一種原魯烷型倍半萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從烏藥的干燥塊根中分離得到的一種具有內(nèi) 皮細胞保護作用的原魯烷型倍半萜類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 烏藥為棒科（Lauraceae)山胡椒屬（Lindera)植物烏藥（Lindera aggregata(Sims)Kosterm.)的干燥塊根。全年均可采挖，除去細根，洗凈，趁鮮切片，曬干， 或直接曬干。主產(chǎn)于浙江、安徽、湖南、廣東、廣西等地。烏藥作為中國傳統(tǒng)中藥具有行氣止 痛，溫腎散寒的作用。主治胸脅滿悶、脘腹脹痛、頭痛、寒疝疼痛、痛經(jīng)及產(chǎn)后腹痛、尿頻、遺 尿等證。
[0003] 烏藥的化學(xué)成分種類較多，目前報道的主要成分有揮發(fā)油、異喹啉生物堿、倍半萜 及其內(nèi)酯、黃銅類等成分。烏藥的根、葉、果皮及種子中均含有揮發(fā)油，其主要成分多為常見 的單萜和倍半萜類化合物。烏藥所含的生物堿以異喹啉型生物堿為主。烏藥中報道最多的 成分是呋喃倍半萜及其內(nèi)酯，并且該類成分是烏藥的特征性成分，具有較強的專屬性，2010 版中國藥典中規(guī)定以烏藥醚內(nèi)酯作為烏藥含量測定的指標(biāo)性成分。
[0004] 烏藥的化學(xué)成分復(fù)雜，藥理作用廣，具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗病毒、抑菌、抗氧化、抗疲勞、 調(diào)節(jié)消化道、松弛內(nèi)臟平滑肌、改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能、調(diào)理婦科病癥等藥理作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從烏藥的干燥塊根中分離得到的一種具有內(nèi)皮細胞保 護作用的原魯烷型倍半萜類化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：(a)將烏藥的干燥塊根粉 碎，用80~90 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟 (a)中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用75%乙醇洗 脫10個柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟（b)中 75 %乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、55:1、25:1、10:1和1:1的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用 體積比為15:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分 2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫， 收集8~10個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0010] 進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0011] 進一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為85 %。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的 載體。
[0013] 所述的化合物（I)在制備內(nèi)皮細胞保護的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備內(nèi)皮細胞保護的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物（I)理論E⑶值與實驗E⑶值比較。
【具體實施方式】
[0020] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0021] 實施例1 :化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0022] 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023] 制備方法：（a)將烏藥的干燥塊根（8kg)粉碎，用85%乙醇熱回流提?。?5LX3 次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和 水飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（345g)和正 丁醇萃取物；(b)步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫 6個柱體積，再用75 %乙醇洗脫10個柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇 洗脫物浸膏（133g) ;(c)步驟（b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為 85:1 (8個柱體積）、55:1 (8個柱體積）、25:U6個柱體積）、10:1 (8個柱體積）和1:1 (5個 柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（c)中組分4 (27g)用正相硅 膠進一步分離，依次用體積比為15:1 (8個柱體積）、10:1 (10個柱體積）和5:U6個柱體 積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2 (13g)用十八烷基硅 烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-10個柱體 積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)(32mg)。
[0024] 結(jié)構(gòu)確證：無色油狀物；HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z287. 1314,結(jié)合核磁特 征可得分子式為(：15氏。04,不飽和度為6。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)SH(ppm，DMS0-d6,500MHz): H-1 (1. 46,ddd，J= 8. 3,10. 3,10. 3)，H-1 (1. 92,m)，H-2 (1. 58,m)，H-2 (1. 64,dddd，J= 9· 0,10. 3,11. 3,11. 3)，H-2a(2. 45,dd，J= 9· 3,11. 3)，H-4a(3. 86,dd，J= 4· 0,10. 8)， H-5(L55,ddd，J= 3. 4,10. 8,12. 2)，Η-5(2· 01，br，dd，J= 4. 0,12. 2)，H-8(L01，s)， H-9(l. 19,s)，H-10(3. 40,d，J= 6. 5)，H-10(3. 48,dd，J= 3. 4,6. 5)，H-11(0. 91，s);核磁 共振碳譜數(shù)據(jù)δc (ppm，DMS0-d6,125MHz) :28. 2 (CH2,1-C)，21. 5 (CH2, 2-C)，59. 1 (CH，2a-C)， 76. 4(C，3-C)，211. 4(C，4-C)，47. 6(CH，4a-C)，30. 7(CH2,5-C)，52. 8(C，6-C)，205. 6(C， 7-C)，116. 8 (C，7a-C)，42. 4 (C，7b-C)，19. 3 (CH3, 8-C)，18. 7 (CH3, 9-C)，76. 3 (CH2,10-C)， 21.7(CH3，11-C);碳原子標(biāo)記參見圖1。該化合物在204nm處有最大紫外吸收。i-NMR譜 表明三個甲基信號[SHO. 91(s，H-ll)，1.01(s，H-8)和1. 19(s，H-9)]，一個含氧亞甲基信 號[δH3. 40(d，J= 6. 5Hz，H-10)，3. 48(dd，J= 3· 4,6· 5Hz，H-10)]。13CNMR譜顯示 15 個 碳信號，包括三個甲基，四個亞甲基（一個含氧亞甲基），兩個次甲基，以及六個季碳（兩個 羰基季碳，兩個含氧季碳）。根據(jù)核磁數(shù)據(jù)可知C-3(δC76. 4)位連有一個羥基，且為β構(gòu) 型。HMBC譜中，單甲基信號Me-9與亞甲基C-5,季碳C-6,含氧亞甲基C-10和羰基C-7的 相關(guān)性表明C-6位連有一個甲基。通過H