本發(fā)明涉及化學(xué)及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及新化合物的合成及其中間體的合成方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：皮膚癬菌病是由皮膚癬菌引起的毛發(fā)、皮膚和指(趾)甲的淺部真菌感染，但目前也有其引起深部感染的報(bào)告。臨床上常見者為頭癬、體癬、股癬、手癬、足癬及癬菌疹等。偶可累及深部組織。引起深部感染。皮膚癬菌及其代謝產(chǎn)物通過血液循環(huán)可引起病灶外皮膚的變態(tài)反應(yīng)，稱癬菌疹。皮膚癬菌病是一組常見病和多發(fā)病。在皮膚科就診病例中，次于皮炎和濕疹，而在感染性皮膚病中則居首位。在我國(guó)，患病人數(shù)至少以億計(jì)算，所以積極防治皮膚癬菌病具有重要的臨床意義和社會(huì)意義。臨床上治療真菌感染主要采用抗生素，隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，產(chǎn)生了多種耐藥機(jī)制，使其對(duì)抗真菌藥敏感性大大降低。所以尋找安全、高效、甚至不同作用機(jī)制的抗真菌藥物仍然是現(xiàn)今抗真菌藥物的研究發(fā)展方向。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明要解決的問題是填補(bǔ)現(xiàn)有活性間苯三酚類衍生物的種類不足，提供一種新的中間體化合物，基于所述中間體化合物可以制備得到具有抗菌活性的化合物及藥物。本發(fā)明要解決的另一技術(shù)問題是提供一種新的活性化合物(E)-1-{[3-甲基-5-(4-萘甲胺-2-丁烯基)-2,4,6-三羥基]苯基}-1-丁酮，至少具有優(yōu)良的抗菌活性。本發(fā)明還一要解決的技術(shù)問題是提供所述中間體(E)-N-(1-萘甲基)-4-氯-2-丁烯-1-胺和(E)-1-{[3-甲基-5-(4-萘甲胺-2-丁烯基)-2,4,6-三羥基]苯基}-1-丁酮的制備方法。本發(fā)明還一要解決的技術(shù)問題是提供上述化合物的應(yīng)用。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：提供一種化合物Ⅰ，命名為(E)-N-(1-萘甲基)-4-氯-2-丁烯-1-胺，具有式(Ⅰ)所示的結(jié)構(gòu)式：優(yōu)選地，X為Cl或Br。本發(fā)明同時(shí)提供化合物Ⅰ與鹽酸、硫酸或磷酸所形成的鹽。本發(fā)明還提供所述的化合物Ⅰ及其鹽的含結(jié)晶水合物或溶劑合物。所述的化合物Ⅰ可以通過合成、柱層析、結(jié)晶、萃取或制備液相制備的方法制備得到。本發(fā)明提供了一種優(yōu)選的合成化合物Ⅰ的方法，包括以下步驟：S1.將4-氯-2-丁烯胺鹽酸鹽或4-溴-2-丁烯胺鹽酸鹽加入到反應(yīng)瓶中，加入溶劑溶解，加入堿；S2.將步驟S1加入堿后的體系降溫，攪拌下滴加溶劑溶解的1-氯甲基萘，攪拌反應(yīng)，回收溶劑，加入有機(jī)層萃取，有機(jī)層經(jīng)洗滌分離有機(jī)層，干燥，抽濾，回收溶劑，即得化合物Ⅰ。優(yōu)選地，步驟S1中4-氯-2-丁烯胺鹽酸鹽或4-溴-2-丁烯胺鹽酸鹽的質(zhì)量百分比濃度為30％。優(yōu)選地，步驟S1所述溶劑為C1-C5的醇、二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈或四氫呋喃。溶劑的用量適量即可。更優(yōu)選地，S1中溶劑為甲醇或乙醇。優(yōu)選地，步驟S1中所用的堿為無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿；所述無(wú)機(jī)堿進(jìn)一步優(yōu)選碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫化鈉、氫氧化鈉、氨基鈉、醇鈉；所述有機(jī)堿進(jìn)一步優(yōu)選三乙胺、吡啶、哌啶、以及取代的吡啶或取代后的哌啶。更優(yōu)選的，S1中堿，無(wú)機(jī)堿為碳酸鉀；或者，有機(jī)堿為三乙胺。優(yōu)選地，步驟S1中所用的堿的加入量按照占反應(yīng)底物的摩爾量2～5倍確定。優(yōu)選地，步驟S2可以加入適量相轉(zhuǎn)移催化劑。所述相轉(zhuǎn)移催化劑優(yōu)選聚乙二醇PEG-400，其用量按照1-氯甲基萘質(zhì)量的10％左右確定。優(yōu)選地，步驟S2所述體系的溫度降為-20℃～0℃。更優(yōu)選地，步驟S2所述體系的溫度降為-5℃～0℃。優(yōu)選地，步驟S2所述攪拌反應(yīng)的時(shí)間為3～4小時(shí)，優(yōu)選3小時(shí)。步驟S2所述1-氯甲基萘的加入量按照與4-氯-2-丁烯胺鹽酸鹽按照1:1～1:3的摩爾比加入。優(yōu)選地，步驟S2所述洗滌是依次用堿溶液和水洗滌。進(jìn)一步地，所述堿溶液為0.1％～15％的氫氧化鈉溶液、0.1％～33.2％碳酸鈉溶液或0.1％～5％碳酸氫鈉溶液。更優(yōu)選地，所述堿溶液為10％的氫氧化鈉溶液。本發(fā)明提供了所述化合物Ⅰ的應(yīng)用，應(yīng)用于作為制備活性化合物Ⅱ的原料。所述化合物Ⅱ?yàn)?E)-1-{[3-甲基-5-(4-萘甲胺-2-丁烯基)-2,4,6-三羥基]苯基}-1-丁酮?；衔铫窈廷蚝望}及它們形成的含結(jié)晶水合物及溶劑合物應(yīng)用于抗真菌方面的應(yīng)用。本發(fā)明還提供所述化合物Ⅰ及其鹽、它們形成的含結(jié)晶水合物和/或溶劑合物在制備抗菌藥物方面的應(yīng)用，尤其是在制備抗真菌藥物方面的應(yīng)用，并與其他藥物合用于抗真菌方面。優(yōu)選地，所述與其他藥物合用于抗真菌方面，是將所述化合物Ⅰ及其鹽及它們形成的含結(jié)晶水合物及溶劑合物與其他藥物組成復(fù)方藥物，在所述復(fù)方藥物中，所述化合物Ⅰ及其鹽和/或它們形成的含結(jié)晶水合物和/或溶劑合物的含量為0.1％～99.9％。本發(fā)明同時(shí)提供了一種新化合物(E)-1-{[3-甲基-5-(4-萘甲胺-2-丁烯基)-2,4,6-三羥基]苯基}-1-丁酮，其具有式(Ⅱ)所示的結(jié)構(gòu)式：本發(fā)明同時(shí)提供化合物Ⅱ與鹽酸、硫酸或磷酸所形成的鹽。本發(fā)明還提供所述的化合物Ⅱ及其鹽的含結(jié)晶水合物或溶劑合物。所述的化合物Ⅱ可以通過合成、柱層析、結(jié)晶、萃取或制備液相制備的方法制備得到。本發(fā)明提供了一種優(yōu)選的合成化合物Ⅱ的方法，包括以下步驟：S3.稱取1-[(3-甲基-2,4,6-三羥基)苯基]-1-丁酮，加入溶劑及路易斯酸，攪拌下加入硝基苯，加熱回流反應(yīng)；S4.往S3加熱回流反應(yīng)體系中緩慢滴加用溶劑溶解的化合物Ⅰ，繼續(xù)回流反應(yīng)，待反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，在攪拌下傾入酸水中溶解，減壓蒸餾，趁熱過濾，濾液中析出淺黃色細(xì)針狀結(jié)晶，抽濾得到化合物Ⅱ。優(yōu)選地，步驟S3中所述溶劑為C1～C5的醇、二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、二硫化碳或四氫呋喃。更優(yōu)選地，步驟S3所述溶劑為二硫化碳，可獲得較高的轉(zhuǎn)化率和收率。優(yōu)選地，步驟S3中所述路易斯酸為三氯化鋁、氯化鐵、三氟化硼、五氯化鈮或鑭系元素的三氟甲磺酸鹽。更優(yōu)選地，步驟S3所述路易斯酸為三氯化鋁。步驟S3所述路易斯酸的加入量按照1-[(3-甲基-2,4,6-三羥基)苯基]-1-丁酮摩爾量的1.1～5倍量確定。步驟S3所述硝基苯的加入量按照1-[(3-甲基-2,4,6-三羥基)苯基]-1-丁酮質(zhì)量的10％～20％(質(zhì)量百分比)確定。步驟S3所述化合物Ⅰ的加入量按照1-[(3-甲基-2,4,6-三羥基)苯基]-1-丁酮的摩爾量的1～5倍量確定。優(yōu)選的，步驟S3中加熱回流反應(yīng)的時(shí)間為30分鐘。優(yōu)選的，步驟S4所述回流時(shí)間的1.5小時(shí)。優(yōu)選地，步驟S4中所述的酸水的濃度為2N～8N；進(jìn)一步地，所述酸水中的酸可以為有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸，更進(jìn)一步地，所述有機(jī)酸為醋酸、草酸、富馬酸或檸檬酸的一種或多種；所述無(wú)機(jī)酸為鹽酸、硫酸、磷酸或硝酸的一種或多種。更優(yōu)選地，步驟S4中酸為4N鹽酸溶液。步驟S4所述酸水的加入量按照剛好溶解反應(yīng)物確定。優(yōu)選地，步驟S4中所述的溶劑為無(wú)水乙醇。本發(fā)明的有益效果如下：本申請(qǐng)人多年的研究總結(jié)發(fā)現(xiàn)從中草藥中提取分離的間苯三酚類衍生物具有很好的抗皮膚真菌活性，但是因其量少，且難以重復(fù)分離得到，故本發(fā)明對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行科學(xué)的優(yōu)化修飾，提供包括中間體化合物在內(nèi)的新的活性化合物，均為新化合物，目前未見技術(shù)報(bào)道，填補(bǔ)了本
技術(shù)領(lǐng)域：
空白。本發(fā)明提供了所述化合物、其鹽及其含結(jié)晶水合物或溶劑合物在制備抗菌尤其是抗真菌藥物方面的良好應(yīng)用。體外抑菌實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明提供的化合物具有抑菌效果，尤其是對(duì)兩種皮膚致病菌紅色毛癬菌和石膏樣小孢子菌具有很好的抑菌效果，有副作用低、抗真菌耐藥等特點(diǎn)，豐富了治療皮膚淺部真菌感染的化合物庫(kù)，為制備抗皮膚淺部真菌感染的藥物或藥物組合物提供了有力的技術(shù)支持。本發(fā)明進(jìn)一步提供了所述化合物的合成方法，簡(jiǎn)單易行。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明方法。下述實(shí)施例僅用于示例性說明，不能理解為對(duì)本發(fā)明的限制。除非特別說明，下述實(shí)施例中使用的試劑原料為常規(guī)市購(gòu)或商業(yè)途徑獲得的原料。實(shí)施例1化合物Ⅰ的合成合成路線如下：合成反應(yīng)：在反應(yīng)瓶中，加入1.3g的4-氯-2-丁烯胺鹽酸鹽的30mL乙醇溶液，1.96g碳酸鉀，加入0.1g聚乙二醇PEG-400作為相轉(zhuǎn)移催化劑，冰浴冷卻，攪拌下滴加1g1-氯甲基萘用5mL無(wú)水乙醇溶解的溶液，攪拌反應(yīng)3h?；厥杖軇尤?0mL二氯甲烷，依次用10mL10％氫氧化鈉溶液、水洗滌，分離有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，回收溶劑，減壓蒸餾得化合物Ⅰ，為(E)-N-(1-萘甲基)-4-氯-2-丁烯-1-胺。實(shí)施例2化合物Ⅰ的合成合成路線如下：合成反應(yīng)：在反應(yīng)瓶中，加入1.3g4-氯-2-丁烯胺鹽酸鹽的30mL甲醇溶液，1.72g三乙胺，0.1g聚乙二醇PEG-400，冰浴冷卻，攪拌下滴加1g1-氯甲基萘的5mL甲醇溶解的溶液，攪拌反應(yīng)3.5h?；厥杖軇尤?0mL二氯甲烷，依次用10mL5％碳酸氫鈉溶液、水洗滌，分離有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，回收溶劑，減壓蒸餾得化合物Ⅰ，為(E)-N-(1-萘甲基)-4-氯-2-丁烯-1-胺。實(shí)施例3化合物Ⅰ的合成合成路線如下：合成反應(yīng)：在反應(yīng)瓶中，加入1.3g4-氯-2-丁烯胺鹽酸鹽的40mL三氯甲烷溶液，0.8g氫氧化鈉，0.09g聚乙二醇PEG-400，冰浴冷卻，攪拌下滴加0.9g1-氯甲基萘的無(wú)水乙醇溶液，攪拌反應(yīng)4h?；厥杖軇尤?0mL二氯甲烷，依次用10mL33.2％碳酸鈉溶液、水洗滌，分離有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，回收溶劑，減壓蒸餾得化合物Ⅰ，為(E)-N-(1-萘甲基)-4-氯-2-丁烯-1-胺。實(shí)施例1～3任一例所得化合物Ⅰ的結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)為：ESI-MS(M+H)+:246.091H-NMR(400MHZ,CDCl3):7.48-7.53(m,3H)，7.04-7.10(d,2H),7.23-7.30(d,2H),5.91(dd,1H),5.85(dd,1H),4.62(s,2H),4.3(s,2H),2.3(s,1H)；13C-NMR(100MHZ,CDCl3):δC：135.2,134.7,134.1,130.2，130.5，128.6,128.3,128.1,127.9,127.7,127.3,126.2,56.4,54.3,49.5；實(shí)施例4化合物Ⅱ的合成合成路線如下：合成反應(yīng)：將2.1g1-[(3-甲基-2,4,6-三羥基)苯基]-1-丁酮置于圓底燒瓶中，加入40mL二硫化碳及1.6g無(wú)水三氯化鋁，在攪拌下加入0.2g硝基苯，加熱回流半小時(shí)，然后緩慢滴加用5mL二硫化碳溶解的3.68g化合物Ⅰ，繼續(xù)回流1.5小時(shí)后冷卻至室溫，在攪拌下傾入10mL4N鹽酸中溶解，減壓蒸餾，趁熱過濾，濾液冷卻析出淺黃色細(xì)針狀結(jié)晶，干燥得到化合物Ⅱ，為(E)-1-{[3-甲基-5-(4-萘甲胺-2-丁烯基)-2,4,6-三羥基]苯基}-1-丁酮。實(shí)施例5化合物Ⅱ的合成合成路線如下：合成反應(yīng)：將2.1g1-[(3-甲基-2,4,6-三羥基)苯基]-1-丁酮置于圓底燒瓶中，加入30mL甲醇及1.94g氯化鐵，在攪拌下加入0.2g硝基苯，加熱回流半小時(shí)，然后緩慢滴加用5mL甲醇溶解的7.36g化合物Ⅰ，繼續(xù)回流1.5小時(shí)后冷卻至室溫，在攪拌下傾入15mL3N磷酸中溶解，減壓蒸餾，趁熱過濾，濾液冷卻析出淺黃色細(xì)針狀結(jié)晶，干燥得到化合物Ⅱ，為(E)-1-{[3-甲基-5-(4-萘甲胺-2-丁烯基)-2,4,6-三羥基]苯基}-1-丁酮。實(shí)施例6化合物Ⅱ的合成合成路線如下：合成反應(yīng)：將2.1g1-[(3-甲基-2,4,6-三羥基)苯基]-1-丁酮置于圓底燒瓶中，加入40mL二硫化碳及1.84g三氟化硼乙醚，在攪拌下加入0.3g硝基苯，加熱回流半小時(shí)，然后緩慢滴加5mL二硫化碳溶解的3.68g化合物Ⅰ，繼續(xù)回流1.5小時(shí)后冷卻至室溫，在攪拌下傾入10mL4N鹽酸中溶解，減壓蒸餾，趁熱過濾，濾液冷卻析出淺黃色細(xì)針狀結(jié)晶，干燥得到化合物Ⅱ，為(E)-1-{[3-甲基-5-(4-萘甲胺-2-丁烯基)-2,4,6-三羥基]苯基}-1-丁酮。實(shí)施例4～6任一例所得化合物Ⅰ的結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)為：ESI-MS(M+H)+420.23；1H-NMR(400MHZ,DMSO-d6):δH7.45-7.55(m,3H),7.05-7.12(d,2H),7.23-7.31(d,2H),6.13(dd,1H),5.91(dd,1H),5.45(S,3H),3.19-3.42(m,4H),3.10(m,2H),2.42(S,3H),2.4(s,1H),1.62(m,2H),1.21(S,3H)。13C-NMR(100MHZ,CDCl3):δC198.1,168.3,160.4,160.2,106.7,106.5,106.1,135.1,134.8,134.2,130.3,130.1,128.5,128.3,128.2,127.7,127.5,127.4,126.2,56.4,54.3,45.2,21.7,20.5,17.5,15.9。實(shí)施例7化合物Ⅱ的體外抗淺部真菌作用實(shí)驗(yàn)(1)紅色毛癬菌(CMCC(f)T1b)、石膏樣小孢子菌(CMCC(F)M2C)，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚研究所提供。皮膚癬菌的微量稀釋法按美國(guó)CLSI制定的M38-A2方案進(jìn)行，介紹如下：用接種環(huán)輕刮SDA培養(yǎng)基表面菌落使用無(wú)菌研磨器將菌絲研碎，將皮膚癬菌懸浮于無(wú)菌生理鹽水中，調(diào)整濁度至0.5麥?zhǔn)蠞岫?，并用血?xì)胞計(jì)數(shù)孢子數(shù)量及短菌絲數(shù)。使菌液濃度為1×103CFU/mL至3×103CFU/mL。即用RPMI-1640液體培養(yǎng)基將0.5麥?zhǔn)蠞岫染合♂?000倍，并以血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)為準(zhǔn)，得接種菌液。用RPMI-1640液體培養(yǎng)基稀釋化合物Ⅰ(20μg/mL)于96孔板上的第1至第10列用RPMI-1640液體培養(yǎng)基進(jìn)行橫向倍比稀釋，第11列為生長(zhǎng)對(duì)照孔，加入100μlRPMI-1640液體培養(yǎng)基；第12列為空白對(duì)照，加入200μlRPMI-1640液體培養(yǎng)基，然后再于第1-11列各孔中加入100μL接種菌液，此時(shí)，第1-10列的化合物Ⅱ的濃度為20μg/μL至0.040μg/μL，且各孔中抗菌藥物溶液濃度(v/v)低于1％，符合M27-A3規(guī)定。將96孔板置于35℃恒溫孵育7天，以肉眼觀察，視相當(dāng)于與生長(zhǎng)對(duì)照比較產(chǎn)生了85％生長(zhǎng)抑制的終濃度為MIC。此外，在每次測(cè)定時(shí)應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制，QC株采用近平滑念珠菌(ATCC22019)，質(zhì)控藥物為特比萘芬，在平行操作條件下，QC株的MIC應(yīng)在1.0～4.0μg/mL范圍內(nèi)，如此則視為測(cè)定結(jié)果有效可信。各菌株按以上操作平行重復(fù)測(cè)定四次，計(jì)算MIC的幾何均數(shù)。結(jié)果判讀參考CLSI的M38-A2方案，肉眼觀察評(píng)分法來判定孔內(nèi)真菌生長(zhǎng)情況，按以下標(biāo)準(zhǔn)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果：各孔均與生長(zhǎng)對(duì)照孔相比完全澄清(100％生長(zhǎng)抑制)，-；與生長(zhǎng)對(duì)照孔相比略微模糊(75％生長(zhǎng)抑制)，+；與生長(zhǎng)對(duì)照孔相比濁度顯著降低(50％生長(zhǎng)抑制)，++；與生長(zhǎng)對(duì)照孔相比濁度略有降低(25％生長(zhǎng)抑制)，+++，濁度與生長(zhǎng)對(duì)照孔相當(dāng)，即濁度無(wú)降低(無(wú)生長(zhǎng)抑制)++++。本實(shí)驗(yàn)取與生長(zhǎng)對(duì)照孔相比85％生長(zhǎng)抑制所對(duì)應(yīng)的最低藥物濃度為MIC值，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1和表2所示。表1.化合物Ⅱ抗紅色毛癬菌的體外作用研究(X±SD)(μg/mL)受試化合物MIC范圍MIC85的幾何平均值化合物Ⅱ1.5～6.03.76±5.77特比萘芬(陽(yáng)性藥)0.5～42.17±2.98表2.化合物Ⅱ抗石膏樣小孢子菌MIC85值(μg/mL)受試化合物MIC范圍MIC85的幾何平均值化合物Ⅱ2～416.1特比萘芬(陽(yáng)性藥)0.5～1010實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，從單體MIC85幾何平均值中看出新化合物Ⅱ?qū)t色毛癬菌和石膏樣小孢子菌有良好的抑制作用。特比萘芬對(duì)質(zhì)控菌株的MIC在規(guī)定的范圍內(nèi)，符合要求，結(jié)果可靠。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3