本發(fā)明涉及酸漿果實(shí)中多糖的提取及其制備方法，屬于茄科食品加工技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

隨著人們生活壓力日益增大，加之缺乏鍛煉以及飲食結(jié)構(gòu)的不合理，造成了我國(guó)血脂血壓異常患病人數(shù)高達(dá)1.9億這一不良健康現(xiàn)狀，且其呈遞增趨勢(shì)。酸漿果實(shí)，富含多糖、維生素及酸漿果紅素等成分，作為一種具有降血脂、降血壓、止咳抑菌等功效的茄科食品在我國(guó)深受歡迎，尤其是東北地區(qū)。

本方法利用單因素試驗(yàn)與響應(yīng)面優(yōu)化法探究酸漿果實(shí)中多糖提取的微波輔助法及其最佳工藝條件，液固比、微波功率、微波時(shí)間對(duì)多糖提取率的影響程度及影響次序，對(duì)酸漿果實(shí)中多糖的提取方法與加工工藝進(jìn)一步改善，并提高酸漿果實(shí)的利用率與附加值，促進(jìn)酸漿類食品的產(chǎn)業(yè)鏈發(fā)展。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提高酸漿果實(shí)的利用率與附加值，促進(jìn)酸漿類食品的產(chǎn)業(yè)鏈發(fā)展，提供高效率的微波輔助提取多糖法及其制備方法。此發(fā)明在傳統(tǒng)的多糖提取方法的基礎(chǔ)上進(jìn)一步創(chuàng)新，通過(guò)微波輔助的提取方法,經(jīng)過(guò)果實(shí)破碎，配置液固比，微波提取，離心，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，脫色，多糖溶液，稀釋，比色等步驟提取出具有利尿、降血壓、降血脂、止咳等功效的多糖。

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：酸漿果實(shí)中多糖的提取及其制備方法，包括以下步驟：酸漿果實(shí)用破壁機(jī)破碎；加入去離子水將液固比配置成13(ml/g)；微波提取，時(shí)間15min，功率576w；4℃，8000r/min下離心20min；55℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)；ph值8-9，55℃下脫色1h；多糖溶液稀釋；在490nm下進(jìn)行比色處理。

本發(fā)明優(yōu)化了酸漿果實(shí)中多糖的微波輔助提取法，首先利用單因素試驗(yàn)，通過(guò)多糖提取率確定最佳微波時(shí)間，微波功率與提取率分別為12min,500w,10(ml/g)。在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，確定box-behnken試驗(yàn)的因素與水平。以多糖提取率為指標(biāo)，通過(guò)designexpert8.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，建立各因素與響應(yīng)值的回歸方程，通過(guò)探索響應(yīng)面來(lái)估計(jì)整個(gè)多分量系統(tǒng)的性質(zhì)，得出微波輔助提取多糖的最佳工藝條件。

利用designexpert8.0中box-behnken中optimizationchoises的numericaloptimization對(duì)酸漿的多糖提取率進(jìn)行最優(yōu)化設(shè)計(jì)，得出微波輔助提取法的最佳工藝參數(shù)為：微波時(shí)間15min，液固比13(ml/g)，微波功率576w，此時(shí)提取率可達(dá)10.12％。

附圖說(shuō)明

圖1加工工藝流程圖；

圖2葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線；

圖3微波時(shí)間，微波功率，液固比對(duì)多糖提取率的影響圖；

圖4響應(yīng)面優(yōu)化實(shí)驗(yàn)圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的說(shuō)明，但并不局限于此，凡是對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍中。

一.實(shí)驗(yàn)流程

1.酸漿果實(shí)選擇

選擇新鮮成熟、色澤濃郁的酸漿果實(shí)，清雜晾干。

2.破碎

使用破壁機(jī)進(jìn)行打碎，得到果漿，稱量備用。

3.加水

各組試驗(yàn)加入不同體積的去離子水，分別配置成液固比為5ml/g，10ml/g，15ml/g，20ml/g，25ml/g的試驗(yàn)組別。

4.微波提取

取上述加水果漿置于微波爐中分別在75w，225w，375w，525w，750w微波功率下進(jìn)行加熱提取，分別經(jīng)5min，10min，15min，20min，25min后取出。

5.冷凍離心

取上述加熱冷卻至室溫的提取混合物，倒入離心管里于冷凍離心機(jī)進(jìn)行離心處理，操作條件采用4℃，8000轉(zhuǎn)/min，20min。

6.旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)

經(jīng)離心后可除去固體不溶物，得到的多糖溶液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮，操作條件采用55℃。

7.過(guò)氧化氫脫色

脫色工藝為用氨水調(diào)節(jié)濃縮后的多糖溶液，使其ph值8-9，然后加入多糖溶液體積20％的過(guò)氧化氫溶液，55℃下脫色1h。

8.溶液稀釋

脫色處理的后的多糖溶液取1ml進(jìn)行稀釋，使其多糖含量適當(dāng)，從而提高苯酚-硫酸法測(cè)多糖的準(zhǔn)確度。

9.比色

采用苯酚-硫酸法測(cè)多糖，在490nm下，采用紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行比色處理。

二.單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

探究微波時(shí)間，微波功率，液固比對(duì)多糖提取率的影響。具體設(shè)計(jì)見表1。

表1單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)

分別取一定重量的酸漿漿液按照液固比(5-25ml/g)、微波功率(75-750w)、微波時(shí)間(5-25min)進(jìn)行配比，然后按照上述流程進(jìn)行操作，計(jì)算多糖得率。應(yīng)用苯酚-硫酸法測(cè)定多糖的含量。葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，以葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖2所示。

1.液固比的單因素實(shí)驗(yàn)

稱取酸漿果實(shí)15g進(jìn)行試驗(yàn)，設(shè)定液固比分別為5ml/g，10ml/g，15ml/g，20ml/g，25ml/g，然后按照提取過(guò)程進(jìn)行微波提取，離心，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，脫色，多糖溶液，稀釋，比色，以多糖提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)一系列單因素實(shí)驗(yàn)探究液固比與多糖提取率的關(guān)系，結(jié)果見圖3。

2.微波功率的單因素實(shí)驗(yàn)

微波功率會(huì)影響微波提取法的效率。稱取酸漿果實(shí)15g進(jìn)行試驗(yàn)，設(shè)定微波功率分別為75w，225w，375w，525w，750w，然后按照提取過(guò)程進(jìn)行微波提取，離心，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，脫色，多糖溶液，稀釋，比色，以多糖提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)一系列單因素實(shí)驗(yàn)探究微波功率與多糖提取率的關(guān)系，結(jié)果見圖3。

3.微波時(shí)間的單因素實(shí)驗(yàn)

微波時(shí)間會(huì)影響微波提取多糖的量。稱取酸漿果實(shí)15g進(jìn)行試驗(yàn)，設(shè)定微波時(shí)間為5min，10min，15min，20min，25min，然后按照提取過(guò)程進(jìn)行微波提取，離心，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，脫色，多糖溶液，稀釋，比色，以多糖提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)一系列單因素實(shí)驗(yàn)探究微波時(shí)間與多糖提取率的關(guān)系，結(jié)果見圖3。

三.響應(yīng)面優(yōu)化配方

在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，確定box-behnken試驗(yàn)的因素與水平，見表2。以多糖提取率為響應(yīng)指標(biāo)，通過(guò)designexpert8.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，建立各因素與響應(yīng)值的回歸方程，通過(guò)探索響應(yīng)面來(lái)估計(jì)整個(gè)多分量系統(tǒng)的性質(zhì)，預(yù)測(cè)微波輔助法提取多糖最佳工藝條件。

表2box-behnken設(shè)計(jì)的因素與水平

表3所示為響應(yīng)面設(shè)計(jì)方案與試驗(yàn)結(jié)果，利用designexpert8.0軟件對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行二次多元回歸擬合，分別得到多糖提取率，對(duì)編碼自變量a、b和c的二次多項(xiàng)回歸方程：y＝10.04+0.081a+0.16b+0.13c-0.005ab+0.063ac+0.017bc-0.093a²-0.37b²-0.13c²

式中：y為多糖提取率；a，b，c分別代表液固比，微波功率和微波時(shí)間。

表3響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)結(jié)果

由表三可知模型的p<0.0001，表明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，模型的回歸效果極顯著。而失擬項(xiàng)p＝0.0678>0.05，相對(duì)于絕對(duì)誤差不顯著，即模型的擬合程度良好，未知因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果干擾很小。因此，應(yīng)用此方程來(lái)模擬指標(biāo)值與因素的關(guān)系是可行的。同時(shí)，其方程的相關(guān)系數(shù)r²＝0.9956，表明99.56％的數(shù)據(jù)可以用此方程解釋。此外，a、b、c的p<0.01，說(shuō)明對(duì)提取率影響差異極顯著，三因素的二次項(xiàng)對(duì)提取率的影響均達(dá)到差異極顯著水平，而交互項(xiàng)ac即液固比和微波時(shí)間的交互作用對(duì)多糖提取率的影響差異極顯著，ab與bc對(duì)多糖的提取率影響差異不顯著。

以上利用designexpert8.0中box-behnken中optimizationchoises的numericaloptimization對(duì)進(jìn)行最優(yōu)化設(shè)計(jì)，得出微波輔助法提取多糖的最佳參數(shù)為：微波時(shí)間14.5min，液固比13.2(ml/g)，微波功率576.1w，此時(shí)提取率可達(dá)10.12％。實(shí)際中，采用微波時(shí)間15min，液固比13(ml/g)，微波功率576w的工藝條件。結(jié)果如圖4。