專利名稱：Hcg制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
總體而言，本發(fā)明涉及具生物活性的水溶性蛋白或多肽如hCG激素的藥用制劑，這些蛋白或多肽能用來治療不同的疾病。本發(fā)明的組合物治療的疾病尤其優(yōu)選的是由病毒引起的免疫和惡性疾病。更具體而言，人類中由病毒如導(dǎo)致獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)的人免疫缺陷病毒(HIV)引起的疾病及相關(guān)癌癥都是考慮的對象。
相關(guān)技術(shù)的背景知識和討論人絨膜促性腺激素(hCG)屬于糖蛋白激素家族，這個激素家族包括黃體生成素(促黃體素，LH)，促卵泡素(FSH)和促甲狀腺激素(TSH)。這類激素各由兩個不同的非共價結(jié)合的亞基，α亞基和β亞基組成。這些激素都有一個相同的α亞基，而β亞基則各自獨(dú)特，在長度和氨基酸序列上有差異。最相似的激素是hCG和LH，除了hCG C末端有一段氨基酸序列外，它們有85％的同一性。HCG和LH作用于同一個受體。按傳統(tǒng)的觀點(diǎn)，hCG及相關(guān)激素在正常人類生理中發(fā)揮作用。例如hCG已經(jīng)很好地確認(rèn)為孕激素，在生殖生理學(xué)的妊娠過程中扮演了重要的角色。本發(fā)明人撰寫的一篇綜述中提供了關(guān)于hCG的廣泛的背景知識(參見Hernan F.Acevedo，“人絨膜促性腺激素生與死的激素，綜述”(Human chorionic gonadotropin(hCG)The hormone of life anddeath，a review)在這里引作參考)。
最近，有人提出，hCG激素也可用于HIV/AIDS和癌癥的治療。參看如美國專利No.5700781；5811390；5851997；5997871；5877148和5677275或者Bourinbaiar AS，Nagorny R的原著。人絨膜促性腺激素(hCG)對HIV-1中逆轉(zhuǎn)錄酶活性的作用效果會影響淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。FEMS Microbiol Lett.1992年9月1日，75(1)27-30，以及Bourinbaiar AS，Nagorny R的原著。人絨膜促性腺激素(hCG)對HIV-1從淋巴細(xì)胞到營養(yǎng)細(xì)胞傳播的抑制效果。FEBS Lett，1992年8月31日；309(1)82-4，這篇文章的內(nèi)容在這里引作參考。然而，一些研究者提出，在一些市售hCG制劑中發(fā)現(xiàn)的污染因子對抗HIV和抗癌活性負(fù)責(zé)，駁斥了hCG能抗病毒和抗癌活性的觀點(diǎn)。例如參考Lee-Huangs，Huang PL，Sun Y，Huang PL，Kuang HF，Blithe DL，Chen HC.溶菌酶和RNase作為人絨膜促性腺激素β-核心制品的抗HIV成分。Proc Natl Acad Sci USA.1999年3月16日，96(6)2678-81；Sairam MR，Antakly T.Debunking hCG.Nat Biotechnol，1997年11月，(12)1228，Albini A，Paglieri I，Orengo G，Carlone S，Aluigi MG，DeMarchi R，Matteucci C，MantovaniA，Carozzi F，Donini S，Benelli R.人絨膜促性腺激素β-核心片段抑制卡波西氏肉瘤衍生細(xì)胞及新的無限增殖化的卡波西氏肉瘤細(xì)胞系的生長。AIDS.1997年5月；11(6)713-21；Lunardi-Iskandar Y，Bryant JL，B lattner WA，Hung CL，F(xiàn) lamand L，Gill P，Hermans P，Birken S，Gallo RC.來自早期懷孕婦女的尿因子對HIV-1，SIV及相關(guān)疾病的作用效果。Nat Med.1998年4月，4(4)428-34；Sipsas NV，Aroni K，Tsavaris N，Mavragani K，Paikos S，KordossisT.AIDS相關(guān)的皮膚卡波西氏肉瘤用人絨膜促性腺激素治療的失敗。J.Chemother.1999年2月；11(1)78-9；Masood R，McGarvey ME，ZhengT，Cai J，Arora N，Smith DL，Sloane N，Gill PS.抗腫瘤的尿蛋白在體內(nèi)和體外均能抑制卡波西氏肉瘤和血管新生。Blood，1999年2月1日，93(3)1038-44；Griffiths SJ，Adams DJ，Talbot SJ，核糖核酸酶抑制卡波西氏肉瘤。Nature，1997年12月11日，390(6660)568；Darzynkiewicz Z.butler可用來在人絨膜促性腺激素制品中搜尋殺傷卡波西氏肉瘤的成分。J Natl Cancer Inst.1999年1月20；91(2)104-6和Noonan D，Albini A.抗KS活性仍然是個謎。Nat Med.1998年7月；4(7)748；以上文章的摘要在這一并引作參考。因為結(jié)果混亂，一些作者提出，懷孕婦女的尿液和市售的臨床級hCG粗品中含有不同的具抗卡波西氏肉瘤和抗HIV活性的因子。研究者在尿液中找到如嗜酸性粒細(xì)胞衍生的神經(jīng)毒素(EDN)，抗致瘤性尿蛋白(ANUP)，抑制素，活化素A和血管抑素等因子。此外，一些作者公開告誡hCG可能有相反的效果，它可能促進(jìn)致癌作用，這樣教導(dǎo)就有效地背離了hCG作為抗癌和抗病毒試劑的有用性。例如，可以參考Simonart等(Simonart T，Hermans P，Van Vooren JP，Meuris S.人絨膜促性腺激素制品的自相矛盾的前卡波西氏肉瘤活性(Paradoxical pro-Kaposi’s sarcoma activityof preparation of human chorionic gonadotropin)。Blood，1999年7月1日；94(1)367-7)。
盡管在現(xiàn)有技術(shù)上關(guān)于hCG或某個污染因子是否具有抗病毒和抗癌活性仍有很大的爭論，但從實踐的觀點(diǎn)來看，使用市售hCG制品中的激素或污染因子是不方便的。和許多其它的水溶性糖蛋白激素一樣，hCG在體內(nèi)能被快速地代謝掉，因此其半壽期相對較短。這樣就必須經(jīng)常注射激素或增大hCG的上樣劑量，而這兩種做法都是不切實際的，而且是昂貴的。參考授予Harn的美國專利No5700781“治療卡波西氏肉瘤和HIV感染的方法”(Method for treating Kaposi’s sarcomaand HIV infections)，在這里引作參考。
hCG輸送的修飾形式，即所謂的hCG的“緩慢釋放”或“持續(xù)釋放”形式在早期即被提出，但沒有人成功地實施，因為沒有關(guān)于這些特殊形式的激素的特定保證指南。例如，參考授予Ham的美國專利No5851997“人絨膜促性腺激素用作具免疫能力的抗病毒劑”(use ofhuman chorionic gonadotropin as an immune-potentiating antiviralagent)。在這個專利中，Harris列舉了不同形式的hCG緩慢釋放方法。尤其是，Harris教導(dǎo)了用作經(jīng)皮hCG貼片的hCG的持續(xù)釋放形式，這種貼片是繼DURAGESICTMfentaryl貼片流行后的一種貼片，它使得像hCG一樣的蛋白的經(jīng)皮輸送能通過離子電滲或電滲的方法得以完成，即在電場的影響下進(jìn)行。Harris思考的另一種hCG持續(xù)釋放形式是可植入的hCG輸送系統(tǒng)。用該范疇的一種典型裝置NORPLANTTMLevonorgestrol植入方式，該系統(tǒng)通過一種例如由水凝膠或微孔多聚體組成的非生物降解的限速的膜元件，進(jìn)行hCG的被動輸送。Harris考慮的另一類型的hCG植入方式把hCG的施用和泵作用功能結(jié)合起來。這種泵動作用是通過滲透驅(qū)動或病人激活。這樣，Harris就教導(dǎo)了hCG施用的可選擇的不同模式。然而，考慮的輸送模式均是利用一些特定的持續(xù)釋放的給藥裝置，即經(jīng)皮貼片以及不同類型的植入或泵。沒有別的hCG輸送形式被告知是給藥的可靠且有實踐意義的模式。
據(jù)這些發(fā)明人及其它人的報道，僅胞壁酰肽就能抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒復(fù)制(Acevedo HF，Raikow RB，Acevedo HO，Delgado TF，Pardo M.用合成的胞壁酰二肽類似物CGP11637防止致癌病毒對小鼠的感染(Prevention of oncogenic viral infectious in mice with CGP 11637，asynthetic muramyl dipeptide analog)，Antimicrob Agents Chemother，1985年11月，28(5)589-96；Lazdins JK，Woods-Cook K.，Walker M，AlteriE.親脂的胞壁酰肽MTP-PE是巨噬細(xì)胞中HIV復(fù)制的有力抑制子(Thelipophilic muramyl peptide MTP-PE is a potent inhibitor of HIVreplication in macrophages)AIDS Res Hum Retroviruses，1990年10月，6(10)1157-61；Masihi KN，Lange W，Rohde-Schulz B，Chedid L，胞壁酰二肽在體外抑制人免疫缺陷病毒的復(fù)制(Muramyl dipeptide inhibitsreplication of human immunodeficiency virus in vitro).AIDS Res HumRetroviruses，1990年3月，6(3)393-9。
然而，hCG和胞壁酰肽的組合使用和本領(lǐng)域當(dāng)前的想法相左，因為胞壁酰肽主要是用作疫苗佐劑，用來增強(qiáng)對疫苗制品中的抗原即hCG的免疫反應(yīng)(參看例如美國專利No.5840313或5876724)，因此，這種組合物能有效地使hCG失活或甚至?xí)又丶膊〉倪^程。根據(jù)別人的觀察，某些胞壁酰肽實際上能增強(qiáng)HIV的復(fù)制，因此胞壁酰肽的臨床應(yīng)用會加重HIV病情，這種前景尤其令人擔(dān)憂(Schreck R，Bevec D，Duror P，Baeuerle PA，Chedid L，Bahr GM.基于缺乏核因子κ-B的激活而選擇胞壁酰肽作為AIDS疫苗潛在的佐劑(Selection of a muramylpeptide based on its lack of activation of nuclear-kappa B as a potentialadjuvant for AIDS vaccines)，Clin Exp Immunol，1992年11月，90(2)188-93，Masihi KN，Lange W，Rohde-Schulz B.由細(xì)菌免疫調(diào)制劑加重人免疫缺陷病毒對前單核細(xì)胞的感染(Exacerbation of humanimmunodeficiency virus infection in promonocytic cells by bacterialimmunomodulators)J Acquir Immune Defic Syndr，1990；3(3)200-5)。迄今為止，無論分離自天然來源的MDP還是人工合成的MDP，當(dāng)施用給哺乳動物時，均伴隨著明顯的毒性。這種毒性顯著地限制了MDP在臨床上的使用。雖然偶爾當(dāng)胞壁酰肽和具生物活性蛋白組合施用時，被認(rèn)為是有用的。例如，美國專利NO5932208公開了一些組合物，在這些組合物中，胞壁酰肽和一些細(xì)胞因子組合使用，但作者沒有教導(dǎo)和hCG的組合使用。
然而，在現(xiàn)有技術(shù)中，hCG變體和胞壁酰肽的組合已知主要是用來做生育力或癌癥疫苗。這些疫苗唯獨(dú)含有hCGβ鏈或hCGβ鏈的C末端肽，以及不是全部的二聚體hCG(參看美國專利No4313871，4256629，4310455，6146633，6143305，6096318，6039948，5891992，5817753，5698201，5106619，5006334，4855285，4791062，4767842和4762913)。對hCGβ鏈或其肽的選擇性優(yōu)選主要出于一種考慮，那就是用二聚體或整個hCG免疫接種將會引起和一些相關(guān)的糖蛋白激素如LH，F(xiàn)SH和TSH的非期望的交叉反應(yīng)，隨后產(chǎn)生對宿主有害的后果。迄今為止，關(guān)于hCG二聚體和胞壁酰肽組合使用的現(xiàn)有技術(shù)參考資料不存在。
和現(xiàn)有技術(shù)中占優(yōu)的傳統(tǒng)觀念相反，本發(fā)明人令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，整體或二聚體hCG分子和胞壁酰肽的組合使用在體內(nèi)能協(xié)同增強(qiáng)抗HIV和抗癌活性，而且不會對宿主產(chǎn)生有害的作用。同時，還驚訝地發(fā)現(xiàn)，在含或不含胞壁酰肽的水包油乳液中配制的hCG有相同力度的臨床效果。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的是提供一種新的組合物，這種組合物能克服上述及本領(lǐng)域中的其它缺點(diǎn)。本發(fā)明首先成功地減少了特殊配制的水溶性激素在治療病毒疾病和癌癥中的應(yīng)用實踐。出于這些和其它考慮，本發(fā)明者發(fā)現(xiàn)施用hCG和胞壁酰肽比施用現(xiàn)在市場上獲得的hCG非修飾形式具有更好的臨床效果或反應(yīng)。還考慮到HCG是在含有或不含胞壁酰肽的水包油乳液中配制的。別的制劑如膠囊化的脂質(zhì)體輸送形式是同樣合適的。因此，本發(fā)明考慮一種組合物，它包含二聚體hCG的新的治療形式。
本發(fā)明的另一個目的是指提供制備組合物的方法，它也能克服本領(lǐng)域的缺陷。
本發(fā)明也考慮了一些給被試者施用一定量的hCG的制劑的方法，這些制劑在臨床上治療或預(yù)防病毒感染中更有效，而這些病毒感染是被試者已患上或?qū)忌系摹?br> 根據(jù)本發(fā)明的另一方面，也提供了一些用于治療被試動物如人中癌癥的方法，給所述被試者施用一定劑量的速溶組合物，所述劑量對于消除或預(yù)防所述癌癥在所述動物中的生長是有效的。
本發(fā)明者所面對的一些優(yōu)選的用處是一些疾病如AIDS，卡波西氏肉瘤(包括地方性和HIV相關(guān)類型)，多發(fā)性骨髓瘤，淋巴瘤，黑色素瘤及其它形式的癌癥和白血病的治療。
沒有暗含任何限制，這些藥物組合物可以通過溶液形式來有利地制備，這些溶液可以通過腸胃外的形式來施用，尤其是皮下，肌內(nèi)，靜脈內(nèi)或灌流的方式施用。本發(fā)明的組合物單獨(dú)口服或以蓋侖制劑(galencica)的形式施用時，效果是相等的，而且都是有利的。以蓋侖制劑的形式如把它們膠囊化成膠囊形式或小球體或脂質(zhì)體形式能保護(hù)這些組合物，使它們能跨越胃障。
實施本發(fā)明的最好模式本發(fā)明是基于下列發(fā)現(xiàn)盡管胞壁酰二肽(MDP)一般用作疫苗制品的成份去誘導(dǎo)對疫苗抗原簇的免疫，但實際上，這些胞壁酰肽化合物在體內(nèi)能和hCG活性協(xié)同作用，而不是拮抗hCG的活性。盡管上面提到了本領(lǐng)域教導(dǎo)的東西，胞壁酰肽化合物和hCG組合使用在HIV感染和別的威脅生命的癥狀，如癌癥的治療，預(yù)防和控制中是有用的。
后文使用的術(shù)語“持續(xù)輸送裝置”，指的是一些特異的裝置，如經(jīng)皮貼片，皮下移植以及含藥的泵。
后文使用的術(shù)語“緩慢釋放制劑”指的是藥物輸送形式而不是持續(xù)的輸送裝置，包括未在本領(lǐng)域提及的和hCG制劑相關(guān)的hCG制劑。
術(shù)語“佐劑”定義的是摻入到抗原中或和抗原一起注射的物質(zhì)。佐劑非特異地增強(qiáng)隨后對抗原的免疫應(yīng)答。應(yīng)用免疫治療用佐劑的一個主要目的是通過施用更少劑量的低水平抗原比施用等量水性抗原獲得更持久的高水平體液或細(xì)胞介導(dǎo)的免疫。佐劑通常和無生命的試劑(取代有生命的微生物)組合使用用于疫苗制備。佐劑也能有效地提高對低免疫原性或非免疫原性的腫瘤細(xì)胞以及由胞內(nèi)物質(zhì)感染的細(xì)胞的免疫應(yīng)答，這些胞內(nèi)物質(zhì)在體內(nèi)已經(jīng)存在，不能被自然誘發(fā)的免疫應(yīng)答所足夠阻止。
下文中使用的術(shù)語“乳化劑”意思是指從氧化亞烷和/或六元醇和/或高級天然脂肪酸如酯或酯-醚衍生的非離子型表面活性化合物。
術(shù)語“弗氏完全佐劑”(CFA)指的是一種效果強(qiáng)大的免疫刺激劑，它已經(jīng)和許多抗原在實驗基礎(chǔ)上成功地使用了。CFA包括礦物油，乳化劑/穩(wěn)定劑如失水山梨醇酯A，和殺傷性分枝桿菌如結(jié)核分枝桿菌。水性抗原/蛋白溶液和這些成分混和在一起形成油包水的乳化劑。然而，CFA會引起很嚴(yán)重的副作用，包括疼痛，形成膿腫以及發(fā)燒，這樣會阻止它在人用或獸用疫苗中的使用。副作用主要是由病人對CFA中分枝桿菌成分的反應(yīng)產(chǎn)生的。
“弗氏不完全佐劑”(IFA)除了沒有細(xì)菌成分，和CFA相似。盡管在美國沒有被批準(zhǔn)使用，但I(xiàn)FA在其他國家已用于若干類型的疫苗。IFA在人體中已經(jīng)成功地與流行性感冒和脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗以及其他一些動物疫苗中包括狂犬病，犬瘟熱，和口蹄疫疫苗一起使用了。實驗表明，IFA中用的油和乳化劑均能引起小鼠出現(xiàn)腫瘤，這意味著選擇一種替代佐劑是用于人的較好選擇。
胞壁酰二肽(MDP)表示的是分枝桿菌細(xì)胞壁復(fù)合物中的最小單位，用CFA可以觀察到它具佐劑活性。已經(jīng)產(chǎn)生了許多人工合成的MDP類似物，它們表現(xiàn)出范圍更寬的佐劑潛能和副作用。三種類似物作疫苗佐劑時特別有用，它們是MDP的蘇氨酰衍生物，MDP的n-丁基衍生物以及胞壁酰三肽的親脂衍生物(參看美國專利NO5709879)。這些化合物能有效地刺激體液和細(xì)胞介導(dǎo)的免疫，而只表現(xiàn)出低水平的毒性。這種胞壁酰肽有一個磷脂尾巴，這樣就使得這個分子的疏水部分和脂環(huán)境相連，而胞壁酰肽部分則和水性環(huán)境結(jié)合。因此，MTP-PE本身能作為一種乳化試劑，用來生產(chǎn)穩(wěn)定的水包油乳液。
術(shù)語“胞壁酰肽”對本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言有一個明確的意思。它尤其是指含一個或多個糖殘基的，至少是含一個糖殘基的化合物，這個化合物通常是一個胞壁酸殘基，被至少一個或多個(通常是2或多個)氨基酸殘基取代。胞壁酰肽化合物是肽聚糖，它們能增強(qiáng)哺乳動物細(xì)胞的抗原性反應(yīng)，以及它們是胞壁酰二肽(MDP)的原型或其類似物或其衍生物。
許多以前公開的胞壁酰肽化合物在治療或預(yù)防進(jìn)行性白血病和敗血性休克中發(fā)揮作用，具有免疫強(qiáng)化的抗細(xì)菌活性。然而，胞壁酰肽分子只在免疫活性宿主中有效。有代表性的胞壁酰肽請參看美國專利No5506204和5534492，在這里一并引作參考。
多種胞壁酰二肽的原型類似物都是已知的，其中的一些被提出用作免疫功能或免疫系統(tǒng)的非特異性刺激恢復(fù)的治療手段。這些類似物及原型MDP本身被總稱為“胞壁酰肽”。
本發(fā)明的第一方面是提供了一種胞壁酰肽化合物和水溶性生物活性蛋白如hCG的組合物。
無需局限于hCG，其他治療劑也予以考慮，包括但不限于胰島素，胰高血糖素，降鈣素，心房肽，促胰液素，縮膽囊素，促甲狀腺激素釋放胸腺五肽，促腎上腺皮質(zhì)激素，生長激素釋放因子，腦啡肽，催產(chǎn)素，血管升壓素和促黃體生成素釋放激素。這些組合物也可另外被配制成基質(zhì)物質(zhì)，它選自脫乙酰殼多糖，藻膠，飽和的多糖甘油酯(polyglycolysed glyceride)，甘油棕油硬脂酸甲酯，多元醇的C12到C22的飽和脂肪酸酯，甘油基和聚乙二醇山俞酸甲酯，聚環(huán)氧乙烷和甘草酸銨鹽等。
佐劑選自單磷酰脂A，脂A，匙孔血藍(lán)蛋白，組氨酸標(biāo)簽，明礬，弗氏佐劑，β-gal，棕櫚酸，皂苷，脂多糖，BCG細(xì)胞壁骨架，monomycolate海藻糖，dimycolate海藻糖，脂X，異丙肌苷，lithosperman(A，B或C)，和胞壁酰二肽(MDP)脂交聯(lián)物。這些脂可以是飽和和或非飽和的磷脂或糖脂。優(yōu)選的脂選自1，2二-肉豆蔻酰磷脂酰膽堿，1，2-二棕櫚酰磷脂酰膽堿，1，2-二肉豆蔻酰磷脂酰甘油，膽固醇及它們的組合。
適合制備速溶組合物的固體脂的例子是由天然的、偶數(shù)的、鏈長范圍在C10-C18的沒有分枝的脂肪酸組成的甘油三酯，或由天然來源的、飽和的、偶數(shù)的和沒有分枝的脂肪酸組成的微結(jié)晶的甘油三脂，如三葵酸甘油酯，三月桂酰甘油酯，三豆蔻酰甘油酯，三棕櫚酰甘油酯和三硬脂酸甘油脂(tristearin)?？傊魏卧诔膳鷻z測時能在室溫(25℃)中提供固相的脂類成分或脂類成分的混合物，適合用作脂核。
用來制造速溶組合物的優(yōu)選磷脂有天然的磷脂，如豆磷脂，卵磷脂，磷脂酰甘油，磷脂酰肌醇，磷脂酰乙醇胺，磷脂酸，鞘磷脂，二磷脂酰甘油，磷脂酰絲氨酸，磷脂酰膽堿，心磷脂等，和合成的磷脂如二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿，二肉豆蔻酰磷脂酰甘油，二硬脂酸磷脂酰甘油，二棕櫚酰磷脂酰膽堿，單磷酰脂A，二磷酰脂A等以及羥基化或部分羥基化的卵磷脂和磷脂。
非天然的表面活性劑和去污劑可以任選地以一定數(shù)量摻入到本發(fā)明的組合物中。這里使用的術(shù)語“表面活性劑”或“去污劑”包括范圍很廣的人造分子，它們在水溶液中形成微膠粒，包含親脂和親水區(qū)域?？傊?，乳化劑包括山梨聚糖酯，聚氧乙烯山梨聚糖單，二或三酯，聚氧乙烯脂肪酸，聚氧乙烯脂肪酸脂及它們的組合。非天然的表面活性劑的例子包括，但不限于聚山梨酸酯(“Tween”或單油酸失水山梨醇酯)，十二烷基硫酸鈉(SDS)，聚乙氧基化蓖麻油(“CREMOPHOR”)，NP-40和許多別的人工合成分子。此外，若干人工合成的表面活性劑，如二甲基雙十八烷基溴化銨(DDA)，某些線性聚氧丙烯-聚氧乙烯(POP-POE)嵌段多聚體(商業(yè)上可以獲得，其商標(biāo)為PLUPONIC)，據(jù)報道有佐劑的活性。其中，泊洛沙姆401，普流羅尼L62LF，普流羅尼L101，普流羅尼L64，PEG1000，特強(qiáng)尼1501，特強(qiáng)尼150R1，特強(qiáng)尼701，特強(qiáng)尼901，特強(qiáng)尼1301，Atmos300，Tween 20，Tween 40，Tween 60，Tween 80和特強(qiáng)尼130R1是尤其期望的。乳化劑也包含失水山梨醇酯A或失水山梨醇酯80或Span80(所謂的單油酸二縮甘露醇)。這些佐劑可以用于不同的劑量。例如在速溶組合物中，當(dāng)失水山梨醇酯A或失水山梨醇酯80或Span80的優(yōu)選范圍介于大約2-15％重量之間時，Tween 80的范圍就在0.2-0.4％重量?？傊砻婊钚詣┱冀M合物的總重少于30％，優(yōu)選的是少于25％，更優(yōu)選的是少于10％，而最優(yōu)選的是少于5％。
MDP的功能等效物，包括但不限于胞壁酰二肽或三肽，如N-乙酰葡糖胺基-N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺(GMDP)，N-乙酰-D-葡糖胺基(β-1，4)-N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰葡糖胺基-N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-谷氨酸(GMDP-A)，胞壁酰二肽磷脂酰乙醇胺，胞壁酰三肽磷脂酰乙醇胺，胞壁酰三肽磷脂酰乙醇胺，GGP11637(去甲-MDP)，α(N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺)，β，γ-二棕櫚酰-sn-甘油，α(N-乙酰-胞壁酰-D-丙氨酰-D-異谷氨酰胺)，β，γ-二棕櫚酰-sn-甘油，α(N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺-L-丙氨酸)，β，γ-二棕櫚酰-sn-甘油，α(N-乙酰-胞壁酰-D-丙氨酰-D-異谷氨酰胺-L-丙氨酸)，β，γ-二棕櫚酰-sn-甘油，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺-L-丙氨酸-2-(1，2-二棕櫚酰-sn-甘油-3-羥磷酰氧基)乙酰胺，葡糖胺基胞壁酰肽，murametide，murabutide，muradimetide，myramistin，N-乙酰胞壁酰-L-蘇氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-α-氨基丁酰-D-異谷氨酰胺，6-O-硬脂酰-N-乙酰胞壁酰-L-α-氨基丁基-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-纈氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰-去甲基胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-谷氨酰胺丁基酯，N-乙酰胞壁酰-L-絲氨酰-D-異谷氨酰胺，N-丁基胞壁酰-L-α-氨基丁基-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-蘇氨酰-D-異谷氨酰胺，雙(6-O-胞壁酰二肽)O-棕櫚酰丙醇二酸，胞壁酰三肽磷脂酰乙醇胺，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺酰-L-丙氨酸-2-(1，2-二棕櫚酰-sn-甘油-3-(羥磷酰氧基))乙酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-谷氨酰胺丁基酯，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺酰-L-丙氨酸-2-1，2-二棕櫚酰-sn-甘油-3-(羥磷酰氧基)乙酰胺(MTP-PE)，膽固醇-MDP，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺的β-丁基糖苷，2-乙酰氨基-4，6-二-O-乙酰-2-脫氧-3-O-[(R)1-(甲氧羰基)乙基]-α-D-吡喃葡萄糖，(β-丁基MDP，MTPO-26，β-膽固醇-MDP)，皂苷(Taurosid I)，N-乙酰去甲-胞壁酰-L-N-甲基丙酰-D-異谷氨酰胺辛酰胺，UDP-N-乙酰胞壁酰五肽，L4-MDP-ONB，L-丙氨酰-γ-D-谷氨酰-中-二氨基庚二酸，1，6-脫水胞壁酰二肽，N-乙酰葡糖胺基-β-1，4-N-乙酰胞壁酰五肽-焦磷酰-十一萜醇，3-O-[乙酰胞壁酰-D-異谷氨酰胺酰]-1，2-二棕櫚酰-sn-甘油，L-蘇氨酰-MDP-GDP，L-異蘇氨酰-MDP-GDP，海藻糖6，6-二酯，胞壁酰二肽，B30胞壁酰二肽和胞壁酰二肽-賴氨酸。
可以理解氨?；鶜埢梢允沁x自丙氨?；?，纈氨酰基，亮氨酰基，異亮氨?；?氨丁基，蘇氨?；?，甲硫氨?；?，半胱氨酰基，谷氨?；?，異谷氨酰基，谷氨酰胺?；?，異谷氨酰胺?；?，天冬氨?；?，苯丙氨?；?，酪氨?；?，色氨酰基，賴氨?；?，鳥氨酰基，精氨?；M氨?；於０滨；滨；?，羥脯氨?；?，絲氨?；透拾滨；邪滨；糠值娜我粋€。
別的胞壁酰肽衍生物包括那些用L-蘇氨酰殘基替代胞壁酰肽基中的L丙氨酰殘基的化合物。此外，使用在糖基的1，4，6位上有取代基的佐劑胞壁酰肽也是有可能的，條件是它們和上文提到的優(yōu)選胞壁酰肽具相同的有利效果。無需限于上述胞壁酰肽的衍生物，那些例如已經(jīng)在美國專利No4158052，4220637，4323559，4323560，4409209，4423038，4185089，4406889，4082735，4082736，4427659，4461761，4314998，4101536，4369178，5075287，5376369，5264431和5709879(在此一并引作參考)中公開的衍生物在本發(fā)明中具有同等的用處。
組合物中的其他有用的添加劑包括N-環(huán)己酰精氨酸，N-環(huán)己酰酪氨酸和N-環(huán)己酰亮氨酸的混合物，N-苯基磺酰纈氨酸、N-苯基磺酰亮氨酸、N-苯基磺酰苯丙氨酸、N-苯基磺酰賴氨酸和N-苯基磺酰精氨酸的混合物，以及N-苯甲酰纈氨酸、N-苯甲酰亮氨酸、N-苯甲酰苯丙氨酸、N-苯甲酰賴氨酸、N-苯甲酰精氨酸和穩(wěn)定劑如2-環(huán)己基丁酸鈉的混合物。
無需限于上述成分，一個本領(lǐng)域的技術(shù)人員能想到的有卵清蛋白，霍亂毒素，?；陌被峒捌潲}，含有至少一種?；陌被峄蚱潲}的多氨基酸，一種磺酸化的氨基酸及其鹽，或這些物質(zhì)的任何組合。這種組合物也包含微球體。
用于形成微球體的多聚體基質(zhì)是本領(lǐng)域眾所周知的。例如，包含酶，激素，疫苗和其它生物制品的半透性的微球體，在美國專利No5643605中被公開了。另一個美國專利No5075109公開了一種方法，這種方法通過施用一種混合物促進(jìn)免疫應(yīng)答，這種混合物至少由兩群含生物活性劑的微球體組成，其中一群微球體的大小介于約1-10μm。美國專利No4293539公開了共聚物中活性成分的可控制釋放制劑，而共聚物由大約60-95％重量的乳酸和大約40-4％重量的乙醇酸衍生而成。美國專利No4919929公開了一種具生物相容性基質(zhì)有形結(jié)構(gòu)的抗原物質(zhì)的施用。美國專利No4767628公開了一種含活性的酸穩(wěn)定多肽和聚丙交酯的組合物，當(dāng)把這種組合物置于水性生理環(huán)境中時，它基本上以一種單相方式，以大致恒定的速率釋放多肽。美國專利No4962091公開了一種在聚丙交酯基質(zhì)中的水溶性大分子多肽的微懸浮液。美國專利No4849228和4728721公開了一種可生物降解的高分子量多聚體，其特征是水溶性低分子量化合物的含量小于0.01mol/100g高分子量多聚體，計算的依據(jù)是假設(shè)這種化合物是一元酸。美國專利No4902515和4719246公開了聚丙交酯組合物，它包含與聚(S-丙交酯)區(qū)段連結(jié)的聚(R-丙交酯)區(qū)段。美國專利No4990336公開了一種多階段持續(xù)釋放系統(tǒng)，它包含以微球體形式膠囊化的過敏原提取物，微球體是一種可生物侵蝕的膠囊化多聚體，它使得過敏原能分階段的持續(xù)釋放。這個系統(tǒng)包括過敏原提取物的第一部分和第二部分，通過注射，第一部分以一種方式被釋放，在這種方式中，起始變應(yīng)原性(allergenicity)被最小化，產(chǎn)生一種和正常情況下施用低劑量的常規(guī)過敏原所觀察到的相似的適度局部反應(yīng)，而第二部分提供基本上劑量更高的過敏原提取物，它在病人中會產(chǎn)生一種嚴(yán)重的反應(yīng)，如果沒有釋放過敏原提取物的第一部分。美國專利No4897268公開了微膠囊輸送系統(tǒng)，其中成分被膠囊化在按不同摩爾比率配成的可生物降解的共聚物賦形劑中，這樣，成份就會在一個延長的時期以恒定速率輸送。因此，制造和使用微球體的不同手段是已知的，可以輕易地用于本發(fā)明目的。
本發(fā)明的微球體也包括脂質(zhì)體。適合形成脂質(zhì)體的組合物在技術(shù)文獻(xiàn)眾所周知，而組合物在本領(lǐng)域也很豐富。優(yōu)選的脂類組合物是那些能變成磷脂的組合物，如磷脂酰膽堿(一種脂肪酸衍生物，含有12-20個碳原子)(特別是16-20個碳原子)，磷脂酰絲氨酸，磷脂酰肌醇，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰甘油和磷脂酸。這些磷脂化合物可以單獨(dú)使用也可混合使用。尤其有利的是采用合成或天然的二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)或磷脂酰膽堿的混合物，以及磷脂酰絲氨酸(PS)或磷脂酰甘油(PG)的混合物。有利的是，這些脂質(zhì)體是由含上面提及的磷脂混合物組成的，在這個混合物中，一般是7倍體積的DSPC或磷脂酸膽堿(PC)對1-10倍體積，優(yōu)選的是3倍體積的PS。當(dāng)含有本發(fā)明衍生物的脂質(zhì)體以單層脂質(zhì)或多層脂質(zhì)的形式出現(xiàn)時，它的生物活性被證明一樣的好。優(yōu)選地，脂質(zhì)體粒子的大小大于或等于0.1μm，例如，介于1-10μm。
本發(fā)明的化合物可以用作非特異抗微生物抗性的調(diào)制劑，用于全身性增強(qiáng)免疫應(yīng)答和非特異性免疫。
因此，這表明例如在對免疫應(yīng)答下降的癥狀，尤其是細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)下降的癥狀和延緩型過敏反應(yīng)下降的癥狀進(jìn)行治愈性治療或支持療法(即，和治療的進(jìn)一步特異或支持形式一起)中，以及進(jìn)一步在通常需要免疫應(yīng)答的調(diào)制的癥狀的治療中。
它在病理狀態(tài)的治愈性治療或支持療法中特別有用，病理狀態(tài)和自發(fā)性免疫缺陷或老年病人或重度燒傷或全身性感染病人中所遇到缺陷型相關(guān)。
本發(fā)明的化合物進(jìn)一步在病毒感染如傳播性皰疹和傳播性水痘感染、HIV感染以及惡性腫瘤的治愈性治療或支持療法中有用。
緩慢釋放的hCG可以考慮用于RNA和DNA病毒。這包括，但不限于肝炎病毒，皰疹病毒，流感病毒和裂谷熱病毒。
產(chǎn)生給定結(jié)果所必需的活性成份的準(zhǔn)確數(shù)量應(yīng)根據(jù)特定的化合物，大小，以及將要治療的被試者的年齡和狀況而變化，這一點(diǎn)對本領(lǐng)域的任何一個普通技術(shù)人員都是很明顯的。這些數(shù)量可以利用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所知的常規(guī)方法輕易地加以決定。
本發(fā)明的佐劑組合物和疫苗一般都是通過注射施用。然而，也可以設(shè)計更容易的給藥方法，如口服。當(dāng)本發(fā)明的組合物被直接用于臨床治療和預(yù)防時，它有口服和腸胃外制劑兩種方式。術(shù)語“腸胃外”包括皮下，靜脈內(nèi)，硬膜外，灌胃，肌內(nèi)，釋放泵或灌輸形式。這些組合物也可以不加限制地通過關(guān)節(jié)內(nèi)，滑膜內(nèi)，鞘內(nèi)，骨膜，腫瘤內(nèi)，腫瘤周圍，病斑內(nèi)，病斑周圍，舌下，含服，經(jīng)皮，局部或吸入的方式施用。它也可以作為一種敷料用于傷口或病斑。然而，這種組合物特別優(yōu)選的給藥方式是口服。口服時，本發(fā)明的組合物可以單獨(dú)施用或和可藥用載體結(jié)合做成藥用制劑，如膠囊，藥丸，膠質(zhì)軟糖，片劑，草糖，小香袋，茶包，顆粒，粉末，包衣片劑，糖衣片劑，干糊片，糖塊，膠，水凝膠如親水性吸濕多糖的粒子，泡沫，栓劑，吸入劑，汁液，shake，口香糖，牙膏，牙粉，漱口粉，糖果和乳劑。
合適的藥用載體包括如填充物，結(jié)合劑，潤滑劑，崩解劑，促進(jìn)劑和濕潤劑。填充物如乳糖，蔗糖，甘露醇，葡萄糖，淀粉，山梨糖醇，甘氨酸，磷酸鈣和微結(jié)晶纖維；結(jié)合劑如淀粉，酪蛋白，明膠，阿拉伯膠，葡萄糖，蔗糖，山梨糖醇，甘露醇，西黃耆膠，羥基丙基纖維素，羥基丙氧基甲基纖維素，羧甲基纖維素，2-甲基-5-乙烯吡啶/甲基甲基丙烯酸/乙基丙烯酸脂共聚物，聚乙烯吡咯烷酮和藻酸鈉，海藻酸膠；潤滑劑如硬脂酸，硬化油，硬脂酸鎂，硬脂酸鈣，單硬脂酸聚氧乙烯，滑石粉，氧化硅和聚乙二醇；崩解劑如土豆淀粉以及含有表面活性劑等的淀粉；促進(jìn)劑如硫酸鎂；濕潤劑如十二烷基硫酸鈉。
本發(fā)明的組合物也能以脂質(zhì)體的形式施用。正如本領(lǐng)域所知，脂質(zhì)體或人造脂類囊狀物一般都是源自磷脂或別的脂類物質(zhì)。它們也含有胞壁酰肽，可代謝的油，也可選擇性地添加乳化劑。單層或多層水合液體晶體，分散在水性介質(zhì)中形成脂質(zhì)體。由含本發(fā)明膠囊化組合物的脂質(zhì)體組成的脂質(zhì)體制劑的典型制造過程包括用將要膠囊化的材料的溶液水合脂類物質(zhì)或脂質(zhì)體，提供多個部分的干脂類物質(zhì)或干脂質(zhì)體制劑，然后用含有將要膠囊化的所述材料溶液分別與所述多個部分進(jìn)行水合，以及把每一部分結(jié)合在一起形成單一的脂質(zhì)體制劑，這樣就形成了由含有所述膠囊化材料的脂質(zhì)體組成的脂質(zhì)體制劑。任何無毒的生理上可接受的代謝性脂類物質(zhì)均可用來形成脂質(zhì)體。脂質(zhì)體形式的本發(fā)明組合物除了本發(fā)明的化合物，還包括穩(wěn)定劑，防腐劑，賦形劑等。優(yōu)選的脂類物質(zhì)是磷脂和磷脂酰膽堿(卵磷脂)，天然的或人工合成的均可以。制備脂質(zhì)體的方法在本領(lǐng)域眾所周知的。例如，cochleate含有生物相關(guān)分子成份，即負(fù)電荷脂類成份的和二價陽離子成份。Cochleate具有延長的保質(zhì)期，即便是在干燥狀態(tài)。攝取cochleate是有利的。
出于上述含義，將要使用的劑量取決于待治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，給藥方式以及施用的化合物形式。對于一個普通的被試者，合適的劑量是100IU-約20000IU，一次施用或分開施用。每天一到三次或更少的頻率，如三天一次，一周一次或2周一次，或一月一次，甚至于每三月一次，可方便地實行反復(fù)給藥。在重復(fù)施用的情況下，本發(fā)明的化合物每次注射的指定單位劑量是100IU-約10000IU，優(yōu)選的大約1000-5000IU。如果治療需要的話，一次施用的劑量也可上升到約20000IU。根據(jù)hCG商品制劑商提供的產(chǎn)品說明，本領(lǐng)域的技術(shù)人員能輕易地將hCG的IU單位轉(zhuǎn)變成重量單位，反之亦然。
在許多別的和治療適應(yīng)癥無關(guān)的方法中也可用本發(fā)明的組合物。例如，為了檢測hCG或hCG抗體，組合物可以作為標(biāo)記或非標(biāo)記試劑用于不同的免疫測定，生物測定等。合適的標(biāo)記包括放射性同位素，酶，熒光分子，化學(xué)發(fā)光標(biāo)記，酶底物或輔因子，酶抑制劑，粒子，染料等。這些標(biāo)記的試劑可用于許多眾所周知的測定，如放射性免疫測定，酶聯(lián)免疫測定，如ELISA，熒光免疫測定等。
本發(fā)明也包括使用速溶組合物及本領(lǐng)域通用的藥物或化合物的概念用于不同的疾病類別。在前述的化合物中，下列若干類和/或這些類的成員都是活性成份，它們屬于腎上腺皮質(zhì)類固醇，腎上腺質(zhì)皮抑制劑，醛固酮拮抗物，氨基酸，合成代謝物，雄激素，抗AIDS藥物，蠕蟲劑，抗粉刺藥劑，抗腎上腺功能藥物，抗變態(tài)反應(yīng)物，抗阿米巴性藥物，抗雄激素藥物，抗貧血，抗心絞痛，抗關(guān)節(jié)炎物，抗哮喘藥，抗動脈粥樣劑，抗細(xì)菌劑，抗霍亂劑，anticholelithogenic，抗膽堿能劑，抗凝血劑，抗球蟲劑，抗糖尿病藥，抗腹瀉劑，抗利尿劑，解毒劑，抗雌激素，抗纖維蛋白酶，抗真菌劑，抗青光眼藥劑，抗血友病藥，抗出血藥，抗組胺劑，抗高脂血癥藥，抗高脂蛋白血藥，抗高血壓劑，抗低血壓劑，抗感染劑，抗局部感染劑，抗炎癥藥，抗角質(zhì)化藥劑，抗瘧疾藥，抗微生物的，抗有絲分裂，抗真菌病藥，抗瘤劑，抗嗜中性白細(xì)胞減少劑，抗寄生藥，逆蠕動劑，抗肺囊蟲病藥，抗增殖劑，抗前列腺肥大劑，抗原生動物藥，抗搔癢劑，治牛皮癬藥，抗風(fēng)濕病藥，抗血吸蟲藥，抗脂溢性劑，抗分泌劑，鎮(zhèn)痛劑，抗凝劑，止咳劑，抗?jié)儎?，抗尿石劑，抗病毒劑；食欲遏抑劑，良性前列腺增生治療劑，骨吸收抑制劑，支氣管擴(kuò)張劑，碳酸酐酶抑制劑，心臟抑制藥，心臟保護(hù)劑，強(qiáng)心劑，心血管劑，利膽劑，膽堿能藥物，膽堿能激動劑，膽堿脂酶鈍化劑，抑球蟲劑；診斷用輔助藥，利尿劑，殺外寄生物藥，酶抑制劑，雌激素，纖維蛋白，氧自由基清除劑；糖皮質(zhì)激素；性腺刺激素，毛發(fā)生長刺激物，止血劑，激素，低膽甾醇血的，低血糖的，低血脂的，低血壓的，免疫劑，免疫調(diào)制劑，免疫調(diào)節(jié)劑，免疫刺激劑，免疫抑制劑，陽痿治療附加物，抑制劑，角質(zhì)層分離的，LHRH激動劑，肝紊亂治療劑，黃體溶解素，粘液溶解，放瞳劑，鼻子去充血劑，神經(jīng)肌肉阻斷劑，非激素固醇衍生物，催產(chǎn)素，纖溶酶原激活物，血小板活化因子拮抗物，血小板聚集抑制物，增效劑，孕酮，前列腺素，前列腺素生長抑制劑，前促甲狀腺素，肺面，放射性物質(zhì)，調(diào)節(jié)物，舒張物，再分配劑，滅疥螨劑，硬化劑，選擇性腺苷A1拮抗劑，類固醇抑制劑，炎性多發(fā)性硬化，增效劑，甲狀腺激素，甲狀腺抑制劑，thyromimetic，肌萎縮單側(cè)硬化劑，派杰氏病試劑，不穩(wěn)定心絞痛藥劑，排尿酸劑，血管收縮肌，血管舒張劑，創(chuàng)傷藥，傷口治愈試劑以及黃嘌呤氧化酶抑制劑等。
用于本發(fā)明的那些化合物可以雞尾酒藥物形式輸送。所謂雞尾酒是用上面所提到的任何一種化合物與本發(fā)明的化合物混合在一起。這種混合物并不需要在物質(zhì)上混合，藥物可以單獨(dú)施用，按順序施用或者同時施用。
人們特別感興趣的除了艾滋病藥物外還有抗癌藥物，抗癌藥物能與本發(fā)明的組合物一起用于給藥?？鼓[瘤藥物包括但不限于下面這些藥物阿雪維菌素；阿克拉霉素；Acodazole Hydrochloride；AcrQnine；阿多來新；白細(xì)胞介素-2；六甲蜜胺；二霉素；乙酸阿美蒽醌；氨基導(dǎo)眠能；安丫啶；阿那舒唑；恩霉素；天冬酰胺酶；Asperlin；阿扎胞苷；阿扎替派；疊氮霉素；巴馬司他；苯佐替派；白卡羅他邁；鹽酸比生群；Bisnafide Dimesylate；比折來新；硫酸博來霉素；布列奎鈉；溴匹立明；白消安；放線菌素C；Calusterone；卡醋胺；卡貝替姆；卡波鉑；亞硝基脲氮芥；鹽酸去甲柔紅霉素；卡折來新；Cedefingol；苯丁酸氮芥；Cirolemycin；順式鉑氨；克拉利賓；Crisnatol Mesylate；環(huán)磷酰胺；阿糖胞苷；氮烯咪胺；更生霉素；鹽酸道諾紅霉素；地西他濱；右奧馬鉑；Dezaguanine；Dezaguanine Mesylate；地吖醌；泰索帝；阿霉素；鹽酸多柔比星；屈洛昔芬；檸檬酸屈洛昔芬；丙酸甲氫睪酮；偶氮霉素；依達(dá)曲沙；Eflomithine Hydrochloride；依沙蘆星；恩洛鉑；恩普氨酯；依匹哌啶；鹽酸表柔比星；Erbulozole；鹽酸依索比星；雌氮芥；磷雌莫司汀鈉；依他硝唑；乙碘油I131；鬼臼亞乙苷；磷依托泊苷；Etoprine；鹽酸法屈唑；法扎拉濱；芬維A胺；氟尿嘧啶脫氧核苷；磷酸氟達(dá)拉濱；氟尿嘧啶；氟西他濱；磷喹酮；磷曲星鈉鹽；吉西他濱；鹽酸吉西他濱；金Au198；羥脲；鹽酸伊達(dá)比星；異環(huán)磷酰胺；伊莫福新；α-2a干擾素；α-2b干擾素；α-n1干擾素；α-n3干擾素；β-Ia干擾素；γ-Ib干擾素；異丙鉑；鹽酸伊立替康；醋酸蘭瑞肽；來曲唑；醋酸亮丙瑞林；Liarozole Hydrochloride；洛美曲索鈉鹽；洛莫司??；鹽酸洛索蒽醌；馬索羅酚；美登素；鹽酸二氯甲基二乙胺；乙酸甲地孕酮；甲烯雌醇乙酸酯；苯丙氨酸氮芥；美諾立爾；巰嘌呤；甲氨蝶呤；甲氨蝶呤鈉；Metoprine；美妥替哌；米丁度胺；Mitocarcin；絲裂紅素；絲林霉素；絲林馬菌素；絲裂霉素；米托司培；鄰對滴滴滴；鹽酸米托蒽醌；霉酚酸；諾考達(dá)唑；諾加霉素；奧馬鉑；亞磺酰吡啶；紫杉醇；培加帕酶；佩里霉素；奈莫司??；硫酸培洛霉素；派磷酰胺；哌泊溴烷；哌泊舒凡；鹽酸吡羅蒽醌；米拉霉素；普洛美坦；卟吩姆鈉；紫菜霉素；潑尼莫司?。畸}酸甲基芐肼；嘌呤霉素；鹽酸嘌呤霉素；吡唑呋喃菌素；利波腺苷；羅谷亞胺；Safmgol；Safingol Hydrochloride；司莫司汀；辛曲秦；parfosate Sodium；稀疏霉素；鹽酸鍺螺胺；螺莫司??；螺鉑；鏈黑菌素；鏈佐星；氯化鍶Sr 89；磺氯苯脲；Talisomycin；紫杉醇類；Taxoid；Tecogalan Sodium；替加氟；鹽酸替洛蒽醌；替莫卟吩；表鬼臼毒噻吩糖苷；替羅昔??；睪內(nèi)酪；Thiamiprine；硫鳥嘌呤；硫替哌；噻唑呋啉；替拉扎明；鹽酸拓?fù)涮婵?；枸櫞酸托瑞米芬；乙酸甲諾酮；磷酸曲西立濱；三甲曲沙；三甲曲沙葡糖醛酸脂；曲譜瑞林；鹽酸妥布氯唑；烏拉莫司汀；烏瑞替派；伐普肽；維速達(dá)爾；硫酸長春滅瘟堿哪；硫酸長春花新堿鈉；長春地辛；硫酸長春地辛；硫酸長春匹定；硫酸長春甘酯；硫酸長春羅新；酒石酸長春瑞賓；硫酸長春羅定；硫酸長春利定；伏氯唑；折尼鉑；新制癌菌素和鹽酸佐柔比星。
其它的抗腫瘤化合物包括20-epi-1，25-二氫維生素D3；5-乙炔尿嘧啶；abiraterone；阿克拉霉素；腸癌?；幌?；腺環(huán)戊醇；阿多來新；白細(xì)胞介素-2；ALL-TK拮抗物；六甲蜜胺；氨莫司??；amidox；氨磷?。话被阴１?；氨柔比星；atrsacrine；阿那格雷；阿那舒唑；穿心蓮內(nèi)酯；血管發(fā)生抑制劑；拮抗物D；拮抗物G；antarelix；anti-doralizing形態(tài)發(fā)生蛋白-1；抗雄激素；前列腺癌；抗雌激素；抗腫瘤物質(zhì)；反義寡核苷酸；甘氨酸蚜棲菌素；細(xì)胞程序性死亡基因調(diào)制劑；細(xì)胞程序性死亡調(diào)節(jié)子；脫嘌呤核酸；ara-CDP-DL-PTBA；精氨酸脫氨酶；asulacrine；阿霉素碳；阿莫司??；axinastatin 1；axinastatin2；axinastatin 3；阿扎司瓊；azatoxin；重氮酪氨酸；漿果赤霉素III衍生物；balanol；巴馬司他；BCR/ABL拮抗物；benzochlorins；benzoylstaurosporine；β內(nèi)酰胺衍生物；β-alethine；亞阿克拉霉素B；樺木酸；bFGH抑制劑；白卡羅他邁；比生群；bisaziridinylspermine；雙奈法德；bistratene A；比折來新；breflate；溴匹立明；布度鈦；丁基硫堇硫氧胺；大力士軟膏；calphostin C；喜樹堿衍生物；金絲雀痘IL-2；卡培他濱；氨甲酰-氨基-三唑；羧氨基三唑；CaRest M3；CARN700；cartilaga衍生的抑制劑；卡折來新；酪蛋白激酶抑制制(ICOS)；栗樹精胺；殺菌肽B；西曲瑞克；氫卟酚；氯喹喔啉磺胺；cicaprost；順卟啉；克拉屈濱；氯米分類似物；克霉唑；collismycin A；collismycinB；combretastatin A4；combretastatin類似物；conagenin；crambescidin816；crisnatol；念珠藻環(huán)肽8；念珠藻環(huán)肽A衍生物；curacin A；cyclopentanthraquinones；cycloplatam；cypemycin；阿糖胞苷ocfosfate；細(xì)胞溶解因子；cytostatin；dacliximab；地西他濱；dehydrodidemnin B；deslorelin；右異環(huán)磷酰胺；右雷佐生；dexverapamil；亞胺醌；膜海鞘素B；didox；二甲基去甲精胺(diethylnorspermine)；二氫-5-氮胞苷；二氫紫杉醇，9-；二氨基乙二酰；二苯基螺莫司??；二十二烷醇；多拉司瓊；去氧氟尿苷；屈洛昔芬；屈大麻酚；duocannycin SA；依布硒啉；依考莫司??；依地福新；edrecolomab；依氟鳥氨酸；欖香烯；乙嘧替氟；表柔比星；愛普列特；雌氮芥類似物；雌激素激動劑；雌激素拮抗劑；依他硝唑；磷酸鬼臼亞乙苷；依曼適達(dá)；法屈唑；法扎拉濱；芬維A胺；非格司亭；fmasteride；flavopiridol；flezelastine；fluasterone；氟達(dá)拉濱；fluorodaunorunicin hydrochloride；forfenimex；福美司坦；磷烯菌素；福莫司汀；gadolinium taxaphyrin；硝酸鎵；galocitabine；加尼瑞克；明膠酶抑制劑；21-去氧-21，21-二氟胞嘧啶；谷胱甘肽抑制劑；hepsulfam；heregulin；六亞甲基二乙酰胺；金絲桃素；依班膦酸；伊達(dá)比星；艾多昔芬；idramantone；伊莫福新；伊洛馬司他；imidazoacridones；咪喹莫特；免疫刺激肽；類胰島素生長素-1受體抑制劑；干擾素激動劑；干擾素；白細(xì)胞介素；碘芐胍；iododoxorubicin；4-蕃薯寧；伊立替康；iroplact；伊索拉定；isobengazole；isohomohalicondrin B；伊他司瓊；jasplakinolide；kahalalide F；lamellarin-N triacetate；蘭瑞肽；leinamycin；來格司亭；硫酸蘑菇多糖；leptolstatin；來曲唑；白血病抑制因子；白細(xì)胞α干擾素；亮丙瑞林+雌激素+孕酮；亮丙瑞林；左旋咪唑；liarozole；線性多氨基類似物；親脂性二糖肽；親脂性鉑化合物；lissoclinamide 7；絡(luò)鉑；蚯蚓磷脂；洛美曲索；氯尼達(dá)明；洛索蒽醌；洛伐他汀；loxoribine；勒托替康；德克薩斯卟啉镥；lysofylline；裂解肽；美坦辛；制甘糖霉素A；marimastat；馬索羅酚；maspin；基質(zhì)裂解素抑制劑；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑；美諾立爾；麥爾巴隆；meterelin；甲硫氨酸酶；甲氧氯普胺；MIF抑制劑；米非司酮；米特福辛；mirimostin；錯配雙鏈RNA；米托胍腙；二溴衛(wèi)矛醇；絲裂霉素類似物；米托萘胺；mitotoxin fibroblastgrowth factor-saporin；米托蒽醌；莫法羅??；沙格司亭；單克隆抗體；人絨膜促性腺激素；單磷脂A十分枝桿菌細(xì)胞壁sk；mopidamol；多抗藥性基因抑制劑；多腫瘤抑制劑1基本療法；芥子抗癌劑；mycaperoxide B；分枝桿菌細(xì)胞壁提取物；myriaporone；N-乙酰地那林；N-取代的苯甲酰胺；那法瑞林；nagrestip；納洛酮+潘他唑新；napavin；naphterpin；nartograstim；奈達(dá)泊汀；奈莫柔比星；neridronicacid；中性內(nèi)肽酶；尼魯米特；nisamycin；氧化氮調(diào)制劑；硝基氧抗氧化劑；nitrullyn；O6-芐基鳥嘌呤；奧曲肽；okicenone；寡核苷酸；奧納司酮；昂丹司瓊；恩丹西酮；oracin；口服細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑；奧馬鉑；osaterone；oxaliplain；oxaunomycin；紫杉醇類似物；紫杉醇衍生物；palauamine；棕櫚酰利索新；帕米膦酸；人參炔三醇；panomifene；副球菌素；帕折普汀；培加帕酶；peldesine；戊聚糖多硫酸鈉，戊制菌素；pentrozole；perflubron；派磷酰胺；紫蘇子醇；phenazinomycin；苯乙酸；磷酸酶抑制劑；picibanil；鹽酸毛果堿；吡柔比星；吡曲克辛；placetin A；placetin B；溶酶原激活物抑制劑；鉑復(fù)合物；鉑化合物；鉑三氨基復(fù)合物；泊非美鈉；甲基絲裂霉素；丙基雙-吖啶酮；前列腺素J2；蛋白酶體抑制劑；蛋白A基的免疫調(diào)制劑；蛋白激酶C抑制劑；蛋白激酶C抑制劑；微笑藻類；蛋白酪氨酸磷酸酶抑制劑；嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑；嘌呤；pyrazoloacridine；pyridoxylated血紅蛋白聚氧乙烯交聯(lián)物；raf拮抗劑；雷替曲塞；拉莫司瓊；ras法呢酯蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑；ras抑制劑；ras-GAP抑制劑；retelliptinedemethylated；錸Re 186 etidronate；利索新；核酶；RII維甲胺；羅谷亞胺；rohitukine；羅莫肽；roquinimex；rubiginone B1；ruboxyl；safingol；saintopin；SarCNU；sarcophytol A；沙格司亭；Sdi 1模擬物；司莫司??；衰老衍生抑制劑1；有義鏈寡核苷酸；信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑；信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)劑；單鏈抗原結(jié)合蛋白；西佐喃；索布佐生；硼卡鈉；苯乙酸鈉；solverol；生長調(diào)節(jié)素結(jié)合蛋白；索納明；斯帕福斯酸；穗霉素D；螺莫司??；splenopentin；海綿素1；角鯊烯胺；干細(xì)胞抑制劑；干細(xì)胞分裂抑制劑；stipiamide；溶基質(zhì)素抑制劑；sulfmosine；超活躍的血管活性腸肽拮抗劑；suradista；蘇拉明；苦馬豆素；合成的糖胺聚糖；他莫司??；三苯氧胺methiodide；牛磺莫司??；他佐羅??；tecogalan sodium；替加氟；tellurapyrylium；端粒酶抑制劑；替莫卟吩；帝盟多那買；表鬼臼毒噻吩糖苷；tetrachlorodecaoxide；tetrazomine；thaliblastine；沙利度胺；thiocoraline；血小板生成素；血小板生成素模擬物；日達(dá)仙(tm)胸腺1；胸腺生成素受體激動劑；thymotrinan；促甲狀腺激素；乙基初卟啉錫(tin ethyl etiopurpurin)；替拉扎明；二氯二茂鈦；拓?fù)涮乜?；topsentin；脫瑞米芬；全能干細(xì)胞因子；翻譯抑制劑；維A酸；三乙酰尿苷；曲西立濱；三甲曲沙葡糖醛酸脂；曲普瑞林；托烷司瓊；turosteride；酪氨酸激酶抑制劑；酪氨酸磷酸化抑制劑；UBC抑制劑；烏苯美司；尿生殖竇衍生生長抑制因子；尿激酶受體拮抗物；伐普肽；variolin B；載體系統(tǒng)；紅細(xì)胞基因療法；velaresol；veramine；verdins；維特卟吩；長春瑞賓；vinxaltine；vitaxin；伏氯唑；zanoterone；折尼鉑；亞芐維C；凈司他丁斯酯等。
配制不含有hCG而含有其它的具有生物活性的水溶性蛋白和肽的制劑也是本發(fā)明的目的。這樣的活性水溶性蛋白是一種生長激素或一種促生長素，例如人生長激素(HGH)，牛生長激素(BGH或BST)，豬生長激素(PGH或PST)以及它們的類似物和衍生物，還有表皮生長因子(FGF)及它的類似物。其它可以考慮的蛋白有白細(xì)胞介素，白細(xì)胞介素受體，白細(xì)胞介素受體激動劑，趨化因子和干擾素。例如，α干擾素，α-2a干擾素，α-2b干擾素，α-N1干擾素，α-N3干擾素，β干擾素，β-1 a1干擾素；β-1b干擾素，γ-1a干擾素，γ-1b干擾素，ω干擾素，τ干擾素，白細(xì)胞介素-1，白細(xì)胞介素-1α，白細(xì)胞介素-1β，白細(xì)胞介素-10，白細(xì)胞介素-11，白細(xì)胞介素-12，白細(xì)胞介素-15，白細(xì)胞介素-2，白細(xì)胞介素-3，白細(xì)胞介素-4，白細(xì)胞介素-5，白細(xì)胞介素-7，白細(xì)胞介素-8，MIP-1α和β，RANTES等。此外，蛋白也可選自血細(xì)胞生長刺激因子和它們的前體物，促紅細(xì)胞生成素(EPO)及其類似物。其它同等需要的蛋白有甲狀旁腺激素(PTH)，含硒蛋白質(zhì)P，半胱氨酸蛋白酶抑制劑B和它的肝巰基蛋白酶抑制劑類似物，內(nèi)毒素中和蛋白，淋巴細(xì)胞遷移抑制因子(LIF)，肥大細(xì)胞生長因子(MGF)，巨核細(xì)胞刺激因子(MGDF)，粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)，genofibrate，α降鈣素，β降鈣素，腫瘤壞死因子(TNF)，腫瘤侵入抑制因子，TGF-β型細(xì)胞因子，艾滋病和其它逆轉(zhuǎn)錄病毒的反式作用調(diào)節(jié)蛋白(TAT′s)，蛋白酶抑制劑和BPC 157，降脂激素，以及這些蛋白的類似物和變體。還可考慮的蛋白質(zhì)有；胰島素，胰高血糖素，胃泌素，血管緊張素，胰泌素，催乳激素，促甲狀腺素，促黑激素，促黃體素(LH)，促卵泡激素(FSH)，促甲狀腺素(TSH)，血小板生成素(TPO)，促黃體素生成激素，人絕經(jīng)期促性腺激素，血管升壓素，催產(chǎn)素，普羅瑞林，促腎上腺皮質(zhì)激素，SOD，尿激酶和溶菌酶。一個本領(lǐng)域的技術(shù)人員將意識到其它的細(xì)胞因子也是眾所周知的，而且也同樣適用于發(fā)明的組合物中。并不局限于上面列舉的這些生物活性蛋白，其它的多肽也是考慮的對象，例如G-CSF，M-CSF，LIF，抑制素A，抑制素B，活化素A，活化素B，NAP-1，MCP-1，MIP-1α，MIP-1β，MIP-2，SISβ，SISδ，SISε，PF4，PBP，γIP-10，MGSA，aFGF，bFGF，KGF，PDGF-A，PDGF-B，PD-ECGF，INS，IGF-I，IGF-II，NGF-β，GRO/MGSA，PF4，PBP/CTAP/β。TG，IP-10，KC，9E3，MCAF，ACT-2/PAT 744/G26，LD-78/PAT 464，RANTES，G26，I309，JE，TCA3，ICAM-1，ICAM-2，LFA-1，LFA-3，CD72，CTAPIII，ENA-78，GRO，I-309，PF-4和LD-78。
除了上面這些蛋白，其它由表1所列的基因所編碼的目的蛋白也可考慮用于本發(fā)明的組合物中。
表1




















實施例1本發(fā)明的組合物可以用許多本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法制備?？傊?，對不同應(yīng)用所需的親脂親水值如下3～6油包水的乳化劑(如失水山梨醇酯+角鯊烯)，7～9的潤濕劑；8～13的水包油的乳化劑；13～15的去污劑；15～18的增溶劑(如硬脂酸鋁和硬脂酸鎂)。這些值在文獻(xiàn)中被廣泛引用，作為特殊目的乳化劑的選擇指南。它們被設(shè)計用于非離子型乳化劑。類似的系統(tǒng)被開發(fā)用于陰離子或陽離子乳化劑，但它們的用處不如非離子型乳化劑。許多非離子型乳化劑的親水親脂平衡數(shù)已經(jīng)出版。含有大約0.5-55％的油，大約0.1-15％的乳化劑，大約0.05-5％的非離子型表面活性劑，大約0.00001-10％的治療劑及一個連續(xù)水相的水包油乳液最適合這種特殊用法。組合物中的乳化劑是一種磷脂化合物或選自磷脂酰膽堿，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰絲氨酸，磷脂酰肌醇，磷脂酰甘油，磷脂酸，鞘磷脂，心磷脂中的磷脂混合物。乳化劑的一個例子是失水山梨醇酯A。表面活性劑通常是選自脂肪酸，聚乙二醇脂肪酸酯，聚乙氧基化脂肪酸酯，聚乙氧基化脂肪醇醚，具1或多個羥基的有機(jī)化合物的環(huán)氧亞烷縮合物。表面活性劑可以是天然的具生物相容性的表面活性劑，如卵磷脂或可藥用的非天然表面活性劑如Tween-80。和卵磷脂相關(guān)的合適的天然成份如EPICURON120(Lucas Meyer德國)，它是大約70％的磷脂酰膽堿，12％的磷脂酰乙醇胺和大約15％的其他磷脂組成的混合物；OVOTHIN 160(LucasMeyer，德國)，它是一種含大約60％的磷脂酰膽堿，18％磷脂酰乙醇胺和12％的其他磷脂的混合物；一種純化的磷脂混合物L(fēng)IPOID E-75或LIPOID E80(lipoid，德國)，它是一種含大約80％磷脂酰膽堿，8％的磷脂酰乙醇胺，3.6％非極性脂類和大約2％的鞘磷脂的磷脂混合物。純化的卵黃磷脂，豆油磷脂或其他純化的磷脂混合物都可用作這種成份。列出的是有代表性的磷脂，但不限于這些磷脂，本領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的其他磷脂一樣也能被使用。別的表面活性劑例子如脂肪酸的聚乙二醇酯，它們有不同來源如海貍油(EMULFOR)，聚乙氧基化脂肪酸，如硬脂酸(SIMULSOL M-53)；NONIDET；聚乙氧基化異辛基酚/甲醛聚合物(TYLOXAPOL)；聚氧乙烯脂肪醇醚(BRIJ)；聚氧乙烯非苯基醚(TRITON N)；和聚氧乙烯異辛基苯基醚(TRITON X)等。在一些實施方案中，乳液可形成和穩(wěn)定在一或多個共表面活性劑基本缺乏的情況中，這些共表面活性劑選自非鹵化的脂族C3-C6醇，游離脂肪酸，單或二甘油酯，聚甘油脂肪酸酯或溶血磷脂酰膽堿。然而，替代的組合物也同樣合適并且可被本領(lǐng)域技術(shù)人員輕易地制備，例如，含5.0％PLURONIC，10％角鯊烯，0.4％Tween-80，qs磷酸鹽緩沖液(pH7.4)的組合物，把成份加入試管，攪拌混合，直到獲得奶狀的乳液。這種組合物應(yīng)該在施用前制備或冰凍在4℃。例如，組合物2含5.0％TETRONIC1501，10％角鯊?fù)椋?.4％Tween-80，qs磷酸鹽緩沖液(pH7.4)；然后向這些組合物中加入固體的N-乙酰胞壁酰-L-蘇氨酰-D-異谷氨酰胺(Thr-MDP)，從而形成濃度為500μg/mL的“濃縮液”。然后，這濃縮液和2×抗原溶液(hCG的鹽水溶液，1mg/mL)混合形成了本發(fā)明的制劑。HCG在組合物中的重量優(yōu)選是大約0.00001-10％，更優(yōu)選是大約0.0001-5％，而最優(yōu)選的則是0.001-1％。此外，pH也應(yīng)該在適合穩(wěn)定hCG的范圍。組合物的連續(xù)相是水相，它附加有鹽，糖，抗氧化劑，防腐劑，殺微生物劑，緩沖液，滲透劑(osmoticant)，冷凍保護(hù)劑和別的藥學(xué)上有用的添加劑或溶質(zhì)。典型的防腐劑包括硫柳汞，氯丁醇和對羥基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯或丁酯。典型的滲透壓調(diào)節(jié)劑包括甘油和甘露醇，而甘油是優(yōu)選的。優(yōu)選的油相抗氧化劑是α-生育酚或α-生育酚琥珀酸。水相也可包括多胺羧酸的抗氧化劑，如乙二胺四乙酸或其他可藥用的鹽。
實施例2速溶組合物由兩部分組成。第一部分是N-乙酰胞壁酰-L-蘇氨酰-D-異谷氨酰胺(Thr-MDP)，其是分枝桿菌細(xì)胞壁成份的衍生物。第二部分為磷酸鹽緩沖液，它包括終濃度為5％的角鯊?fù)椋?.25％的普流羅尼(Pluronic)和0.2％的Tween 80(媒介物)。出于實用目的，所需數(shù)量的hCG和顯微流態(tài)的媒介物(第二部分)混合，獲得均一的乳液。然后加入MDP，簡單搖晃一下。可以通過改變混合物中MDP濃度來確定最佳的臨床反應(yīng)濃度。根據(jù)制造商手冊(Pierce chemical，Rockford，III)，作為佐劑對照，可以往小鼠中注入混有明礬或弗氏完全佐劑(CFA)的可溶性hCG。
那些本領(lǐng)域中普通的技術(shù)人員會意識到這樣一種小鼠模型表明，等同的實驗或處理會在人、馴養(yǎng)動物或農(nóng)用動物中誘導(dǎo)出同樣的臨床反應(yīng)。通過一些本領(lǐng)域普通技術(shù)人員眾所周知的常規(guī)程序，憑經(jīng)驗而無需過多的實驗就可以確定用來產(chǎn)生所需臨床效果的制劑和hCG的數(shù)量。因此，如果有必要將這種混合物所帶來的治療副作用降到最低，同時又要獲得有效的反應(yīng)，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員會確定這種混合物對人、馴養(yǎng)動物和農(nóng)用動物施用時的最低水平，從而誘導(dǎo)出所需的臨床效果。在正常使用中，可以根據(jù)許多基本程序中的任何一個注射這種混合物，但皮下或肌內(nèi)注射是特別優(yōu)選的，注射的部位能使乳液以穩(wěn)定的形式保持幾天或幾周。
實施例3hCG水懸浮液在室溫下加入油相中，同時用勻漿器勻漿。當(dāng)油和hCG懸浮液的比率達(dá)到5-6∶3-5份時，停止添加水相。繼續(xù)勻漿，直到水相的液滴大小達(dá)到大約0.05-0.5μm。油相包括下列物質(zhì)93.6％的macro 52；6.0％的失水山梨醇酯A或失水山梨醇酯80或Span80(二縮甘露醇單油酸(mannide monooleate))；0.4％的Tween 80(聚氧乙烯20山梨聚糖單油酸酯)。液相的成分可單獨(dú)在滅菌鍋中被加熱到110℃或以混合物形式被無菌過濾。乳液的穩(wěn)定性由2個因素決定(1)乳化后，用移液器直接滴到水面上，這樣液滴不會擴(kuò)散，保持完整；(2)在37℃儲存4周不會形成任何水相。這樣制備的乳液的終濃度含有大約10％重量的hCG，通過肌內(nèi)或皮下注射時，每個被試者所用的劑量是0.5mL。
實施例4無需限于上述的實施例，含二聚體hCG的本發(fā)明組合物能同時包括兩個乳化劑，這樣就提供更好的穩(wěn)定性。在這個組合物中，主要乳化劑選自聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段共聚物，甘油單油酸酯，甘油二油酸酯，山梨聚糖倍半油酸酯，Brij 93聚氧乙二醇，山梨聚糖單油酸酯及其混合物，而第二個乳化劑則選自聚氧乙烯脂肪酸酯，普流羅尼F68，環(huán)氧乙烷，卵磷脂及其混合物。這個組合物中的油部分是甘油三酯，它選自三己酰甘油酯，三辛酰甘油酯，三棕櫚酰甘油酯及其混合物。別的合適的油包括植物和動物油。合適的植物油包括橄欖油，紅花油，芝麻油和大豆油而合適的動物油則包括那些含有甘油酯的動物油。優(yōu)選的礦物油包括No.40白油，康乃馨輕油和Klearol輕油。這些油的混合物同樣也能使用。
為了制備含礦物油的主要乳液，將約1-約50％體積、優(yōu)選約2-約40％體積的hCG水溶液；約8-約58％體積、優(yōu)選約14-約25％體積的礦物油；以及約2-約30％體積、優(yōu)選約5-約15％體積的主要乳化劑混合在一起。HCG水溶液優(yōu)選的是緩慢加入快速攪拌的油相中，混合，如用磁力攪拌器，攪拌混合約15-60分鐘，優(yōu)選約25-35分鐘。混好的初級乳液然后進(jìn)行更高的剪切乳化，在壓力降為約1000-10000psi，優(yōu)選的是約1000-3000psi，最優(yōu)選的是約1800-2000psi的情況下，以剪切速率為每秒約100000-500000，優(yōu)選為每秒約500000-1000000進(jìn)行剪切，如應(yīng)用微射流均質(zhì)機(jī)(microfluidizer)。關(guān)于微射流均質(zhì)機(jī)的更完整的信息在美國專利NO4533254中已提出。微射流均質(zhì)機(jī)能提供持續(xù)時間短如幾分之一秒的高剪切速率，而不會導(dǎo)致蛋白如hCG變性。然后過濾初級懸浮液，如利用5μm的親水性聚偏氧乙烯二氟化物過濾器(Duropore，Millipore公司)。在乳化之前可以向hCG溶液中加入清蛋白，加入的量約是1-5g％，優(yōu)選是約2-3g％，從而幫助穩(wěn)定多乳液大小分布。在礦物油或固化油中的hCG水溶液的初級懸浮液適合制備本發(fā)明的液相多懸浮液，也應(yīng)產(chǎn)生初級浮液小滴，直徑小于5μm，優(yōu)選的是小于3μm。
實施例5制備由50％v/v外層鹽水相和0.25％共聚體P123的水包油油包水的多乳液。分散在油包水相中的其余50％v/v由72％鹽溶液，18％角鯊烯，2％Span80和32mg共聚物L(fēng)310以及濃度為0.5mg/0.5mL乳液的TNP-HEA組成。乳液含1mg/0.5mL乳液的hCG。這種油包水的乳液在顯微鏡下顯示為直徑是1.0-20μm的粒子。同樣適合這種組合物的其他油包水乳化劑是SF1328，Arlacel P135，DC3225C，DC5200，Abil EM-90和Abil WE-09。本領(lǐng)域的技術(shù)人員意識到有若干別的油包水的乳化劑也能取代上述列出名字的成分。
實施例6根據(jù)本領(lǐng)域眾所周知的基本方法制備含hCG的脂質(zhì)體(例如參看美國專利NO6110492)?？梢詰?yīng)用下列成份DLPC二月桂酰磷脂酰膽堿，DMPC二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿，DPPC二棕櫚酰磷脂酰膽堿，DSPC二硬脂酰磷脂酰膽堿，DOPC二油酰磷脂酰膽堿，DLnPc雙亞麻油酸磷脂酰膽堿，DMPG二肉豆蔻酰磷脂酰甘油，CHOL膽固醇，LA脂A。在一種典型制劑中，多層脂質(zhì)體由DMPC∶DMPG∶CHOL∶LA以摩爾比9∶1∶7.5∶0.011組成的混合物制成。脂A在其中是作佐劑。在梨形搖瓶中把脂類混合物從氯仿溶液在真空狀態(tài)和40℃左右，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)成一干薄層。為了保證完全去掉有機(jī)溶劑，然后在室溫下，把搖瓶放在干燥器中，過夜低真空(大約0.5mmHg柱)抽干。抽干后，通過旋轉(zhuǎn)小心翼翼地使脂類在去離子的無菌無熱原的水中膨脹。利用Virtis Unitop800SL Freeze Mobile將產(chǎn)生的懸浮液冷凍在-55℃，然后在-20℃過夜凍干，第二天保持在0-10℃。然后在物質(zhì)，即hCG存在的情況下，凍干的脂類物質(zhì)復(fù)溶以被囊狀化，從而獲得含有hCG的多層脂質(zhì)體。用來復(fù)溶的合適緩沖液是磷酸鹽緩沖液(PBS)或Tris-甘氨酸/NaCl緩沖液。復(fù)溶緩沖液中的脂質(zhì)體磷脂濃度是10-200mM。用0.15M的NaCl溶液在10℃用27000xg將脂質(zhì)體洗三遍，每遍10分鐘，可去除未被包進(jìn)脂質(zhì)體囊的hCG。為了使磷脂的終濃度達(dá)到10-200mM，將獲得的脂質(zhì)體懸浮在0.15M NaCl溶液或另一種合適的等滲緩沖液中。此外，洗脫步驟也可省略，使未包進(jìn)脂質(zhì)體或包入脂質(zhì)體的hCG均存在制劑中。
實施例7這個實施例可以將hCG偶聯(lián)到MDP上。這個過程需要用硫醇化合物來猝滅第一個反應(yīng)。這個反應(yīng)在2-(N-嗎啉)乙磺酸(MES)(pH4.5-5.0)中進(jìn)行。從水中凍干的MDP(10mg)重懸在MES(0.5mL)(pH4.5-5.0)中，和溶解在MES(pH4.5-5.0)中的EDC(0.5mg或大約2mM)結(jié)合在一起，并在室溫下反應(yīng)15分鐘。加入2-巰基乙醇(終濃度是20mM)去猝滅EDC，并通過離心分離出來。反應(yīng)混合物用MES洗一次，然后重懸在0.5mL的MES(pH4.5-5.0)中。溶解在MES中的hCG加入到激活的MDP中，摩爾比約2∶1。加入MES(0.5M，pH8.5)，讓反應(yīng)的pH在15分鐘緩慢上升到8.5，并在室溫下反應(yīng)2個小時。加入MDP的hCG濃度可通過對MDP末端羧基進(jìn)行定量分析來計算，并表示為mol/mgMDP。加入終濃度為10mM的羥胺可以猝滅該反應(yīng)。猝滅反應(yīng)的方法可以水解任何未反應(yīng)的MDP活化位點(diǎn)，導(dǎo)致原來羧基的再生。其他猝滅反應(yīng)的方法涉及加入20-50mM的Tris，賴氨酸，甘氨酸或乙醇胺。除了hCG外，別的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物如IL2對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是眾所周知的，也能用于這個目的。通過離心，洗脫以及在選擇的緩沖液中重懸可以實現(xiàn)分離。
實施例8本發(fā)明的組合物也能用作乳劑，在局部給藥時，可穿透皮膚。一種典型的局部施用組合物包括下列物質(zhì)2％的甘油山梨聚糖油硬脂酸酯(失水山梨醇脂481)，6％的聚乙氧基化脂肪酸(失水山梨醇脂989)，15％葵基油酸(碳酸二辛酯)，8％的支鏈?zhǔn)?異構(gòu)十六烷烴)，1％的微晶石蠟，1％的MDP，4％的甘油，0.7％的七水硫酸鎂，0.2％的山梨酸鈉鹽，1％的hCG，0.1％檸檬酸氫二銨，檸檬酸(調(diào)節(jié)pH到4-5)，加入去離子水至100％。
實施例9在開始研究前30天內(nèi)，根據(jù)Western blot證明的HIV感染的血清診斷，AIDS的定義標(biāo)準(zhǔn)，臨床癥狀和CD4淋巴細(xì)胞數(shù)小于300細(xì)胞/μL，將超過18歲的男性和沒有懷孕的女性選出來?；镜呐R床和試驗參數(shù)被用來評估效能。臨床參數(shù)包括機(jī)會感染的變化，體重的變化，胃腸功能的變化，包括大便稠度和頻率，能量水平的變化，胃口的變化，體力和耐力的變化，以及生活質(zhì)量的總體變化。實驗參數(shù)包括CD4和CD8淋巴細(xì)胞數(shù)目的變化，選擇性血液學(xué)，血液化學(xué)和尿分析，以及如果能得到的話，還包括病毒負(fù)載的變化，它可通過PCR來檢測病毒RNA。
研究結(jié)果表明，根據(jù)本發(fā)明的精神，通過施用hCG制劑，HIV陽性病人在臨床上有改善，機(jī)會感染降低，體重增加，腸胃功能有所變化，包括嚴(yán)重的腹瀉減少，能量水平增強(qiáng)，食欲增加，性欲增加，體力和耐力有所改善，以及生活質(zhì)量全面改善。實驗參數(shù)也得到改善，CD4和CD8淋巴細(xì)胞數(shù)增加，血液學(xué)，血液化學(xué)和尿分析的參數(shù)均有改善，此外，利用PCR檢測病毒RNA，發(fā)現(xiàn)病毒負(fù)載下降，以及通過TCID檢測，發(fā)現(xiàn)傳染力下降。HCG制劑給藥時，會產(chǎn)生一些小的不利反應(yīng)，僅限于小的發(fā)燒，寒顫，頭疼和肌肉疼。
實施例10具C3H背景(H2k/k，Harlan Sprague Dawley)的雌性小鼠可以用于這些研究。根據(jù)“實驗動物的護(hù)理和使用指南”(Guide for the care and useof laboratory animals)(DHHS，NIH)飼養(yǎng)動物，并隨意接受食物和水。腫瘤細(xì)胞株HOPE2在體外通過連續(xù)傳代被保持。在體外通過皮下注射150000通道細(xì)胞起始同源C3H小鼠的腫瘤。腫瘤每隔兩周通過兩種垂直方向進(jìn)行檢測。每一個治療組和一個沒接受治療的對照小組進(jìn)行比較。治療在HOPE2細(xì)胞接種后10天開始，這時，大多數(shù)腫瘤是可觸知的(大約50-75mm3)。通過給小鼠注射可溶性的hCG起始治療(通過皮下注射，總體積0.2mL)，而hCG蛋白在MDP混合物或明礬佐劑中。在接種前，hCG和MDP在Hanks平衡鹽溶液混合60秒，以使每只小鼠接受和人等量的hCG，即在0.2mL中有2000或5000IU的hCG蛋白。根據(jù)制造商提供的說明，將明礬(Pierce Chemical公司)和hCG混合，以便每只小鼠能接受在0.2mL中5000IU等量的hCG。在這個實施例中，在腫瘤細(xì)胞接種后41天，只有5/8或4/8注射了單次可溶性hCG(分別是2000IU或5000IU)的小鼠顯示可檢測的腫瘤。相比之下，所有注射有hCG的明礬的小鼠(8/8)均顯示活躍生長的腫瘤。此外，和對照(未治療的)或明礬處理組相比，只在注射有hCG的MDP的處理組中觀察到了腫瘤生長被顯著抑制。而在接受單次注射hCG的明礬的小鼠中沒有發(fā)現(xiàn)腫瘤生長抑制或腫瘤消退速率增加。
因此，本發(fā)明的特點(diǎn)在于含二聚體hCG和胞壁酰肽的藥用制劑。此外，本發(fā)明可被表征成一種治療用組合物，包括(a)治療有效量的與脂質(zhì)體結(jié)合的二聚體hCG；以及(b)在所述脂質(zhì)體周圍含有油的油包水的乳液，相對于hCG和脂質(zhì)體在所述乳液中不存在的情況，所述乳液的數(shù)量足以提高治療反應(yīng)。更進(jìn)一步，本發(fā)明提供了一種治療需要其的被試者中HIV感染的方法，包括給所述被試者施用有效量的hCG，所述hCG和油包水的乳液一起施用，相對于所述hCG在所述乳液不存在的情況，所述乳液存在的量足以增加臨床反應(yīng)。本發(fā)明還提供了一種治療需要其的被試者中癌癥的方法，包括給所述被試者施用有效量的hCG，所述hCG和油包水的乳液一起施用，并且相對于所述hCG在所述乳液中不存在的情形，所述乳液的量足以增加臨床反應(yīng)。本發(fā)明還進(jìn)一步提供了一種治療用組合物，它包含一種油包水的乳液，其具有一個連續(xù)的水相和一個不連續(xù)的油相及含有至少0.01％重量的二聚體hCG。本發(fā)明也提供了一種方法用于制備藥用制劑，所述方法包括供應(yīng)和混合含hCG的水懸浮液及至少一種油類成份和至少一種乳化劑，它們的數(shù)量足夠多，使得提供給所述制劑的是油包水的乳液。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療用組合物，它包含一種油包水的乳液和至少一種天然或重組的水溶性生物活性蛋白和任選的至少一種包壁酰肽。本發(fā)明也提供了一種試劑盒，用于藥物組合物的現(xiàn)場制備，所述的試劑盒包括1)第一個容器中含一種乳液，其中所述的乳液包括角鯊?fù)榛蚪酋徬?，失水山梨醇酯和一種水溶液，和2)第二個容器中含有治療有效量的二聚體hCG，它存在水溶液中或以粉末形式存在，其中每個容器中成分的濃度是有選擇的，這樣兩個容器中組分的組合會產(chǎn)生一種制劑，它含的所述失水山梨醇酯的量為1-30％，角鯊?fù)榛蚪酋徬┑牧繛?-30％，胞壁酰肽的量為0.0001-30％，而hCG的量為0.01-99％。
盡管本發(fā)明結(jié)合現(xiàn)被認(rèn)為是最有實踐意義和最優(yōu)選的實施方案已經(jīng)在上面具體而詳細(xì)地被充分描述了，但很明顯，對本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明闡述的原則和概念的情況下，可以對其進(jìn)行許多修飾。因此，只有通過附加的權(quán)利要求書最廣泛的解釋，本發(fā)明的合適范圍才能被確定，以致包括了所有這樣的修飾以及所有和說明書中描述的東西等同的關(guān)系。
權(quán)利要求
1.一種包含二聚體hCG和胞壁酰肽的藥用制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，它進(jìn)一步包含一種乳化劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，它進(jìn)一步包含一種表面活性劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，它進(jìn)一步包含一種油。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，它包含至少0.01％重量的二聚體hCG。
6.一種治療用組合物，包括(a)治療有效量的與脂質(zhì)體結(jié)合的二聚體hCG；以及(b)在所述脂質(zhì)體周圍含有油的水包油乳液，相對于hCG和脂質(zhì)體在所述乳液中不存在的情形，所述乳液存在的量足以增加治療反應(yīng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的組合物，其中所述的油是角鯊烯。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的組合物，其中所述的hCG含至少0.1％體積的所述油。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的組合物，其中所述組合物進(jìn)一步包含一個其他乳化劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物，其中所述的其他乳化劑選自山梨聚糖酯，聚氧乙烯山梨聚糖單，二或三酯，聚氧乙烯脂肪酸，聚氧乙烯脂肪酸醚及這些物質(zhì)的組合。
11.根據(jù)權(quán)利要求6所述的組合物，其中所述組合物進(jìn)一步包含一種佐劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的組合物，其中所述佐劑選自N-乙酰葡糖胺基-N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺(GMDP)，N-乙酰葡糖胺基(β-1，4)-N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰葡糖胺基-N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-谷氨酸(GMDP-A)，胞壁酰二肽磷脂酰乙醇胺，胞壁酰三肽磷脂酰乙醇胺，胞壁酰三肽磷脂酰乙醇胺，CGP11637(去甲-MDP)，α(N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺)，β，γ-二棕櫚酰-sn-甘油，α(N-乙酰-胞壁酰-D-丙氨酰-D-異谷氨酰胺)，β，γ-二棕櫚酰-sn-甘油，α(N-乙酰-胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺基-L-丙氨酸)，β，γ-二棕櫚酰-sn-甘油，α(N-乙酰-胞壁酰-D-丙氨酰-D-異谷氨酰胺基-L-丙氨酸)，β，γ-二棕櫚酰-sn-甘油，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺基-L-丙氨酸-2-(1，2-二棕櫚酰-sn-甘油-3-羥磷酰氧基)乙酰胺，葡糖胺基胞壁酰肽，murametide，murabutide，muradimetide，myramistin，N-乙酰胞壁酰-L-蘇氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-α-氨基丁基-D-異谷氨酰胺，6-O-硬脂酰-N-乙酰胞壁酰-L-α-氨基丁基-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-纈氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰-去甲基胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-谷氨酰胺丁基酯，N-乙酰胞壁酰-L-絲氨酰-D-異谷氨酰胺，N-丁基胞壁酰-L-α-氨基丁基-D-異谷氨酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-蘇氨酰-D-異谷氨酰胺，雙(6-O-胞壁酰二肽)O-棕櫚酰丙醇二酸，胞壁酰三肽磷脂酰乙醇胺，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺酰-L-丙氨酸-2-(1，2-二棕櫚酰-sn-甘油-3-(羥磷酰氧基))乙酰胺，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-谷氨酰胺丁基酯，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺酰-L-丙氨酸-2-1，2-二棕櫚酰-sn-甘油-3-(羥磷酰氧基)乙酰胺(MTP-PE)，膽固醇基-MDP，N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酰-D-異谷氨酰胺的β-丁基糖苷，2-乙酰氨基-4，6-二-O-乙酰-2-脫氧-3-O-[(R)-1-(甲氧羰基)乙基]-α-D-吡喃葡萄糖，(β-丁基-MDP，MTPO-26，β-膽固醇基-MDP)，皂苷(Taurosid I)，N-乙酰去甲胞壁酰-L-N-甲基丙酰-D-異谷氨酰胺辛酰胺，UDP-N-乙酰胞壁酰五肽，L4-MDP-ONB，L-丙氨酰-γ-D-谷氨酰-中-二氨基庚二酸，1，6-脫水胞壁酰二肽，N-乙酰葡糖胺基-β-1，4-N-乙酰胞壁酰五肽-焦磷酰-十一萜醇，3-O-[乙酰胞壁酰-D-異谷氨酰胺酰]-1，2-二棕櫚酰-sn-甘油，L-蘇氨酰-MDP-GDP，L-異蘇氨酰-MDP-GDP，海藻糖6，6-二酯，胞壁酰二肽，B30胞壁酰二肽和胞壁酰二肽-賴氨酸。
13.一種治療需要其的被試者中HIV感染的方法，包括給所述被試者施用有效量的hCG，所述hCG和油包水的乳液一起施用，以及相對于所述hCG在所述乳液中缺乏的情形，所述乳液存在的量足以增加臨床反應(yīng)。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述的乳液進(jìn)一步包含有效量的胞壁酰肽，其施用量是1-500μg/kg被試者體重。
15.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述的hCG與脂質(zhì)體結(jié)合而得以提供。
16.一種治療需要其的被試者中癌癥的方法，包括給所述被試者施用有效量的hCG，所述hCG和水包油的乳液一起施用，以及相對于所述hCG在所述乳液中缺乏的情形，所述乳液存在的量足以增加臨床反應(yīng)。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述的乳液進(jìn)一步包含有效量的胞壁酰肽，其施用量是1-500μg/kg被試者體重。
18.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述的hCG與脂質(zhì)體結(jié)合而得以提供。
19.根據(jù)權(quán)利要求16所述的方法，其中所述的hCG可以通過靜脈內(nèi)，腹膜內(nèi)，鞘內(nèi)，肌內(nèi)，皮下，皮內(nèi)，含服，口服，鼻內(nèi)，眼內(nèi)或局部給藥。
20.一種治療用組合物，它包含一種水包油的乳液，所述乳液具有一個連續(xù)的水相和一個不連續(xù)的油相并含有至少0.01％重量的二聚體hCG。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物，其進(jìn)一步包括治療有效量的胞壁酰肽。
22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物，其中所述油相包括礦物油，角鯊烯，花生油，植物油或硅酮油。
23.根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物，其中所述的乳液包含表面活性劑，所述表面活性劑選自山梨聚糖酯，聚氧乙烯山梨聚糖單、二或三酯，聚氧乙烯脂肪酸，聚氧乙烯脂肪酸醚及這些物質(zhì)的組合。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的組合物，其中所述的表面活性劑包括聚山梨酸酯(“Tween”或山梨聚糖單油酸酯)，十二烷基硫酸鈉(SDS)，聚乙氧基化蓖麻油(“CREMOPHOR”)，NP-40，二甲基雙十八烷基溴化銨(DDA)，線性聚氧丙烯一聚氧乙烯(POP-POE)嵌段多聚體，泊洛沙姆401，普流羅尼L62LF，普流羅尼L101，普流羅尼L64，PEG1000，特強(qiáng)尼1501，特強(qiáng)尼150R1，特強(qiáng)尼701，特強(qiáng)尼901，特強(qiáng)尼1301，Atmos 300，Tween 20，Tween 40，Tween 60，Tween 80和特強(qiáng)尼130R1，失水山梨醇酯A，失水山梨醇酯80或Span 80和二縮甘露醇單油酸。
25.根據(jù)權(quán)利要求20所述的組合物，其中水相是水本身，磷酸鹽緩沖液，鹽水，林格氏溶液或它們的組合。
26.一種制備藥用制劑的方法，所述方法包括供應(yīng)和混合含hCG的水懸浮液及至少一種油類成份和至少一種乳化劑，其數(shù)量足以給所述制劑提供水包油的乳液。
27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，它進(jìn)一步包括把治療有效量的胞壁酰肽添加入水包油的乳液中。
28.一種治療用組合物，它包括一種水包油的乳液和至少一種天然或重組的水溶性生物活性的蛋白以及任選至少一種胞壁酰肽。
29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的治療用組合物，其中所述生物活性的蛋白選自促生長素，人生長激素(HGH)，牛生長激素(BGH或BST)，豬生長激素(PGH或PST)，表皮生長因子(FGF)，α干擾素，α-2a干擾素，α-2b干擾素，α-N1干擾素，α-N3干擾素，β干擾素，β-1 a1干擾素；β-1b干擾素，γ-1a干擾素，γ-1b干擾素，ω干擾素，τ干擾素，白細(xì)胞介素-1，白細(xì)胞介素-1α，白細(xì)胞介素-1β，白細(xì)胞介素-10，白細(xì)胞介素-11，白細(xì)胞介素-12，白細(xì)胞介素-12，白細(xì)胞介素-15，白細(xì)胞介素-2，白細(xì)胞介素-3，白細(xì)胞介素-4，白細(xì)胞介素-5，白細(xì)胞介素-7，白細(xì)胞介素-8，促紅細(xì)胞生成素(EPO)，甲狀旁腺激素(PTH)，含硒蛋白質(zhì)P，半胱氨酸蛋白酶抑制劑B，內(nèi)毒素中和蛋白，巨核細(xì)胞刺激因子(MGDF)，粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)，細(xì)胞因子合成抑制因子(CSIF)，genofibrate，α降鈣素，β降鈣素，腫瘤壞死因子(TNF)，淋巴細(xì)胞遷移抑制因子(LIF)，腫瘤侵入抑制因子，反作用調(diào)節(jié)蛋白(TAT’s)，蛋白酶抑制劑，BPC 157，降脂激素，胰島素，胰高血糖素，胃泌素，血管緊張素，胰泌素，催乳激素，促甲狀腺素，促黑激素，促黃體素(LH)，促卵泡激素(FSH)，促甲狀腺素(TSH)，血小板生成素(TPO)，促黃體素生成激素，人絕經(jīng)期促性腺激素，血管升壓素，催產(chǎn)素，普羅瑞林，促腎上腺皮質(zhì)激素，SOD，尿激酶，溶菌酶，G-CSF，M-CSF，LIF，抑制素A，抑制素B，活化素A，活化素B，NAP-1，MCP-1，MIP-1α，MIP-1β，MIP-2，SISβ，SISδ，SISε，PF4，PBP，γIP-10，MGSA，aFGF，bFGF，KJF，PDGF-A，PDGF-B，PD-ECGF，INS，IGF-I，IGF-II，NGF-β，GRO/MGSA，PF4，PBP/CTAP/βTG，IP-10，KC，9E3，MCP-1/MCAF，MCAF，ACT-2/PAT744/G26，LD-78/PAT 464，RANTES，G26，I309，JE，TCA3，B7.1，B7.2，ICAM-1，ICAM-2，LFA-1，LFA-3，CD72，CTAPIII，ENA-78，GRO，I-309，PF-4，LD-78，嗜酸性粒細(xì)胞衍生的神經(jīng)毒素(EDN)，抗腫瘤的尿蛋白(ANUP)，核糖核酸酶和血管抑素和它們的類似物和變體。
30.根據(jù)權(quán)利要求28所述的治療用組合物，其中生物活性蛋白選自表1所列的那些蛋白。
31.一種用于現(xiàn)場制備藥物組合物的試劑盒，所述的試劑盒包括1)第一個容器中含一種乳液，其中所述的乳液包括角鯊?fù)榛蚪酋徬?，失水山梨醇酯和一種水溶液，和2)第二個容器中含有治療有效量的二聚體hCG，它以水溶液或粉末的形式存在，其中每個容器中的成分濃度是有選擇的，這樣兩個容器中成分的組合會產(chǎn)生一種制劑，它含的所述失水山梨醇酯的量為1-30％，角鯊?fù)榛蚪酋徬┑牧繛?-30％，胞壁酰肽的量為0.0001-30％，而hCG的量為0.01-99％。
32.權(quán)利要求31所述的試劑盒，其進(jìn)一步包含治療有效量的胞壁酰肽，它可以加入第一個或第二個容器中。
33.權(quán)利要求31所述的試劑盒，其進(jìn)一步包含治療有效量的胞壁酰肽，它密封在一個單獨(dú)的容器中。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藥物組合物，它包括具生物活性的蛋白或肽，蛋白或肽配制于帶或不帶胞壁酰肽的油包水乳液中。更具體地說，它涉及的是人絨膜促性腺激素及相關(guān)激素的制品。此外也提供了這種組合物的制備方法及該組合物在抗病毒感染，免疫紊亂和癌癥上的使用方法。
文檔編號A61K47/14GK1512890SQ02810936
公開日2004年7月14日 申請日期2002年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月25日
發(fā)明者埃爾南·F·阿塞韋多, 埃爾南 F 阿塞韋多 申請人:開米卡公司