技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種牛PDHB基因腺病毒干擾載體構(gòu)建及其鑒定方法，序列為：SEQ?ID?NO：1、SEQ?ID?NO：2、SEQ?ID?NO：3。構(gòu)建方法包括：載體用BamH?I，EcoR?I雙酶切；酶切完成后膠回收；目的片斷利用3’和5’的單鏈退火獲得：目的片段與載體連接反應(yīng)；轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞:DH5a；轉(zhuǎn)化后挑菌，搖菌14小時，測序；將重組腺病毒載體質(zhì)粒PDHB?shRNA與pHBAd?BHG骨架載體共轉(zhuǎn)染HEK293A細(xì)胞，獲得重組腺病毒Ad?PDHB?shRNA。本發(fā)明的shRNA1、shRNA2和shRNA3對PDHB基因的干擾效率分別為：95.12％、12.69％和97.76％。

技術(shù)研發(fā)人員：李安寧;昝林森;武麗娟;王曉宇
受保護(hù)的技術(shù)使用者：西北農(nóng)林科技大學(xué)
文檔號碼：201710018350
技術(shù)研發(fā)日：2017.01.11
技術(shù)公布日：2017.06.09