本發(fā)明涉及多肽提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種枸杞肽的提取方法。

背景技術(shù)：

枸杞，又稱枸杞子、紅耳墜，是茄科小灌木枸杞的成熟子實(shí)，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》稱其為“久服輕身不老、耐寒暑”，有延衰抗老的功效，又名“卻老子”?，F(xiàn)代藥理學(xué)表明，枸杞子具有提高機(jī)體免功能、抗氧化、抗衰老、保肝、增加白細(xì)胞等作用，被列為重要的滋補(bǔ)性藥物。另外，枸杞子中的枸杞多肽是其主要的活性成分之一，具有很大的市場(chǎng)前景。

目前市面上葛根產(chǎn)品多為粗加工產(chǎn)品(枸杞干、枸杞原汁、枸杞酒、枸杞飲料、枸杞調(diào)和蜜、枸杞茶等)或直接入藥，枸杞中發(fā)揮作用的枸杞多糖，甜菜堿等有效成份吸收利用率低，無法體現(xiàn)枸杞產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的充分利用。因此，要想使得枸杞發(fā)揮出最大的功效，最好的方式是從枸杞中提取出枸杞多肽，從而便于人體吸收。

現(xiàn)有的提取法由于在溶劑用量、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)等方面沒有進(jìn)行優(yōu)化，往往難以達(dá)到最佳的枸杞多肽提取效果。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種枸杞肽的提取方法，選用新鮮優(yōu)質(zhì)的枸杞子，運(yùn)用生物酶解技術(shù)，經(jīng)原材料預(yù)處理、制取漿汁、低溫浸泡、水解、過濾、濃縮、噴霧干燥，能大大優(yōu)化枸杞肽的提取效果。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種枸杞肽的提取方法。具體地，所述的提取方法包括以下步驟：

步驟一、將枸杞用殺菌劑浸泡后，用濃度0.5-1.0％的氯化鈉溶液浸泡20-30min，清水沖洗2-3次，制得初步滅菌枸杞；

步驟二、將初步滅菌枸杞100℃殺菌5-10s后，冷卻至室溫，制得滅菌枸杞，然后將所述滅菌枸杞轉(zhuǎn)移至打漿機(jī)中加入蒸餾水，打漿15-25min，壓濾，分別得到枸杞漿汁和枸杞料渣；

步驟三、向枸杞料渣中加入酪蛋白和磷脂，室溫條件下振動(dòng)磨粉碎至粒徑為20-30μm，得到破壁枸杞料渣；

步驟四、將枸杞漿汁與破壁枸杞料渣加入蒸煮罐，30℃條件下攪拌2h，靜置1h，60℃條件下真空抽得到枸杞抽提液；

步驟五、將枸杞抽提液轉(zhuǎn)移至微波提取設(shè)備，加入植物蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值至4.5-6，50℃、800MHz條件下酶解1.5h，然后調(diào)節(jié)pH值至3.5，加入復(fù)合多糖酶45℃、800MHz條件下酶解1h，95℃、15s滅酶活，然后降至室溫，制得枸杞滅活酶解液；

步驟六、將枸杞滅活酶解液利用板框過濾器過濾后，轉(zhuǎn)移至減壓濃縮罐中進(jìn)行減壓濃縮至相對(duì)密度大于0.1-0.2g/mL，制得枸杞多肽濃縮液；

步驟七、將枸杞多肽濃縮液轉(zhuǎn)移至噴霧干燥機(jī)，進(jìn)風(fēng)溫度100℃，出風(fēng)溫度85℃進(jìn)行濃縮，制得枸杞干膏；

步驟八、將枸杞干膏粉碎過濾后過篩，即制得枸杞肽。

優(yōu)選地，步驟一中所述殺菌劑為濃度0.06wt％的次氯酸鈣溶液。

優(yōu)選地，步驟二中所述滅菌枸杞與蒸餾水的質(zhì)量體積比為1∶2-3。

優(yōu)選地，步驟二中所述壓濾時(shí)，壓濾設(shè)備的孔徑為100-120目。

優(yōu)選地，步驟三中所述枸杞料渣與酪蛋白的質(zhì)量比為1:0.03-0.05；枸杞料渣與磷脂的質(zhì)量比為1:0.03-0.04。

優(yōu)選地，步驟五中所述微波提取設(shè)備為超聲波提取機(jī)。

優(yōu)選地，步驟五中所述枸杞抽提液與纖維素酶的體積質(zhì)量比為1：0.5-0.8；枸杞抽提液與復(fù)合多糖酶的體積質(zhì)量比為0.2-0.4。

優(yōu)選地，步驟六中減壓濃縮條件為80℃，0.05-0.07mPa。

優(yōu)選地，所述枸杞干膏含水量為8-10％。

優(yōu)選地，步驟八中過篩時(shí)篩子的目數(shù)為60目。

本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：

1、本發(fā)明枸杞肽的提取方法，通過改進(jìn)制備過程，原材料經(jīng)過多次酶解和過濾，不僅提高了枸杞的利用率，而且增加了枸杞肽的提取率。

2、本發(fā)明枸杞肽的提取方法，枸杞原料能夠獲得充分的滅菌和消毒，消毒過程綠色環(huán)保，極大的提高了枸杞肽的食品安全性。

3、本發(fā)明枸杞肽的提取方法，原材料易取得，成本低，在傳統(tǒng)工藝上進(jìn)行改善，不需額外增加設(shè)備，具有低成本、高產(chǎn)出、易于大規(guī)模推廣的特點(diǎn)。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

本實(shí)施例的枸杞肽的提取方法，按以下步驟制備：

步驟一、將100Kg枸杞用濃度0.06wt％的次氯酸鈣溶液浸泡后，用濃度0.6％的氯化鈉溶液浸泡20min，清水沖洗2次，制得初步滅菌枸杞；

步驟二、將初步滅菌枸杞100℃殺菌8s后，冷卻至室溫，制得滅菌枸杞，然后將滅菌枸杞轉(zhuǎn)移至打漿機(jī)中加入與滅菌枸杞質(zhì)量體積比為1∶3的蒸餾水，打漿15min，壓濾(孔徑為110目)，分別得到枸杞漿汁和枸杞料渣；

步驟三、向枸杞料渣中加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.05的酪蛋白、加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.034的磷脂，室溫條件下振動(dòng)磨粉碎至粒徑為20μm，得到破壁枸杞料渣；

步驟四、將枸杞漿汁與破壁枸杞料渣加入蒸煮罐，30℃條件下攪拌2h，靜置1h，60℃條件下真空抽得到枸杞抽提液；

步驟五、將枸杞抽提液轉(zhuǎn)移至超聲波提取機(jī)，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為1：0.7的植物蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值至5.5，50℃、800MHz條件下酶解1.5h，然后調(diào)節(jié)pH值至3.5，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為0.4的復(fù)合多糖酶，45℃、800MHz條件下酶解1h，95℃、15s滅酶活，然后降至室溫，制得枸杞滅活酶解液；

步驟六、將枸杞滅活酶解液利用板框過濾器過濾后，轉(zhuǎn)移至減壓濃縮罐中80℃，0.05mPa條件下進(jìn)行減壓濃縮至相對(duì)密度大于0.1g/mL，制得枸杞多肽濃縮液；

步驟七、將枸杞多肽濃縮液轉(zhuǎn)移至噴霧干燥機(jī)，進(jìn)風(fēng)溫度100℃，出風(fēng)溫度85℃進(jìn)行濃縮，制得含水量為9.5％的枸杞干膏；

步驟八、將枸杞干膏粉碎過濾后過60目篩，即制得枸杞肽。

實(shí)施例2

本實(shí)施例的枸杞肽的提取方法，按以下步驟制備：

步驟一、將15Kg枸杞用濃度0.06wt％的次氯酸鈣溶液浸泡后，用濃度0.5％的氯化鈉溶液浸泡30min，清水沖洗2次，制得初步滅菌枸杞；

步驟二、將初步滅菌枸杞100℃殺菌6s后，冷卻至室溫，制得滅菌枸杞，然后將滅菌枸杞轉(zhuǎn)移至打漿機(jī)中加入與滅菌枸杞質(zhì)量體積比為1∶2.8的蒸餾水，打漿18min，壓濾(孔徑為120目)，分別得到枸杞漿汁和枸杞料渣；

步驟三、向枸杞料渣中加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.04的酪蛋白、加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.03的磷脂，室溫條件下振動(dòng)磨粉碎至粒徑為28μm，得到破壁枸杞料渣；

步驟四、將枸杞漿汁與破壁枸杞料渣加入蒸煮罐，30℃條件下攪拌2h，靜置1h，60℃條件下真空抽得到枸杞抽提液；

步驟五、將枸杞抽提液轉(zhuǎn)移至超聲波提取機(jī)，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為1：0.6的植物蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值至5，50℃、800MHz條件下酶解1.5h，然后調(diào)節(jié)pH值至3.5，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為0.38的復(fù)合多糖酶，45℃、800MHz條件下酶解1h，95℃、15s滅酶活，然后降至室溫，制得枸杞滅活酶解液；

步驟六、將枸杞滅活酶解液利用板框過濾器過濾后，轉(zhuǎn)移至減壓濃縮罐中80℃，0.06mPa條件下進(jìn)行減壓濃縮至相對(duì)密度大于0.16g/mL，制得枸杞多肽濃縮液；

步驟七、將枸杞多肽濃縮液轉(zhuǎn)移至噴霧干燥機(jī)，進(jìn)風(fēng)溫度100℃，出風(fēng)溫度85℃進(jìn)行濃縮，制得含水量為9％的枸杞干膏；

步驟八、將枸杞干膏粉碎過濾后過60目篩，即制得枸杞肽。

實(shí)施例3

本實(shí)施例的枸杞肽的提取方法，按以下步驟制備：

步驟一、將800Kg枸杞用濃度0.06wt％的次氯酸鈣溶液浸泡后，用濃度0.8％的氯化鈉溶液浸泡26min，清水沖洗3次，制得初步滅菌枸杞；

步驟二、將初步滅菌枸杞100℃殺菌5s后，冷卻至室溫，制得滅菌枸杞，然后將滅菌枸杞轉(zhuǎn)移至打漿機(jī)中加入與滅菌枸杞質(zhì)量體積比為1∶2.6的蒸餾水，打漿24min，壓濾(孔徑為100目)，分別得到枸杞漿汁和枸杞料渣；

步驟三、向枸杞料渣中加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.045的酪蛋白、加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.04的磷脂，室溫條件下振動(dòng)磨粉碎至粒徑為30μm，得到破壁枸杞料渣；

步驟四、將枸杞漿汁與破壁枸杞料渣加入蒸煮罐，30℃條件下攪拌2h，靜置1h，60℃條件下真空抽得到枸杞抽提液；

步驟五、將枸杞抽提液轉(zhuǎn)移至超聲波提取機(jī)，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為1：0.8的植物蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值至6，50℃、800MHz條件下酶解1.5h，然后調(diào)節(jié)pH值至3.5，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為0.3的復(fù)合多糖酶，45℃、800MHz條件下酶解1h，95℃、15s滅酶活，然后降至室溫，制得枸杞滅活酶解液；

步驟六、將枸杞滅活酶解液利用板框過濾器過濾后，轉(zhuǎn)移至減壓濃縮罐中80℃，0.05mPa條件下進(jìn)行減壓濃縮至相對(duì)密度大于0.18g/mL，制得枸杞多肽濃縮液；

步驟七、將枸杞多肽濃縮液轉(zhuǎn)移至噴霧干燥機(jī)，進(jìn)風(fēng)溫度100℃，出風(fēng)溫度85℃進(jìn)行濃縮，制得含水量為10％的枸杞干膏；

步驟八、將枸杞干膏粉碎過濾后過60目篩，即制得枸杞肽。

實(shí)施例4

本實(shí)施例的枸杞肽的提取方法，按以下步驟制備：

步驟一、將60Kg枸杞用濃度0.06wt％的次氯酸鈣溶液浸泡后，用濃度0.9％的氯化鈉溶液浸泡24min，清水沖洗3次，制得初步滅菌枸杞；

步驟二、將初步滅菌枸杞100℃殺菌10s后，冷卻至室溫，制得滅菌枸杞，然后將滅菌枸杞轉(zhuǎn)移至打漿機(jī)中加入與滅菌枸杞質(zhì)量體積比為1∶2.5的蒸餾水，打漿20min，壓濾(孔徑為100目)，分別得到枸杞漿汁和枸杞料渣；

步驟三、向枸杞料渣中加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.03的酪蛋白、加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.038的磷脂，室溫條件下振動(dòng)磨粉碎至粒徑為26μm，得到破壁枸杞料渣；

步驟四、將枸杞漿汁與破壁枸杞料渣加入蒸煮罐，30℃條件下攪拌2h，靜置1h，60℃條件下真空抽得到枸杞抽提液；

步驟五、將枸杞抽提液轉(zhuǎn)移至超聲波提取機(jī)，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為1：0.6的植物蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值至4.5，50℃、800MHz條件下酶解1.5h，然后調(diào)節(jié)pH值至3.5，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為0.25的復(fù)合多糖酶，45℃、800MHz條件下酶解1h，95℃、15s滅酶活，然后降至室溫，制得枸杞滅活酶解液；

步驟六、將枸杞滅活酶解液利用板框過濾器過濾后，轉(zhuǎn)移至減壓濃縮罐中80℃，0.07mPa條件下進(jìn)行減壓濃縮至相對(duì)密度大于0.2g/mL，制得枸杞多肽濃縮液；

步驟七、將枸杞多肽濃縮液轉(zhuǎn)移至噴霧干燥機(jī)，進(jìn)風(fēng)溫度100℃，出風(fēng)溫度85℃進(jìn)行濃縮，制得含水量為8％的枸杞干膏；

步驟八、將枸杞干膏粉碎過濾后過60目篩，即制得枸杞肽。

實(shí)施例5

本實(shí)施例的枸杞肽的提取方法，按以下步驟制備：

步驟一、將120Kg枸杞用濃度0.06wt％的次氯酸鈣溶液浸泡后，用濃度1.0％的氯化鈉溶液浸泡22min，清水沖洗2次，制得初步滅菌枸杞；

步驟二、將初步滅菌枸杞100℃殺菌9s后，冷卻至室溫，制得滅菌枸杞，然后將滅菌枸杞轉(zhuǎn)移至打漿機(jī)中加入與滅菌枸杞質(zhì)量體積比為1∶2的蒸餾水，打漿25min，壓濾(孔徑為120目)，分別得到枸杞漿汁和枸杞料渣；

步驟三、向枸杞料渣中加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.035的酪蛋白、加入與枸杞料渣質(zhì)量比為1:0.035的磷脂，室溫條件下振動(dòng)磨粉碎至粒徑為25μm，得到破壁枸杞料渣；

步驟四、將枸杞漿汁與破壁枸杞料渣加入蒸煮罐，30℃條件下攪拌2h，靜置1h，60℃條件下真空抽得到枸杞抽提液；

步驟五、將枸杞抽提液轉(zhuǎn)移至超聲波提取機(jī)，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為1：0.5的植物蛋白酶，調(diào)節(jié)pH值至4.8，50℃、800MHz條件下酶解1.5h，然后調(diào)節(jié)pH值至3.5，加入與枸杞抽提液體積質(zhì)量比為0.2的復(fù)合多糖酶，45℃、800MHz條件下酶解1h，95℃、15s滅酶活，然后降至室溫，制得枸杞滅活酶解液；

步驟六、將枸杞滅活酶解液利用板框過濾器過濾后，轉(zhuǎn)移至減壓濃縮罐中80℃，0.07mPa條件下進(jìn)行減壓濃縮至相對(duì)密度大于0.12g/mL，制得枸杞多肽濃縮液；

步驟七、將枸杞多肽濃縮液轉(zhuǎn)移至噴霧干燥機(jī)，進(jìn)風(fēng)溫度100℃，出風(fēng)溫度85℃進(jìn)行濃縮，制得含水量為8.5％的枸杞干膏；

步驟八、將枸杞干膏粉碎過濾后過60目篩，即制得枸杞肽。

枸杞中富含多種氨基酸且不含脂肪，其中的肽類物質(zhì)可以不經(jīng)消化直接為人體所吸收，具有調(diào)節(jié)免疫、抗衰老、抗腫瘤、抗疲勞、抗輻射損傷、調(diào)節(jié)血脂、降血糖、降血壓、保護(hù)生殖系統(tǒng)、提高視力、提高呼吸道抗病能力、美容養(yǎng)顏等功效，適合所有人群使用。

本發(fā)明枸杞肽的提取方法，原材料選用新鮮優(yōu)質(zhì)的枸杞子，運(yùn)用生物酶解技術(shù)，枸杞經(jīng)過預(yù)處理、制取漿汁、低溫浸泡、水解、過濾、濃縮、噴霧干燥等工藝流程，能夠?qū)㈣坭街械挠行С煞?，成功轉(zhuǎn)化為小分子肽類物質(zhì)，并高效的提取出來，從而有效解決了枸杞中多種有效成份與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被人體有效吸收和利用的問題。本發(fā)明實(shí)施例制得的小分子枸杞肽分子量均在1000道爾頓以下，具有極高的消化吸收性和利用率，可以有效的保證人體對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)素的補(bǔ)充。

雖然以上描述了本發(fā)明的具體實(shí)施方式，但是本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，這些僅是舉例說明，本發(fā)明的保護(hù)范圍是由所附權(quán)利要求書限定的。本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不背離本發(fā)明的原理和實(shí)質(zhì)的前提下，可以對(duì)這些實(shí)施方式作出多種變更或修改，但這些變更和修改均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。