專利名稱：一種從杏鮑菇廢菌渣中提取三萜類化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從杏鮑菇廢菌渣中提取三萜類化合物的方法，屬于農(nóng)副產(chǎn)品精深加工及其副產(chǎn)物綜合利用的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
杏鮑菇栽培后的廢菌渣還含有大量的菌絲體，而菌絲體有許多人體免疫力的有效成分，其提取物應(yīng)用于醫(yī)療或輔助治療的臨床療效特別顯著。但長期以來，人們將都栽培后的杏鮑菇廢菌渣當(dāng)成肥料或燃料處理，杏鮑菇廢菌渣中的菌絲體沒有利用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從杏鮑菇廢菌渣菌絲中提取三萜類化合物的方法。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種從杏鮑菇廢菌渣中提取三萜類化合物的方法，其特征在于工藝流程如下杏鮑菇廢菌筒一挑選一清洗一粉碎一酶解一超聲波提取一萃取一過濾一減壓濃縮一粗制三萜類化合物一純化一真空冷凍干燥一成品。根據(jù)上述所述的一種從杏鮑菇廢菌渣中提取三萜類化合物的方法，其特征在于步驟1挑選對采完新鮮杏鮑菇的廢菌筒進(jìn)行挑選，選擇菌絲體生長良好的杏鮑菇廢菌筒；步驟2清洗將步驟1挑選出的杏鮑菇廢菌筒清洗干凈；步驟3粉碎將步驟2的杏鮑菇廢菌筒，去除外袋，并將杏鮑菇廢菌渣粉碎，粉碎粒度 60-100 目；步驟4酶解將步驟3的粉碎料加入0. 0001-0. 0005%重量百分比的纖維酶，在常溫、常壓下進(jìn)行酶解，酶解時間ΙΟ-24/h ；步驟5超聲波提取和萃取將步驟4的酶解粉碎料，并用80%乙醇作溶劑加入超聲設(shè)備中，酶解粉碎料和乙醇投料比為重量百分比1 6，浸提溫度50-70°C，浸提壓力為常壓，攪拌速度20-25r/s，全程浸提時間為25-35min，每次超聲提取時間2S，間歇時間0. 5S ；步驟6過濾將步驟5的料液進(jìn)行過濾分離；步驟7減壓濃縮將步驟6所得的浸膏用氯仿循環(huán)攪拌l-^iiin，待充分溶解后，再加入等量飽和NaHCO3溶液進(jìn)行超聲處理，堿提2次，每次堿提后靜置20-35min。合并黃色堿提液，用鹽酸調(diào)PH至3. 5 4. 0。最后將酸化液用氯仿萃取2次，收集氯仿層，減壓濃縮， 得粗制三萜類化合物。步驟8純化將步驟7制取的粗制三萜類化合物進(jìn)一步純化，將苯乙烯型樹脂先用乙醇浸泡充分溶脹，然后用乙醇洗至洗出液加適量水無白色渾濁現(xiàn)象，再用蒸餾水洗盡醇， 最后轉(zhuǎn)入酸堿處理。即用4BV的5% HCL溶液，以5BV/h的流速通過色譜樹脂層，并浸泡3h， 而后用蒸餾水以同樣流速洗至出水PH值中性；將已進(jìn)行預(yù)處理的苯乙烯型樹脂裝入柱中， 將粗制三萜類化合物提取液上柱至接近飽和進(jìn)行濃度25 35mg/ml，吸附流速2BV/h。再用乙醇溶液進(jìn)行解吸，洗脫流速lBV/h，得到解吸液；
步驟9真空冷凍干燥將步驟8解吸液經(jīng)過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器真空濃縮至近干，再放到真空冷凍干燥箱中干燥2-3. 5h，即得到杏鮑菇菌絲體三萜類化合物。本發(fā)明的有益效果在于我國食用菌資源十分豐富，年產(chǎn)量居世界第一位，但食用菌的廢菌筒基本上是作肥料或燃料燒掉，資源沒有很好利用，本項(xiàng)目先將杏鮑菇廢菌筒菌絲體提取三萜類化合物后，再將其用于肥料或燃料，延長了食用菌加工鏈條，還能優(yōu)化醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，增加農(nóng)民經(jīng)濟(jì)收入、減少環(huán)境污染。實(shí)施例一步驟1 對采完新鮮杏鮑菇的廢菌筒進(jìn)行挑選，選擇菌絲體生長良好的杏鮑菇的廢菌筒；步驟2 將步驟1挑選出的杏鮑菇廢菌筒，清洗干凈；步驟3 將步驟2的杏鮑菇廢菌筒，去除外袋，并將杏鮑菇廢菌渣粉碎，粉碎粒度為 60目；步驟4 將步驟3的粉碎料加入0. 0001%重量百分比的纖維酶，在常溫、常壓下進(jìn)行酶解，酶解時間為 ο/h ；步驟5 將步驟4的酶解粉碎料，稱取250克，并用80%乙醇作溶劑加入超聲設(shè)備中，酶解粉碎料和乙醇投料比為重量百分比1 6，浸提溫度50°C，浸提壓力為常壓，攪拌速度20r/s，全程浸提時間為25min，每次超聲提取時間2S，間歇時間0. 5S ；步驟6 將步驟5的料液進(jìn)行過濾分離；步驟7 將步驟6所得的浸膏減壓濃縮，所得的浸膏12.5g用125ml氯仿循環(huán)攪拌 Imin,待充分溶解后，再加入等量飽和NaHCO3溶液進(jìn)行超聲處理，超聲功率250W，堿提2次， 每次堿提后靜置20min。合并黃色堿提液，用6!1101/1鹽酸調(diào)？!1至3.5。最后將酸化液用 250ml氯仿萃取2次，收集氯仿層，減壓濃縮，得粗制三萜類化合物。步驟8 將步驟7制取的粗制三萜類化合物進(jìn)一步純化，將苯乙烯型(CG300)樹脂先用乙醇浸泡充分溶脹，然后用乙醇洗至洗出液加適量水無白色渾濁現(xiàn)象，再用蒸餾水洗盡醇，最后轉(zhuǎn)入酸堿處理。即用4BV的5% HCL溶液，以5BV/h的流速通過色譜樹脂層，并浸泡池，而后用蒸餾水以同樣流速洗至出水PH值中性；將已進(jìn)行預(yù)處理的苯乙烯型樹脂裝入柱中，將粗制三萜類化合物提取液上柱至接近飽和進(jìn)行濃度25mg/ml，吸附流速2BV/h。再用乙醇溶液進(jìn)行解吸，洗脫流速lBV/h，得到解吸液。解吸液經(jīng)過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器真空濃縮至近干，再放到真空冷凍干燥箱中干燥2h，即得到杏鮑菇菌絲體三萜類化合物。實(shí)施例二 步驟1 對采完新鮮杏鮑菇的廢菌筒進(jìn)行挑選，選擇菌絲體生長良好的杏鮑菇的廢菌筒；步驟2 將步驟1挑選出的杏鮑菇廢菌筒，清洗干凈；步驟3 將步驟2的杏鮑菇廢菌筒，去除外袋，并將杏鮑菇廢菌渣粉碎，粉碎粒度80 目；步驟4 將步驟3的粉碎料進(jìn)行酶解，在粉碎料加入0. 0003%重量百分比的纖維酶，酶解在常溫、常壓下進(jìn)行酶解，，酶解時間18/h ；步驟5 將步驟4的酶解粉碎料，稱取酶解粉碎料250克和80%乙醇作溶劑，投料比為1 6，在超聲設(shè)備中加入80%乙醇，邊攪拌邊加入酶解粉碎料，浸提溫度60°C，攪拌速
4度21r/s。投料結(jié)束后施加超聲波浸提，超聲功率300W。全程浸提時間為30min，每次超聲提取時間2S，間歇時間0. 5S。步驟6 將步驟5的料液進(jìn)行過濾分離；步驟7 將步驟6的將分離液體進(jìn)行減壓濃縮，所得的浸膏12. 5g用125ml氯仿循環(huán)攪拌2min，待充分溶解后，再加入等量飽和NaHCO3溶液進(jìn)行超聲處理，超聲功率300W，堿提2次，每次堿提后靜置30min。合并黃色堿提液，用6mol/L鹽酸調(diào)PH至4. 0。最后將酸化液用250ml氯仿萃取2次，收集氯仿層，減壓濃縮，得粗制三萜類化合物。步驟8 將步驟7制取的粗制三萜類化合物進(jìn)一步純化，將苯乙烯型(CG300)樹脂先用乙醇浸泡充分溶脹，然后用乙醇洗至洗出液加適量水無白色渾濁現(xiàn)象，再用蒸餾水洗盡醇，最后轉(zhuǎn)入酸堿處理。即用4BV的5% HCL溶液，以5BV/h的流速通過色譜樹脂層，并浸泡池，而后用蒸餾水以同樣流速洗至出水PH值中性；將已進(jìn)行預(yù)處理的苯乙烯型樹脂裝入柱中，將粗制三萜類化合物提取液上柱至接近飽和進(jìn)行濃度30mg/ml，吸附流速2BV/h。再用乙醇溶液進(jìn)行解吸，洗脫流速lBV/h，得到解吸液。解吸液經(jīng)過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器真空濃縮至近干，再放到真空冷凍干燥箱中干燥3h，即得到杏鮑菇菌絲體三萜類化合物。實(shí)施例三步驟1 對采完新鮮杏鮑菇的廢菌筒進(jìn)行挑選，選擇菌絲體生長良好的杏鮑菇廢菌筒；步驟2 將步驟1挑選出的杏鮑菇廢菌筒清洗干凈；步驟3 將步驟2的杏鮑菇廢菌筒，去除外袋，并將杏鮑菇廢菌渣粉碎，粉碎粒度 100 目；步驟4 將步驟3的粉碎料加入0. 0005%重量百分比的纖維酶，進(jìn)行酶解，酶解在常溫、常壓下進(jìn)行，酶解時間M/h ；步驟5 將步驟4的酶解粉碎料，并用80%乙醇作溶劑加入超聲設(shè)備中，酶解粉碎料和乙醇投料比為重量百分比1 6，浸提溫度70°C，壓力為常壓，攪拌速度25r/s，全程浸提時間為35min，每次超聲提取時間2S，間歇時間0. 5S ；步驟6 將步驟5的料液進(jìn)行過濾分離；步驟7 將步驟6的將分離液體進(jìn)行減壓濃縮，將步驟6所得的浸膏用氯仿循環(huán)攪拌3min，待充分溶解后，再加入等量飽和NaHCO3溶液進(jìn)行超聲處理，堿提2次，每次堿提后靜置35min。合并黃色堿提液，用鹽酸調(diào)PH至4. 0。最后將酸化液用氯仿萃取2次，收集氯仿層，減壓濃縮，得粗制三萜類化合物。 步驟8純化將步驟7制取的粗制三萜類化合物進(jìn)一步純化，將苯乙烯型樹脂先用乙醇浸泡充分溶脹，然后用乙醇洗至洗出液加適量水無白色渾濁現(xiàn)象，再用蒸餾水洗盡醇， 最后轉(zhuǎn)入酸堿處理。即用4BV的5% HCL溶液，以5BV/h的流速通過色譜樹脂層，并浸泡3h， 而后用蒸餾水以同樣流速洗至出水PH值中性；將已進(jìn)行預(yù)處理的苯乙烯型樹脂裝入柱中， 將粗制三萜類化合物提取液上柱至接近飽和進(jìn)行濃度35mg/ml，吸附流速2BV/h。再用乙醇溶液進(jìn)行解吸，洗脫流速lBV/h，得到解吸液； 步驟9真空冷凍干燥將步驟8解吸液經(jīng)過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器真空濃縮至近干，再放到真空冷凍干燥箱中干燥3. 5h，即得到杏鮑菇菌絲體三萜類化合物。
權(quán)利要求
1.一種從杏鮑菇廢菌渣中提取三萜化合物的方法，其特征在于工藝流程如下杏鮑菇廢菌筒一挑選一清洗一粉碎一酶解一超聲波提取一萃取一過濾一減壓濃縮一粗制三萜類化合物一純化一真空冷凍干燥一成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求所述的一種從杏鮑菇廢菌渣中提取三萜化合物的方法，其特征在于步驟1挑選對采完新鮮杏鮑菇的廢菌筒進(jìn)行挑選，選擇菌絲體生長良好的杏鮑菇廢菌筒；步驟2清洗將步驟1挑選出的杏鮑菇廢菌筒清洗干凈；步驟3粉碎將步驟2的杏鮑菇廢菌筒，去除外袋，并將杏鮑菇廢菌渣粉碎，粉碎粒度 60-100 目；步驟4酶解將步驟3的粉碎料加入0. 0001-0. 0005%重量百分比的纖維酶，在常溫、 常壓下進(jìn)行酶解，酶解時間ΙΟ-24/h ；步驟5超聲波提取和萃取將步驟4的酶解粉碎料，并用80%乙醇作溶劑加入超聲設(shè)備中，酶解粉碎料和乙醇投料比為重量百分比1 6，浸提溫度50-70°C，浸提壓力為常壓， 攪拌速度20-25r/s，全程浸提時間為25-35min，每次超聲提取時間2S，間歇時間0. 5S ；步驟6過濾將步驟5的料液進(jìn)行過濾分離；步驟7減壓濃縮將步驟6所得的浸膏用氯仿循環(huán)攪拌l-3min，待充分溶解后，再加入等量飽和NaHCO3溶液進(jìn)行超聲處理，堿提2次，每次堿提后靜置20-35min。合并黃色堿提液，用鹽酸調(diào)PH至3. 5 4. 0。最后將酸化液用氯仿萃取2次，收集氯仿層，減壓濃縮，得粗制三萜類化合物。步驟8純化將步驟7制取的粗制三萜類化合物進(jìn)一步純化，將苯乙烯型樹脂先用乙醇浸泡充分溶脹，然后用乙醇洗至洗出液加適量水無白色渾濁現(xiàn)象，再用蒸餾水洗盡醇，最后轉(zhuǎn)入酸堿處理。即用4BV的5% HCL溶液，以5BV/h的流速通過色譜樹脂層，并浸泡3h，而后用蒸餾水以同樣流速洗至出水PH值中性；將已進(jìn)行預(yù)處理的苯乙烯型樹脂裝入柱中，將粗制三萜類化合物提取液上柱至接近飽和進(jìn)行濃度25 35mg/ml，吸附流速2BV/h。再用乙醇溶液進(jìn)行解吸，洗脫流速lBV/h，得到解吸液；步驟9真空冷凍干燥將步驟8解吸液經(jīng)過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器真空濃縮至近干，再放到真空冷凍干燥箱中干燥2-3. 5h，即得到杏鮑菇菌絲體三萜類化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從杏鮑茹廢菌渣菌絲體中提取三萜類化合物的方法，屬于屬于農(nóng)副產(chǎn)品精深加工及其副產(chǎn)物綜合利用的技術(shù)領(lǐng)域。其特征在于工藝流程如下杏鮑菇廢菌筒→挑選→清洗→粉碎→酶解→超聲波提取→萃取→過濾→減壓濃縮→粗制三萜類化合物→純化→真空冷凍干燥→成品。既延長了食用菌加工鏈條，還能優(yōu)化醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)，增加農(nóng)民經(jīng)濟(jì)收入、減少環(huán)境污染。
文檔編號A61K36/07GK102188458SQ201010158330
公開日2011年9月21日 申請日期2010年3月16日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月16日
發(fā)明者唐東升, 黃培元 申請人:唐東升