本發(fā)明屬于食品化學(xué)領(lǐng)域，涉及果膠低聚糖的制備方法，尤其是分子量為2000～3000Da的果膠低聚糖化學(xué)制備方法。技術(shù)背景果膠寡糖尤其是寡聚半乳糖醛酸具有誘導(dǎo)植物抗性、抑制小鼠肝細(xì)胞中油脂的積累等生物活性，果膠低聚糖能夠影響細(xì)菌菌群而發(fā)揮其潛在的益生活性。目前果膠低聚糖主要通過(guò)從天然植物中提取、化學(xué)法、酶法合成，基于產(chǎn)品質(zhì)量和成本等的綜合考慮，目前較為普遍的方法是采用化學(xué)或酶法對(duì)果膠多糖進(jìn)行降解。由于酶的價(jià)格較高，工藝復(fù)雜，周期長(zhǎng)，產(chǎn)品質(zhì)量難以控制，因此酶法無(wú)法實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。而現(xiàn)有的化學(xué)方法制備果膠低聚糖存在降解難以控制的問(wèn)題，得到的產(chǎn)品主要是單糖和雙糖，很難得到所需的活性寡糖。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有果膠低聚糖制備工藝成本高，產(chǎn)品質(zhì)量難以控制等缺陷，提供一種分子量為2000～3000Da的果膠低聚糖化學(xué)制備方法。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：一種分子量為2000～3000Da的果膠低聚糖制備方法，它包括以下步驟：1)用超純水配置質(zhì)量濃度為0.5～2％的果膠溶液，至于35～45℃搖床使其充分溶解，測(cè)定初始pH，然后用堿液調(diào)節(jié)pH至9.5～10.5，于85～95℃繼續(xù)搖床10～30min；2)向溶液中按體積加入5～20％的H2O2，于85～95℃搖床反應(yīng)3～5h，反應(yīng)結(jié)束后用酸液將pH調(diào)至略低于初始pH并向反應(yīng)液中加入2～5倍體積的乙醇沉淀；3)離心，分離沉淀并用乙醇洗滌2～3次，置于35～45℃烘箱烘干至恒重，即得。優(yōu)選的制備方法是：1)用超純水配置質(zhì)量濃度為1％的果膠溶液，至于40℃搖床使其充分溶解，測(cè)定初始pH，然后用堿液調(diào)節(jié)pH至10，于90℃繼續(xù)搖床10min；2)向溶液中按體積加入10％的H2O2，于90℃搖床反應(yīng)4h，反應(yīng)結(jié)束后用酸液將pH調(diào)至略低于初始pH并向反應(yīng)液中加入4倍體積的乙醇沉淀；3)離心，分離沉淀并用乙醇洗滌3次，置于40℃烘箱烘干至恒重，即得。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述果膠為柑橘果膠。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述堿液為氨水。進(jìn)一步優(yōu)選地，所述酸液為鹽酸。本發(fā)明的有益效果是：1)本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了果膠的可控降解，制備出重均分子量(Weight-averageMolecularWeight，MW)為2000～3000Da的果膠低聚糖，從而提高了產(chǎn)品質(zhì)量，試驗(yàn)證明，該果膠低聚糖比普通化學(xué)法制備的產(chǎn)品具有更好的抑菌活性。2)本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)周期短，產(chǎn)物收率和純度高，所用的原料、試劑來(lái)源廣泛、成本低廉，容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。具體實(shí)施方式以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)地說(shuō)明。實(shí)施例1果膠低聚糖制備工藝步驟如下：1)用超純水配置質(zhì)量濃度為1％的柑橘果膠溶液100ml，至于40℃搖床使其充分溶解，測(cè)定初始pH為3.8，然后用氨水調(diào)節(jié)pH至10，于90℃搖床穩(wěn)定10min；2)向溶液中加入H2O210ml，于90℃搖床反應(yīng)4h，反應(yīng)結(jié)束后用鹽酸將pH調(diào)至略低于初始pH(pH為3.5)，向反應(yīng)液中加入4倍體積的乙醇沉淀；3)離心(8000rpm/min，10min)，分離沉淀并用乙醇洗滌3次，置于40℃烘箱烘干至恒重，即得。實(shí)施例2果膠低聚糖制備工藝步驟如下：1)用超純水配置質(zhì)量濃度為0.5％的柑橘果膠溶液100ml，至于35℃搖床使其充分溶解，測(cè)定初始pH為3.9，然后用氨水調(diào)節(jié)pH至9.5，于85℃搖床穩(wěn)定10min；2)向溶液中加入H2O25ml，于95℃搖床反應(yīng)3h，反應(yīng)結(jié)束后用鹽酸將pH調(diào)至略低于初始pH(pH為3.6)，向反應(yīng)液中加入2倍體積的乙醇沉淀；3)離心，分離沉淀并用乙醇洗滌2次，置于35℃烘箱烘干至恒重，即得。實(shí)施例3果膠低聚糖制備工藝步驟如下：1)用超純水配置質(zhì)量濃度為2％的柑橘果膠溶液100ml，至于45℃搖床使其充分溶解，測(cè)定初始pH為3.6，然后用NaOH調(diào)節(jié)pH至10.5，于95℃搖床穩(wěn)定10min；2)向溶液中加入H2O220ml，于85℃搖床反應(yīng)5h，反應(yīng)結(jié)束后用鹽酸將pH調(diào)至略低于初始pH(pH為3.3)，并向反應(yīng)液中加入5倍體積的乙醇沉淀；3)離心，分離沉淀并用乙醇洗滌3次，置于45℃烘箱烘干至恒重，即得。試驗(yàn)例1將實(shí)施例1～3烘干至恒重的產(chǎn)品取出稱(chēng)重并計(jì)算收率，采用GPC測(cè)定樣品的分子量(所用流動(dòng)相為0.1M的NaNO3，流速為0.4ml/min，樣品濃度為0.01g/9.9ml，進(jìn)樣量為1ml)，檢測(cè)2000～3000Da果膠低聚糖占總產(chǎn)物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，結(jié)果見(jiàn)表1。表1實(shí)施例1～3的產(chǎn)物檢測(cè)數(shù)據(jù)產(chǎn)物重量(g)收率(％)分子量質(zhì)量分?jǐn)?shù)(％)實(shí)施例10.42542.52.620×103100實(shí)施例20.18537.02.317×10398.9實(shí)施例30.7738.52.661×10399.2從表1中的數(shù)據(jù)可以看出，本發(fā)明制得的果膠低聚糖收率達(dá)37％以上，分子量在2000～3000Da之間，純度在98.9％以上，且實(shí)施例1的綜合效果最好。試驗(yàn)例2果膠低聚糖對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌抑菌活性試驗(yàn)：將活化好的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌分別配制成梯度菌懸液，涂布于LB固體培養(yǎng)基后于37℃培養(yǎng)基培養(yǎng)36小時(shí)后，計(jì)數(shù)得到菌濃度合適的菌懸液。取該濃度的菌懸液涂布，然后等距放置牛津杯，牛津杯中分別加入一定濃度的樣品的水溶液。大腸桿菌實(shí)驗(yàn)中所用的菌懸液濃度為4×106cfu/ml，樣品濃度為50mg/ml；金黃色葡萄球菌的菌懸液濃度為2.4×107cfu/ml，樣品濃度為80mg/ml，培養(yǎng)后取出牛津杯測(cè)定抑菌圈直徑，同時(shí)以是市售的果膠低聚糖為對(duì)照，結(jié)果如表2。表2實(shí)施例1～3的抑菌活性大腸桿菌抑菌圈(mm)金黃色葡萄球菌抑菌圈(mm)實(shí)施例19.514.2實(shí)施例29.111.6實(shí)施例38.512.0對(duì)照5.67.8從表2中的數(shù)據(jù)可以看出，本發(fā)明制備的果膠低聚糖具有更好的抑菌活性。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3