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一種MCF?7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基的制作方法

文檔序號:11510449閱讀:615來源:國知局

本發(fā)明屬于生物技術應用領域,具體地,涉及一種mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基。



背景技術:

乳腺癌是女性最常見的癌癥,主要包括導管癌和小葉癌。2016年美國ca(acancerjournalforclinicians)公布的最新統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,美國2016年預計將有420840例女性患乳腺癌,占女性新發(fā)惡性腫瘤的38%,居女性惡性腫瘤發(fā)病率第一位,并且死亡人數(shù)將達52930例。更為嚴重的是全球的乳腺癌發(fā)病率正在逐年增長。

細胞培養(yǎng)基是生物與健康相關研究領域的一項重要技術。隨著生命科學的迅速發(fā)展,目前細胞培養(yǎng)已成為細胞生物學、分子生物學、遺傳學和免疫學等學科研究的重要基礎。為了深入探討細胞的生長活動規(guī)律、有關疾病的病理和藥物的藥理(毒理)機制,開發(fā)具有不同針對性的細胞培養(yǎng)方法具有重要意義。

其中,mcf-7乳腺癌細胞作為人源性低轉移乳腺癌細胞,常用于乳腺癌原位生長、血管生成等乳腺癌的體內外研究。此外,mcf-7乳腺癌細胞還會同其他乳腺癌高轉移性細胞進行對比研究。

本發(fā)明的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富,mcf-7細胞生長速度快,細胞狀態(tài)好,邊界清晰,鏡下觀察透亮、分裂相更多、形態(tài)及分散度佳,可以有利于乳腺癌的原位生長、血管生成以及與其他乳腺癌高轉移性細胞進行對比研究等的相關研究。



技術實現(xiàn)要素:

發(fā)明目的:本發(fā)明提供了一種mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,專用于mcf-7乳腺癌細胞的體外培養(yǎng)。

技術方案:本發(fā)明提供了一種mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,以重量組分計,包括以下組分:葡萄糖80-90份、碳酸氫鈉10-20份、丙酮酸鈉8-18份、轉鐵蛋白2-10份、氯化鉀30-50份、無水硫酸鎂5-12份、氯化鈉60-80份、氯化鋰3-10份、無水磷酸二氫鈉8-16份、葉酸0.2-0.6份、肌醇0.5-1.5份、煙酰胺0.2-0.8份、無水氯化鈣20-40份、硝酸鐵0.1-0.5份、丁二酸5-10份、丁二酸鈉9-18份、d-泛酸鈣0.2-0.8份、酒石酸膽堿0.5-1份、核黃素0.1-0.3份、鹽酸硫胺0.1-0.5份、鹽酸吡哆辛0.1-0.6份、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.2-0.8份、亞麻油0.5-2份、聚脂肪酸酯0.5-1.8份、酚紅鈉0.8-1.5份和去離子水100份。

進一步的,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,以重量組分計,包括以下組分:葡萄糖82-88份、碳酸氫鈉12-25份、丙酮酸鈉10-16份、轉鐵蛋白3-8份、氯化鉀35-45份、無水硫酸鎂6-10份、氯化鈉70-78份、氯化鋰5-8份、無水磷酸二氫鈉10-14份、葉酸0.3-0.5份、肌醇0.8-1.2份、煙酰胺0.3-0.6份、無水氯化鈣25-35份、硝酸鐵0.2-0.4份、丁二酸6-8份、丁二酸鈉12-16份、d-泛酸鈣0.3-0.6份、酒石酸膽堿0.6-0.8份、核黃素0.1-0.3份、鹽酸硫胺0.2-0.4份、鹽酸吡哆辛0.3-0.5份、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.3-0.6份、亞麻油1-1.5份、聚脂肪酸酯0.8-1.6份、酚紅鈉1-1.3份和去離子水100份。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選方式,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,以重量組分計,包括以下組分:葡萄糖86份、碳酸氫鈉18份、丙酮酸鈉12份、轉鐵蛋白6份、氯化鉀40份、無水硫酸鎂8份、氯化鈉75份、氯化鋰6份、無水磷酸二氫鈉12份、葉酸0.4份、肌醇1份、煙酰胺0.5份、無水氯化鈣30份、硝酸鐵0.3份、丁二酸7份、丁二酸鈉14份、d-泛酸鈣0.5份、酒石酸膽堿0.7份、核黃素0.2份、鹽酸硫胺0.3份、鹽酸吡哆辛0.4份、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.5份、亞麻油1.2份、聚脂肪酸酯1.2份、酚紅鈉1.2份和去離子水100份。

進一步的,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,還包括3-8份氨基酸,所述氨基酸以重量組分計,由以下組分組成:l-鹽酸精氨酸5-10份、l-鹽酸胱氨酸3-8份、l-絲氨酸3-6份、甘氨酸1-5份、l-鹽酸組氨酸4-6份、l-異亮氨酸8-20份、l-亮氨酸7-18份、l-鹽酸賴氨酸10-20份、l-甲硫氨酸1-6份、l-苯丙氨酸2-8份、l-蘇氨酸5-15份、l-色氨酸1-3份、l-酪氨酸5-9份和l-纈氨酸8-12份。

進一步的,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,還包括2-5份輔助因子,所述輔助因子以重量組分計,由以下組分組成:胰島素生長因子3-8份、白介素62-5份、白介素101-4份、白介素123-6份、tnf-β2-10份、gm-csf1-5份。

進一步的,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,還包括體積比10-30%的胎牛血清。

進一步的,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,以重量組分計,還包括0.006份青霉素和0.01份的鏈霉素。

進一步的,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,所述青霉素選自10000u/ml,所述鏈霉素選自10000μg/ml。

有益效果:本發(fā)明所述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,其組分合理,營養(yǎng)豐富,mcf-7細胞生長速度快,細胞狀態(tài)好,邊界清晰,鏡下觀察透亮、分裂相更多、形態(tài)及分散度佳,可以有利于乳腺癌的原位生長、血管生成以及與其他乳腺癌高轉移性細胞進行對比研究等的相關研究。

具體實施方式

下面將通過幾個具體實施例,進一步闡明本發(fā)明,這些實施例只是為了說明問題,并不是一種限制。

實施例1

一種mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,以重量組分計,包括以下組分:包括以下組分:葡萄糖80份、碳酸氫鈉10份、丙酮酸鈉8份、轉鐵蛋白2份、氯化鉀30份、無水硫酸鎂5份、氯化鈉60份、氯化鋰3份、無水磷酸二氫鈉8份、葉酸0.2份、肌醇0.5份、煙酰胺0.2份、無水氯化鈣20份、硝酸鐵0.1份、丁二酸5份、丁二酸鈉9份、d-泛酸鈣0.2份、酒石酸膽堿0.5份、核黃素0.1份、鹽酸硫胺0.1份、鹽酸吡哆辛0.1份、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.2份、亞麻油0.5份、聚脂肪酸酯0.5份、酚紅鈉0.8份和去離子水100份。

另,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括3份氨基酸,所述氨基酸以重量組分計,由以下組分組成:l-鹽酸精氨酸5份、l-鹽酸胱氨酸3份、l-絲氨酸3份、甘氨酸1份、l-鹽酸組氨酸4份、l-異亮氨酸8份、l-亮氨酸7份、l-鹽酸賴氨酸10份、l-甲硫氨酸1份、l-苯丙氨酸2份、l-蘇氨酸5份、l-色氨酸1份、l-酪氨酸5份和l-纈氨酸8份。

再,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括2份輔助因子,所述輔助因子以重量組分計,由以下組分組成:胰島素生長因子3份、白介素62份、白介素101份、白介素123份、tnf-β2份、gm-csf1份。

此外,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括體積比10%的胎牛血清。并且,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基以重量組分計,還包括0.006份青霉素和0.01份的鏈霉素。其中,所述青霉素選自10000u/ml,所述鏈霉素選自10000μg/ml。

實施例2

一種mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,以重量組分計,包括以下組分:包括以下組分:葡萄糖90份、碳酸氫鈉20份、丙酮酸鈉18份、轉鐵蛋白10份、氯化鉀50份、無水硫酸鎂12份、氯化鈉80份、氯化鋰10份、無水磷酸二氫鈉16份、葉酸0.6份、肌醇1.5份、煙酰胺0.8份、無水氯化鈣40份、硝酸鐵0.5份、丁二酸10份、丁二酸鈉18份、d-泛酸鈣0.8份、酒石酸膽堿1份、核黃素0.3份、鹽酸硫胺0.5份、鹽酸吡哆辛0.6份、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.8份、亞麻油2份、聚脂肪酸酯1.8份、酚紅鈉1.5份和去離子水100份。

另,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括8份氨基酸,所述氨基酸以重量組分計,由以下組分組成:l-鹽酸精氨酸10份、l-鹽酸胱氨酸8份、l-絲氨酸6份、甘氨酸5份、l-鹽酸組氨酸6份、l-異亮氨酸20份、l-亮氨酸18份、l-鹽酸賴氨酸20份、l-甲硫氨酸6份、l-苯丙氨酸8份、l-蘇氨酸15份、l-色氨酸3份、l-酪氨酸9份和l-纈氨酸12份。

再,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括5份輔助因子,所述輔助因子以重量組分計,由以下組分組成:胰島素生長因子8份、白介素65份、白介素104份、白介素126份、tnf-β10份、gm-csf5份。

此外,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括體積比30%的胎牛血清。并且,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基以重量組分計,還包括0.006份青霉素和0.01份的鏈霉素。其中,所述青霉素選自10000u/ml,所述鏈霉素選自10000μg/ml。

實施例3

一種mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,以重量組分計,包括以下組分:包括以下組分:葡萄糖82份、碳酸氫鈉12份、丙酮酸鈉10份、轉鐵蛋白3份、氯化鉀35份、無水硫酸鎂6份、氯化鈉70份、氯化鋰5份、無水磷酸二氫鈉10份、葉酸0.3份、肌醇0.8份、煙酰胺0.3份、無水氯化鈣25份、硝酸鐵0.2份、丁二酸6份、丁二酸鈉12份、d-泛酸鈣0.3份、酒石酸膽堿0.6份、核黃素0.1份、鹽酸硫胺0.2份、鹽酸吡哆辛0.3份、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.3份、亞麻油1份、聚脂肪酸酯0.8份、酚紅鈉1份和去離子水100份。

另,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括3份氨基酸,所述氨基酸以重量組分計,由以下組分組成:l-鹽酸精氨酸5份、l-鹽酸胱氨酸3份、l-絲氨酸3份、甘氨酸1份、l-鹽酸組氨酸4份、l-異亮氨酸8份、l-亮氨酸7份、l-鹽酸賴氨酸10份、l-甲硫氨酸1份、l-苯丙氨酸2份、l-蘇氨酸5份、l-色氨酸1份、l-酪氨酸5份和l-纈氨酸8份。

再,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括2份輔助因子,所述輔助因子以重量組分計,由以下組分組成:胰島素生長因子3份、白介素62份、白介素101份、白介素123份、tnf-β2份、gm-csf1份。

此外,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括體積比10%的胎牛血清。并且,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基以重量組分計,還包括0.006份青霉素和0.01份的鏈霉素。其中,所述青霉素選自10000u/ml,所述鏈霉素選自10000μg/ml。

實施例4

一種mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,以重量組分計,包括以下組分:包括以下組分:葡萄糖88份、碳酸氫鈉25份、丙酮酸鈉16份、轉鐵蛋白8份、氯化鉀45份、無水硫酸鎂10份、氯化鈉78份、氯化鋰8份、無水磷酸二氫鈉14份、葉酸0.5份、肌醇1.2份、煙酰胺0.6份、無水氯化鈣35份、硝酸鐵0.4份、丁二酸8份、丁二酸鈉16份、d-泛酸鈣0.6份、酒石酸膽堿0.8份、核黃素0.3份、鹽酸硫胺0.4份、鹽酸吡哆辛0.5份、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.6份、亞麻油1.5份、聚脂肪酸酯1.6份、酚紅鈉1.3份和去離子水100份。

另,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括8份氨基酸,所述氨基酸以重量組分計,由以下組分組成:l-鹽酸精氨酸10份、l-鹽酸胱氨酸8份、l-絲氨酸6份、甘氨酸5份、l-鹽酸組氨酸6份、l-異亮氨酸20份、l-亮氨酸18份、l-鹽酸賴氨酸20份、l-甲硫氨酸6份、l-苯丙氨酸8份、l-蘇氨酸15份、l-色氨酸3份、l-酪氨酸9份和l-纈氨酸12份。

再,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括5份輔助因子,所述輔助因子以重量組分計,由以下組分組成:胰島素生長因子8份、白介素65份、白介素104份、白介素126份、tnf-β10份、gm-csf5份。

此外,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括體積比30%的胎牛血清。并且,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基以重量組分計,還包括0.006份青霉素和0.01份的鏈霉素。其中,所述青霉素選自10000u/ml,所述鏈霉素選自10000μg/ml。

實施例5

一種mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基,以重量組分計,包括以下組分:包括以下組分:葡萄糖86份、碳酸氫鈉18份、丙酮酸鈉12份、轉鐵蛋白6份、氯化鉀40份、無水硫酸鎂8份、氯化鈉75份、氯化鋰6份、無水磷酸二氫鈉12份、葉酸0.4份、肌醇1份、煙酰胺0.5份、無水氯化鈣30份、硝酸鐵0.3份、丁二酸7份、丁二酸鈉14份、d-泛酸鈣0.5份、酒石酸膽堿0.7份、核黃素0.2份、鹽酸硫胺0.3份、鹽酸吡哆辛0.4份、4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸0.5份、亞麻油1.2份、聚脂肪酸酯1.2份、酚紅鈉1.2份和去離子水100份。

另,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括5份氨基酸,所述氨基酸以重量組分計,由以下組分組成:l-鹽酸精氨酸8份、l-鹽酸胱氨酸6份、l-絲氨酸5份、甘氨酸4份、l-鹽酸組氨酸5份、l-異亮氨酸12份、l-亮氨酸10份、l-鹽酸賴氨酸16份、l-甲硫氨酸3份、l-苯丙氨酸6份、l-蘇氨酸9份、l-色氨酸2份、l-酪氨酸6份和l-纈氨酸10份。

再,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括3份輔助因子,所述輔助因子以重量組分計,由以下組分組成:胰島素生長因子4份、白介素64份、白介素103份、白介素125份、tnf-β8份、gm-csf3份。

此外,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基還包括體積比25%的胎牛血清。并且,上述的mcf-7乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基以重量組分計,還包括0.006份青霉素和0.01份的鏈霉素。其中,所述青霉素選自10000u/ml,所述鏈霉素選自10000μg/ml。

以上所述僅是發(fā)明的幾個實施方式,應當指出,對于本技術領域的普通技術人員來說,在不脫離發(fā)明原理的前提下,還可以做出若干改進,這些改進也應視為本發(fā)明的保護范圍。

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