本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一類黃芩素-7-甲醚衍生物的制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
黃酮類化合物廣泛分布于蔬菜、水果和草本藥材中，具有極高的藥用價(jià)值，如抗氧化、抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)功能等，開發(fā)意義重大。中藥黃芩（Scutellaria baicalensis Georgi）首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味苦、性寒，功能泄實(shí)火、除濕熱，具有抑菌、除熱、解毒、鎮(zhèn)靜、降壓、利膽等作用。黃芩甙及黃芩甙元（黃芩素）是黃芩里所含的主要黃酮類化合物，兩者具有共同的黃酮母體結(jié)構(gòu)。黃芩甙和黃芩素具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗過敏、降壓、利尿、利膽等多種藥理活性。近年來有文獻(xiàn)報(bào)道，黃芩甙和黃芩素對(duì)體外培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)具有抑制作用（So F. V，et al. Cancer Lett.，112：127-133，1997）。也有文獻(xiàn)報(bào)道黃芩甙及黃芩素對(duì)食道癌和胃癌細(xì)胞有很明顯的殺傷效應(yīng)（中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)朇N031099335；中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)朇N031099424）。黃芩素低毒高效，資源豐富，藥材來源廣泛，價(jià)格低廉，具有良好的發(fā)展前景。但是黃芩素存在水溶解性差、生物利用度低等缺點(diǎn)，這在一定程度上限制了其在藥物治療上的應(yīng)用。
近年來黃芩素衍生物深受關(guān)注，他們的水溶解性和生物利用度都比黃芩素來得好，因此具有更好的臨床應(yīng)用價(jià)值。黃芩素-7-甲醚（negletein）是黃芩素的七位甲氧基化產(chǎn)物，化學(xué)名位5，6-二羥基-7- 甲氧基黃酮，它具有和黃芩素幾乎相同的藥用價(jià)值，不僅如此，黃芩素-7-甲醚的溶解性和生物利用度等物理化學(xué)性質(zhì)比黃芩素來得好，因此具有更好的臨床應(yīng)用價(jià)值。目前，有研究表明黃芩素-7-甲醚有抗白血病活性，但是活性并不高（IC50≈ 40 μM）。因此，積極尋找具有高抗癌活性、低毒且成藥性好的新型黃芩素-7-甲醚衍生物對(duì)于白血病治療有著極為重要的意義。本發(fā)明具有的突出優(yōu)點(diǎn)包括：本發(fā)明的黃芩素-7-甲醚衍生物是一類小分子化合物，通過測(cè)定其對(duì)癌細(xì)胞的作用評(píng)價(jià)其活性結(jié)果，可以得出本發(fā)明的小分子黃芩素-7-甲醚衍生物可用于治療血液性相關(guān)的惡性腫瘤，具有較廣的應(yīng)用前景。本發(fā)明的小分子黃芩素-7-甲醚衍生物，制備方法簡(jiǎn)單，產(chǎn)品純度高，得率高，實(shí)用性強(qiáng)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一類黃芩素-7-甲醚衍生物的小分子化合物及其制備方法和應(yīng)用，該化合物能夠顯著抑制多種白血病細(xì)胞的增殖和存活，具有多靶點(diǎn)抑制白血病細(xì)胞信號(hào)通路，從而誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡，達(dá)到治療白血病疾病的效果。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：所述的一類黃芩素-7-甲醚衍生物，其特征是為如下結(jié)構(gòu)通式：
其中R1為羥基、或；R2為、、、、、、、、 、、、、、、、或。
本發(fā)明所述的黃芩素-7-甲醚系列衍生物的方法，其特征是它包括以下步驟：
1）將黃芩素-7-甲醚溶解于有機(jī)溶劑中，在-20～50oC下分別加入有機(jī)醇、三苯基膦和偶氮二甲酸二異丙酯，混勻后攪拌反應(yīng)5min到48h得到紫黑色液體；
2）待步驟1）反應(yīng)結(jié)束后，用有機(jī)溶劑和水萃取，有機(jī)相用飽和NaCl溶液洗滌，靜置分層后有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，除去有機(jī)試劑后得到黃色固體粗產(chǎn)物；
3）將步驟2）獲得的固體粗品用石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑或者二氯甲烷和甲醇的混合溶劑作為流動(dòng)相體系進(jìn)行柱層析分離得到最終產(chǎn)物。
上述步驟1）中，所述的有機(jī)溶劑選自四氫呋喃、甲苯、苯、二氯甲烷氯仿；所述的有機(jī)醇為含一個(gè)或者兩個(gè)羥基的有機(jī)醇或有機(jī)醇胺；步驟2）中，用于萃取的有機(jī)溶劑為二氯甲烷或者乙酸乙酯。
本發(fā)明所述的黃芩素-7-甲醚系列衍生物的方法，其特征是它包括以下步驟：
1）將黃芩素-7-甲醚溶解于有機(jī)溶劑中，室溫下分別加入有機(jī)溴代物、碳酸鉀和催化量碘化鉀，混勻后加熱回流攪拌反應(yīng)1h到48h得到黃色液體；
2）待步驟1）反應(yīng)結(jié)束后，用鹽酸將反應(yīng)液的酸堿度調(diào)至中性，然后反應(yīng)液用有機(jī)溶劑和水萃取，有機(jī)相用飽和NaCl溶液洗滌，靜置分層后有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，除去有機(jī)試劑后得到黃色固體粗產(chǎn)物；
3）將步驟2）獲得的固體粗品用石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑或者二氯甲烷和甲醇的混合溶劑作為流動(dòng)相體系進(jìn)行柱層析分離得到最終產(chǎn)物。
上述步驟1）中，所述的有機(jī)溶劑選自四氫呋喃、甲苯、苯、二氯甲烷或氯仿；所述的有機(jī)溴代物為含溴的炔基化合物、酰胺類化合物、酯類化合物或芐基類化合物；步驟2）中，用于萃取的有機(jī)溶劑為二氯甲烷或者乙酸乙酯。
本發(fā)明所述的黃芩素-7-甲醚系列衍生物的方法，其特征是它包括以下步驟：
1）將黃芩素-7-甲醚溶解于混合溶劑中，室溫下分別加入有機(jī)疊氮化合物、催化量的五水硫酸銅和催化量的抗壞血酸鈉，混勻后室溫?cái)嚢璺磻?yīng)1h到48h得到黃色液體；
2）待步驟1）反應(yīng)結(jié)束后，用有機(jī)溶劑和1N鹽酸萃取，有機(jī)相用飽和NaCl溶液洗滌，靜置分層后有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，除去有機(jī)試劑后得到黃色固體粗產(chǎn)物；
3）將步驟2）獲得的固體粗品用二氯甲烷和甲醇的混合溶劑作為流動(dòng)相體系進(jìn)行柱層析分離得到最終產(chǎn)物。
上述步驟1）中，所述的混合溶劑為N，N-二甲基甲酰胺和水的混合溶劑體系，體積比由1:1到9:1；或者所述的混合溶劑為二甲基亞砜和水的混合溶劑體系，體積比由1:1到9:1；步驟1）中，所述的有機(jī)疊氮化合物為苯基疊氮化合物或芐基疊氮化合物；步驟2）中，用于萃取的有機(jī)溶劑為二氯甲烷或者乙酸乙酯。
本發(fā)明所述的一種黃芩素-7-甲醚系列衍生物的合成反應(yīng)，包括如下步驟：
1）黃芩素-7-甲醚與有機(jī)醇胺通過Mitsunobu反應(yīng)得到，R1為羥基或；R2為、、、或；
或者2）黃芩素-7-甲醚與有機(jī)溴代物反應(yīng)得到，R1為羥基、；R2為、、、、；
3）在上述步驟2）得到的化合物IIIa與芳香疊氮通過Click反應(yīng)得到；其中R為無取代、鄰位甲氧基、間位甲氧基、對(duì)位甲氧基芳香基團(tuán)。
本發(fā)明所述的黃芩素-7-甲醚系列衍生物在制備治療白血病等血液腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
具體地說，本發(fā)明所述的一類黃芩素-7-甲醚衍生物是具有通式I所示的化合物，其中R1為羥基、、；R2為、、、、、、等有機(jī)C1-C3的含氮基團(tuán)；、 、、、、等芳基或酯基；、、、等三氮唑芳環(huán)基團(tuán)。
一種制備如上所述的黃芩素-7-甲醚衍生物的方法包括以下步驟：包括以下步驟：
1)黃芩素-7-甲醚與有機(jī)醇胺通過Mitsunobu反應(yīng)得到，R1為羥基、；R2為、、、、等有機(jī)C1-C3的含氮化合物。
2)黃芩素-7-甲醚與有機(jī)溴代物反應(yīng)得到，R1為羥基、；R2為、、、、等芳基或酯基。
3）在步驟2）得到的化合物IIIa與芳香疊氮通過Click反應(yīng)得到。R為無取代、鄰位甲氧基、間位甲氧基、對(duì)位甲氧基等芳香基團(tuán)。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：本發(fā)明提供了一種一類黃芩素-7-甲醚衍生物的小分子化合物的制備方法及其應(yīng)用，該化合物能夠顯著抑制多種白血病細(xì)胞的增殖和存活，具有多靶點(diǎn)抑制白血病細(xì)胞信號(hào)通路，從而誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡，達(dá)到治療白血病的效果。因此，本發(fā)明所需材料易得、成本低廉，反應(yīng)操作簡(jiǎn)單，易于處理，可以大量獲得黃芩素-7-甲醚衍生物，以供醫(yī)藥研發(fā)的使用。
附圖說明
圖1為本發(fā)明的合成路線圖。
具體實(shí)施方式
為了使本發(fā)明所述的內(nèi)容更加便于理解，下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所述的技術(shù)方案做進(jìn)一步的說明，但是本發(fā)明不僅限于此。
具體的化合物結(jié)構(gòu)如下：
制備方法的具體反應(yīng)式如下：
其中：PPh3為三苯基膦，DIAD為偶氮二羧酸二異丙酯，THF為四氫呋喃，K2CO3為碳酸鈉，KI為碘化鉀，DMF為二甲基甲酰胺，H2O為水，Sodium ascorbate為抗壞血酸鈉，CuSO4·5H2O為五水硫酸銅。
式I、II、III和IV所示化合物的結(jié)構(gòu)及化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞抑制活性研究。經(jīng)過申請(qǐng)人的深入研究發(fā)現(xiàn)，式I、II、III和IV所示化合物主要通過抑制Akt信號(hào)通路以及激活Caspase-3凋亡信號(hào)通絡(luò)，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。
由有效量的式I、II、III和IV所示化合物和藥學(xué)上可接受的輔料組成的抑制劑。所述可接受輔料可以采用本領(lǐng)域常規(guī)的輔料，按照常規(guī)制備方法制備即可，本發(fā)明所述可接受輔料優(yōu)選自山梨醇、甘露醇、木糖醇、環(huán)糊精、蔗糖。其中，所述Negletein衍生物優(yōu)選為口服制劑，所述口服制劑優(yōu)選為片劑。
式I、II、III和IV所示化合物能夠顯著抑制多種白血病細(xì)胞的增殖和存活，多靶點(diǎn)抑制白血病細(xì)胞信號(hào)通路，從而誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡，達(dá)到治療白血病疾病的效果。
所述Negletein衍生物可應(yīng)用于治療腫瘤疾病，所述腫瘤疾病優(yōu)選為急性髓細(xì)胞白血病。
下面結(jié)合以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但這些實(shí)施例不限制本發(fā)明范圍。
實(shí)施示例1：6-(2-(Dimethylamino)ethoxy)-5-hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0009-003)（化合物IIa）的制備
在20 mL小瓶中加入57 mg Negletein、157 mg三苯基膦和2 mL四氫呋喃，室溫下滴加90 mg N，N-二甲基乙醇胺以及100 mg偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD），室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2小時(shí)，TLC板確定反應(yīng)程度，待確定反應(yīng)結(jié)束后，加入20 mL水和20 mL乙酸乙酯，萃取得到的有機(jī)相再用10 mL水萃取，萃取得到的有機(jī)相用飽和氯化鈉洗滌后，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥后旋干后，粗產(chǎn)物過硅膠柱得到62 mg最終產(chǎn)物II。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 7.89 (dd，J = 7.9，1.7 Hz，2H)，7.56–7.50 (m，3H)，6.68 (s，1H)，6.56 (s，1H)，4.16 (t，J = 5.8 Hz，2H)，3.95 (s，3H)，2.81 (t，J = 5.8 Hz，2H)，2.42 (s，6H). 13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.68，163.91，159.18，153.52，153.31，131.89，131.83，131.43， 129.17，126.32，106.43，105.77，90.69，70.88，58.92，56.34，45.80；Melting Point：157.4-158.6 oC；HRMS (m/z)：calcd for C20H22NO5 [M + H]+ 356.1492， found：356.1487。
實(shí)施示例2：6-(3-(Dimethylamino)propoxy)-5-hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0018-028)（化合物IIb）的制備
在20 mL小瓶中加入57 mg Negletein、157 mg三苯基膦和2 mL四氫呋喃，室溫下滴加62 mg N，N-二甲基丙醇胺以及100 mg偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD），3 oC攪拌反應(yīng)2小時(shí)，TLC板確定反應(yīng)程度，待確定反應(yīng)結(jié)束后，加入20 mL水和20 mL乙酸乙酯，萃取得到的有機(jī)相再用10 mL水萃取，萃取得到的有機(jī)相用飽和氯化鈉洗滌后，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥后旋干后，粗產(chǎn)物過硅膠柱得到35 mg最終產(chǎn)物IIb。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 7.90–7.84 (m，2H)，7.56 – 7.47 (m，3H)，6.65 (s，1H)，6.54 (s，1H)，4.13 – 4.07 (m，2H)，3.94 (s，3H)，2.85 – 2.77 (m，2H)，2.44 (s，6H)，2.09 – 2.01 (m，2H)；13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.75，164.06，159.17，153.55，153.28，131.96，131.65，131.40，129.21，126.36，106.41，105.75，90.78，71.44，56.41，44.78，27.39；Melting Point: 92.3-93.5 oC；HRMS (m/z)：calcd for C21H24NO5 [M + H]+：370.1649，found: 370.1648。
實(shí)施示例3：5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-6-(2-(pyrrolidin-1-yl)ethoxy)-4H-chromen-4-one (FZU-0009-039)（化合物IId）的制備
在20 mL小瓶中加入100 mg Negletein、157 mg三苯基膦和2 mL四氫呋喃，室溫下滴加62 mg N-(2-羥乙基)吡咯烷以及157 mg偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD），3 oC攪拌反應(yīng)2小時(shí)，TLC板確定反應(yīng)程度，待確定反應(yīng)結(jié)束后，加入20 mL水和20 mL乙酸乙酯，萃取得到的有機(jī)相再用10 mL水萃取，萃取得到的有機(jī)相用飽和氯化鈉洗滌后，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥后旋干后，粗產(chǎn)物過硅膠柱得到35 mg最終產(chǎn)物IId。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 7.90–7.84 (m，2H)，7.56–7.47 (m，3H)，6.65 (s，1H)，6.54 (s，1H)，4.13 – 4.07 (m，2H)，3.94 (s，3H)，2.85 – 2.77 (m，2H)，2.44 (s，6H)，2.09–2.01 (m，2H)；13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.75，164.06，159.17， 153.55，153.28，131.96，131.65，131.40，129.21，126.36，106.41，105.75，90.78，71.44，56.41，44.78，27.39；Melting Point：108.3-109.5 oC；HRMS (m/z)：calcd for C22H24NO5 [M + H]+：382.1649， found：382.1648。
實(shí)施示例4：5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-6-(2-(piperidin-1-yl)ethoxy)-4H-chromen-4-one (FZU-0009-043)（化合物IIe）的制備
在20 mL小瓶中加入100 mg Negletein、139 mg三苯基膦和2 mL四氫呋喃，室溫下滴加63 mg N-(2-羥乙基)哌啶以及97 mg偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD），室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2小時(shí)，TLC板確定反應(yīng)程度，待確定反應(yīng)結(jié)束后，加入20 mL水和20 mL乙酸乙酯，萃取得到的有機(jī)相再用10 mL水萃取，萃取得到的有機(jī)相用飽和氯化鈉洗滌后，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥后旋干后，粗產(chǎn)物過硅膠柱得到19 mg最終產(chǎn)物IIe。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 12.66 (s，1H)，7.92–7.83 (m，2H)，7.57–7.48 (m，3H)，6.66 (s，1H)， 6.57 (s，1H)，4.24 (t，J = 5.7 Hz，2H)，3.90 (s， 3H)，2.89 (t，J = 5.8 Hz，2H)，2.62 – 2.51 (m，4H)，1.66–1.58 (m，4H)，1.49–1.41 (m，2H). 13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.84，164.07，158.28，153.38，153.28，132.98，131.96，131.41， 129.22，126.37，106.41，105.69，91.65，67.35，60.96，57.42，55.11，25.94，24.14。 Melting Point: 105.1-106.3 oC. HRMS (m/z): calcd for C23H26NO5 [M + H]+:396.1805， found: 396.1804.
實(shí)施示例5：5-Hydroxy-7-methoxy-6-(2-morpholinoethoxy)-2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0018-032-P1)（化合物IIf）和 7-Methoxy-5，6-bis(2-morpholinoethoxy)-2-phenyl-4H-chromen-
4-one (FZU-0018-032-P2)（化合物IIg）的制備
在20 mL小瓶中加入114 mg Negletein、209 mg三苯基膦和2 mL四氫呋喃，室溫下滴加105 mg N-(2-羥乙基)嗎啉以及162 mg偶氮二羧酸二異丙酯（DIAD），室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2小時(shí)，TLC板確定反應(yīng)程度，待確定反應(yīng)結(jié)束后，加入20 mL水和20 mL乙酸乙酯，萃取得到的有機(jī)相再用10 mL水萃取，萃取得到的有機(jī)相用飽和氯化鈉洗滌后，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥后旋干后，粗產(chǎn)物過硅膠柱得到最終產(chǎn)物IIf 31 mg和IIg 18 mg。
5-Hydroxy-7-methoxy-6-(2-morpholinoethoxy)-2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0018-032-P1)：
1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 12.66 (s，1H)，7.89 (d，J = 7.5 Hz，2H)，7.55 (d，J = 6.4 Hz，2H)，7.51 (d，J = 6.2 Hz，1H)，6.67 (s，1H)，6.56 (s，1H)，4.19 (t，J = 5.6 Hz，2H)，3.95 (s，3H)，3.78–3.73 (m，4H)，2.82 (t，J = 5.6 Hz，2H)，2.62 (s，4H)。 13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.80， 164.05，159.18，153.52，153.33，131.95，131.85，131.44，129.22，126.36，106.40，105.77，90.70，70.22，67.11，58.53，56.39，54.02。Melting Point： 137.2-138.4 oC。HRMS (m/z)：calcd for C22H24NO6 [M + H]+：398.1598，found：398.1596。
7-Methoxy-5，6-bis(2-morpholinoethoxy)-2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0018-032-P2)：
1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 7.92–7.80 (m，2H)，7.57-7.44 (m，3H)，6.80 (s，1H)，6.63 (s，1H)，4.27-4.11 (m，4H)，3.94 (s，3H)，3.78–3.67 (m，8H)，2.94–2.84 (m，2H)，2.83-2.72 (m，2H)，2.64 – 2.52 (m，8H)；13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 177.20，161.23，157.98，154.77，151.81，139.69，131.67，131.40，129.09，126.07，113.27，108.43，96.43，71.73，70.87，67.12，67.04，58.61，56.33，54.00；Melting Point：N/A；HRMS (m/z)：calcd for C28H35N2O7 [M + H]+：511.2439， found：511.2439。
實(shí)施示例6：5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-6-(prop-2-yn-1-yloxy)-4H-chromen-4-one
(FZU-0018-006)（化合物IIIa）的制備
在100 mL燒瓶中加入511 mg Negletein、481 mg K2CO3為碳酸鈉，30 mg KI為碘化鉀和30 mL甲醇，室溫下滴加257 mg 3-溴丙炔，70oC加熱回流攪拌反應(yīng)3小時(shí)，TLC板確定反應(yīng)程度，待確定反應(yīng)結(jié)束后，加入50 mL水和50 mL乙酸乙酯以及5 mL的1mol/L鹽酸，萃取得到的有機(jī)相再用50 mL水萃取，萃取得到的有機(jī)相用飽和氯化鈉洗滌后，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥后旋干后，粗產(chǎn)物過硅膠柱得到350 mg最終產(chǎn)物。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 12.77 (s，1H)， 7.89 (dd，J = 7.8，1.4 Hz，2H)，7.56 (d，J = 7.1 Hz，2H)，7.52 (d，J = 6.2 Hz，1H)，6.69 (s，1H)，6.58 (s，1H)，4.84 (d，J = 2.4 Hz，2H)，3.98 (s，3H)，2.45 (t，J = 2.3 Hz，1H)；13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.83，164.16，159.37，153.85，153.53，132.01，131.38，130.16，129.23，126.38，106.28，105.78，90.80，79.25，75.31，59.90，56.51；Melting Point：205.5-206.7oC；HRMS (m/z)：calcd for C19H15O5 [M + H]+323.0914，found：323.0916。
實(shí)施示例7：6-(Benzyloxy)-5-hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0018-012-P1)（化合物IIIb）和5，6-Bis(benzyloxy)-7-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0018-012-P2) （化合物IIIc）的制備
化合物IIIb和IIIc的制備與化合物IIIa的制備類似，將3-溴丙炔代替為溴化芐。
化合物IIIb：1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 12.73 (s，1H)，7.88–7.84 (m，2H)，7.55–7.48 (m，5H)，7.35 (t，J = 7.2 Hz，2H)，7.30 (d，J = 7.1 Hz，1H)，6.65 (s，1H)，6.51 (s，1H)，5.12 (s，2H)，3.89 (s，3H). 13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.79，163.97，159.27，153.46，153.34，137.56，131.90，131.46，131.37，129.17，128.64，128.28，128.07，126.31，106.30，105.66，90.69，74.90，56.33；HRMS (m/z)：calcd for C23H19O5 [M + H]+375.1227，found: 375.1226。
化合物IIIc：1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 7.89 (dd，J = 6.2，2.5 Hz，2H)，7.69–7.65 (m，2H)，7.53–7.49 (m，3H)，7.47–7.43 (m，2H)，6.83 (s，1H)，6.70 (s，1H)，5.16 (s，2H)，5.04 (s，2H)，3.94 (s，3H)；13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 177.30，161.26，158.24，154.86，139.79，137.27，137.21， 131.69，131.37，129.44，129.07，128.79，128.39，128.36，128.17，113.42，108.48，96.68，75.96，56.35；Melting Point：125.1-126.3 oC；HRMS (m/z)：calcd for C30H25O5 [M + H]+ 465.1697，found：465.1697。
實(shí)施示例8：6-((4-Fluorobenzyl)oxy)-5-hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0018-013)（化合物IIId）的制備
化合物IIId的制備與化合物IIIa的制備類似，將3-溴丙炔代替為4-氟芐溴。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 12.74 (s，1H)，7.91–7.87 (m，2H)，7.57–7.53 (m，2H)，7.53–7.52 (m，1H)，7.51–7.48 (m，2H)，7.03 (t，J = 8.6 Hz，2H)，6.68 (s，1H)，6.54 (s，1H)，5.09 (s，2H)，3.91 (s，3H)；13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.80，164.05，163.93，161.49，159.21，153.52，153.34，133.43，133.40，131.94，131.37，131.23，130.58，130.50，129.18，126.33，115.23，115.01，106.31，105.68，90.70，74.10，56.35；Melting Point：174.5-175.7 oC；HRMS (m/z)：calcd for C23H18FO5 [M + H]+ 393.1133，found: 393.1130。
實(shí)施示例9：Methyl 2-((5-hydroxy-7-methoxy-4-oxo-2-phenyl-4H-chromen-6-yl)oxy)acetate
(FZU-0012-047)（化合物IIIe）的制備
化合物IIIe的制備與化合物IIIa的制備類似，將3-溴丙炔代替為2-溴乙酸乙酯。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 12.79 (s，1H)，7.88 (d，J = 7.3 Hz，2H)，7.58–7.53 (m，2H)，7.52 – 7.49 (m，1H)，6.67 (s，1H)，6.57 (s，1H)，4.77 (s，2H)，3.97 (s，3H)，3.80 (s，3H). 13C NMR (101 MHz， CDCl3) δ 182.84，169.86，164.19，158.56，153.62，152.46，132.03，131.33，130.74，129.24，126.39，106.26，105.75，90.87，69.15，56.58，52.19； Melting Point：172.6-173.8 oC；HRMS (m/z)：calcd for C19H17O7 [M + H]+ 357.0969，found：357.0967。
實(shí)施示例10：2-((5-hydroxy-7-methoxy-4-oxo-2-phenyl-4H-chromen-6-yl)oxy)acetic acid
(FZU-0012-048)（化合物IIIf）的制備
化合物IIIf的制備與化合物IIIa的制備類似，將3-溴丙炔代替為2-溴乙酸乙酯。Melting Point： 181.5-182.7 oC；HRMS (m/z)：calcd for C18H15O7 [M + H]+ 343.0812，found: 343.0809。
實(shí)施示例11：5-Hydroxy-7-methoxy-6-((1-(2-methoxyphenyl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl) methoxy)-
2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0018-007)（化合物IVa）的制備
在20 mL小瓶中加入50 mg化合物III、12 mg抗壞血酸鈉，14 mg 五水硫、2 mL DMF和0.4 mL水，室溫下滴加171 mg 1-疊氮基-2-甲氧基苯，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)3小時(shí)，TLC板確定反應(yīng)程度，待確定反應(yīng)結(jié)束后，加入20 mL水和20 mL乙酸乙酯，萃取得到的有機(jī)相再用50 mL水萃取，萃取得到的有機(jī)相用飽和氯化鈉洗滌后，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥后旋干后，粗產(chǎn)物過硅膠柱得到17 mg最終產(chǎn)物。1H NMR (400 MHz，CDCl3) 12.74 (s，1H)，8.35 (s，1H)，7.89–7.84 (m，2H)，7.74 (dd，J = 7.8，2.2 Hz，1H)，7.55–7.48 (m，3H)，7.43–7.37 (m，1H)，7.11–7.04 (m，2H)，6.65 (s，1H)，6.55 (s，1H)，5.39 (s，2H)，3.92 (s，3H)，3.88 (s，3H). 13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.82，164.10，159.34，153.70，153.35，151.29，144.01，131.97，131.36，131.35，130.89，130.88，130.13，129.20，126.45，126.35，125.77，125.59，125.55，121.22，112.32，106.29，105.70，90.85，66.33，56.45，56.04；Melting Point：178.4-179.6 oC；HRMS (m/z)：calcd for C26H22N3O6 [M + H]+ 472.1503，found：472.1503。
實(shí)施示例12：5-Hydroxy-7-methoxy-6-((1-(3-methoxyphenyl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methoxy)-
2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0016-030)（化合物IVb）的制備
化合物IVb的制備與化合物IVa的制備類似，將1-疊氮基-2-甲氧基苯代替為1-疊氮基-3-甲氧基苯。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 12.77 (s，1H)，7.82 (d，J = 6.7 Hz，2H)，7.54–7.42 (m， 3H)，7.37 (t，J = 8.1 Hz，1H)，7.31 (t，J = 2.1 Hz，1H)，7.26–7.21 (m，1H)，6.92 (dd，J = 8.2，2.3 Hz，1H)，6.60 (s，1H)，6.52 (s，1H)，5.33 (s，2H)，3.90 (s，3H)，3.83 (s，3H). 13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.67，164.01，160.57，159.09，153.58，153.12，145.46，138.08，131.91，131.13，130.87，130.54，129.10，126.23，121.64，114.60，112.39，106.26，106.16，105.50，90.81，66.34，56.39，55.63；Melting Point：174.2-175.0 oC；HRMS (m/z)：calcd for C26H22N3O6 [M + H]+ 472.1503，found: 472.1504。
實(shí)施示例13：5-Hydroxy-7-methoxy-6-((1-(4-methoxyphenyl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methoxy)-
2-phenyl-4H-chromen-4-one (FZU-0016-032)（化合物IVc）的制備
化合物IVc的制備與化合物IVa的制備類似，將1-疊氮基-2-甲氧基苯代替為1-疊氮基-4-甲氧基苯。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 12.78 (s，1H)，8.19 (s，1H)，7.93–7.83 (m，2H)，7.66–7.60 (m，2H)，7.57–7.48 (m，3H)，7.01 (d，J = 8.9 Hz，2H)，6.66 (s，1H)，6.56 (s，1H)，5.36 (s，2H)，3.94 (s，3H)，3.86 (s，3H)；13C NMR (101 MHz，CDCl3) δ 182.86，164.20，159.93，159.28， 153.78，153.33，145.41，132.01，131.40，131.07，130.74，129.24，126.40，122.35，121.84，114.91，106.37，105.77，90.91，66.56，56.50，55.76；Melting Point：168.6-169.7 oC；HRMS (m/z)： calcd for C26H22N3O6 [M + H]+ 472.1503，found: 472.1504。
實(shí)施示例14：5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-6-((1-phenyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)methoxy)-4H-
chromen-4-one (FZU-0016-033)（化合物IVd）的制備
化合物IVd的制備與化合物IVa的制備類似，將1-疊氮基-2-甲氧基苯代替為疊氮苯。1H NMR (400 MHz，CDCl3) δ 12.79 (s，1H)，8.28 (s，1H)，7.90–7.85 (m，2H)，7.74 (d，J = 7.8 Hz，2H)，7.57–7.48 (m，5H)，7.43 (t，J = 7.4 Hz，1H)，6.66 (s，1H)，6.56 (s，1H)，5.37 (s，2H)，3.94 (s，3H)；13C NMR (101 MHz， CDCl3) δ 182.84，164.19，159.24，153.76，153.31，145.67，137.25，132.00，131.38，131.04，129.87，129.23，128.82，126.39，121.64，120.70，106.36，105.76，90.91，66.54，56.50；Melting Point：171.3-172.4 oC；HRMS (m/z)：calcd for C25H19N3O5 [M + H]+442.1397；found：
應(yīng)用實(shí)施例：
實(shí)施例1：化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖和存活的抑制作用
材料：白血病細(xì)胞HL-60。
受試藥物：0、5 μΜ、10 μΜ、20 μΜ、40 μΜ的5個(gè)濃度的化合物。
化合物IIa對(duì)白血病細(xì)胞HL-60增殖和存活的抑制作用：HL-60細(xì)胞培養(yǎng)后，分別加入化合物孵育48h，HL-60細(xì)胞增殖能力下降，細(xì)胞呈現(xiàn)凋亡改變。MTT分析結(jié)果顯示，HL-60細(xì)胞的存活率隨著IIa濃度增加（0、5 μΜ、10 μΜ、20 μΜ、40μΜ)而呈下降趨勢(shì)，在7.24 μM降至近70%。
實(shí)施例2：化合物對(duì)白血病細(xì)胞信號(hào)通路活化的影響
材料：白血病細(xì)胞HL-60；
受試藥物：0、5 μΜ、10 μΜ、20 μΜ的4個(gè)濃度的化合物。
對(duì)HL-60細(xì)胞信號(hào)通路的影響：IIa分別處理HL-60細(xì)胞24h后，提取細(xì)胞總蛋白，經(jīng)SDS凝膠電泳分離，免疫印跡法分析結(jié)果顯示，化合物IIa劑量依賴性抑制Akt信號(hào)通路活化，并激活Caspase-3，從而抑制HL-60細(xì)胞增殖，促使HL-60細(xì)胞凋亡。
實(shí)施例3：凍干粉針劑的制備
取IIa（100 mg）溶于乙醇（1 mL），加入β環(huán)糊精 （1g，溶于10 mL水），攪拌1小時(shí)后，真空旋轉(zhuǎn)除去乙醇后，凍干得到粉針劑。
實(shí)施例4：片劑的制備
取IIa、蔗糖和環(huán)糊精按重量比1:2:2的比例，按常規(guī)方法制成片劑。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請(qǐng)范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。