專利名稱：某些5－烷基－2－芳基氨基苯乙酸及其衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及本文所定義的特別是有效的和選擇性的環(huán)加氧酶-2(COX-2)抑制劑的5-烷基-2-芳基氨基苯乙酸及其衍生物，其制備方法，包含所述化合物的藥物組合物，利用所述化合物或包含本發(fā)明所述化合物的藥物組合物選擇性抑制COX-2活性和治療對(duì)COX-2抑制有響應(yīng)的哺乳動(dòng)物疾病的方法。
例如，在J.Med.Chem.33，2358(1990)，美國專利3,558,690，3,652,762，4,173,577和4,548,952，DE3445011，和在PCT申請(qǐng)WO97/09977和WO96/00716中描述了各種取代的2-芳基氨基苯乙酸及其衍生物作為非甾類抗炎劑和環(huán)加氧酶抑制劑。關(guān)于5-烷基-2-芳基氨基苯乙酸，已知在文獻(xiàn)中描述的唯一實(shí)例是5-甲基-2-(2，6-二甲基苯氨基)-苯乙酸及其鈉鹽(美國專利3,558,690)，其生物學(xué)數(shù)據(jù)未見報(bào)道。
非甾類抗炎劑通過抑制環(huán)加氧酶阻斷前列腺素合成。目前，已知環(huán)加氧酶包含一結(jié)構(gòu)同工型(環(huán)加氧酶-1，COX-1)和一誘導(dǎo)同工型(環(huán)加氧酶-2，COX-2)。COX-1似乎決定了前列腺素的保護(hù)性有益特征，例如對(duì)胃腸道、腎臟等，而誘導(dǎo)同工型COX-2似乎決定了與前列腺素有關(guān)的病理性疾病，如炎性疾病。使用傳統(tǒng)非甾類抗炎藥(NSAIDs，包括雙氯芬酸鈉，它是2，6-二氯苯氨基苯基乙酸的鈉鹽)的缺陷是目前歸因于COX-1同工型環(huán)加氧酶抑制作用的胃腸道毒性。據(jù)報(bào)道，在體內(nèi)誘導(dǎo)型COX-2的選擇性抑制作用是抗炎的并且不產(chǎn)生潰瘍(non-ulcerogenic)(Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)1994；913228-3232)。
本發(fā)明提供新的5-烷基取代的2-芳基氨基苯乙酸及其衍生物，它們令人意外地抑制COX-2而不明顯地抑制COX-1。因此，本發(fā)明提供新的非甾類抗炎劑，它們令人意外地沒有不希望的、通常與傳統(tǒng)非甾類抗炎劑有關(guān)的副作用，如胃腸道和腎臟的副作用。
本發(fā)明涉及式I化合物、其可藥用鹽；及其可藥用前體藥物酯
其中R是甲基或乙基；R1是氯或氟；R2是氫或氟；R3是氫、氟、氯、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或羥基；R4是氫或氟；并且R5是氯、氟、三氟甲基或甲基。
本發(fā)明的特定實(shí)例涉及式I化合物、其可藥用鹽；及其可藥用前體藥物酯，其中R是甲基或乙基；R1是氯或氟；R2是氫；R3是氫、氟、氯、甲基或羥基；R4是氫；并且R5是氯、氟、或甲基。
優(yōu)選的實(shí)例涉及式I化合物、其可藥用鹽；及其可藥用前體藥物酯，其中R是甲基或乙基；R1是氟；R2是氫；R3是氫、氟或羥基；R4是氫；并且R5是氯。
本發(fā)明另一優(yōu)選的實(shí)例涉及式I化合物、其可藥用鹽；及其可藥用前體藥物酯，其中R是乙基或甲基；R1是氟；R2是氫或氟；R3是氫、氟、乙氧基或羥基；R4是氫或氟；并且R5是氯、氟、或甲基。
進(jìn)一步優(yōu)選的是這樣的化合物、其可藥用鹽；及其可藥用前體藥物酯，其中R是甲基或乙基；R1是氟；R2-R4是氫或氟；并且R5是氯或氟。
本發(fā)明的另一實(shí)例涉及式I化合物、其可藥用鹽；及其可藥用前體藥物酯，其中R是甲基或乙基；R1是氟；R2是氟；R3是氫、乙氧基或羥基；R4是氟；并且R5是氟。
本發(fā)明另一優(yōu)選的實(shí)例涉及式I化合物、其可藥用鹽；及其可藥用前體藥物酯，其中R是甲基；R1是氟；R2是氫；R3是氫或氟；R4是氫；并且R5是氯。
本發(fā)明的特定實(shí)例涉及式I化合物、其可藥用鹽；及其可藥用前體藥物酯(a)其中R是甲基；R1是氟；R2是氫；R3是氫；R4是氫；并且R5是氯；(b)其中R是甲基；R1是氟；R2是氫；R3是氟；R4是氫；并且R5是氯；(c)其中R是乙基；R1是氟；R2是氟；R3是氫；R4是氟；并且R5是氟；和(d)其中R是乙基；R1是氯；R2是氫；R3是氯；R4是氫；并且R5是甲基。
本文所使用的通用定義具有在本發(fā)明范圍內(nèi)的下列含義。
可藥用前體藥物酯是酯的衍生物，它們可通過溶劑解作用或在生理?xiàng)l件下轉(zhuǎn)換為式I游離羧酸。例如，該酯是低級(jí)烷基酯(如甲基或乙基酯)、羧基-低級(jí)烷基酯如羧甲基酯、硝酰氧基(nitrooxy)-低級(jí)烷基酯(如4-硝酰氧基丁酯)等等。優(yōu)選的是式Ia化合物及其可藥用鹽
其中R和R1-R5具有上述關(guān)于式I化合物所定義的含義。
可藥用鹽代表金屬鹽如堿金屬鹽，例如鈉、鉀、鎂或鈣鹽，以及銨鹽，例如它們是由氨和單-或二-烷基胺形成的，如二乙基銨鹽以及與氨基酸形成的，如精氨酸鹽和組氨酸鹽。
低級(jí)烷基包含最多7個(gè)碳原子，優(yōu)選1-4個(gè)碳原子，例如，它們代表甲基、乙基、丙基或丁基，并且可以是直鏈或支鏈的。
本發(fā)明化合物特別有用或者可以通過代謝轉(zhuǎn)化為特別用作COX-2選擇性環(huán)加氧酶抑制劑的化合物。因此，它們特別用于治療哺乳動(dòng)物環(huán)加氧酶依賴性疾病，包括炎癥、發(fā)燒(pyresis)、疼痛、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、偏頭痛、神經(jīng)變性疾病(如多發(fā)性硬化)、早老性癡呆、骨質(zhì)疏松癥、哮喘、狼瘡和牛皮癬。
本發(fā)明化合物進(jìn)一步用于治療瘤形成，特別是產(chǎn)生前列腺素或表達(dá)環(huán)加氧酶的瘤形成，包括良性瘤和癌性瘤，生長物和息肉。本發(fā)明化合物可用于治療1998年4月23日公開的國際專利申請(qǐng)公開號(hào)WO98/16227中列舉的任何瘤形成，特別是上皮細(xì)胞產(chǎn)生的瘤形成。本發(fā)明化合物特別用于治療肝、膀胱、胰腺、卵巢、前列腺、子宮頸、肺和乳房癌并且特別是胃腸癌如結(jié)腸癌，和皮膚癌如鱗狀(squamus)細(xì)胞或基底細(xì)胞癌和黑素瘤。
本文所使用的術(shù)語“治療”應(yīng)理解為包括治療和預(yù)防性治療，例如涉及瘤形成的治療、預(yù)防臨床或臨床前期明顯的瘤形成發(fā)作的治療，或用于預(yù)防惡性細(xì)胞的引發(fā)或者抑制或逆轉(zhuǎn)癌前期細(xì)胞向惡性細(xì)胞發(fā)展，以及預(yù)防或抑制瘤生長或轉(zhuǎn)移。在本文中，尤其可理解為本發(fā)明包括利用本發(fā)明化合物來抑制或預(yù)防皮膚癌的發(fā)展，例如由紫外線照射特別是由長期的太陽光照射引發(fā)的鱗狀細(xì)胞或基底細(xì)胞癌。
本發(fā)明化合物在上述疾病中具有活性，同時(shí)可顯著避免不希望的與常規(guī)環(huán)加氧酶抑制劑有關(guān)的胃腸道潰瘍。
本發(fā)明化合物也是UV吸收劑并且用于阻斷或吸收UV輻射；例如，在防曬產(chǎn)品中用于治療和預(yù)防曬傷。
本發(fā)明化合物也可用于眼科應(yīng)用，包括治療眼病、尤其是眼部炎性疾病、眼部疼痛，包括與眼外科手術(shù)如PRK或白內(nèi)障外科手術(shù)有關(guān)的疼痛、眼部過敏反應(yīng)、各種病因的恐光癥、眼內(nèi)壓升高(如青光眼)和干眼病，其中眼內(nèi)壓升高的治療是通過抑制小梁網(wǎng)狀組織誘導(dǎo)的糖皮質(zhì)激素反應(yīng)(TIGR)蛋白的產(chǎn)生進(jìn)行的。
可在體內(nèi)和體外通過有利地使用哺乳動(dòng)物例如大鼠、小鼠、狗、猴子及其分離細(xì)胞或酶制劑來證明上述性質(zhì)。所述化合物也可以以溶液例如水溶液的形式用于體外，并且有利的是通過口服、局部或非腸道例如靜脈內(nèi)給藥用于體內(nèi)。體外應(yīng)用的劑量可以在大約10-5-10-9摩爾濃度范圍內(nèi)變化。根據(jù)給藥途徑，體內(nèi)劑量可以在大約1-100mg/kg范圍內(nèi)變化。
通過對(duì)環(huán)加氧酶-1和環(huán)加氧酶-2抑制作用的細(xì)胞分析，體外測(cè)定環(huán)加氧酶的抑制作用。
測(cè)定環(huán)加氧酶抑制劑的細(xì)胞分析方法以下列事實(shí)為基礎(chǔ)，即環(huán)加氧酶(前列腺素H合成酶)催化由花生四烯酸合成前列腺素的限速步驟。兩種酶調(diào)節(jié)該反應(yīng)COX-1是酶的結(jié)構(gòu)形式，而COX-2響應(yīng)于各種生長因子和細(xì)胞因子而被誘導(dǎo)。表達(dá)一種酶形式的細(xì)胞系已經(jīng)確立下來可由IL-1誘導(dǎo)合成COX-2的人皮膚成纖維細(xì)胞系，以及被穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染以主要表達(dá)COX-1的腎上皮細(xì)胞系293。兩種同工型都可以將花生四烯酸代謝為穩(wěn)定的代謝物前列腺素E2。可通過外加花生四烯酸將產(chǎn)量提高到容易測(cè)定的水平。通過作為酶活性測(cè)量法的放射免疫測(cè)定法來測(cè)定細(xì)胞外介質(zhì)中前列腺素E2的含量。比較各同工型的相對(duì)活性來評(píng)定化合物的選擇性。
使用前列腺素E2放射免疫測(cè)定法在基于細(xì)胞的分析中測(cè)定體外環(huán)加氧酶-1(COX-1)和環(huán)加氧酶-2(COX-2)的抑制作用以便評(píng)價(jià)體外活性和對(duì)COX-2抑制的選擇性。利用的細(xì)胞是由白細(xì)胞介素-1誘導(dǎo)產(chǎn)生COX-2的初級(jí)人成纖維細(xì)胞和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染以主要產(chǎn)生COX-1的人腎上皮細(xì)胞系293。將細(xì)胞置于進(jìn)行測(cè)定的孔板上。通過用IL-1過夜處理來刺激成纖維細(xì)胞合成COX-2；293細(xì)胞不需要誘導(dǎo)。兩種細(xì)胞系均用化合物稀釋物在37℃溫度下預(yù)處理15分鐘，然后加入40μM的花生四烯酸作為產(chǎn)生PGE2的外生底物，通過放射免疫測(cè)定法測(cè)定在上層清液中的PGE2。為了測(cè)定IC50，在5個(gè)濃度(最高濃度30μM)下試驗(yàn)化合物，一式四份，計(jì)算每個(gè)濃度下PGE2的平均抑制作用(與未用化合物處理的細(xì)胞相比)，全部試驗(yàn)中的平均％抑制作用與對(duì)數(shù)化合物濃度繪圖，使用4-參數(shù)對(duì)數(shù)擬合計(jì)算總體IC50值。
COX-2抑制測(cè)定中式I化合物的IC50值通常低至約為0.005μM而COX-1抑制測(cè)定中的IC50值高于30μM。
作為本發(fā)明的舉例說明，實(shí)施例6、9和18的化合物對(duì)COX-2抑制的IC50值分別約為0.13、0.25和0.007μM而在30μM對(duì)COX-1沒有明顯的抑制作用。
在大鼠脂多糖(LPS)-激發(fā)皮下空氣囊模型中體內(nèi)測(cè)定COX-2對(duì)前列腺素E2產(chǎn)生的抑制作用(參見“Advances in Inflammation Research”，Raven Press，1986和J.Med.Chem.39，1846(1996))。
雌性Lewis大鼠被麻醉并通過皮下注射10ml通過滅菌的0.45微米裝有注射器的濾器的空氣來制備背部的氣囊。制備24小時(shí)后，氣囊中注射懸浮于滅菌磷酸鹽緩沖的鹽水中的LPS(8μg/囊)。將被評(píng)價(jià)的化合物懸浮在強(qiáng)化玉米淀粉中并在LPS激發(fā)前1小時(shí)通過管飼法給藥。LPS激發(fā)3小時(shí)后收獲氣囊內(nèi)容物并通過酶免疫測(cè)定法測(cè)量氣囊液體中存在的PGE2水平。通過最小二乘法線性回歸計(jì)算抑制PGE2形成的ED50值。作為本發(fā)明的舉例說明，實(shí)施例6、9、18和24的化合物的ED50值范圍為大約0.2mg/kg口服到大約0.6mg/kg口服。
COX-1對(duì)凝血噁烷B2(TXB2)的體內(nèi)抑制作用可在口服化合物后的大鼠血清中進(jìn)行離體(ex vivo)測(cè)量。
簡(jiǎn)單來說，將大鼠禁食過夜，通過管飼給予強(qiáng)化玉米淀粉賦形劑中的化合物，并在30分鐘至8小時(shí)后吸入二氧化碳處死動(dòng)物。通過心臟穿刺將血液收集在沒有抗凝劑的管中、允許其凝結(jié)并將血清離心分離。冷凍儲(chǔ)存血清用于以后通過放射免疫測(cè)定法分析凝血噁烷B2。每個(gè)實(shí)驗(yàn)包括下列實(shí)驗(yàn)組(每組5-6只大鼠)賦形劑對(duì)照和不同劑量或不同時(shí)間點(diǎn)的試驗(yàn)化合物。凝血噁烷B2數(shù)據(jù)表示成賦形劑對(duì)照組測(cè)量水平的百分?jǐn)?shù)。作為本發(fā)明的舉例說明，化合物1(d)、1(g)、3(a)和6(a)在體內(nèi)COX-2抑制ED50值的50-150倍口服劑量時(shí)產(chǎn)生低于50％的對(duì)血清凝血噁烷B2產(chǎn)生的抑制作用。
使用角叉菜膠誘導(dǎo)的大鼠足水腫測(cè)定法測(cè)定抗炎活性。
將Sprague Dawley大鼠(200-225g)禁食過夜，然后口服給予懸浮在強(qiáng)化玉米淀粉溶液中的化合物。1小時(shí)后，將0.1ml體積的1％在鹽水中的角叉菜膠注射到左后足的足底下區(qū)域，引起炎癥反應(yīng)。在注射角叉菜膠3小時(shí)后，將大鼠處死并沿爪毛線切下雙后足并在電子天平上稱重。通過從發(fā)炎爪(左)的重量減去未發(fā)炎爪(右)的重量來測(cè)定發(fā)炎爪的水腫量。以與對(duì)照平均值相比所獲得的爪百分重量測(cè)定每只動(dòng)物中化合物的百分抑制作用。使用曲線擬合公式測(cè)定各劑量反應(yīng)的ED30值，100/1+(藥物濃度/ED50)斜率計(jì)算平均ED30值作為從獨(dú)立劑量反應(yīng)分析中測(cè)定的平均ED30值。
利用胃耐受性試驗(yàn)來評(píng)定大鼠的總潰瘍，在口服給予試驗(yàn)化合物4小時(shí)后測(cè)定。如下進(jìn)行該試驗(yàn)將大鼠禁食過夜，通過管飼法給予懸浮在強(qiáng)化玉米淀粉賦形劑中的化合物，并且在4小時(shí)后，通過吸入二氧化碳處死。將胃切除并計(jì)算和測(cè)定總的胃損傷，得到每只大鼠的總損傷長度。每個(gè)試驗(yàn)包含下列組(每組5-6只大鼠)賦形劑對(duì)照、試驗(yàn)化合物和參考化合物雙氯芬酸鈉。
計(jì)算數(shù)據(jù)作為每組潰瘍的平均數(shù)、該組潰瘍的平均長度(mm)和潰瘍指數(shù)(UI)。UI＝每組潰瘍的平均長度×潰瘍的發(fā)生率其中潰瘍發(fā)生率是在受損組中動(dòng)物的分?jǐn)?shù)(100％發(fā)生率是1)。
作為本發(fā)明的舉例，實(shí)施例6、9、18和24的化合物在口服劑量為100mg/kg時(shí)基本上無任何胃潰瘍形成作用。
通過測(cè)定對(duì)腸滲透性的影響來測(cè)定腸的耐受性。滲透性不增加表示具有腸耐受性。
所使用的方法是Davies等人在Pharm.Res.1994；111652-1656中描述的方法的改進(jìn)并且基于下列事實(shí)，即NSAIDs可增加口服給予的51Cr-EDTA的排泄，這是小腸滲透性的標(biāo)志。通過胃插管法給予各組大鼠(≥12/組)單一口服劑量的試驗(yàn)化合物或賦形劑。給予化合物后立即通過胃插管法給予各大鼠51Cr-EDTA(5μCi/大鼠)。將這些大鼠放置在各個(gè)代謝籠中并供給隨意食用的食物和水。收集24小時(shí)期間的尿。給予51Cr-EDTA24小時(shí)后，處死大鼠。為了定量化合物對(duì)腸滲透性的影響，將用化合物治療的鼠的尿中測(cè)到的51Cr-EDTA排泄量與用賦形劑治療的鼠的尿中測(cè)到的51Cr-EDTA排泄量比較。通過計(jì)算各尿樣中存在的活性來測(cè)定相對(duì)滲透性，在校正背景輻射后，以給予劑量的百分?jǐn)?shù)表示。
作為本發(fā)明的舉例，實(shí)施例6、9、18和24的化合物證明，在口服劑量為30mg/kg時(shí)對(duì)腸滲透性無影響或僅有極微小的影響。
利用公知的Randall-Selitto試驗(yàn)測(cè)定本發(fā)明化合物的止痛活性。
Randall-Selitto爪壓力測(cè)定法通過將口服試驗(yàn)藥物后大鼠發(fā)炎爪的壓力閾值與口服玉米淀粉賦形劑的大鼠發(fā)炎爪相比較測(cè)量發(fā)炎組織的抗感受傷害作用(止痛活性)。
試驗(yàn)前，各組的10只雄性Wistar大鼠(體重40-50g)禁食過夜。通過用26號(hào)針管將0.1ml 20％的Brewer’s酵母懸浮液注射到右后足的足底區(qū)域來誘導(dǎo)痛覺過敏。左足不注射并用作測(cè)定痛覺過敏的對(duì)照足。賦形劑(強(qiáng)化玉米淀粉懸浮液3％)10ml/kg、對(duì)照化合物(雙氯芬酸鈉在每個(gè)試驗(yàn)中以與試驗(yàn)化合物相同的劑量進(jìn)行)和試驗(yàn)化合物(不同的劑量，以10ml/kg懸浮在賦形劑中)在酵母注射后2小時(shí)口服給藥。口服試驗(yàn)化合物1小時(shí)后，用Basile Analgesy儀定量爪退回的閾值。感受傷害的閾值被定義為大鼠縮回其足或發(fā)聲時(shí)以克為單位的力量。發(fā)聲或縮足被記錄為產(chǎn)生反應(yīng)。
通過比較玉米淀粉賦形劑治療的發(fā)炎和未發(fā)炎爪動(dòng)物組的平均疼痛閾值和各個(gè)藥物治療大鼠來分析數(shù)據(jù)。如果每個(gè)爪的各個(gè)疼痛閾值超過對(duì)照組平均閾值的值為該平均值的兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差，藥物治療組和陽性對(duì)照組(雙氯芬酸鈉)中的各個(gè)大鼠被稱為有反應(yīng)者。對(duì)照組發(fā)炎爪的平均疼痛閾值與試驗(yàn)組發(fā)炎爪的各個(gè)疼痛閾值進(jìn)行比較。未發(fā)炎對(duì)照平均壓力閾值與試驗(yàn)組中未發(fā)炎的各個(gè)壓力閾值進(jìn)行比較。結(jié)果表示為各試驗(yàn)組(n＝10)發(fā)炎和未發(fā)炎爪的反應(yīng)者數(shù)目。通過反應(yīng)者數(shù)目除以使用化合物的大鼠總數(shù)來計(jì)算百分?jǐn)?shù)。
作為本發(fā)明的舉例說明，實(shí)施例6、9、18和24的化合物在10mg/kg的口服劑量時(shí)均增加了發(fā)炎爪的疼痛閾值。這些化合物選擇性地提高發(fā)炎爪的疼痛閾值而沒有提高未發(fā)炎爪的閾值，表明為外周作用機(jī)制。
可通過公知的大鼠慢性輔助性關(guān)節(jié)炎試驗(yàn)測(cè)定來本發(fā)明化合物的抗關(guān)節(jié)炎作用。可通過使用本領(lǐng)域公知的方法來證明本發(fā)明化合物的眼科作用。
可按如下制備式I化合物，例如(a)在銅和碘化亞銅存在下，通過將式II或IIa化合物
其中R具有上述定義的含義；Ra是低級(jí)烷基，優(yōu)選異丙基；并且R6和R7表示低級(jí)烷基；或者R6和R7與氮原子一起表示哌啶子基、吡咯烷基或嗎啉代；與式III化合物偶聯(lián)
其中R1、R2、R3、R4和R5具有上述定義的含義；得到式IV或IVa化合物
將所得到的式IV或IVa化合物水解得到式I化合物；或者(b)對(duì)于其中R表示乙基的化合物來說，在弗瑞德-克來福特?；磻?yīng)中，將式V化合物
其中R1-R7具有本文所定義的含義；與乙酸的反應(yīng)性官能衍生物如乙酰氯縮合得到式VI化合物
其中R1-R7具有本文所定義的含義；將式VI化合物氫解后水解，得到式I化合物，其中R表示乙基；或者(c)通過用強(qiáng)堿將式VII內(nèi)酰胺水解
其中R和R1-R5具有本文所定義的含義；并且在上述方法中，如果需要，臨時(shí)將任何干擾性反應(yīng)性基團(tuán)保護(hù)起來，然后將所得到的本發(fā)明化合物分離；以及如果需要，將任何所得到的化合物轉(zhuǎn)化為另一種本發(fā)明化合物；和/或者如果需要，將本發(fā)明游離的羧酸轉(zhuǎn)化為其可藥用酯衍生物；和/或者如果需要，將所得到的游離酸轉(zhuǎn)化為鹽或者將所得到的鹽轉(zhuǎn)化為游離的酸或者轉(zhuǎn)化為另一種鹽。
在可通過本文所描述的方法轉(zhuǎn)化為本發(fā)明化合物的起始化合物和中間體中，存在的官能團(tuán)如氨基、羥基和羧基可用制備性有機(jī)化學(xué)中普通的常規(guī)保護(hù)基保護(hù)或不保護(hù)。保護(hù)的羥基、氨基和羧基是那些可在溫和的條件下轉(zhuǎn)化為游離的氨基、羥基和羧基而不產(chǎn)生其它不需要的副反應(yīng)的基團(tuán)。例如，優(yōu)選地，羥基保護(hù)基是芐基或取代的芐基。
按照F.Nohara在Chem.Abstr.94，15402x(1951)和Moser等人在J.Med.Chem.33，2358(1990)中所描述的常規(guī)方法學(xué)，在制備二芳基胺的改良Ullmann縮合反應(yīng)條件下，例如在銅粉、碘化亞銅和碳酸鉀存在下，在惰性高沸點(diǎn)溶劑如硝基苯、甲苯、二甲苯或N-甲基吡咯烷酮中，在高溫，例如在100-200℃下，優(yōu)選在回流溫度下，按照方法(a)制備式IV化合物。
可通過在Heck反應(yīng)條件下，即在鈀鹽(如Pd(OAc)2或PdCl2)、三芳基膦(如三-(鄰-甲苯基)膦)和堿(如三乙胺、乙酸鈉)存在下，在極性溶劑如二甲基甲酰胺中，與四甲基錫或四乙基錫反應(yīng)，從R1或R5是溴的式IV中間體制備R1或R5是甲基或乙基的式IV中間體。
在堿金屬氫氧化物水溶液，例如在6N NaOH中，在醇(如乙醇、丙醇、丁醇)存在下，在高溫如在反應(yīng)混合物回流溫度下，將所得到的式IV鄰-苯氨基苯乙酰胺水解。
按照本領(lǐng)域已知的方法，例如在上述關(guān)于式IV化合物中所描述的堿性條件下或者在酸性條件下，例如通過使用甲磺酸，將式IVa的酯水解。
式II或IIa起始物質(zhì)通常是已知的或者可使用本領(lǐng)域已知的方法學(xué)，例如F.Nohara在日本專利申請(qǐng)?zhí)?8/96,434(1978)中所描述的方法學(xué)制備。
例如，將5-甲基或5-乙基鄰氨基苯甲酸轉(zhuǎn)化為鄰-重氮衍生物，然后用在酸(例如磺酸)中的堿金屬碘化物處理，得到5-烷基-2-碘苯甲酸。按照本領(lǐng)域已知的方法學(xué)，將相應(yīng)的苯甲醇還原(例如用乙硼烷)，將該醇首先轉(zhuǎn)化為溴化物，然后轉(zhuǎn)化為腈，將該腈水解為乙酸并轉(zhuǎn)化為N，N二烷基酰胺，得到式II起始物質(zhì)。
或者，例如可通過在氯化鋁存在下，用乙酰氯將羥吲哚進(jìn)行Friedel-Crafts乙酰化，通過催化氫解將所得到的酮還原，通過水解將所得到的5-乙基羥吲哚斷裂為5-乙基-2-氨基苯乙酸來制備其中R為乙基的式II起始物質(zhì)。例如在碘化鉀存在下重氮化，得到5-乙基-2-碘-苯乙酸，將其轉(zhuǎn)化為式II酰胺。按照本領(lǐng)域已知的酯化方法，從相應(yīng)的酸來制備式IIa酯。
式III苯胺是本領(lǐng)域已知的或者可按照本領(lǐng)域公知的方法或按照本文所闡明的方法制備。
在Friedel-Crafts?；瘲l件下，例如在氯化鋁存在下，在惰性溶劑如1，2-二氯乙烷中，按照方法(b)制備5-乙基取代的化合物，然后通過使用披鈀碳催化劑，優(yōu)選在乙酸溶劑中，在室溫和大約3個(gè)大氣壓下氫解。
通常如方法(a)所述制備式V起始物質(zhì)，但由其中R表示氫的式II酰胺開始，例如，如J.Med.Chem.33，2358(1990)中所描述的。
如美國專利3,558,690中通常描述的，在本領(lǐng)域已知的水解斷裂內(nèi)酰胺的條件下，優(yōu)選用強(qiáng)堿水溶液例如氫氧化鈉水溶液，在易與水混溶的有機(jī)溶劑如甲醇存在或不存在下，在高溫，如在大約50-100℃下，按照方法(c)制備本發(fā)明化合物。
通過下列方法制備羥吲哚起始物質(zhì)，在高溫如在接近100℃下，用鹵代乙酰氯，優(yōu)選氯乙酰氯將式VIII二芳基胺N-?；?
其中R和R1-R5具有上述所定義的含義；得到式IX化合物
其中R和R1-R5具有上述所定義的含義。
在Friedel-Crafts烷基化條件下，在惰性溶劑如二氯苯中，在Friedel-Crafts催化劑如氯化鋁和二氯化乙基鋁存在下，在高溫如在120-175℃下，將式IX化合物環(huán)化。
可通過上文所描述的Ullmann縮合反應(yīng)和本領(lǐng)域已知的其它方法如Buchwald偶聯(lián)反應(yīng)制備式VIII二芳基胺。
如J.of Fluorine Chemistry 5，323(1975)中通常所描述的，例如，可通過在強(qiáng)堿如氨基鋰或正丁基鋰存在下，將相應(yīng)的苯胺(4-乙基-或4-甲基-苯胺)與五氟苯反應(yīng)來制備式VIII的二芳基胺，其中R1、R2、R4和R5是氟并且R3是氫。
按照本領(lǐng)域公知的方法，例如在極性溶劑如二甲基甲酰胺中，通過將鹽形式的羧酸或在堿存在下，將羧酸與對(duì)應(yīng)于酯化醇的鹵化物(如溴化物或氯化物)(如氯乙酸芐酯)縮合來制備式I羧酸酯，并且如果需要，將所得到的產(chǎn)品進(jìn)一步改性。
例如，如果酯化產(chǎn)品本身是酯，可通過將所得到的芐酯氫解將其轉(zhuǎn)化為羧酸。如果酯化產(chǎn)品本身是鹵化物，可通過與硝酸銀反應(yīng)，將其轉(zhuǎn)化為硝酰氧基衍生物。
例如，優(yōu)選通過將上述式I羧酸鹽與下式化合物縮合來制備式Ia化合物X-CH2COORa其中X為離去基團(tuán)并且Ra為羧基保護(hù)基；得到羧基保護(hù)形式的式I化合物，并接著除掉保護(hù)基Ra。
可在本領(lǐng)域已知的酯化條件下，例如在極性溶劑如二甲基甲酰胺中，在室溫-大約100℃，優(yōu)選在40-60℃的溫度下進(jìn)行酯化反應(yīng)。
優(yōu)選地，式Ia酸的鹽是堿金屬鹽，例如鈉鹽，它可以現(xiàn)場(chǎng)制備。
優(yōu)選地，離去基團(tuán)X是鹵素，例如氯或溴，或者低級(jí)烷基磺酰氧基例如甲磺酰氧基。
優(yōu)選地，羧基保護(hù)基Ra是芐基。
優(yōu)選地，可通過在Pd/C催化劑存在下，在乙酸中，在大氣壓力或在Parr氫化條件下，在室溫-大約50℃的溫度下用氫氣氫解，將所得到的芐酯轉(zhuǎn)化為游離的式Ia羧酸。
本發(fā)明包括任何新的起始物質(zhì)及其制備方法。
最后，得到游離形式或者鹽形式(如果存在成鹽基團(tuán))的本發(fā)明化合物。
有利的是可在醚或醇溶劑如低級(jí)鏈烷醇存在下，用可藥用堿如堿金屬氫氧化物的水溶液將本發(fā)明酸性化合物轉(zhuǎn)化為金屬鹽。通過用酸處理，可將所得到的鹽轉(zhuǎn)化為游離化合物。這些鹽或其它的鹽也可以用于純化所得到的化合物。可通過與適宜的胺如二乙胺等反應(yīng)得到銨鹽。
具有堿性基團(tuán)的本發(fā)明化合物可轉(zhuǎn)化為酸加成鹽，特別是可藥用鹽。這些鹽可用無機(jī)酸、有機(jī)羧酸或有機(jī)磺酸形成，所述無機(jī)酸如礦物酸，例如硫酸、磷酸或氫鹵酸，所述有機(jī)羧酸如未取代的或由鹵素取代的(C1-C4)鏈烷烴羧酸，例如乙酸，如飽和或不飽和的二羧酸，例如草酸、琥珀酸、馬來酸或富馬酸，如羥基羧酸，例如乙醇酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸或檸檬酸，如氨基酸，例如天冬氨酸或谷氨酸，所述有機(jī)磺酸如未取代的或取代(例如由鹵素取代)的(C1-C4)烷基磺酸(例如甲磺酸)或芳基磺酸。優(yōu)選的是用鹽酸、甲磺酸和馬來酸形成的鹽。
由于游離化合物與其鹽形式的化合物之間存在密切關(guān)系，因此在本文中，假設(shè)在一定條件下是可能的或適宜的，那么當(dāng)提到化合物時(shí)，也包括其相應(yīng)的鹽。
所得化合物(包括其鹽)也可以是其水合物形式，或者可包含它們結(jié)晶時(shí)所使用的溶劑。
本發(fā)明藥物組合物是那些適用于經(jīng)腸道如口服或直腸、透皮、局部或非腸道給予哺乳動(dòng)物包括人，用于抑制COX-2-活性和用于治療COX-2依賴性疾病的藥物組合物，并且單獨(dú)或與一種或多種可藥用載體一起包含有效量的本發(fā)明藥理學(xué)活性化合物。
更具體地說，該藥物組合物包含抑制環(huán)加氧酶-2有效量的本發(fā)明化合物，它基本上不具有環(huán)加氧酶-1抑制活性及其所產(chǎn)生的副作用。
具有藥理學(xué)活性的本發(fā)明化合物可用于生產(chǎn)包含有效量該化合物和適用于腸道或非腸道應(yīng)用的賦形劑或載體的藥物組合物。優(yōu)選的是片劑和明膠膠囊劑，它們包含活性組分和a)稀釋劑，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纖維素和/或甘氨酸；b)潤滑劑，例如硅膠、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂或鈣鹽和/或聚乙二醇；對(duì)于片劑而言，也可以包含c)粘合劑，例如硅酸鎂鋁、淀粉糊、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要可包含d)崩解劑，例如淀粉、瓊脂、藻酸或其鈉鹽，或泡騰混合物；和/或e)吸收劑、著色劑、矯味劑和甜味劑。優(yōu)選地，可注射組合物是含水等滲溶液或懸浮液，并且優(yōu)選地，栓劑是由脂肪乳劑或懸浮液制備的。所述組合物可滅菌和/或包含輔助劑如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑或乳化劑、溶解促進(jìn)劑、調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑。另外，它們也可以包含其它具有治療價(jià)值的物質(zhì)。所述組合物可分別按照常規(guī)的混合、制?；虬路椒ㄖ苽?，并且包含大約0.1-75％，優(yōu)選大約1-50％活性組分。
片劑可按照本領(lǐng)域已知的方法包膜或腸衣。
適用于透皮應(yīng)用的制劑包含有效量本發(fā)明化合物和載體。優(yōu)選的載體包括藥理學(xué)上可接受的、有助于透過宿主皮膚的可吸收溶劑。例如透皮裝置是繃帶形式，它包含背膜、包含化合物和可有可無的載體的儲(chǔ)庫、可有可無的能夠以控制的和預(yù)定的速率在較長的時(shí)間內(nèi)釋放宿主皮膚上的化合物的速率控制屏障，和確保所述裝置停留在皮膚上的裝置。
例如，適用于局部應(yīng)用到皮膚和眼的制劑包括水溶液、懸浮液、軟膏、霜?jiǎng)?、凝膠或可噴霧制劑，例如通過氣霧劑等釋放藥物。該局部釋放系統(tǒng)尤其適用于皮膚應(yīng)用，例如用于治療皮膚癌，例如在防曬霜、洗液、噴霧劑等中的預(yù)防性應(yīng)用。在這點(diǎn)上應(yīng)注意到，本發(fā)明化合物，例如下文實(shí)施例2和9的化合物能夠吸收290-320nm范圍內(nèi)的紫外線，同時(shí)容許在較高波長的可將皮膚曬成褐色的射線通過。因此，它們特別適用于局部應(yīng)用，包括如上所述本領(lǐng)域公知的化妝品制劑。該制劑中可包含助溶劑、穩(wěn)定劑、張力增強(qiáng)劑、緩沖劑和防腐劑。例如，可如美國專利4,784,808中所描述的制備適用于局部應(yīng)用的制劑。例如，可如美國專利4,829,088和4,960,799中所描述的制備適用于眼部給藥的制劑。
藥物制劑單獨(dú)或與另一治療劑一起包含有效COX-2抑制量的上述本發(fā)明化合物。
例如，適于治療瘤形成的其它活性劑包括在上述國際專利公開WO98/16227中第24頁第19行開始列舉的任何抗瘤形成劑或輻射防護(hù)劑。
本發(fā)明化合物與另一活性組分可同時(shí)、在給予其它活性組分前或后，通過相同的或不同的給藥途徑單獨(dú)地或者在同一藥物制劑中給藥。
所給予活性化合物的劑量依賴于溫血?jiǎng)游?哺乳動(dòng)物)的種類、體重、年齡和個(gè)體狀況，并依賴于給藥形式。用于口服給予大約50-70kg哺乳動(dòng)物的單位劑量可包含大約5-500mg活性組分。
本發(fā)明也涉及在哺乳動(dòng)物中利用本發(fā)明化合物及其可藥用鹽或其藥物組合物來抑制COX-2和治療本文所描述的COX-2依賴性疾病的方法，所述疾病包括炎癥、疼痛、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、眼部疾病，特別是眼部炎性疾病、青光眼和干眼病。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及利用本發(fā)明化合物來制備用于治療COX-2疾病的藥物。
本發(fā)明尤其涉及選擇性抑制哺乳動(dòng)物中環(huán)加氧酶-2活性而基本上不抑制環(huán)加氧酶-1活性的方法，它包括給予哺乳動(dòng)物抑制環(huán)加氧酶-2有效量的本發(fā)明化合物。
因此，本發(fā)明也涉及治療哺乳動(dòng)物中環(huán)加氧酶-2依賴性疾病的方法，它包括給予哺乳動(dòng)物抑制環(huán)加氧酶-2有效量的本發(fā)明化合物。
本發(fā)明尤其涉及治療哺乳動(dòng)物中環(huán)加氧酶-2依賴性疾病，同時(shí)基本上消除不需要的與環(huán)加氧酶-1抑制活性有關(guān)的副作用的方法，它包括給予哺乳動(dòng)物抑制環(huán)加氧酶-2有效量的本發(fā)明化合物，該劑量基本上不具有環(huán)加氧酶-1抑制活性。
更具體地說，本發(fā)明涉及治療哺乳動(dòng)物類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、疼痛或炎癥而不引起不需要的胃腸潰瘍的方法，它包括給予哺乳動(dòng)物相應(yīng)有效量的本發(fā)明化合物。
下列實(shí)施例用于說明本發(fā)明并且不用于限制本發(fā)明。所提到的溫度是指攝氏度。如果不另外提到，所有的蒸發(fā)都是在減壓下進(jìn)行，優(yōu)選在大約15-100mm Hg(＝20-133mbar)之間。通過標(biāo)準(zhǔn)分析方法，例如微量分析和光譜學(xué)特性(例如MS，IR，NMR)來確定最終產(chǎn)品、中間體和起始物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。所使用的縮寫是本領(lǐng)域常見的那些。實(shí)施例實(shí)施例1(a)在回流溫度下，將N，N-二甲基-5-甲基-2-(2’，4’-二氯-6’-甲基苯氨基)苯基乙酰胺(1.5g，4.3mmol)用6N NaOH(70ml)和n-BuOH(40ml)形成的兩相溶液水解14小時(shí)。冷卻至室溫后，將該混合物傾于冰(100ml)上。加入甲苯(100ml)并將該混合物轉(zhuǎn)移到分液漏斗中。將水相用3N HCl調(diào)至pH1。將有機(jī)相分離并將水相用甲苯(100ml)再萃取。將合并的有機(jī)溶液干燥(MgSO4)并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上，在高真空(35-50mbar)下濃縮，小心溫度不要超過50℃。從Et2O/己烷中結(jié)晶后，得到5-甲基-2-(2’，4’-二氯-6’-甲基苯氨基)苯基乙酸的褐色固體，m.p.137-141℃。
用下列方法制備起始物質(zhì)N，N-二甲基-5-甲基-2-(2’，4’-二氯-6’-甲基苯氨基)苯基乙酰胺將5-甲基-2-碘苯甲酸(100g，0.38mol)溶解在THF(350ml)中并在冰浴中冷卻。滴加硼烷-THF配合物(380ml，1M的THF溶液，0.38mol)。加完后，將該反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?4小時(shí)。將該混合物轉(zhuǎn)移到大錐形瓶中，在冰浴中冷卻并用水(250ml)小心地終止。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)THF得到白色懸浮液，將其再用水(1L)處理，然后過濾并在真空干燥器中用P2O5干燥，得到2-碘-5-甲基苯甲醇的白色固體，m.p.82-85℃。
將該苯甲醇(99.8g，0.38mol)溶解在48％HBr(500ml)中并加熱回流4小時(shí)。通過將冷卻的混合物傾入大量(1.5L)水中，然后過濾，分離得到芐基溴的黃色固體。將芐基溴(小心催淚劑)溶解在EtOH(400ml)中并在室溫下攪拌。將氰化鈉(56g，1.14mol)溶解在最少量的(～100ml)水中，然后加到芐基溴的乙醇溶液中。將該反應(yīng)物加熱回流3小時(shí)，然后冷卻至室溫。將乙醇在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除掉并將殘?jiān)么罅?1L)水洗滌。通過過濾分離得到2’-碘-5’-甲基苯基乙腈的白色固體，m.p.77-79℃。
將該腈(94.5g，0.37mol)溶解在EtOH(350ml)中并用溶解在水(200ml)中的NaOH(29.4g，0.74mol)處理。將該反應(yīng)物加熱回流14小時(shí)。冷卻至室溫后，將乙醇在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除掉并加入6N HCl直至pH＝1。將固體5-甲基-2-碘苯基乙酸過濾并用水(2×500ml)洗滌。在真空干燥器中用P2O5干燥后，將固體5-甲基-2-碘苯乙酸(mp112-114℃，83g，0.30mol)溶解在含幾滴DMF的CH2Cl2(450ml)中。向該溶液中加入亞硫酰氯(32ml，0.450mol)并將該反應(yīng)物加熱回流過夜。冷卻至室溫后，將該反應(yīng)混合物再用CH2Cl2(500ml)稀釋并用水(2×250ml)、飽和NaHCO3(250ml)和鹽水(250ml)洗滌。將該溶液干燥(MgSO4)并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，得到5-甲基-2-碘苯乙酰氯的淡黃色油狀物。
將二甲胺(200ml 2M的THF溶液)滴加到在冰浴中冷卻的5-甲基-2-碘苯乙酰氯的Et2O(500ml)溶液中。加完后，加入EtOAc(350ml)并將該溶液用水(350ml)、鹽水(250ml)洗滌并干燥(MgSO4)。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)并用1∶1的Et2O/己烷研制，得到N，N-二甲基-5-甲基-2-碘苯乙酰胺的淡褐色固體。m.p.47-49℃。
在二甲苯(100ml)中，將N，N-二甲基-5-甲基-2-碘苯乙酰胺(3.5g，11.5mmol)和2，4-二氯-6-甲基苯胺(4.1g，23mmol)與銅粉(0.18，2.9mmol)、碘化銅(I)(0.55g，2.9mmol)和無水碳酸鉀(1.6g，11.5mmol)一起攪拌。將該反應(yīng)物加熱回流48小時(shí)。在微熱(40℃)下，將該棕色懸浮液通過硅藻土濾板過濾，將其依次用甲苯(75ml)沖洗。將該濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)并在硅膠上進(jìn)行閃式色譜層析(Rf＝0.30，在40％EtOAc/己烷中)，得到N，N-二甲基-5-甲基-2-(2’，4’-二氯-6’-甲基苯氨基)苯乙酰胺的灰白色結(jié)晶固體，m.p.119-124℃。
類似地制備下列式I化合物，其中R取代基如表1顯示。
表1
>1-鉀鹽；2-鈉鹽；3-從環(huán)己烷中重結(jié)晶后。
如下制備實(shí)施例12-17的起始物質(zhì)5-乙基-2-碘-N，N-二甲基苯乙酰胺將AlCl3(303g，2.27mol)放在安裝溫度計(jì)和滴液漏斗的3-頸瓶中，在攪拌下滴加DMF(50ml)并將溫度升至大約60℃。將該混合物冷卻至45℃，并分3次加入羥吲哚(33g，0.25mol)。再過10分鐘后，加入乙酰氯(36ml，0.5mol)。將該混合物在室溫下再攪拌30分鐘。將該混合物傾到冰(3000g)上。由此形成固體，將其過濾，然后先用水，再用冷甲醇(1000ml)洗滌，并干燥得到5-乙?；u吲哚。
將5-乙?；u吲哚(54g，308mmol)、乙酸(400ml)和披鈀碳(10％，5g)合并并在55psi下用氫處理14小時(shí)。通過在硅藻土濾床上過濾除掉催化劑，將濾液減壓濃縮并將殘?jiān)靡颐烟幚淼玫?-乙基羥吲哚。
將5-乙基羥吲哚(～54g，～335mmol)、乙醇(750ml)、水(150ml)和氫氧化鉀(65g，1.62mol)合并并加熱回流3天。將該混合物冷卻，然后通過硅藻土濾床過濾。將濾液減壓濃縮，加入水并將pH調(diào)至6.5。將沉淀過濾，用水洗滌并在烘箱中干燥過夜，得到5-乙基-2-氨基苯乙酸。
將水(405ml)和濃HCl(48ml)的混合物攪拌并冷卻至0℃。緩慢地加入5-乙基-2-氨基苯乙酸(53.7g，300mmol)同時(shí)保持溫度在0-2℃。加完后，用30分鐘的時(shí)間滴加亞硝酸鈉(22.2g，322mmol)在60ml水中的溶液并保持溫度在0-2℃。再過20分鐘后，滴加碘化鉀(48g，290mmol)在18ml濃HCl和130ml水中的溶液同時(shí)保持溫度低于10℃。將該混合物溫?zé)嶂潦覝?，然后加熱回?小時(shí)。將該混合物用乙酸乙酯和乙醚(1∶1混合物，4×300ml)萃取，然后在酸化至pH6之前，將有機(jī)層先用30％硫代亞硫酸鈉的水溶液洗滌，再用氫氧化鈉溶液(0.1M)洗滌并用乙酸乙酯萃取。將該溶液用飽和鹽水洗滌、干燥(硫酸鎂)、過濾并將溶劑減壓除掉。將該殘?jiān)眉和樘幚?，得?-乙基-2-碘苯乙酸。
將5-乙基-2-碘苯乙酸溶解在二氯甲烷(400ml)中并加入DMF(1ml)。然后，用20分鐘的時(shí)間滴加亞硫酰氯(21ml，300mmol)。將該混合物加熱至回流并連續(xù)加熱3.5小時(shí)，然后將該混合物冷卻并加入冰水(400ml)和二氯甲烷(300ml)。分離各層，將有機(jī)層用碳酸氫鈉溶液、飽和鹽水洗滌，干燥(硫酸鎂)并減壓蒸發(fā)，得到5-乙基-2-碘苯乙酰氯。
將該酰氯(46g，150mmol)溶解在乙醚(500ml)中并在-35℃下攪拌。在-35℃下滴加二甲胺(250ml 2M的THF溶液，500mmol)并將該混合物溫?zé)嶂潦覝?，然后攪?0小時(shí)。加入乙酸乙酯和水并分離各層。將有機(jī)層用飽和鹽水洗滌并將合并的水層用乙醚洗滌。將合并的有機(jī)層干燥(硫酸鎂)，并將溶劑減壓除掉。加入己烷得到N，N-二甲基-5-乙基-2-碘苯乙酰胺的固體。
用下列方法制備實(shí)施例18-19的起始物質(zhì)N，N-二甲基-5-乙基-苯乙酰胺
將N，N-二甲基-2-碘苯乙酰胺(60g，0.208mol)、2’，3’，5’，6’-四氟苯胺(100g，0.606mol)、銅粉(6.6g，0.104mol)碘化銅(I)(19.8g，0.104mol)和無水碳酸鉀(28.7g，0.208mol)在1000ml二甲苯中一起攪拌。將該反應(yīng)物加熱回流48小時(shí)。在微熱(40℃)下，將該棕色懸浮液通過硅藻土濾板過濾，用甲苯(250ml)沖洗。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)濾液，然后在硅膠上閃式色譜層析(Rf＝0.25，在30％EtOAc/己烷中)。從戊烷/Et2O中結(jié)晶得到N，N-二甲基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酰胺，m.p.109-110℃。
在惰性氣氛下，將乙酰氯(29.1ml，0.385mol)緩慢地加到攪拌在1，2-二氯乙烷(750ml)中的氯化鋁懸浮液(51.2g，0.385mol)中。在室溫下攪拌1小時(shí)后，得到黃色溶液。將該溶液在冰浴中冷卻并加入N，N-二甲基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酰胺(40g，0.123mol)。將該反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝厝缓鬁責(zé)嶂?0℃并保持0.5小時(shí)。將該反應(yīng)物傾到冰上并用EtOAc(2×750ml)萃取。將有機(jī)萃取液用水(750ml)、飽和NaHCO3溶液(500ml)和鹽水(500ml)洗滌。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)并用Et2O研制，得到N，N-二甲基-5-乙酰基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酰胺的白色固體，m.p.112-114℃。
將N，N-二甲基-5-乙酰基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酰胺(30g，0.802mol)溶解在HOAc(150ml)中并用10％Pd/C(1.5g)催化劑氫化(55psi)8小時(shí)。通過在硅藻土上過濾除掉催化劑并將濾液傾入水(500ml)和EtOAc(500ml)中。將有機(jī)層用水(750ml)洗滌，用飽和Na2CO3溶液(500ml)中和并用鹽水(500ml)洗滌。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)，然后用己烷研制，得到N，N-二甲基-5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酰胺，m.p.105-106℃。
如下制備實(shí)施例21和22的起始物質(zhì)N，N-二甲基-5-乙基-2-(4’-氯-2’-氟-6’-甲基苯氨基)苯乙酰胺按照實(shí)施例1中所描述的方法，將N，N-二甲基-5-乙基-2-碘-苯乙酰胺與2-溴-4-氯-6-氟苯胺一起進(jìn)行Ullmann縮合，得到N，N-二甲基-5-乙基-2-(2’-溴-4’-氯-6’-氟苯氨基)苯乙酰胺。
將N，N-二甲基-5-乙基-2-(2’-溴-4’-氯-6’-氟苯氨基)苯乙酰胺(2.5g，6.0mmol)與DMF(10ml)、三乙胺(10ml)、三-鄰-甲苯基膦(0.5g，1.6mmol)、四甲基錫(4ml，5.16g，2 8.9mmol)和乙酸鈀(0.25g，1.1mmol)合并，并將該混合物在95℃下在密封管中加熱3天。將該管冷卻并小心地打開。將水和乙酸乙酯加到該反應(yīng)物中并將該混合物分離。將有機(jī)級(jí)分用稀NaCl溶液(2×50ml)洗滌。將合并的含水級(jí)分用乙酸乙酯洗滌，然后將合并的有機(jī)級(jí)分干燥(硫酸鎂)。將該物質(zhì)吸收到少量硅膠上并通過閃式色譜層析(在硅膠上，乙酸乙酯∶己烷，1∶4-1∶1)純化，得到N，N-二甲基-5-乙基-2-(4’-氯-2’-氟-6’-甲基苯氨基)苯乙酰胺。
用下列方法制備實(shí)施例23的起始物質(zhì)2-氯-4-三甲基乙酰氧基-6-氟苯胺向冷卻至0℃的7.0g(0.045mol)3-氟-4-硝基苯酚和6.7g(0.067mol)三乙胺在20ml二氯甲烷中的混合物中滴加6.5g(0.054mol)三甲基乙酰氯。將該反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝夭嚢柽^夜。將反應(yīng)物用水終止并用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層相繼用1N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和鹽水洗滌，然后用硫酸鎂干燥。過濾并除掉溶劑得到10.5g 2-氟-4-三甲基乙酰氧基-硝基苯粗品，將其溶解在200ml無水乙醇中。向該溶液中加入0.9g 5％披鈀碳，然后將該混合物在30psi氫氣下氫化2小時(shí)。將催化劑過濾掉并將溶劑除掉得到2-氟-4-三甲基乙酰氧基苯胺。
在氮?dú)鈿夥障?，?.3g(0.035mol)2-氟-4-三甲基乙酰氧基苯胺和5.1g(0.038mol)N-氯琥珀酰亞胺在50ml氟苯中的混合物加熱回流2小時(shí)。冷卻至室溫后，除掉溶劑，加入水并將該混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用1N氫氧化鈉和飽和鹽水洗滌并用硫酸鎂干燥。過濾并除掉溶劑得到殘?jiān)瑢⒃摎堅(jiān)ㄟ^硅膠色譜層析(20％乙酸乙酯/己烷)純化，得到2-氯-4-三甲基乙酰氧基-6-氟苯胺。
用與實(shí)施例1類似的方法，將2-氯-4-三甲基乙酰氧基-6-氟苯胺轉(zhuǎn)化為5-甲基-2-(2’-氯-4’-羥基-6’-氟苯氨基)苯乙酸，在最后一步，用二甲胺將三甲基乙酰基水解得到最終產(chǎn)品。實(shí)施例24將在THF(100ml)中的5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸(1.0g，3.06mmol)用1N氫氧化鈉(3.06ml，3.06mmol)處理1小時(shí)。將該混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，然后首先用THF(2×100ml)，再用苯(2×100ml)處理并蒸發(fā)干燥。將所得到的灰白色5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸的鈉鹽在高真空下干燥過夜。將5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸鈉(0.5g，1.43mmol)和2-溴乙酸芐酯(272μl，1.72mmol)在50℃下在二甲基甲酰胺(50ml)中攪拌14小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并在EtOAc(200ml)和水(200ml)之間分配。將有機(jī)層再次用水(2×200ml)、鹽水(100ml)洗滌，干燥(MgSO4)并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮。將粗品芐基酯在硅膠上閃式色譜層析(10-15％EtOAc/己烷)得到5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸的芐氧基羰基甲酯無色油狀物。將該油狀物溶解在HOAc(20ml)中并用10％Pd/C催化劑(0.1g)氫化(55psi)1小時(shí)。將催化劑通過在硅藻土上過濾除掉并將濾液傾入水(200ml)和EtOAc(200ml)中。將有機(jī)層用水(250ml)和鹽水(100ml)洗滌。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)并用Et2O/己烷研制得到式(1a)酯，5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸的羧甲基酯，m.p.151-153℃，其中R為乙基，R1＝R2＝R4＝R5＝氟化物并且R3＝H。
類似地制備下列式(1a)化合物，其中R取代基如表2顯示。
表2
實(shí)施例34將在THF(100ml)中的5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸(1.0g，3.06mmol)用1N氫氧化鈉(3.06ml，3.06mmol)處理1小時(shí)。將該混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮，然后首先用THF(2×100ml)，再用苯(2×100ml)處理殘?jiān)⒄舭l(fā)至干。將所得到的灰白色5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸的鈉鹽在高真空下干燥過夜。將5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸鈉(2.0g，6.2mmol)溶解在DMF(70ml)中并在室溫下用1-溴-4-氯丁烷(1.2g，6.9mmol)處理過夜。將該反應(yīng)混合物在高真空(35-50mbar)下在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮。將所得到的油狀物在水(200ml)和Et2O(200ml)之間分配。將有機(jī)層用鹽水(100ml)洗滌、干燥(MgSO4)并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮得到氯丁酯的淡棕色油狀物。將該氯丁酯溶解在CH3CN(100ml)中并在回流溫度下用硝酸銀(8.7g，50mmol)處理18小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫并將溶劑在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除掉。將殘?jiān)贑H2Cl2(200ml)和水(200ml)之間分配。將有機(jī)層干燥(MgSO4)、濃縮并閃式色譜層析(5％EtOAc/己烷)得到5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸的硝酰氧基丁酯的澄清油狀物。實(shí)施例35將5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸鈉(7.3g，20.9mmol)溶解在DMF(100ml)中并在50℃下用2-甲基-2-溴丙酸芐酯(6.2g，24.2mmol)處理96小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并在高真空(35-50mbar)下在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮。將所得到的油狀物在水(200ml)和Et2O(200ml)之間分配。將有機(jī)層用鹽水(100ml)洗滌、干燥(MgSO4)并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮得到淡棕色油狀物。在硅膠上閃式色譜層析(0-10％EtOAc/己烷)得到酯的淡紅色油狀物。將該酯(1.5g，3.0mmol)溶解在EtOAc(150ml)中并用10％Pd/C(0.3g)催化劑氫化(55psi)1小時(shí)。通過硅藻土(500ml)過濾除掉該催化劑。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)，然后用己烷研制得到5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸1-羧基-1-甲基乙酯的結(jié)晶型白色固體，m.p.104-108℃。實(shí)施例36將5-甲基-2-(2’-氟-6’-三氟甲基苯氨基)苯乙酸異丙基酯(2.9g，8.4mmol)溶解在甲磺酸(25ml)中并在室溫下攪拌8小時(shí)。將該反應(yīng)混合物緩慢地加到在燒杯中的200ml冰中。當(dāng)冰溶化后，將該溶液攪拌產(chǎn)生白色固體，并通過過濾分離。將該固體在硅膠上閃式色譜層析，用35％EtOAc作為洗脫劑得到5-甲基-2-(2’-氟-6’-三氟甲基苯氨基)苯乙酸的白色固體，m.p.155-156℃。
如下制備起始物質(zhì)將2-碘-5-甲基苯乙酸(20.0g，72mmol)和催化量98％硫酸(0.2ml)溶解在異丙醇(200ml)中并加熱回流48小時(shí)。將溶劑在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除掉并將殘留的油狀物在EtOAc(500ml)和飽和NaHCO3溶液(500ml)之間分配。分離有機(jī)層，干燥(MgSO4)并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮。用Kugelrohr裝置將殘留的油狀物蒸餾得到澄清、無色的油狀物，當(dāng)在室溫下放置時(shí)，該油狀物凝固得到2-碘-5-甲基苯乙酸異丙基酯，m.p.48-50℃。
將2-碘-5-甲基苯乙酸異丙基酯(10.0g，31mmol)、2-氨基-3-氟三氟甲苯(20.0g，111mmol)、銅粉(1.1g，16mmol)、碘化銅(I)(3.1g，16mmol)和K2CO3(4.3g，31mmol)一起在二甲苯(200ml)中攪拌。將該反應(yīng)混合物加熱回流48小時(shí)。在微熱(40℃)下，將棕色懸浮液通過硅藻土濾板過濾由此用甲苯(100ml)沖洗。將濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)，然后在硅膠上閃式色譜層析，用3-4％EtOAc/己烷作為洗脫劑。分離得到產(chǎn)品5-甲基-2-(2’-氟-6’-三氟甲基苯氨基)苯乙酸異丙基酯的淡黃色油狀物。實(shí)施例37類似地，按照實(shí)施例36所描述的方法制備5-甲基-2-(2’4’-二氯-6’-三氟甲基苯氨基)苯乙酸，m.p.157-158℃。實(shí)施例38將N-(2，3，5，6-四氟苯基)-5-乙基羥吲哚(72.67g；0.235mol)在含少量甲醇的水(10％v/v；253ml)中漿化并加入氫氧化鈉溶液(50wt％；16.1ml)。將該混合物在80-85℃下攪拌2-4小時(shí)，然后冷卻至室溫。將該反應(yīng)溶液部分減壓(25-30mm)濃縮。除掉50ml溶劑后，將該混合物用水(150ml)和叔丁基甲基醚(250ml)稀釋。將冷卻的混合物用HCl水溶液(12.1N；19.5ml)酸化至pH 6.5-7.0，保持溫度在0-5℃。將含水層丟棄并將有機(jī)層用水(250ml)洗滌。將有機(jī)層減壓(20-100mm)濃縮同時(shí)將溶劑改換為甲苯。更多的揮發(fā)性組分除掉后，將每批容量調(diào)至400-450ml。將該混合物溫?zé)嶂?0℃、使之澄清、濃縮至原體積的一半并冷卻至0℃。在該溫度下攪拌2小時(shí)后，收集該產(chǎn)品并用甲苯/庚烷(10∶90；100ml)洗滌。將所得到的固體在50-60℃下減壓干燥4-8小時(shí)，得到實(shí)施例18的5-乙基-2-(2’，3’，5’，6’-四氟苯氨基)苯乙酸。
如下制備起始物質(zhì)將4-乙基苯胺(242.36g；2.00mol)溶解在無水四氫呋喃(900ml)中。在N2和冷卻下加入n-BuLi溶液(2.5M的己烷溶液，800ml；2.00mol)并保持反應(yīng)溫度低于15℃。在10℃下攪拌1小時(shí)后，在冷卻下，將純凈的五氟苯(168.06g；1.00mol)加到該混合物中，并保持反應(yīng)溫度為10-20℃。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物1.5小時(shí)，然后在劇烈攪拌下緩慢加入HCl水溶液(6N；500ml)，保持反應(yīng)溫度低于35℃。將淬滅的反應(yīng)物在室溫下攪拌0.5-18小時(shí)。分離下層的含水層并將上層的有機(jī)相減壓(30-150mm)濃縮至體積為1/4。用庚烷(300ml)稀釋該濃縮物并用水(300ml)萃取。分離出的有機(jī)上層在230-400目硅膠(50g)上攪拌并過濾。將濾餅用庚烷(4×50ml)洗滌。將合并的濾液和洗滌液減壓(20-30mm)濃縮得到固體粗品。將該固體在熱庚烷(200ml)中重結(jié)晶并在0℃下收集。將該固體用冷庚烷(100ml)洗滌并在40℃下減壓干燥，得到純N-(2’，3’，5’，6’-四氟苯基)-4-乙基苯胺。
在100-115℃下，將二苯胺衍生物(230.0g；0.854mol；1.0eq)用氯乙酰氯(192.96g；1.709mol；2.0eq)處理2小時(shí)(通過加熱速率控制HCl的劇烈釋放)。將該混合物冷卻至室溫，減壓(10-12mm)濃縮至原體積的80-90％。加入1，2-二氯苯(80ml)并將稀釋的混合物減壓(10-12mm)濃縮直至通過GC分析不再發(fā)現(xiàn)氯乙酰氯(蒸餾出30-40ml)，得到粗品N-(2’，3’，5’，6’-四氟苯基)-N-氯乙?；?4-乙基苯胺的溶液。
在N2下，將無水AlCl3(170.84g；1.281mol；1.5eq)與1，2-二氯苯(480ml)淤漿化并冷卻至0℃。在劇烈攪拌下，緩慢地加入前一步中得到的粗品溶液(理論上含295.34g；0.854mol；1.0eq)，并保持溫度低于60℃。加入EtAlCl2溶液(1.8M的甲苯溶液；733ml；1.319mol；1.7eq)并將劇烈攪拌的反應(yīng)混合物加熱至～160℃，在常壓下蒸餾甲苯(135-160℃)。當(dāng)停止蒸餾(～690ml)時(shí)，將反應(yīng)溫度保持在155-165℃下3.5-5小時(shí)。將該混合物冷卻至室溫，然后在N2和劇烈攪拌下傾到碎冰(2.5kg)上。將反應(yīng)容器用1，2-二氯苯(50ml)沖洗。將冷淬滅的產(chǎn)品漿液過濾并將濾餅相繼用10％1，2-二氯苯/庚烷(100ml)和庚烷(100ml)洗滌。將該物質(zhì)在80-90℃下減壓干燥12-16小時(shí)，得到N-(2’，3’，5’，6’-四氟苯基)-5-乙基羥吲哚。
權(quán)利要求
1.式I化合物或其可藥用鹽；或其可藥用前體藥物酯
其中R是甲基或乙基；R1是氯或氟；R2是氫或氟；R3是氫、氟、氯、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基或羥基；R4是氫或氟；并且R5是氯、氟、三氟甲基或甲基。
2.式(1a)化合物及其可藥用鹽
其中R、R1、R2、R3、R4和R5如權(quán)利要求1中所定義。
3.權(quán)利要求1或2的化合物或其可藥用鹽；或其可藥用前體藥物酯，其中R是甲基或乙基；R1是氯或氟；R2是氫；R3是氫、氟、氯、甲基或羥基；R4是氫；并且R5是氯、氟或甲基。
4.權(quán)利要求1的化合物；或其可藥用鹽；或其可藥用前體藥物酯，如實(shí)施例1-37任一項(xiàng)所公開。
5.一種藥物組合物，含有與一種或多種可藥用載體組合的抑制環(huán)加氧酶-2有效量的權(quán)利要求1或2的化合物。
6.一種治療哺乳動(dòng)物的環(huán)加氧酶-2依賴性疾病的方法，該方法包括給予需要進(jìn)行治療的哺乳動(dòng)物抑制環(huán)加氧酶-2有效量的權(quán)利要求1或2的化合物。
7.一種選擇性地抑制哺乳動(dòng)物中環(huán)加氧酶-2活性而基本上不抑制環(huán)加氧酶-1活性的方法，該方法包括給予需要進(jìn)行治療的哺乳動(dòng)物抑制環(huán)加氧酶-2有效量的權(quán)利要求1或2的化合物。
8.一種治療哺乳動(dòng)物的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、疼痛、炎癥、眼科炎癥疾病、青光眼或干眼病的方法，該方法包括給予需要進(jìn)行治療的哺乳動(dòng)物相應(yīng)有效量的權(quán)利要求1或2的化合物。
9.一種制備式I化合物的方法，該方法包括(a)在銅和碘化亞銅存在下，將式II或IIa化合物
其中R具有權(quán)利要求1中的含義；Ra是低級(jí)烷基；并且R6和R7表示低級(jí)烷基；或者R6和R7與氮原子一起表示哌啶子基、吡咯烷基或嗎啉代；與式III化合物偶聯(lián)
其中R1、R2、R3、R4和R5具有權(quán)利要求1中的含義；得到式IV或IVa化合物
將所得到的式IV或IVa化合物水解得到式I化合物；或者(b)對(duì)于其中R表示乙基的化合物來說，在弗瑞德-克來福特?；磻?yīng)中，將式V化合物
其中R1-R7具有本文所定義的含義；與乙酸的反應(yīng)性官能衍生物如乙酰氯縮合得到式VI化合物
其中R1-R7具有本文所定義的含義；將式VI化合物氫解后水解，得到式I化合物，其中R表示乙基；或者(c)用強(qiáng)堿將式VII內(nèi)酰胺水解
其中R和R1-R5具有本文所定義的含義；并且在上述方法中，如果需要，臨時(shí)將任何干擾性反應(yīng)性基團(tuán)保護(hù)起來，然后將所得到的本發(fā)明化合物分離；以及如果需要，將任何所得到的化合物轉(zhuǎn)化為另一種本發(fā)明化合物；和/或者如果需要，將本發(fā)明游離的羧酸轉(zhuǎn)化為其可藥用酯衍生物；和/或者如果需要，將所得到的游離酸轉(zhuǎn)化為鹽或者將所得到的鹽轉(zhuǎn)化為游離的酸或者轉(zhuǎn)化為另一種鹽。
全文摘要
公開了式(Ⅰ)化合物:其可藥用鹽;及其可藥用前體藥物酯,其中R是甲基或乙基;R
文檔編號(hào)C07C229/42GK1268112SQ98808520
公開日2000年9月27日 申請(qǐng)日期1998年8月26日 優(yōu)先權(quán)日1997年8月28日
發(fā)明者R·A·福吉莫托, L·W·麥克奎瑞, B·B·穆格拉吉, J·H·范杜澤, 許大強(qiáng) 申請(qǐng)人:諾瓦提斯公司