專利名稱：制備鬼臼乙叉甙磷酸酯和其中間體的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及制備鬼臼乙叉甙磷酸酯和其中間體的方法。
鬼臼乙叉甙磷酸酯是一種具有抗腫瘤活性有益化合物，同鬼臼乙叉甙比，該酯在水中的溶解度得到了改善。日本公開專利(No.192793/1988)和US4904768對其制備方法已作了披露。
US4904768中披露的此法包括直接將鬼臼乙叉甙同磷酰氯或烷基或芳基氯磷酸酯進行反應，通過這類磷化合物與糖化物部分的羥基進行反應，除得到目的化合物外，也有大量的副產(chǎn)物生成，這里磷化合物同鬼臼乙叉甙的4’位相連。因此，為了除去副產(chǎn)物，必須對此法得到的反應混合物進行如柱色譜法一類特殊的處理。此外，日本公開專利(No.192793/1988)中報導的此法用的是其中的糖化物部分的羥基經(jīng)保護了的鬼臼乙叉甙，因此沒產(chǎn)生多少副產(chǎn)物。然而，此法在對糖化物部分進行去保護時，要涉及到使用乙酸和鋅，且需用冷凍干燥來對所需的鬼臼乙叉甙磷酸酯進行分離，在進行工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)時，這無疑是一個問題。
本發(fā)明涉及制備式(1)表示的鬼臼乙叉甙磷酸酯的方法
所說方法包括于胺存在下，從化合物(2)中去掉R和R1基團，所說化合物(2)的結構式為
在(2)中R和R1可以相同不同，各表示基團-COCHmX(3-m)(X表示鹵原子，m為0-2的整數(shù))，本發(fā)明還涉及制備通式(2)的化合物和通式(3)的化合物的方法，所說化合物(3)的結構式為
(3)中的R和R1的定義同上。
本發(fā)明方法的特征在于用鹵乙?；鶊F作糖化物部分的保護基團，在胺(特別是叔胺)存在下消去此保護基團，從而使制備鬼臼乙叉甙磷酸酯的產(chǎn)率比公知技術的高，且適宜于工業(yè)規(guī)模的生產(chǎn)。
在通式(2)和(3)中，R和R1各選一鹵乙?；?、二鹵乙酰基和三鹵乙乙?；?本說明書中簡稱為“鹵乙酰基”)。R和R1基團中的X所定義的鹵原子為氟、氯、溴和碘原子。
下面，將對本發(fā)明的制備方法作更詳細的描述。
在適宜的胺或胺鹽存在下，于諸如從醇(甲醇和乙醇)、鹵代烴(如二氯甲烷和氯仿)、醚類(四氫呋喃和二噁烷)或由其二種或多種上述溶劑組成的混合溶劑選出的溶劑中，通過溶劑分解從化合物(2)中去掉保護糖化合物部分羥基的鹵乙?；鶊F。所說胺可以是從如一甲基胺和一乙基胺等伯胺，如二甲胺、二乙胺和乙甲胺等仲胺，如三甲胺和三乙胺等叔胺中選出的任何C1-5烷基胺和從苯胺、二乙苯胺等選出的任何芳族胺。根據(jù)緩慢差向異構表異構化，優(yōu)選使用C1-5烷基叔胺(如三乙胺)。所說胺鹽可以是伯、仲、叔或芳族胺同乙酸等有機酸形成的鹽。所說溶劑分解包括水解、醇解、氨解或氨基分解。用于溶劑分解的試劑有水、上述醇類、氨和上述伯、仲胺類。如使用叔胺或胺鹽，優(yōu)選的溶劑是甲醇或乙醇等醇或醇同其他溶劑的混合物。如使用胺時，在0-70℃(優(yōu)選0-30℃下)即可容易地消去鹵乙酰基團。根據(jù)通式(2)化合物計算，所用的胺的量為0.2-15當量，優(yōu)選1-3個當量，如使用胺鹽，于20-70℃(優(yōu)選30-50℃)下即可容易地消去鹵乙?；鶊F，根據(jù)化合物(2)計算，所用的胺鹽的量為1-15(優(yōu)選3-10)個當量。此消除反應在約1-6小時內(nèi)即可完成。
消除反應完成后，反應混合物用鹽酸/四氫呋喃進行中和，濃縮后用四氫呋喃進行溶劑置換。對所得的反應混合物進行過濾以除去形成的胺的氫氯化物。濃縮濾液后加入正巳烷。冷卻所得反應混合物即得鬼臼乙叉甙磷酸酯。
在本發(fā)明中用作起始物料的通式(2)化合物可按如下方法制備。
用容易為鈀催化劑等催化還原消去的基團，如取代的或未取代的芐氧基羰基等保護4’-去甲表鬼臼毒素的4’位。取代的芐氧基羰基的實例包括對甲氧基芐氧基羰基、對硝基芐氧基羰基和對氯芐氧基羰基，用慣常方法，于三氟化硼-醚配合物存在下，使經(jīng)此種方法保護的4’-去甲基表鬼臼毒素同β-D-2，3-二-氧-鹵乙?；?4，6-氧-亞乙基吡喃葡萄糖進行偶合。
上述偶合反應中所用的β-D-2，3-二-氧-鹵乙?；?4，6-氧-亞乙基吡喃葡萄糖可用US4757138或4564675中公開的方法進行制備。
偶合反應完成后，于鈀催化劑存在下，對所得產(chǎn)品進行氫化以除去4’的保護基，經(jīng)此氫化即可獲得4’-去甲表鬼臼毒素同β-D-2，3-二-氧鹵乙?；?4，6-氧-亞乙基苷。再于適宜堿存在下，在如四氫呋喃、二噁烷、丙酮、乙腈、氯仿、二氯甲烷或1，2-二氯乙烯等非質(zhì)子傳遞溶劑中，使該化合物進一步同磷酰氯反應即形成上述通式(3)表示的4’-氧-二氯磷?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-鹵乙?；?4，6-氧-亞乙基苷。用于此步驟的堿是叔胺、吡啶等不與該產(chǎn)物反應的堿類。
于適宜堿存在下，在中性或酸性條件下，在水中，對反應混合物或所分離的通式(3)化合物進行二氯磷?；?，經(jīng)此水解即得式(2)化合物4’-氧-膦?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-鹵乙?；?4，6-氧-亞乙基苷。用于此水解的堿是不與化合物(3)反應的叔胺或吡啶等芳族胺。保護糖化物部分的羥基的鹵乙?；谒舛攘柞；臈l件下是穩(wěn)定的基團。水解過程完成后，將此反應混合物的PH調(diào)到1.0-2.5以使通式(2)化合物從水相萃取入有機相，濃縮有機相后，加入正巳烷以分離通式(2)化合物。
實施例1(1)合成4’-氧-二氯磷?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷把22.03g(27.18mmol)4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷溶于190ml四氫呋喃中。把此溶液冷卻到-15℃。在所得溶液中滴加8.34g(54.4mmol)磷酰氯后加入8.25g(81.5mmol)三乙胺。
所得混合物在-10℃至-15℃下反應后，過濾除去形成的三乙胺化氫氯。把濾液濃縮至60g后加入500ml異丙醚。冷卻此混合物以沉淀出晶體。過濾回收晶體得4’-氧-二氯磷酰基-4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷。
無水產(chǎn)品重24.45g(產(chǎn)率97%)200MHZ1HNMR(DMSOd-6)δ1.21(d，3H)，2.85-3.10(m，2H)，3.59(s，6H)，3.41-3.84(m，3H)，4.19(m，2H)，4.32(m，1H)，4.53(d，1H)，4.79(q，1H)，4.98(m，2H)，5.30(d，1H)，5.54(t，1H)，6.01(s，1H)，6.05(s，1H)，6.19(s，2H)，6.54(s，1H)，6.66(s，1H)，6.99(s，1H)，7.01(s，1H)MS(FAB)，m/e，927(M+H)(2)合成4’-氧-膦?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷把24.4g(26.37mmol)4’-氧-二氯磷?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷加到400ml水中。0-5℃下向此混合物中滴加入12.28g吡啶以進行水解。水解完成后，向此反應混合物中加入180ml氯仿，用6N的鹽酸把此混合物PH調(diào)到2以用氯仿萃取產(chǎn)品。
氯仿相用120ml飽和普通鹽水溶液洗滌、濃縮后加入360ml正巳烷即得4’-氧-膦酰基-4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷。
無水產(chǎn)品重22.99g(產(chǎn)率97.9%)200MHZ1HNMR(DMSOd-6)δ1.21(d，3H)，2.83-3.10(m，2H)，3.57(s，6H)，3.48-3.85(m，3H)，4.18(m，2H)，4.33(m，1H)，4.51(d，1H)，4.78(q，1H)，4.98(m，2H)，5.27(d，1H)，5.54(t，1H)，6.00(s，1H)，6.04(s，1H)，6.16(s，2H)，6.54(s，1H)，6.63(s，1H)，6.94(s，1H)，7.01(s，1H)MS(FAB)，m/e，891(M+H)(3)合成鬼臼乙叉甙磷酸酯(式(1)化合物)把22.99g(25.82mmol)4’-氧-膦?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷溶解在150ml甲醇中，將所得溶液冷至5-10℃，接著滴加5.22g(51.64mmol)三乙胺。
將所得混合物在10℃下進行反應。反應完成后，中和反應混合物并用鹽酸/四氫呋喃把PH調(diào)到2.5-3.0。將所得溶液濃縮至干，殘余物中加入四氫呋喃以進行溶解置換。用鹽酸四氫呋喃把溶液的PH調(diào)到1.0以沉淀出三乙胺化氫氯。濾出三乙胺化氫氯、濃縮濾液后加入200ml正巳烷、攪拌所得混合物、除去上清液、加入200ml正巳烷。此步驟重復幾次后得到用過濾即可回收的固體鬼臼乙叉苷磷酸酯。
無水產(chǎn)品重11.22g(產(chǎn)率65%)
(按步驟(1)中所用原料計，產(chǎn)率61.7%)200MHZ1HNMR(DMSOd-6)δ1.25(d，3H)，2.80-3.00(m，1H)，3.61(s，6H)，3.02-3.66(m，6H)，4.04(dd，1H)，4.24(d，2H)，4.55-4.59(m，2H)，4.72(q，1H)，4.95(d，1H)，5.23(br，2H)，6.03(s，2H)，6.23(s，2H)，6.53(s，1H)，7.01(s，1H)MS(FAB)，m/e，669(M+H)實施例2(1)合成4’-氧-二氯磷?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷把9.5g(11.72mmol)4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷溶解在80ml四氫呋喃中。冷卻到-50℃后加入3.6g(35.6mmol)三乙胺，接著滴加3.6g(23.5mmol)磷酰氯，所得混合物在-5℃至-15℃下反應。
(2)合成4’-氧-膦?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷把含4’-氧-二氯磷?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷的上述反應混合物加入225ml水中。25℃下于此混合物中滴加5.8g吡啶以進行水解。水解完成后，加入85ml二氯甲烷，用6N鹽酸把PH調(diào)至1以用二氯甲烷萃取反應產(chǎn)物。把二氯甲烷相濃縮至30ml。
(3)合成鬼臼乙叉苷磷酸酯(式(1)化合物)含上述4’-氧-膦?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷的濃縮物中加入65ml甲醇，接著于室溫下滴加2.37g(23.4mmol)三乙胺。
室溫下所得混合物反應4小時。反應完成后，用鹽酸/四氫呋喃中和并調(diào)節(jié)PH至3。所得溶液濃縮至干后，向殘余物中加入四氫呋喃以進行溶解置換。用鹽酸/四氫呋喃把所得四氫呋喃溶液的PH調(diào)節(jié)至0.5以沉淀出形成的三乙胺化氫氯。濾出三乙胺化氫氯后的濾液經(jīng)濃縮后加入200ml正巳烷、攪拌所得混合物、除去上清液、加入200ml正巳烷。重復此步驟幾次得到用過濾即能回收的固體鬼臼乙叉苷酸酯。
無水產(chǎn)品重5.36g(按步驟(1)中所用原料計，產(chǎn)率68.4%)反應混合物中苦異構體含量0.6%實施例3(1)合成4’-氧-二氯磷?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷把9.5g(11.72mmol)4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷溶于80ml四氫呋喃中。將此溶液冷卻到-5℃，于其中加入3.6g(35.6mmol)三乙胺，接著滴加3.6g(23.5mmol)磷酰氯，所得混合物在-5℃至-15℃下反應。
(2)合成4’-氧-膦?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷把上述獲得的含有4’-氧-二氯磷?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷的上述反應混合物加到225ml水中。25℃下向此反應混合物中滴加5.3g吡啶以進行水解。水解完成后，加入85ml二氯甲烷，用6N鹽酸把PH調(diào)至1，用二氯甲烷萃取反應產(chǎn)物。把二氯甲烷相濃縮至35ml。
(3)合成鬼臼乙叉苷磷酸酯(式(1)化合物)把65ml甲醇加到4’-氧-膦?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷的所得濃縮物中，接著，室溫下滴加1.71g(23.4mmol)二乙胺。
將所得混合物在室溫下反應4小時。反應畢，用鹽酸/四氫呋喃中和并將PH調(diào)至3。把所得溶液濃縮至干，在殘余物中加入四氫呋喃以進行溶劑置換。用鹽酸/四氫呋喃把所得四氫呋喃溶液的PH調(diào)節(jié)至1以沉淀出形成的二乙胺化氫氯。濾出二乙胺化氫氯后，濃縮濾液，接著加入200ml正巳烷、將所得混合物攪拌、濾出上清液，加入200ml正巳烷。重復此步驟幾次，得到用過濾即可回收的固體鬼臼乙叉苷酸酯。
無水產(chǎn)品重4.98g(按步驟(1)中所用原料計，產(chǎn)率63.5%)反應混合物中苦異構體含量3.3%實施例4(1)合成4’-氧-二氯磷?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷把9.5g(11.72mmol)4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷溶解在80ml四氫呋喃中。將所得溶液冷到-5℃，加入3.6g(35.6mmol)三乙胺，接著滴加3.6g(23.5mmol)磷酰氯，所得混合物在-5℃至-15℃下反應。
(2)合成4’-氧-膦?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷將上述所得的含有4’-氧-二氯磷?；?4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷加入到225ml水中。25℃下滴加5.8g吡啶以進行水解。水解畢，加入85ml二氯甲烷，然后用6N鹽酸把PH調(diào)至1，用二氯甲烷萃取反應產(chǎn)物。把二氯甲烷相濃縮至25ml。
(3)合成鬼臼乙叉苷磷酸酯(式(1)化合物)在所得的含4’-氧-膦酰基-4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙酰基-4，6-氧-亞乙基苷的濃縮物中加入65ml甲醇，接著，室溫下滴加1.39g(23.5mmol)異丙胺。
所得反應混合物在室溫下反應4小時。反應畢，用鹽酸/四氫呋喃使反應混合物進行中和并把PH調(diào)至3。把所得溶液濃縮至干后于殘留物中加入四氫呋喃以進行溶劑置換。用鹽酸/四氫呋喃把溶液的PH調(diào)節(jié)至0.6以沉淀出形成的異丙胺化氫氯。濾出異丙胺化氫氯，濃縮濾液，接著加入200ml正巳烷、攪拌所得混合物、除去上清液，加入200ml正巳烷。重復此步驟幾次，用過濾進行回收，得到固體鬼臼乙叉苷磷酸酯。
無水產(chǎn)品重4.33g(按步驟1用原料計，產(chǎn)率55.3%)
反應混合物中苦異構體含量2.5%參考實施例合成4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷(1)合成4’-氧-芐氧基羰基-4’-去甲表鬼臼毒素把22g(55mmol)4’-去甲表鬼臼毒素加到220ml二氯甲烷中。所得混合物冷卻至0℃后加入7.35g(72.6mmol)三乙胺和11.25g(66mmol)芐氧基羰酰氯。所得混合物于0-5℃下反應2小時，反應畢，二氯甲烷相用水洗滌后濃縮。向濃縮物中加入40ml丙酮形成一種溶液。于此溶液中加入350ml甲醇以沉淀4’-氧-芐氧基羰基-4’-去甲表鬼臼毒素，過濾、干燥。
無水產(chǎn)品重22.05g(產(chǎn)率75.1%)(2)合成4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷把17.0g(31.8mmol)4’-氧-芐氧基羰基-4’-去甲表鬼臼毒素和17.65g(41.2mmol)β-D-2，3-二-氧-二氯乙?；?4，6-氧-亞乙基吡喃葡萄糖溶解在240ml二氯甲烷中。將所得溶液冷卻到-20℃，加入6.77g(47.7mmol)醚合三氟化硼進行偶合反應。反應畢，向反應混合物中加入58.5g(57.2mmol)吡啶，爾后相繼用稀鹽酸、硅酸氫鈉水溶液和水洗滌所得溶液，濃縮二氯甲烷相。向濃縮物中加入100ml丙酮形成溶液，接著加入1.6g鈀黑。向混合物中導入氫氣以進行脫芐氧羰基反應。反應畢，從反應混合物中濾出催化劑，濃縮濾液。向濃縮物中加入130ml異丙醚以沉淀出晶形4’-去甲表鬼臼毒素β-D-2，3-二-氧-氯乙?；?4，6-氧-亞乙基苷，濾出產(chǎn)物晶體并予以干燥。
干品重22.03g。
產(chǎn)率85.5%。
權利要求
1.一種制備式(1)鬼臼乙叉甙磷酸酯的方法，
所說方法包括在胺存在下，從式(2)化合物中去掉R和R1基團，
在化合物(2)中R和R1可以相同或不同，各表示基團-COCHmX(3-m)(其中X為鹵原子，m為0-2的整數(shù))。
2.一種根據(jù)權利要求1的方法，其中所說鹵原子是氯原子。
3.一種根據(jù)權利要求1的方法，其中R和R1各為二氯乙?；鶊F。
4.一種根據(jù)權利要求1的方法，其中所說胺是叔胺。
5.一種根據(jù)權利要求4的方法，其中所說叔胺為三(C1-C5)烷基胺。
6.一種根據(jù)權利要求4的方法，其中所說叔胺是三乙胺。
7.一種根據(jù)權利要求1的方法，其中按式(2)化合物計算，所用胺的量為0.2-15當量。
8.一種根據(jù)權利要求1的方法，其中按式(2)化合物計算，所用胺的量為1-3個當量。
9.一種根據(jù)權利要求1的方法，其中在0-70℃下進行所說反應。
10.一種根據(jù)權利要求1的方法，其中在0-30℃下進行所說反應。
11.一種根據(jù)權利要求1的方法，其中所說反應在溶劑中進行。
12.一種根據(jù)權利要求11的方法，其中所說溶劑是醇。
13.一種根據(jù)權利要求12的方法，其中所說醇是有1-5個碳原子的伯醇。
14.一種通式(2)化合物
其中R和R1可以相同或不同，各表示基團-COCHmX(3-m)，該X為鹵原子，m為0-2的整數(shù)。
15.一種式(3)化合物
其中R和R1可以相同或不同，各表示基團-COCHmX(3-m)，該X為鹵原子，m為0-2的整數(shù)。
16.一種根據(jù)權利要求14或15的化合物，其中所說的鹵原子是氯原子。
17.一種根據(jù)權利要求14或15的化合物，其中R和R1各為二氯乙?；?。
全文摘要
一種用下述方法制備的式(I)鬼臼乙叉甙磷酸酯
文檔編號C07H17/04GK1083067SQ93106360
公開日1994年3月2日 申請日期1993年4月23日 優(yōu)先權日1992年4月24日
發(fā)明者宮澤嘉延, 佐藤仁, 好川博, 大川幸一, 富吉紀子 申請人:日本化藥株式會社