專利名稱:一種色釘菇多糖的提取方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及從色釘菇[Chroogomphus rutilus]中提取的多糖及其在抗運動病中的應(yīng)用,屬于食品保健和藥物開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù):
運動病是暈車、暈船、暈機(jī)和宇航病的總稱,癥狀上表現(xiàn)為頭昏、眩暈、惡心、嘔吐、 面色蒼白、出冷汗等一系列植物神經(jīng)性反應(yīng)。其誘因主要是異常的運動和低頻噪音使前庭、 聽覺和視覺傳入與儲存于中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的經(jīng)驗信息相異,產(chǎn)生植物神經(jīng)功能紊亂和感覺不適的癥狀。盡管該病癥對于一般人群只是感覺和精神上的不適,恢復(fù)后對健康、精神狀態(tài)及以后的工作并無多大影響,但對于乘車、船作戰(zhàn)的戰(zhàn)士、飛行員和航天員則有嚴(yán)重的危害。因為上述人員在乘坐相應(yīng)的運輸工具中必須保持清醒的頭腦和應(yīng)急能力,否則將有性命之憂和招致巨大的損失。當(dāng)前預(yù)防和治療運動病的藥物主要有抗膽堿藥、抗組胺藥、擬交感藥、鈣拮抗劑、胃動劑等,其中東莨菪堿是目前防治運動病效果最好的。這些藥物中多數(shù)具有難以消除的副作用,如抗膽堿藥、抗組胺藥有抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)活動,出現(xiàn)口干、嗜睡、 視力模糊、記憶力受損等不良反應(yīng);擬交感藥有成癮副作用;生姜中藥合劑可使胃運動過速;鈣離子拮抗劑強(qiáng)烈抑制前庭功能等。所以這些藥物均不能滿足航天員、飛行員和戰(zhàn)士抗運動病的需要。真菌多糖是一類活性高分子化合物,具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、降血糖、降血脂等多種功效。近年來的研究發(fā)現(xiàn),向小鼠胃內(nèi)灌入松茸,能明顯促進(jìn)小鼠胃的排空;臨床上也證實,口服蜜環(huán)菌片能有效治療眩暈、惡心、嘔吐等癥狀。推測這種抑制眩暈、惡心、嘔吐的作用可能與真菌多糖有關(guān)。色釘菇(Chroogomphus rutilus),又稱血紅鉚釘菇,俗稱紅蘑、肉蘑、松樹傘、松蘑等,在真菌分類上屬于擔(dān)子菌亞門層菌綱、傘菌目、鉚釘菇科。是針葉樹木重要的外生菌根真菌。色釘菇是中國向日本出口最多的食用真菌,也是烹制蘑菇清湯的主要原料。研究發(fā)現(xiàn),蘑菇清湯能有效地預(yù)防空間運動病的發(fā)生,但其作用成分和機(jī)制、蘑菇清湯中對抗運動病的有效物質(zhì)未曾見諸報道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種色釘菇多糖的提取方法。本發(fā)明的目的還在于提供一種色釘菇多糖在抗運動病中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的本申請認(rèn)為蘑菇清湯中對抗運動病的主要物質(zhì)可能是真菌多糖,因為蘑菇的水相提取物中最多的是多糖。所以本申請人以大鼠為實驗動物,對色釘菇多糖的抗運動病作用進(jìn)行了較深入的研究,結(jié)果表明該多糖有顯著抗運動病作用。具體的,本發(fā)明的內(nèi)容包括一、色釘菇多糖的提取二、色釘菇多糖抗運動病效果的檢測實驗及其應(yīng)用。本發(fā)明所說的色釘菇多糖的提取方法包括以下步驟
⑴熱水浸提以蒸餾水清洗采集到的色釘菇真菌子實體,洗滌三次,放入烘箱中,45°C烘干,將子實體粉碎、稱重,以水子實體=IOml Ig的加水比例于80°C水浴鍋中進(jìn)行水浴加熱, 并攪拌,浸提時間10h,離心,取上清浸提液,回收離心后得到的子實體沉淀,再重復(fù)上述步驟2次,將3次所得的浸提液合并,濃縮至所得浸提液總體積的1/3 ;(2)乙醇沉淀將濃縮后的浸提液加入浸提液3倍體積的質(zhì)量濃度為95%的乙醇,于4°C沉淀IOh 以上,沉淀物用無水乙醇洗滌數(shù)次,再加入少許去離子水溶解,然后真空冷凍干燥,即得色釘菇多糖。經(jīng)計算,用此種方法提取所得色釘菇多糖的得率為6. 73%。本發(fā)明所說的色釘菇多糖在抗運動病中的應(yīng)用通過以下實驗完成。以下是色釘菇多糖抗運動病效果實驗以SD大鼠為實驗動物,用偏離垂直軸旋轉(zhuǎn)刺激復(fù)制大鼠運動病模型,旋轉(zhuǎn)刺激前通過灌胃方式給予大鼠不同濃度該色釘菇多糖溶液,通過行為學(xué)觀察、糖精水厭惡實驗、曠場實驗檢測,以及血清中5-HT和胃動素含量的檢測,評價該多糖是否有防治運動病的作用。復(fù)制成功的運動病模型大鼠,在行為上表現(xiàn)為活動少,活動范圍小,行動遲緩,有轉(zhuǎn)圈行走現(xiàn)象,還表現(xiàn)出顫抖、豎毛、大小便失禁、過多的修飾活動等。在給予糖精水后進(jìn)行旋轉(zhuǎn)刺激,使大鼠產(chǎn)生內(nèi)臟不適癥狀,以建立對糖精水的厭惡性條件反射,使其飲用的糖精水顯著減少。運動病模型大鼠血清中的多種生物活性物質(zhì)的含量會發(fā)生顯著變化,其中常用的判斷指標(biāo)是5-HT和胃動素,5-HT水平會顯著升高,胃動素的水平會顯著下降。在旋轉(zhuǎn)刺激前給予各組大鼠不同劑量的色釘菇多糖,通過上述指標(biāo)的測定來檢測色釘菇多糖是否有抗運動病作用。糖精水厭惡實驗、曠場實驗的行為學(xué)檢測①動物分組雄性SD大鼠,體重200_250g,購于河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。動物購入后隨機(jī)分為5組,按照實驗步驟進(jìn)行適應(yīng)飼養(yǎng)和實驗。表1動物分組
權(quán)利要求
1.一種色釘菇多糖的提取方法,其特征在于包括以下步驟(1)熱水浸提以蒸餾水清洗采集到的色釘菇真菌子實體,洗滌三次,放入烘箱中,45°C烘干,將子實體粉碎、稱重,以水子實體=IOml Ig的加水比例于80°C水浴鍋中進(jìn)行水浴加熱,并攪拌,浸提時間為10h,離心,取上清浸提液,回收離心后得到的子實體沉淀,再重復(fù)上述步驟 2次,將3次所得的浸提液合并,濃縮至所得浸提液總體積的1/3 ;(2)乙醇沉淀將濃縮后的浸提液加入3倍體積的質(zhì)量濃度為95%的乙醇,于4°C沉淀IOh以上,沉淀物用無水乙醇洗滌數(shù)次,再加入少許去離子水溶解,然后,真空冷凍干燥即得色釘菇多糖。
2.一種色釘菇多糖的應(yīng)用,其特征在于用于制備抗運動病藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有抗運動病效果的色釘菇多糖的提取方法及其應(yīng)用。該多糖是以色釘菇為原料,經(jīng)水提醇沉法制備的。應(yīng)用于運動病的防治,經(jīng)行為學(xué)實驗及激素水平檢測,結(jié)果均顯示,胃內(nèi)給予200mg/kg色釘菇多糖有很好的抗運動病效果。不但能顯著減輕內(nèi)臟不適、大小便失禁、豎毛、震顫等運動病癥狀,還可以降低血清中5-HT水平、提高胃動素水平,最重要的是大鼠精神狀態(tài)良好,無精神萎靡和其他的副作用癥狀。表明200mg/kg色釘菇多糖是該多糖抗運動病較為理想的劑量。本發(fā)明為進(jìn)一步研制高效、無毒副作用的抗運動病新藥提供了新的物質(zhì)和參考劑量。
文檔編號A61K31/715GK102532341SQ201210035838
公開日2012年7月4日 申請日期2012年2月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月17日
發(fā)明者劉亞寧, 王宇辰, 王微, 王立安, 王艷芹, 管振龍 申請人:河北師范大學(xué)