸二酯酶的抑制劑。
美國專利No.A4,278,673公開了具有cAMP磷酸二酯酶抑制的2-芳基-咪唑三嗪酮類用于例如哮喘的治療。
本發(fā)明涉及通式(I)的化合物 其中R1代表(C6-C10)-芳基，其選擇性地被相同或不同的選自鹵素，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，氰基，硝基和三氟甲氧基的基團(tuán)取代，或代表(C1-C8)-烷基，它選擇性地被3-至10-員碳環(huán)基取代，或代表3-至10-員碳環(huán)基，其選擇性地被相同或不同的(C1-C4)-烷基取代，和R2代表4-叔丁基-環(huán)己-1-基，本發(fā)明涉及通式(I)的化合物的另一實(shí)施方式中，其中R1代表萘基，或代表苯基，其選擇性地被相同或不同的鹵素原子取代和R2具有上述含義。
本發(fā)明涉及通式(I)的化合物的另一實(shí)施方式，其中R1具有上述含義，和R2代表順式-4-叔丁基-環(huán)己-1-基。
本發(fā)明的化合物還可以其鹽、水合物和/或溶劑化物的形式存在。
通常，在此可以提及與有機(jī)或無機(jī)堿或酸的鹽。
本發(fā)明中優(yōu)選生理可接受的鹽。
生理可接受鹽也可以是本發(fā)明的化合物與無機(jī)或有機(jī)酸的鹽。優(yōu)選的鹽是那些與無機(jī)酸，例如鹽酸、氫溴酸、磷酸或硫酸的鹽，或與有機(jī)羧酸或磺酸，例如乙酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸或萘二磺酸的鹽。優(yōu)選的吡啶鎓鹽是與結(jié)合鹵素的鹽。
本發(fā)明的化合物可以存在立體異構(gòu)體，它們或者成為像和鏡像(對映體)，或它們不是像和鏡像(非對映體)。本發(fā)明同時(shí)涉及對映體和外消旋體，以及純的非對映體及其混合物。外消旋體，如非對映體，可以按照已知方法分離為立體異構(gòu)上均一的組分。
尤其優(yōu)選通式(I)的化合物，其中R1代表1-萘基或3-鹵代-苯基。
本發(fā)明的化合物的水合物是所述化合物與水的化學(xué)計(jì)量組合物，例如半-、一-或二水合物。
本發(fā)明的化合物的溶劑化物或鹽是所述化合物與溶劑的化學(xué)計(jì)量組合物。
(C1-C8)-烷基和(C1-C4)-烷基一般分別表示直鏈或支鏈的具有1-8，或1-4個(gè)碳原子的烷基。該烷基可以是飽和的或部分不飽和的，即含一個(gè)或多個(gè)雙和/或三鍵。優(yōu)選飽和的烷基。下列烷基是舉例實(shí)施例甲基，乙基，正丙基，異丙基，烯丙基，炔丙基，叔丁基，戊基，己基，庚基，和辛基，(C6-C10)-芳基一般表示具有6-10個(gè)碳原子的芳基。優(yōu)選苯基和萘基。
3-至10-員碳環(huán)基一般表示一-或多環(huán)的、具有3-10環(huán)原子的碳環(huán)基團(tuán)，優(yōu)選3-至8-員碳環(huán)基。優(yōu)選一-和二環(huán)碳環(huán)基。尤其優(yōu)選單環(huán)碳環(huán)基。該碳環(huán)基可以飽和或部分不飽和。優(yōu)選飽和碳環(huán)基。尤其優(yōu)選(C3-C10)-環(huán)烷基和(C4-C7)-環(huán)烷基。下列碳環(huán)基舉例說明環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)戊烯基，環(huán)己基，環(huán)庚基，降冰片-1-基，降冰片-2-基，降冰片-7-基，降冰片-2-烯-7-基，環(huán)辛基，立方烷基，環(huán)壬基，環(huán)癸基，萘烷基，金剛烷-1-基，金剛烷-2-基。
鹵素一般表示氟、氯、溴和碘。優(yōu)選氟、氯和溴。更優(yōu)選氟和氯。
除非另外說明，當(dāng)本發(fā)明的化合物中的基團(tuán)被選擇性取代時(shí)，一般優(yōu)選至多被3個(gè)相同或不同的基團(tuán)取代。
本發(fā)明進(jìn)一步提供一種制備本發(fā)明通式(I)的化合物的方法，其特征在于通式(II)的化合物 其中R2定義如上和L表示具有至多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，與通式(III)的化合物縮合 其中R1定義如上，優(yōu)選使用乙醇作為溶劑，得到通式(IV)的化合物， 其中R1和R2定義如上，其可以在分離后選擇性地與脫水劑反應(yīng)，優(yōu)選三氯氧化磷，生成通式(I)的化合物。
通式的化合物(IV)或者可以通過下列制備[A]通式(IIa)的化合物與通式(III)的化合物的縮合， 其中L定義如上，生成通式(IVa)的化合物， 其中R1定義如上，優(yōu)選用乙醇作為溶劑，[B]隨后通式(IVa)的化合物水解為通式(V)的化合物， 其中R1定義如上，[C]并且最后通式(V)的化合物與通式(VI)的化合物縮合
其中R2定義如上，和T代表離去基團(tuán)，優(yōu)選氯。
本發(fā)明的方法可以利用下列合成路線作為實(shí)例舉例說明
適合各步驟的溶劑是在反應(yīng)條件下不改變的常規(guī)有機(jī)溶劑。這些溶劑優(yōu)選包括醚類，例如乙醚，二噁烷，四氫呋喃，乙二醇二甲基醚，或烴類，例如苯，甲苯，二甲苯，己烷，環(huán)己烷或礦物油餾分，或鹵代烴類，例如二氯甲烷，三氯甲烷，四氯化碳，二氯乙烷，三氯乙烯或氯苯，或乙酸乙酯，二甲基甲酰胺，六甲基磷酸三酰胺，乙腈，丙酮，二甲氧基乙烷或吡啶。也可以使用上述溶劑的混合物。特別優(yōu)選乙醇用于反應(yīng)II/IIa+III→IV/IVa和二氯乙烷用于環(huán)化反應(yīng)IV→I。
反應(yīng)溫度通?？梢栽谙鄬挼姆秶鷥?nèi)變化。一般地，該反應(yīng)在-20℃至200℃的范圍內(nèi)，優(yōu)選0℃至100℃的范圍內(nèi)進(jìn)行。
本發(fā)明的步驟通常在常壓下進(jìn)行。然而，也可以在超常壓或低壓(例如，在0.5-5巴的范圍內(nèi))進(jìn)行。
通式(IVa)的化合物適宜在酸性條件下水解為通式(V)的化合物，例如在回流的2N鹽酸中。
通式(V)的化合物與通式(VI)的化合物在惰性溶劑中，如果適合在堿的存在下，縮合得到通式(IV)的化合物。
適當(dāng)?shù)亩栊匀軇┦窃诜磻?yīng)條件下不變化的常規(guī)有機(jī)溶劑。這些溶劑中優(yōu)選包括醚類，例如乙醚，二噁烷，四氫呋喃，乙二醇二甲醚，或烴類，例如苯，甲苯，二甲苯，己烷，環(huán)己烷或礦物油餾分，或鹵代烴類，例如二氯甲烷，三氯甲烷，四氯化碳，二氯乙烯，三氯乙烯或氯苯，或乙酸乙酯，二甲基甲酰胺，六甲基磷酸三酰胺，乙腈，丙酮，二甲氧基乙烷或吡啶。也可以使用上述溶劑的混合物。
適當(dāng)?shù)膲A一般是堿金屬氫化物或堿金屬鏈烷醇化物，例如，氫化鈉或叔丁醇鉀，或環(huán)胺類，例如，哌啶，吡啶，二甲基氨基吡啶或(C1-C4)-烷基胺，例如，三乙胺。優(yōu)選三乙胺、吡啶和/或二甲基氨基吡啶。
所述的堿通常是以1mol-4mol，優(yōu)選1.2mol-3mol的量使用，在各種情況中基于1mol式(V)的化合物計(jì)。
反應(yīng)溫度一般可在相對寬的范圍內(nèi)變化。通常，該反應(yīng)是在-20℃至200℃.，優(yōu)選0℃至100℃的范圍內(nèi)進(jìn)行。
一些的通式(II)的化合物是已知物質(zhì)，或它們是新的，且可以通過轉(zhuǎn)化通式(VI)的化合物來制備
R2-CO-T(VI)其中R2定義如上和T表示鹵素，優(yōu)選氯，首選通過與α-氨基-丁酸在惰性溶劑中溶液，如果適當(dāng)在堿和三甲基甲硅烷基氯的存在下，得到通式(VII)的化合物， 其中R2定義如上，和最后在惰性溶劑中與式(VIII)的化合物反應(yīng) 其中L定義如上，如果適當(dāng)在堿的存在下反應(yīng)。
通式(IIa)的化合物可以按照類似方法制備。
適當(dāng)?shù)亩栊匀軇┦窃诜磻?yīng)條件下不變化的常規(guī)有機(jī)溶劑。這些溶劑中優(yōu)選包括醚類，例如乙醚，二噁烷，四氫呋喃，乙二醇二甲醚，或烴類，例如苯，甲苯，二甲苯，己烷，環(huán)己烷或礦物油餾分，或鹵代烴類，例如二氯甲烷，三氯甲烷，四氯化碳，二氯乙烯，三氯乙烯或氯苯，或乙酸乙酯，二甲基甲酰胺，六甲基磷酸三酰胺，乙腈，丙酮，二甲氧基乙烷或吡啶。也可以使用上述溶劑的混合物。特別優(yōu)選第一步中使用二氯甲烷并且第二步使用四氫呋喃和吡啶的混合物。
適當(dāng)?shù)膲A一般是堿金屬氫化物或堿金屬鏈烷醇化物，例如，氫化鈉或叔丁醇鉀，或環(huán)胺類，例如，哌啶，吡啶，二甲基氨基吡啶或(C1-C4)-烷基胺，例如，三乙胺。優(yōu)選三乙胺、吡啶和/或二甲基氨基吡啶。
所述的堿通常是以1mol-4mol，優(yōu)選1.2mol-3mol的量使用，在各種情況中基于1mol式(V)的化合物計(jì)。
反應(yīng)溫度一般可在相對寬的范圍內(nèi)變化。通常，該反應(yīng)是在-20℃至200℃，優(yōu)選0℃至100℃的范圍內(nèi)進(jìn)行。
通式(VI)和(VIII)的化合物本身已知，或它們可以通過常規(guī)方法制備。
通式(III)的化合物已知或可以通過通式(IX)的化合物R1-Y (IX)其中R1定義如上，和Y表示氰基，羧基，甲氧基羰基或乙氧基羰基，與氯化銨在甲苯中和存在于己烷中三甲基鋁的存在下、于-20℃至室溫，優(yōu)選0℃和常壓下反應(yīng)，并且所得的脒，如果適當(dāng)就地，與水合肼反應(yīng)。
通式(IX)的化合物本身已知，或它們可以通過常規(guī)方法制備。
通式(I)的化合物抑制存在于人中性粒細(xì)胞膜內(nèi)的PDE 4且表現(xiàn)出對PDE 4高親和性位點(diǎn)特別有利的結(jié)合性能，與該位點(diǎn)結(jié)合導(dǎo)致例如嘔吐的副作用。這種抑制作用的一個(gè)可測的的功能性結(jié)果是被刺激人中性粒細(xì)胞對超氧化物陰離子生成的抑制。
通式(I)的化合物因此可以用于治療炎癥進(jìn)程，尤其是急性和慢性炎癥進(jìn)程，和/或免疫疾病的藥物中。
本發(fā)明的化合物適合治療和預(yù)防炎癥進(jìn)程，即急性和慢性炎癥進(jìn)程，和/或免疫疾病，例如肺氣腫，牙槽炎，肺休克，所有類型的慢性阻塞性肺病(COPD)，成人互相窘迫綜合征(ARDS)，哮喘，支氣管炎，囊腫性纖維化，嗜曙紅細(xì)胞肉芽腫，動(dòng)脈硬化，關(guān)節(jié)炎，胃腸道的炎癥，心肌炎，骨再吸收性疾病，再灌注損傷，克羅恩氏疾病，潰瘍性結(jié)腸炎，全身性紅斑狼瘡，I型糖尿病，牛皮癬，過敏性紫癜腎炎，慢性血管球性腎炎，炎性腸病，特應(yīng)性皮炎，其他良性和惡心增殖性皮膚病，變應(yīng)性鼻炎，變應(yīng)性結(jié)膜炎，春季結(jié)膜炎，動(dòng)脈再狹窄，膿毒癥和膿毒性休克，中毒休克綜合征，移植物排斥宿主反應(yīng)，同種異體移植物排斥，細(xì)胞因子介導(dǎo)的慢性組織退化的治療，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕性脊椎炎，骨關(guān)節(jié)炎，冠狀缺損，肌肉痛，多發(fā)性硬化，瘧疾，AIDS，惡病質(zhì)，腫瘤生長和組織侵入的預(yù)防，白血病，抑郁，記憶損傷和急性中風(fēng)。本發(fā)明的化合物還適合減輕再氧化后梗塞組織的損害。
本發(fā)明的(I)化合物可以用作制備藥物的活性化合物成分。為此，它們可以通過已知方式用惰性、無毒、藥學(xué)適宜的賦形劑或溶劑轉(zhuǎn)化為常規(guī)制劑例如片劑、包衣片、氣霧劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、乳劑、混懸劑和溶液劑?？扇〉兀景l(fā)明的化合物是以其濃度在總混合物中為約0.5-約90％(重量)的量使用，具體地，該濃度依賴于該藥物的相應(yīng)適應(yīng)征。
上述制劑是通過，例如，將活性化合物用具有上述性質(zhì)的溶劑和/或賦形劑擴(kuò)充，在水作為溶劑的情形中如果適當(dāng)另外可以加入乳化劑或分散劑，或加入有機(jī)溶劑來制備。
給藥是以常規(guī)方式進(jìn)行，優(yōu)選經(jīng)口服、透皮或非腸道，例如perlingually，經(jīng)頰、靜脈內(nèi)、經(jīng)鼻、經(jīng)直腸或吸入。
對于人體應(yīng)用，在口服給藥的情形中，推薦給用藥者的劑量是0.001-50mg/kg，優(yōu)選0.01mg/kg-20mg/kg。在非腸道給藥的情形中，例如，靜脈內(nèi)或經(jīng)粘膜、經(jīng)鼻、經(jīng)頰或吸入給藥，推薦的使用劑量是0.001mg/kg-0.5mg/kg。
盡管如此，如果適合，可能需要脫離上述含量，也就是取決于體重或給藥途徑的類型、對藥物的個(gè)體反應(yīng)、其制劑的方式和給藥的時(shí)間或間隔。所以，在某些情況中可能用小于上述最低量就足以控制疾病，而其他情形中必需超過上述上限。在相對大量的給藥情況中，可推薦在當(dāng)天過程內(nèi)將這些量細(xì)分為若干個(gè)別劑量。
試驗(yàn)說明1.人PMN的制備很容易從外周血純化得到人PMN(多形核中性粒細(xì)胞白細(xì)胞)。這些細(xì)胞內(nèi)的磷酸二酯酶主要位于膜部分?；衔飳@種制品的抑制功效很好地與通過超氧化物生成的抑制作用測定的抗炎活性相關(guān)。
從健康對象通過靜脈穿刺采血并通過葡聚糖沉降和在FicollHistopaque上密度梯度離心并再懸浮在合成介質(zhì)中來純化中性粒細(xì)胞。
2.人PMN磷酸二酯酶的試驗(yàn)該試驗(yàn)基本上按照Souness和Scott[Biochem.J.291，389-395(1993)]所述的對得自人PMN的顆粒部分進(jìn)行。
將顆粒部分用釩酸鈉/谷胱甘肽按照作者所述處理來表達(dá)磷酸二酯酶上的離散立體特異性位點(diǎn)。原型(prototypical)PDE 4抑制劑，環(huán)戊苯吡酮，具有的IC50值在450nM-1500nM范圍內(nèi)，因此將這種制品定義為所謂的″低親和力″[L]型。所述的制品實(shí)例具有的IC50值在0.1nM-10,000nM的范圍內(nèi)。
3.FMLP-刺激的超氧化物自由基陰離子的生成的抑制將中性粒細(xì)胞(2.5×105ml-1)與細(xì)胞色素C(1.2mg/ml)在微量滴定平板中混合。將本發(fā)明的化合物加入二甲基亞砜(DMSO)?；衔餄舛仍?.5nM-10μM的范圍內(nèi)，DMSO的濃度在所有孔中均為0.1％v/v。加入細(xì)胞松弛素b(5μg×ml-1)后平板在37℃下溫育5分鐘。隨后通過加入4×10-8M FMLP(N-甲酰基-Met-亮-苯丙氨酸)刺激中性粒細(xì)胞并根據(jù)可超氧化物歧化酶抑制的細(xì)胞色素C的減少、通過監(jiān)測Thermomax微量滴定平板分光光度計(jì)中的OD550來測定超氧化物生成。
超氧化物生成的抑制計(jì)算如下[1-(Rx-Rb)](Ro-Rb)×100]]>Rx＝含有本發(fā)明化合物的孔的比率Ro＝對照孔中的比率Rb＝含有超氧化物歧化酶空白孔的比率所述的制品實(shí)例具有的IC50值在0.1nM-10,000nM的范圍內(nèi)。4.與大鼠腦膜內(nèi)環(huán)戊苯吡酮結(jié)合位點(diǎn)(PDE 4 High Affinity Site；″H-PDE 4 Form″)的結(jié)合試驗(yàn)化合物對PDE 4高親和性位點(diǎn)(″H-PDE 4型″)的活性很容易通過測定它們從大鼠腦膜內(nèi)結(jié)合位點(diǎn)置換[3H]-環(huán)戊苯吡酮的效價(jià)來測量。在這種位點(diǎn)上的活性肯定是副作用潛在性(例如胃酸分泌的刺激、惡心和嘔吐)的一個(gè)量度。
環(huán)戊苯吡酮結(jié)合位點(diǎn)試驗(yàn)基本上按照Schneider等[Eur.J.Pharmacol.127，105-115(1986)]所述進(jìn)行。
5.脂多糖(LPS)誘發(fā)的中性粒細(xì)胞內(nèi)流如大鼠肺內(nèi)通過24小時(shí)后支氣管肺灌洗液的組織學(xué)和生物化學(xué)分析抗炎測定出LPS對大鼠鼻內(nèi)給藥引起中性粒細(xì)胞大量內(nèi)流到肺內(nèi)。通過在鼻內(nèi)給予LPS之前1小時(shí)和之后6小時(shí)用試驗(yàn)化合物或載體處理大鼠。24小時(shí)后將動(dòng)物安樂死并用PBS(磷酸鹽緩沖鹽水)灌洗其肺。分析中性粒細(xì)胞和全細(xì)胞數(shù)量。
6.絨猴中的催吐潛在性載體或試驗(yàn)化合物通過口服途徑施用給有意識(shí)的絨猴。給藥后1小時(shí)觀察動(dòng)物嘔吐發(fā)作或異常行為。在一些試驗(yàn)中，如果沒有觀察到不良反應(yīng)，在log更高劑量下對一個(gè)單獨(dú)組的動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)直至觀察到嘔吐或異常行為。出現(xiàn)異常行為或嘔吐發(fā)現(xiàn)時(shí)的最高劑量記錄為NOEL。
材料和方法LC-MS方法ALC-參數(shù)溶液A乙腈溶液B 0.3g 30％HCl/1水柱溫箱50℃.；色譜柱C182.1×150mm梯度時(shí)間[min] ％A ％B 流量[ml/min]010900.9390101.2690101.2LC-MS方法BLC-參數(shù) 溶液A乙腈/0.1％甲酸溶液B水/0.1％甲酸柱加熱箱40℃.；柱C182.1×50mm
梯度時(shí)間[min] ％A ％B流量[ml/min]0 10 90 0.54 90 10 0.56 90 10 0.56.1 10 90 1.07.5 10 90 0.5GC-MS方法A柱HP-5 30m×320μm×0.25μm栽氣氦模式恒流，起始流速1.5ml/min加熱箱過程起始溫度60℃.
起始時(shí)間1分鐘溫速14℃./min至300℃.，隨后300℃.2分鐘除非具體說明，采用下列色譜條件在硅膠Si 60上進(jìn)行層析；對于快速色譜，常規(guī)條件按照Still，J. Org.Chem.43，2923(1978)所述；二氯甲烷和甲醇或環(huán)己烷和乙酸乙酯的混合物用作洗脫劑。除非另外說明，在氬氣氛下和無水條件下進(jìn)行反應(yīng)。
縮寫HPLC＝高效液體色譜MS＝質(zhì)譜NMR＝核磁共振LC-MS＝質(zhì)譜聯(lián)合的液體色譜GC-MS＝質(zhì)譜聯(lián)合的氣體色譜MeOH＝甲醇DMF＝N，N-二甲基甲酰胺DMSO＝二甲基亞砜起始原料實(shí)施例1A2-(乙?；被?丁酸
將163g(1,58mol)2-氨基丁酸溶解在乙酸中，并且滴加242g(2,37mol)乙酸酐。將該混合物在100℃下攪拌2小時(shí)直至反應(yīng)完全，隨后使該溶液真空蒸發(fā)至干。固體殘余物懸浮在乙酸乙酯中，過濾并用乙醚洗滌。
產(chǎn)量220g(96％)1H-NMR(甲醇-d4)δ＝0,97(t，3H)，1,65-1，93(m，2H)，1,99(s，3H)，4，29(q，1H)ppm。
實(shí)施例2A3-(乙?；被?-2-氧代戊酸乙酯 將9,2g(63，4mmol)2-(乙?；被?丁酸懸浮在120ml四氫呋喃中并與15,0g(190mmol)吡啶和少許N，N-二甲基氨基吡啶一起加熱回流。在加熱回流時(shí)，滴加17,3g(127mmol)氯(氧代)乙酸乙酯。該反應(yīng)混合物加熱回流直至可以觀察到不再產(chǎn)生出氣體。冷卻至室溫后，將該反應(yīng)混合物加入到冰水且有機(jī)相用乙酸乙酯提取。干燥的有機(jī)相真空蒸發(fā)至干，溶于乙醇并將該溶液直接用于下面的反應(yīng)。
實(shí)施例3A3-溴苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物
氬氣氛下將1,18g(22mmol，2當(dāng)量)氯化銨懸浮在40ml的干燥甲苯中，并且將該混合物冷卻至0℃。滴加11ml(22mmol，2當(dāng)量)的2M三甲基鋁的己烷溶液，并且該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌直至觀察到不再有氣體產(chǎn)生。加入2,0g(11mmol，1當(dāng)量)3-溴-苯甲腈，該混合物在80℃浴溫中攪拌過夜。隨后冷卻至0℃和加入50ml的甲醇，隨后室溫下攪拌1小時(shí)。過濾后，固體用甲醇洗滌數(shù)次，該溶液真空蒸發(fā)至干且殘余物用甲醇洗滌。
產(chǎn)量2.02g(78％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝7,6(m，1H)，7,8(m，1H)，8,0(m，1H)，8,1(s，1H)ppm。
實(shí)施例4A4-氟苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物 以類似于實(shí)施例3A的方法，使用2,0g(16,5mmol)4-氟苯甲腈和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量2.9g(100％)1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝7,5(m，2H)，8,0(m，2H)ppm。
實(shí)施例5A環(huán)丙烷甲亞胺酸酰胺鹽酸化物
以類似于實(shí)施例3A的方法，使用6,71g(100mmol)環(huán)丙烷甲腈和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量7.3g(61％)GC/MS(方法A)保留時(shí)間3.42分鐘.，m/z 85，1[M+H]+實(shí)施例6A環(huán)戊烷甲亞胺酸酰胺鹽酸化物 以類似于實(shí)施例3A的方法，使用7,51g(79,0mmol)環(huán)戊烷甲腈和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量3.9g(33％)LC-MS(方法A)保留時(shí)間0.42分鐘.，m/z 113[M+H]+實(shí)施例7A2，2-二甲基丙烷亞胺酸酰胺鹽酸化物 以類似于實(shí)施例3A的方法，使用8,31g(100mmol)新戊腈和適量的其他反應(yīng)物。粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化可用于下一步驟。
產(chǎn)量6g粗產(chǎn)物實(shí)施例8A3-硝基苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物 以類似于實(shí)施例3A的方法，使用30,0g(203mmol)3-硝基苯甲腈和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量24.5g(47％)LC-MS(方法A)保留時(shí)間0.40分鐘.，m/z 166[M+H]+實(shí)施例9A1-萘甲亞胺酸酰胺鹽酸化物 氬氣氛下將14g(261mmol，2當(dāng)量)氯化銨懸浮在150ml的干燥甲苯中，并且使該混合物冷卻至0℃。滴加130ml(260mmol，2當(dāng)量)的2M三甲基鋁的己烷溶液，并且將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌直至觀察到不再有氣體產(chǎn)生。加入20g(130mmol，1當(dāng)量)1-氰基萘后，該混合物在80℃浴溫下攪拌過夜。冷卻該混合物并傾入硅石在二氯甲烷中的漿液內(nèi)。過濾后，固體甲醇洗滌數(shù)次，該溶液真空蒸發(fā)至干且殘余物用甲醇洗滌。合并濾液并在含10％甲醇的二氯甲烷的混合物中攪拌。
產(chǎn)量9.88g(37％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝7,6-7,8(m，4H)，8,0(d，1H)，8,1(m，1H)，8,2(d，1H)ppm，9,5(brs，4H)ppm。
實(shí)施例10AN-{1-[3-(3-溴苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺 2,02(8,6mmol，1當(dāng)量)3-溴苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物懸浮在50ml的乙醇并加入1,47g(10,2mmol，1,2當(dāng)量)水合肼。室溫下攪拌1小時(shí)后，加入2,59g(13mmol，1,5當(dāng)量)實(shí)施例2A的溶解在10ml乙醇中的化合物。該反應(yīng)混合物在80℃(浴溫)下攪拌4小時(shí)并在室溫過夜。使該混合物真空蒸發(fā)至干且產(chǎn)物通過色譜純化(快速或柱色譜或制備HPLC)。
產(chǎn)量758mg(25％)1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,6(m，1H)，1,8(m，1H)，1,9(s，3H)，4,9(m，1H)，7,5(m，1H)，7,8(m，1H)，8,0(m，1H)，8,2(m，2H)，14,1(br.s，1H)ppm。
實(shí)施例11AN-{1-[3-(4-氟苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺
以類似于實(shí)施例10A的方法，使用2,0g(11,4mmol)4-氟苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量1.47g(44％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,6(m，1H)，1,8(m，1H)，1,9(s，3H)，4,9(m，1H)，7,5(m，2H)，8,1(m，3H)，14,1(br.s，1H)ppm。
實(shí)施例12AN-{1-[3-(3-氟苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺 以類似于實(shí)施例10A的方法，使用2,0g(11,4mmol)3-氟苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量781mg(23％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,6(m，1H)，1,8(m，1H)，1,9(s，3H)，4,9(m，1H)，7,5(m，1H)，7,7(m，1H)，7,8(m，1H)，7,9(m，1H)，8,2(d，1H)，14,1(br.s，1H)ppm。
實(shí)施例13AN-{1-[3-(3-氯苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺
以類似于實(shí)施例10A的方法，使用1,5g(7,9mmol)3-氯苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量441mg(18％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,6(m，1H)，1,8(m，1H)，1,9(s，3H)，4,9(m，1H)，7,6(m，1H)，7,7(m，1H)，8,0(m，1H)，8,1(m，1H)，8,2(d，1H)，14,1(br.s，1H)ppm。
實(shí)施例14AN-{1-[3-(2-溴苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺 以類似于實(shí)施例10A的方法，使用1,64g(7,0mmol)2-溴苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量1.0g(41％)LC/MS(B)MS(ES+)351(M+H+)，保留時(shí)間2.34分鐘。
實(shí)施例15AN-[1-(3-環(huán)己基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]乙酰胺
以類似于實(shí)施例10A的方法，使用1,50g(9,2mmol)環(huán)己烷甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量1.17g(46％)1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,2(m，3H)，1,5(m，3H)，1,8(m，4H)，1,9(s，3H)，2,5(m，1H)，4,8(m，1H)，8,1(d，1H)，13,4(br.s，1H)ppm。
實(shí)施例16AN-{1-[3-(4-溴苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺 以類似于實(shí)施例10A的方法，使用10,2g(43,3mmol)4-溴苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量5.23g(34％)1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ＝1,01(t，3H)，1,66-1,79(m，1H)，1,91-2,06(m，4H，sat 1,99)，5,02-5,09(m，1H)，7,75(d，2H)，7,93(d，2H)ppm。
實(shí)施例17AN-[1-(3-環(huán)丙基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]乙酰胺
以類似于實(shí)施例10A的方法，使用7,30g(60,5mmol)環(huán)丙烷甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化可用于下一步驟。
產(chǎn)量4.9g(34％)粗產(chǎn)物實(shí)施例18AN-[1-(3-環(huán)戊基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]乙酰胺 以類似于實(shí)施例10A的方法，使用3,50g(23,6mmol)環(huán)戊烷甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量1.7g(27％)LC/MS(方法A)保留時(shí)間1.60分鐘.，m/z 265[M+H]+實(shí)施例19AN-[1-(3-叔丁基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]乙酰胺
以類似于實(shí)施例10A的方法，使用6,0g(11,0mmol)2，2-二甲基丙烷亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量1.77g(64％)LC/MS(方法A)保留時(shí)間1.59分鐘.，m/z 253[M+H]+實(shí)施例20AN-(1-[3-(3-硝基苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺 以類似于實(shí)施例10A的方法，使用35,0g(174mmol)3-硝基苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量13.6g(25％)1H-NMR(200MHz，CDCl3)δ＝0,97(t，3H)，1,83-2,08(m，5H，s at 2,02)，5,09(m，1H)，7,76(t，1H)，8,45(d，1H)，8,58(d，1H)，9,12(s，1H)ppm。
實(shí)施例21AN-[1-(5-氧代-3-苯基-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]乙酰胺
以類似于實(shí)施例10A的方法，使用7,26g(46,8mmol)苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量10.1g(80％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,5(m，1H)，1,8(m，1H)，1,9(s，3H)，4,9(m，1H)，7,5(m，3H)，8,1(m，3H)，14,1(br.s，1H)ppm。
實(shí)施例22AN-{1-[3-(1-萘基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺 將1,0g(4,84mmol，1當(dāng)量)1-萘甲亞胺酸酰胺鹽酸化物懸浮在2ml的DMSO中并加入0,29g(5,81mmol，1,2當(dāng)量)水合肼。室溫下攪拌16小時(shí)后，加入1,45g(7,3mmol，1,5當(dāng)量)溶解在10ml乙醇中的實(shí)施例2A的化合物。該反應(yīng)混合物攪拌回流1小時(shí)，隨后在60℃(浴溫)下攪拌4小時(shí)且隨后室溫過夜。該混合物真空蒸發(fā)至干且產(chǎn)物通過快速色譜純化。
產(chǎn)量7.1g(70％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝1,0(t，3H)，1,6-1,7(m，2H)，1,9(s，3H)，5,0(m，1H)，7,5-8,2(m，8H)，14,0(br.s，1H)ppm。
實(shí)施例23A6-(1-氨基丙基)-3-(3-溴苯基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 將749mg(2,13mmol)的實(shí)施例10A在20ml 2N鹽酸中加熱回流18小時(shí)。冷卻至室溫后，該混合物用10％NaOH中和，并且加入乙醇之后，真空蒸發(fā)至干。殘余物用甲醇處理并過濾與鹽分離。將濾液真空蒸發(fā)至干且產(chǎn)物通過色譜純化(快速或柱色譜或制備HPLC)。
產(chǎn)量320mg(49％)1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,9(m，2H)，4,3(d/d，1H)，7,4(m，1H)，7,6(m，1H)，8,1(br.s，2H)，8,2(m，1H)，8,4(m，1H)ppm。
實(shí)施例24A6-(1-氨基丙基)-3-(4-氟苯基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用1,46g(5,0mmol)的實(shí)施例11A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量970mg(78％)LC/MS(A)MS(ESI)249(M+H+)，保留時(shí)間0.50分鐘實(shí)施例25A6-(1-氨基丙基)-3-(3-氟苯基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用1,1g(3,8mmol)的實(shí)施例12A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量594mg(63％)LC/MS(A)MS(ESI)249(M+H+)，保留時(shí)間0.49分鐘實(shí)施例26A6-(1-氨基丙基)-3-(3-氯苯基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用419mg(1,4mmol)的實(shí)施例13A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量280mg(77％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,9(m，1H)，2,0(m，1H)，4,3(d/d，1H)，7,5(m，2H)，8,2(br.m，4H)ppm。
實(shí)施例27A6-(1-氨基丙基)-3-(2-溴苯基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用1,00g(2,85mmol)的實(shí)施例14A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量152mg(17％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,9(m，1H)，2,0(m，1H)，4,3(d/d，1H)，7,3(m，1H)，7,4(m，1H)，7,5(m，1H)，7,7(m，1H)ppm。
實(shí)施例28A6-(1-氨基丙基)-3-環(huán)己基-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用1,14g(4,10mmol)的實(shí)施例15A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量128mg(13％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,3(m，3H)，1,5(m，2H)，1,7(m，1H)，1,8(m，4H)，2,6(m，1H)，4,3(m，1H)ppm。
實(shí)施例29A6-(1-氨基丙基)-3-(4-溴苯基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用5,0g(14,2mmol)N-{1-[3-(4-溴苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量3.4g(77％)1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ＝1,02(t，3H)，1,87-2,22(m，5H，s at 1,96)，4,42-4,53(t，1H)，7,63(d，2H)，8,09(d，2H)ppm。
實(shí)施例30A6-(1-氨基丙基)-3-環(huán)丙基-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用4,90g(20,7mmol)N-[1-(3-環(huán)丙基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]乙酰胺和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量1.6g(40％)LC/MS(方法A)保留時(shí)間0.36分鐘.，m/z 195[M+H]+
實(shí)施例31A6-(1-氨基丙基)-3-叔丁基-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用1,77g(4,42mmol)N-[1-(3-叔丁基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]乙酰胺和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量850mg(91％)1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ＝0,99(t，3H)，1,34(s，9H)，1,82-2,12(m，2H)，4,34(t，1H)ppm。
實(shí)施例32A6-(1-氨基丙基)-3-環(huán)戊基-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用1,65g(6,24mmol)N-[1-(3-環(huán)戊基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]乙酰胺和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量900mg(65％)1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ＝0,99(t，3H)，1,64-2,11(m，10H)，3,03(quin.，1H)，4.30(t，1H)ppm。
實(shí)施例33A6-(1-氨基丙基)-3-(3-硝基苯基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用13,5g(42,5mmol)N-{1-[3-(3-硝基苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量6.2g(41％)LC/MS(方法A)保留時(shí)間0.497分鐘.，m/z 276[M+H]+實(shí)施例34A6-(1-氨基丙基)-3-苯基-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用10,00g(36,7mmol)的實(shí)施例21A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量6.7g(77％)1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,9(m，2H)，4,1(m，1H)，4,3(dd，1H)，7,4(m，3H)，8,2(m，2H)，8,3(bs，2H)ppm。
實(shí)施例35A6-(1-氨基丙基)-3-(1-萘基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用700mg(2,17mmol)的實(shí)施例22A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量557mg(91％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,8-2,2(m，2H)，4,4(d/d，1H)，7,4-8,7(m，10H)ppm。
實(shí)施例36AN-{1-[3-(3-溴苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}-4-叔丁基環(huán)己烷甲酰胺 500mg(1,62mmol，1當(dāng)量)的實(shí)施例23A懸浮在40ml二氯甲烷中，加入0,48ml(3,44mmol，2當(dāng)量)三乙胺和328mg(1,62mmol)4-叔丁基環(huán)己烷羰基氯。將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌直至反應(yīng)完全(1-2小時(shí))。該反應(yīng)混合物加入到相同體積的1N鹽酸中，有機(jī)相用1N鹽酸和鹽水洗滌，硫酸鈉干燥和蒸發(fā)至干。產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化或通過色譜純化(快速或柱色譜或制備HPLC)使用。
LC/MS(A)MS(ESI)475，477(M+H+)，保留時(shí)間3.17，3.20分鐘。
實(shí)施例37A4-叔丁基-N-[1-(3-環(huán)丙基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]環(huán)己烷甲酰胺 以類似于實(shí)施例36A的方法，使用250mg(1,29mmol)6-(1-氨基丙基)-3-環(huán)丙基-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮，260mg(1,29mmol)4-叔丁基環(huán)己烷羰基氯和適量的其他反應(yīng)物。粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化可用于下一步驟。
產(chǎn)量464mg粗產(chǎn)物實(shí)施例38A4-叔丁基-N-[1-(3-環(huán)戊基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]環(huán)己烷甲酰胺 以類似于實(shí)施例36A的方法，使用200mg(0,90mmol)6-(1-氨基丙基)-3-環(huán)戊基-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮，180mg(0,90mmol)4-叔丁基環(huán)己烷羰基氯和適量的其他反應(yīng)物。粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化可用于下一步驟。
產(chǎn)量350mg粗產(chǎn)物實(shí)施例39A4-叔丁基-N-[1-(3-叔丁基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]環(huán)己烷甲酰胺 以類似于實(shí)施例36A的方法，使用210mg(1,00mmol)6-(1-氨基丙基)-3-叔丁基-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮，200mg(1,00mmol)4-叔丁基環(huán)己烷羰基氯和適量的其他反應(yīng)物。粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化可用于下一步驟。
產(chǎn)量377mg粗產(chǎn)物實(shí)施例40A4-叔丁基-N-[1-(5-氧代-3-苯基-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]環(huán)己烷甲酰胺 以類似于實(shí)施例36A的方法，使用100mg(0,43mmol)的實(shí)施例34A、100mg(0,48mmol)4-叔丁基環(huán)己烷羰基氯和適量的其他反應(yīng)物。得到異構(gòu)體的混合物。
產(chǎn)量150mg(87％)LC/MS(A)MS(ESI)397(M+H+)，保留時(shí)間4.14分鐘。
實(shí)施例41A順式-4-叔丁基-N-{1-[3-(1-萘基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}-環(huán)己烷甲酰胺 在0℃下向252mg(1,37mmol)順式-4-叔丁基環(huán)己烷甲酸和185mg(1,37mmol)1-羥基-1H-苯并三唑在9ml二氯甲烷和1ml DMF中的溶液內(nèi)首先加入0,23ml N-乙基二異丙胺且隨后加入300mg(0,91mmol)的實(shí)施例35A。10分鐘后使該溶液升至室溫并攪拌過夜。該溶液用二氯甲烷稀釋且用1N HCl溶液且隨后用5％碳酸氫鈉溶液洗滌。有機(jī)相用硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)至干。殘余物通過制備HPLC純化。
產(chǎn)量215mg(53％)1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝0,8(s，9H)，1,0(t，3H)，1,2-2,2(m，12H)，5,0(m，1H)，7,5-8,3(m，8H)，14,1(br.s，1H)ppm。
實(shí)施例42A順式-4-叔丁基環(huán)己烷甲酸
順式-和反式-4-叔丁基環(huán)己烷甲酸的制備HPLC分離是在下列條件下進(jìn)行加料10g順式-和反式-4-叔丁基-環(huán)己烷甲酸的異構(gòu)體混合物溶解在500ml異己烷(80％)/叔丁基甲基醚(20％)中柱330×100mm；Self Packing Device NW 100；Merck固定相LiChrospher Si 60，12μm，Merck流動(dòng)相異己烷/叔丁基甲基醚(4/1 v/v)+0.25 vol-％乙酸流量150ml/min注射體積70ml(＝1.4g化合物)波長210nm溫度25℃.
在該柱上流動(dòng)的樣本每30分鐘反復(fù)注射。首先洗脫的化合物是順式-異構(gòu)體。
順式-異構(gòu)體mp118℃。
1H-NMR(300MHz，)MSO)δ＝0.9(t，3H)，1.0(m，3H)，1.4(m，2H)，1.6(m，1H)，2.1(m，2H)，2.5(m，1H)，12.0(s，1H)ppm。
反式-異構(gòu)體mp172℃。
1H-NMR(300MHz，DMSO)δ＝0.9(t，3H)，1.0(m，3H)，1.3(m，2H)，1.7(m，1H)，1.9(m，2H)，2.1(m，1H)，11.9(s，1H)ppm。
實(shí)施例43A順式-4-叔丁基環(huán)己烷羰基氯
將2.0g(10.85mmol)順式-4-叔丁基環(huán)己烷甲酸(實(shí)施例42A)溶解在50ml二氯甲烷中，加入1.65g(13.02mmol)乙烷二酰二氯并將該溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將該混合物攪拌回流2小時(shí)且，冷卻至室溫后，真空蒸發(fā)至干。殘余物隨后溶解在2倍的甲苯中并再次真空蒸發(fā)至干。殘余物無需進(jìn)一步純化用于下步。
實(shí)施例44A4-硝基苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物 以類似于實(shí)施例3A的方法，使用10,0g(67.5mmol)4-硝基苯甲腈和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量12.64g(93％)1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝8.1(m，2H)，8,4(m，2H)ppm。
實(shí)施例45A3-氰基苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物
以類似于實(shí)施例3A的方法，使用20,0g(125.9mmol)3-氰基苯甲酸和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量4.27g(17％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝7.8(m，1H)，8.1(m，1H)，8.2(m，1H)，8.3(m，1H)，9.4(br.s，4H)ppm。
實(shí)施例46AN-{1-[3-(4-甲基苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺 以類似于實(shí)施例10A的方法，使用3.0g(17.6mmol)4-甲基苯甲亞胺酸酰胺鹽酸化物和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量2.74g(54％)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,6(m，1H)，1.9(m，1H；s，3H)，2.4(s，3H)，4.9(m，1H)，7.4(m，2H)，7.9(m，2H)，14.0(s，1H)ppm。
實(shí)施例47AN-{1-[3-(4-硝基苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基)乙酰胺
以類似于實(shí)施例10A的方法，使用7.29g(36.16mmol)的實(shí)施例44A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量3.35g(29％)1H-NMR(DMSO-d6，400MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,6(m，1H)，1.9(m，1H；s，3H)，5.0(m，1H)，8.1(d，1H)，8.3(m，2H)，8.4(m，2H)ppm。
實(shí)施例48AN-{1-[3-(3-氰基苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]丙基}乙酰胺 以類似于實(shí)施例10A的方法，使用4.27g(23.5mmol)的實(shí)施例45A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量2.41g(34％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,9(t，3H)，1,6(m，1H)，1.9(m，1H；s，3H)，4.9(m，1H)，7.8(m，1H)，8.1(m，2H)，8.3(m，1H)，8.4(m，1H)，14.2(br.s，1H)ppm。
實(shí)施例49A6-(1-氨基丙基)-3-(4-甲基苯基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮
以類似于實(shí)施例23A的方法，使用2.74g(9.57mmol)的實(shí)施例46A和適量的其他反應(yīng)物。該產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化用于下步。
1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0.9(t，3H)，1.8(m，1H)，1.9(m，1H)，2.3(s，3H)，4，1(d/d，1H)，7，2(m，2H)，8.1(m，2H)ppm。
實(shí)施例50A6-(1-氨基丙基)-3-(4-硝基苯基)-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮 以類似于實(shí)施例23A的方法，使用3.33g(10.51mmol)的實(shí)施例47A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量1.29g(45％)LC/MS(A)MS(ESI)276(M+H+)，保留時(shí)間0.49分鐘。
實(shí)施例51A3-[6-(1-氨基丙基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-3-基]苯甲腈
以類似于實(shí)施例23A的方法，使用2.41g(8.11mmol)的實(shí)施例48A和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量1.1g(53％)LC/MS(A)MS(ESI)256(M+H+)，保留時(shí)間1.27分鐘。
實(shí)施例52A4-叔丁基-N-{1-[3-(4-甲基苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基]-丙基}環(huán)己烷甲酰胺 以類似于實(shí)施例的方法37A的方法，使用800mg(3.27mmol)的實(shí)施例49A，730mg(3.60mmol)4-叔丁基環(huán)己烷羰基氯和適量的其他反應(yīng)物。產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化用于下步。
LC/MS(A)MS(ESI)411(M+H+)，保留時(shí)間3.09分鐘。
實(shí)施例53A順式-7-(4-叔丁基環(huán)己基)-4-氯-5-乙基-2-(4-硝基苯基)咪唑并[5，1-f]-[1，2，4]三嗪
將500mg(1.82mmol)的實(shí)施例50A懸浮在20ml二氯乙烷，并且加入276mg(2.72mmol)三乙胺和552mg(2.72mmol)順式-4-叔丁基-環(huán)己烷羰基氯。該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，隨后加入279mg(1.82mmol)氯氧磷。將該混合物攪拌回流3小時(shí).冷卻至室溫后，加入乙酸乙酯和飽和NaHCO3(水溶液)。有機(jī)相用飽和NaHCO3(水溶液)、水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥和真空蒸發(fā)至于。產(chǎn)物通過色譜純化。
產(chǎn)量127mg(16％)順式-產(chǎn)物MS(ESI)442，444(M+H+)實(shí)施例54A順式-4-叔丁基-N-[1-(5-氧代-3-苯基-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]環(huán)己烷甲酰胺 將1.3g(5.65mmol)實(shí)施例34A懸浮在50ml 1，2-二氯乙烷中，加入0.94ml(6.78mmol)三乙胺和1.26g(6.21mmol)順式-4-叔丁基-環(huán)己烷羰基(實(shí)施例43A)氯。該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用二氯甲烷稀釋，用飽和碳酸氫鈉洗滌，有機(jī)相用硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)至干。
產(chǎn)量2.2g(98.3％)LC/MSMS(ESI)397(M+H+)，保留時(shí)間4.14分鐘。
制備實(shí)施例實(shí)施例12-(3-溴苯基)-7-(4-叔丁基環(huán)己基)-5-乙基咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4(3H)-酮 將770mg(1,62mmol，1當(dāng)量)實(shí)施例36A懸浮在70ml二氯乙烷中，并且加入373mg(2,45mmol，1,5當(dāng)量)氯氧磷。該混合物攪拌回流3小時(shí)。隨后再加入373mg的三氯化磷，并且攪拌回流過夜。冷卻至室溫后，加入乙酸乙酯和飽和NaHCO3(水溶液)。有機(jī)相用飽和NaHCO3(水溶液)、水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥和真空蒸發(fā)至干。純化產(chǎn)物并通過色譜分離異構(gòu)體(快速或柱色譜或制備HPLC)。
產(chǎn)量156mg(21％)順式-異構(gòu)體1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0,8(s，9H)，1,1(m，2H)，1,2(t，3H)，1,5(m，2H)，1,7(m，2H)，2,2(m，2H)，2,9(q，2H)，3,5(m，1H)，7,5(m，1H)，7,8(m，1H)，8,0(m，1H)，8,1(m，1H)，11,8(s，1H)ppm。
實(shí)施例27-(4-叔丁基環(huán)己基)-2-環(huán)丙基-5-乙基咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4(3H)-酮 以類似于實(shí)施例1的方法，464mg(1,29mmol)粗4-叔丁基-N-[1-(3-環(huán)丙基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]環(huán)己烷甲酰胺、200mg(1,29mmol)三氯化磷攪拌回流3小時(shí)，并且使用適量的溶劑。所得混合物經(jīng)硅膠色譜用洗脫劑環(huán)己烷/乙酸乙酯5/1，2/1分離出異構(gòu)體。
產(chǎn)量20mg(4.5％)順式-異構(gòu)體1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝0,82(s，9H)，0,93-1,11(m，5H)，1,18(t，3H)，1,44-2,18(m，9H)，2,83(q，2H)，3,33(m，1H)，11,62(s，1H，NH)ppm。
實(shí)施例3和42-叔丁基-7-(4-叔丁基環(huán)己基)-5-乙基咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4(3H)-酮
以類似于實(shí)施例1的方法，將377mg(1,00mmol)粗4-叔丁基-N-[1-(3-叔丁基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]環(huán)己烷甲酰胺、184mg(1,20mmol)三氯化磷攪拌回流3小時(shí)，使用適量的溶劑。所得混合物經(jīng)硅膠色譜用洗脫劑環(huán)己烷/乙酸乙酯10/1，5/1分離出純的順式-或反式異構(gòu)體。
產(chǎn)量22mg(6.13％)順式-異構(gòu)體(實(shí)施例3)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝0,82(s，9H)，0,95-1,12(m，1H)，1,18(t，3H)，1,28(s，9H)，1,46-1,72(m，6H)，2,09-2,23(m，2H)，2,85(q，2H)，3,43(m，1H)，11,22(s，1H，NH)ppm。
產(chǎn)量60mg(17％)反式-異構(gòu)體(實(shí)施例4)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝0,87(s，9H)，0,93-1,12(m，3H)，1,18(t，3H)，1,03(s，9H)，1,48-2,07(m，6H)，2,83(q，2H)，2,98(m，1H)ppm。
實(shí)施例5和67-(4-叔丁基環(huán)己基)-2-環(huán)戊基-5-乙基咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4(3H)-酮 以類似于實(shí)施例1的方法，將350mg(0,90mmol)粗4-叔丁基-N-[1-(3-環(huán)戊基-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三嗪-6-基)丙基]環(huán)己烷甲酰胺、140mg(0,90mmol)三氯化磷攪拌回流3小時(shí)，使用適量的溶劑。通過色譜分離異構(gòu)體。
產(chǎn)量21mg(6.3％)順式-異構(gòu)體(實(shí)施例5)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝0,82(s，9H)，0,98-1,12(m，1H)，1,18(t，3H)，1,44-2,01(m，14H)，2,05-2,20(m，2H)，2,77-2,98(m，3H)，3,40(m，1H)ppm。
產(chǎn)量31mg(17％)反式-異構(gòu)體(實(shí)施例6)1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)δ＝0,86(s，9H)，1,03-1,26(m，5H，t at 1,17)，1,45-2,18(m，14H)，2,74-3,03(m，3H)ppm。
實(shí)施例7和87-(4-叔丁基環(huán)己基)-5-乙基-2-苯基咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4(3H)-酮 方法a)以類似于實(shí)施例1的方法，將150mg(0,39mmol)的實(shí)施例40A、250mg(1,61mmol)三氯化磷攪拌回流3小時(shí)，使用適量的溶劑。通過色譜分離異構(gòu)體。
產(chǎn)量26mg(18％)反式-異構(gòu)體(實(shí)施例7)1H-NMR(300MHz，DMSO)δ＝0,87(s，9H)，1,03-1,28(m，3H)，1,23(t，3H)，1,52-1,72(m，2H)，1,78-1,93(m，2H)，1,99-2,10(m，2H)，2,90(q，2H)，3,07-3,21(m，1H)，7,51-7,67(m，3H)，7,93-8,02(m，2H)，11,95(s，1H)ppm。
產(chǎn)量11mg(8％)順式-異構(gòu)體(實(shí)施例8)1H-NMR(300MHz，DMSO)δ＝0,83(s，9H)，1,00-1,16(m，1H)，1,22(t，3H)，1,44-1,79(m，6H)，2,11-2,23(m，2H)，2,90(q，2H)，3,49-3,59(m，1H)，7,47-7,60(m，3H)，7,91-7,98(m，2H)ppm。
實(shí)施例8的制備方法b)7-(順式-4-叔丁基環(huán)己基)-5-乙基-2-苯基咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4(3H)-酮 2.2g(5.55mmol，1當(dāng)量)的實(shí)施例54A懸浮在50ml二氯乙烷中，并且加入3.62g(23.2mmol，4當(dāng)量)氯氧磷。將該混合物攪拌回流4小時(shí)。冷卻至室溫后，加入二氯甲烷且有機(jī)相用水終止，用水洗滌，硫酸鎂干燥，和真空蒸發(fā)至干。固體殘余物用乙醚洗滌，過濾并干燥。
產(chǎn)量1.02g(49％)1H-NMR與上面的相同(參見方法a)。
制備實(shí)施例8的方法c)將20.45g(0.09mol)6-(1-氨基丙基)-3-苯基-1，2，4-三嗪-5(4H)-酮(實(shí)施例34A)溶解在二氯乙烷中，加入502g(5.08mol)三乙胺和19.8g(0.10mol)順式-4-叔丁基環(huán)己烷羰基氯。該溶液攪拌回流3小時(shí)，隨后加入20.42g(0.13mol)氯氧磷。該溶液繼續(xù)攪拌回流4小時(shí)并，冷卻至室溫后，加入水、氫氧化鈉和隨后加入二氯甲烷。有機(jī)相真空蒸發(fā)至干，并且殘余物用乙醚研制和過濾。將固體溶解在甲醇(75％)/二氯甲烷(25％)，真空蒸發(fā)二氯甲烷，并且過濾并干燥結(jié)晶產(chǎn)物。
產(chǎn)量17.8g(52％)1H-NMR與上面的相同(參見方法a)。
實(shí)施例97-(順式-4-叔丁基環(huán)己基)-5-乙基-2-(1-萘基)咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4(3H)-酮 將200mg(0,45mmol)的實(shí)施例41A和104mg(0,67mmol)三氯化磷在10ml 1，2-二氯乙烷中的溶液攪拌回流4小時(shí)。按照類似于實(shí)施例1的方法處理后，得到固體產(chǎn)物。
產(chǎn)量172mg(89％)熔點(diǎn)203℃。
1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝11,9(s，1H)，8,3-7,5(m，7H)，3.5(m，1H)，2,9(q，J＝7.5Hz，2H)，2,1(m，2H)，1,7-1,5(m，6H)，1,3(t，J＝7.5Hz，3H)，1,0(m，1H)，0,8(s，9H)ppm。
實(shí)施例107-(順式-4-叔丁基環(huán)己基)-5-乙基-2-(4-甲基苯基)咪唑并[5，1-f][1，2，4]-三嗪-4(3H)-酮
以類似于實(shí)施例1的方法，將1750mg(4.26mmol)的實(shí)施例52A、980mg(6.39mmol)三氯化磷攪拌回流過夜，使用適量的溶劑。
產(chǎn)量40mg(2％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0.8(t，9H)，1.1(m，1H)，1.2(t，3H)，1.6(m，6H)，2.2(m，2H)，2.4(s，3H)，2.9 (q，2H)，3.5(m，1H)，7.4(m，2H)，7.9(m，2H)，11.7(s，1H)ppm。
實(shí)施例117-(順式-4-叔丁基環(huán)己基)-5-乙基-2-(4-硝基苯基)咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4(3H)-酮 598mg(1.35mmol)的實(shí)施例53A懸浮在甲醇中，并且加入10ml氫氧化鈉(10％在水中)。該混合物被攪拌回流過夜.冷卻至室溫后，真空蒸發(fā)甲醇，殘余物溶解在乙酸乙酯中，有機(jī)相用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥和真空蒸發(fā)至干。
產(chǎn)量580mg(quant.)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0.8(s，9H)，1.1(m，1H)，1.2(t，3H)，1.5-1.7(m，6H)，2.2(m，2H)，2.9(q，2H)，3.6(m，1H)，8.2(m，2H)，8.4(m，2H)，12.1(s，1H)ppm。
實(shí)施例12和137-(4-叔丁基環(huán)己基)-5-乙基-2-(3-氟苯基)咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4(3H)-酮 500mg(2.01mmol)的實(shí)施例25A懸浮在20ml二氯乙烷中，并且加入306mg(3.02mmol)三乙胺和408mg(2.01mmol)4-叔丁基-環(huán)己烷羰基氯。該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，隨后加入463mg(3.02mmol)氯氧磷。該混合物被攪拌回流3小時(shí)。冷卻至室溫后，加入乙酸乙酯和飽和NaHCO3(水溶液)。有機(jī)相用飽和NaHCO3(水溶液)、水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥和真空蒸發(fā)至干。產(chǎn)物通過色譜純化。
產(chǎn)量33mg(4％)順式-產(chǎn)物(實(shí)施例12)1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)δ＝0.8(s，9H)，1.0(m，1H)，1.2(t，3H)，1.5-1.7(m，6H)，2.2(m，2H)，2.9(q，2H)，3.6(m，1H)，7.5(m，1H)，7.6(m，1H)，7.8(m，2H)，12.0 (br.s，1H)ppm。
產(chǎn)量29mg(4％)反式-產(chǎn)物(實(shí)施例1 3)1H-NMR(DMS0-d6，200MHz)δ＝0.8(s，9 H)，1.1(m，1H)，1.2(t，3H)，1.6(m，4H)，1.9(m，2H)，2.0(m，2H)，2.9(q，2H)，3.1(m，1H)，7.5(m，1H)，7.6(m，1H)，7.8(m，2H)ppm。
實(shí)施例14順式-3-[7-(4-叔丁基環(huán)己基)-5-乙基-4-氧代-3，4-二氫咪唑并[5，1-f][1，2，4]-三嗪-2-基]苯甲腈 以類似于實(shí)施例12和13的方法，使用1.09g(4.27mmol)的實(shí)施例51A、0.86g(4.27mmol)順式-4-叔丁基環(huán)己烷羰基氯和適量的其他反應(yīng)物。
產(chǎn)量0.70g(41％)1H-NMR(DMSO-d6，300MHz)δ＝0.8(s，9H)，1.1(m，1H)，1.2(t，3H)，1.5-1.7(m，6H)，2.2(m，2H)，2.9(q，2H)，3.6(m，1H)，7.7(m，1H)，8.0(m，1H)，8.3(m，1H)，8.4(m，1H)，11.9(s，1H)ppm.
權(quán)利要求
1.通式(I)的化合物及其鹽、水合物和/或溶劑化物， 其中R1代表(C6-C10)-芳基，其選擇性地被相同或不同的選自鹵素，(C1-C4)-烷基，三氟甲基，氰基，硝基和三氟甲氧基的基團(tuán)取代，或代表(C1-C8)-烷基，它選擇性地被3-至10-員碳環(huán)基取代，或代表3-至10-員碳環(huán)基，其選擇性地被相同或不同的(C1-C4)-烷基取代，和R2代表4-叔丁基-環(huán)己-1-基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1代表萘基，或代表苯基，其選擇性地被相同或不同的鹵素原子取代。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中R2代表順式-4-叔丁基-環(huán)己-1-基。
4.一種制備權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述化合物的方法，其特征在于通式(IV)的化合物 其中R1和R2具有權(quán)利要求1所述的含義，與脫水劑反應(yīng)。
5.權(quán)利要求4所述的通式(IV)的化合物。
6.用于治療和/或預(yù)防用途的權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的化合物。
7.含有至少一種權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的化合物和藥學(xué)可接受稀釋劑的藥物組合物。
8.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的化合物在制備藥物中的用途。
9.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的化合物在制備用于炎癥進(jìn)程和/或免疫疾病的治療和/或預(yù)防的藥物中的用途。
10.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的化合物在制備用于慢性阻塞性肺病和/或哮喘的治療和/或預(yù)防的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及7－(4－叔丁基－環(huán)己基)咪唑三嗪酮類化合物、其制備方法和其在藥物，尤其是炎癥進(jìn)程和/或免疫疾病的治療和/或預(yù)防的藥物中的用途。
文檔編號(hào)A61P37/02GK1512993SQ02811052
公開日2004年7月14日 申請日期2002年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2001年6月1日
發(fā)明者C·阿龍索－阿拉亞, H·吉倫, M·亨德里克斯, U·尼沃納, D·肖斯, H·比肖夫, N·布爾克哈德特, V·蓋斯, K·H·施萊默, N·J·庫斯伯特, M·費(fèi)茨格拉爾德, G·施圖爾頓, C 阿龍索-阿拉亞, し, 呂錕慫, 幟, 庫斯伯特, 斯 綠, 施萊默, 母窶 , 級 申請人:拜爾健康護(hù)理股份公司