技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一步法實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)香石竹斑駁病毒的方法。其主要特征在于靶基因?yàn)镃arMV分離物CP基因經(jīng)過(guò)克隆后，構(gòu)建質(zhì)粒載體，選取正確的質(zhì)粒載體經(jīng)線性化體外轉(zhuǎn)錄后，計(jì)算提純后ssRNA用10倍梯度稀釋，配制拷貝數(shù)為2×102?2×106copies陽(yáng)性ssRNA制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，并設(shè)計(jì)香石竹斑駁病毒特異性檢測(cè)的引物對(duì)和Taqman熒光探針，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)找到最優(yōu)化條件下引物的退火溫度、引物濃度、探針濃度，并采用一步實(shí)時(shí)定量RT?PCR檢測(cè)方法進(jìn)行定量檢測(cè)。本發(fā)明方法能快速、可靠的檢測(cè)出香石竹斑駁病毒，并可對(duì)所含病毒進(jìn)行定量。

技術(shù)研發(fā)人員：劉冠澤;王麗花;張藝萍;楊秀梅;瞿素萍;許鳳;王繼華;蘇艷;張麗芳
受保護(hù)的技術(shù)使用者：云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所
文檔號(hào)碼：201611255119
技術(shù)研發(fā)日：2016.12.30
技術(shù)公布日：2017.05.31