相關(guān)申請(qǐng)的交叉參考本申請(qǐng)是2016年4月5日提交的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?5/090,926的延續(xù)，其公開(kāi)內(nèi)容出于所有目的經(jīng)此引用全文并入本文。本發(fā)明涉及衍生自植物和谷物的玉米淀粉、用于制造這樣的淀粉的組合物和方法。
背景技術(shù)：
：現(xiàn)有的waxy/sugary-2雙突變玉米淀粉顯示出非常良好的凍/融穩(wěn)定性。但是，現(xiàn)有的waxy/sugary-2玉米淀粉的粘度顯著低于商業(yè)蠟質(zhì)（waxy）玉米淀粉，如amioca?淀粉。此外，現(xiàn)有的waxy/sugary-2雙突變玉米淀粉的糊化溫度顯著低于amioca?淀粉。因此，在本領(lǐng)域中仍然需要生產(chǎn)具有良好的凍/融穩(wěn)定性、提高的粘度和/或更高的糊化溫度的玉米淀粉。在本發(fā)明中，我們通過(guò)向現(xiàn)有的waxy/sugary-2雙突變玉米中引入低活性的gbssi來(lái)開(kāi)發(fā)了具有比商業(yè)蠟質(zhì)玉米淀粉，如amioca?淀粉更高的粘度和/或更高的糊化溫度的新型玉米淀粉。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供了在自然界中從未發(fā)現(xiàn)的具有新功能的淀粉。在一些實(shí)施方案中，使用直鏈淀粉/支鏈淀粉測(cè)定試劑盒，如megazyme?，該淀粉包含大約2重量%至大約20重量%的直鏈淀粉含量。在一些實(shí)施方案中，如使用快速粘度分析儀（rva，newportscientific，sydney，australia）測(cè)得的，該淀粉具有比對(duì)照淀粉的淀粉糊化溫度高至少大約5%的水淀粉糊化溫度。在一些實(shí)施方案中，該淀粉衍生自在胚乳中包含至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因的waxy/sugary-2雙突變玉米植物。在一些實(shí)施方案中，該waxy/sugary-2雙突變玉米植物包含隱性su2突變等位基因。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的淀粉由對(duì)于產(chǎn)生所公開(kāi)和要求保護(hù)的淀粉的基因型不是轉(zhuǎn)基因（即非gmo）的植物生產(chǎn)。在一些實(shí)施方案中，該淀粉的直鏈淀粉含量為大約8重量%至大約15重量%。在一些實(shí)施方案中，該水糊化溫度比對(duì)照淀粉的水糊化溫度高大約5%至大約15%。在一些實(shí)施方案中，該淀粉進(jìn)一步具有結(jié)晶焓變。在一些實(shí)施方案中，如使用差示掃描量熱計(jì)（dsc）測(cè)得的，該結(jié)晶焓變比對(duì)照淀粉的結(jié)晶焓變高至少大約30%。在一些實(shí)施方案中，如使用dsc測(cè)得的，該結(jié)晶焓變比對(duì)照淀粉的結(jié)晶焓變高大約30%至大約200%。在一些實(shí)施方案中，該淀粉進(jìn)一步具有淀粉顆粒尺寸的分布，如使用掃描電子顯微鏡觀察到的，其中淀粉顆粒尺寸的分布包含與對(duì)照淀粉中小于5微米的顆粒的比例相比少至少大約40%的小于5微米的顆粒。在一些實(shí)施方案中，如使用掃描電子顯微鏡觀察到的，該淀粉具有與衍生自對(duì)照玉米植物的淀粉相比表現(xiàn)出提高的完整性的顆粒。在一些實(shí)施方案中，該淀粉能夠承受至少三次凍融循環(huán)。在一些實(shí)施方案中，該淀粉能夠承受至少三次到至少五次凍融循環(huán)。在一些實(shí)施方案中，制造本發(fā)明的淀粉的植物通過(guò)具有wxwxsu2su2的基因型的第一玉米植物與具有wxswxssu2su2的基因型或wxswxsu2su2的基因型的第二玉米植物的異花傳粉來(lái)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，該waxy/sugary-2玉米植物的胚乳具有1劑量、2劑量或3劑量的wxs等位基因，并且該胚乳具有wxswxwxsu2su2su2、wxswxswxsu2su2su2或wxswxswxssu2su2su2的基因型。本發(fā)明還提供了制造具有改善的糊化曲線的淀粉的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括向蠟質(zhì)玉米植物的胚乳中引入至少一個(gè)wxs等位基因。本發(fā)明還提供了新的雙突變植物。在一些實(shí)施方案中，該植物是玉米植物。在一些實(shí)施方案中，該植物對(duì)淀粉合成酶iia（su2）基因是純合隱性的。在一些實(shí)施方案中，該植物對(duì)突變的顆粒結(jié)合淀粉合成酶i（gbssi）基因是純合或雜合的。在一些實(shí)施方案中，該突變的gbssi基因具有比野生型野生型gbssi基因（wx）更低的gbssi活性，但是具有比隱性的功能缺失的gbssi基因（wx）更高的gbssi活性。在一些實(shí)施方案中，該突變的gbssi基因具有大約8%至大約10%的野生型gbssi基因的gbssi活性。在一些實(shí)施方案中，該突變的gbssi基因是wx-stonor（wxs）等位基因。在一些實(shí)施方案中，該突變的gbssi基因是wx-g等位基因、wx-b5等位基因或wx-m等位基因。在一些實(shí)施方案中，該雙突變植物通過(guò)兩個(gè)親本植物的異花傳粉來(lái)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，該第一植物具有wxwxsu2su2的基因型。在一些實(shí)施方案中，該第二植物具有wxswxssu2su2的基因型或wxswxsu2su2的基因型。在一些實(shí)施方案中，該植物的胚乳具有1劑量、2劑量或3劑量的wxs等位基因。在一些實(shí)施方案中，該植物的胚乳具有wxswxwxsu2su2su2、wxswxswxsu2su2su2或wxswxswxssu2su2su2的基因型。在一些實(shí)施方案中，在該植物的胚乳中產(chǎn)生的淀粉與具有wxwxwxsu2su2su2的基因型的雙waxy/sugary-2隱性突變植物的胚乳中產(chǎn)生的淀粉相比具有更高的粘度。在一些實(shí)施方案中，在該植物的胚乳中產(chǎn)生的淀粉與具有wxwxwxsu2su2su2的基因型的雙waxy/sugary-2隱性突變植物的胚乳中產(chǎn)生的淀粉相比具有更高的淀粉糊化溫度。本發(fā)明還提供了植物部分、植物細(xì)胞和植物的組織培養(yǎng)物。在一些實(shí)施方案中，該植物部分是胚乳、葉、花、胚珠、花粉、根莖或接穗。在一些實(shí)施方案中，該植物部分是植物的種子。本發(fā)明還提供了從上述植物中提取的淀粉。本發(fā)明還提供了制造淀粉的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括從本發(fā)明的植物的胚乳中獲得淀粉。在一些實(shí)施方案中，制造淀粉的方法包括種植本發(fā)明的植物，并從該植物收獲種子。本發(fā)明還提供了產(chǎn)生種子的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括使第一親本植物與第二親本植物雜交并收獲所得種子。在一些實(shí)施方案中，所述第一親本植物和/或第二親本植物是本發(fā)明的植物。在一些實(shí)施方案中，該方法包括使本發(fā)明的植物自花傳粉，并收獲所得種子。本發(fā)明還提供了無(wú)性繁殖該植物的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括收集該植物的部分并由所述部分再生植物。本發(fā)明還提供了產(chǎn)生衍生自本發(fā)明的植物的植物的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括使本發(fā)明的植物自花傳粉至少一次以制造衍生自該植物的后代植物。在一些實(shí)施方案中，該方法包括使本發(fā)明的植物與第二植物雜交以制造植物后代。本發(fā)明還提供了產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植物的方法。在一些實(shí)施方案中，該方法包括將相關(guān)轉(zhuǎn)基因引入本發(fā)明的植物。所述相關(guān)轉(zhuǎn)基因在該植物中賦予一種或多種期望表型。本發(fā)明還提供了產(chǎn)生具有期望表型的植物的方法，包括基因編輯以在本發(fā)明的植物中制造基因序列。該基因序列在該植物中賦予一種或多種期望表型。本發(fā)明還提供了產(chǎn)生具有期望表型的植物的方法，包括在本發(fā)明的植物中誘導(dǎo)一個(gè)或多個(gè)突變以產(chǎn)生基因序列。該基因序列在該植物中賦予一種或多種期望表型。附圖說(shuō)明圖1描述了在加熱-冷卻循環(huán)過(guò)程中隨時(shí)間推移通過(guò)快速粘度分析儀（rva）測(cè)得的amioca?淀粉、wxwxwxsu2su2su2淀粉和具有0、1、2或3劑量的wxs基因的waxy/sugary-2雙突變植物的淀粉的糊化曲線。圖2描述了amioca?淀粉、wxwxwxsu2su2su2淀粉和具有0、1、2或3劑量的wxs基因的waxy/sugary-2雙突變植物的淀粉的糊化性質(zhì)，包括糊化溫度、峰值rvu、保持rvu、最終rvu、崩解rvu和消減rvu。圖3描述了具有1、2、3或0劑量的wxs基因的waxy/sugary-2雙突變植物的淀粉、來(lái)自waxystonor種子的淀粉、wxwxwxsu2su2su2淀粉和amioca?淀粉的凍-融穩(wěn)定性測(cè)試。上述淀粉以行呈現(xiàn)，并在第一次凍融（循環(huán)1）之后、在第三次凍融（循環(huán)3）之后和在第五次凍融（循環(huán)5）之后提供了淀粉凝膠的說(shuō)明性圖像。圖4描述了amioca?淀粉、wxwxwxsu2su2su2淀粉和具有0、1、2或3劑量的wxs基因的waxy/sugary-2雙突變植物的淀粉的熱性質(zhì)。圖5描述了amioca?淀粉、wxwxwxsu2su2su2淀粉和具有0、1、2或3劑量的wxs基因的waxy/sugary-2雙突變植物的淀粉的淀粉顆粒尺寸分布。圖6描述了具有1、2、3或0劑量的wxs基因的waxy/sugary-2雙突變植物的淀粉、wxwxwxsu2su2su2淀粉、amioca?淀粉和來(lái)自waxystonor種子的淀粉的顆粒形態(tài)。提供了使用掃描電子顯微鏡捕獲的上述淀粉各自的說(shuō)明性圖像。具體實(shí)施方式定義本文中所用的動(dòng)詞“包含”當(dāng)用于本說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求及其結(jié)合時(shí)以其非限制性含義使用，指的是包括該詞之后的項(xiàng)目，但是不排除并未具體提及的項(xiàng)目。本發(fā)明提供制造植物的組合物和方法。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“植物”指的是植物界的任何活生物體（即植物王國(guó)中的任何屬/種）。在一些實(shí)施方案中，能夠制造淀粉的植物包括但不限于玉米、馬鈴薯、小麥、木薯、水稻、馬鈴薯和高粱。在一些實(shí)施方案中，該植物是玉米植物。本發(fā)明提供植物部分。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“植物部分”指的是植物的任何部分，包括但不限于胚芽、胚乳、枝條、根、莖、種子、托葉、葉、花瓣、花、胚珠、苞片、分枝、葉柄、節(jié)間、樹(shù)皮、柔毛、分蘗、根莖、復(fù)葉、葉片、胚珠、花粉、雄蕊等等。本發(fā)明提供了包含分離的（例如野生型，對(duì)該生物體是內(nèi)源性的）、嵌合的、重組的或合成的核酸序列的基因。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“基因”指的是與生物功能相關(guān)的任何dna片段。由此，基因包括但不限于其表達(dá)所需的編碼序列和/或調(diào)節(jié)序列?；蜻€可以包括非表達(dá)的dna片段，例如，形成其它蛋白的識(shí)別序列?；蚩梢垣@自多種來(lái)源，包括從相關(guān)來(lái)源克隆，或由已知或預(yù)測(cè)的序列信息合成，并且可以包括設(shè)計(jì)為具有所需參數(shù)的序列。本發(fā)明提供了與野生型參照序列相比時(shí)具有核苷酸變化的多核苷酸。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“核苷酸變化”指的是例如核苷酸替換、缺失、插入或轉(zhuǎn)座子，如本領(lǐng)域中充分理解的那樣。例如，突變包含產(chǎn)生沉默替換、添加、缺失或可變剪接的改變，這會(huì)改變或不改變編碼的蛋白的性質(zhì)或活性或是如何制造該蛋白。核苷酸變化還可以是基因中逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子元件的插入和/或排除。本發(fā)明提供了與野生型參照序列相比時(shí)具有蛋白修飾的多肽。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“蛋白修飾”指的是例如氨基酸替換、氨基酸修飾、缺失、插入或蛋白活性變化，如本領(lǐng)域中充分理解的那樣。本發(fā)明提供了衍生自野生型參照序列的多核苷酸和多肽。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“衍生自”指的是起源或來(lái)源，并可以包括天然存在的、重組的、未純化的或純化的分子。衍生自起源或來(lái)源的核酸或氨基酸可以具有如本文中其它地方所定義的所有類(lèi)型的核苷酸變化或蛋白修飾。本發(fā)明提供了本發(fā)明的核酸序列和多肽序列的生物活性變體或功能變體。本文中所用的短語(yǔ)“生物活性變體”或“功能變體”對(duì)于蛋白質(zhì)而言指的是相對(duì)于參照序列被一個(gè)或多個(gè)氨基酸改變，同時(shí)仍保留參照序列的實(shí)質(zhì)性生物活性的氨基酸序列。該變體可以具有“保守”變化，其中替換的氨基酸具有類(lèi)似的結(jié)構(gòu)或化學(xué)性質(zhì)，例如用異亮氨酸代替亮氨酸。下面的表顯示了示例性的保守氨基酸替換。在一些實(shí)施方案中，該變體具有一個(gè)或多個(gè)氨基酸替換。其中一個(gè)或多個(gè)或全部替換是酸性氨基酸，如天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸或谷氨酰胺。原始?xì)埢鶚O高度保守的替換高度保守的替換(來(lái)自blosum90matrix)保守的替換(來(lái)自blosum65matrix)alasergly,ser,thrcys,gly,ser,thr,valarglysgln,his,lysasn,gln,glu,his,lysasngln;hisasp,gln,his,lys,ser,thrarg,asp,gln,glu,his,lys,ser,thraspgluasn,gluasn,gln,glu,sercysser無(wú)alaglnasnarg,asn,glu,his,lys,metarg,asn,asp,glu,his,lys,met,sergluaspasp,gln,lysarg,asn,asp,gln,his,lys,serglyproalaala,serhisasn;glnarg,asn,gln,tyrarg,asn,gln,glu,tyrileleu;valleu,met,valleu,met,phe,valleuile;valile,met,phe,valile,met,phe,vallysarg;gln;gluarg,asn,gln,gluarg,asn,gln,glu,ser,metleu;ilegln,ile,leu,valgln,ile,leu,phe,valphemet;leu;tyrleu,trp,tyrile,leu,met,trp,tyrserthrala,asn,thrala,asn,asp,gln,glu,gly,lys,thrthrserala,asn,serala,asn,ser,valtrptyrphe,tyrphe,tyrtyrtrp;phehis,phe,trphis,phe,trpvalile;leuile,leu,metala,ile,leu,met,thr或者，變體可具有“非保守”變化，例如用色氨酸替代甘氨酸。類(lèi)似的微小變化也可以包括氨基酸缺失和/或插入。確定哪些氨基酸殘基可以替換、插入或缺失而不會(huì)消除生物或免疫活性的指導(dǎo)可以使用本領(lǐng)域公知的計(jì)算機(jī)程序（例如dnastar軟件）來(lái)找到。對(duì)于多核苷酸而言，變體包括以下多核苷酸：在5'和/或3'末端處具有缺失（即截短）；在參照多核苷酸中在一個(gè)或多個(gè)內(nèi)部位點(diǎn)處缺失和/或添加一個(gè)或多個(gè)核苷酸；和/或在參照多核苷酸中在一個(gè)或多個(gè)位點(diǎn)處替換一個(gè)或多個(gè)核苷酸。本文中所用的“參照”多核苷酸包含通過(guò)本文中公開(kāi)的方法制得的核苷酸序列。變體多核苷酸還包括合成衍生的多核苷酸，如例如通過(guò)使用定向誘變生成但仍包含基因調(diào)節(jié)元件活性的那些。通常，本發(fā)明的特定多核苷酸或核酸分子，或多肽的變體將具有如通過(guò)本文中其它地方描述的序列比對(duì)程序和參數(shù)所確定的與特定多核苷酸/多肽至少大約60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、91.5%、92%、92.5%、93%、93.5%、94%、94.5%、95%、95.5%、96%、96.5%、97%、97.5%、98%、98.5%、99%、99.1%、99.2%、99.3%、99.4%、99.5%、99.6%、99.7%、99.8%、99.9%或更高的序列同一性。變體多核苷酸還包括衍生自誘變和重組程序（如dna改組）的序列。這樣的dna改組的策略是本領(lǐng)域已知的。參見(jiàn)例如stemmer(1994)pnas91:10747-10751；stemmer(1994)nature370:389-391；crameri等人(1997)naturebiotech.15:436-438；moore等人(1997)j.mol.biol.272:336-347；zhang等人(1997)pnas94:4504-4509；crameri等人(1998)nature391:288-291；以及美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,605,793和5,837,458。對(duì)于本文中公開(kāi)的多核苷酸的pcr擴(kuò)增，寡核苷酸引物可以設(shè)計(jì)用于pcr反應(yīng)以擴(kuò)增來(lái)自從任何相關(guān)植物中提取的cdna或基因組dna的相應(yīng)dna序列。設(shè)計(jì)pcr引物和pcr克隆的方法通常是本領(lǐng)域已知的，并且公開(kāi)在sambrook等人(1989)molecularcloning:alaboratorymanual(第2版，coldspringharborlaboratorypress，plainview，newyork)中。還參見(jiàn)innis等人主編的(1990)pcrprotocols:aguidetomethodsandapplications(academicpress，newyork)；innis和gelfand主編的(1995)pcrstrategies(academicpress，newyork)；以及innis和gelfand主編的(1999)pcrmethodsmanual(academicpress，newyork)。pcr的已知方法包括但不限于使用配對(duì)引物、巢式引物、單特異性引物、簡(jiǎn)并引物、基因特異性引物、載體特異性引物、部分錯(cuò)配引物等等的方法。本發(fā)明提供轉(zhuǎn)基因植物。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“轉(zhuǎn)基因”指的是已經(jīng)通過(guò)各種轉(zhuǎn)化方法之一接受外源或修飾的基因的細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)物、生物體（例如植物）和后代，其中該外源或修飾的基因來(lái)自與接受該外源或修飾的基因的生物體的物種相同或不同的物種。waxy基因：waxy基因是顆粒結(jié)合淀粉合成酶i（gbssi）基因。該基因編碼負(fù)責(zé)在發(fā)育的核的三倍體胚乳中和在單倍體花粉和胚囊中的直鏈淀粉生物合成的淀粉顆粒結(jié)合adp-葡萄糖-葡糖基轉(zhuǎn)移酶（ec2.4.1.242）?！皐x”指的是野生型等位基因，并且“wx”指的是無(wú)效的參照突變等位基因。術(shù)語(yǔ)wxs（又名wx-stonor）、wx-g、wx-b5和wx-m指的是在waxy基因中具有逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子插入的中間等位基因，如在wessler和varagona(pnas，82:4177-4181，1985)以及varagona等人(theplantcell，4:811-820，1992)中所述，其各自經(jīng)此引用全文并入本文。這些中間等位基因在具有該等位基因的植物中導(dǎo)致與在野生型植物中的蠟質(zhì)蛋白（waxyprotein）活性相比較低的蠟質(zhì)蛋白活性。該玉米waxy基因編碼具有seqidno:1的序列的蛋白。wx-stonor：玉米植物中的wx-stonor等位基因由該waxy基因的內(nèi)含子5的剪接供體位點(diǎn)處的逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子插入所導(dǎo)致。盡管該插入不會(huì)影響剪接機(jī)制，其導(dǎo)致與野生型等位基因相比更低水平的酶活性（例如僅為野生型的gbssi活性的大約9.5%）。因此，具有wx-stonor等位基因的植物具有比不具有該wx-stonor等位基因的相同植物更高的直鏈淀粉水平。sugary-2基因：sugary-2基因編碼淀粉合成酶同種型iia（ssiia，ec2.4.1.21）?！皊u2”指的是野生型等位基因，且“su2”指的是隱性的突變等位基因。sugary-2蛋白在玉米中的功能描述在zhang等人(plantmolecularbiology，54(6):865-879，2004)中，其經(jīng)此引用全文并入本文。該玉米野生型su2基因編碼具有seqidno:2的序列的野生型蛋白。玉米中的waxy基因和sugary-2基因的更多細(xì)節(jié)描述在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4428972、5954883、6828474、6960703和7678898中，其各自經(jīng)此引用全文并入本文。amioca?淀粉：該術(shù)語(yǔ)指的是由nationalstarchandchemicalcompany（現(xiàn)為ingredionincorporated）制造的amioca?玉米淀粉。wxwxwxsu2su2su2淀粉：該術(shù)語(yǔ)指的是從具有wxwxwxsu2su2su2的基因型的玉米胚乳中分離的淀粉。wxwxwxsu2su2su2淀粉：該術(shù)語(yǔ)指的是從具有wxwxwxsu2su2su2的基因型的玉米胚乳中分離的淀粉，其為waxy/sugary-2雙隱性突變體的胚乳。該突變的waxy基因有助于其良好的凍-融穩(wěn)定性，并且突變的sugary-2基因?qū)е露讨ф滈L(zhǎng)度。但是，該淀粉具有低淀粉顆粒完整性。該顆粒容易崩解，并且該淀粉具有低粘度。melojel?淀粉：該術(shù)語(yǔ)指的是由nationalstarchandchemicalcompany（現(xiàn)為ingredionincorporated）制造的melojel?玉米淀粉。對(duì)照玉米植物：該術(shù)語(yǔ)指的是用于比較的適當(dāng)?shù)膶?duì)照植物。在一些實(shí)施方案中，對(duì)照植物可以是野生型植物。在一些實(shí)施方案中，該對(duì)照植物是不具有本文中描述的中間waxy基因的植物。在一些實(shí)施方案中，該對(duì)照植物是制造wxwxwxsu2su2su2淀粉或wxwxwxsu2su2su2淀粉的玉米植物。因此，在一些實(shí)施方案中，該對(duì)照玉米植物是在胚乳中不具有wx-s等位基因的玉米植物。對(duì)照淀粉：該術(shù)語(yǔ)指的是對(duì)照淀粉。wxswxwxsu2su2su2：該術(shù)語(yǔ)指的是具有1劑量的wxs的玉米胚乳。wxswxwxsu2su2su2淀粉：該術(shù)語(yǔ)指的是從具有1劑量的wxs的玉米胚乳中分離的淀粉，該胚乳具有基因型wxswxwxsu2su2su2。wxswxswxsu2su2su2：該術(shù)語(yǔ)指的是具有2劑量的wxs的玉米胚乳。wxswxswxsu2su2su2淀粉：該術(shù)語(yǔ)指的是從具有2劑量的wxs的玉米胚乳中分離的淀粉，該胚乳具有基因型wxswxswxsu2su2su2。wxswxswxssu2su2su2：該術(shù)語(yǔ)指的是具有3劑量的wxs的玉米胚乳。wxswxswxssu2su2su2淀粉：該術(shù)語(yǔ)指的是從具有3劑量的wxs的玉米胚乳中分離的淀粉，該胚乳具有基因型wxswxswxssu2su2su2。下面的實(shí)施例舉例說(shuō)明了本發(fā)明的各個(gè)方面。當(dāng)然，該實(shí)施例應(yīng)理解為僅舉例說(shuō)明本發(fā)明的某些實(shí)施方案，并不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成限制。具有新功能的淀粉在一個(gè)方面，本公開(kāi)提供了衍生自包含中間gbssi等位基因的雙突變玉米植物的淀粉，所述中間gbssi等位基因具有比野生型gbssi基因（wx）更低的gbssi活性，但是具有比隱性的功能缺失的gbssi基因（wx）更高的gbssi活性。在一些實(shí)施方案中，具有中間gbssi等位基因的雙突變玉米植物是在胚乳中包含至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因的waxy/sugary-2玉米植物。在一些實(shí)施方案中，該waxy/sugary-2玉米植物通過(guò)具有wxwxsu2su2的基因型的第一玉米植物與具有wxswxssu2su2的基因型或wxswxsu2su2的基因型的第二玉米植物的異花傳粉來(lái)產(chǎn)生。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，該waxy/sugary-2玉米植物的胚乳具有1劑量、2劑量或3劑量的wxs等位基因，并且該胚乳具有wxswxwxsu2su2su2、wxswxswxsu2su2su2或wxswxswxssu2su2su2的基因型。在一些實(shí)施方案中，該淀粉包含如使用megazyme?直鏈淀粉/支鏈淀粉測(cè)定試劑盒測(cè)得的大約2重量%至大約20重量%的直鏈淀粉含量，以及如使用rva分析測(cè)得的比對(duì)照淀粉的糊化溫度高至少大約5%的水淀粉糊化溫度。直鏈淀粉含量：淀粉由直鏈淀粉和支鏈淀粉組成。直鏈淀粉是由α-d-葡萄糖單元制成并通過(guò)α(1→4)糖苷鍵連接的螺旋形聚合物。支鏈淀粉是包含α(1→4)和α(1→6)糖苷鍵的葡萄糖的高度支化聚合物。在α(1→6)鍵的情況下發(fā)生支化，其出現(xiàn)在大約每24至30個(gè)葡萄糖單元處。在一些實(shí)施方案中，淀粉中的直鏈淀粉含量可以使用直鏈淀粉/支鏈淀粉測(cè)定試劑盒，例如由megazyme?制造的直鏈淀粉/支鏈淀粉測(cè)定試劑盒測(cè)得，如實(shí)施例部分所述的那樣。觀察到雙突變玉米植物中g(shù)bssi基因的中間突變相對(duì)于具有無(wú)效等位基因gbssi基因的對(duì)照玉米植物提高了衍生自其的淀粉中的直鏈淀粉含量。例如，觀察到衍生自在胚乳中包含至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因的waxy/sugary-2玉米植物的淀粉的直鏈淀粉含量相對(duì)于對(duì)照玉米植物得到了提高。在一些實(shí)施方案中，衍生自在胚乳中具有至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因的玉米植物的淀粉具有大約2重量%至大約20重量%、大約4重量%至大約18重量%、大約5重量%至大約15重量%或大約8重量%至大約15重量%的直鏈淀粉含量，包括其間的所有值和子范圍。在其它實(shí)施方案中，該直鏈淀粉含量為大約5重量%、大約6重量%、大約7重量%、大約8重量%、大約9重量%、大約10重量%、大約11重量%、大約12重量%、大約13重量%、大約14重量%、大約15重量%、大約16重量%、大約17重量%或大約18重量%，包括其間的所有值。不受理論的限制，直鏈淀粉含量的提高預(yù)期將降低該淀粉中的支鏈淀粉含量，由此降低可用于與水性介質(zhì)相互作用的葡萄糖單元和氫鍵合基團(tuán)的總數(shù)。氫鍵合的這種降低應(yīng)當(dāng)對(duì)應(yīng)于所述淀粉與水性介質(zhì)的相互作用的強(qiáng)度的整體降低，并降低該淀粉的糊化性質(zhì)。但是，在本文中公開(kāi)的淀粉中，當(dāng)直鏈淀粉含量提高時(shí)，觀察到糊化曲線中的預(yù)料不到的改善。不受理論的限制，這種預(yù)料不到的結(jié)果可能歸因于在胚乳中包含至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因的waxy/sugary-2玉米植物中觀察到的支鏈長(zhǎng)度的提高。在該淀粉上較長(zhǎng)的支鏈具有更多葡萄糖單元，這與較短的支鏈長(zhǎng)度相比提高了與水性介質(zhì)的氫鍵合相互作用的數(shù)量。淀粉的糊化曲線可以通過(guò)已知方法來(lái)測(cè)量，如使用快速粘度分析儀（rva）（newportscientific，sydney，australia）。例如，rva可以測(cè)量糊化溫度（℃）、峰值粘度（rvu）、保持粘度（rvu）、最終粘度（rvu）、崩解粘度（rvu）和消減粘度（rvu）。在一些實(shí)施方案中，改善的糊化曲線允許凝膠化發(fā)生，尤其是在與對(duì)照淀粉相比較低的淀粉有效量和/或較高的糊化溫度下。淀粉凝膠化指的是在水和熱的存在下破壞淀粉分子的分子間鍵，使得氫鍵合位點(diǎn)（例如羥基基團(tuán)）能夠結(jié)合更多水的過(guò)程。為了測(cè)量淀粉糊化曲線，可以在中性ph下向水溶液中添加有效量的淀粉。例如，淀粉可以8重量%的固體水平添加到水溶液中。糊化溫度：本文中所用的糊化溫度旨在如實(shí)施例部分中所述的那樣測(cè)量。淀粉的糊化溫度是當(dāng)懸浮在水中時(shí)淀粉顆粒發(fā)生初始溶脹時(shí)的溫度。在一些實(shí)施方案中，本文中描述的淀粉具有使用如rva分析測(cè)得的比對(duì)照淀粉的糊化溫度高至少大約5%的水糊化溫度。在一些實(shí)施方案中，該水糊化溫度提高了大約1%至大約100%、大約1%至大約50%、大約5%至大約50%、大約5%至大約40%、大約5%至大約30%、大約5%至大約25%、大約5%至大約20%或大約5%至大約14%，包括其間的所有值和子范圍。在特定實(shí)施方案中，該水糊化溫度比對(duì)照玉米植物（如雙突變waxy/sugary-2玉米植物）高大約5%至大約14%。在其它實(shí)施方案中，與對(duì)照淀粉的糊化溫度相比，該水糊化溫度提高了至少大約2%、至少大約3%、至少大約4%、至少大約5%、至少大約6%、至少大約7%、至少大約8%、至少大約9%、至少大約10%、至少大約11%、至少大約12%、至少大約13%、至少大約14%、至少大約15%、至少大約16%、至少大約17%、至少大約18%、至少大約19%或至少大約20%，包括其間的所有值。在還有的其它實(shí)施方案中，該水糊化溫度提高了大約1℃至大約20℃、或大約5℃至大約10℃，包括其間的所有值和子范圍。在其它實(shí)施方案中，該水糊化溫度與對(duì)照淀粉的糊化溫度相比提高了至少大約4℃、至少大約5℃、至少大約6℃、至少大約7℃、至少大約8℃、至少大約9℃、至少大約10℃、至少大約11℃、至少大約12℃、至少大約13℃、至少大約14℃或至少大約15℃。在還有的其它實(shí)施方案中，本文中描述的淀粉具有至少大約50℃、至少大約55℃、至少大約60℃、至少大約65℃、至少大約70℃、至少大約75℃、至少大約80℃、至少大約85℃、至少大約90℃、至少大約95℃或至少大約100℃的水糊化溫度。在特定實(shí)施方案中，衍生自在胚乳中包含至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因的waxy/sugary-2玉米植物的淀粉具有大約55℃至大約68℃、或大約59℃至大約65℃的水糊化溫度，包括其間的所有值和子范圍。在其它實(shí)施方案中，該水糊化溫度為大約59℃、大約60℃、大約61℃、大約62℃、大約63℃、大約64℃、大約65℃、大約66℃、大約67℃或大約68℃，包括其間的所有值。結(jié)晶焓變：本文中所用的結(jié)晶焓變旨在如實(shí)施例部分中所述的那樣測(cè)量。結(jié)晶指的是通過(guò)沉淀從溶液中形成固體晶體的過(guò)程。在一些實(shí)施方案中，觀察到在waxy/sugary-2雙突變玉米植物中在胚乳中引入至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因相對(duì)于來(lái)自對(duì)照玉米植物的淀粉提高了該結(jié)晶焓變。焓變可以使用例如差示掃描量熱法（dsc）來(lái)測(cè)量。在一些實(shí)施方案中，該結(jié)晶焓變提高了大約10%至大約300%、大約10%至大約200%、大約10%至大約150%、大約10%至大約100%、或大約10%至大約50%，包括其間的所有值和子范圍。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，該結(jié)晶焓變?nèi)缡褂胐sc測(cè)得的比對(duì)照淀粉的結(jié)晶焓變高大約70%至大約200%。在一些實(shí)施方案中，該結(jié)晶焓變提高了至少大約10%、至少大約20%、至少大約30%、至少大約40%、至少大約50%、至少大約60%、至少大約70%、至少大約80%、至少大約90%、至少大約100%、至少大約110%、至少大約120%、至少大約130%、至少大約140%、至少大約150%、至少大約160%、至少大約170%、至少大約180%、至少大約190%或至少大約200%，包括其間的所有值。在一些實(shí)施方案中，該結(jié)晶焓變?yōu)榇蠹s1j/g至大約20j/g、大約5j/g至大約15j/g、大約6j/g至大約13j/g，包括其間的所有值和子范圍。在其它實(shí)施方案中，結(jié)晶度8重量%的焓變?yōu)榇蠹s4j/g、大約5j/g、大約6j/g、大約7j/g、大約8j/g、大約9j/g、大約10j/g、大約11j/g、大約12j/g、大約13j/g，包括其間的所有值。在特定實(shí)施方案中，該玉米植物在胚乳中包含一個(gè)wxs等位基因，且結(jié)晶焓變比衍生自對(duì)照植物的淀粉的結(jié)晶焓變高至少大約150%，所述對(duì)照植物具有wxwxwxsu2su2su2的胚乳基因型。在另一特定實(shí)施方案中，該玉米植物在胚乳中包含兩個(gè)wxs等位基因，且結(jié)晶焓變比衍生自對(duì)照植物的淀粉的結(jié)晶焓變高至少大約30%，所述對(duì)照植物具有wxwxwxsu2su2su2的胚乳基因型。在又一特定實(shí)施方案中，該玉米植物在胚乳中包含三個(gè)wxs等位基因，且結(jié)晶焓變比衍生自對(duì)照植物的淀粉的結(jié)晶焓變高至少大約75%，所述對(duì)照植物具有wxwxwxsu2su2su2的胚乳基因型。凍融穩(wěn)定性：本文中所用的凍融穩(wěn)定性旨在如實(shí)施例部分中所述的那樣測(cè)量。在一些實(shí)施方案中，本文中描述的淀粉表現(xiàn)出期望的凍融特性，例如改善的凍-融穩(wěn)定性。凍-融穩(wěn)定性可以通過(guò)以下方法測(cè)得：將有效量的淀粉添加到水中以形成漿料，隨后將其烹煮，并在冷凍/冷卻循環(huán)后測(cè)量脫水收縮。在一些實(shí)施方案中，向玉米植物的胚乳中引入至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因與對(duì)照淀粉相比不會(huì)降低由其衍生的淀粉的凍-融穩(wěn)定性。在其它實(shí)施方案中，向玉米植物的胚乳中引入至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因改善了該淀粉的凍-融穩(wěn)定性。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，該淀粉能夠承受總計(jì)至少三次到至少五次凍融循環(huán)。顆粒分布與完整性：本文中所用的顆粒分布與完整性旨在如實(shí)施例部分中所述的那樣測(cè)量。在一些實(shí)施方案中，觀察到在玉米植物的胚乳中引入至少一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因相對(duì)于對(duì)照淀粉改變了淀粉顆粒的尺寸分布。在一些這樣的實(shí)施方案中，如使用掃描電子顯微鏡觀察到的，本文中描述的淀粉的淀粉顆粒尺寸的分布包含與對(duì)照淀粉中小于5微米的顆粒的比例相比少至少大約40%的小于5微米的顆粒。本文中所用的顆粒完整性指的是該淀粉在溶于水性介質(zhì)之后保持為完整顆粒的能力。在一些實(shí)施方案中，如使用掃描電子顯微鏡觀察到的，本文中描述的淀粉是與衍生自對(duì)照玉米植物的淀粉相比表現(xiàn)出提高的完整性的顆粒。粘度：本文中所用的粘度旨在如實(shí)施例部分中所述的那樣測(cè)量。在一些實(shí)施方案中，本文中描述的淀粉具有如使用rva分析測(cè)得的比對(duì)照淀粉的水峰值粘度高至少大約10%的水峰值粘度。在一些實(shí)施方案中，該水峰值粘度提高了大約10%至大約300%、大約10%至大約250%、大約10%至大約200%、大約10%至大約150%、大約10%至大約100%或大約10%至大約50%，包括其間的所有值和子范圍。在一些實(shí)施方案中，該水峰值粘度提高了至少大約10%、至少大約20%、至少大約30%、至少大約40%、至少大約50%、至少大約60%至少大約70%、至少大約80%、至少大約90%、至少大約100%、至少大約110%、至少大約120%、至少大約130%、至少大約140%、至少大約150%、至少大約160%、至少大約170%、至少大約180%、至少大約190%或至少大約200%，包括其間的所有值。在一些實(shí)施方案中，在8重量%固體下該淀粉的水峰值粘度為大約100rvu至大約500rvu、大約100rvu至大約400rvu、大約100rvu至大約300rvu、大約100rvu至大約200rvu或大約100rvu至大約150rvu，包括其間的所有值和子范圍。在一些實(shí)施方案中，該水峰值粘度為大約150rvu、大約155rvu、大約160rvu、大約165rvu、大約170rvu、大約175rvu、大約180rvu、大約185rvu、大約190rvu、大約195rvu、大約200rvu、大約205rvu、大約210rvu、大約215rvu、大約220rvu、大約225rvu、大約230rvu、大約235rvu、大約240rvu、大約245rvu、大約250rvu、大約255rvu、大約260rvu、大約265rvu、大約270rvu、大約275rvu、大約280rvu、大約285rvu、大約290rvu、大約295rvu、大約300rvu、大約305rvu、大約310rvu、大約315rvu、大約320rvu、大約325rvu、大約330rvu、大約335rvu、大約340rvu、大約345rvu、大約350rvu、大約355rvu、大約360rvu、大約365rvu、大約370rvu、大約375rvu、大約380rvu、大約385rvu、大約390rvu、大約395rvu或大約400rvu，包括其間的所有值。在特定實(shí)施方案中，該waxy/sugary-2玉米植物在胚乳中包含一個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因，且該淀粉具有比具有wxwxwxsu2su2su2的胚乳基因型的對(duì)照植物的淀粉高大約110%的峰值粘度。在另一特定實(shí)施方案中，該waxy/sugary-2玉米植物在胚乳中包含兩個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因，且該淀粉具有比具有wxwxwxsu2su2su2的胚乳基因型的對(duì)照植物的淀粉高大約30%的峰值粘度。在又一特定實(shí)施方案中，該waxy/sugary-2玉米植物在胚乳中包含三個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因，且該淀粉具有比具有wxwxwxsu2su2su2的胚乳基因型的對(duì)照植物的淀粉高大約40%的峰值粘度。在甚至另一特定實(shí)施方案中，該waxy/sugary-2玉米植物在胚乳中包含兩個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因，且該淀粉具有比具有wxwxwxsu2su2su2的胚乳基因型的對(duì)照植物的淀粉高大約20%的峰值粘度。在又一特定實(shí)施方案中，該waxy/sugary-2玉米植物在胚乳中包含兩個(gè)wx-stonor（wxs）等位基因，且該淀粉具有比具有wxwxwxsu2su2su2的胚乳基因型的對(duì)照植物的淀粉高至少大約30%的峰值粘度。提?。簭谋景l(fā)明的植物的核中提取該淀粉可以通過(guò)本領(lǐng)域中公知的濕磨或干磨方法以標(biāo)準(zhǔn)方式來(lái)進(jìn)行，但是不限于這樣的方法。在一個(gè)典型的濕磨方法中，該植物通過(guò)強(qiáng)氣流、篩子和電磁鐵來(lái)清潔以除去不想要的材料。隨后將其浸泡在含有少量二氧化硫的溫水中。將浸泡水排空，軟化的核運(yùn)行通過(guò)磨碎機(jī)以將其分開(kāi)。除去胚芽并將剩余的混合物研磨，洗滌并篩分為漿料。通過(guò)離心將淀粉與谷蛋白分離，隨后將剩余的漿狀淀粉過(guò)濾、洗滌、再懸浮和再過(guò)濾。從植物中提取面粉或其變體可以通過(guò)干磨方法來(lái)完成。在適于本文但不排除其它程序的典型程序中，獲自本發(fā)明的植物的谷物首先徹底清潔并通過(guò)脫殼機(jī)，隨后調(diào)合或調(diào)理并通過(guò)去胚芽機(jī)。將來(lái)自去胚芽機(jī)的原料干燥并隨后冷卻，通過(guò)碎玉米分離器和吸引器，研磨，并最終根據(jù)需要整體還是單獨(dú)部分來(lái)進(jìn)行篩分。改性：可以理解的是，在上述提取方法之一中的一些修改，如使用低于通常所用溫度的浸泡水溫度可能是期望的，并將容易被淀粉制造業(yè)者所識(shí)別。如果需要的話，本文中的淀粉可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的程序來(lái)改性，如通過(guò)衍生化以形成醚或酯，如羥丙基醚、乙酸酯、磷酸酯、琥珀酸酯（例如辛烯基琥珀酸酯）、叔胺和季銨醚等等，或通過(guò)制造具有本文中定義的特性的淀粉的任何其它改性技術(shù)。本文中優(yōu)選的取代基是羥丙基、磷酸酯或乙酸酯基團(tuán)。出于商業(yè)目的而言，本文中的淀粉的一種改性是交聯(lián)以針對(duì)在制造操作中常常遇到的處理與加工條件來(lái)強(qiáng)化該顆粒，并提供能夠賦予食品系統(tǒng)期望的流變性質(zhì)的淀粉。本領(lǐng)域中已知的任何交聯(lián)劑可用于該目的，對(duì)于食品系統(tǒng)包括但不限于表氯醇、直鏈二羧酸酐、檸檬酸丙烯醛、磷酰氯、己二酸/乙酸混合酸酐和三偏磷酸鹽，并且在非食品系統(tǒng)中包括但不限于表氯醇、直鏈二羧酸酐、檸檬酸丙烯醛、磷酰氯、己二酸/乙酸混合酸酐、三偏磷酸鹽、甲醛、氰尿酰氯、二異氰酸酯和二乙烯基砜。使用本領(lǐng)域中已知的技術(shù)進(jìn)行該交聯(lián)反應(yīng)，例如在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)2,328,537和2,801,242中描述的那些。用于將淀粉改性的程序描述在m.w.rutenberg的章節(jié)“starchanditsmodification”，第22-26至22-47頁(yè)，handbookofwatersolublegumsandresins，r.l.davidson編著(mcgraw-hill，inc.，newyork，n.y.1980)中。得到合適的產(chǎn)物所需交聯(lián)劑的量將根據(jù)例如使用的交聯(lián)劑的類(lèi)型、交聯(lián)劑的濃度、反應(yīng)條件、和具有落在所需粘度范圍內(nèi)的交聯(lián)淀粉的必要性而變化。從業(yè)者將認(rèn)識(shí)到可以采用哪些量，因?yàn)檫@些在本領(lǐng)域中是公知的。通常，該量將低至該淀粉重量的大約0.001%，高至對(duì)食品用途被視為可接受的。本發(fā)明的淀粉還可以物理改性，如通過(guò)wo95/04082（1995年2月9日公開(kāi)）中描述的熱抑制。加工：還可以使該淀粉預(yù)膠化。制備預(yù)膠化淀粉的示例性方法公開(kāi)在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,280,851（pitchon等人）、美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,465,702（eastman等人）、美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,037,929（rajagopalan）、美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,131,953（kasica等人）和美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,149,799（rubens）中。使淀粉預(yù)膠化的常規(guī)程序是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，并描述在諸如以下的文獻(xiàn)中：第xxii章“productionanduseofpregelatinizedstarch”，starch:chemistryandtechnology，第iii卷industrialaspects，r.l.whistler和e.f.paschall編著，academicpress，newyork1967。本發(fā)明的淀粉可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的任何方法純化以除去該淀粉原有的或在淀粉改性過(guò)程中產(chǎn)生的異味和顏色。優(yōu)選用于處理本發(fā)明的淀粉的純化方法公開(kāi)在kasica等人在1992年2月7日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)07/832,838中。堿洗技術(shù)，對(duì)于旨在以顆?；蝾A(yù)膠化形式使用的淀粉而言也是可用的，并描述在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,187,272（bertalan等人）所代表的專(zhuān)利族中。衍生自本發(fā)明的淀粉的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，包括但不限于通過(guò)氧化、酶轉(zhuǎn)化（特別是通過(guò)α-淀粉酶）、酸水解、熱和/或酸糊精化、熱和/或剪切產(chǎn)物制備的流動(dòng)性或稀糊淀粉也可用于本文中。產(chǎn)生淀粉的植物本發(fā)明提供了產(chǎn)生上述淀粉的植物。所述產(chǎn)生淀粉的植物包括但不限于玉米、馬鈴薯、小麥、木薯、水稻、木薯和高粱。本發(fā)明的淀粉可以從玉米植物中，如從玉米植物的胚乳中提取。產(chǎn)生本發(fā)明的淀粉的玉米植物是waxy/sugary-2基因型的雙突變植物。該waxy基因位于玉米的9號(hào)染色體上，而sugary-2基因位于6號(hào)染色體上（參見(jiàn)m.g.nueffer，l.jones和m.zuber，“themutantsofmaize"（cropsciencesocietyofamerica，madison，wi，1968），第72和73頁(yè)）。本發(fā)明的植物對(duì)淀粉合成酶iia（su2）基因是純合隱性的，并且對(duì)突變的顆粒結(jié)合淀粉合成酶i（gbssi）基因是純合或雜合的。該突變的gbssi基因具有比野生型gbssi基因（wx）更低的gbssi活性，但是具有比隱性的功能缺失的gbssi基因（wx）更高的gbssi活性。如本文中所用，這樣的waxy突變基因被稱(chēng)為中間蠟質(zhì)突變體。在一些實(shí)施方案中，該中間蠟質(zhì)突變體具有野生型gbssi基因表達(dá)的低于30%、低于25%、低于20%、低于15%、低于10%或低于5%。在一些實(shí)施方案中，該中間蠟質(zhì)突變體具有野生型gbssi基因表達(dá)的大約5%、大約6%、大約7%、大約8%、大約9%、大約10%、大約11%、大約12%、大約13%、大約14%或大約15%。具有比野生型gbssi基因更低的gbssi活性但具有比隱性的功能缺失的gbssi基因更高的gbssi活性的中間gbssi基因可以是本領(lǐng)域中先前已知的那些，或可以通過(guò)任何合適的誘變方法來(lái)產(chǎn)生。突變等位基因如wxs（又名wx-stonor）、wx-g、wx-b5和wx-m具有中間gbssi活性。如wessler與varagona（pnas，82:4177-4181，1985）和varagona等人（theplantcell，4:811-820，1992）所述，這些突變等位基因是由于gbssi基因中的逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子插入。這些中間等位基因?qū)е铝司哂斜纫吧拖炠|(zhì)蛋白更低的活性的蠟質(zhì)蛋白。具有中間gbssi活性的附加突變等位基因可以通過(guò)合適的方法來(lái)產(chǎn)生。例如，逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子誘變可用于產(chǎn)生用于篩選具有突變的gbssi基因的玉米植物的群體，所述突變的gbssi基因具有中間gbssi活性。在一些實(shí)施方案中，wxs（又名wx-stonor）、wx-g、wx-b5和wx-m可以用作原材料以產(chǎn)生附加突變等位基因?？捎糜诋a(chǎn)生具有中間gbssi活性的突變等位基因的其它誘變方法包括但不限于化學(xué)誘變、輻射誘變、轉(zhuǎn)座子誘變、插入誘變、信號(hào)標(biāo)簽誘變、定點(diǎn)誘變和天然誘變。在又一些實(shí)施方案中，反義rna、核酶、dsrnai、rna干擾（rnai）可用于制造具有中間gbssi活性的突變等位基因。反義rna技術(shù)涉及在細(xì)胞中表達(dá)或向細(xì)胞中引入與細(xì)胞中的特定mrna中發(fā)現(xiàn)的序列互補(bǔ)或反義的rna分子（或rna衍生物）。通過(guò)與該mrna結(jié)合，該反義rna可以抑制編碼的基因產(chǎn)物的翻譯。使用反義技術(shù)減少或抑制特定植物基因的表達(dá)已經(jīng)描述在例如歐洲專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)271988，smith等人，nature，334:724-726(1988)；smith等人，plantmol.biol.，14:369-379(1990)中。核酶是具有催化結(jié)構(gòu)域和與特定mrna互補(bǔ)的序列的rna。核酶通過(guò)與該mrna結(jié)合（通過(guò)核酶的互補(bǔ)結(jié)構(gòu)域）并隨后使用催化結(jié)構(gòu)域分裂（降解）信息來(lái)起作用。rna干擾（rnai）是在動(dòng)物和植物中的序列特異性的、轉(zhuǎn)錄后基因沉默的或轉(zhuǎn)錄基因沉默的過(guò)程，其通過(guò)在序列中與沉默基因同源的雙鏈rna（dsrna）引發(fā)。該rnai技術(shù)例如描述在elibashir等人，methodsenzymol.26:199(2002)；mcmanus&sharp，naturerev.genetics3:737(2002)；pct申請(qǐng)wo01/75164；martinez等人，cell110:563(2002)；elbashir等人，supra；lagos-quintana等人，curr.biol.12:735(2002)；tuschl等人，naturebiotechnol.20:446(2002)；tuschl，chembiochem.2:239(2001)；harborth等人，j.cellsci.114:4557(2001)；等人，emboj.20:6877(2001)；lagos-quintana等人，science294:8538(2001)；hutvagner等人，loccit，834；elbashir等人，nature411:494(2001)。同樣在本發(fā)明的范圍內(nèi)的是由其中突變的wx和/或su2等位基因已經(jīng)通過(guò)易位、倒位或任何其它染色體工程方法來(lái)移至該植物基因組另一部分的突變體所產(chǎn)生的淀粉。此外，從由上述基因組成的人工突變和變異生長(zhǎng)的植物中提取的淀粉也適用于本文，所述植物可以通過(guò)已知的突變育種的標(biāo)準(zhǔn)方法來(lái)產(chǎn)生。同樣在本發(fā)明的范圍內(nèi)的是由玉米植物以外的植物產(chǎn)生的淀粉，只要產(chǎn)生該淀粉的植物包含具有中間gbssi活性的玉米gbssi基因的突變直系同源物和玉米ssiia基因的隱性突變直系同源物。在一些實(shí)施方案中，該植物可以是小麥、木薯、水稻、木薯、西米、馬鈴薯或高粱。在一些實(shí)施方案中，除玉米以外的植物中的直系同源gbssi基因編碼具有與seqidno:1至少80%、至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高的同一性的蛋白，并具有該gbssi活性。在一些實(shí)施方案中，該直系同源物具有uniprot條目號(hào)o82627（antirrhinummajus（金魚(yú)草））、p12615（avenasativa（燕麥））、q42968（oryzaglaberrima（非洲水稻））、q43784（manihotesculenta（木薯））、p0c585（oryzasativa（水稻））、q00775（solanumtuberosum（馬鈴薯））、p27736（triticumaestivum（小麥））、q43134（sorghumbicolor（高粱））、q43092（pisumsativum（豌豆））、p84766（aegilopstauschiisubsp.strangulata（山羊草））、q0dev5（oryzasativasubsp.japonica（水稻））、q42857（ipomoeabatatas（甘薯））、p84633（fagopyrumesculentum（普通蕎麥））、p84765（secalecereale（黑麥））、q9maq0（arabidopsisthaliana）、p09842（hordeumvulgare（大麥））或a2y8x2（oryzasativasubsp.indica（水稻））的序列，其各自經(jīng)此引用整體并入本文。在一些實(shí)施方案中，除玉米以外的植物中的直系同源ssiia基因編碼具有與seqidno:2至少80%、至少81%、至少82%、至少83%、至少84%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或更高的同一性的蛋白，并具有ssiia活性。在一些實(shí)施方案中，該直系同源物具有uniprot條目號(hào)v6bpg5（triticumurartu（紅色野生單粒小麥））、v6bpn2（triticummonococcumsubsp.monococcum）、c3w8l4（hordeumvulgarevar.distichum（訓(xùn)化大麥））、e2ghr4（oryzasativasubsp.indica（水稻））或e2ghr6（oryzasativasubsp.japonica（水稻））的序列，其各自經(jīng)此引用整體并入本文。在一些實(shí)施方案中，為了產(chǎn)生具有中間wx突變體和隱性su2突變體的雙突變植物，可以進(jìn)行在具有中間wx突變體的植物與具有隱性su2突變體的植物之間的異花傳粉。例如，可以在純合wxs突變體（wxswxssu2su2）或雜合wxs突變體（wxswxsu2su2）與純合waxy/su2突變體（wxwxsu2su2）或雜合waxy/su2突變體（wxwxsu2su2或wxwxsu2su2）之間進(jìn)行異花傳粉。在雜交后，具有wxswxsu2su2的基因型的f1代的自花傳粉可用于產(chǎn)生f2植物?？梢韵鄳?yīng)地分離在胚乳中具有0、1、2或3劑量的wxs基因和3劑量的隱性su2基因的植物（例如具有wxwxwxsu2su2su2、wxswxwxsu2su2su2、wxswxswxsu2su2su2或wxswxswssu2su2su2的基因型的胚乳）。這僅僅是育種方法的一個(gè)實(shí)例，可以采用其它育種方案，并且其在本發(fā)明的范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，其胚乳具有至少1劑量的中間waxy等位基因和隱性sugary-2等位基因的植物的田間生產(chǎn)是通過(guò)使雌性玉米植物與雄性玉米植物雜交來(lái)進(jìn)行。典型的植物布置是一行雄性對(duì)幾行雌性。雌性行通過(guò)本領(lǐng)域已知的各種其它方法（如細(xì)胞質(zhì)或基因手段）去雄或賦予雄性不育。本發(fā)明中使用的淀粉可以獲自自交系，或者該淀粉可以獲自雜交種，該雜交種衍生自含有中間waxy/隱性su2雙突變體的自交系。雖然玉米是本文中蠟質(zhì)淀粉來(lái)源的示例性植物，本發(fā)明還適用于其它植物物種，例如蠟質(zhì)大米、蠟質(zhì)大麥和蠟質(zhì)高粱，條件是它們具有中間waxy基因和隱性su2基因。育種方法為了制造本發(fā)明的植物，可以使用合適的育種或選擇方法。常用的選擇方法通常包括譜系選擇、改良的譜系選擇、混合選擇、輪回選擇和回交育種。開(kāi)放授粉的種群：這樣的作物如黑麥、許多玉米和甜菜、牧草、豆類(lèi)如苜蓿和三葉草，以及熱帶樹(shù)木作物如可可、椰子、油棕櫚和一些橡膠的開(kāi)放授粉種群的改善基本上取決于改變基因的頻率，目標(biāo)是固定有利等位基因同時(shí)保持高（但遠(yuǎn)非最大）雜合度。在這樣的種群中的均一性是不可能的，在開(kāi)放授粉品種中的純真型是該種群作為整體的統(tǒng)計(jì)特征，而非個(gè)體植物的特性。因此，開(kāi)發(fā)授粉種群的異質(zhì)性與自交系、克隆和雜交系的同質(zhì)性（或幾乎同樣）形成對(duì)比。種群改善方法天然地分成兩組，基于純表型選擇的那些（通常稱(chēng)為混合選擇），和基于采用后代測(cè)試的選擇的那些。種群間改善利用了開(kāi)放育種種群的概念；允許基因從一個(gè)種群流向另一個(gè)。一個(gè)種群（栽培品種、品系、生態(tài)型或任何種質(zhì)源）中的植物與來(lái)自其它種群的植物自然地（例如通過(guò)風(fēng)）雜交，或是通過(guò)手工或通過(guò)蜜蜂（通常為apismelliferal.或megachilerotundataf.）雜交。施加選擇以通過(guò)分離具有來(lái)自?xún)蓚€(gè)來(lái)源的期望性狀的植物來(lái)改善一個(gè)（或有時(shí)為兩個(gè)）種群?；旧洗嬖趦煞N開(kāi)放授粉群體改善的主要方法。首先，存在這樣的情況，其中通過(guò)所選擇的選擇程序一同改變種群。結(jié)果是通過(guò)在孤立的自身內(nèi)隨機(jī)交配可無(wú)限繁殖的改善的種群。第二，合成品種獲得了與種群改善相同的最終結(jié)果，但是本身不能如此繁殖；其必須由親本系或克隆重構(gòu)。這些用于改善開(kāi)放授粉種群的植物育種程序?qū)Ρ绢I(lǐng)域技術(shù)人員是公知的，并且常規(guī)用于改善異花授粉植物的育種程序的全面評(píng)述在大量文本和文章中提供，包括：allard，principlesofplantbreeding，johnwiley&sons，inc.(1960)；simmonds，principlesofcropimprovement，longmangrouplimited(1979)；hallauer和miranda，quantitativegeneticsinmaizebreeding，iowastateuniversitypress(1981)；和jensen，plantbreedingmethodology，johnwiley&sons，inc.(1988)?；旌线x擇：在混合選擇中，選擇期望的個(gè)體植物，收獲，并且種子在未經(jīng)后代測(cè)試的情況下復(fù)合以產(chǎn)生下一代。由于選擇僅基于母本，并且不存在對(duì)授粉的控制，混合選擇相當(dāng)于具有選擇的隨機(jī)交配形式。如本文中所述，混合選擇的目的在于提高種群中優(yōu)質(zhì)基因型的比例。合成：通過(guò)在所有可能的雜交組合中針對(duì)良好配合力所選擇的多種基因型相互之間的雜交來(lái)產(chǎn)生合成品種，隨后通過(guò)開(kāi)放授粉維持該品種。無(wú)論親本是（或多或少自交）種子繁殖系，如在一些甜菜和豆類(lèi)（vicia）中，或是克隆，如在牧草、三葉草和苜蓿中，原則上沒(méi)有差異。針對(duì)一般配合力選擇親本，有時(shí)通過(guò)測(cè)交或頂交，更通常通過(guò)多系雜交。親本種子系可以故意自交（例如通過(guò)自花受精或姐妹種雜交）。但是，即使親本并非故意自交，在系維護(hù)過(guò)程中在系內(nèi)的選擇將確保出現(xiàn)一些自交。克隆的親本當(dāng)然將保持不變和高度雜合。合成物可以直接從親本種子生產(chǎn)轉(zhuǎn)移到農(nóng)民還是必須首先經(jīng)歷一次或兩次繁殖周期，這取決于種子生產(chǎn)和對(duì)種子的需求的規(guī)模。在實(shí)踐中，牧草和三葉草通常繁殖一次或兩次，由此顯著從原始合成物中除去。雖然有時(shí)采用混合選擇，但是對(duì)多系雜交而言后代測(cè)試通常是優(yōu)選的，因?yàn)樗鼈兊牟僮骱?jiǎn)便性和與目標(biāo)的顯著相關(guān)性，即在合成中利用一般配合力。進(jìn)入合成的親本系或克隆的數(shù)量變化很大。在實(shí)踐中，親本系的數(shù)量為10至數(shù)百，平均100-200。由100或更多個(gè)克隆形成的基礎(chǔ)廣泛的合成物預(yù)期在種子繁殖過(guò)程中比基礎(chǔ)狹窄的合成物更穩(wěn)定。純種品種：純種品種是通過(guò)從分離種群中選出個(gè)體植物開(kāi)發(fā)的優(yōu)良基因型，隨后是自花授粉后代的繁殖和種子增加，并對(duì)幾代仔細(xì)測(cè)試該基因型。這是一種開(kāi)放授粉方法，適用于天然自花傳粉物種。這種方法可以在物種開(kāi)發(fā)中與混合選擇結(jié)合使用。純種和混合選擇組合的變體是在自花授粉作物中產(chǎn)生品種的最常見(jiàn)方法。雜交種：雜交種是來(lái)自不同基因型的親本之間的雜交的個(gè)體植物。商業(yè)雜交種現(xiàn)在廣泛用于許多作物，包括玉米（玉蜀黍）、高粱、甜菜、向日葵和花椰菜。雜交種可以多種不同方式形成，包括通過(guò)直接使兩種親本雜交（單交種）、通過(guò)單交種與另一親本雜交（三向雜交或三交種）、或通過(guò)兩種不同雜交種雜交（四向雜交或雙交雜交種）。譜系選擇：譜系育種通常用于改善自花傳粉作物或異花傳粉作物的自交系。將具有有利的互補(bǔ)性狀的兩種親本雜交以產(chǎn)生f1。通過(guò)一個(gè)或多個(gè)f1的自交或通過(guò)兩個(gè)f1的互交（同胞交配）來(lái)產(chǎn)生f2種群。該雙單倍體育種方法或其它倍性降低技術(shù)也可以使用。通常在f2種群中開(kāi)始最佳個(gè)體的選擇；隨后，從f3開(kāi)始，選擇最佳家族中的最佳個(gè)體。家族或涉及這些家族的個(gè)體的雜交組合的復(fù)制測(cè)試通常跟隨f4代以提高對(duì)具有低遺傳力的性狀選擇的有效性。在同系交配的晚期（即f6和f7），測(cè)試最佳品系或表型相似品系的混合物的新品種的潛在釋放。類(lèi)似地，通過(guò)雙單倍體系統(tǒng)開(kāi)發(fā)新品種需要選擇栽培品種，隨后在重復(fù)區(qū)中進(jìn)行兩年到五年的測(cè)試?；亟挥N：回交育種已經(jīng)用于將簡(jiǎn)單遺傳的高度可遺傳性狀的基因轉(zhuǎn)移到作為輪回親本的期望的純合栽培品種或自交系中。待轉(zhuǎn)移的性狀來(lái)源稱(chēng)為供體親本。所得植物預(yù)期具有該輪回親本（例如栽培品種）的屬性和從該供體親本轉(zhuǎn)移的期望性狀。在初始雜交后，選擇具有供體親本的表型的個(gè)體，并反復(fù)與該輪回親本雜交（回交）。所得植物預(yù)期具有該輪回親本（例如栽培品種）的屬性和從該供體親本轉(zhuǎn)移的期望性狀。群體分離分析（bsa）：bsa（又名群分離分析或群組分離分析）是由michelmore等人（michelmore等人，1991，identificationofmarkerslinkedtodisease-resistancegenesbybulkedsegregantanalysis：arapidmethodtodetectmarkersinspecificgenomicregionsbyusingsegregatingpopulations，proceedingsofthenationalacademyofsciences，usa，99:9828-9832）和quarrie等人（quarrie等人，1999，journalofexperimentalbotany，50(337):1299-1306）描述的方法。對(duì)相關(guān)性狀的bsa而言，采用qtl分析選擇具有某些不同表型的親本系并將其雜交以產(chǎn)生f2、加倍單倍體或重組自交系種群。該種群隨后進(jìn)行表型以確定具有性狀的高或低表達(dá)的個(gè)體植物或品系。制備兩個(gè)dna混合池，一個(gè)來(lái)自具有一種表型（例如對(duì)病毒的抗性）的個(gè)體，另一個(gè)來(lái)自具有反向表型（例如對(duì)病毒易感）的個(gè)體，并用分子標(biāo)記分析等位基因頻率。如果該標(biāo)記是顯性的（例如rapds），在每個(gè)混合池中僅需要幾個(gè)個(gè)體（例如每個(gè)混合池10株植物）。當(dāng)標(biāo)記是共顯性時(shí)（例如rflps），需要更多的個(gè)體。連接到該表型的標(biāo)記可以被識(shí)別并用于育種或qtl作圖。定向誘導(dǎo)基因組局部病變（tilling?）：本申請(qǐng)的育種方案可以包括采用tilling?植物栽培品種的雜交。tilling?是分子生物學(xué)中的一種方法，其能夠在特定基因中定向鑒定突變。tilling?在2000年引入，使用模型植物arabidopsisthaliana。tilling?已經(jīng)在其它生物體如斑馬魚(yú)、玉米、小麥、水稻、大豆、番茄和brassicarapavar.nipposinica中作為反向遺傳學(xué)方法使用。該方法將采用化學(xué)誘變劑（例如甲磺酸乙酯（ems））的標(biāo)準(zhǔn)和有效的誘變技術(shù)與識(shí)別靶基因中單堿基突變（也稱(chēng)為點(diǎn)突變）的敏感dna篩選技術(shù)結(jié)合。ecotilling是使用tilling?技術(shù)尋找個(gè)體中的天然突變的方法，通常用于群體遺傳學(xué)分析（參見(jiàn)comai等人，2003theplantjournal37，778-786；gilchrist等人，2006mol.ecol.15，1367-1378；mejlhede等人，2006plantbreeding125，461-467；nieto等人，2007bmcplantbiology7，34-42，其各自經(jīng)此引用出于所有目的并入本文）。decotilling是tilling?和ecotilling的修改，其使用廉價(jià)的方法來(lái)鑒定片段（garvin等人，2007，deco-tilling：aninexpensivemethodforsnpdiscoverythatreducesascertainmentbias.molecularecologynotes7，735-746）。該tilling?法依賴(lài)于多個(gè)等位基因（其可以來(lái)自雜合子或多個(gè)純合子與雜合子的池）在pcr中擴(kuò)增、加熱并隨后緩慢冷卻時(shí)形成的雜合雙鏈的形成。在兩條dna鏈的錯(cuò)配（在tilling?中的誘導(dǎo)突變或天然突變或在ecotilling中的snp）處形成“泡”，其隨后被單鏈核酸酶分裂。產(chǎn)物隨后在幾個(gè)不同平臺(tái)上通過(guò)尺寸分離。關(guān)于tilling?的方法和組合物的更詳細(xì)描述可以在us5994075、us2004/0053236a1、wo2005/055704和wo2005/048692中找到，其各自經(jīng)此引用出于所有目的并入本文。由此在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的育種方法包括用一種或多種具有一個(gè)或多個(gè)鑒定的突變的tilling?植物系進(jìn)行育種。突變育種：突變育種是向植物中引入新性狀的另一種方法。自發(fā)發(fā)生或人工誘導(dǎo)的突變對(duì)植物育種者而言可以是變異性的可用來(lái)源。人工誘變的目的是提高所需特性的突變率。突變率可以通過(guò)許多不同的手段或突變?cè)噭﹣?lái)提高，包括溫度、長(zhǎng)期種子儲(chǔ)存、組織培養(yǎng)條件、輻射（如x射線、γ射線、中子、β輻射或紫外輻射）、化學(xué)誘變劑（如堿基類(lèi)似物，如5-溴-尿嘧啶）、抗生素、烷基化劑（如硫芥、氮芥、環(huán)氧化物、亞乙基胺、硫酸鹽、磺酸鹽、砜或內(nèi)酯）、疊氮化物、羥胺、亞硝酸或吖啶。一旦通過(guò)誘變觀察到所需性狀，隨后可以通過(guò)傳統(tǒng)育種技術(shù)將該性狀并入現(xiàn)有種質(zhì)。突變育種的細(xì)節(jié)可以在w.r.fehr，1993，principlesofcultivardevelopment，macmillanpublishingco.中找到。新的育種技術(shù)，如涉及使用鋅指核酸酶或寡核苷酸定向誘變的技術(shù)也應(yīng)當(dāng)用于產(chǎn)生遺傳變異性和向品種中引入新的性狀。在一些實(shí)施方案中，突變育種包括單基因座轉(zhuǎn)換。單基因座可以含有幾個(gè)基因和/或轉(zhuǎn)基因，如用于抗病性的轉(zhuǎn)基因，其在相同的表達(dá)載體中還含有用于除草劑抗性的轉(zhuǎn)基因。用于除草劑抗性的基因可以用作可選標(biāo)記和/或用作表型性狀。位點(diǎn)特異性整合系統(tǒng)的單基因座轉(zhuǎn)換允許在轉(zhuǎn)換的基因座處整合多個(gè)基因。單基因座轉(zhuǎn)換還能夠?qū)υ撝参锏幕蚪M進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)位點(diǎn)特異性改變。在一些實(shí)施方案中，通過(guò)基因組編輯進(jìn)行單基因座轉(zhuǎn)換，即采用工程化核酸酶的基因組編輯（geen）。在一些實(shí)施方案中，該基因組編輯包括使用一種或多種工程化核酸酶。在一些實(shí)施方案中，該工程化核酸酶包括但不限于鋅指核酸酶（zfn）、轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)子核酸酶（talen）、crispr/cas系統(tǒng)和工程化的大范圍核酸酶重新工程化的歸位內(nèi)切酶。在一些實(shí)施方案中，單基因座轉(zhuǎn)換改變了該植物基因組的一個(gè)或多個(gè)核酸。雙單倍體和染色體倍增：獲得純合植物而無(wú)需雜交兩個(gè)親本系并隨后長(zhǎng)時(shí)間選擇分離后代和/或多次回交的一種方法是產(chǎn)生單倍體并隨后將染色體倍增以形成雙單倍體。單倍體植物可以自發(fā)地發(fā)生，或可以經(jīng)由化學(xué)處理或通過(guò)使植物與誘導(dǎo)物系雜交來(lái)人工誘導(dǎo)（seymour等人，2012，pnas，第109卷，第4227-4232頁(yè)；zhang等人，2008plantcellrep.dec27(12)1851-60）。單倍體后代的產(chǎn)生可以經(jīng)由多種機(jī)制發(fā)生，其可以在配子形成過(guò)程中影響染色體的分布。單倍體的染色體組有時(shí)自發(fā)地倍增以產(chǎn)生純合雙單倍體（dh）。混倍體（其是含有具有不同倍性的細(xì)胞的植物）有時(shí)可能出現(xiàn)并可以代表經(jīng)歷染色體倍增以便自發(fā)產(chǎn)生雙單倍體組織、器官、芽、花部分或植物的植物。另一種常見(jiàn)技術(shù)是用染色體倍增處理如秋水仙堿來(lái)誘導(dǎo)形成雙單倍體植株（el-hennawy等人，2011第56卷，第2期，第63-72頁(yè)；maluszynski編著的doubledhaploidproductionincropplants2003，isbn1-4020-1544-5）。產(chǎn)生加倍單倍體植株得到了高度一致的栽培品種，并且作為長(zhǎng)期作物的性自交的替代品是尤其期望的。通過(guò)產(chǎn)生雙單倍體后代，遺傳性狀的可能的基因組合數(shù)量更易于管理。由此，有效的雙單倍體技術(shù)可以顯著減少自交和栽培品種開(kāi)發(fā)的時(shí)間和成本。原生質(zhì)體融合：在另一種植物育種方法中，原生質(zhì)體融合也可用于將賦予性狀的基因組材料由供體植物轉(zhuǎn)移至受體植物。原生質(zhì)體融合是兩個(gè)或多個(gè)原生質(zhì)體（細(xì)胞壁通過(guò)酶處理被除去的細(xì)胞）之間的誘導(dǎo)性或自發(fā)性結(jié)合（如體細(xì)胞雜交）以產(chǎn)生單個(gè)雙核或多核細(xì)胞。將甚至可以用不能在自然界中混種的植物物種獲得的融合細(xì)胞組織培養(yǎng)成表現(xiàn)出所需性狀的組合的雜交植物。組織培養(yǎng)物：本文中所用的術(shù)語(yǔ)“組織培養(yǎng)物”表示包含相同或不同類(lèi)型的分離細(xì)胞或組織成植物部分的這樣的細(xì)胞的集合的組合物。組織培養(yǎng)物的示例性類(lèi)型是可以產(chǎn)生在植物或植物部分中完整的組織培養(yǎng)物的原生質(zhì)體、胼胝體、植物簇和植物細(xì)胞，所述植物部分例如胚芽、花粉、花、種子、葉、莖、根、根尖、花藥、雌蕊、分生細(xì)胞、腋芽、子房、種皮、胚乳、下胚軸、子葉等等。用于制備和維護(hù)植物組織培養(yǎng)物的手段在本領(lǐng)域中是公知的。例如，包含器官的組織培養(yǎng)物已經(jīng)用于產(chǎn)生再生植物。美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,959,185、5,973,234和5,977,445描述了某些技術(shù)，其公開(kāi)內(nèi)容經(jīng)此引用并入本文。通過(guò)下面的實(shí)施例和實(shí)施方案進(jìn)一步舉例描述本發(fā)明，所述實(shí)施例和實(shí)施方案不應(yīng)解釋為限制性的。在整個(gè)本申請(qǐng)中引用的所有參考文獻(xiàn)、專(zhuān)利和公開(kāi)的專(zhuān)利申請(qǐng)的內(nèi)容，以及附圖和序列表均經(jīng)此引用并入本文。實(shí)施方案1．淀粉，包含：如使用直鏈淀粉/支鏈淀粉測(cè)定試劑盒測(cè)得的大約2重量%至大約20重量%的直鏈淀粉含量；和如使用rva分析測(cè)得的比對(duì)照淀粉的淀粉糊化溫度高至少大約5%的水淀粉糊化溫度，其中，所述淀粉衍生自在胚乳中包含至少一個(gè)wxs等位基因的waxy/sugary-2玉米植物。2．實(shí)施方案1的淀粉，其中直鏈淀粉含量為大約8重量%至大約15重量%。3．實(shí)施方案1或2任一項(xiàng)的淀粉，其中水糊化溫度比對(duì)照淀粉的水糊化溫度高大約5%至大約14%。4．實(shí)施方案1-3任一項(xiàng)的淀粉，進(jìn)一步具有如使用rva分析測(cè)得的比對(duì)照淀粉的結(jié)晶焓變高至少大約30%的結(jié)晶焓變。5．實(shí)施方案4的淀粉，其中如使用差示掃描量熱計(jì)（dsc）測(cè)得的，該結(jié)晶焓變比對(duì)照淀粉的結(jié)晶焓變高大約70%至大約200%。6．實(shí)施方案1-4任一項(xiàng)的淀粉，進(jìn)一步具有淀粉顆粒尺寸的分布，其中如使用掃描電子顯微鏡觀察到的，該淀粉顆粒尺寸的分布包含與對(duì)照淀粉中小于5微米的顆粒的比例相比少至少大約40%的小于5微米的顆粒。7．實(shí)施方案1-6任一項(xiàng)的淀粉，其中如使用掃描電子顯微鏡觀察到的，該淀粉是與對(duì)照淀粉相比表現(xiàn)出提高的完整性的顆粒。8．實(shí)施方案1-7任一項(xiàng)的淀粉，其中該淀粉能夠承受至少三次凍融循環(huán)。9．實(shí)施方案8的淀粉，其中該淀粉能夠承受至少三次到至少五次凍融循環(huán)。10．實(shí)施方案1-9任一項(xiàng)的淀粉，其中該waxy/sugary-2玉米植物通過(guò)具有wxwxsu2su2的基因型的第一玉米植物與具有wxswxssu2su2的基因型或wxswxsu2su2的基因型的第二玉米植物的異花傳粉來(lái)產(chǎn)生。11．實(shí)施方案1-10任一項(xiàng)的淀粉，其中該waxy/sugary-2玉米植物的胚乳具有1劑量、2劑量或3劑量的wxs等位基因，并且該胚乳具有wxswxwxsu2su2su2、wxswxswxsu2su2su2或wxswxswxssu2su2su2的基因型。12．用于改善淀粉的糊化曲線中的至少一個(gè)特性的方法，包括向蠟質(zhì)玉米植物的胚乳中引入至少一個(gè)wxs等位基因，其中衍生自在胚乳中包含至少一個(gè)wxs等位基因的蠟質(zhì)玉米植物的所得淀粉具有如使用rva分析測(cè)得的比對(duì)照淀粉的淀粉糊化溫度高至少大約5%的水淀粉糊化溫度，由此與對(duì)照淀粉相比改善該淀粉的糊化曲線中的至少一個(gè)特性。13．雙突變玉米植物，其中該玉米植物對(duì)淀粉合成酶iia（su2）基因是純合隱性的，并且對(duì)突變的顆粒結(jié)合淀粉合成酶i（gbssi）基因是純合或雜合的，其中該突變的gbssi基因具有比野生型gbssi基因（wx）更低的gbssi活性，但是具有比隱性的功能缺失的gbssi基因（wx）更高的gbssi活性。14．實(shí)施方案13的雙突變玉米植物，其中該突變的gbssi基因是wx-stonor（wxs）等位基因。15．實(shí)施方案14的雙突變玉米植物，其中該植物通過(guò)具有wxwxsu2su2的基因型的第一玉米植物與具有wxswxssu2su2的基因型或wxswxsu2su2的基因型的第二玉米植物的異花傳粉來(lái)產(chǎn)生。16．實(shí)施方案15的雙突變玉米植物，其中該玉米植物的胚乳具有1劑量、2劑量或3劑量的wxs等位基因，其中所述胚乳具有wxswxwxsu2su2su2、wxswxswxsu2su2su2或wxswxswxssu2su2su2的基因型。17．實(shí)施方案13-16任一項(xiàng)的雙突變玉米植物，其中在該玉米植物的胚乳中產(chǎn)生的淀粉與具有wxwxwxsu2su2su2的基因型的雙waxy/sugary-2隱性突變玉米植物的胚乳中產(chǎn)生的淀粉相比具有更高的糊化溫度。18．實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變玉米植物的種子。19．實(shí)施方案13-18任一項(xiàng)的雙突變玉米植物的植物部分、植物細(xì)胞或組織培養(yǎng)物。20．實(shí)施方案19的植物部分，其中該植物部分選自胚乳、葉、花、胚珠、花粉、根莖和接穗。21．生產(chǎn)淀粉的方法，包括從實(shí)施方案13-20任一項(xiàng)的雙突變玉米植物的胚乳中獲得淀粉。22．生產(chǎn)淀粉的方法，包括種植實(shí)施方案13-21任一項(xiàng)的雙突變玉米植物，并從該雙突變玉米植物收獲種子。23．生產(chǎn)玉米種子的方法，包括使第一親本玉米植物與第二親本玉米植物雜交并收獲所得玉米種子，其中所述第一親本玉米植物和/或第二親本玉米植物是實(shí)施方案13-22任一項(xiàng)的雙突變玉米植物。24．生產(chǎn)玉米種子的方法，包括使實(shí)施方案13-23任一項(xiàng)的雙突變玉米植物自花傳粉，并收獲所得玉米種子。25．無(wú)性繁殖實(shí)施方案13-24任一項(xiàng)的玉米植物的方法，所述方法包括收集實(shí)施方案1-11任一項(xiàng)的植物部分并由所述部分再生植物。26．生產(chǎn)衍生自實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變玉米植物的玉米植物的方法，該方法包括使自實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變植物自花傳粉至少一次以產(chǎn)生衍生自實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變植物的后代植物。27．生產(chǎn)衍生自實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變植物的玉米植物的方法，該方法包括使實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變植物與第二玉米植物雜交以產(chǎn)生實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變植物的后代植物。28．生產(chǎn)玉米植物的方法，包括向玉米植物中引入轉(zhuǎn)基因，其中該轉(zhuǎn)基因賦予實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變植物的期望表型。29．生產(chǎn)玉米植物的方法，包括基因編輯以產(chǎn)生基因序列，所述基因序列賦予實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變植物的期望表型。30．生產(chǎn)玉米植物的方法，包括引入突變以產(chǎn)生基因序列，所述基因序列賦予實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變植物的期望表型。31．從實(shí)施方案13-17任一項(xiàng)的雙突變玉米植物中提取的淀粉。32．從實(shí)施方案15的雙突變玉米植物中提取的淀粉。33．從實(shí)施方案16的雙突變玉米植物的胚乳中提取的淀粉。實(shí)施例1生成具有1、2或3劑量的wxs等位基因的谷物由于玉米胚乳的三倍體性質(zhì)，其中來(lái)自母本的兩個(gè)極性核通過(guò)來(lái)自父本的一個(gè)精細(xì)胞受精，可能存在三種基因型組合。使用wxswxssu2su2植物作為雌性，其通過(guò)wxwxsu2su2雄性授粉導(dǎo)致“劑量-2”或wxswxswxsu2su2su2谷物。使用wxswxssu2su2作為雄性，其授粉wxwxsu2su2雌性導(dǎo)致“劑量-1”或wxswxwxsu2su2su2谷物。wxswxssu2su2的自花傳粉導(dǎo)致“劑量-3”或wxswxswxssu2su2su2谷物。wxs劑量胚乳基因型(1wxs)wxswxwxsu2su2su2(2wxs)wxswxswxsu2su2su2(3wxs)wxswxswxssu2su2su2來(lái)自wxwxwxsu2su2su2種子的淀粉(0wxs)wxwxwxsu2su2su2amioca?淀粉(0wxs)wxwxwxsu2su2su2來(lái)自wxwxwxsu2su2su2的淀粉(0wxs)wxwxwxsu2su2su2實(shí)施例2使用快速粘度糊化儀（rva）的淀粉的粘度使用快速粘度糊化儀（newportscientific，edenprairie，minn.）測(cè)定衍生自在隱性sugary-2突變植物中含有0、1、2和3劑量的wxs等位基因的植物的玉米淀粉的粘度。包括amioca?淀粉和wxwxwxsu2su2su2淀粉作為對(duì)照。與所述淀粉分離的胚乳的基因型總結(jié)在上表中。使用megazyme?直鏈淀粉試劑盒測(cè)量直鏈淀粉含量。隨著gbssi活性的提高，該淀粉的直鏈淀粉含量提高。wxwxwxsu2su2su2淀粉（7.4%）、amioca?淀粉（7.1%）和wxwxwxsu2su2su2淀粉（6.1%）的直鏈淀粉含量低于waxystonor（12.8%）和在胚乳中具有1至3劑量的wxs基因的wxwxwxsu2su2su2淀粉（8.2-14.6%）。wxwxwxsu2su2su2淀粉的直鏈淀粉含量（7.4%、8.2%、13.8%和14.6%）隨著wxs劑量的提高（分別為0、1、2和3劑量的wxs）而提高。結(jié)果表明，向wxwxwxsu2su2su2中引入wxs基因略微提高了該淀粉的直鏈淀粉含量。采用“標(biāo)準(zhǔn)2”輪廓法使用快速粘度分析儀（rva，newportscientific，sydney，australia）分析蠟質(zhì)玉米淀粉的糊化性質(zhì)。含有8%淀粉（w/w，干淀粉基，dsb）的懸浮液（28.0克）在50℃下平衡1分鐘，以6℃/分鐘的速率加熱至95℃，在95℃下保持5分鐘，隨后以6℃/分鐘的速率冷卻至50℃。除了960rpm用于最初10秒外，槳葉的旋轉(zhuǎn)速度為160rpm。結(jié)果顯示在圖1和圖2中?，F(xiàn)有的wxwxwxsu2su2su2淀粉具有最低的糊化溫度、峰值粘度和最終粘度。在向wxwxwxsu2su2su2淀粉中引入wxs基因后，淀粉樣品（q3017a[1wxs]、q8412a[2wxs]和q7738a[3wxs]）顯示出與現(xiàn)有的wxwxwxsu2su2su2淀粉（0wxs）相比提高的峰值粘度。但是，僅僅具有1劑量的wxs基因的wxswxwxsu2su2su2淀粉顯示出遠(yuǎn)高于waxystonor、amioca?淀粉和wxwxwxsu2su2su2淀粉的峰值粘度。結(jié)果表明，糊化溫度的改善將允許經(jīng)由濕磨法進(jìn)行淀粉提取。實(shí)施例3淀粉的凍-融穩(wěn)定性測(cè)試衍生自在隱性sugary-2突變植物中含有0、1、2和3劑量的wxs等位基因的植物的玉米淀粉的凍-融穩(wěn)定性。包括amioca?淀粉和wxwxwxsu2su2su2淀粉作為對(duì)照。8%固體的淀粉樣品在水浴中在95℃下烹煮20分鐘。該淀粉漿料用玻璃棒混合3分鐘，隨后在烹煮過(guò)程中靜態(tài)加熱17分鐘。中性ph下淀粉凝膠（8%，w/w）的凍-融穩(wěn)定性使用caron循環(huán)冷凍器分析五次凍-融循環(huán)。在各循環(huán)中，將樣品冷凍6小時(shí)并解凍6小時(shí)，每天2次循環(huán)。目視檢查樣品在表面上和在壓制時(shí)的脫水收縮，以及不透明度和膠凝變化。重復(fù)該凍/融循環(huán)。結(jié)果顯示在圖3中。在第一次凍-融循環(huán)后，僅有waxystonor淀粉凝膠顯示出高不透明度，表明高的淀粉凝沉程度。淀粉凝膠的不透明度隨著凍/融循環(huán)的增加而提高。在第三次凍/融循環(huán)時(shí)，amioca?淀粉、wxwxwxsu2su2su2淀粉和waxystonor的淀粉凝膠變得非常不透明，而q3017a（1wxs）、q8412a（2wxs）、q7738a（3wxs）和現(xiàn)有的wxwxwxsu2su2su2淀粉的淀粉凝膠仍未不透明。在五次凍/融循環(huán)后，q3017a（1wxs）、q8412a（2wxs）、q7738a（3wxs）和現(xiàn)有的wxwxwxsu2su2su2淀粉變得略微不透明。結(jié)果表明，淀粉樣品中直鏈淀粉的略微增加對(duì)凍/融穩(wěn)定性幾乎沒(méi)有影響。q3017a（1wxs）、q8412a（2wxs）、q7738a（3wxs）淀粉具有優(yōu)于wxwxwxsu2su2su2淀粉和amioca?淀粉的凍/融穩(wěn)定性。實(shí)施例4差示掃描量熱法（dsc）測(cè)試采用差示掃描量熱法（dsc）測(cè)定衍生自在隱性sugary-2突變植物中含有0、1、2和3劑量的wxs等位基因的植物的玉米淀粉的熱性質(zhì)。包括amioca?淀粉和wxwxwxsu2su2su2淀粉作為對(duì)照。差示掃描量熱法（dsc）測(cè)量在規(guī)定溫度下在受控氣氛中樣品所吸收或釋放的熱量。dsc提供關(guān)于樣品隨著溫度升高的比熱和潛熱的信息，這顯示出在非晶與結(jié)晶結(jié)構(gòu)中的變化。數(shù)據(jù)根據(jù)熱流記錄，并以焦耳/克（j/g）表示（cassel，2002）。在淀粉的分析中，收集淀粉糊化參數(shù)如峰值開(kāi)始、峰值溫度、峰值終點(diǎn)和糊化焓變信息。結(jié)果顯示在圖4中。wxswxwxsu2su2su2淀粉（q3017a）、wxswxswxsu2su2su2淀粉（q8412a）、wxswxswxssu2su2su2淀粉（q7738a）和wxwxwxsu2su2su2淀粉（0wxs）顯示出與amioca?淀粉、waxystonor和wxwxwxsu2su2su2淀粉相比更低的糊化溫度，這與從具有1、2和3劑量的wxs的玉米胚乳中分離的淀粉的更好的凍/融穩(wěn)定性一致。具有1劑量的wxs的wxswxwxsu2su2su2淀粉（q3017a）具有比其它雜交種（q8412a[2wxs]、q7738a[3wxs]和wxwxwxsu2su2su2淀粉）略微更高的開(kāi)始糊化溫度，表明該q3017a具有比其它雜交種更好的濕磨特性。實(shí)施例5淀粉顆粒通過(guò)激光散射測(cè)量衍生自在隱性sugary-2突變植物中含有1、2和3劑量的wxs等位基因的植物的蠟質(zhì)玉米淀粉的平均粒度。包括amioca?淀粉和wxwxwxsu2su2su2淀粉作為對(duì)照。結(jié)果顯示在圖5中。此外，在圖6中提供了各樣品的掃描電子顯微鏡照片以顯示顆粒形態(tài)。q3017a（11.4微米）、q8412a（11.4微米）和q7738a（10.9微米）的平均淀粉顆粒尺寸大于現(xiàn)有的wxwxwxsu2su2su2淀粉（10.4微米），表明向waxyvo中引入wxs基因提高了淀粉顆粒尺寸。該結(jié)果與sem圖像（圖5）一致，表明向wxwxwxsu2su2su2淀粉中引入wxs基因提高了該淀粉顆粒完整性。除非另行規(guī)定，本文中所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理解的相同含義。雖然與本文中描述的那些相似或等同的任何方法和材料可以用于本公開(kāi)的實(shí)踐或測(cè)試，但是優(yōu)選的方法和材料描述在本文中。出于所有目的，引用的所有出版物、專(zhuān)利和專(zhuān)利公開(kāi)經(jīng)此引用整體并入本文。本文討論的出版物僅用于其在本申請(qǐng)的申請(qǐng)日之前的公開(kāi)內(nèi)容而提供。本文中的任何內(nèi)容不應(yīng)被解釋為承認(rèn)本公開(kāi)沒(méi)有權(quán)利由于在先發(fā)明而先于這樣的公開(kāi)。雖然已經(jīng)結(jié)合其具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，應(yīng)該理解的是，能夠進(jìn)一步修改，并且本申請(qǐng)旨在覆蓋通常遵循本發(fā)明的原則的對(duì)本發(fā)明的任何改變、使用或改編，并且包括對(duì)本公開(kāi)的這樣的偏離，如在本發(fā)明所屬領(lǐng)域內(nèi)的已知或常規(guī)實(shí)踐內(nèi)，和如可以應(yīng)用于上文闡述的基本特征并且如在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)。序列表<110>ingredionincorporatedjiang,hongxinostrander,bradlane,chris<120>用于生產(chǎn)具有新功能的淀粉的組合物和方法<130>ingr-036/00us317596-2045<160>2<170>patentinversion3.5<210>1<211>605<212>prt<213>玉米<400>1metalaalaleualathrserglnleuvalalathrargalaglyleu151015glyvalproaspalaserthrpheargargglyalaalaglnglyleu202530argglyalaargalaseralaalaalaaspthrleusermetargthr354045seralaargalaalaproarghisglnglnglnalaargargglygly505560argpheproserleuvalvalcysalaseralaglymetasnvalval65707580phevalglyalaglumetalaprotrpserlysthrglyglyleugly859095aspvalleuglyglyleuproproalametalaalaasnglyhisarg100105110valmetvalvalserproargtyraspglntyrlysaspalatrpasp115120125thrservalvalsergluilelysmetglyaspglytyrgluthrval130135140argphephehiscystyrlysargglyvalaspargvalphevalasp145150155160hisproleupheleugluargvaltrpglylysthrgluglulysile165170175tyrglyprovalalaglythrasptyrargaspasnglnleuargphe180185190serleuleucysglnalaalaleuglualaproargileleuserleu195200205asnasnasnprotyrpheserglyprotyrglygluaspvalvalphe210215220valcysasnasptrphisthrglyproleusercystyrleulysser225230235240asntyrglnserhisglyiletyrargaspalalysthralaphecys245250255ilehisasnilesertyrglnglyargphealapheserasptyrpro260265270gluleuasnleuprogluargphelysserserpheasppheileasp275280285glytyrglulysprovalgluglyarglysileasntrpmetlysala290295300glyileleuglualaaspargvalleuthrvalserprotyrtyrala305310315320glugluleuileserglyilealaargglycysgluleuaspasnile325330335metargleuthrglyilethrglyilevalasnglymetaspvalser340345350glutrpaspproserargasplystyrilealavallystyraspval355360365serthralavalglualalysalaleuasnlysglualaleuglnala370375380gluvalglyleuprovalaspargasnileproleuvalalapheile385390395400glyargleuglugluglnlysglyproaspvalmetalaalaalaile405410415proglnleumetglumetvalgluaspvalglnilevalleuleugly420425430thrglylyslyslysphegluargmetleumetseralagluglulys435440445pheproglylysvalargalavalvallyspheasnalaalaleuala450455460hishisilemetalaglyalaaspvalleualavalthrserargphe465470475480gluprocysglyleuileglnleuglnglymetargtyrglythrpro485490495cysalacysalaserthrglyglyleuvalaspthrileileglugly500505510lysthrglyphehismetglyargleuservalaspcysasnvalval515520525gluproalaaspvallyslysvalalathrthrleuglnargalaile530535540lysvalvalglythrproalatyrgluglumetvalargasncysmet545550555560ileglnaspleusertrplysglyproalalysasntrpgluasnval565570575leuleuserleuglyvalalaglyglygluproglyvalgluglyglu580585590gluilealaproleualalysgluasnvalalaalapro595600605<210>2<211>729<212>prt<213>玉米<400>2metserseralaalavalserserserserserthrphepheleuala151015leualaseralaserproglyglyargargargalaargvalglyser202530serprophehisthrglyalaserleuserphealaphetrpalapro354045proserproproargalaproargaspalaalaleuvalargalaglu505560alaglualaglyglylysaspalaproprogluargserglyaspala65707580alaargleuproargalaargargasnalavalserlysargargasp859095proleuglnprovalglyargtyrglyseralathrglyasnthrala100105110argthrglyalaalasercysglnasnalaalaleualaaspvalglu115120125ilelysserilevalalaalaproprothrserilevallysphepro130135140alaproglytyrargmetileleuproserglyaspilealaproglu145150155160thrvalleuproalaprolysproleuhisgluserproalavalasp165170175glyaspserasnglyilealaproprothrvalgluproleuvalgln180185190glualathrtrpaspphelyslystyrileglypheaspgluproasp195200205glualalysaspaspserargvalglyalaaspaspalaglyserphe210215220gluhistyrglyaspasnaspserglyproleualaglygluasnval225230235240metasnvalilevalvalalaalaglucysserprotrpcyslysthr245250255glyglyleuglyaspvalvalglyalaleuprolysalaleualaarg260265270argglyhisargvalmetvalvalvalproargtyrglyasptyrval275280285glualapheaspmetglyilearglystyrtyrlysalaalaglypro290295300valasntyrphehisalapheileaspglyvalaspphevalpheile305310315320aspalaproleuphearghisargglnaspaspiletyrglyglyser325330335argglngluilemetlysargmetileleuphecyslysvalalaval340345350gluvalprotrphisvalprocysglyglyvalcystyrglyaspgly355360365asnleuvalpheilealaasnasptrphisthralaleuleuproval370375380tyrleulysalatyrtyrargasphisglyleumetglntyrthrarg385390395400servalleuvalilehisasnilealahisglnglyargglyproval405410415aspglupheprotyrmetaspleuprogluhistyrleuglnhisphe420425430gluleutyraspprovalglyglygluhisalaasnilephealaala435440445glyleulysmetalaaspargvalvalthrvalserargglytyrleu450455460trpgluleulysthrvalgluglyglytrpglyleuhisaspileile465470475480argserasnasptrplysileasnglyilevalasnglyileasphis485490495glnglutrpasnprolysvalaspvalhisleuargseraspglytyr500505510thrasntyrserleugluthrleuaspalaglylysargglncyslys515520525alaalaleuglnarggluleuglyleugluvalargaspaspvalpro530535540leuleuglypheileglyargleuaspglyglnlysglyvalaspile545550555560ileglyaspalametprotrpilealaglyglnaspvalglnleuval565570575metleuglythrglyargalaaspleugluargmetleuglnhisleu580585590gluarggluhisproasnlysvalargglytrpvalglypheserval595600605prometalahisargilethralaglyalaaspvalleuvalmetpro610615620serargphegluprocysglyleuasnglnleutyralametalatyr625630635640glythrvalprovalvalhisalavalglyglyleuargaspthrval645650655alapropheasppropheseraspalaglyleuglytrpthrpheasp660665670argalaglualaasnlysleuileglualaleuarghiscysleuasp675680685thrtyrargasntyrgluglusertrplysserleuglnalaarggly690695700metserglnaspleusertrpasphisalaalagluleutyrgluasp705710715720valleuvallysalalystyrglntrp725當(dāng)前第1頁(yè)12