一種貝殼杉烷型二萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術領域，具體涉及從芫花的干燥花蕾中分離得到的一種貝殼杉 烷型二萜類化合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 芫花又稱紫芫花、南芫花、頭痛花、藥魚草等，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為下品，為 傳統(tǒng)的峻下逐水藥?！侗静菥V目》列入毒草類，按《吳普本草》謂芫花"二月生青葉，加厚則 黑，花有紫、赤、白者，三月實落盡，葉乃生。"韓保昇《蜀本草》謂"近道處處有之，苗高二三 尺。葉似白前及柳葉，根皮黃似桑根，正月二月花發(fā)，紫碧色，葉未生時收。"結合《本草圖 經(jīng)》"安徽滁州芫花"和"四川錦州芫花"附圖看，古今藥用芫花品種一致，其原植物均為 Daphnegenkwasieb.Etzucc.無疑。《中國藥典》2010版收載其為瑞香科（Thymelaeaceae) 瑞香屬（Daphne)植物芫花（Daphnegenkwasiebetzucc)的干燥花蕾。謝宗萬曾對芫花 進行了本草學考證，確證了歷代本草中所記載的芫花應該為紫芫花Daphnegenkwasieb. Etzucc的干燥花蕾。該植物為全國大多數(shù)地區(qū)臨床習用的品種，其野生主要產(chǎn)于河南、山 東、江蘇、安徽、四川等省，河南省主要分布在信陽、南陽等地的山區(qū)。
[0003] 到目前為止，從芫花的花、花蕾、葉、枝條、根中提取分離出化合物有70多種，其中 含有黃酮類成分、二萜原酸酯類成分、香豆素類成分、綠原酸類成分、木脂素類成分、酚苷類 等多種成分。
[0004] 芫花為傳統(tǒng)的峻下逐水藥，有毒，功能瀉水逐飲，解毒殺蟲，現(xiàn)代研究表明其具有 以下藥理作用：①利尿作用；②鎮(zhèn)咳祛痰作用；③殺蟲、抗寄生蟲作用；④引產(chǎn)作用；⑤抗 炎、抗腫瘤作用；⑥免疫調節(jié)作用。

【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從芫花的干燥花蕾中分離得到的一種貝殼杉烷型二萜 類化合物，含其的藥物組合物及其制備方法和應用。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術方案得以實現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結構式的化合物（I ):
[0008]
[0009]所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：(a)將芫花的干燥花蕾粉 碎，用70~80 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟 (a)中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇洗脫 8個柱體積，收集70 %洗脫液，減壓濃縮得70 %乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟（b)中70 %乙醇 洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為50:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯 度洗脫得到4個組分；（d)步驟（c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為8:1、 5:1和2:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2用十八烷基硅 烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱 體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0010] 進一步地，步驟（a)中，用75%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0011] 進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學上可接受的 載體。
[0013] 所述的化合物（I)在制備治療腎癌的藥物中的應用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備治療腎癌的藥物中的應用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物（I)結構式；
[0019] 圖2為化合物（I)計算E⑶和實驗E⑶圖。
【具體實施方式】
[0020] 下面結合實施例進一步說明本發(fā)明的實質性內容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對 本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的實質和范圍。
[0021] 主要材料、試劑來源及儀器類型：
[0022] 乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學試劑有限 公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學試劑有限公司。
[0023] 實施例1:化合物（I)分離制備及結構確證
[0024](a)將芫花的干燥花蕾（8kg)粉碎，用75%乙醇熱回流提?。?0LX3次），合并提 取液，濃縮至無醇味（6L)，依次用石油醚（6LX3次）、乙酸乙酯（6LX3次）和水飽和的正 丁醇（6LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（375g)和正丁醇萃取物； (b) 步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個柱體積，再 用70%乙醇洗脫8個柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物（129g); (c) 步驟（b)中70%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為50:1 (8個柱體積）、 30:1 (8個柱體積）、15:1 (8個柱體積）和5:1 (10個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫 得到4個組分；（d)步驟（c)中組分4(27g)用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為8:1(8 個柱體積）、5:1 (10個柱體積）和2:1 (8個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個 組分；（e)步驟（d)中組分2 (15g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度 為70%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化 合物（I) (138mg)。
[0025] 結構確證：HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z399. 1414,結合核磁特征可得分子式為 C20H2407，不飽和度為 9。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ΡΡπι，DMS0-d6,500MHz) :H-1(5.91，dd，J= 11. 9, 5. 8)，H-2 (2. 89,m)，H-2 (2. 67,m)，H-5 (2. 84,br，s)，H-6 (5. 95,br，s)，H-9 (2. 89,d， J= 3. 6)，21，m)，H-12(2. 21，m)，H-12(l. 99,m)，H-13(2. 64,m)，H-14(3. 69,d，J =10. 8)，H-14 (3. 05,dd，J= 10. 8,4. 0)，H-17 (1. 43,s)，H-18 (1. 24,s)，H-19 (1. 22,s)， H-20 (4. 55,d，J= 8. 8)，H-20 (4. 57,d，J= 8. 8);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)δc (ppm，DMS0-d6， 125MHz) :76. 7 (CH，1-C)，39. 8 (CH2, 2-C)，217. 1 (C，3-C)，37. 3 (C，4-C)，54. 9 (CH，5-C)， 101. 5 (CH，6-C)，171. 4 (C，7-C)，56. 4 (C，8-C)，49. 8 (CH，9-C)，48. 9 (C，10-C)，74. 7 (CH， 11-C)，33. 5(CH2,12-C)，40. 5(CH，13-C)，32. 6(CH2,14-C)，211. 8(C，15-C)，77. 7(C，16-C)， 19. 9 (CH3,17-C)，29. 1 (CH3,18-C)，15. 8 (CH3,19-C)，73. 4 (CH2, 20-C);碳原子標記參見圖 1。 IR光譜表明該化合物含有羥基（3432cm3和羰基（1760和1708cm3基團。13CNMR和DEPT 譜顯示該化合物含有三個甲基，四個亞甲基（一個含氧亞甲基），六個次甲基（四個含氧）， 七個季碳（一個含氧碳，兩個酮羰基碳以及一個內酯羰基碳）。核磁數(shù)據(jù)表明，該化合物 為6, 7-開環(huán)-對應-貝殼杉烷型-1，8-內酯二萜結構。HMBC譜中Η2-14(δH3. 69,d，J= 10. 8Hz和 3· 05,dd，J= 10. 8,4. 0Hz)，H-13 (δΗ2· 64,m)，H2-12 (δΗ2· 21，m和 1· 99,m)和 Me-17 (δHI. 43,s)與含氧季碳C-16 (δC7