本發(fā)明屬于藥物包合物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其是涉及黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物的制備方法。
背景技術(shù)：
：黃芩苷(Baicalin)是從黃芩根中提取分離出來的一種黃酮類化合物，化學(xué)名5，6-二羥基-7-O-葡萄糖醛酸黃酮苷，分子式：C21H18O11，分子量為446.37，黃芩苷為葡萄糖醛酸和黃芩素的縮合物，分子中含有鄰二酚羥基，極易氧化變質(zhì)，且其水溶性小。黃芩苷具有顯著的生物活性，在藥理上已證實(shí)具有抑菌、清熱、降壓、鎮(zhèn)靜、利尿、利膽、抗炎抗變態(tài)反應(yīng)、解毒、抗癌反應(yīng)等效能[侯艷寧、朱秀媛、程桂芳：黃芩苷的抗炎機(jī)理[J].藥學(xué)學(xué)報(bào).2000(03)：161-4.]；還能吸收紫外線，清除氧自由基，抑制黑色素的生成，是一種很好的功能性美容化妝品原料[龔盛昭，揭育科，袁水明.黃芩苷在功能性化妝品中的應(yīng)用研究[J].日用化學(xué)工業(yè).2003(03)：200-3.]。其具有抗肺炎衣原體所致的動(dòng)脈粥樣硬化作用，對(duì)缺血再灌注損傷的大腦和心肌具有保護(hù)作用，對(duì)不同原因引起的肝損傷具有保護(hù)作用，能顯著促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖，對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞具有保護(hù)作用，在體外對(duì)某些寄生蟲均有明顯的抑制和殺滅作用[文敏，李雪，付守廷.黃芩苷藥理作用研究新進(jìn)展[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào).2008(02)：158-62.]。還能抑制醛糖還原酶，用于糖尿病慢性并發(fā)癥的治療；對(duì)病期不同、皮損面積不同的銀屑病患者均有較好療效[崔嵐，袁靜，王平全.黃芩苷藥理作用研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志.2000(11)：45-6.]，對(duì)于視網(wǎng)膜的病變也有一定的影響，具有明顯抑制視網(wǎng)膜細(xì)胞外炎性水腫的作用[黃志軍.黃芩苷藥理作用研究進(jìn)展[J].天津藥學(xué).2012(03)：61-4.]。黃芩苷的開發(fā)利用主要是應(yīng)用其抗炎、降壓等活性，對(duì)其他藥理活性的研究利用相對(duì)較少。隨著生物技術(shù)的發(fā)展以及中藥化學(xué)成分分離水平的進(jìn)步，黃芩苷在抗氧化、抗腫瘤、抗HIV以及治療心血管疾病等方面均具有潛在的開發(fā)應(yīng)用價(jià)值[張喜平，田華，程琪輝.黃芩苷的藥理作用研究現(xiàn)狀[J].中國藥理學(xué)通報(bào). 2003(11)：1212-5.]。盡管黃芩苷療效眾多，但因其所具有的水溶性小，性質(zhì)不穩(wěn)定，易氧化變質(zhì)，吸收差，有一定苦味等的特點(diǎn)，使其在臨床上的應(yīng)用受到一定影響[馮淑華，喬衛(wèi).黃芩及其制劑中黃芩甙含量測(cè)定方法[J].中草藥.1995(07)：381-3+5.]。環(huán)糊精包合技術(shù)作為一種很好的增溶技術(shù)，已應(yīng)用于黃芩苷的包合，可提高藥物溶解度，促進(jìn)體內(nèi)吸收。文獻(xiàn)(程建明，劉漢青，張興德.黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物制備工藝研究.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，19(6)：358-360.)采用溶液攪拌法以溶解度為評(píng)價(jià)指標(biāo)制備黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物，實(shí)驗(yàn)表明羥丙基-β-環(huán)糊精能顯著提高黃芩苷的溶解度，可增加84倍。但是，我們采取同樣的方法制備了黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物，發(fā)現(xiàn)該法對(duì)黃芩苷的包合率不高，載藥量也較低，且制備步驟較繁瑣。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所解決的技術(shù)問題在于克服傳統(tǒng)制備方法所存在的包合率不高、操作繁瑣、溶劑殘留等缺點(diǎn)而提供一種新的制備黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物的方法，該方法實(shí)現(xiàn)操作簡(jiǎn)便、載藥量高、并顯著提高包含率的良好效果。為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下：本方案涉及一種黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物的制備方法，其包括如下步驟：首先，將一定量的黃芩苷與羥丙基-β-環(huán)糊精充分混合后置于一定溫度的反應(yīng)釜中；然后，再將超臨界CO2流體導(dǎo)入至反應(yīng)釜中，達(dá)到并維持一定壓力，使黃芩苷與羥丙基-β-環(huán)糊精在超臨界CO2流體中反應(yīng)一定時(shí)間后快速解壓，得干燥包合物。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案確定，其中所述反應(yīng)釜中溫度是45-65℃；本發(fā)明實(shí)施例還總結(jié)出：所述超臨界CO2流體的壓力為10-30MPa；所述反應(yīng)時(shí)間為3-14小時(shí)；所述黃芩苷與羥丙基-β-環(huán)糊精兩者摩爾比為1∶(1-4)。本發(fā)明將一定量的黃芩苷與羥丙基-β-環(huán)糊精充分混合后置于一定溫度的反應(yīng)釜前，還可以通過在混合物中加入有機(jī)酸來進(jìn)一步提高所述包合物的包合率與載藥量，所述有機(jī)酸為賴氨酸，且所述有機(jī)酸與黃芩苷的摩爾比為1∶1。與現(xiàn)有技術(shù)的包合物制備方法相比，本發(fā)明的超臨界流體包合法解決了溶劑殘留問題，制備過程中不使用任何有機(jī)溶劑；另外操作步驟簡(jiǎn)便，可一步得到所需粒子的包合，同時(shí)顯著提高包合率。具體實(shí)施方式：為克服現(xiàn)有技術(shù)中制備工藝缺陷，我們引入超臨界流體技術(shù)制備黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物。超臨界流體技術(shù)，如超臨界溶液之快速膨脹(RESS)，氣體飽和溶液之沉淀(PGSS)，氣體反溶劑(GAS)以及超臨界流體強(qiáng)制分散法(SEDS)已被藥物加工及制劑制備廣泛應(yīng)用，顯示出了很大的適用性并取得了很大的成績。近年來，超臨界流體技術(shù)已成功應(yīng)用于環(huán)糊精對(duì)藥物的包合，該技術(shù)在載藥系統(tǒng)中的應(yīng)用收到研究者普遍關(guān)注。該包合方法的機(jī)制為：以具有優(yōu)越傳質(zhì)能力及高溶劑化性能的超臨界CO2為包合介質(zhì)，當(dāng)其通過藥物與環(huán)糊精的混合物時(shí)，由于它具有降低某些有機(jī)化合物的熔點(diǎn)特性，將使包合材料與客體物質(zhì)形成超臨界溶液，從而導(dǎo)致包合過程的進(jìn)行。下面詳細(xì)描述本發(fā)明的黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物的研究數(shù)據(jù)并通過列舉實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案：本發(fā)明的黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物的處方設(shè)計(jì)的研究過程及參數(shù)選擇依據(jù)如下：一、黃芩苷包合物傳統(tǒng)制備方法：傳統(tǒng)制備方法是采用溶液攪拌法(文獻(xiàn)已報(bào)道)，具體實(shí)驗(yàn)步驟如下：稱取36.2gHPCD，加177.3ml水溶解(濃度20％)。置磁力攪拌器上，調(diào)至溫度60℃，邊攪拌邊加入黃芩苷，直至出現(xiàn)渾濁為止，繼續(xù)攪拌2h。將溶液室溫下靜置2h，0.45um濾膜過濾，濾液冷凍干燥，即得。結(jié)果包合率為1.51％，載藥量0.33％。二、黃芩苷包合物超臨界制備方法：1.單因素考察方案與結(jié)果(1)反應(yīng)時(shí)間【實(shí)施例1】設(shè)定黃芩苷與羥丙基-β-環(huán)糊精的摩爾比為1∶2，超臨界CO2流體的壓力為20MPa，反應(yīng)釜溫度為55℃，平行三份樣品，以包合物包合率、載藥量、溶解度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別考察反應(yīng)3h、6h、10h、14h后制備的包合物，結(jié)果見表一所示：表一：時(shí)間(h)包合率(％)載藥量(％)溶解度(ug/mL)31.4770.179633.2661.4820.180787.36101.5360.186856.84141.3640.1661183.76(2)反應(yīng)釜溫度【實(shí)施例2】設(shè)定黃芩苷與羥丙基-β-環(huán)糊精的摩爾比為1∶2，超臨界CO2流體的壓力為20MPa，反應(yīng)時(shí)間為8h，平行三份樣品，以包合物包合率、載藥量、溶解度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別考察45℃、55℃、65℃時(shí)制備的包合物。結(jié)果見表二所示：表二：溫度(℃)包合率(％)載藥量(％)溶解度(ug/mL)451.7690.2141106.66551.9090.2321207.17651.5440.1871117.43(3)超臨界流體壓力【實(shí)施例3】設(shè)定黃芩苷與羥丙基-β-環(huán)糊精的摩爾比為1∶2，反應(yīng)時(shí)間為8h，反應(yīng)釜溫度為55℃，平行三份樣品，以包合物包合率、載藥量、溶解度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別考察超臨界CO2流體的壓力為10MPa、20MPa、30MPa時(shí)制備的包合物。結(jié)果見表三所示：表三：壓力(MPa)包合率(％)載藥量(％)溶解度(ug/mL)101.3270.1611274.62201.9090.2321207.17301.3770.1671281.47(4)黃芩苷與羥丙基-β-環(huán)糊精的摩爾比【實(shí)施例4】設(shè)定超臨界CO2流體的壓力為20MPa，反應(yīng)釜溫度為55℃，反應(yīng)時(shí)間為8h，平行三份樣品，以包合物包合率、載藥量、溶解度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別考察摩爾比為1∶1、1∶2、1∶3、1∶4時(shí)制備的包合物。結(jié)果見表四所示：表四：2.正交優(yōu)化方案與結(jié)果根據(jù)單因素考察的結(jié)果，羥丙基-β-環(huán)糊精包合黃芩苷的反應(yīng)時(shí)間確定為8h，確定反應(yīng)釜溫度(A)、反應(yīng)壓力(B)、黃芩苷和羥丙基-β-環(huán)糊精的摩爾比(C)為正交試驗(yàn)的影響因素，采用L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn)，以載藥量、包合率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用綜合評(píng)分法，二者的權(quán)重系數(shù)分別為0.3、0.7，對(duì)包合物綜合評(píng)分結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，正交因素水平表、正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果表如表五-1、表五-2所示：表五-1：正交因素水平表表五-2：正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果表由上表分析，根據(jù)R值可知，各考察因素對(duì)包合率和包合物載藥量的影響程度不同，程度大小順序?yàn)镃＞A＞B；根據(jù)極值可知，A2B2C3為最優(yōu)處方，選擇該處方進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果包合率為10.07％，載藥量0.75％。3.超臨界固體包埋制備包合物的包合率提高實(shí)驗(yàn)【實(shí)施例5】在上述正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化處方的基礎(chǔ)上加入賴氨酸，即：黃芩苷與羥丙基-β-環(huán)糊精混合物中再添加有機(jī)酸來提高包合物的包合率及載藥量，比例按賴氨酸與黃芩苷摩爾比1∶1加入，反應(yīng)壓力20MPa、反應(yīng)時(shí)間8h、反應(yīng)釜溫度55℃、黃芩苷和羥丙基-β-環(huán)糊精的摩爾比為1∶4，制備黃芩苷包合物，結(jié)果見表六所示：表六：有機(jī)酸的影響包合率(％)載藥量(％)賴氨酸66.484.27上述實(shí)施例結(jié)果可以看出，采用超臨界固體包埋法制備黃芩苷-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物不僅可以使包合率和載藥量從傳統(tǒng)法的1.51％、0.33％提高到10.07％和0.75％，再進(jìn)一步通過加入有機(jī)酸可使包合率、載藥量顯著增加至66.48％、4.27％，大幅提升了包合效率、載藥量，且實(shí)驗(yàn)操作一步完成，更加簡(jiǎn)便易行。當(dāng)前第1頁1 2 3