專利名稱：哌嗪衍生物及其鹽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新哌嗪衍生物和其鹽。
從以下現(xiàn)有技術(shù)文獻中，即EP-A2-303250和美國專利5，021，419，已知一些化學(xué)結(jié)構(gòu)式與本發(fā)明哌嗪衍生物的結(jié)構(gòu)式相似的哌嗪衍生物。
本發(fā)明提供新的、現(xiàn)有技術(shù)文獻中未知的哌嗪衍生物和其鹽。所述哌嗪衍生物由下列通式(1)和(2)代表 式中R1為低級烷基;
R2為苯環(huán)上可帶有1-3個選自羥基、苯基-低級烷氧基、低級烷基、低級烷氧基和鹵原子的取代基的苯基-低級烷基，在咪唑環(huán)上可帶有苯基-低級烷基作為取代基的咪唑基取代的低級烷基，或下式基團
(式中R5和R6相同或不同，各自為氫原子，苯并噻唑基，或在苯環(huán)上可帶有1-3個選自低級烷氧基、苯基-低級烷氧基、低級烷基和羥基的取代基的苯基-低級烷基;另外，所述R5、R6和與其成鍵的相鄰氮原子可與其它氮原子或氧原子一起或無其它氮原子或氧原子存在下形成5-6元飽和雜環(huán)基;所述雜環(huán)基可有苯基作為取代基，其中苯基的苯環(huán)上可有低級烷氧基作為取代基;)R3為氫原子、低級烷基或苯基-低級烷基;和R4為羥基、苯基-低級烷氧基或四氫吡喃氧基;和 其中R7為低級烷基，在苯環(huán)上可有選自羥基和苯基-低級烷氧基的取代基的苯基-低級烷基，低級烷硫基取代的低級烷基，苯基-低級烷氧基取代的低級烷基，低級烷氧羰基，低級烷氧羰基取代的低級烷基，或羥基取代的低級烷基;
R8為氫原子;另外，R7和R8一起可形成亞丙基;及R9為羥基或苯基-低級烷氧基。
由通式(1)和(2)代表的本發(fā)明的哌嗪衍生物和它們的鹽對豚鼠的巨噬細胞受激釋放的過氧化物自由基(O2)有抑制作用，還在Masugi腎炎中具有抗蛋白尿活性。因此，通式(1)和(2)代表的哌嗪衍生物和其鹽是預(yù)防和治療上述過氧化物自由基引起的各種疾病的有用試劑，例如，自身免疫病(如類風濕性關(guān)節(jié)炎)、動脈硬化、心缺血病、暫時性腦缺血、肝功能不全及腎功能不全。它們還是在各種臨床領(lǐng)域中預(yù)防和治療腎炎的有用試劑。
除此以外，通式(1)和(2)的哌嗪衍生物和其鹽對腎小球膜細胞的繁殖具有抑制作用，后者與腎炎的發(fā)展有密切關(guān)系;因此，它們是預(yù)防和治療繁殖性腎炎的有用試劑。
在本說明書中，通式(1)和(2)中的取代基具體如下所述。
低級烷氧基可列舉C1-6直鏈或支鏈烷氧基，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基和己氧基等。
低級烷基可列舉C1-6直鏈或支鏈烷基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基和己基等。
在苯環(huán)上可有1-3個選自羥基、苯基-低級烷氧基、低級烷基、低級烷氧基和鹵原子的取代基的苯基-低級烷基，可列舉這樣的苯基烷基，其中烷基片段為C1-6直鏈或支鏈烷基，而且苯環(huán)上可有1-3個選自羥基、苯基-C1-6直鏈或支鏈烷氧基、C1-6直鏈或支鏈烷基、C1-6直鏈或支鏈烷氧基和鹵原子的取代基，如芐基、2-苯乙基、1-苯乙基、3-苯丙基、4-苯丁基、1，1-二甲基-2-苯乙基、5-苯基戊基、6-苯基己基、2-甲基-3-苯丙基、2-(3-甲氧苯基)乙基、1-(4-甲氧苯基)乙基、2-甲氧芐基、3-(2-乙氧苯基)丙基、4-(3-乙氧苯基)丁基、1，1-二甲基-2-(4-乙氧苯基)乙基、5-(4-異丙氧基苯基)戊基、6-(4-己氧基苯基)己基、3，4-二甲氧基芐基、3，4，5-三甲氧基芐基、2，4-二甲氧基芐基、2，5-二甲氧基芐基、1-苯基-1-羥甲基、2-羥基-2-苯乙基、3-羥基-3-苯丙基、4-羥基-4-苯丁基、1，1-二甲基-2-羥基-2-苯乙基、5-羥基-5-苯基戊基、6-苯基-6-羥基-己基、2-甲基-3-苯基-3-羥基丙基、2-(4-甲氧苯基)-2-羥乙基、2-(3-乙氧苯基-2-羥乙基、4-羥基-4-(3，4-二甲氧苯基)丁基、3-甲氧芐基、4-甲氧芐基、2，4-二乙氧基芐基、2，3-二甲氧基芐基、2，4-二甲氧基芐基、2，6-二甲氧基芐基、4-芐氧基芐基、2-(3-芐氧基苯基)乙基、1-(2-芐氧基苯基)乙基、3-[2-(2-苯基乙氧基)苯基]丙基、4-[3-(3-苯基丙氧基)苯基]丁基、1，1-二甲基-2-[4-(4-苯基丁氧基)苯基]乙基、5-[2-(5-苯基戊氧基)苯基]戊基、6-[3-(6-苯基己氧基)苯基]己基、2-羥基芐基、4-羥基芐基、2-(3-羥基苯基)乙基、1-(4-羥苯基)乙基、3-(2-羥苯基)丙基、4-(3-羥苯基)丁基、5-(2-羥苯基)戊基、6-(3-羥苯基)己基、3，4-二羥基芐基、3，4，5-三羥基芐基、3，5-二甲氧基-4-芐氧基芐基、3，5-二甲氧基-4-羥基芐基、3，5-二叔丁氧基-4-芐氧基芐基、3，5-二叔丁氧基-4-羥基芐基、2-甲基芐基、2-(3-甲基苯基)乙基、1-(4-甲基苯基)乙基、3-(2-乙基苯基)丙基、4-(3-乙基苯基)丁基、1，1-二甲基-2-(4-乙基苯基)乙基、5-(4-異丙基苯基)戊基、6-(4-己基苯基)己基、3，4-二甲基芐基、3，4，5-三甲基芐基、2，5-二甲基芐基、2-氯芐基、2-(3-氯苯基)乙基、2-氟芐基、1-(4-氯苯基)乙基、3-(2-氟苯基)丙基、4-(3-氟苯基)丁基、5-(4-氟苯基)戊基、1，1-二甲基-2-(2-溴苯基)乙基、6-(3-溴苯基)己基、4-溴芐基、2-(2-碘苯基)乙基、1-(3-碘苯基)乙基、3-(4-碘苯基)丙基、3，4-二氯芐基、3，5-二氯芐基、2，6-二氯芐基、2，3-二氯芐基、2，4-二氯芐基、3，4-二氟芐基、3，5-二溴芐基、3，4，5-三氟芐基、3，5-二氯-4-羥基芐基、3，5-二甲基-4-羥基芐基和2-甲氧基-3-氯芐基等。
低級烷氧羰基可列舉C1-6直鏈或支鏈烷氧羰基，如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、異丙氧羰基、丁氧羰基、叔丁氧羰基、戊氧羰基和己氧羰基等。
苯基-低級烷氧基可列舉苯基-C1-6直鏈或支鏈烷氧基，如芐氧基、2-苯基乙氧基、1-苯基乙氧基、3-苯基丙氧基、4-苯基丁氧基、1，1-二甲基-2-苯基乙氧基、5-苯基戊氧基、6-苯基己氧基和2-甲基-3-苯基丙氧基等。
作為鹵原子，可列舉如氟原子、氯原子、溴原子和碘原子。
苯基低級烷基可列舉苯基-C1-6直鏈或支鏈烷基，如芐基、2-苯基乙基、1-苯基乙基、3-苯基丙基、4-苯基丁基、1，1-二甲基-2-苯基乙基、5-苯基戊基、6-苯基己基和2-甲基-3-苯基丙基等。
在咪唑環(huán)上可帶有苯基-低級烷基作為取代基的咪唑基取代的低級烷基，可列舉咪唑基取代的C1-6直鏈或支鏈烷基，在咪唑環(huán)上可帶有的取代基為苯基-C1-6直鏈或支鏈烷基，如(4-咪唑基)甲基、2-(2-咪唑基)乙基、1-(4-咪唑基)乙基、3-(5-咪唑基)丙基、4-(2-咪唑基)丁基、1，1-二甲基-2-(4-咪唑基)乙基、5-(5-咪唑基)戊基、6-(2-咪唑基)己基、2-甲基-3-(4-咪唑基)丙基、(1-芐基-4-咪唑基)甲基、2-[1-(2-苯乙基)-4-咪唑基]乙基、1-[5-(1-苯乙基)-2-咪唑基]乙基、3-[1-(3-苯丙基)-5-咪唑基]丙基、4-[4-(4-苯基丁基)-2-咪唑基]丁基、5-[2-(5-苯基戊基)-4-咪唑基]戊基和6-[1-(6-苯基己基)-4-咪唑基]己基等。
在苯環(huán)上可帶有1-3個選自低級烷氧基、苯基-低級烷氧基、低級烷基和羥基的取代基的苯基-低級烷基，可列舉這樣的苯基-烷基，其中烷基片段為C1-6直鏈或支鏈烷基，苯環(huán)上可帶有的1-3個取代基選自C1-6直鏈或支鏈烷氧基、苯基-C1-6直鏈或支鏈烷氧基、C1-6直鏈或支鏈烷基和羥基，如芐基、2-苯基乙基、1-苯基乙基、3-苯基丙基、4-苯基丁基、1，1-二甲基-2-苯基乙基、5-苯基戊基、6-苯基己基、2-甲基-3-苯基丙基、2-甲氧基芐基、3-甲氧基芐基、4-甲氧基芐基、2-(3-甲氧苯基)乙基、1-(4-甲氧苯基)乙基、2-甲氧基芐基、3-(2-乙氧苯基)丙基、4-(3-乙氧基苯基)丁基、1，1-二甲基-2-(4-乙氧基苯基)乙基、5-(4-異丙氧基苯基)戊基、6-(4-己氧基苯基)己基、3，4-二甲氧基芐基、3，4，5-三甲氧基芐基、2，5-二甲氧基芐基、2，4-二乙氧基芐基、2，3-二甲氧基芐基、2，4-二甲氧基芐基、2，6-二甲氧基芐基、4-芐氧基芐基、2-(3-芐氧基苯基)乙基、1-(2-芐氧基苯基)乙基、3-[2-(2-苯基乙氧基)苯基]丙基、4-[3-(3-苯基丙氧基)苯基]丁基、1，1-二甲基-2-[4-(4-苯基丁氧基)苯基]乙基、5-[2-(5-苯基戊氧基)苯基]戊基、6-[3-(6-苯基己氧基)苯基]己基、2-羥基芐基、2-(3-羥苯基)乙基、1-(4-羥苯基)乙基、3-(2-羥苯基)丙基、4-(3-羥苯基)丁基、5-(2-羥苯基)戊基、6-(3-羥苯基)己基、3，4-二羥基芐基、3，4，5-三羥基芐基、3，5-二甲氧基-4-芐氧基芐基、3，5-二甲氧基-4-羥基芐基、3，5-二叔丁氧基-4-羥基芐基、2-甲基芐基、2-(3-甲基苯基)乙基、1-(4-甲基苯基)乙基、3-(2-乙基苯基)丙基、4-(3-乙基苯基)丁基、1，1-二甲基-2-(4-乙基苯基)乙基、5-(4-異丙基苯基)戊基、6-(4-己基苯基)己基、3，4-二甲基芐基、3，4，5-三甲基芐基、3，5-二叔丁基-4-羥基芐基和3，5-二叔丁基-4-芐氧基芐基等。
由R5、R6和與它們成鍵的相鄰氮原子一起，及有或無其它氮原子或氧原子下形成的5-6元飽和雜環(huán)基，可列舉哌嗪基、吡咯烷基、嗎啉基和哌啶基等。
有苯基作為取代基的上述雜環(huán)基，其中苯基可有烷氧基作為取代基，可列舉這樣的苯基取代的上述雜環(huán)基，其中苯基在苯環(huán)上可有1-3個C1-6直鏈或支鏈烷氧基，如4-(2-甲氧基苯基)哌嗪基、4-(2，4-二甲氧苯基)哌啶、3-(2，3，4-三甲氧基苯基)嗎啉基、2-(3-甲氧基苯基)吡咯烷基、2-苯基哌啶基、2-(2-乙氧基苯基)哌嗪基、3-(3-丙氧基苯基)哌啶基、2-(4-丁氧基苯基)嗎啉代基、3-(2-戊氧基苯基)吡咯烷基和3-(4-己氧基苯基)哌嗪基等。
在苯環(huán)上可帶有低級烷氧基取代的苯基，可列舉在苯環(huán)上可有1-3個C1-6直鏈或支鏈烷氧基的苯基，如苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-乙氧基苯基、3-乙氧基苯基、4-乙氧基苯基、3-異丙氧基苯基、4-己氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、2，5-二甲氧基苯基和3，4，5-三甲氧基苯基等。
在苯環(huán)上可有選自羥基和苯基-低級烷氧基的取代基的苯基-低級烷基，可列舉苯基-C1-6直鏈或支鏈烷基，在苯環(huán)上可含有1-3個選自羥基和苯基-C1-6直鏈或支鏈烷氧基的取代基，如2-羥基芐基、3-羥基芐基、4-羥基芐基、2-(3-羥苯基)乙基、1-(4-羥苯基)乙基、3-(2-羥苯基)丙基、4-(3-羥基苯基)丁基、5-(2-羥苯基)戊基、6-(3-羥苯基)己基、3，4-二羥基芐基、3，4，5-三羥基芐基、4-芐氧基芐基、2-(3-芐氧基苯基)乙基、1-(2-芐氧基苯基)乙基、3-[2-(2-苯基乙氧基)苯基]丙基、4-[3-(3-苯基丙氧基)苯基]丁基、1，1-二甲基-2-[4-(4-苯基丁氧基)苯基]乙基、5-[2-(5-苯基戊氧基)苯基]戊基和6-[3-(6-苯基己氧基)苯基]己基等。
低級烷硫基取代的低級烷基可列舉C1-6直鏈或支鏈烷硫基取代的C1-6直鏈或支鏈烷基，如甲硫基甲基、2-(甲硫基)乙基、1-(乙硫基)乙基、3-(丙硫基)丙基、4-(正丁硫基)丁基、5-(戊硫基)戊基和6-(己硫基)己基等。
苯基低級烷氧基取代的低級烷基，可列舉苯基-C1-6直鏈或支鏈烷氧基取代的C1-6直鏈或支鏈烷基，如芐氧基甲基、2-(2-苯基乙氧基)乙基、1-(1-苯基乙氧基)乙基、3-(3-苯基丙氧基)丙基、4-(4-苯基丁氧基)丁基、5-(5-苯基戊氧基)戊基、6-(6-苯基己氧基)己基、(2-甲基-3-苯基丙氧基)甲基和(1，1-二甲基-2-苯基乙氧基)甲基等。
低級烷氧羰基-低級烷基可列舉C1-6直鏈或支鏈烷氧羰基-C1-6直鏈或支鏈烷基，如甲氧羰基甲基、3-甲氧羰基丙基、乙氧羰基甲基、4-乙氧羰基丁基、1-乙氧羰基乙基、1-甲氧羰基乙基、6-丙氧羰基己基、5-異丙氧羰基戊基、1，1-二甲基-2-丁氧羰基乙基、2-甲基-3-叔丁氧羰基丙基、2-戊氧羰基乙基和己氧羰基甲基等。
羥基取代的低級烷基可列舉含1-3個羥基作為取代基的C1-6直鏈或支鏈烷基，如羥甲基、2-羥乙基、1-羥乙基、3-羥丙基、2，3-二羥基丙基、4-羥基丁基、1，1-二甲基-2-羥基乙基、5，5，4-三羥基戊基、5-羥基戊基、6-羥基己基、1-羥基異丙基、2-甲基-3-羥基丙基、2，3-二羥基乙基、3，4-二羥基丁基和5，6-二羥基己基等。
可用各種方法制備本發(fā)明的通式(1)和(2)代表的哌嗪衍生物。這些方法的優(yōu)選實例如下所示。
反應(yīng)式-1 (其中R1、R3、R4、R5和R6同上所定義)。
化合物(3)和(4)之間的反應(yīng)按一般的酰胺鍵生成反應(yīng)來進行。酰胺鍵形成反應(yīng)可以用各種已知方法進行，例如(a)混合酸酐法，如包括羧酸(3)與鹵代羧酸烷基酯反應(yīng)，然后將生成的混合酸酐與胺(4)反應(yīng)，(b)活性酯法，如包括將羧酸(3)轉(zhuǎn)化為活性酯(如對硝基苯基酯、琥珀酰亞胺酯或苯并噻唑-1-基酯)，然后活性酯與胺(4)反應(yīng)，(c)碳化二亞胺法，包括羧酸(3)和胺(4)在活化試劑如二環(huán)己基碳化二亞胺、N，N-羰基-二咪唑或類似物存在下縮合，及(d)其它方法。其它方法(d)包括，例如用脫水劑(如醋酸酐)將羧酸(3)轉(zhuǎn)化為酸酐，然后酸酐與胺(4)反應(yīng)的方法，和羧酸(3)與低級醇反應(yīng)，然后生成的酯與胺(4)在高溫高壓下反應(yīng)的方法。還可以使用包括用磷化合物如三苯膦、氯代磷酸二乙酯或類似物將羧酸(3)活化，然后生成物與胺(4)反應(yīng)的方法。還可以使用包括用乙炔化合物如三甲基甲硅烷基乙氧基乙炔或類似物活化羧酸(3)，然后生成物與胺(4)反應(yīng)的方法。
在混合酸酐法(a)中，所用混合酸酐可用一般的Schotten-Bauman反應(yīng)制備。一般酸酐不經(jīng)分離直接與胺(4)反應(yīng)，從而生成了通式(1a)的化合物。Schotten-Baumnn反應(yīng)在堿化合物存在下進行。堿化合物為一般用在Schotten-Baumnn反應(yīng)中的化合物，例如包括有機堿如三乙胺、三甲胺、吡啶、二甲基苯胺、N-甲基嗎啉、4-二甲氨基吡啶、1，5-二氮雜雙環(huán)[4，3，0]壬烯-5(DBN)、1，8-二氮雜雙環(huán)[5，4，0]十一烯-7(DBU)、1，4-二氮雜雙環(huán)[2，2，2]辛烷(DABCO)及類似物，和無機堿如氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鈉及類似物。反應(yīng)在-20℃到100℃，優(yōu)選0-50℃下進行約5分鐘到10小時，優(yōu)選約5分鐘到2小時。生成的混合酸酐與胺(4)的反應(yīng)在-20℃到150℃，優(yōu)選在10-50℃下進行約5分鐘到10小時，優(yōu)選約5分鐘到5小時。混合酸酐法(a)在有適當溶劑或混合溶劑存在下或無任何溶劑存在下進行。該溶劑可為一般用于混合酸酐法中的任何溶劑，例如鹵代烴如二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷等;芳香烴如苯、甲苯、二甲苯等;醚如乙醚、二噁烷、二異丙基醚、四氫呋喃、二甲氧基乙烷等;酯如乙酸甲酯、乙酸乙酯等;非質(zhì)子極性溶劑如1，1，3，3-四甲基脲、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、六甲基磷酸三酰胺和類似物。用于混合酸酐法(a)中的α-鹵代羧酸烷基酯包括，例如氯代甲酸甲酯、溴代甲酸甲酯、氯代甲酸乙酯、溴代甲酸乙酯和氯代甲酸異丁酯。鹵代羧酸烷基酯的用量一般為至少1mol，優(yōu)選1-1.5mol/mol胺(4)。羧酸(3)的用量一般為每mol胺(4)至少1mol，優(yōu)選約1-1.5mol。
活性酯法(b)，例如使用琥珀酰亞胺基酯時，在有或無堿化合物存在下、在對反應(yīng)無不利影響的非質(zhì)子極性溶劑中進行?？上虼朔磻?yīng)系統(tǒng)中加入縮合劑如二環(huán)己基碳化二亞胺、N，N-羰基二咪唑、1-乙基-3-(3'-二甲氨基丙基)碳化二亞胺等。對于堿化合物，可以使用用于Schotten-Baumann反應(yīng)中的任何堿化合物。還可以使用羧酸堿金屬鹽如醋酸鈉、苯甲酸鈉、甲酸鈉、醋酸鉀、苯甲酸鋰、醛酸銫等;堿金屬鹵化物如氟化鉀、氟化銫等;等。溶劑的具體實例為鹵代烴如二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷等;芳烴如苯、甲苯、二甲苯等;醚如乙醚、二噁烷、四氫呋喃、二甲氧基乙烷等;酯如乙酸甲酯、乙酸乙酯等;非質(zhì)子極性溶劑如N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、六甲基磷酸三酰胺等;及其混合溶劑。反應(yīng)在-0-200℃，優(yōu)選在10-150℃下進行，在1小時到3.5天內(nèi)完成。胺(4)與琥珀酰亞胺酯的適宜比例為每摩爾琥珀酰亞胺酯一般用至少1mol胺(4)，優(yōu)選1-2mol/mol。
化合物(1a)還可通過羧酸(3)與胺(4)在磷化合物作為縮合劑存在下反應(yīng)來獲得，磷化合物如為三苯膦-2，2'-二吡啶基二硫化物、氯代磷酸二乙酯、二苯基氧膦基氯、苯基N-苯基磷酰胺氯化物、氰基磷酸二乙酯、二(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酸氯化物等。堿化合物可用廣為人知的堿化合物，如用于Schotten-Baumann反應(yīng)的堿化合物，氫氧化鈉和氫氧化鉀。溶劑可列舉，如用于混合酸酐法(a)中的溶劑、吡啶、丙酮、乙腈及其中兩種或多種溶劑的混合物。反應(yīng)一般在約-20℃到150℃下，優(yōu)選在約0-100℃下進行，一般在約5分鐘到30小時內(nèi)完成。對于縮合劑和羧酸(3)的適當用量，兩者均為每mol胺(4)用至少1mol，優(yōu)選約1-2mol。
化合物(1a)還可通過羧酸(3)與胺(4)在縮合劑存在下反應(yīng)而制得。該反應(yīng)在有或無催化劑存在下在適當溶劑中進行。溶劑可列舉鹵代烴(如二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿和四氯化碳)、乙腈和N，N-二甲基甲酰胺。催化劑可列舉有機堿(如4-二甲氨基吡啶和4-哌啶子基吡啶)、鹽(如對甲苯磺酸吡啶鎓鹽)、樟腦磺酸和氧化汞(Ⅱ)。對于縮合劑可列舉，如乙炔化合物如三甲基甲硅烷基乙氧基乙炔等?？s合劑的用量每mol胺(4)一般為1-10mol，優(yōu)選2-6mol。羧酸(3)的用量每mol胺(4)一般為至少1mol，優(yōu)選約1-2mol。該反應(yīng)一般在約0-150℃下，優(yōu)選在約室溫到100℃下進行。一般在約1-10小時內(nèi)完成。
作為起始物的化合物(3)例如可通過如下反式制備。
反應(yīng)式-2

(其中R1同上所定義;R10a和R10b各自為低級烷基;R3a為低級烷基或苯基-低級烷基;R3b為苯基-低級烷基;R4a為四氫吡喃氧基;R4b為苯基-低級烷氧基;X為鹵原子;R11為苯基-低級烷基;及R12為低級烷基或苯基-低級烷基)。
化合物(5)與化合物(6)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-1中化合物(3)與(4)的反應(yīng)中相同的反應(yīng)條件下進行?；衔?7)轉(zhuǎn)化為化合物(7a)的反應(yīng)在與下述反應(yīng)式-6中化合物(20)轉(zhuǎn)化為化合物(21)的反應(yīng)中相同的反應(yīng)條件下進行。
化合物(7)或(7a)轉(zhuǎn)化成化合物(8)的反應(yīng)是這樣進行的，先在酸存在下在適當溶劑中還原化合物(7)或(7a)，然后將還原產(chǎn)物環(huán)化。用于還原反應(yīng)的溶劑可列舉水、醋酸、低級醇(如甲醇、乙醇和異丙醇)和醚(如四氫呋喃、乙醚、二噁烷和二甘醇二甲醚)。酸可列舉無機酸(如氫氯酸)和有機酸(如醋酸)。還原劑可列舉氫化物還原劑如硼烷-三甲基胺、氰基硼氫化鈉等。對于每摩爾化合物(7)或(7a)，氫化物還原劑的用量為至少1mol，優(yōu)選1-2mol。反應(yīng)一般在0-100℃下，優(yōu)選在約0-70℃下進行，在約1-30小時內(nèi)完成。
接下來的環(huán)化在適當溶劑中進行。該溶劑與用于羧酸(3)的鹵化物與胺(4)的反應(yīng)中的溶劑相同。反應(yīng)一般在室溫到200℃下，優(yōu)選約50-150℃下進行，在約0.5-10小時內(nèi)完成。
化合物(8)與化合物(11)的反應(yīng)在酸存在下在適當溶劑中進行。溶劑可列舉鹵代烴如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳等;醚如乙醚、四氫呋喃、二噁烷、乙二醇單甲醚等;芳烴如苯、甲苯、二甲苯等;酯如乙酸甲酯、乙酸乙酯等;酮如丙酮、甲乙酮等;極性溶劑如乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、六甲基磷酸三酰胺等;及它們的混合溶劑。酸可舉出無機酸(如氫氯酸、硫酸和氫溴酸)和有機酸(如對甲苯磺酸)。對每摩爾化合物(8)，化合物(11)的適當用量一般為至少1mol，優(yōu)選為1-2mol。反應(yīng)一般在0-100℃下，優(yōu)選在約0-70℃下進行，一般在約0.5-10小時內(nèi)完成。
化合物(8)與化合物(9)的反應(yīng)在堿化合物存在下在適當溶劑中進行。溶劑可列舉水;低級醇如甲醇、乙醇、丙醇等;醚如乙醚、四氫呋喃、二噁烷、乙二醇單甲醚等;芳烴如苯、甲苯、二甲苯等;酯如乙酸甲酯、乙酸乙酯等;酮如丙酮、甲乙酮等;極性溶劑如乙腈、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、六甲基磷酸三酰胺等;及它們的混合溶劑。堿化合物可列舉無機堿如氫氧化鈉、氫氧化鉀碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫化鈉等;堿金屬如鈉、鉀等;堿金屬醇化物如乙醇鈉、甲醇鈉等;有機堿如三乙胺、吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基嗎啉、4-甲氨基吡啶、DBN、DBU、DABCO等。對于每摩爾化合物(8)，化合物(9)的用量一般為至少1mol，優(yōu)選1-5mol。反應(yīng)一般在0.5-20小時內(nèi)完成。
化合物(12)與(13)的反應(yīng)在與化合物(8)與(9)的反應(yīng)中相同的條件下進行。
(其中R1、R3、R4和R10a同上所定義)。
化合物(15)轉(zhuǎn)化成化合物(3)的反應(yīng)通過一般水解進行。具體講，水解在酸如無機酸(如硫酸、鹽酸或硝酸)、有機酸(如醋酸或芳香磺酸)等，或堿化合物(如碳酸鈉、碳酸鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋇等存在下，在溶劑中進行，其中溶劑如有水、醇(如甲醇、乙醇或異丙醇)、酮(如丙酮或甲乙酮)、醚(如二噁烷或乙二醇二甲醚)、醋酸或其混合溶劑。反應(yīng)一般在約0-200℃下，優(yōu)選在約室溫到150℃下進行，一般在約0.5-15小時內(nèi)完成。
其中R4和/或R4b為羥基的化合物(1)、(1a)和(10)可通過還原其中R4和/或R4b為苯基-低級烷氧基的化合物(1)、(1a)和(10)來制備。例如將原料化合物在催化劑存在下在適當溶劑中進行催化氫化。溶劑例如可列舉水;醋酸;醇如甲醇、乙醇、異丙醇等;烴如己烷、環(huán)己烷等;醚如二噁烷、四氫呋喃、乙醚、乙二醇二甲醚等;酯如乙酸乙酯、乙酸甲酯等;非質(zhì)子極性溶劑如二甲基甲酰胺等;及它們的混合溶劑。催化劑例如可列舉鈀、鈀黑、鈀碳、鉑、氧化鉑、鉻酸銅和Raney鎳。催化劑的適宜用量一般為起始原料重的約0.02-1倍。反應(yīng)溫度一般為約-20℃到100℃，優(yōu)選約0-80℃;氫氣壓力一般為1-10大氣壓;反應(yīng)一般在約0.5-20小時內(nèi)完成。
其中R4和/或R4b為羥基的化合物(1)、(1a)和(10)可通過水解其中R4和/或R4b為四氫吡喃氧基的化合物(1)、(1a)和(10)來制備。此水解在酸存在下在適當溶劑中或不用任何溶劑來進行?？墒褂萌魏螌Ψ磻?yīng)無不利影響的溶劑，例如可例舉水;鹵代烴如二氯甲烷、氯仿等;低級醇如甲醇、乙醇、異丙醇等;酮如丙酮、甲乙酮等;醚如二噁烷、四氫呋喃、乙二醇單甲醚、乙二醇二甲醚等;脂肪酸如甲酸、乙酸等;及它們的混合溶劑。酸可列舉例如無機酸如氫氯酸、硫酸、氫溴酸等;和有機酸如甲酸、三氟乙酸、乙酸、芳磺酸等。對酸的用量沒有特別限制、可在較寬范圍內(nèi)適當選擇，但較好相對原料為等摩爾到大大過量，優(yōu)選為約10-20mol/mol原料。反應(yīng)一般在約0-200℃下，優(yōu)選在約室溫到150℃下進行有利，一般在約5分鐘到5小時內(nèi)完成。
反應(yīng)式-4
(其中R1、R2、R3和R4同上所定義)。
化合物(16)轉(zhuǎn)化成化合物(1)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-1中化合物(3)與化合物(4)的反應(yīng)中相同的條件下進行。
用作起始物的化合物(16)例如可用下述反應(yīng)式所示方法制備。
反應(yīng)式-5 (其中R1、R2、R3和R4同上所定義;R12為氫原子、低級烷基或含低級烷基的甲硅烷基)。
化合物(17)與(18)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-1中化合物(3)與(4)的反應(yīng)中相同的條件下進行。
其中R12為低級烷基的化合物(19)轉(zhuǎn)化為(16)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-3中化合物(5)轉(zhuǎn)化為(3)的反應(yīng)中相同的條件下進行。另外，當R12為含低級烷基的甲硅烷基時，該反應(yīng)在與R4為四氫吡喃氧基的化合物(1)轉(zhuǎn)化為R4為羥基的化合物(1)的反應(yīng)中相同的條件下進行。
反應(yīng)式-6 (其中R1、R4、R5、R6、R10a和R10b同上所定義)。
化合物(5)與化合物(18)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-1中化合物(3)與(4)的反應(yīng)中相同的條件下進行?；衔?20)轉(zhuǎn)化成化合物(21)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-3中化合物(15)轉(zhuǎn)化為化合物(3)的反應(yīng)中相同的條件下進行。但在此反應(yīng)中，對每摩爾化合物(20)堿化合物的用量優(yōu)選為1mol?；衔?21)與(4)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-1中化合物(3)與(4)的反應(yīng)中相同的條件下進行。
反應(yīng)式-7 (其中R1、R2、R3、R4和R10a同上所定義)。
化合物(17a)與化合物(6a)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-2中化合物(5)與(6)的反應(yīng)中相同的條件下進行?；衔?22)轉(zhuǎn)化為化合物(23)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-3中化合物(15)轉(zhuǎn)化為化合物(3)的反應(yīng)中相同的條件下進行?；衔?22)轉(zhuǎn)化為化合物(1)的反應(yīng)和化合物(23)轉(zhuǎn)化為化合物(1)的反應(yīng)都在反應(yīng)式-2中化合物(7)轉(zhuǎn)化為化合物(8)的反應(yīng)中相同的條件下進行。
反應(yīng)式-8 (其中R7、R8、R9和R10a同上所定義)。
化合物(24)與(25)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-1中化合物(3)與(4)的反應(yīng)中相同的條件下進行?；衔?26)轉(zhuǎn)化為(2)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-2中化合物(7)轉(zhuǎn)化為(8)的反應(yīng)中相同的條件下進行。
反應(yīng)式-9
(其中R7、R8、R9和R10a同上所定義)。
化合物(27)與(25)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-1中化合物(3)與(4)的反應(yīng)中相同的條件下進行。化合物(28)轉(zhuǎn)化為(29)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-3中化合物(15)轉(zhuǎn)化為化合物(3)的反應(yīng)中相同的條件下進行?；衔?29)轉(zhuǎn)化為(2)的反應(yīng)在與反應(yīng)式-1中化合物(3)與(4)的反應(yīng)中相同的條件下進行。
還原R9為苯基-低級烷氧基的化合物(2)可制得R9為羥基的化合物(2)。該還原在與R4為苯基-低級烷氧基的化合物(1)的還原中相同的條件下進行。
其中R2、R5或R6為苯環(huán)上帶有至少一個羥基取代基的苯基-低級烷基的化合物(1)，可通過還原其中R2、R5和R6為苯環(huán)上帶有至少一個苯基-低級烷氧基的苯基-低級烷基的化合物(1)來制備。其中R7為在苯環(huán)上帶有至少一個羥基取代基的苯基-低級烷基，或為羥基取代的低級烷基的化合物(2)，可通過還原其中R7為在苯環(huán)上帶有至少一個苯基-低級烷氧基的苯基-低級烷基，或為苯基-低級烷氧基取代的低級烷基的化合物(2)來制備。在與R4為苯基-低級烷氧基的化合物(1)的還原中相同的條件下進行這些還原。
在式(1)和(2)代表的本發(fā)明化合物中，帶有堿性基團的化合物可容易地與藥理上可接受的酸反應(yīng)制成酸加成鹽。例如可舉出下列酸無機酸如氫氯酸、硫酸、磷酸、氫溴酸等;和有機酸如草酸、醋酸、琥珀酸、丙二酸、甲磺酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸等。
在式(1)和(2)代表的本發(fā)明化合物中，具有酸性基團的化合物可容易地與藥理上可接受的堿化合物反應(yīng)制成鹽。例如可舉出如下堿化合物氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、碳酸鈉、碳酸氫鉀等。
上述反應(yīng)式中得到的目標化合物可用常規(guī)方法容易地從反應(yīng)系統(tǒng)中分離和純化。例如分離方法有溶劑萃取、稀釋、重結(jié)晶、柱層析和制備性薄層層析。
當然，本發(fā)明化合物包括光學(xué)異構(gòu)體和立體異構(gòu)體。
通式(1)和(2)的每種化合物一般以普通藥物制劑形式使用。用常用稀釋劑或賦形劑如填充劑、增量劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、表面活性劑、潤滑劑等制備藥物制劑。根據(jù)治療目的可制備各種形式的藥物制劑，典型劑型包括片劑、丸劑、粉劑、溶液、懸液、乳劑、粒劑、膠囊、栓劑、針劑(如溶液或懸液)等。制備片劑時可使用本領(lǐng)域中已知的各種載體，例如賦形劑有乳糖、白糖、氯化鈉、葡萄糖、脲、淀粉、碳酸鈣、高嶺土、結(jié)晶纖維素、硅酸等;粘合劑有水、乙醇、丙醇、簡單糖漿、葡萄糖溶液、明膠溶液、羧甲基纖維素、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等;崩解劑如干淀粉、藻酸鈉、瓊脂粉、海帶多糖分、碳酸氫鈉、碳酸鈣、聚氧亞乙基脫水山梨糖-脂肪酸酯、月桂基硫酸鈉、硬脂酸單甘油酯、淀粉、乳糖等;崩解抑制劑如白糖、硬脂精、可可脂、氫化油等;吸收促進劑如季銨鹽、月桂基硫酸鈉等;濕潤劑如甘油、淀粉等;吸附劑如淀粉、乳糖、高嶺土、膨潤土、膠態(tài)硅酸等;及潤滑劑如精制滑石、硬脂酸鹽、硼酸粉、聚乙二醇等。
根據(jù)需要，可將片劑制成普通包衣片劑形式，如糖包衣片劑、明膠包衣片劑、腸溶包衣片劑或膜包衣片劑，或呈雙層片劑或多層片劑形式。在制備丸劑時可使用本領(lǐng)域中已知的各種載體，例如賦形劑有葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、硬化植物油、高嶺土、滑石等;粘合劑如粉狀阿拉伯樹膠、粉狀黃蓍膠、明膠、乙醇等;崩解劑有海帶多糖、瓊脂等。在制備栓劑時，可使用各種已知載體，例如聚乙二醇、可可脂、高級醇、高級醇酯、明膠和半合成甘油酯。在制備針劑(溶液、乳液或懸液)時，將溶液和懸液滅菌，并最好使其與血液等滲。在制備溶液、乳液或懸液時，可使用常用于本領(lǐng)域的所有稀釋劑，如水、乙醇，丙二醇，乙氧化的異硬脂醇、多氧基-異硬脂醇和聚氧亞乙基脫水山梨醇-脂肪酸酯。在此情形下，針劑可含有足量的氯化鈉、葡萄糖或甘油以使該針劑等滲，另外還可以含有所有常用助溶劑、緩沖液、光滑劑等。根據(jù)需要，本藥物制劑還可以含有著色劑、防腐劑、香料、香味劑、增甜劑和其它藥物。
對藥物制劑中通式(1)和(2)的化合物的含量沒有特別限制，可在較寬范圍內(nèi)適當選擇，但相對藥物制劑的重量，其含量一般為1-70%(重量)，優(yōu)選為1-30%(重量)。
對此藥物制劑的給藥方法沒有特別限制。這取決于劑型、病人的年齡、性別和其它條件、病人的疾病狀況等。例如，片劑、丸劑、溶液、懸液、乳液、粒劑或膠囊為口服給藥。針劑可單獨或與葡萄糖、氨基酸等一般輔助溶液混合靜脈內(nèi)給藥，或根據(jù)需要通過肌內(nèi)、真皮內(nèi)、皮下或腹膜內(nèi)單獨給藥。栓劑為直腸內(nèi)給藥。
根據(jù)給藥方法、病人的年齡、性別和其它條件、病人的疾病狀態(tài)等適當?shù)剡x擇藥物制劑的劑量，但適宜劑量以活性成份即通式(1)和(2)的化合物的量而言，一般為約0.5-30mg/kg體重/天。在每單位給藥劑型中活性成份的適宜含量為約10-1000mg。
以下參考制劑實施例、參考實施例、實施例和藥理試驗更具體地說明本發(fā)明。
制劑實施例1(3RS，6RS)-3-(3，5-二叔丁基-4-羥基芐基)-1-羥基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮150.0g檸檬酸1.0g乳糖33.5g磷酸二鈣70.0gPluronicF-68(BASF-WyandottCorp.，N.J.，U.S.A制造的聚乙二醇的商標)30.0g月桂基硫酸鈉15.0g
聚乙烯吡咯烷酮15.0gCarbowax1500(UnionCarbideCorp.，N.Y.，U.S.A制造的聚乙二醇的商標)4.5gCarbowax6000(UnionCarbideCorp.，N.Y.，U.S.A制造的聚乙二醇的商標)45.0g玉米淀粉30.0g干月桂基硫酸鈉3.0g干硬脂酸鎂3.0g乙醇足量混合本發(fā)明化合物、檸檬酸、乳糖、磷酸二鈣、PluronicF-68和月桂基硫酸鈉。
將混合物篩過-NO.60的篩，將過篩物用含聚乙烯吡咯烷酮、Carbowax1500和Carbowax6000的乙醇溶液進行濕法制粒。根據(jù)需要加入乙醇，將生成物制成漿狀塊。向此塊中加入玉米淀粉，繼續(xù)混合直到形成大小均一的顆粒。將這些顆粒過-NO.10篩，將過篩后的顆粒置于一盤上，在爐中100℃干燥12-14小時。將干燥顆粒篩過-NO.16篩，向過篩后的顆粒中加入干月桂基硫酸鈉和干硬脂酸鎂。充分混合整個混合物，用壓片機壓縮成所希望的形式，得到的片劑作為包衣片劑的核心部分。
此核心部分用清漆處理，處理后的表面用滑石包衣以防止此表面吸收水分。形成的核部分的表面再用基本包衣物包衣。再用清漆包衣，制得口服片劑需要多次包衣。為了得到具有光滑表面的完全球形的最終片劑，包衣片劑再用基本包衣物和光滑劑包衣。形成的片劑用著色劑包衣片劑，直到表面具有所希望的顏色。包衣片劑干燥后，將其表面拋光，以制得具有均一光澤的片劑。
參考實施例1將240ml7N氫氯酸(乙醇溶液)滴加到240ml含18.46gN-(2-羥基亞氨基-4-甲基戊?；?氨基丙二酸二乙酯和5.49g硼烷-三甲胺的乙醇溶液(用冰冷卻)中。在室溫下攪拌此混合物15小時。將反應(yīng)混合物在室溫下真空蒸餾以除去溶劑。用二氯甲烷溶解殘余物。形成的溶液依次用飽和氯化鈉水溶液和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥，并且進行蒸餾以除去溶劑。將生成的黃色油狀物質(zhì)溶解在120ml甲苯中。將溶液回流1小時，再進行蒸餾除去溶劑。19.02g生成的橙色油狀物用硅膠柱層析純化(洗脫液二氯甲烷/甲醇＝30/1)，得到2.94g橙色油狀物3-乙氧基羰基-1-羥基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮。
1H-NMR(DMSO-d6，250 MHz)δppm0.87(3H，d，J＝6.5Hz)，0.88(3H，d，J＝6.5Hz)，1.20(1.4H，d，J＝7Hz)，1.21(0.6H，d，J＝7Hz)，1.60-1.85(2H，m)，1.85-2.05(1H，m)，4.01(1H，t，J＝6.5Hz)，4.16(2H，q，J＝7Hz)，4.65(0.7H，d，J＝3.5Hz)，4.82(0.3H，s)，8.56(0.7H，d，J＝8Hz)，8.60(0.3H，brs)，10.30(1H，brs)參考例2用冰冷卻下，將7.60g碳酸鉀和6.3ml芐基氯加到100ml含9.57g3-乙氧基羰基-1-羥基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮的無水N，N-二甲基甲酰胺溶液中。室溫下攪拌混合物16小時。反應(yīng)混合物用450ml乙酸乙酯稀釋，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌三次，再用無水硫酸鎂干燥。將形成的溶液蒸餾除去溶劑。靜置殘余物。過濾收集生成的結(jié)晶，用甲醇洗滌，得到4.51g無色柱狀結(jié)晶(3RS，6SR)-3-芐基-1-芐氧基-3-乙氧羰基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.80(3H，d，J＝6.5Hz)，0.81(3H，d，J＝6.5Hz)，1.32(3H，t，J＝＝7Hz)，1.60-1.80(2H，m)，1.80-2.00(1H，m)，3.32，3.65(each 1H，d，J＝14Hz)，3.59(1H，dd，J＝6Hz，7Hz)，4.29(2H，q，J＝7Hz)，4.51，4.80(each 1H，d，J＝10.5Hz)，6.55-6.95(1H，br)，7.06(2H，d，J＝7Hz)，7.20-7.50(8H，m)
參考實施例3將5.3ml 1N氫氧化鈉加到25ml含2.32g(3RS，6SR)-3-芐基-1-芐氧基-3-乙氧羰基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮的乙醇溶液中。在室溫下攪拌混合物1.5小時。用1N鹽酸調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物到pH3。向其中加入80ml乙酸乙酯和80ml水以進行分配。有機層用無水硫酸鎂干燥，然后室溫下真空蒸餾以除去溶劑，得到2.17g淺黃色固體(3RS，6SR)-3-芐基-1-芐氧基-3-羧基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮。
1H-NMR(DMSO-d6，250 MHz)δppm0.70(3H，d，J＝6.5Hz)，0.71(3H，d，J＝6.5Hz)，1.50-1.65(2H，m)，1.65-1.85(1H，m)，3.07，3.53(each 1H，d，J＝13.5Hz)，3.43(1H，t，J＝6Hz)，4.34，4.58(each 1H，d，J＝10.5Hz)，6.94(2H，d，J＝6.5Hz)，7.10-7.45(9H，m)，8.87(1H，brs)用適當?shù)钠鹗嘉镆詤⒖紝嵤├?中相同的方法得到了下述化合物。棕色油狀物(3RS，6SR)-3-羧基-6-異丁基-3-甲基-1-(2-四氫呋喃氧基)哌嗪-2，5-二酮。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.96(3H，d，J＝6Hz)，0.97(3H，d，J＝6Hz)，1.45-2.00(9H，m)，1.78(1.5H，s)，1.83(1.5H，s)，3.55-3.75(1H，m)，3.80-3.95(1H，m)，4.50-4.70(1H，m)，5.05-5.20(1H，m)，6.71(2H，brs)參考實施例4將0.45g水合對甲苯磺酸加到60ml含6.15g3-乙氧基羰基-1-羥基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮和4ml 3，4-二氫-2H-吡喃的無水二氯甲烷溶液中。室溫下攪拌此混合物4小時。反應(yīng)混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用無水硫酸鎂干燥。形成的混合物進行蒸餾以除去溶劑，得到9.67g橙色油狀物3-乙氧羰基-6-異丁基-1-(2-四氫吡喃氧基)哌嗪-2，5-二酮。
1H-NMR(CDCl3，，250 MHz)δppm0.97(3H，t，J＝7Hz)，0.98(3H，t，J＝7Hz)，1.33(3H，t，J＝7Hz)，1.45-1.95(9H，m)，3.55-3.70(1H，m)，3.80-3.95(1H，m)，4.20-4.40(2H，m)，4.5-4.60(1H，m)，4.65-4.80(1H，m)，5.15-5.22(1H，m)，6.72(1H，brs)參考實施例5
將1.04g 60%氫化鈉加到100ml含9.67g3-乙氧羰基-6-異丁基-1-(2-四氫吡喃氧基)哌嗪-2，5-二酮的無水N，N-二甲基亞砜溶液(用冰冷卻)中，并攪拌混合物10分鐘。向其中加入3.5ml碘甲烷。室溫下攪拌混合物5小時。反應(yīng)混合物用冰冷卻，傾入飽和氯化銨水溶液中。用乙酸乙酯萃取，萃取液用飽和氯化鈉水溶液洗三次，用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到8.53g棕色油狀物(3RS，6SR)-3-乙氧羰基-6-異丁基-3-甲基-1-(2-四氫呋喃氧基)哌嗪-2，5-二酮。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.98(3H，d，J＝6.5Hz)，0.99(3H，d，J＝6.5Hz)，1.26(1.5H，t，J＝7Hz)，1.31(1.5H，t，J＝7Hz)，1.45-1.90(9H，m)，1.71(1.5H，s)，1.75(1.5H，s)，3.60-3.70(1H，m)，3.85-3.95(1H，m)，4.25(2H，q，J＝7Hz)，4.50-4.60(1H，m)，5.00-5.20(1H，m)參考實施例6將14.86g二環(huán)己基碳化二亞胺加到200ml含17.07gN-芐氧亮氨酸和9.09gN-羥基琥珀酰亞胺的無水二噁烷溶液中。室溫下攪拌混合物2小時。過濾除去不溶物。向濾液中加入28.94g(3'，5'-二叔丁基)酪氨酸乙酯。室溫下攪拌混合物12小時。用1，000ml乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物。形成的溶液用1N鹽酸、碳酸氫鈉飽和水溶液和氯化鈉飽和水溶液依次洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑。用硅膠柱層析純化殘余物(洗脫液乙酸乙酯/正己烷＝1/6-1/4)，得到34.63g棕色油狀物N-(N-芐氧基亮氨?；?-(3'，5'-二叔丁基)酪氨酸乙酯。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.75-0.95(6H，m)，1.22(1.6H，t，J＝7Hz)，1.26(0.4H，t，J＝7Hz)，1.30-1.50(1H，m)，1.39(14.4H，s)，1.40(3.6H，s)，1.50-1.70(1H，m)，3.01，3.10(each 1H，dd，J＝6Hz，14Hz)，3.35-3.55(1H，m)，4.05-4.25(2H，m)，4.43，4.53(each 0.2H，d，J＝12Hz)，4.61，4.71(each 0.8H，d，J＝12Hz)，4.75-4.95 91H，m)，5.10(0.2H，s)，5.12(0.8，s)，5.59(0.8H，d，J＝4.5Hz)，5.67(0.2H，d，J＝6Hz)，6.74(0.2H，d，J＝8.5Hz)，6.91(1.6H，s)，6.92(0.4H，s)，7.02(0.8H，d，J＝8.5Hz)，7.20-7.45(5H，m)參考實施例7用適當起始物以參考實施例6中相同的方法得到了下列化合物。
N-(N-芐氧基亮氨?；?-(3'，5'-二甲氧基)酪氨酸乙酯，無色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.85，0.87(each 2.4H，d，J＝6.5Hz)，0.86，0.91(each 0.6H，d，J＝6.5Hz)，1.15-1.50(5H，m)，1.50-1.65(1H，m)，3.00-3.20(2H，m)，3.49(1H，dd，J＝5.5Hz，J＝8Hz)，3.82(6H，s)，4.10-4.30(2H，m)，4.46，4.56(eadch 0.2H，d，J＝12Hz)，4.63，4.72(each 0.8H，d，J＝12Hz)，4.91(1H，dt，J＝6Hz，J＝98Hz)，5.46(1H，brs)，6.35(1.6H，s)，6.38(0.4H，s)，6.92(0.2H，d，J＝8Hz)，7.02(0.8H，d，J＝8Hz)，7.15-7.50(5H，m)N-(N-芐氧基亮氨?；?-(3'，5'-二甲基)酪氨酸乙酯，黃色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.85，0.87(each 0.6H，d，J＝6Hz)，0.86，0.89(each 2.4H，d，J＝7Hz)，1.27(3H，t，J＝7Hz)，1.20-1.45(2H，m)，1.55-1.70(1H，m)，2.15(1.2H，s)，2.17(4.8H，s)，2.90-3.15(2H，m)，3.40-3.55(1H，m)，4.10(2H，q，J＝7Hz)，4.64，4.74(each 1H，d，J＝12Hz)，4.86(1H，dt，J＝5.5Hz，J＝8Hz)，5.66(1H，brs)，6.73(1.6H，s)，6.76(0.4H，s)，6.81(0.2H，d，J＝9.5Hz)，7.00(0.8H，d，J＝8Hz)，7.20-7.45(5H，m)參考實施例8在氮氣氛下，將13.2ml三乙胺和6ml氯化三甲基甲硅烷加到11.78g(2'，4'-二甲氧基)苯丙氨酸鹽酸鹽在無水二氯甲烷中的150ml懸液中。將混合物回流1.5小時。另外將9.28g二環(huán)己基碳化二亞胺加到10.68gN-芐氧基亮氨酸和5.18gN-羥基琥珀酰亞胺在無水二噁烷中的100ml溶液中。室溫攪拌此混合物2小時。過濾除去生成的不溶物，室溫下將濾液加入上述回流后的反應(yīng)混合物中。攪拌形成的混合物12小時。用1，200ml乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物。形成的溶液用1N鹽酸、氯化鈉飽和水溶液、碳酸氫鈉飽和水溶液和氯化鈉和水溶液依次洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，真空蒸餾除去溶劑，得到17.40g淺棕色玻璃樣物質(zhì)N-(N-芐氧基亮氨?；?-(2'，4'-二甲氧基)苯丙氨酸。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.82，0.85(each 1.5H，d，J＝6.5Hz)，0.87，0.92(each 1.5H，d，J＝6.5Hz)，1.05-1.30(2H，m)，1.45-1.60(1H，m)，3.05-3.02(1H，m)，3.35-3.55(1H，m)，3.74(3H，s)，3.75(3H，s)，3.90-4.05(0.5H，m)，4.10-4.25(0.5H，m)，4.50-4.80(3H，m)，6.30-6.50(2H，m)，7.01(1H，d，J＝8Hz)，7.15-7.40(5H，m)用適當起始物以參考實施例8中的相同方法得到了下述參考實施例9的化合物。
參考實施例9將64ml 2N氫氧化鈉溶液加到34.63gN-(N-芐氧基亮氨酰)-(3'，5'-二叔丁基)酪氨酸乙酯的乙醇溶液中。在室溫下攪拌此混合物1.5小時。用濃鹽酸調(diào)節(jié)其pH至1。向其中加入500ml水?；旌衔镉靡宜嵋阴ポ腿?次，萃取液用飽和氯化鈉水溶液洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到32.83g棕色油狀物N-(N-芐氧基亮氨酸)-(3'，5'-二叔丁基)酪氨酸。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.82(3H，d，J＝6.5Hz)，0.84(3H，d，J＝6.5Hz)，1.10-1.37(2H，m)，1.39(18H，s)，1.45-1.65(1H，m)，2.99(0.43H，dd，J＝7Hz，J＝14Hz)，3.16(0.43H，dd，J＝5.5Hz，J＝14Hz)，3.04-3.28(0.15H，m)，3.42(0.15H，dd，J＝6Hz，J＝8Hz)，3.51(0.85H，dd，J＝5Hz，J＝9Hz)，4.35，4.42(each 0.15H，d，J＝12Hz)，4.53，4.60(each 0.85H，d，J＝12Hz)，4.70-4.90(1H，m)，5.13(1H，brs)，6.94(2H，s)，6.96(1H，d，J＝9Hz)，7.15-7.45(5H，m)用適當起始物，利用參考實施例9中相同的方法制得了參考實施例8的化合物。
參考實施例10用適當?shù)钠鹗嘉镉门c參考例8和9中相同的方法，得到了下列化合物。
N-(N-芐氧基亮氨酰)-(3'，5'-二甲氧基)酪氨酸，無色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.83(3H，d，J＝6Hz)，0.85(3H，d，J＝6Hz)，1.15-1.45(2H，m)，1.45-1.65(1H，m)，3.04(1H，dd，J＝6.5Hz，J＝14Hz)，3.16(1H，dd，J＝5.5Hz，J＝14Hz)，3.52(1H，dd，J＝5.5Hz，J＝8.5Hz)，3.79(3H，s)，3.80(3H，s)，4.40，4.48(each 0.2H，d，J＝12Hz)，4.75-5.00(1H，m)，6.39(1.6H，s)，6.42(0.4H，s)，6.10-6.90(2H，br)，6.98(0.2H，d，J＝7Hz)，7.08(0.8H，d，J＝7.5Hz)，7.15-7.40(5H，m)N-(N-芐氧基亮氨酰)-(3'5'-二甲基)酪氨酸，白色固體1H-NMR(DMSO-d6，250 MHz)δppm0.80(3H，d，J＝6.5Hz)，0.86(3H，d，J＝6.5Hz)，1.30-1.45(2H，m)，1.50-1.70(1H，m)，2.03(6H，s)，2.77(1H，dd，J-7.5Hz，J＝14Hz)，2.87(1H，dd，J＝5.5Hz，J＝14Hz)，3.83(1H，t，J＝8Hz)，4.44(1H，dd，J＝5Hz，J＝8Hz)，4.80(2H，s)，76.70(2H，s)，7.20-7.40(5H，m)，8.45(1H，brs)(N-芐氧基-DL-色氨酰)-L-絲氨酸，棕色泡沫樣物質(zhì)1H-NMR(DMSO-d6，250 MHz)δppm2.80-3.00(1H，m)，3.00-3.15(1H，m)，3.45-3.65(1H，m)，3.65-3.85(1H，m)，3.90-4.05(1H，m)，4.30-4.45(1H，m)，4.67，4.73(1H，d，J＝11Hz)，6.97(1H，t，J＝7.5Hz)，7.07(1H，t，J＝7Hz)，7.17(1H，d，J＝7Hz)，7.29(5H，s)，7.34(1H，d，J＝8Hz)，7.55(1H，d，J＝8Hz)，8.21(1H，d，J＝8Hz)，10.87(1H，brs)
參考實施例11將26.82g二環(huán)己基碳化二亞胺加到含34.47g(3'，4'，5'-三甲氧基)苯丙氨酸甲酯、18.87g2-羥亞氨基-4-甲基戊酸和14.96gN-羥基琥珀酰亞胺的1升無水二噁烷溶液中。室溫下攪拌混合物18小時，過濾，濾液進行蒸餾除去溶劑。用硅膠柱層析純化殘余物(洗脫液乙酸乙酯/正己烷＝1/2)，得到42.70g白色粉末N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊?；?-(3'，4'，5'-三甲氧基)苯丙氨酸甲酯。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.90(6H，d，J＝6.5Hz)，1.90-2.11(1H，m)，2.52(2H，d，J＝7.5Hz)，3.02-3.18(2H，m)，3.74(3H，s)，3.81(6H，s)，3.82(3H，s)，4.91(1H，dt，J＝6Hz，J＝8.5Hz)，6.32(2H，s)，7.17(1H，d，J＝8.5Hz)，7.83(1H，brs)參考實施例12用適當?shù)钠鹗嘉?，用與參考例11中相同的方法，得到了下列化合物。
N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊?；?-(3'，5'-二叔丁基)酪氨酸乙酯，白色粉末
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.90(6H，d，J＝6.5Hz)，1.21(3H，t，J＝7Hz)，1.28(18H，s)，1.80-2.15(1H，m)，2.52(2H，d，J＝7.5Hz)，3.00(1H，dd，J＝6Hz，J＝14Hz)，3.07(1H，dd，J＝6Hz，J＝14Hz)，4.00-4.23(2H，m)，4.82(1H，dt，J＝6Hz，J＝8Hz)，5.10(1H，s)，6.89(2H，s)，7.15(1H，brd，J＝8.5Hz)，7.56(1H，brs)N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊?；?-2-苯丙氨酸甲酯，無色針晶，熔點71-73℃N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊?；?-O-芐基-L-酪氨酸甲酯，無色針晶，熔點108-110℃N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊?；?-(3'，5'-二氯)-L-酪氨酸乙酯，白色固體1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.91(6H，d，J＝6.5Hz)，1.27(3H，t，J＝7Hz)，1.90-2.10(1H，m)，2.52(2H，d，J＝7.5Hz)，2.98(1H，dd，J＝6Hz，J＝14Hz)，3.08(1H，dd，J＝6Hz，J＝14Hz)，4.20，4.21(each 1H，q，J＝7Hz)，4.81(1H，dt，J＝6Hz，J＝8Hz)，5.86(1H，s)，7.03(2H，s)，7.26(1H，d，J＝8Hz)，8.24(1H，brs)
N-芐基-N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊?；?-L-組氨酸甲酯，白色固體1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.86(3H，d，J＝6.5Hz)，0.88(3H，d，J＝6.5Hz)，1.88-2.10(1H，m)，2.49(2H，d，J＝7.5Hz)，3.09(1H，dd，J＝7.5Hz，J＝14.5Hz)，3.17(1H，dd，J＝6Hz，J＝14.5Hz)，3.62(3H，s)，4.87(1H，dt，J＝7Hz，J＝8Hz)，5.03(2H，s)，6.77(1H，s)，7.10-7.23(2H，m)，7.30-7.46(3H，m)，7.44(1H，s)，8.16(1H，d，J＝8.5Hz)，23.66(1H，brs)參考實施例13將180ml 1N氫氧化鈉加到500ml含31.98gN-(2-羥亞氨基-4-甲基戊?；?-(3'，4'，5'-三甲氧基)苯丙氨酸甲基的乙醇溶液中。室溫攪拌混合物13小時。對反應(yīng)混合物進行蒸餾除去乙醇。殘余物用鹽酸酸化，再用乙酸乙酯萃取。萃取液用氯化鈉飽和水溶液洗滌，用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到30.93g白色粉末N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊酰基)-(3'，4'，5'-三甲氧基)苯丙氨酸。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.85(3H，d，J＝6.5Hz)，0.8(3H，d，J＝6.5Hz)，1.88-2.07(1H，m)，2.48(1H，dd，J＝12.5Hz，J＝19.5Hz)，2.50(1H，dd，J＝12.5Hz，J＝19.5Hz)，3.05(1H，dd，J＝7.5Hz，J＝14Hz)，3.20(1H，dd，J＝5Hz，J＝14Hz)，3.77(6H，s)，3.80(3H，s)，4.92(1H，dt，J＝6Hz，J＝8.5Hz)，6.38(2H，s)，7.28(1H，d，J＝8.5Hz)參考實施例14用適當?shù)钠鹗嘉锖团c參考實施例13中相同的方法，得到了下列化合物。
N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊?；?-L-苯丙氨酸，白色粉末，熔點120-122℃。
N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊酰基)-O-芐基-L-酪氨酸，無色針晶，熔點147-148℃N-芐基-N-(2-羥亞氨基-4-甲基戊?；?-L-組氨酸，白色粉末1H-NMR(DMSO-d6，250 MHz)δppm0.82(6H，d，J＝6.5Hz)，1.80-2.00(1H，m)，2.36(2H，d，J＝7.5Hz)，2.94(1H，dd，J＝5Hz，J＝15Hz)，3.03(1H，dd，J＝7Hz，J＝15Hz)，4.56(1H，dt，J＝6Hz，J＝8Hz)，5.19(2H，s)，7.03(1H，s)，7.20-7.30(2H，m)，7.30-7.45(3H，m)，7.95(1H，s)，8.22(1H，d，J＝8Hz)，11.81(1H，s)參考實施例15將22.90g二環(huán)己基碳化二亞胺加到300ml含26.39gN-芐氧基亮氨酸和13.35gN-羥基琥珀酰亞胺的無水二噁烷溶液中。在室溫下攪拌混合物2小時，過濾反應(yīng)混合物除去不溶物，得到一無色溶液。另外，將20ml三乙胺加到300ml含28.57g氨基丙二酸二乙酯鹽酸鹽的無水二噁烷懸浮液中。此混合物用超聲波處理1小時。將上述無色溶液加入其中。室溫下攪拌16小時，再在熱浴溫度100℃下攪拌3.5小時。蒸餾反應(yīng)混合物以除去溶劑。將殘余物溶解在1，000ml乙酸乙酯中。此溶液用1N鹽酸、碳酸氫鈉飽和水溶液和氯化鈉飽和水溶液依次洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到39.22gN-(N-芐氧基亮氨酰)氨基丙二酸二乙酯，黃色油狀物。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.88(3H，d，J＝6.5Hz)，0.91(3H，d，J＝6.5Hz)，1.30(6H，t，J＝7Hz)，1.35-1.55(2H，m)，1.60-1.80(1H，m)，3.57(1H，dt，J＝5.5Hz，J＝8.5Hz)，4.20-4.40(4H，m)，4.73，4.82(each 1H，d，J＝12Hz)，5.21(1H，d，J＝7Hz)，5.69(1H，d，J＝5Hz)，7.25-7.40(5H，m)，7.52(1H，d，J＝7Hz)
參考實施例16用冰冷卻下，將90ml1N氫氧化鈉加到180ml含35.28gN-(N-芐氧基亮氨酰)氨基丙二酸二乙酯的乙醇溶液中。冰冷卻下用600ml水稀釋此混合物，形成的混合物用乙醚洗滌(500ml×2)。水層用濃鹽酸調(diào)pH至1，用冰冷的乙酸乙酯萃取(500ml×2)。萃取液用氯化鈉飽和水溶液洗兩次，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到28.72gN-(N-芐氧基亮氨酰)氨基丙甲二酸，白色固體。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.89(3H，d，J＝6Hz)，0.91(3H，d，J＝6Hz)，1.32(3H，t，J＝7Hz)，1.30-1.55(2H，m)，1.55-1.80(1H，m)，3.61(1H，dd，J＝6Hz，J＝8.5Hz)，4.31(2H，q，J＝7Hz)，4.77，4.80(each 1H，d，J＝12Hz)，5.17(0.5H，d，J＝6.5Hz)，5.19(0.5H，d，J＝5Hz)，5.25(2H，brs)，7.25-7.45(5H，m)，7.71(1H，d，J＝6.5Hz)參考實施例17將1.03g二環(huán)己基碳化二亞胺加到30ml含1.83gN-(N-芐氧基亮氨酰)氨基丙二酸乙酯、0.58gN-羥基琥珀酰亞胺和1.3ml(3-甲氧芐基)胺的無水二噁烷溶液中。室溫下攪拌混合物2小時。過濾反應(yīng)混合物除去不溶物，濾液用100ml乙酸乙酯稀釋。形成的溶液用1N鹽酸、碳酸氫鈉飽和水溶液和氯化鈉飽和水溶液依次洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑。生成的黃色油狀物1.49g用硅膠柱層析純化(洗脫液乙酸乙酯/正己烷＝1/2)，得到0.96gN-(N-芐氧基亮氨酰)-α-[N-(3-甲氧基芐基)氨基甲?；鵠甘氨酸乙酯，無色油狀物。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.85(1.5H，d，J＝6.5Hz)，0.87(1.5H，d，J＝6.5Hz)，0.88(1.5H，d，J＝6.5Hz)，0.90(1.5H，d，J＝6.5Hz)，1.26(1.5H，t，J＝7Hz)，1.27(1.5H，t，J＝7Hz)，1.30-1.55(2H，m)，1.55-1.75(1H，m)，3.56(1H，dt，J＝6Hz，J＝8Hz)，3.78(3H，s)，4.15-4.35(2H，m)，4.35-4.55(2H，m)，4.70，4.76(each 0.5H，d，J＝12Hz)，4.72，4.78(each 0.5H，d，J＝12Hz)，5.13(0.5H，d，J＝7Hz)，5.14(0.5H，d，J＝7Hz)，6.75-7.00(4H，m)，7.21(1H，d，J＝7.5Hz)，7.30-7.50(5H，m)，7.62(0.5H，d，J＝7Hz)，7.75(0.5H，d，J＝7Hz)參考實施例18
用適當?shù)钠鹗嘉镉脜⒖紝嵤├?7中相同的方法，得到下列化合物。
N-(N-芐氧基亮氨酰)-α-[N-(2，4-二甲氧基芐基)氨基甲?；鵠甘氨酸乙酯，白色固體1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.85(1.5H，d，J＝6.5Hz)，0.86(1.5H，d，J＝6.5Hz)，0.88(1.5H，d，J＝6.5Hz)，0.89(1.5H，d，J＝6.5Hz)，1.21(1.5H，t，J＝7Hz)，1.22(1.5H，t，J＝7Hz)，1.30-1.55(2H，m)，1.55-1.80(1H，m)，3.54(1H，dt，J＝6Hz，J＝8Hz)，3.79(3H，s)，3.83(3H，s)，4.20(1H，q，J＝7Hz)，4.22(1H，q，J＝7Hz)，4.38(1H，d，J＝6Hz)，4.40(1H，d，J＝6Hz)，4.70，4.77(each 0.5H，d，J＝12Hz)，4.71，4.78(each 0.5H，d，J＝12Hz)，5.04(0.5H，d，J＝7Hz)，5.06(0.5H，d，J＝7Hz)，6.41(0.5H，dd，J＝2.5Hz，J＝8Hz)，6.42(0.5H，dd，J＝2.5Hz，J＝8Hz)，6.45(1H，d，J＝2.5Hz)，6.88(1H，brt，J＝8Hz)，7.14(1H，d，J＝8Hz)，7.25-7.45(5H，m)，7.59(0.5H，d，J＝7Hz)，7.72(0.5H，d，J＝7Hz)
N-(N-芐氧基亮氨酰)-α-[N-(3，5-二叔丁基-4-羥基芐基)氨基甲?；鵠甘氨酸乙酯，棕色油狀物。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.87(3H，d，J＝6.5Hz)，0.89(3H，d，J＝6.5Hz)，1.23(2H，J＝7Hz)，1.20-1.55(2H，m)，1.42(18H，s)，1.55-1.75(1H，m)，3.40-3.65(1H，m)，4.20-4.50(4H，m)，4.65-4.80(2H，m)，5.09(0.5H，d，J＝7Hz)，5.10(0.5H，d，J＝7Hz)，5.20(1H，s)，5.62-5.78(1H，br)，6.63(1H，brt，J＝5Hz)，7.05(2H，s)，7.30-7.45(5H，m)，7.58(0.5H，d，J＝7Hz)，7.78(0.5H，d，J＝7Hz)N-(N-芐氧基亮氨酰)-α-[4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基羰基]甘氨酸乙酯，無色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.87(3H，d，J＝7Hz)，0.90(3H，d，J＝7Hz)，1.27(3H，t，J＝7Hz)，1.30-1.55(2H，m)，1.55-1.80(1H，m)，3.00-3.25(4H，m)，3.45-3.65(1H，m)，3.75-4.10(4H，m)，3.89(3H，s)，4.23(2H，q，J＝7Hz)，4.77(0.8H，dd，J＝12Hz，J＝19.5Hz)，4.78(1.2H，dd，J＝12Hz，J＝19.5Hz)，5.66(1H，d，J＝7.5Hz)，5.71(0.4H，d，J＝5Hz)，5.78(0.6H，d，J＝6.5Hz)，6.85-7.15(4H，m)，7.30-7.50(5H，m)，7.66(0.6H，d，J＝7.5Hz)，7.81(0.4H，d，J＝7.5Hz)參考實施例19用冰冷卻下，將2.5ml1N氫氧化鈉加到20ml含0.96gN-(N-芐氧基亮氨酰)-α-[N-(3-甲氧芐基)氨基甲?；鵠甘氨酸乙酯的乙醇溶液中。在室溫下攪拌混合物4小時。用70ml水稀釋反應(yīng)混合物。形成的溶液用濃鹽酸調(diào)pH為1，再用乙酸乙酯萃取。萃取液用氯化鈉飽和水溶液洗2次，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到了1.03gN-(N-芐氧亮氨酸)-α-[N-(3-甲氧基芐基)氨基甲?；鵠甘氨酸，白色固體。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.84(3H，d，J＝6.5Hz)，0.89(3H，d，J＝6.5Hz)，1.25-1.50(2H，m)，1.50-1.70(1H，m)，3.50-3.70(1H，m)，3.78(3H，s)，4.10-4.22(0.8H，m)，4.35(1.2H，dd，J＝6Hz，J＝12Hz)，4.56(0.8H，s)，4.60(1.2H，s)，5.08-5.13(0.4H，m)，5.14-5.23(0.6H，m)，6.70-6.90(2H，m)，7.15-7.40(6H，m)，7.63(1H，brd，J＝6Hz)
參考實施例20用適當?shù)钠鹗嘉?，用參考實施?9中相同的方法，得到了下列化合物。
N-(N-芐氧基亮氨酰)-2-[N-(2，4-二甲氧基芐基)氨基甲?；鵠甘氨酸，淺黃色油狀物，1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.80-0.95(6H，m)，1.25-1.50(2H，m)，1.50-1.75(1H，m)，3.52(0.5H，d，J＝8Hz)，3.63(0.5H，dd，J＝6Hz，J＝8.5Hz)，3.76(1.5H，s)，3.77(1.5H，s)，3.78(1.5H，s)，3.79(1.5H，s)，4.31(1H，d，J＝5.5Hz)，4.35(1H，d，J＝5.5Hz)，4.57，4.63(each 1H，d，J＝12.5Hz)，5.02(0.5H，d，J＝6.5Hz)，5.10(0.5H，d，J＝6.5Hz)，5.10-6.20(1H，br)，6.41(1H，dd，J＝1.5Hz，J＝8Hz)，6.42(1H，d，J＝1.5Hz)，7.10(0.5H，d，J＝8Hz)，7.12(0.5H，d，J＝8Hz)，7.20-7.40(5.5H，m)，7.52(0.5H，d，J＝6.5Hz)N-(N-芐氧基亮氨酰)-α-[N-(3，5-二叔丁基-4-羥基芐基)氨基甲?；鵠甘氨酸，棕色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.80-0.95(6H，m)，1.30-1.50(2H，m)，1.41(18H，s)，1.55-1.70(1H，m)，3.90-4.05(1H，m)，4.25-4.40(2H，m)，4.45-4.60(2H，m)，5.08(0.5H，d，J＝6.5Hz)，5.13(0.5H，d，J＝6.5Hz)，5.20(1H，brs)，6.61(0.5H，brt，J＝6.5Hz)，6.95-7.10(2H，m)，7.14(0.5H，brt，J＝6.5Hz)，7.20-7.40(5H，m)，7.71(1H，brd，J＝8.5Hz)N-(N-芐氧基亮氨酸)-α-[4-(2-甲氧苯基)-1-哌嗪基羰基]甘氨酸，黃色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.85(3H，d，J＝6.5Hz)，0.88(3H，d，J＝6.5Hz)，1.35-1.55(2H，m)，1.55＝1.75(1H，m)，2.95-3.25(4H，m)，3.60(1H，dd，J＝5.5Hz，J＝8.5Hz)，3.75-3.90(4H，m)，3.86(3H，s)，4.71(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝2Hz)，4.78(1H，dd，J＝3.5Hz，J＝12Hz)，5.59(0.5H，d，J＝7.5Hz)，5.63(0.5H，d，J＝12Hz)，5.59(0.5H，d，J＝7.5Hz)，5.63(0.5H，d，J＝7.5Hz)，5.69(2H，brs)，6.85-6.95(3H，m)，6.95-7.10(1H，m)，7.25-7.45(5H，m)，8.00(0.5H，d，J＝7.5Hz)，8.06(0.5H，d，J＝7.5Hz)參考實施例21用冰冷卻下，將8.68g二環(huán)己基碳化二亞胺加到200ml含8.73g3-(3-吲哚基)-2-羥基亞氨基丙酸和4.83gN-羥基琥珀酰亞胺的無水二噁烷溶液中。在室溫下攪拌混合物2小時。過濾反應(yīng)混合物以除去不溶物，得到一棕色溶液。另外，將5.6ml三乙胺加到70ml含7.27gL-亮氨酸甲酯鹽酸鹽的無水二噁烷懸液中，室溫攪拌此混合物2小時。向其中加入上述棕色溶液。攪拌混合物16小時。用700ml乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，形成的溶液用1N鹽酸、氯化鈉飽和水溶液和碳酸氫鈉飽和水溶液依次洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到13.81gN-[2-羥基亞氨基-3-(3-吲哚基)丙?；鵠-L-亮氨酸甲酯，棕色油狀物。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.87(3H，d，J＝6Hz)，0.89(3H，d，J＝6Hz)，1.45-1.75(3H，m)，3.70(3H，s)，4.08(2H，s)，4.65(1H，dt，J＝5.5Hz，J＝8.5Hz)，6.96(1H，d，J＝2.5Hz)，7.09(1H，d，J＝7Hz)，7.15(1H，d，J＝7Hz)，7.26(1H，d，J＝7Hz)，7.28(1H，d，J＝7Hz)，7.78(1H，d，J＝7Hz)，7.93(1H，brs)，9.29(1H，s)參考實施例22用適當?shù)钠鹗嘉?，用與參考實施例21中相同的方法，制得下列化合物。
N-[2-羥亞氨基-3-(3-吲哚基)丙酰基]-L-苯丙氨酸甲酯，棕色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm3.01(1H，dd，J＝6Hz，J＝14Hz)，3.09(1H，dd，J＝6Hz，J＝14Hz)，3.65(3H，s)，4.04，4.11(each1H，d，J＝14Hz)，4.87(1H，dt，J＝6Hz，J＝8Hz)，6.85-7.00(2H，m)，7.04(1H，d，J＝2.5Hz)，7.05-7.25(6H，m)，7.30(1H，d，J＝7.5Hz)，7.78(1H，d，J＝7.5Hz)，8.00(1H，brs)，8.56(1H，brs)N-[2-羥基亞氨基-3-(3-吲哚基)丙?；鵠-L-甲硫氨酸甲酯，棕色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm1.75-2.05(1H，m)，1.98(3H，s)，2.05-2.20(1H，m)，2.40(2H，t，J＝7Hz)，3.70(3H，s)，4.08(2H，s)，4.74(1H，dt，J＝5.5Hz，8Hz)，7.02(1H，d，J＝2.5Hz)，7.08(1H，t，J＝8Hz)，7.15(1H，t，J＝8Hz)，7.26(1H，d，J＝8Hz)，7.37(1H，d，J＝8Hz)，7.78(1H，d，J＝8Hz)，8.03(1H，brs)，9.24(1H，brs)O-芐基-N-[2-羥基亞氨基-3-(3-吲哚基)丙酰基]-L-絲氨酸甲酯，淺黃色泡沫樣物質(zhì)1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm3.60(1H，dd，J＝3.5Hz，J＝9.5Hz)，3.68(3H，3.60(1H，dd，J＝3.5Hz，J＝9.5Hz)，4.06(2H，brs)，4.36，4.45(each 1H，d，J＝12Hz)，4.76(1H，dt，J＝3.5Hz，8.5Hz)，6.99(1H，s)，7.05-7.35(7H，m)，7.63(1H，d，J＝8Hz)，7.78(1H，d，J＝7.5Hz)，7.90(1H，brs)，8.89(1H，brs)N-[2-羥基亞氨基-3-(3-吲哚基)丙酰基]氨基丙二酸二乙酯，棕色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm1.24(6H，t，J＝7Hz)，4.04(2H，s)，4.10-4.35(4H，m)，5.18(1H，d，J＝7Hz)，6.98(1H，d，J＝2.5Hz)，7.08(1H，t，J＝7Hz)，7.14(1H，t，J＝7Hz)，7.24(1H，d，J＝7Hz)，7.77(1H，d，J＝7Hz)，7.79(1H，d，J＝7Hz)，8.05(1H，brs)，9.30(1H，brs)N-[2-羥基亞氨基-3-(3-吲哚基)丙酰基]-L-天冬酰酸二乙酯，棕色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm1.19(3H，t，J＝7Hz)，1.20(3H，t，J＝7Hz)，2.80(1H，dd，J＝5Hz，J＝17Hz)，2.99(1H，dd，J＝5Hz，J＝17Hz)，4.07(2H，s)，4.17(2H，q，J＝7Hz)，4.18(2H，q，J＝7Hz)，4.87(1H，dt，J＝5Hz，J＝8.5Hz)，7.07(1H，d，J＝2.5Hz)，7.12(1H，t，J＝7.5Hz)，7.15(1H，t，J＝7Hz)，7.28(1H，d，J＝7Hz)，7.67(1H，d，J＝8.5Hz)，7.79(1H，d，J＝7.5Hz)，8.03(1H，brs)，8.58(1H，s)O-芐基-N-[2-羥基亞氨基-3-(3-吲哚基)丙酰基]-L-酪氨酸甲酯，棕色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm2.92(1H，dd，J＝6Hz，J＝14Hz)，3.02(1H，dd，J＝6Hz，J＝14Hz)，3.62(3H，s)，4.10，4.13(each1H，s)，4.81(1H，dd，J＝6Hz，J＝14Hz)，4.88(2H，s)，6.66，6.78(each 2H，d，J＝8.5Hz)，6.96(1H，d，J＝2Hz)，7.09(1H，t，J＝7.5Hz)，7.15(1H，t，J＝7.5Hz)，7.24(1H，d，J＝7Hz)，7.25-7.45(5H，m)，7.78(1H，d，J＝7Hz)，8.06(1H，brs)N-[2-羥基亞氨基-3-(3-吲哚基)丙?；鵠-L-脯氨酸甲酯，棕色油狀物1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm1.30-1.55(0.5H，m)，1.55-1.95(3H，m)，1.95-2.10(0.5H，m)，3.20-3.45(2H，m)，3.67(3H，s)，4.00，4.13(each 0.7H，d，J＝14.5Hz)，4.18，4.23(each 0.3H，d，J＝8Hz)，4.40(0.7H，dd，J＝5.5Hz，8.5Hz)，4.49(0.3H，brd，J＝4.5Hz)，7.00-7.20(3H，m)，7.20-7.40(1H，m)，7.70(1H，d，J＝7Hz)，8.43(1H，brs)，9.47(1H，s)參考實施例23在冰冷卻下，將1.24g二環(huán)己基碳化二亞胺加到30ml含1.77gN-芐氧基-DL-色氨酸和0.70gN-羥基琥珀酰亞胺的無水二噁烷溶液中。室溫下攪拌混合物2小時。過濾反應(yīng)混合物以除去不溶物，從而得到一淺棕色溶液。另外，將0.8ml三乙胺加到20ml含0.89gL-絲氨酸甲酯鹽酸鹽的無水二噁烷溶液中。室溫下攪拌混合物2小時，向其中加入上述淺棕色溶液。形成的混合物在室溫下攪拌66小時。用200ml乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物。形成的溶液用1N鹽酸和氯化鈉飽和水溶液洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到2.07g(N-芐氧基-DL-色氨酰)-L-絲氨酸甲酯，棕色油狀物。
1H-NMR(DMSO-d6，250 MHz)δppm2.70-2.87(1H，m)，2.97(1H，dd，J＝6Hz，J＝14.5Hz)，3.45-3.80(2H，m)，3.60，3.61(each1.5H，s)，3.80-3.95(1H，m)，4.30-4.55(1H，m)，4.62(2H，s)，5.08(1H，dd，J＝5.5Hz，J＝10.5Hz)，6.49(1H，d，J＝7Hz)，6.96(1H，t，J＝7.5Hz)，7.06(1H，t，J＝7.5Hz)，7.13(1H，s)，7.27(5H，s)，7.32(1H，d，J＝7.5Hz)，7.51(1H，d，J＝7.5Hz)，8.15，8.22(each 0.5H，d，J＝8Hz)，10.83(1H，brs)實施例1將1.09g二環(huán)己基碳化二亞胺加到含2.17g(3RS，6SR)-3-芐基-1-芐氧基-3-羧基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮和0.63gN-羥基琥珀酰亞胺的25ml無水二噁烷溶液中。在室溫攪拌此混合物2小時。向其中加入0.80g2-氨基苯并噻唑。室溫下攪拌此混合物23小時。用200ml乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物。形成的溶液用碳酸氫鈉飽和水溶液和氯化鈉飽和水溶液洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑。殘余物用乙酸乙酯重結(jié)晶，得到2.77g(3RS，6SR)-3-(苯并噻唑-2-基)氨基甲?；?3-芐基-1-芐氧基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮，白色固體。
1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.75(3H，d，J＝6Hz)，0.76(3H，d，J＝6Hz)，1.50-1.85(3H，m)，3.26，3.64(each 1H，d，J＝13.5Hz)，3.51(1H，t，J＝6Hz)，4.49，4.81(each 1H，d，J＝10Hz)，6.95(1H，brs)，7.10-7.20(2H，m)，7.25-7.40(9H，m)，7.48(1H，t，J＝8Hz)，7.85(2H，t，J＝8Hz)用適當起始物，用實施例1中相同的方法制備了下述實施例27-29和31-39的化合物。
實施例2將0.80g10%鈀-碳加到30ml含1.56g(3RS，6SR)-3-(苯并噻唑-2-基)氨基甲?；?3-芐基-1-芐氧基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮的二噁烷溶液中。在氫氣流中于室溫下攪拌混合物4小時。過濾反應(yīng)混合物除去催化劑。濾液進行蒸餾除去溶劑。生成的淺棕色油狀物用二氯甲烷重結(jié)晶，得到0.56g(3RS，6SR)-3-(苯并噻唑-2-基)氨基甲酰基-3-芐基-1-羥基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮，白色固體，熔點222-225℃(分解)。
用適當?shù)钠鹗嘉锖团c實施例2中相同的方法，得到了下述實施例9-26，28-29，33，37-39，47-62及64-65的化合物。
實施例3將3.32g(3RS，6SR)-1-(2-四氫吡喃氧基)-6-異丁基-3-N-(3-甲氧基芐基)氨基甲?；?3-甲基哌嗪-2，5-二酮溶解在20ml 1N氫氯酸(乙醇溶液)中。攪拌此溶液5分鐘，再蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入30ml1N氫氧化鈉水溶液。用二氯甲烷(30ml×2)和乙醚(30ml)洗滌此混合物，水層用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH為2-3，用乙酸乙酯萃取(30ml×2)。萃取液用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，殘余物用乙醚重結(jié)晶，得到1.26g(3RS，6SR)-1-羥基-6-異丁基-3-[N-(3-甲氧基芐基)]氨基甲酰基-3-甲基哌嗪-2，5-二酮，淺棕色固體，熔點151.5-153.5℃。
實施例4將13.21g二環(huán)己基碳化二亞胺加到含32.83gN-(N-芐氧基亮氨酰)-(3'，5'-二叔丁基)酪氨酸和7.71gN-羥基琥珀酰亞胺的500ml無水二噁烷溶液中。室溫下攪拌3天，然后保持120℃計1.5小時。讓反應(yīng)混合物冷卻。過濾除去不溶物，減壓濃縮濾液至200ml。用1，000ml乙酸乙酯稀釋濃縮液，形成的溶液用1N鹽酸、碳酸氫鈉飽和水溶液和氯化鈉飽和水溶液洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，減壓蒸餾除去溶劑。殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液乙酸乙酯/正己烷＝1/2)，得到11.54g化合物(A)和5.42g化合物(B)。
化合物(A)(3RS，6RS)-1-芐氧基-3-(3，5-二叔丁基-4-羥基芐基)-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮熔點198.5-200.5℃(分解)(從乙酸乙酯中重結(jié)晶)無色針狀結(jié)晶化合物(B)(3RS，6SR)-1-芐氧基-3-(3，5-二叔丁基-4-羥基芐基)-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮淺黃色固體1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.86(3H，d，J＝6Hz)，0.88(3H，d，J＝6Hz)，1.43(18H，s)，1.60-1.95(3H，m)，2.74(1H，dd，J＝9.5Hz，J＝14Hz)，3.44(1H，dd，J＝3.5Hz，J＝14Hz)，3.77(1H，t，J＝6Hz)，4.15(1H，dd，J＝3.5Hz，J＝9.5Hz)，4.82，4.97(each 1H，d，J＝10.5Hz)，5.21(1H，s)，5.67(1H，brs)，7.01(2H，s)，7.37(5H，s)實施例5將0.41g二環(huán)己基碳化二亞胺加到含0.91gN-(N-芐氧基亮氨酰)-α-[N-(3-甲氧芐基)]氨基甲酰基甘氨酸和0.23gN-羥基琥珀酰亞胺的20ml無水二噁烷溶液中。在室溫下攪拌此混合物16小時。過濾反應(yīng)混合物除去不溶物。用50ml乙酸乙酯稀釋濾液。形成的溶液用1N鹽酸和碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到0.81g1-芐氧基-6-異丁基-3-[N-(3-甲氧基芐基)]氨基甲?；哙?2，5-二酮的順反混合物。
淺棕色固體1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.85(1.5H，d，J＝6.5Hz)，0.86(1.5H，d，J＝6.5Hz)，0.92(3H，d，J＝6Hz)，1.60-2.00(3H，m)，3.78(1.5H，s)，3.80(1.5H，s)，4.00(1H，t，J＝6Hz)，4.43(1H，d，J＝6Hz)，4.46(0.5H，d，J＝6Hz)，4.53(0.5H，d，J＝6Hz)，4.54(0.5H，s-like)，4.62(0.5H，d，J＝2.5Hz)，4.88，4.99(each 0.5H，d，J＝10.5Hz)，4.95，5.01(each 0.5H，d，J＝10.5Hz)，6.46(0.5H，brs)，6.90(0.5H，brs)，6.70-7.00(3H，m)，7.15-7.28(1H，m)，7.37(2.5H，s)，7.15-7.28(1H，m)，7.37(2.5H，s)，7.40(2.5H，s)，7.54(0.5H，brt，J＝6Hz)，8.53(0.5H，brt，J＝6Hz)實施例6
將7.00gN，N'-羰基二咪唑加到含17.40gN-(N-芐氧基亮氨酰)-(2'，4'-二甲氧基)苯丙氨酸的200ml無水二噁烷溶液中。室溫下攪拌混合物16小時。用1，000ml乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物。形成的溶液用10%檸檬酸、10%碳酸氫鈉水溶液和氯化鈉飽和水溶液依次洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，真空蒸餾除去溶劑。將生成的黃色油狀物進行硅膠柱層析(洗脫液乙酸乙酯/正己烷＝1/1-3/1)，得到3.79g黃色玻璃樣化合物(C)和1.53g淺黃色固體化合物(D)化合物(C)(3RS，6RS)-1-芐氧基-3-(2，4-二甲氧芐基)-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.84(6H，d，J＝6.5Hz)，1.15-1.35(1H，m)，1.40-1.55(1H，m)，1.75-1.95(1H，m)，2.92(1H，dd，J＝8Hz，13.5Hz)，3.36(1H dd，J＝4.5Hz，13.5Hz)，3.78(3H，s)，3.80(3H，s)，3.88(1H，dd，J＝5.5Hz，8Hz)，4.20-4.35(1H，m)，4.94，5.02(each 1H，d，J＝10.5Hz)，5.65(1H，brs)，6.41(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8Hz)，6.45(1H，d，J＝2.5Hz)，7.04(1H，d，J＝8Hz)，7.30-7.50(5H，m)
化合物(D)(3RS，6SR)-1-芐氧基-3-(2，4-二甲氧芐基)-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮1H-NMR(CDCl3，250 MHz)δppm0.86(3H，d，J＝6.5Hz)，0.87(3H，d，J＝6.5Hz)，1.50-1.90(3H，m)，2.93(1H，dd，J＝7.5Hz，J＝14Hz)，3.51(1H，dd，J＝4Hz，J＝14Hz)，3.75(1H，t，J＝6Hz)，3.80(3H，s)，3.85(3H，s)，4.23(1H，dd，J＝4Hz，7.5Hz)，4.82，4.97(each 1H，d，J＝11Hz)，6.00(1H，brs)，76.47(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8Hz)，6.50(1H，d，J＝2.5Hz)，7.15(1H，d，J＝8Hz)，7.25-7.40(5H，m)實施例7于室溫下20分鐘內(nèi)，將150ml7N氫氯酸(乙醇溶液)滴加到含8.77gN-(2-羥基亞氨基-4-甲基戊酰基)-L-苯丙氨酸和3.28g硼烷-三甲胺的150ml乙醇溶液中。攪拌混合物24小時，室溫下真空蒸餾除去溶劑。用二氯甲烷溶解殘余物。此溶液用氯化鈉飽和水溶液和碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑。向殘余物中加入100ml甲苯?；亓骰旌衔?小時，再蒸餾除去溶劑。生成的棕色油狀物進行硅膠柱層析(洗脫液二氯甲烷/甲醇＝15/1)，得到1.77g化合物(E)和1.65g化合物(F)。
化合物(E)(3S，6S)-3-芐基-1-羥基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮，淺橙色棱晶熔點152-153℃(從二氯甲烷中重結(jié)晶)化合物(F)(3S，6R)-3-芐基-1-羥基-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮，淺棕色針晶熔點203-204℃(從氯仿-乙醚中重結(jié)晶)實施例8在冰冷卻下，將200ml7N氫氯酸(乙醇溶液)加到含13.81gN-[2-羥基亞氨基-3-(3-吲哚基)丙?；鵠-L-亮氨酸甲酯和4.51g硼烷-三甲胺的200ml乙醇溶液中。室溫下攪拌混合物16小時。反應(yīng)混合物經(jīng)蒸餾除去溶劑。殘余物與150ml二氯甲烷和150ml碳酸氫鈉飽和水溶液混合以進行分配。有機層用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑。將殘余物溶于100ml甲苯溶液中?；亓?小時，蒸餾除去溶劑。生成的棕色油狀物15.64g用硅膠柱層析純化(洗脫液二氯甲烷/甲醇＝50/1-15/1)，得到1.28g順式化合物(G)和1.30g反式化合物(H)。
化合物(G)(3S，6S)-1-羥基-6-(3-吲哚基甲基)-3-異丁基哌嗪-2，5-二酮淺橙色固體熔點146-148℃(分解)(從氯仿-正己烷中重結(jié)晶)化合物(H)(3S，6R)-1-羥基-6-(3-吲哚基甲基)-3-異丁基哌嗪-2，5-二酮淺橙固體熔點128-129.5℃(分解)用適當?shù)钠鹗嘉?，用實施?、5、6和7中的相同方法，得到了示于下列表1-13中的實施例9-45的化合物。
表1
表2
表3
表4
表5
表6
表7
表8
表9
表10
表11
表12
表13
實施例46將1.24g二環(huán)己基碳化二亞胺加到含2.04g(3RS，6SR)-3-羧基-6-異丁基-3-甲基-1-(2-四氫吡喃氧基)哌嗪-2，5-二酮和0.73gN-羥基琥珀酰亞胺的30ml無水二噁烷溶液中。室溫下攪拌3小時。過濾反應(yīng)混合物除去不溶物。向濾液中加入0.84ml3-甲氧基芐基胺。室溫下攪拌此混合物19小時。用150ml乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物。形成的溶液用碳酸氫鈉飽和水溶液和氯化鈉飽和水溶液洗滌，再用無水硫酸鎂干燥，蒸餾除去溶劑，得到3.32g(3RS，6SR)-1-(2-四氫吡喃氧基)-6-異丁基-3-[N-(3-甲氧基芐基)]氨基甲?；?3-甲基哌嗪-2，5-二酮，黃色油狀物。
用適當起始物，用與實施例4、5、6和8中相同的方法，得到了下表14-19中所示實施例47-65的化合物。
表14
表15
表15(續(xù))
表16
表16(續(xù))
表17
表17(續(xù))
表18
表19
以上所得化合物的部分NMR光譜數(shù)據(jù)示于下表20-25中表20
表21
表22
表23
表24
表25
藥理試驗-1對豚鼠的腹膜巨噬細胞受激釋放過氧化物自由基(O-2)的抑制作用細豚鼠腹膜內(nèi)注射15ml礦物油，注射96小時后，收集腹膜巨噬細胞。
按照T.Matsumoto，K.Takeshige和S.Minakami撰寫的文章Biochemical and Biophysical Research Communication，Vol.88，NO.3，pp 974-979，(1979)中描述的步驟，用細胞色素C還原法測定過氧化物自由基(O-2)。
向1ml 80μM的細胞色素C溶液中加入腹膜巨噬細胞，使終濃度為2×106個細胞/ml，將每種本發(fā)明的試驗化合物加入其中形成試驗組樣品。另一方面，用水代替本發(fā)明的試驗化合物加入其中，形成對照組樣品。將每個試驗組樣品和對照組樣品在37℃預(yù)孵育1分鐘。
作為過氧化物自由基(O-2)釋放的刺激劑，向每個樣品溶液和對照樣品中加入FMLP(甲?；琢虬滨Ａ涟滨１奖彼?，使FMLP的終濃度為10-7M，然后再將樣品溶液孵育反應(yīng)一分鐘。
在550nm測定了試驗組樣品和對照組樣品吸光度的差別(OD550)，通過計算實驗組與對照組樣品的OD550的比例，得到了50%抑制率濃度(IC50)。從試驗中得到的IC50示于下表26中
表26 藥理試驗-2對大鼠神經(jīng)細胞釋放溶酶體酶的抑制作用給以大鼠10ml1%酪蛋白溶液(生理鹽水溶液)16小時后，從腹腔采集神經(jīng)細胞樣品。
大鼠神經(jīng)細胞釋放溶酶體酶的反應(yīng)，按照T.Matsumoto，K.Takeshige和S.Minakami的文章BiochemicalandBiophysicalResearchCommunication，Vol.88，NO.3，pp 974-979，(1979)中描述的方法測定。
將采集的神經(jīng)細胞加到Hank's液中，使其濃度為5×105個細胞/ml，向其中加入本發(fā)明的哌嗪衍生物作為試驗化合物，形成試樣組樣品。另一方面，用水代替本發(fā)明的哌嗪衍生物加入其中，形成對照組樣品。每個試驗組和對照組樣品在37℃下預(yù)孵育1分鐘。
作為刺激劑，向試驗溶液中加入10-6M的FMIP(甲?；琢虬滨Ａ涟滨１奖彼?和5μg/ml的細胞松弛素B溶液。如此得到的混合溶液孵育反應(yīng)15分鐘，然后2000rpm下離心10分鐘。上清液(0.2ml)與溶解有0.2mM酚酞葡糖醛酸的0.5ml 0.1M乙酸緩沖溶液(pH 4.5)混合。形成的混合溶液在37℃下孵育反應(yīng)5小時。反應(yīng)后，向反應(yīng)混合物中加入1N NaOH溶液，但其pH達8-9，在540nm處測定試驗組和對照組樣品的吸光度(OD540)。
通過計算試驗組樣品與對照組樣品的OD540比值，得到了50%抑制濃度(IC50)的值。從試驗中得到的IC50(×10-5g/ml)值示于下表27中。
表27
藥理試驗-3對大鼠腹腔神經(jīng)細胞釋放過氧化氫(H2O2)的抑制作用給SD-系大鼠腹腔注射1%酪蛋白溶液，注射16小時后，通過清洗腹腔得到神經(jīng)細胞。將得到的神經(jīng)細胞用Hank's液洗滌。
向由下列成分組成的反應(yīng)混合物中NaN31mMNaCl140mMKCl5mMMgCl21mMCaCl21mM葡萄糖5.5mM酚紅0.28mMHRP(馬辣根過氧化物)8.5μ/mlHEPES[N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-2-乙磺酸]10mM(pH7.0)大鼠神經(jīng)細胞 106個細胞/mlFMLP 2×10-6M加入試驗化合物，然后整個混合物在37℃孵育1小時，再將混合物在2000rpm下離心分離10分鐘。取1ml上清液，向其中加入10μl1NNaOH水溶液。然后用分光光度計在610nm測定上清液的吸光度(OD610)。
通過計算試驗組樣品與對照組樣品的OD610之比，得到了試驗化合物的IC50(50%抑制濃度)。結(jié)果示于下表28中。
表28 藥理試驗-4對大鼠被動Heymann腎炎中尿蛋白增加的抑制作用以SD-系雄性大鼠(7周齡，體重200-230g)作為實驗動物。
按照如下所述的T.S.Edington等的方法，制備用于誘導(dǎo)大鼠被動Heymann腎炎的抗血清，[T.S.Edington，R.J.Glassok和F.J.DixonAutologousimmunecomplexnephritisinducedwithrenaltublerantigen.I.Identificationandisolationofthepathogeneticantigen.JournalofExperimentalMedicineVol.127，pp555-572(1968)]首先，從SD-大鼠中采集腎小管brush邊緣的抗原(FXIA片段)樣品。然后將抗原與Freund'完全佐劑混合，再用它敏化新西蘭白兔。每2周進行3次敏化操作，自最后一次敏化2周后，從兔中采血。
根據(jù)體重將實驗大鼠分成實驗組，每組由7只鼠組成。
通過向?qū)嶒灤笫蟮奈察o注射上述抗血清，來誘導(dǎo)大鼠的Heymann腎炎。將每個試驗化合物懸液在0.5%CMC(羧甲基纖維素)水溶液中，注射后第4天開始口服所述試驗化合物懸液，每天一次，連續(xù)7天。從注射后第10天開始連續(xù)收集大鼠尿樣，測定樣品中尿蛋白的量。用下式計算試驗化合物對產(chǎn)生尿蛋白的抑制率(%)抑制率(%)＝[(A-B)/(A)]×100其中A對照組中尿蛋白的量;
B試驗組中尿蛋白的量(服用試驗化合物的情況下)。
試驗結(jié)果示于下表29中
表29 藥理試驗-5對腎小球膜細胞繁殖的抑制作用將SD-系大鼠的腎無菌切除取出，從中切出腎皮質(zhì)。用篩分離腎小球。在RPMI1640培養(yǎng)基[含10%的FBS(胎牛血清)]中培養(yǎng)4周。這樣得到的細胞用作腎小球膜細胞。
通過白細胞介素-1β?lián)饺胄剀盏膶嶒灠凑誈anz的方法進行[Michael B.Ganz;Mary C.Perfetto和Walter F.BoronAmerican Journal of Physiology，Vol.259，F(xiàn)269-F278，(1990)]。將2×104個細胞/ml的腎小球膜細胞分散在一個48-孔板上(0.5ml/孔)，將這些細胞在RPMI培養(yǎng)基(含10%FBS)中培養(yǎng)3天。然后，將培養(yǎng)基換成另一種RPMI培養(yǎng)基，其中FBS的濃度由10%降到5%，再培養(yǎng)3天。再將RPMI培養(yǎng)基(含0.5% FBS)換成另一RPMI培養(yǎng)基，其中加入了試驗化合物和1ng/ml的白細胞介素-1β。培養(yǎng)24小時。然后向培養(yǎng)基中加入1μCi/孔的3H-胸苷，再繼續(xù)培養(yǎng)24小時。
用閃爍計數(shù)器測定摻入腎小球膜細胞中的3H-胸苷的量，比較試驗組與對照組，按下式計算抑制率(%)抑制率(%)＝[(C-D)/(C-E)]×100其中C對照組中摻入3H-胸苷的量;
D加入試驗化合物的組別中摻入3H-胸苷的量;
E不加白細胞介素-1β的組別中摻入3H-胸苷的量試驗結(jié)果示于下表30中。
表30
權(quán)利要求
1.選自通式(1)和(2)代表的哌嗪衍生物的至少一種哌嗪衍生物或其鹽 其中R1為低級烷基；R2為苯環(huán)上可帶有1-3個選自羥基、苯基-低級烷氧基、低級烷基、低級烷氧基和鹵原子的取代基的苯基-低級烷基，在咪唑環(huán)上可帶有苯基-低級烷基作為取代基的咪唑基取代的低級烷基，或下式基團 (式中R5和R6相同或不同，各自為氫原子，苯并噻唑基，或在苯環(huán)上可帶有1-3個選自低級烷氧基、苯基-低級烷氧基、低級烷基和羥基的取代基的苯基-低級烷基；另外，所述R5、R6和與其成鍵的相鄰氮原子可與其它氮原子或氧原子一起或無其它氮原子或氧原子存在下形成5-6元飽和雜環(huán)基；所述雜環(huán)基可有苯基作為取代基，其中苯基的苯環(huán)上可有低級烷氧基作為取代基)；R3為氫原子、低級烷基或苯基-低級烷基；和R4為羥基、苯基-低級烷氧基或四氫吡喃氧基；和 其中R7為低級烷基，在苯環(huán)上可帶有選自羥基和苯基-低級烷氧基的取代基的苯基-低級烷基，低級烷硫基取代的低級烷基，苯基-低級烷氧基取代的低級烷基，低級烷氧羰基，低級烷氧羰基取代的低級烷基，或羥基取代的低級烷基；R8為氫原子；另外R7和R8一起可形成亞丙基；及R9為羥基或苯基-低級烷氧基。
2.權(quán)利要求1的哌嗪衍生物或其鹽，其中哌嗪衍生物或其鹽由通式(1)代表 其中R1為低級烷基;R2為苯環(huán)上可帶有1-3個選自羥基、苯基-低級烷氧基、低級烷基、低級烷氧基和鹵原子的取代基的苯基-低級烷基，在咪唑環(huán)上可帶有苯基-低級烷基作為取代基的咪唑基取代的低級烷基，或下式基團 (式中R5和R6相同或不同，各自為氫原子，苯并噻唑基，或在苯環(huán)上可帶有1-3個選自低級烷氧基、苯基-低級烷氧基、低級烷基和羥基的取代基的苯基-低級烷基;另外，所述R5、R6和與其成鍵的相鄰氮原子可與其它氮原子或氧原子一起或無其它氮原子或氧原子存在下形成5-6元飽和雜環(huán)基;所述雜環(huán)基可有苯基作為取代基，其中苯基的苯環(huán)上可有低級烷氧基作為取代基);R3為氫原子、低級烷基或苯基-低級烷基;和R4為羥基、苯基-低級烷氧基或四氫吡喃氧基。
3.權(quán)利要求1的哌嗪衍生物，其中哌嗪衍生物由通式(2)代表 其中R7為低級烷基，在苯環(huán)上可有選自羥基和苯基-低級烷氧基的取代基的苯基-低級烷基，低級烷硫基取代的低級烷基，苯基-低級烷氧基取代的低級烷基，低級烷氧羰基，低級烷氧羰基取代的低級烷基，或羥基取代的低級烷基;R8為氫原子;另外R7和R8一起可形成亞丙基;及R9為羥基或苯基-低級烷氧基。
4.權(quán)利要求2的哌嗪衍生物或其鹽，其中R2為苯基-低級烷基，其中苯環(huán)上可帶有1-3個選自羥基、苯基低級烷氧基、低級烷基、低級烷氧基和鹵原子的取代基。
5.權(quán)利要求2的哌嗪衍生物或其鹽，其中R2為咪唑基取代的低級烷基，其中咪唑環(huán)上可帶有苯基-低級烷基作為取代基。
6.權(quán)利要求2的哌嗪衍生物或其鹽，其中R2為下式基團 (其中R5和R6同上所定義)。
7.權(quán)利要求4的哌嗪衍生物或其鹽，其中R3為鹵原子。
8.權(quán)利要求4的哌嗪衍生物或其鹽，其中R3為低級烷基或苯基-低級烷基。
9.權(quán)利要求5的哌嗪衍生物或其鹽，其中R3為鹵原子。
10.權(quán)利要求5的哌嗪衍生物或其鹽，其中R3為低級烷基或苯基-低級烷基。
11.權(quán)利要求6的哌嗪衍生物或其鹽，其中R3為鹵原子。
12.權(quán)利要求6的哌嗪衍生物或其鹽，其中R3為低級烷基或苯基-低級烷基。
13.權(quán)利要求7-12之一的哌嗪衍生物或其鹽，其中R4為羥基。
14.權(quán)利要求7-12之一的哌嗪衍生物或其鹽，其中R4為苯基低級烷氧基或四氫吡喃氧基。
15.權(quán)利要求3的哌嗪衍生物或其鹽，其中R7為低級烷氧羰基取代的低級烷基。
16.權(quán)利要求3的哌嗪衍生物或其鹽，其中R7和R8結(jié)合形成亞丙基。
17.權(quán)利要求3的哌嗪衍生物或其鹽，其中R7為低級烷基、在苯環(huán)上可帶有選自羥基和苯基-低級烷氧基的取代基的苯基-低級烷基、低級烷硫基取代的低級烷基、苯基-低級烷基取代的低級烷基、低級烷氧羰基、或羥基取代的低級烷基。
18.權(quán)利要求15-17之一的哌嗪衍生物或其鹽，其中R9為羥基。
19.權(quán)利要求15-17之一的哌嗪衍生物或其鹽，其中R9為苯基-低級烷氧基。
20.(3RS，6RS)-1-羥基-3-(3，5-二叔丁基-4-羥基芐基)-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮。
21.(3RS，6SR)-1-羥基-3-(3，5-二叔丁基-4-羥基芐基)-6-異丁基哌嗪-2，5-二酮。
22.(3RS，6RS)-1-羥基-6-(3-吲哚基甲基)-3-乙氧羰基甲基哌嗪-2，5-二酮。
23.(3RS，6SR)-1-羥基-6-(3-吲哚基甲基)-3-乙氧羰基甲基哌嗪-2，5-二酮。
24.(3S，6R)-1-羥基-6-(3-吲哚基甲基)-3-乙氧羰基甲基哌嗪-2，5-二酮。
25.一種過氧化物自由基抑制劑，它含有權(quán)利要求1中要求的哌嗪衍生物或其鹽作為活性成分。
26.權(quán)利要求25的過氧化物自由基抑制劑，其中活性試劑是權(quán)利要求2中的哌嗪衍生物或其鹽。
27.權(quán)利要求25的過氧化物自由基抑制劑，其中活性試劑是權(quán)利要求3中的哌嗪衍生物或其鹽。
28.一種預(yù)防和治療由過氧化物自由基引起的疾病或癥狀的試劑，它含有權(quán)利要求1中所要求的哌嗪衍生物或其鹽作為活性成分。
29.權(quán)利要求28的預(yù)防和治療由過氧化物自由基引起的疾病或癥狀的試劑，其中活性成分是權(quán)利要求2中所要求的哌嗪衍生物或其鹽。
30.權(quán)利要求28的預(yù)防和治療由過氧化物自由基引起的疾病或癥狀的試劑，其中活性成分是權(quán)利要求3中所要求的哌嗪衍生物或其鹽。
31.預(yù)防和治療腎炎的試劑，它含有權(quán)利要求1中所要求的哌嗪衍生物或其鹽作為活性成分。
32.權(quán)利要求31的預(yù)防和治療腎炎的試劑，其中活性成分為權(quán)利要求2中所要求的哌嗪衍生物或其鹽。
33.權(quán)利要求31的預(yù)防和治療腎炎的試劑，其中活性成分是權(quán)利要求3中所要求的哌嗪衍生物或其鹽。
34.式(1a)化合物的制備方法 (其中R1、R3、R4、R5和R6同上所定義)，其特征在于式(3)化合物與式(4)化合物反應(yīng) (其中R1、R3和R4同上所定義)， (其中R5和R6同上所定義)。
35.式(1)的哌嗪衍生物的制備方法 (其中R1、R2、R3和R4同上所定義)，其特征在于由式(16)化合物轉(zhuǎn)化成式(1)哌嗪衍生物 (其中R1、R2、R3和R4同上所定義)。
36.式(1)的哌嗪衍生物的制備方法 (其中R1、R2、R3和R4同上所定義)，其特征在于由式(22)或(23)的化合物轉(zhuǎn)化成式(1)的哌嗪衍生物 (其中R1、R2、R3和R4同上所定義;RA為氫原子或R10a，其中R10a為低級烷基)。
37.式(2)的哌嗪衍生物的制備方法 (其中R7、R8和R9同上所定義)，其特征在于由式(26)的化合物轉(zhuǎn)化成式(2)的哌嗪衍生物 (其中R7、R8和R9同上所定義)。
38.式(2)的哌嗪衍生物的制備方法 (其中R7、R8和R9同上所定義)，其特征在于由式(29)的化合物轉(zhuǎn)化成式(2)的哌嗪衍生物 (其中R7、R8和R9同上所定義)。
全文摘要
本發(fā)明提供具有抑制過氧化物自由基(O
文檔編號C07D417/12GK1112364SQ9419049
公開日1995年11月22日 申請日期1994年7月1日 優(yōu)先權(quán)日1993年7月13日
發(fā)明者利根齊, 森末政利, 田村克巳, 宮崎俊樹, 中野善正 申請人:大塚制藥株式會社