溶液(含（2.1~3.9) X l(T3g/ml葡萄糖，（1.1~3.2) X 10一4g/m乙二胺四醋酸-2鈉及（1.3~2.2) X l(T4g/m穩(wěn)定劑），該介質(zhì)溶液位于凝膠上，添加 量正好填滿試管1。
[0027]輸血者的血清和受血者的紅細(xì)胞，作為主側(cè)管，分別通過(guò)組合器頂部?jī)蓚€(gè)進(jìn)液口 分別加入，搖晃。
[0028] 受血者的血清和輸血者紅細(xì)胞，作為次測(cè)管，分別通過(guò)又一組合器頂部?jī)蓚€(gè)進(jìn)液 口分別加入，搖晃。
[0029] 將含抗D血清、氯化鈉及穩(wěn)定劑的溶液作為對(duì)照組，加入到又一組合器試管內(nèi)。
[0030] 將組合器底部出液口和球囊連接的管路打開(kāi)，出液口連接負(fù)壓裝置，靜置lmin后， 記錄觀察結(jié)果。
[0031] 以上操作均應(yīng)該在凝膠化凍前操作完畢，必要時(shí)，可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行拍照。該凝膠在 凝固狀態(tài)下，具有適于紅細(xì)胞大小的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)組織，在負(fù)壓吸附作用下，血液通過(guò)過(guò)程中與 抗體反應(yīng)，根據(jù)分子、細(xì)胞大小，在其中通過(guò)的速率不同，凝結(jié)后的紅細(xì)胞、單細(xì)胞和血清形 成特有分布;根據(jù)之前做好的對(duì)照組圖像，可以得到準(zhǔn)確的分析，無(wú)需再加入洗脫液等操 作，操作更加方便快捷。本發(fā)明所提供的一次性輸血交叉配血實(shí)驗(yàn)組合器可以同時(shí)進(jìn)行兩 人份以上供血者血液與受血者之間的血液交叉配血實(shí)驗(yàn)。
[0032] 在進(jìn)一步的實(shí)施過(guò)程中，為確定是否存在溶血現(xiàn)象，在本發(fā)明實(shí)施例中，將組合器 置于35~45°C水浴下解凍后，保持球囊垂直，收集球囊內(nèi)的液體進(jìn)行溶血分析。即： 1、 制備高鐵血紅蛋白濃度的高鐵血紅蛋白之間呈效量關(guān)系的比色卡： 2、 將球囊內(nèi)的液體涂覆在比色卡上，陰干后，對(duì)比分析得到溶血結(jié)果。
[0033] 在本發(fā)明實(shí)施例中，比色卡應(yīng)當(dāng)提前制備。具體為： A、用不同濃度的亞硝酸鹽溶液分別作用多份不同組織來(lái)源的一級(jí)血液樣本，繪制亞硝 酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖； 采集50名健康人的靜脈血液樣本，定義該靜脈血液樣本為一級(jí)血液樣本，并編號(hào)1~50 號(hào)；將不同摩爾濃度的亞硝酸鹽溶液分別作用一級(jí)血液樣本1~5 0號(hào)，其中，亞硝酸鹽溶液 的摩爾濃度與高鐵血紅蛋白血濃度的關(guān)系用函數(shù)定義為:Y=1.2876+24.80X，r=0.995(P〈 0.001);其中，X代表亞硝酸鹽溶液的摩爾濃度;Y代表高鐵血紅蛋白血濃度。繪制亞硝酸鹽 與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖，如圖2所示，圖2為亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成 率間的效量關(guān)系圖。
[0034]其中，制作尚鐵血紅蛋白生成率間的效量關(guān)系圖的根據(jù)如下表1所不： 表1
(注：此處邁用到的統(tǒng)計(jì)字萬(wàn)'/云為稱準(zhǔn)差） Β、根據(jù)所述效量關(guān)系圖，將上述一級(jí)血液樣本配置成具有不同高鐵血紅蛋白濃度的二 級(jí)血液樣本； 二級(jí)血液樣本中高鐵血紅蛋白濃度包括:包括正常組、5%~80%百分比濃度，其中，所述 5%~80%百分比濃度之間的濃度間隔為5%，亦即分為17組。正常組為健康人的血液樣本，作 為對(duì)照組。
[0035] C、將所述二級(jí)血液樣本分別滴于空白采血卡上，晾干5~15s后掃描后用繪圖軟件 測(cè)定高鐵血紅蛋白的R、G、B值，將具有相同高鐵血紅蛋白濃度的R值、G值以及B值分別求和 算均值得到R均值、G均值以及B均值； 更具體的，晾干的時(shí)間為l〇s，晾干后通過(guò)圖片掃描儀掃描后，得到掃描圖片，通過(guò) Photoshop或CorelDRAW繪圖軟件分析掃描圖片，測(cè)定高鐵血紅蛋白的R、G、B值。
[0036] D、將所述R均值、G均值以及B均值用繪圖軟件整合并繪制出不同高鐵血紅蛋白濃 度的高鐵血紅蛋白比色卡，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后，打印比色卡。
[0037] 更具體的，將所述二級(jí)血液樣本分別滴于空白采血卡上，晾干5~15s后，高分辨率 掃描儀掃描到計(jì)算機(jī)上，后用Photoshop或CorelDRAW繪圖軟件繪圖軟件測(cè)定具有相同高鐵 血紅蛋白濃度二級(jí)血樣的R、G、B值，將具有相同高鐵血紅蛋白濃度二級(jí)血樣R值、G值以及B 值分別求和后，在求其算數(shù)平均值，這個(gè)平均值輸入到這兩個(gè)任意一個(gè)軟件中，就可得出不 同濃度高鐵血紅蛋白的RGB值。
[0038] 本發(fā)明通過(guò)球囊采集到解凍后凝膠中的血液，可進(jìn)一步做溶血分析，凝膠中的亞 硝酸鈉結(jié)合溶血紅細(xì)胞釋放出的高鐵血紅蛋白結(jié)合，通過(guò)將液體涂覆在比色卡上，陰干后， 對(duì)比分析得到溶血結(jié)果，結(jié)果準(zhǔn)確。
[0039] 以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和 原則之內(nèi)所作的任何修該、等同替換和該進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種輸血交叉配血用凝膠，其特征在于，該凝膠包括以下各組分： 透明質(zhì)酸鈉凝膠0. 1~0. 2g/ml; 對(duì)烴基苯甲酸甲酯（3.1~4.9)X10_4g/ml; 氯化鈉（2.6~4.3)X10-4g/ml; 亞硝酸鈉（1.5~2.0)X10-3g/ml; 葡萄糖（5.5~7·0)Χ10-3g/ml; 乙二胺四醋酸-2鈉（6.5~7.0) X10-4g/ml; 抗人血液免疫球蛋白抗體10~20U/mL; 磷酸二氫鉀（8.4~9.5)X10-4g/ml; 磷酸氫二鈉（1.5~2.0) X10-4g/ml; 凝膠pH值為6.6~6.8。2. 如權(quán)利要求1所述的輸血交叉配血用凝膠，其特征在于，所述抗人血液免疫球蛋白抗 體包括抗人IgG抗體、抗人IgM抗體、抗人IgA抗體、抗人IgD抗體和抗人IgE抗體。3. 權(quán)利要求1或2所述的輸血交叉配血用凝膠的制備方法，其特征在于，該方法包括以 下步驟： (1) 將100~200g透明質(zhì)酸鈉凝膠、0.31~0.49g對(duì)烴基苯甲酸甲酯、0.26~0.43g氯化鈉、 1.5~2.0g亞硝酸鈉、5.5~7.0g葡萄糖、0.65~0.70g乙二胺四醋酸-2鈉、100~200U抗人血液 免疫球蛋白抗體、〇. 84~0.95g磷酸二氫鉀、0.15~0.20g磷酸氫二鈉混合，加蒸餾水定容，調(diào) 節(jié)pH值為6.6~6.8; (2) 將定容后的混合液在真空、35~45°C下攪拌，取出置于0環(huán)境下裝入定型容器中定 型冷藏。4. 一種一次性輸血交叉配血實(shí)驗(yàn)組合器，其特征在于，該組合器為權(quán)利要求3所述的定 型容器，所述定型容器為透明塑料小試管，該試管底部分別通過(guò)管路連接球囊以及出液口， 且該試管頂部分別通過(guò)管路連接兩個(gè)進(jìn)液口。5. -種輸血交叉配血檢驗(yàn)方法，其特征在于，該檢驗(yàn)方法包括以下步驟： (1) 將權(quán)利要求4所述組合器的底部出液口和球囊連接的管路封閉；將權(quán)利要求1或2所 述的凝膠在液體狀態(tài)時(shí)通過(guò)組合器頂部進(jìn)液口加入，凝膠添加量為試管體積的1/3~2/3; (2) 將添加完凝膠的組合器置于0下迅速冷結(jié)后，通過(guò)進(jìn)液口加入低離子介質(zhì)溶液，該 介質(zhì)溶液位于凝膠上；將輸血者的血清和受血者的紅細(xì)胞，或者受血者的血清和輸血者紅 細(xì)胞通過(guò)組合器頂部?jī)蓚€(gè)進(jìn)液口分別加入，搖晃； (3) 將組合器底部出液口和球囊連接的管路打開(kāi)，出液口連接負(fù)壓裝置，靜置lmin后， 記錄觀察結(jié)果;將組合器置于35~45°C水浴下解凍后，保持球囊垂直，收集球囊內(nèi)的液體進(jìn) 行溶血分析。6. 如權(quán)利要求5所述的輸血交叉配血檢驗(yàn)方法，其特征在于，在步驟(3)中，所述溶血分 析具體包括以下步驟： A、 制備高鐵血紅蛋白濃度的高鐵血紅蛋白之間呈效量關(guān)系的比色卡： B、 將球囊內(nèi)的液體涂覆在比色卡上，陰干后，對(duì)比分析得到溶血結(jié)果。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種輸血交叉配血用凝膠、制備方法及實(shí)驗(yàn)組合器，本發(fā)明通過(guò)將100~200g透明質(zhì)酸鈉凝膠、0.31~0.49g對(duì)烴基苯甲酸甲酯、0.26~0.43g氯化鈉、1.5~2.0g亞硝酸鈉、5.5~7.0g葡萄糖、0.65~0.70g乙二胺四醋酸-2鈉、100~200U抗人血液免疫球蛋白抗體、0.84~0.95g磷酸二氫鉀、0.15~0.20g磷酸氫二鈉混合，加蒸餾水定容，調(diào)節(jié)pH值為6.6~6.8；將定容后的混合液在真空、35~45℃下攪拌，取出置于0°環(huán)境下裝入實(shí)驗(yàn)組合器中定型冷藏得到凝膠。本發(fā)明輸血交叉配血操作更加方便快捷，結(jié)果準(zhǔn)確可靠；且可同時(shí)進(jìn)行兩人份以上供血者血液與受血者之間的血液交叉配血實(shí)驗(yàn)，效率更高。
【IPC分類】G01N33/80
【公開(kāi)號(hào)】CN105548581
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510877627
【發(fā)明人】何智, 寧尼亞, 李記超
【申請(qǐng)人】漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校
【公開(kāi)日】2016年5月4日
【申請(qǐng)日】2015年12月4日