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表達(dá)金屬硫蛋白的枯草芽孢桿菌和生產(chǎn)金屬硫蛋白的方法與流程

文檔序號(hào):12644509閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種枯草芽孢桿菌,其含有金屬硫蛋白的融合表達(dá)載體,所述融合表達(dá)載體攜帶所述金屬硫蛋白的編碼核酸分子,能夠可誘導(dǎo)地表達(dá)所述金屬硫蛋白。

2.如權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌,其中所述金屬硫蛋白為褶牡蠣金屬硫蛋白。

3.如權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌,其中所述金屬硫蛋白包含或具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列。

4.如權(quán)利要求2或3所述的枯草芽孢桿菌,其中所述編碼核酸分子包含或具有SEQ ID NO:2的核苷酸序列。

5.如權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌,其中所述融合表達(dá)載體構(gòu)建自PHT43-SUMO。

6.如權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌,其中所述枯草芽孢桿菌為B.subtilis WB800N。

7.一種生產(chǎn)金屬硫蛋白的方法,包括以下步驟:

(a)構(gòu)建金屬硫蛋白的融合表達(dá)載體;

(b)用所述融合表達(dá)載體轉(zhuǎn)化枯草芽孢桿菌;以及

(c)培養(yǎng)所述枯草芽孢桿菌,并加入誘導(dǎo)劑,以獲得包含表達(dá)的所述金屬硫蛋白的培養(yǎng)物。

8.如權(quán)利要求7所述的方法,還包括步驟(d):從所述培養(yǎng)物中純化所述金屬硫蛋白。

9.如權(quán)利要求7或8所述的方法,其中所述的金屬硫蛋白為褶牡蠣金屬硫蛋白。

10.如權(quán)利要求7或8所述的方法,其中步驟(a)所用的融合表達(dá)載體為PHT43-SUMO,所用的枯草芽孢桿菌為B.subtilis WB800N。

11.如權(quán)利要求10所述的方法,還包括采用SUMO蛋白酶處理表達(dá)的金屬硫蛋白。

12.如權(quán)利要求7或8所述的方法,其中所述誘導(dǎo)劑為IPTG、葡萄糖和重金屬鹽,其中所述重金屬鹽選自ZnSO4、Na2SeO3、CdCl2或它們的組合。

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