一種博萊霉素微球長效注射劑的制作方法
【專利摘要】一種博萊霉素微球長效注射劑，提供一種博萊霉素長效制劑及其制備方法，所述博萊霉素長效注射劑濃度為2mg/ml時，包埋率為78.4％，所述博萊霉素長效注射劑濃度為3mg/ml時，包埋率為81.2％，所述博萊霉素長效注射劑前15天內(nèi)含物溶出率為75％，30天內(nèi)，仍有15％藥物未釋放。
【專利說明】
一種博萊霉素微球長效注射劑
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，特別的涉及一種博萊霉素微球長效注射劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 臨床上治療皮膚癌、肝癌、頭頸部癌、肺癌、食管癌、宮頸癌以及惡性淋巴瘤的主要 方法均采用博萊霉素等化療藥物。博萊霉素是一種從鏈霉菌中分離得到的抗癌抗生素，它 是幾種糖肽的混合物，主要分為A、B兩大類，博萊霉素A2是這些混合物的主要成分舊J。博 萊霉素用藥后對肺部有一定副作用，其聚乳酸羥基乙酸共聚物（PLGA)長效注射劑比較普 通制劑具有減少給藥次數(shù)及提高生物利用度的優(yōu)點(diǎn)，但其制備工藝復(fù)雜，對生產(chǎn)設(shè)備要求 較高。
[0003]與其它抗癌產(chǎn)品一樣，如何提高博萊霉素的生物利用度，一直是人們期望解決的 問題。本
【發(fā)明人】通過對博萊霉素殼聚糖微球進(jìn)行深入細(xì)致的研究，確立了博萊霉素的微球 包埋率、體外釋放率，優(yōu)化制備工藝，提高注射劑整體特征性物質(zhì)基礎(chǔ)的一致性，使產(chǎn)品質(zhì) 量穩(wěn)定一致，從而生產(chǎn)出高品質(zhì)長效博萊霉素注射劑，于是完成了本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明實(shí)施例的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，提供一種博萊霉素長效注射 劑。
[0005] 為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0006] -種博萊霉素微球長效注射劑，采用如下工藝制備而成：將博萊霉素制成殼聚糖 微球，靜置，加注射用水稀釋，精濾，灌封，滅菌，其特征在于：殼聚糖微球的具體步驟為：
[0007] (1)將殼聚糖溶于1-3%冰乙酸溶液中，W/V比為1-1. 8:32,攪拌溶解得殼聚糖冰 醋酸溶液，其中，攪拌溫度為45_55°C，加熱方式為蒸汽加熱；
[0008] (2)將博萊霉素溶于步驟⑴殼寡糖冰醋酸溶液中，V/V比為1:3-3:1，得混合溶 液B ;
[0009] (3)將混合物B緩慢加入乳化劑中，高速磁力攪拌35-50分鐘，V/V比為1:35-45， 溫度控制在50-55°C，用pH調(diào)節(jié)劑將pH調(diào)至7. 8-9. 2,其中，乳化設(shè)備是帶有隔層的乳化 鍋，轉(zhuǎn)速1000-2000rpm，得乳化液C后；將超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1:10-30， 中速攪拌至室溫得穩(wěn)定的乳化液D ;
[0010] (4)連續(xù)攪拌乳化液D，將交聯(lián)劑戊二醛加入乳化液D中，交聯(lián)反應(yīng)2. 5-3. 5小時， V/V 比為 1:10-2:9 ;
[0011] (5)交聯(lián)反應(yīng)完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得 固體混合物E ;
[0012] (6)用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 2-4次，并離心；
[0013] (7)將步驟（6)沉淀物干燥，得黃褐色載有博萊霉素的殼聚糖微球；
[0014] 優(yōu)選的，所述博萊霉素長效注射劑濃度為2mg/ml時，包埋率為78. 4%。
[0015] 優(yōu)選的，所述博萊霉素長效注射劑濃度為3mg/ml時，包埋率為81. 2%。
[0016] 優(yōu)選的，所述博萊霉素長效注射劑前15天內(nèi)含物溶出率為75%，30天內(nèi)，仍有 15 %藥物未釋放。
[0017] 本發(fā)明的有意效果是
[0018] 1、選擇殼寡糖作為微丸載體，是因?yàn)椋浩浔旧砭哂幸欢ǖ拿庖咴?，能夠刺激機(jī)體 免疫應(yīng)答；殼寡糖分子與存在于腸內(nèi)皮細(xì)胞上的有害微生物的受體結(jié)構(gòu)相似，能與一定的 毒素、病毒和真菌細(xì)胞的表面結(jié)合，可作為外源抗原的佐劑減緩抗原的吸收，增加抗原的效 價，從而增強(qiáng)機(jī)體的細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)；殼寡糖可促進(jìn)有益菌如雙歧桿菌等的大量增殖， 而雙歧桿菌可以提高機(jī)體的抗體水平，激活巨噬細(xì)胞的吞噬活性，從而影響機(jī)體的免疫功 能。
[0019] 2、由于本發(fā)明的制劑在貯存過程中始終為油性溶液，因此避免了脂肪乳長期儲存 中存在的乳滴聚集、局部破乳飄油等問題，進(jìn)一步提高了制劑的穩(wěn)定性。
[0020] 3、本發(fā)明提供的制劑的制備工藝簡單，更易工業(yè)化，由于不需要高強(qiáng)度、高壓力的 均質(zhì)設(shè)備，比如高速剪切裝置，所以產(chǎn)品不會出現(xiàn)設(shè)備脫落的雜質(zhì)（不銹鋼粒等）及外界引 入的雜質(zhì)，同時溫和的制備條件可以避免制備過程中博萊霉素的降解，進(jìn)一步提高了產(chǎn)品 的安全性。
【具體實(shí)施方式】：
[0021] 實(shí)施例1-4
[0022] -種博萊霉素微球長效注射劑，采用如下工藝制備而成：將博萊霉素制成殼聚糖 微球，靜置，加注射用水稀釋，精濾，灌封，滅菌，其特征在于：殼聚糖微球的具體步驟為：
[0023] (1)將殼聚糖溶于1-3%冰乙酸溶液中，W/V比為a:32,攪拌溶解得殼聚糖冰醋酸 溶液，其中，攪拌溫度為45_55°C，加熱方式為蒸汽加熱；
[0024] (2)將博萊霉素溶于步驟⑴殼寡糖冰醋酸溶液中，V/V比為b: c，得混合溶液B ;
[0025] (3)將混合物B緩慢加入乳化劑中，高速磁力攪拌35-50分鐘，V/V比為1: d，溫度 控制在50-55°C，用pH調(diào)節(jié)劑將pH調(diào)至7. 8-9. 2,其中，乳化設(shè)備是帶有隔層的乳化鍋，轉(zhuǎn) 速1000-2000rpm，得乳化液C后；將超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1: e，中速攪拌至 室溫得穩(wěn)定的乳化液D;
[0026] (4)連續(xù)攪拌乳化液D，將交聯(lián)劑戊二醛加入乳化液D中，交聯(lián)反應(yīng)2. 5-3. 5小時， V/V 比為 f:g;
[0027] (5)交聯(lián)反應(yīng)完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得 固體混合物E ;
[0028] (6)用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 2-4次，并離心；
[0029] (7)將步驟（6)沉淀物干燥，得黃褐色載有博萊霉素的殼聚糖微球；
[0030] 優(yōu)選的，所述博萊霉素長效注射劑濃度為2mg/ml時，包埋率為78. 4%。
[0031] 優(yōu)選的，所述博萊霉素長效注射劑濃度為3mg/ml時，包埋率為81. 2%。
[0032] 優(yōu)選的，所述博萊霉素長效注射劑前15天內(nèi)含物溶出率為75%，30天內(nèi)，仍有 15 %藥物未釋放。
[0033]
[0034] 實(shí)施例5
[0035] 藥物包埋率的測定
[0036] 稱取lOOmg干燥微囊，加入5mL 10%的EDTA溶液，超聲至微囊完全破碎，于 4000r/min離心30min，取上清液，沉淀加5mL蒸餾水，合并上清液，定容至50mL，于280nm下 測藥物含量。
[0037] 實(shí)施例6
[0038] 體外釋放實(shí)驗(yàn)
[0039] 稱取100mg干燥微囊置于10mL生理鹽水（含0? 01 %疊氮化鈉），12小時、15天后 取5mL溶液，用紫外分光光度計(jì)法測定藥物的含量，同時加入等量新鮮釋放液保持恒定體 積。
[0040] 實(shí)施例7
[0041] 微囊中博萊霉素的完整性分析
[0042] 將未經(jīng)包埋的博萊霉素和從微囊中抽提的博萊霉素，同時用12%的聚丙烯酰胺凝 膠進(jìn)行SDS-PAGE電泳；電泳儀為Bio-Rad公司的Mini-protein系統(tǒng).比較電泳后的蛋白 質(zhì)譜帶以判斷包埋前、后博萊霉素結(jié)構(gòu)的完整性。
[0043]
[0044] 上述參照實(shí)施例是對該防治水產(chǎn)動物細(xì)菌性腸炎的中藥組合物的制備方法的詳 細(xì)描述，是說明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列舉出若干個實(shí)施例，因此在不脫 離本發(fā)明總體構(gòu)思下的變化和修改，應(yīng)屬本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種博萊霉素微球長效注射劑，采用如下工藝制備而成：將博萊霉素制成殼聚糖微 球，靜置，加注射用水稀釋，精濾，灌封，滅菌，其特征在于：殼聚糖微球的具體步驟為： (1) 將殼聚糖溶于1-3%冰乙酸溶液中，W/V比為1-1. 8:32,攪拌溶解得殼聚糖冰醋酸 溶液，其中，攪拌溫度為45-55°C，加熱方式為蒸汽加熱； (2) 將博萊霉素溶于步驟（1)殼寡糖冰醋酸溶液中，V/V比為1-3:3-1，得混合溶液B ; (3) 將混合物B緩慢加入乳化劑中，高速磁力攪拌35-50分鐘，V/V比為1:35-45,溫度 控制在50-55°C，用pH調(diào)節(jié)劑將pH調(diào)至7. 8-9. 2,其中，乳化設(shè)備是帶有隔層的乳化鍋，轉(zhuǎn) 速1000-2000rpm，得乳化液C后；將超純水緩慢加入乳化液C中，V/V比為1:10-30,中速攪 拌至室溫得穩(wěn)定的乳化液D ; (4) 連續(xù)攪拌乳化液D，將交聯(lián)劑戊二醛加入乳化液D中，交聯(lián)反應(yīng)2. 5-3. 5小時，V/V 比為 1-10:2-9 ; (5) 交聯(lián)反應(yīng)完成后，低速離心（50rpm，20-30分鐘）后靜置30分鐘，棄上清液，得固體 混合物E ; (6) 用無水乙醇和丙酮交替洗滌沉淀混合物E 2-4次，并離心； (7) 將步驟（6)沉淀物干燥，得黃褐色載有博萊霉素的殼聚糖微球。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種博萊霉素長效注射劑，其特征在于，所述博萊霉素長效 注射劑濃度為2mg/ml時，包埋率為78. 4%。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種博萊霉素長效注射劑，其特征在于，所述博萊霉素長效 注射劑濃度為3mg/ml時，包埋率為81. 2%。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種博萊霉素長效注射劑，其特征在于，所述博萊霉素長效 注射劑前15天內(nèi)含物溶出率為75%，30天內(nèi)，仍有15%藥物未釋放。
【文檔編號】A61K38/14GK105853995SQ201510030039
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2015年1月21日
【發(fā)明人】田東奎, 何磊
【申請人】天津法莫西醫(yī)藥科技有限公司