本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及二并環(huán)類間變性淋巴瘤激酶抑制劑、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，這些化合物的制備方法，含有這些化合物的藥物制劑和藥物組合物，以及該化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體在制備治療和/或預(yù)防由間變性淋巴瘤激酶介導(dǎo)的癌癥相關(guān)疾病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
間變性淋巴瘤激酶(Anaplastic lymphoma kinase，ALK)是受體酪氨酸激酶家族成員，可通過自身磷酸化募集下游蛋白，進(jìn)而表達(dá)特定的基因，調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝和生長。間變性淋巴瘤激酶最早發(fā)現(xiàn)于間變性大細(xì)胞淋巴瘤(Anaplastic large cell lymphoma，ALCL)中，后來發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中亦有高表達(dá)。ALK在某些ALCL/NSCLC中的異常表達(dá)來源于不同的染色體易位。這些染色體易位均可產(chǎn)生相應(yīng)的融合蛋白。對這些融合基因分析表明，它們都含有ALK基因3’端編碼胞內(nèi)激酶區(qū)的基因序列，而與ALK融合的基因片段均含啟動子元件及編碼介導(dǎo)自身二聚化的序列，從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)具有ALK激酶活性的融合蛋白高表達(dá)及過度激活，引起細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。所以，ALK胞內(nèi)激酶區(qū)的活性及相應(yīng)的信號傳導(dǎo)途徑是導(dǎo)致ALCL形成的重要分子機(jī)制。
因此，研發(fā)針對ALK的小分子抑制劑，可以有效的降低突變的ALK基因?qū)ο掠蔚鞍椎挠绊?，進(jìn)而影響到腫瘤細(xì)胞侵襲、增殖等效應(yīng)，最終影響腫瘤細(xì)胞的生長，起到抗腫瘤的作用。目前已經(jīng)有輝瑞公司的克唑替尼(Crizotinib)成功上市，但已有大量臨床證明一代ALK抑制劑Crizotinib，容易產(chǎn)生耐藥性，因此，設(shè)計并篩選對ALK突變有活性的小分子抑制劑并努力改善化合物的理化性質(zhì)，提高成藥性(如提高化合物的生物利用度)，具有顯著的臨床意義。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明以開發(fā)針對ALK的小分子抑制劑為目標(biāo)，發(fā)明了對治療和/或預(yù)防ALK介導(dǎo)的癌癥相關(guān)疾病具有良好效果的二并環(huán)類間變性淋巴瘤激酶抑制劑。具體的技術(shù)方案為如下：
1.通式(Ⅰ)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體：
其中，
R1選自氫原子、羥基、氨基、氰基、硝基、羧基、鹵素原子、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷氧基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-6烷基氨基或(C1-6烷基)2氨基；
R2、R4、R5分別獨立地選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、磺酰基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷氧基、C2-8烯基、C2-8炔基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷基氨基磺?；?、(C1-6烷基)2氨基磺酰基或C1-6烷基磺?；?/p>
R3選自任選被W取代的5～14元雜芳基或3～8元雜環(huán)基；
或R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的3～8元環(huán)烷基、3～8元雜環(huán)基或5～14元雜芳基；
或R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的6～8元芳基、5～8元雜芳基或3～8元雜環(huán)基；
X、Y分別獨立地選自-CO-，-CO2-，-SO-，-SO2-，任選被W取代的亞烷基或亞氨基；
n選自0、1、2或3；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基、氰基、羧基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、(C1-6烷基)2氨基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基磺?；1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷基氨基、羥基C1-6烷氧基、氨基磺酰基、氨基磺酰氨基、氨基磺?；鵆1-6烷基、氨基磺酰氨基C1-6烷基、5～6元雜芳基、5～6元雜環(huán)基或3～8元環(huán)烷基。
2.如技術(shù)方案1所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基或鹵代C1-6烷基；
R2、R4、R5分別獨立地選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6 烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷氧基；
R3選自任選被W取代的5～8元雜芳基或4～6元雜環(huán)基；
或R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的5～8元雜芳基或4～6元雜環(huán)基；
或R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的5～6元雜芳基或4～6元雜環(huán)基；
X、Y分別獨立地選自-CO-，-CO2-，-SO-，-SO2-，任選被W取代的C1-6亞烷基或亞氨基；
n選自0或1；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基、羧基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基或C1-6烷基氨基。
3.如技術(shù)方案2所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R2、R4、R5分別獨立地選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷氧基；
R3選自任選被W取代的含1～2個N原子的5～6元雜芳基或5～6元雜環(huán)基；
或R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的含1～2個N原子的5～6元雜環(huán)基；
或R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的含1～2個O和/或S原子的5～6元雜環(huán)基；
X、Y分別獨立地選自-SO-，-SO2-，任選被W取代的C1-6亞烷基或亞氨基；
n選自0或1；
W選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基氨基。
4.如技術(shù)方案3所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
X、Y分別獨立地選自-SO2-或任選被W取代的C1-6亞烷基，其中X、Y不能同時為被W取代的C1-6亞烷基。
5.如技術(shù)方案3所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-4烷基；
R2、R4、R5分別獨立地選自氫原子，鹵素原子、C1-4烷基、羥基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷氧基、鹵代C1-4烷氧基或羥基C1-4烷氧基；
R3選自任選被W取代的吡啶基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、吡咯基、二氫吡咯基、四氫吡咯基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基；
X、Y分別獨立地選自-SO2-或任選被W取代的C1-4亞烷基；
n選自0或1；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基或C1-4烷基。
6.如技術(shù)方案3所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-4烷基；
R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的含1～2個N原子的5～6元雜環(huán)基；
R4、R5分別獨立地選自氫原子、C1-4烷基或C1-4烷氧基；
X、Y分別獨立地選自-SO2-或任選被W取代的C1-4亞烷基；
n選自0或1；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基或C1-4烷基。
7.如技術(shù)方案6所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的含1～2個N原子的6元雜環(huán)基；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基或C1-4烷基。
8.如技術(shù)方案6所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的含1個N原子的5～6元雜環(huán)基；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基或C1-4烷基。
9.如技術(shù)方案3所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-4烷基；
R2選自氫原子、鹵素原子、C1-4烷基、羥基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、C1-4烷氧基或羥基C1-4烷氧基；
R3選自任選被W取代的吡啶基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、吡咯基、二氫吡咯基、四氫吡咯基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基；
R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的含有1～2個O和/或S原子的5～6元雜 環(huán)基；
X、Y分別獨立地選自-SO2-或任選被W取代的C1-4亞烷基；
n選自0或1；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基或C1-4烷基。
10.如技術(shù)方案9所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的含有1～2個O和/或S原子的6元雜環(huán)基；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基或C1-4烷基。
11.如技術(shù)方案10所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的含有2個O和/或S原子的5～6元雜環(huán)基；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基或C1-4烷基。
12.如技術(shù)方案2所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R2、R4、R5分別獨立地選自氫原子、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷氧基；
R3選自任選被W取代的5～6元雜環(huán)基；
或R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的5～6元雜環(huán)基；
或R4和R5連同與之相連的碳形成5～6元雜環(huán)基，所述的5～6元雜環(huán)基可任選被W取代；
X、Y分別獨立地選自-SO2-或任選被W取代的C1-6亞烷基；
n選自0或1；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基、羧基、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
13.如技術(shù)方案12所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R2、R4、R5分別獨立地選自氫原子、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷氧基；
R3選自任選被W取代的含1～2個N原子的6元飽和雜環(huán)基；
或R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的含1～2個N原子的5元飽和雜環(huán)基；
或R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的含1～2個O和/或S原子的6元飽和 雜環(huán)基；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基、羧基、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
14.如技術(shù)方案12所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R2、R4、R5分別獨立地選自氫原子、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷氧基；
R3選自任選被W取代的含1個N原子的5～6元飽和雜環(huán)基；
或R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的含1個N原子的5～6元飽和雜環(huán)基；
或R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的含2個O和/或S原子的5～6元飽和雜環(huán)基；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基、羧基、氰基、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
15.如技術(shù)方案2所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R3選自任選被W取代的吡啶基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、吡咯基、二氫吡咯基、四氫吡咯基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基；
R2、R4、R5分別獨立地選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷氧基；
或R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的吡咯基、二氫吡咯基、四氫吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、惡唑基、吡啶基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基；
或R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的1,4-二氧雜環(huán)己烷基、1,3-二氧雜環(huán)己烷基、1,3-二氧雜環(huán)戊烷基、1,4-二氧雜環(huán)己二烯基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、4,5-二氫噻唑基、嗎啉基、惡唑基、4,5-二氫噁唑基、4,5-二氫異噁唑基、噻喃基或噻唑基；
X、Y分別獨立地選自-SO-，-SO2-，任選被W取代的C1-6亞烷基或亞氨基；
n等于0或1；
W選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基氨基。
16.如技術(shù)方案15所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體， 其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R3選自任選被W取代的吡啶基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、吡咯基、二氫吡咯基、四氫吡咯基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基；
R2、R4、R5分別獨立地選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷氧基；
W選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基氨基。
17.如技術(shù)方案15所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R4、R5分別獨立地選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷氧基；
R2和R3連同與之相連的碳形成任選被W取代的吡咯基、二氫吡咯基、四氫吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、惡唑基、吡啶基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基；
W選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基氨基。
18.如技術(shù)方案15所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
R1選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基或C1-6烷基；
R3選自任選被W取代的吡啶基、二氫吡啶基、四氫吡啶基、吡咯基、二氫吡咯基、四氫吡咯基、哌啶基、哌嗪基或嗎啉基；
R2選自氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、氨基、羥基、羧基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷氧基；
R4和R5連同與之相連的碳形成任選被W取代的1,4-二氧雜環(huán)己烷基、1,3-二氧雜環(huán)己烷基、1,3-二氧雜環(huán)戊烷基、1,4-二氧雜環(huán)己二烯基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、4,5-二氫噻唑基、嗎啉基、噁唑基、4,5-二氫噁唑基、4,5-二氫異噁唑基、噻喃基或噻唑基；
W選自羥基、氨基、羧基、氰基、硝基、鹵素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基或C1-6烷基氨 基。
19.如技術(shù)方案2所述的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體，其中，
X、Y分別獨立地選自-CO-，-CO2-，-SO-，-SO2-，任選被W取代的C1-6亞烷基或亞氨基，且X、Y中一個代表-CO-，-CO2-，-SO-或-SO2-，另一個代表任選被W取代的C1-6亞烷基或亞氨基；
W選自羥基、鹵素原子、氨基、硝基、羧基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基或C1-6烷基氨基。
本發(fā)明的部分化合物
發(fā)明詳述
在本申請的說明書和權(quán)利要求書中，化合物都是依據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)式而命名的，如果表示同一化合物時化合物的命名與化學(xué)結(jié)構(gòu)式不符，以化學(xué)結(jié)構(gòu)式或化學(xué)反應(yīng)式為準(zhǔn)。
本發(fā)明所述的“鹵素原子”包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子等。
本發(fā)明所述的“C1-6烷基”表示直鏈或支鏈的含有1-6個碳原子的烷基，包括例如“C1-4烷基”、“C1-3烷基”等，具體實例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、1,1-二甲基乙基、正戊基、3-甲基丁基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、正己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。
本發(fā)明所述的“C2-8烯基”是指含有至少一個雙鍵的碳原子數(shù)為2-8的直鏈或支鏈或環(huán)狀的烯基，包括例如“C2-6烯基”、“C2-4烯基”、“C2-3烯基”、“C3-6環(huán)烯基”等，具體實例包括但不限于：乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、2-甲基-1-丁烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、1,1-二甲基-2-丙烯基、1-乙基-2-丙烯基、2-己烯基、3-己烯基、2-甲基-1-戊烯基、3-甲基-1-戊烯基、1-甲基-2-戊烯基、3-甲基-2-戊烯基、2-甲基-3-戊烯基、1-甲基-4-戊烯基、3-甲基-4-戊烯基、1,1-二甲基-3-丁烯基、1,2-二甲基-3-丁烯基、1,3-二甲基-2-丁烯基、2,2-二甲基-3-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-1-丁烯基、2-乙基-1-丁烯基、2-乙基-3-丁烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、1-辛烯基、3-辛烯基、4-辛烯基、1,3-丁二烯基、2,4-戊二烯基、1,4-己二烯基、2,4-己二烯基、1,5-庚二烯基、2,5-庚二烯基、2,6-辛二烯基等。
本發(fā)明所述的“C2-8炔基”是指含有三鍵的碳原子數(shù)為2-8的直鏈或支鏈的炔基，其中包 括例如“C2-6炔基”、“C2-4炔基”、“C2-3炔基”等，具體實例包括但不限于：乙炔基、1-丙炔基、2-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、2-甲基-3-丁炔基、1,1-二甲基-2-丙炔基、1-乙基-2-丙炔基、2-己炔基、3-己炔基、1-甲基-2-戊炔基、1-甲基-3-戊炔基、2-甲基-3-戊炔基、1,1-二甲基-3-丁炔基、2-乙基-3-丁炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-甲基-2-己炔基、5-甲基-2-己炔基、2-甲基-3-己炔基、5-甲基-3-己炔基、2-甲基-4-己炔基4-甲基-5-己炔基、2-辛炔基、3-辛炔基、4-辛炔基、4-甲基-2-庚炔基、5-甲基-3-庚炔基、6-甲基-3-庚炔基、2-甲基-4-庚炔基、2-甲基-5-庚炔基、3-甲基-6-庚炔基等。
本發(fā)明所述的“C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基、(C1-6烷基)2氨基、C1-6烷基硫基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷基磺酰基、C1-6烷基磺酰氨基、C1-6烷基氨基磺酰基、(C1-6烷基)2氨基磺?；笔侵敢訡1-6烷基-O-、C1-6烷基-NH-、(C1-6烷基)2-N-、C1-6烷基-S-、C1-6烷基-C(O)-、C1-6烷基-C(O)-O-、C1-6烷基-SO2-、C1-6烷基-SO2-NH-、C1-6烷基-NH-SO2-、(C1-6烷基)2-NH-SO2-方式形成的基團(tuán)，其中“C1-6烷基”的定義如前文所述。
本發(fā)明所述的“C1-4烷氧基、C1-4烷基氨基、(C1-4烷基)2氨基、C1-4烷基硫基、C1-4烷基羰基、C1-4烷基羰基氧基、C1-4烷基磺?；?、C1-4烷基磺酰氨基、C1-4烷基氨基磺?；?C1-4烷基)2氨基磺?；笔侵敢訡1-4烷基-O-、C1-4烷基-NH-、(C1-4烷基)2-N-、C1-4烷基-S-、C1-4烷基-C(O)-、C1-4烷基-C(O)-O-、C1-4烷基-SO2-、C1-4烷基-SO2-NH-、C1-4烷基-NH-SO2-、(C1-4烷基)2-NH-SO2-方式形成的基團(tuán)，其中“C1-4烷基”的定義如前文所述。
本發(fā)明所述的“鹵代C1-6烷基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、磺?；鵆1-6烷基、氨基磺?；鵆1-6烷基、氨基磺酰氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基、羥基C1-6烷氧基”是指一至多個，例如1～4個、1～3個、1～2個鹵素原子、羥基、氨基、磺?；被酋；?、氨基磺酰氨基、C1-6烷氧基分別取代C1-6烷基、C1-6烷氧基中的氫原子所形成的基團(tuán)。
本發(fā)明所述的“鹵代C1-4烷基、羥基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、磺?；鵆1-4烷基、氨基磺?；鵆1-6烷基、氨基磺酰氨基C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、鹵代C1-4烷氧基、羥基C1-4烷氧基”是指一至多個，例如1～4個、1～3個、1～2個鹵素原子、羥基、氨基、磺酰基、氨基磺?；?、氨基磺酰氨基、C1-4烷氧基分別取代C1-4烷基、C1-4烷氧基中的氫原子所形成的基團(tuán)。
本發(fā)明所述的“3～8元環(huán)烷基”，是指3～8個碳原子的烷烴部分去除一個氫原子衍生的單環(huán)環(huán)狀烷基，包括例如“3～6元環(huán)烷基”、“4～7元環(huán)烷基”、“4～8元環(huán)烷基”、“4～6元環(huán)烷基”、“5～6元環(huán)烷基”等。其實例包括但不限于：環(huán)丙烷基、環(huán)丁烷基、環(huán)戊烷基、環(huán)己烷基、環(huán)庚烷基、環(huán)辛烷基、甲基環(huán)丙烷基、二甲基環(huán)丙烷基、甲基環(huán)丁烷基、二甲基環(huán)丁烷基、甲基環(huán)戊烷基、二甲基環(huán)戊烷基、甲基環(huán)己烷基、二甲基環(huán)己烷基等。
本發(fā)明所述的“雜原子”是指N、O、C(O)、S、SO和/或SO2等，優(yōu)選N、O、S，更優(yōu) 選N、O。
本發(fā)明所述的“3～8元雜環(huán)基”是指含有3～8個環(huán)原子、且含有至少一個(例如1、2、3、4或5個)雜原子的飽和或部分飽和的單環(huán)雜環(huán)化合物除去一個氫原子得到的基團(tuán)，包括例如“3～7元雜環(huán)基”、“3～6元雜環(huán)基”、“4～7元雜環(huán)基”、“4～6元雜環(huán)基”、“5～6元雜環(huán)基”、“5～6元含氮雜環(huán)基”、“5元含氮雜環(huán)基”、“6元含氮雜環(huán)基”、“5元飽和雜環(huán)基”、“6元飽和雜環(huán)基”、“含1～2個N原子的5～6元雜環(huán)基”、“含1～2個N原子的5元雜環(huán)基”、“含1～2個N原子的6元雜環(huán)基”、“含1～2個O和/或S原子的5～6元雜環(huán)基”、“含1～2個O和/或S原子的6元雜環(huán)基”、“含1～2個O和/或S原子的5元雜環(huán)基”、“含1～2個O、S和/或N原子的5～6元飽和雜環(huán)基”、“含1～2個O和/或S原子的5～6元飽和雜環(huán)基”、“含1～2個N原子的5～6元飽和雜環(huán)基”、“含1～2個O和/或S原子的5元飽和雜環(huán)基”、“含1～2個O和/或S原子的6元飽和雜環(huán)基”、“含1～2個N原子的5元飽和雜環(huán)基”、“含1～2個N原子的6元飽和雜環(huán)基”、“含2個O和/或S原子的5～6元飽和雜環(huán)基”、“含2個O和/或S原子的5～6元雜環(huán)基”、“含1個N原子的5～6元雜環(huán)基”、“含1個N原子的5～6元飽和雜環(huán)基”等。具體實例包括但不僅限于：氮雜環(huán)丙烷基、2H-氮雜環(huán)丙烷基、二氮雜環(huán)丙烷基、3H-二氮雜環(huán)丙烯基、氮雜環(huán)丁烷基、1,4-二氧雜環(huán)己烷基、1,3-二氧雜環(huán)己烷基、1,3-二氧雜環(huán)戊烷基、1,4-二氧雜環(huán)己二烯基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、二氫吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氫咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氫吡唑基、2,5-二氫噻吩基、四氫噻吩基、4,5-二氫噻唑基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、4,5-二氫噁唑基、4,5-二氫異噁唑基、2,3-二氫異噁唑基、2H-1,2-噁嗪基、6H-1,3-噁嗪基、4H-1,3-噻嗪基、6H-1,3-噻嗪基、2H-吡喃基、2H-吡喃-2-酮基、3,4-二氫-2H-吡喃基等。
本發(fā)明所述的“5～14元雜芳基”是指含有5～14個環(huán)原子(其中至少一個環(huán)原子為雜原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的環(huán)狀基團(tuán)。包括例如“5～10元雜芳基”、“5～8元雜芳基”、“5～6元雜芳基”、“6～12元雜芳基”等。具體實例包括但不僅限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、嘧啶基、1,4-二氧雜環(huán)己二烯基、2H-1,2-噁嗪基、4H-1,2-噁嗪基、6H-1,2-噁嗪基、4H-1,3-噁嗪基、6H-1,3-噁嗪基、4H-1,4-噁嗪基、噠嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基、氮雜環(huán)庚三烯基、1,3-二氮雜環(huán)庚三烯基、氮雜環(huán)辛四烯基等。所述“5～6元雜芳基”是指5～14元雜芳基中含有5～6個環(huán)原子的具體實例。
本發(fā)明所述的“6～8元芳基”是指含有6～8個環(huán)碳原子的單環(huán)芳基，其實例包括但不限 于：苯基、環(huán)辛四烯基等。
本發(fā)明還提供了上述化合物的兩個制備方法，但不僅限于以下方法，反應(yīng)方程式如下：
制備方法一：
反應(yīng)步驟：
步驟1中間體1的制備
分別購買或制備中間體1。
步驟2中間體2的制備
中間體1溶于適當(dāng)溶劑中，0℃加入氫化鈉，攪拌，然后加入原料1，反應(yīng)混合物室溫攪拌(例如1-12h)，加水淬滅，有機(jī)溶劑(例如乙酸乙酯)萃取，濃縮，經(jīng)純化(例如硅膠柱層析)得到中間體2。
步驟3本發(fā)明通式(I)化合物的制備
將中間體2和中間體3溶于適當(dāng)溶劑(例如1,4-二氧六環(huán))中，氮氣保護(hù)下，加熱(例如70℃-120℃)反應(yīng)(例如4-16小時)，過濾，加水稀釋，有機(jī)溶劑(例如乙酸乙酯)萃取，干燥，濃縮，經(jīng)適當(dāng)方法(例如硅膠柱層析)得到本發(fā)明通式(I)化合物。
制備方法二：
反應(yīng)步驟：
步驟1中間體1的制備
將原料1和原料2溶于適當(dāng)溶劑(例如N,N-二甲基甲酰胺)中，室溫下反應(yīng)(例如0.5-5小時)，0℃加水淬滅，有機(jī)溶劑(例如乙酸乙酯)萃取，濃縮，經(jīng)純化(例如硅膠柱層析)得到中間體1。
步驟2中間體2的制備
中間體1溶于適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃)中，室溫攪拌(例如6-16小時)，0℃加水淬滅，有機(jī)溶劑(例如乙酸乙酯)萃取，濃縮，經(jīng)純化(例如硅膠柱層析)得到中間體2。
步驟3本發(fā)明通式(I)化合物的制備
將中間體2和中間體3溶于適當(dāng)溶劑(例如1,4-二氧六環(huán))中，氮氣保護(hù)下，加熱(例如70℃-120℃)反應(yīng)(例如4-16小時)，過濾，加水稀釋，有機(jī)溶劑(例如乙酸乙酯)萃取，干燥，濃縮，經(jīng)適當(dāng)方法(例如硅膠柱層析)得到本發(fā)明通式(I)化合物。
反應(yīng)方程式中，R1、R2、R3、R4、R5、n、X和Y如前文所定義，M代表氟原子、氯原子、溴原子和碘原子。
本發(fā)明式(I)化合物的“立體異構(gòu)體”是指當(dāng)式(I)化合物存在不對稱碳原子時，會產(chǎn)生對映異構(gòu)體，當(dāng)化合物存在碳碳雙鍵或環(huán)狀結(jié)構(gòu)時，會產(chǎn)生順反異構(gòu)體，當(dāng)化合物存在酮或肟時，會產(chǎn)生互變異構(gòu)體，所有式(I)化合物的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、消旋異構(gòu)體、順反異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體、差向異構(gòu)體及其混合物，均包括在本發(fā)明范圍中。
本發(fā)明的通式(I)所示的任一化合物合成得到的若是消旋體，所需要的對映體純的 化合物可以通過手性拆分的方法得到：可以通過具有手性固定相的色譜法(像高壓制備液相色譜、超臨界流體色譜)。手性填料包括但不限于：Chiralcel OJ-H,Chiralpak AD-H，Chiralpak IA，Chiralpak AS-H。
本發(fā)明的通式(I)所示的任一化合物藥學(xué)上可接受的鹽是指由藥學(xué)上可接受的、非毒性堿或酸制備的鹽，包括有機(jī)酸鹽、無機(jī)酸鹽、有機(jī)堿鹽、無機(jī)堿鹽。
有機(jī)酸鹽包括甲酸、乙酸、三氟乙酸鹽、苯磺酸、苯甲酸、對甲苯磺酸、樟腦磺酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、丙磺酸、富馬酸、葡糖酸、谷氨酸、羥乙磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、粘酸、雙羥萘酸、泛酸、琥珀酸、酒石酸等的鹽。
無機(jī)酸鹽包括氫溴酸、氫氯酸、硝酸、硫酸、磷酸等的鹽。
有機(jī)堿鹽包括伯、仲和叔胺，被取代胺包括天然存在的取代胺、環(huán)胺和堿離子交換樹脂，選自甜菜堿、咖啡因、膽堿、N,N’-二芐基乙二胺、二乙胺、2-二乙胺基乙醇、2-二甲胺基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基-嗎啉、N-乙基哌啶、葡甲胺、氨基葡萄糖、海巴明、異丙基胺、甲基葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等的鹽。天然氨基酸鹽如甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、正亮氨酸、酪氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、羥基脯氨酸、組氨酸、鳥氨酸、賴氨酸、精氨酸、絲氨酸等的鹽。
無機(jī)堿鹽包括銨以及鋰、鈉、鉀、鈣、鎂、鋅、鋇、鋁、鐵、酮、亞鐵、錳、二價錳等的鹽。
本發(fā)明式(I)化合物的“酯”是指，當(dāng)式(I)化合物存在羧基時，可以與醇發(fā)生酯化反應(yīng)而形成的酯，當(dāng)式(I)化合物存在羥基時，可以有機(jī)酸、無機(jī)酸、有機(jī)酸鹽等發(fā)生酯化反應(yīng)而形成的酯。酯在酸或者堿存在的條件下，可以發(fā)生水解反應(yīng)生成相應(yīng)的酸或醇。
通式(I)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯或其立體異構(gòu)體可以是溶劑化物形式。若溶劑化物是水合物的情況下，水合作用可以在制備過程中完成或者可以利用原始無水產(chǎn)物的吸濕性逐漸進(jìn)行。
本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)包括上述的式(I)所示的任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體與一種或多種藥用載體和/或稀釋劑的藥物組合物，可以制成藥學(xué)上可接受的任一劑型。以口服、腸胃外、直腸或經(jīng)肺給藥等方式施用于需要這種治療的患者。用于口服給藥時，可制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；也可制成口服液體制劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。制成口服制劑時，可以加入適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等。用于腸胃外給藥時，可制成注射 劑，包括注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液。制成注射劑時，可采用現(xiàn)有制藥領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)，配制注射劑時，可以不加入附加劑，也可根據(jù)藥物的性質(zhì)加入適宜的附加劑。用于直腸給藥時，可制成栓劑等。用于經(jīng)肺給藥時，可制成吸入劑或噴霧劑等。
本發(fā)明進(jìn)一步要求保護(hù)包括上面所述的式(I)任一化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體與其它一種或多種抗腫瘤劑和免疫抑制劑的藥物組合物。所述的抗腫瘤劑和免疫抑制劑為抗代謝物，包括但不限于卡培他濱、吉西他濱、培美曲塞二鈉；為生長因子抑制劑，包括但不限于帕唑帕尼、伊馬替尼、埃羅替尼、拉帕替尼、吉非替尼、凡德他尼；為抗體，包括但不限于赫賽汀、貝伐單抗；為有絲分裂抑制劑，選自紫杉醇、長春瑞濱、多西他賽、多柔比星；為抗腫瘤激素類，包括但不限于來曲唑、他莫西芬、氟維司群、氟他胺、曲普瑞林；為烷化劑類，包括但不限于環(huán)磷酰胺、氮芥、馬法蘭、瘤可寧、卡莫司汀；為金屬鉑類，包括但不限于卡鉑、順鉑、奧沙利鉑；為免疫抑制類，包括但不限于依維莫司、西羅莫司、特癌適；為嘌呤類似物，包括但不限于6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、硫唑嘌呤；為抗生素類，包括但不限于菌素D、柔紅霉素、阿霉素、米托蒽醌、爭光霉素、普卡霉素；為鉑配合物，包括但不限于順鉑、卡波鉑；為腎上腺皮質(zhì)抑制劑類，包括但不限于氨魯米特；為酶抑制劑，包括但不限于SAHA、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、羥基脲、羥喜樹堿、拓?fù)涮乜?、拓?fù)涮婵?、依立替康?/p>
本發(fā)明還提供了本發(fā)明式(I)所示的化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體在制備治療和/或預(yù)防ALK介導(dǎo)的癌癥相關(guān)疾病或非癌性疾病的藥物中的應(yīng)用，所述癌癥相關(guān)的疾病包括但不限于腦癌，肺癌，非小細(xì)胞性肺癌，鱗狀上皮細(xì)胞癌，膀胱癌，胃癌，卵巢癌，腹膜癌，胰腺癌，乳腺癌，頭頸癌，子宮頸癌，子宮內(nèi)膜癌，結(jié)直腸癌，肝癌，腎癌，食管癌，食管腺癌，食管鱗狀細(xì)胞癌，非霍奇金淋巴瘤，腦瘤，中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，膠質(zhì)肉瘤，前列腺癌，甲狀腺癌，雌性生殖道癌，原位癌，淋巴瘤，組織細(xì)胞淋巴瘤，神經(jīng)纖維瘤，骨癌，皮膚癌，結(jié)腸癌，睪丸癌，小細(xì)胞肺癌，胃腸道間質(zhì)瘤，前列腺腫瘤，肥大細(xì)胞腫瘤，多發(fā)性骨髓瘤，黑色素瘤，膠質(zhì)瘤，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，星形細(xì)胞瘤，神經(jīng)母細(xì)胞瘤，肉瘤；增生性疾病，包括但不限于皮膚或前列腺的良性增生。
本發(fā)明化合物具有以下優(yōu)點：
(1)本發(fā)明式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體具有優(yōu)異的ALK抑制活性；
(2)本發(fā)明式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物或其立體異構(gòu)體顯示出良好的生物穩(wěn)定性，作用更持久，生物利用度高；
(3)本發(fā)明化合物制備工藝簡單，藥品純度高，質(zhì)量穩(wěn)定，易于進(jìn)行大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)。
以下通過體外酶學(xué)抑制活性實驗進(jìn)一步闡述本發(fā)明化合物有益效果，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明化合物僅具有下列有益效果。
實驗例1本發(fā)明化合物的體外酶學(xué)活性實驗
供試品：本發(fā)明化合物2的三氟乙酸鹽、化合物3和化合物4，按照化合物2的三氟乙酸鹽、化合物3和化合物4的制備實施例制備。
下述中實驗的縮寫所代表的含義如下：
DMSO：二甲基亞砜
DTT：二硫蘇糖醇
SEB：酶催化劑緩沖溶液
ATP：腺嘌呤核苷三磷酸
ALK：間變性淋巴瘤激酶
SA-XL665：鏈霉親和素標(biāo)記的供體
2.5×、5×、10×其中的“×”：倍
實驗方法：
ALK激酶緩沖液配制：
分別取適量母液濃度為1000mM的MgCl2、2500nM的SEB、100mM的DTT、5×酶緩沖液，加入到超純水中，使得最終濃度分別為：5mM、25nM、1mM、1×酶緩沖液，混勻，待用。
2.5×供試品溶液配制：
對照藥的1mM儲備液配制：稱取對照藥(1.48mg)，加入適量DMSO溶解，混勻，備用。
化合物的1mM儲備液配制：分別稱取化合物適量(具體稱樣量請見下表)，加入適量DMSO溶解，混勻，備用。
分別取1mM儲備液，用DMSO稀釋制成濃度為200μM的溶液，作為母液。用DMSO將上述母液三倍逐級稀釋制成一系列濃度的溶液，然后每個濃度分別用ALK激酶緩沖液稀釋80倍，制成各2.5×供試品溶液，濃度分別為：2500nM、833.33nM、277.78nM、92.59nM、30.86nM、10.29nM、3.43nM、1.14nM、0.38nM、0.13nM、0.04nM。
各種其他試劑配制：
用ALK激酶緩沖液分別配制所需要的5×ALK激酶溶液、5×底物溶液、5×ATP溶液，備用。
ALK酶學(xué)反應(yīng)：
1)384孔板中相對應(yīng)的孔中分別加入4μL配制好的2.5×供試品溶液、2μL配制好的5×ALK激酶溶液，25℃孵育10分鐘。
2)相對應(yīng)的孔中再分別加入2μL配制好的5×底物溶液和2μL配制好的5×ATP溶液，啟動酶反應(yīng)，25℃孵育30分鐘。
酶學(xué)檢測：
用檢測緩沖液(detection buffer)配制所需濃度的SA-XL665，然后和等體積的酪氨酸激酶抗體混勻，相對應(yīng)的孔中分別加入10μL配制好的此抗體溶液，終止反應(yīng)。25℃孵育1h。
酶標(biāo)儀665nm/615nm讀板。
IC50：計算抑制率(％)＝(最大值－樣本值)/(最大值－最小值)×100，采用Graph prism軟件進(jìn)行曲線擬合，得出IC50值。
最大值：不加化合物的陽性對照；最小值：不加酶的陰性對照。
實驗結(jié)果和結(jié)論：
表1.本發(fā)明化合物的體外酶學(xué)抑制活性
由表1可見，本發(fā)明化合物對ALK激酶具有良好的抑制活性，可用于治療與激酶相關(guān)的疾病，特別是ALK激酶介導(dǎo)的病癥或病況，具有顯著的臨床意義。
具體實施方式
以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下實施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
實施例1 4-(5-氯-2-((2-異丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(化合物1)三氟乙酸鹽的制備
(1)2-((2-氯乙基)硫代)苯胺的制備
在一只250mL的三口瓶中，加入2-氨基苯硫酚(10g,79.88mmol)、1,2-二氯乙烷(78g,788.3mmol)。氮氣保護(hù)下反應(yīng)混合物加熱到回流，然后滴加甲醇鈉(15g)的甲醇溶液，滴加完畢，加熱回流3小時。待反應(yīng)完畢，反應(yīng)液冷卻倒入冰水中，然后用二氯甲烷(3×100mL)萃取，合并有機(jī)層，用飽和的碳酸氫鈉洗滌，分出有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，濃縮得到產(chǎn)物(8g,產(chǎn)率53％)。
(2)N-(2-((2-氯乙基)硫代)苯基)乙酰胺的制備
在一只100mL的單口瓶中，加入2-((2-氯乙基)硫代)苯胺(7.5g,40.0mmol)，醋酸酐(7.5g,73mmol)。反應(yīng)混合物加熱回流2小時，反應(yīng)液冷卻倒入冰水中，用乙酸乙酯(80mL×3)萃取，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌一次，有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥。減壓濃縮，剩余物經(jīng)柱層析(乙酸乙酯:石油醚＝1:5)得到產(chǎn)物(5.7g,產(chǎn)率為62％)。
(3)1-(2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噻嗪-4-基)乙酮的制備
在一只250mL的三口瓶中加入N-(2-((2-氯乙基)硫代)苯基)乙酰胺(5.4g,23.5mmol)，t-BuOH(50mL)，加熱到45℃，然后滴加t-BuOK(2.7g，24.1mmol)的t-BuOH(50mL)溶液。反應(yīng)混合物45℃反應(yīng)1小時。反應(yīng)液冷卻倒入冰水中，用鹽酸(1M)調(diào)節(jié)pH＝4～5，用二氯甲烷(50mL×3)萃取，合并有機(jī)相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到粗品(3.8g)。
(4)1-(1,1-二氧代-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噻嗪-4-基)乙酮的制備
在一只250mL的三口瓶中加入1-(2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噻嗪-4-基)乙酮(3.8g,19.66mmol)和甲醇(50mL)。加入(NH4)2MoO4(2.7g,13.78mmol)的水溶液(20mL)。然后加入H2O2(10mL,30％)。反應(yīng)混合物室溫攪拌過夜，減壓除去甲醇，殘余液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有機(jī)相，濃縮，剩余物經(jīng)柱層析(乙酸乙酯:石油醚＝1:5)得產(chǎn)物(2g,兩步產(chǎn)率為38％)。
(5)3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物的制備
在一只100mL的單口瓶中加入1-(1,1-二氧代-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噻嗪-4-基)乙酮(2g，8.88mmol)、甲醇(20mL)、濃鹽酸(5mL)。反應(yīng)混合物室溫攪拌過夜，用飽和的碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH值到8～9，用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，濃縮得產(chǎn)物(800mg,產(chǎn)率為49％)。
(6)4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物的制備
在一只100mL的單口瓶中加入3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(500mg,2.73mmol)、DMSO(10mL)。然后0℃加入氫化鈉(60％,126mg,3.15mmol)。攪拌10分鐘。然后加入2,4,5-三氯嘧啶(500mg,2.73mmol)。反應(yīng)混合物室溫攪拌過夜。然后加入水(2mL)淬滅，并加入水(50mL)稀釋。用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100mL×3)洗滌。分出有機(jī)層，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，剩余物經(jīng)柱純化(乙酸乙酯:石油醚＝1:15～1:3)得到產(chǎn)物(200mg,產(chǎn)率22％)。
(7)叔丁基4-(4-((5-氯-4-(1,1-二氧化物-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噻嗪-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-異丙氧基-2-甲基苯基)哌啶-1-甲酸酯的制備
在一只100mL的單口瓶中加入4-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物(200mg,0.61mmol)、叔丁基4-(4-氨基-5-異丙氧基-2-甲基苯基)哌啶-1-甲酸酯(180mg,0.52mmol)、1,4-二氧六環(huán)(20mL)、碳酸銫(400mg,1.23mmol)和Pd(dppf)Cl2(50mg)。在氮氣保護(hù)下，反應(yīng)混合物加熱到80℃反應(yīng)過夜，過濾，濾餅用乙酸乙酯(50mL)洗滌，濾液加入水(100mL)稀釋，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥。減壓濃縮，殘余物經(jīng)Prep-HPLC純化(Column:Water Sunfire C18,19x150mm,Phase A:H2O(0.05％TFA)，B:CH3CN.25mL/min)，收集組分，濃縮得到產(chǎn)物(70mg,產(chǎn)率21％)。
(8)4-(5-氯-2-((2-異丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)-3,4-二氫-2H-苯并[b][1,4]噻嗪1,1-二氧化物三氟乙酸鹽的制備
在一只100mL的單口瓶中加入叔丁基4-(4-((5-氯-4-(1,1-二氧化物-2,3-二氫-4H-苯并[b][1,4]噻嗪-4-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-異丙氧基-2-甲苯基)哌啶-1-甲酸酯(70mg,0.11mmol)和二氯甲烷(5mL)。室溫加入三氟乙酸(0.5mL)。反應(yīng)混合物室溫攪拌過夜。反應(yīng)液減壓濃縮，殘余物分水干燥得到終產(chǎn)物(61.5mg,產(chǎn)率86％)。
分子式：C29H33ClF3N5O5S分子量:656.12LC-MS(m/z):542[M+H]+
1H-NMR(300MHz,DMSO)δ:8.54-8.58(m,1H),8.46(s,1H),8.23(brs.2H),7.77-7.80(d,1H,J＝8.1Hz),7.68(s,1H),7.47(t,1H,J＝8.1Hz),7.22(t,1H,J＝6.9Hz),6.92(d,1H,J＝8.1Hz),6.74(s,1H),4.50-4.58(m,1H),4.35-4.38(m,2H),3.74-3.78(m,2H),3.35-3.39(m,2H),2.95-3.06(m,3H),2.17(s,3H),1.74-1.80(m,4H),1.28(d,6H,J＝6.0Hz).
實施例2 3-(5-氯-2-((2-異丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物(化合物2)三氟乙酸鹽的制備
(1)2-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)苯硫醇的制備
在一只250mL的三口瓶中加入2-氨基苯-1-硫醇(6g,47.93mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(100mL)，叔丁醇鈉(5.53g)，然后滴加2,4,5-三氯嘧啶(8.78g,47.87mmol)，滴加完畢，室溫攪拌1小時。0℃在冰水浴中加入水淬滅反應(yīng)，用鹽酸(1M)調(diào)節(jié)pH值為7，然后用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有機(jī)層并用飽和食鹽水洗滌，分出有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥。減壓除去溶劑，剩余物經(jīng)柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得到產(chǎn)物(6.5g,產(chǎn)率50％)。
(2)3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑的制備
在一只250mL的三口瓶中加入2-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)苯硫醇(3.5g,12.86mmol)、四氫呋喃(50mL)、LiHMDS(1M,in THF)(25.8mL)、CH2I2(3.45g,12.88mmol)，反應(yīng)混合物室溫攪拌過夜。0℃在冰水浴中加入水淬滅反應(yīng)，然后用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有機(jī)層并用飽和食鹽水洗滌，分出有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥。減壓除去溶劑，剩余物經(jīng)柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到產(chǎn)物(550mg,產(chǎn)率15％)。
(3)3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物的制備
在一只50mL的三口瓶中加入3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑(540mg,1.90mmol)、二氯甲烷(10mL)、m-CPBA(723mg,4.19mmol)。反應(yīng)混合物室溫攪拌過夜，然后加入Na2S2O3(10％)的水溶液淬滅反應(yīng)，用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并有機(jī)層并用飽和食鹽水洗滌，分出有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥。減壓除去溶劑，剩余物經(jīng)柱層析純化(石油醚:乙酸 乙酯＝3:1)得到產(chǎn)物(480mg,產(chǎn)率80％)。
(4)叔丁基4-(4-((5-氯-4-(1,1-二氧代苯并[d]噻唑-3(2H)-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-異丙基-2-甲基苯基)哌啶-1-甲酸酯的制備
在一只100mL的三口瓶中加入3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物(480mg,1.52mmol)、叔丁基4-(4-氨基-5-異丙氧基-2-甲基苯基)哌啶-1-甲酸酯(529mg,1.52mmol)、1,4-二氧六環(huán)(15mL)、碳酸銫(1.47g,4.51mmol)、Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(125mg,0.15mmol)，氮氣保護(hù)下升溫至80℃反應(yīng)過夜，冷至室溫，過濾除去不溶的固體。用乙腈洗滌濾餅，濾液濃縮。殘余物用Prep-HPLC純化(Column:Water Sunfire C18,19x150mm,5um,Phase A:H2O(0.05％TFA),B:CH3CN.B:45-90％,7min,25mL/min.)，收集組分減壓濃縮得到產(chǎn)物(200mg,產(chǎn)率21％)。
(5)3-(5-氯-2-((2-異丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物三氟乙酸鹽的制備
在一只100mL的三口瓶中加入叔丁基4-(4-((5-氯-4-(1,1-二氧代苯并[d]噻唑-3(2H)-基)嘧啶-2-基)氨基)-5-異丙氧基-2-甲基苯基)哌啶-1-甲酸酯(200mg,0.32mmol)、二氯甲烷(10mL)、三氟乙酸(1mL)。反應(yīng)混合物室溫攪拌過夜，經(jīng)減壓濃縮得到終產(chǎn)物(182mg,產(chǎn)率89％)。
分子式：C28H31ClF3N5O5S 分子量:642.09 LC-MS(m/z):528[M+H]+
1H-NMR(300MHz,DMSO)δ:8.55-8.59(1H,m),8.49(1H,s),8.24-8.27(1H,m),8.19(1H,s),7.84-7.86(1H,d,J＝7.2Hz),7.61-7.66(1H,t,J＝8.4Hz),7.51-7.57(2H,m),7.28-7.33(1H,t,J＝8.4Hz),6.73(1H,s),5.31(2H,s),4.47-4.55(1H,m),3.35-3.39(2H,m),2.93-3.05(3H,m),2.07(3H,s),1.74-1.81(4H,m),1.25-1.27(6H,d,J＝6.0Hz).
實施例3 3-(5-氯-2-((7-甲基-8-(哌啶-4-基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)氨基)哌啶-4基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物(化合物3)的制備
(1)2-甲氧基-4-甲基-6-硝基苯酚的制備
將2-甲氧基-4-甲基苯酚(50.0g,0.362mol)溶解在氯仿(1L)中，降溫至0℃，將發(fā)煙硝酸(22.8g,0.362mol)溶解在乙酸(120mL)中，慢慢滴加至溶液中，內(nèi)部溫度控制在0℃以下，升至室溫繼續(xù)反應(yīng)0.5小時。反應(yīng)完全，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物加入甲醇(200mL)，過濾，真空干燥得產(chǎn)物(30g,產(chǎn)率45.4％)。
(2)5-甲基-3-硝基苯-1,2-二醇的制備
將2-甲氧基-4-甲基-6-硝基苯酚(30.0g,0.164mol)加入到氫溴酸(200mL,80％)中，加入20g四丁基氟化銨，加熱至110℃，反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，加入水(1000mL)，用乙酸乙酯(5×500mL)萃取，有機(jī)相合并，飽和食鹽水(250mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥。過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物直接用于下一步。
(3)7-甲基-5-硝基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英的制備
將5-甲基-3-硝基苯-1,2-二醇(20g,0.118mol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中，加入1,2-二溴乙烷(44.4g,0.236mol)和碳酸鉀(49.2g,0.356mol)。加熱至60℃，反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，加入水(300mL)，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取，合并有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到產(chǎn)物(19g,產(chǎn)率82.6％)。
(4)6-溴-7-甲基-5-硝基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英的制備
將7-甲基-5-硝基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英(19g,0.097mol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(200mL)中，分批加入N-溴代琥珀酰亞胺(34.5g,0.194mol)。加熱至60℃，反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，加入水(300mL)，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取，合并有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到產(chǎn)物(18g,產(chǎn)率67.7％)。
(5)6-溴-7-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-胺的制備
將6-溴-7-甲基-5-硝基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英(18g,65.7mmol)溶解在乙醇(200mL)中，加入乙酸(20mL)，加熱至70℃，將鐵粉(36.8g,657.1mmol)分批加入。升溫至80℃，反應(yīng)3小時，反應(yīng)完成后，冷卻至室溫，過濾，濾液中加入水(300mL)，用乙酸乙酯(3×300mL)萃取，合并有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到產(chǎn)物(12g,產(chǎn)率75％)。
(6)6-溴-8-碘-7-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-胺的制備
將6-溴-7-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-胺(12g,49.16mmol)溶于甲苯(100mL)中，加入乙酸(5mL)和N-碘代琥珀酰亞胺(16.6g,73.78mmol)，室溫下反應(yīng)3小時。反應(yīng)完成，加入水(100mL)，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取，合并有機(jī)相，用亞硫酸氫鈉溶液(200mL)洗滌，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)相，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到產(chǎn)物(7g,產(chǎn)率38.5％)。
(7)叔丁基4-(8-氨基-7-溴-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸酯的制備
將6-溴-8-碘-7-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-胺(7.0g,18.92mmol)和叔丁基4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸酯(5.8g,18.76mmol)溶于1,4-二氧六環(huán)(100mL)中，加入水(15mL)和[1,1'-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(1.4g,1.91mmol)，碳酸鉀(7.83g,56.7mmol)，加熱至80℃，反應(yīng)3小時。反應(yīng)完成，加入水(100mL)，用二氯甲烷(3×200mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100mL)洗滌，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)相，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得到產(chǎn)物(5g,產(chǎn)率62.7％)。
(8)叔丁基4-(8-氨基-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)哌啶-1-甲酸酯的制備
將叔丁基4-(8-氨基-7-溴-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-甲酸酯(5g,11.76mmol)溶解在甲醇(150mL)中，加入4g鈀炭，通入氫氣，室溫下反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，得到產(chǎn)物(2.5g,產(chǎn)率61.1％)。
(9)2-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)苯硫酚的制備
將2,4,5-三氯嘧啶(15.0g,81.8mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中，加入2-氨基苯硫酚(10.24g,81.8mmol)和碳酸鉀(2.26g,16.4mmol)，室溫下反應(yīng)3小時。反應(yīng)完全，加入水(300mL)，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取，合并有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到產(chǎn)物(12g,產(chǎn)率53.8％)。
(10)3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑的制備
將2-((2,5-二氯嘧啶-4-基)氨基)苯硫酚(12.0g,44.1mmol)溶于四氫呋喃(50mL)中，在 0℃將1N二(三甲基硅基)氨基鋰(88.2mL,88.2mmol)加入到溶液中，攪拌0.5小時。將二碘甲烷(11.82g,44.1mmol)滴加至反應(yīng)液中，室溫下攪拌過夜。反應(yīng)完成，加入水(50mL)淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，合并有機(jī)相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到產(chǎn)物(2.0g,產(chǎn)率16％)。
(11)3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物的制備
將3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑(2.0g,7.04mmol)溶于二氯甲烷(50mL)，分批加入間氯過氧苯甲酸(3.63g,21.03mmol)，室溫下反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成，加入硫代硫酸鈉溶液(30mL)，分液，水相用二氯甲烷(3×20mL)萃取，合并有機(jī)相，用飽和碳酸氫鈉、氯化鈉溶液洗滌，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到產(chǎn)物(1.5g,產(chǎn)率67.4％)。
(12)叔丁基4-(8-((5-氯-4-(1,1-二氧代苯并[d]噻唑-3(2H)-基)嘧啶-2-基)氨基)-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)哌啶-1-羧酸酯的制備
將3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物(181mg,0.572mmol)和叔丁基4-(8-氨基-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)哌啶-1-甲酸酯(200mg,0.574mmol)溶于1,4-二氧六環(huán)(15mL)中，加入[1,1'-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(42mg,0.057mmol)，碳酸銫(560mg,1.72mmol)，加熱至110℃，過夜。反應(yīng)完成，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得到產(chǎn)物(80mg,產(chǎn)率22.3％)。
(13)3-(5-氯-2-((7-甲基-8-(哌啶-4-基)-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)氨基)哌啶-4基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物的制備
將叔丁基4-(8-((5-氯-4-(1,1-二氧代苯并[d]噻唑-3(2H)-基)嘧啶-2-基)氨基)-6-甲基-2,3-二氫苯并[b][1,4]二噁英-5-基)哌啶-1-羧酸酯(80mg,0.127mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，室溫下攪拌3小時。反應(yīng)完成，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，加入乙酸乙酯(50mL)，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)相，剩余物經(jīng)硅膠柱層析(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到終產(chǎn)物(40mg,產(chǎn)率59.7％)。
分子式:C25H26ClN5O4S 分子量:528.02 LC-MS(m/z):528.2[M+H]+
1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.45(s,1H),8.33(s,1H),7.82(d,J＝7.6Hz,1H),7.57-7.62(m,1H),7.46(d,J＝8.4Hz,1H),7.28(t,J＝7.6Hz,1H),7.03(s,1H),5.28(s,2H),4.18(s,4H),3.28-3.29(m,2H),2.90-2.99(m,3H),2.32-2.39(m,2H),2.10(s,3H),1.58-1.61(m,2H).
實施例4 3-(5-氯-2-((6-異丙氧基異二氫吲哚-5-基)氨基)嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物(化合物4)的制備
(1)2-溴-5-甲氧基苯甲酸甲酯的制備
將3-甲氧基苯甲酸甲酯(16.6g,0.10mol)溶于二氯甲烷(150mL)中，冰浴下緩慢加入液溴(16.0g,0.10mol)，滴加完畢后，室溫反應(yīng)2小時。加入飽和硫代硫酸鈉溶液(20mL)淬滅反應(yīng)，用二氯甲烷(200mL)萃取，有機(jī)相用水洗滌三次，干燥，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)柱色譜分離(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)得產(chǎn)物(15.9g,產(chǎn)率64.9％)。
(2)2-氰基-5-甲氧基苯甲酸甲酯的制備
將2-溴-5-甲氧基苯甲酸甲酯(15.9g,64.9mmol)、氰化亞銅(6.39g,71.4mmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(150mL)中。加熱到140℃反應(yīng)半小時。加入乙酸乙酯(500mL)，用飽和食鹽水洗滌，有機(jī)相干燥，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)柱色譜(石油醚:乙酸乙酯＝20:1)得產(chǎn)物(6.7g, 產(chǎn)率54.0％)。
(3)6-甲氧基異二氫吲哚-1-酮的制備
將2-氰基-5-甲氧基苯甲酸甲酯(6.7g,35.1mmol)溶于甲醇(50mL)中，加入蘭尼鎳(335mg)，置換氫氣，室溫攪拌2小時，抽濾，濾餅用少量甲醇洗滌，合并濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)柱色譜分離(DCM:MeOH＝10:1)得產(chǎn)物(4.7g,產(chǎn)率82％)。
(4)6-羥基異吲哚啉-1-酮的制備
將6-甲氧基異二氫吲哚-1-酮(4.7g,28.8mmol)加入到干燥的三氯化鋁(30g)中，攪拌至充分混合均勻，氮氣保護(hù)，加熱到120℃反應(yīng)2小時，冷至室溫，加入乙酸乙酯(150mL)攪拌均勻，所得懸浮液抽濾，有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌3次，無水硫酸鈉干燥，經(jīng)柱色譜分離(DCM:MeOH＝20:1)得產(chǎn)物(1.19g,產(chǎn)率27.7％)。
(5)6-異丙氧基異吲哚啉-1-酮的制備
將6-羥基異吲哚啉-1-酮(1.0g,6.71mmol)溶于乙腈(25mL)中，加入碳酸鉀(926mg,6.71mmol)、3-碘代異丙烷(1.14g,6.71mmol)，加熱到70℃反應(yīng)2小時，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，加入碳酸氫鈉飽和溶液(10mL)，用二氯甲烷萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，經(jīng)柱色譜分離(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)得產(chǎn)物(803mg,產(chǎn)率62.6％)。
(6)6-異丙氧基-5-硝基異吲哚-1-酮的制備
將6-異丙氧基異吲哚啉-1-酮(803mg,4.20mmol)溶于三氟乙酸酐和乙腈(10mL,1:1)的混合溶液中，冰浴下緩慢加入硝酸鉀(424mg,4.20mmol)，升至室溫反應(yīng)2小時，加入50mL碳酸氫鈉飽和溶液淬滅，用二氯甲烷萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)柱色譜分離(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得產(chǎn)物(612mg,產(chǎn)率61.7％)。
(7)5-氨基-6-異丙氧基異吲哚啉-1-酮的制備
將6-異丙氧基-5-硝基異吲哚啉-1-酮(612mg,2.59mmol)溶于甲醇(15mL)中，加入鈀碳(31mg)，置換氫氣，室溫攪拌30分鐘。反應(yīng)液抽濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑得粗產(chǎn)物(530mg)。
(8)6-異丙氧基異二氫吲哚-5-胺的制備
將5-氨基-6-異丙氧基異吲哚啉-1-酮(530mg,2.57mmol)溶于甲醇(10mL)中，在氮氣保護(hù)下加入2.0mol/L的硼烷二甲硫醚的四氫呋喃溶液(2.57mL,5.14mmol)，加熱至回流反應(yīng)8小時，冷至室溫，緩慢加入2mL的6mol/L的鹽酸溶液，加熱回流1小時，冷至室溫，直接旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)柱色譜分離(DCM:MeOH＝10:1)得產(chǎn)物(80mg,產(chǎn)率16.2％)。
(9)叔丁基5-氨基-6-異丙氧基異二氫吲哚-2-甲酸酯的制備
將6-異丙氧基異二氫吲哚-5-胺(80mg,0.417mmol)溶于5mL的二氯甲烷中，加入三乙胺(42mg,0.416mmol)、二碳酸二叔丁酯(91mg,0.417mmol)，室溫攪拌2小時，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，柱色譜分離(DCM:MeOH＝10:1)得產(chǎn)物(95mg,產(chǎn)率78％)。
(10)3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物的制備
將2,3-二氫苯并[d]噻唑-1,1-二氧化物(507mg,3.0mmol)溶于10mL四氫呋喃中，冰浴下加入氫化鈉(86.4mg,3.6mmol)，攪拌10分鐘后再緩慢加入2,4,5-三氯嘧啶(549mg,3.0mmol)，升至室溫攪拌2小時，加入20mL氯化鈉飽和溶液，用二氯甲烷萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)柱色譜分離(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得產(chǎn)物(376mg,產(chǎn)率39.7％)。
(11)叔丁基5-((5-氯-4-(1,1-二氧苯并[d]噻唑-3(2H)-基)嘧啶-2-基)氨基)-6-異丙氧基異二 氫吲哚-2-甲酸酯的制備
將3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物(103mg,0.326mmol)、叔丁基5-氨基-6-異丙氧基異二氫吲哚-2-甲酸酯(95mg,0.325mmol)、Pd2(dba)3(10mg)，X-Phos(20mg)、碳酸銫(106mg,0.326mmol)，加入到10mL的1,4-二氧六環(huán)中，氮氣保護(hù)，110℃加熱6小時。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，加入10mL氯化鈉飽和溶液，用二氯甲烷萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)柱色譜分離(DCM:MeOH＝10:1)得產(chǎn)物(82mg,產(chǎn)率44.0％)。
(12)3-(5-氯-2-((6-異丙氧基異二氫吲哚-5-基)氨基)嘧啶-4-基)-2,3-二氫苯并[d]噻唑1,1-二氧化物的制備
將叔丁基5-((5-氯-4-(1,1-二氧苯并[d]噻唑-3(2H)-基)嘧啶-2-基)氨基)-6-異丙氧基異二氫吲哚-2-甲酸酯(82mg,0.143mmol)溶于5mL的二氯甲烷和三氟乙酸混合溶液中(1:1)，室溫攪拌2小時，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，剩余物經(jīng)柱色譜分離(DCM:MeOH＝10:1)得到終產(chǎn)物(46mg,產(chǎn)率68.0％)。
分子式：C22H22ClN5O3S 分子量:471.96 LC-MS(m/z):472.1[M+H]+
1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.35(s,1H),7.97(s,1H),7.81(s,1H),7.78(d,1H,J＝7.2Hz),7.56(d,1H,J＝1.2Hz),7.46(d,1H,J＝8.4Hz),7.31(t,1H,J＝7.6Hz),6.79(s,1H),5.04(s,2H),4.54-4.60(m,1H),4.20(s,2H),4.04(s,2H),1.38(d,6H,J＝6.0Hz).