一種豆腐果苷酯衍生物制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了豆腐果苷酯衍生物及其合成方法。該方法是在非水介質(zhì)中加入豆腐果苷和?；w，豆腐果苷的濃度為1.0-40mg／mL，?；w與豆腐果苷的摩爾比為1-20：1，按豆腐果苷與酶制劑的質(zhì)量比為0.1-10：1加入脂肪酶，在溫度為30-60℃、振蕩速度為100-300rpm和常壓條件下，轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)0.5～72小時，制得豆腐果苷的酯類化合物。本發(fā)明合成了多種結(jié)構(gòu)新穎、具有潛在藥用價值的豆腐果苷酯衍生物。其酶法?；哂蟹磻?yīng)條件溫和、環(huán)境友好、區(qū)域選擇性高、反應(yīng)過程簡單可控和產(chǎn)物易分離的優(yōu)點。
【專利說明】一種豆腐果苷酯衍生物制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于酶化工領(lǐng)域，涉及豆腐果苷酯衍生物及其酶催化制備方法。
【背景技術(shù)】 [0002]藥物的化學結(jié)構(gòu)修飾是基于保持藥物原有的基本骨架結(jié)構(gòu)，僅對其中某些官能團進行化學修飾。通過修飾改變或改善原有的理化性質(zhì)，是新藥研究上極其重要的手段。在藥物研究和應(yīng)用的過程中，常會出現(xiàn)一些影響藥效和藥物應(yīng)用的因素。如藥代動力學性質(zhì)不理想而影響藥物的吸收，導致生物利用度較低，或由于化學結(jié)構(gòu)的特點所致代謝速度過快或過慢等情況；也會由于藥物作用的特異性不強，選擇性不高，產(chǎn)生毒副作用；還有一些其他原因，如化學穩(wěn)定性差、溶解性能差、有不良的氣味或味道、對機體產(chǎn)生刺激性或疼痛等。這就需要對藥物的化學結(jié)構(gòu)進行修飾，以克服上述缺點，增強療效。
[0003]從自然界中尋找活性先導化合物，再進行結(jié)構(gòu)修飾，以提高其生物利用度是創(chuàng)新藥物的一條重要思路。如作為新一代新型惡性痢疾新藥蒿甲醚則是將天然產(chǎn)物中提取得到的青蒿素醚化后的衍生物。豆腐果苷(Helicid)，即4-甲酰苯基β -D-吡喃阿洛糖苷，最初是由山龍眼科三龍眼屬(Helicia Lour.)植物的果實中分離得到的一種糖苷類化合物，具有鎮(zhèn)靜安眠、鎮(zhèn)痛、抗炎等藥理活性，但在應(yīng)用中存在脂溶性較差、起效慢、生物利用度低等問題，限制了該藥的應(yīng)用范圍。藥理活性研究表明，豆腐果苷的酯衍生物具有比親代化合物更高的抗酪氨酸酶和乙酰膽堿酯酶活性。
[0004]由于豆腐果苷糖環(huán)上羥基眾多，且反應(yīng)活性相似。采用一般化學方法直接酯化時，區(qū)域選擇性低，易產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物，產(chǎn)物分離困難；為合成確定位置?；漠a(chǎn)物，需要對糖環(huán)特定羥基進行保護和去保護等操作，反應(yīng)步驟多、工藝復雜；同時該方法采用堿性催化劑，易產(chǎn)生含堿廢液，對環(huán)境造成嚴重污染。而酶法合成避免了繁瑣的保護和去保護等復雜的反應(yīng)步驟，反應(yīng)條件溫和、對環(huán)境友好，所得產(chǎn)物純度高。因此，酶催化糖苷區(qū)域選擇性?；且粭l具有廣闊前景的替代途徑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服母藥豆腐果苷在臨床上應(yīng)用的不足，提供一類豆腐果苷酯衍生物。
[0006]本發(fā)明的另一目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，提出酶催化合成上述化合物的方法。
[0007]本發(fā)明以羧酸乙烯酯、酸酐、羧酸甲酯或羧酸乙酯為酰基供體，利用酶催化豆腐果苷進行酰化反應(yīng)，合成豆腐果苷的單酯化合物。該方法區(qū)域選擇性高，產(chǎn)率高、產(chǎn)物純度高，工藝簡單可控。
[0008]本發(fā)明的目的通過如下技術(shù)方案實現(xiàn):
[0009]一種酶催化合成豆腐果苷酯類化合物的方法:在非水介質(zhì)中，加入豆腐果苷和?；w，豆腐果苷的濃度為1.0-40mg / mL，?；w與糖苷的摩爾比為1:1_20:1，按豆腐果苷與酶制劑的質(zhì)量比為0.1-10:1加入酶，在溫度為30-60°C、振蕩速度為100-300rpm和常壓條件下，轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)0.5~72小時，制得豆腐果苷的酯類化合物。
[0010]所述?；w為羧酸乙烯酯、酸酐、羧酸甲酯或羧酸乙酯；
[0011]所用的酶制劑為來源于南極假絲酵母(Candida antarctica B)、嗜熱絲孢菌(Thermomyces Ianuginosus)、根霉(Rhizomucor miehei)、洋蔥假單胞菌(Pseudomonascepacia)、皺落假絲酵母(Candida rugosa)、米赫毛霉(Mucor miehei)中的一種或由其中兩種組成的組合生物催化劑；
[0012]所述的非質(zhì)子有機溶劑優(yōu)選為四氫呋喃、丙酮、乙腈、二噁烷、叔丁醇、二甲基亞砜、N，N-二甲基甲酰胺、吡唆、異丙醚、異辛烷、正己烷、正庚烷、正辛烷、正壬烷或環(huán)己烷。
[0013]所述的含低親核性陰離子的離子液中的陰離子優(yōu)選為四氟硼酸根離子、六氟磷酸根離子、二(三氟甲基磺酰)亞胺離子或氨基酸離子；陽離子優(yōu)選為1-烷基-3-甲基咪唑離子、1-烷基_2，3- 二甲基咪唑離子、季銨離子、季磷離子、氨基酸離子或N-烷基吡啶離子。
[0014]所述的非水介質(zhì)為非質(zhì)子有機溶劑中的兩種，兩種非質(zhì)子有機溶劑體積比為1-19:1。
[0015]所述的非水介質(zhì)為非質(zhì)子有機溶劑中的一種和含低親核性陰離子的離子液中的一種；其中離子液在混合體系中體積含量為5-95%。
[0016]所述分離純化方法為反應(yīng)結(jié)束后，過濾除酶、真空濃縮，再用甲醇、乙醇或者乙酸乙酯結(jié)晶，或者經(jīng)過硅膠柱層析得到目標產(chǎn)物。
[0017]本發(fā)明與現(xiàn)有的技術(shù)相比具有如下的優(yōu)點:
[0018]I)采用高效的生物催化劑——酶催化豆腐果苷酯衍生物合成。酶促反應(yīng)具有高度選擇性，并且可以通過選擇不同的酶或組合生物催化劑合成豆腐果苷酯衍生物，因此克服了傳統(tǒng)化學方法選擇性低、易`生成副產(chǎn)物、需要保護和脫保護操作及產(chǎn)率低等缺點；
[0019]2)本發(fā)明無需基團保護和脫保護操作，反應(yīng)過程簡單易控，產(chǎn)物易分離；
[0020]3)本發(fā)明在溫度為30-60°C、振蕩速度為100-300rpm、常壓條件下，利用酶催化制備豆腐果苷酯衍生物，反應(yīng)條件溫和、環(huán)境友好。
【具體實施方式】
[0021]為更好理解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，但是本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于實施例的范圍。
[0022]實施例1:豆腐果苷6'-乙酸酯的合成
[0023]將豆腐果苷(57mg, 0.2mmol)、乙酸乙烯酯(1.5mmol)、20mL無水四氫呋喃加入50mL具塞三角瓶中混勻后，于其中加入200mg南極假絲酵母(Candida antarctica B)常壓下于35°C、300rpm的恒溫振蕩器內(nèi)振蕩，利用薄層層析法(TLC)監(jiān)控反應(yīng)。反應(yīng)4h后，過濾、真空濃縮濾液、柱層析(石油醚(PE) / 7酸乙酯(EA)=I / 4,Rf=0.25)純化，得白色粉末產(chǎn)物50mg，收率為76%，純度大于99 %。結(jié)構(gòu)通過13C NMR (100.5MHz)和1H NMR(400MHz)確認。
[0024]核磁數(shù)據(jù)如下:?NMR: Sppm2.01(s，3，H2" ), 3.46-3.55 (m, 2, H2 ; +H3 ')，
4.01(apparent dd,2, J=16.3,5.6Hz, H4 ; +H5 ' )，4.10 (dd，1，J=Il.7，6.6Hz，H6 ')，
4.27-4.31(m, )，4.98 (d，1，J=7.4Hz，Hl' ), 5.15 (d, I, J=3.7Hz, 0H4/ ), 5.28 (dd,2，J = 7.9Ηζ，0Η2/ +0Η3/ )，7.19 (d，2，J = 8.7Hz, Η2+Η6), 7.89 (d，2，J=8.7Hz, Η3+Η5)，9.90(s，1，0Η7).13C NMR: δ ppm20.62(C2" ) ,63.59(C6/ ) ,67.13(C4/ ) ,69.97(C2/ )，71.28(C3' )，71.44(C5' ),97.85 (Cl' )，116.29 (C2+C6)，130.52 (C4)，131.59 (C3+C5)，162.06 (Cl)，170.24 (Cl " ), 191.42 (C7).[0025]實施例2:豆腐果苷6' - 丁酸酯的合成
[0026]將豆腐果苷(57mg,0.2mmol)、乙酸乙烯酯(2mmol)、20mL正己燒/四氫呋喃(I / 4, V / v)加入50mL具塞三角瓶中混勻后，于其中加入400mg來源于嗜熱絲孢菌(Thermomyces Ianuginosus)的固定化脂肪酶，常壓下于40°C、200rpm的恒溫振蕩器內(nèi)振蕩，利用薄層層析法(TLC)監(jiān)控反應(yīng)。反應(yīng)2h后，過濾、真空濃縮濾液、柱層析(石油醚(PE) /乙酸乙酯(EA)=I / 4，Rf=0.25)純化，得白色粉末產(chǎn)物55mg，收率為78 %，純度大于99%。結(jié)構(gòu)通過13C NMRdO0.5MHz)和1HNMR(400MHz)確認。核磁數(shù)據(jù)如下:1HNMR: δ ppm0.85 (t, 3，J=7.5，H4")，1.51 (q, 2，J=7.3Hz, H3" )，2.27 (td, 2，J=7.2，1.4Hz,H2")，3.42-3.53(m，2，H2 ' +H3 ' )，3.95-4.04 (m，2，H4 ' +H5 ' )，4.09 (dd，1，J=Il.7，7.0Hz, H6/ ),4.31 (apparent dd, I, J= 11.9, 2.0Hz, H6; )，4.97 (d，1，J = 7.4Hz，Hl')，
5.14 (d, I, J=3.8Hz, 0H4 ' )，5.25 (dd，2，J=12.7，7.3Hz，0H2 ' +0H3 ' ),7.18 (d, 2,J=12.0Hz，H2+H6)，7.88(d，2，J=8.0HZ，H3+H5)，9.90 (s, 1，0H7).13C NMR: δ ppml3.35 (C4")，17.87(C3" )，35.32(C2" )，63.52(C6' )，67.24(C4' )，69.95(C2' )，7L28(C5')，71.55(C3' ) ,97.80 (Cl ' )，116.30 (C2+C6)，130.52 (C4)，131.54 (C3+C5)，162.07 (Cl)，172.58 (Cl" ), 191.43 (C7).[0027]實施例3:豆腐果苷6'-己酸酯的合成
[0028]將豆腐果苷(114mg,0.4mmol)、己酸乙烯酯(4mmol)、20mL異丙醚/四氫呋喃(I /19, V / V)加入50mL具塞三角瓶中混勻后，于其中加入500mg來源于根霉(Rhizomucormiehei)脂肪酶，常壓下于40°C、150rpm的恒溫振蕩器內(nèi)振蕩，用TLC監(jiān)控反應(yīng)。反應(yīng)2h后，過濾、真空濃縮濾液、柱層析(石油醚(PE) /乙酸乙酯(EA)=4 / 1，Rf=0.25)純化，得白色粉末產(chǎn)物122mg，收率為80%，純度大于99%。結(jié)構(gòu)通過13C NMR(100.5MHz)和1HNMR(400MHz)確認。核磁數(shù)據(jù)如下=1H NMR: δ ppm0.80 (apparent t, 3, H6-)，1.16-1.24 (m, 4,H4"+H5〃 )，1.45-1.54 (m，2，H3,, ),2.28 (td, I, J=7.3，1.3HZ，H2〃 )，3.44-3.55 (m，2，H2, +H3,)，3.94-4.04 (m, 2, H4, +H5, ),4.10 (apparent dd, I, J=Il.7, 7.1Hz, H6/ ), 4.32 (apparent d,1，J=8.0Hz，H6, )，4.97(d，1，J=7.4Ηζ，Η )，5.15 (d，1，J=3.8Hz，OH4, )，5.26 (dd，2，J=14.7，7.3Hz, OH2, +OH3, ),7.18 (apparent d, 2, J=8.0Hz, H2+H6), 7.88 (apparent d, 2, J=8.0Hz,H3+H5) ,9.90 (s, I, OH7).13C NMR: δ ppm13.69 (C6〃)，21.71 (C5〃)，24.06 (C4〃)，30.58(Cr )，33.42 (Cr )，63.54 (C6, ),67.29 (C4, ),69.97 (C2, ),71.28 (C5, ),71.54 (C3, ),97.78((^,)，116.27 (C2+C6)，130.50 (C4)，131.52 (C3+C5)，162.07 (C1)，172.70 (C1" ), 191.31 (C7).[0029]實施例4:豆腐果苷6'-辛酸酯的合成
[0030]將豆腐果苷(57mg,0.2mmol)、辛酸乙烯酯(2mmol)、20mL異丙醚/乙腈(I /
5,V / V)加入50mL具塞三角瓶中混勻后，于其中加入SOOmg來源于洋蔥假單胞菌(Pseudomonas cepacia)脂肪酶，常壓下于45°C、250rpm的恒溫振蕩器內(nèi)振蕩，用TLC監(jiān)控反應(yīng)。反應(yīng)1.5h后，過濾、真空濃縮濾液、柱層析(石油醚(PE) /乙酸乙酯(EA)=4 /1，Rf=0.25)純化，得白色粉末產(chǎn)物70mg，收率為85%，純度大于99 %。結(jié)構(gòu)通過13CNMRdO0.5MHz)和 1H NMR(400MHz)確認。核磁數(shù)據(jù)如下=1HNMR: δ ppm0.82 (t，3，J=6.7Hz,H8 ,, )，1.15-1.23 (m，8，H4 ,, +H5 ,, +H6 ,, +H7")，1.44-1.56 (m，2，H3 ,, ),2.28 (t，2，J=7.4Hz,H2,, ) ,3.43-3.48 (m, 1，H3, )，3.52 (td, 1，J=7.2,2.7Hz, H2, )，3.96-4.03 (m, 2, H4, +H5,)，4.06-4.ll(m，l，H6, ),4.31 (apparent dd, I, J=Il.8,2.0HzjH6, ) ,4.96 (d, I, J=7.2Hz,H1,)，5.13 (apparent dd, I, J=8.8, 3.8Hz, OH4, ), 5.20-5.30 (m, 2, OH2, +OH3, ), 7.16-7.19 (m,2，H2+H6), 7.86-7.89 (m，2，H3+H5), 9.90 (s, 1，OH7).13C NMR: δ ppml3.85(C8〃 ) ,21.96 (Cr )，24.40 (C3? )，28.30 (C5? )，28.37 (Cr ) ,31.05 (C6? )，33.49 (C2? )，63.56 (C6, )，67.30 (C4,)，69.97 (C2 , ),71.29 (C5 , ),71.54 (C3 , ) ,97.82 (C1 , ), 116.27 (C2+C6), 130.50 (C4)，131.51 (C3+C5)，162.09 (C1)，172.70 (C1" ), 191.27 (C7).[0031]實施例5:豆腐果苷6'-葵酸酯的合成
[0032]將豆腐果苷(114mg,0.4mmol)、葵酸乙烯酯(6mmol)、20mL[C4MIm]PF6 / 四氫呋喃(I / 9, V / V)加入50mL具塞三角瓶中混勻后，于其中加入600mg來源于皺落假絲酵母(Candida rugosa)脂肪酶，常壓下于40°C、250rpm的恒溫振蕩器內(nèi)振蕩，利用TLC監(jiān)控反應(yīng)。反應(yīng)2h后，過濾、真空濃縮濾液、柱層析(石油醚(PE) /乙酸乙酯(EA)=4 /1，Rf=0.27)純化，得白色粉末產(chǎn)物143.8mg，收率為82%，純度大于99 %。結(jié)構(gòu)通過13CNMRdO0.5MHz)和 1H NMR(400MHz)確認。核磁數(shù)據(jù)如下=1HNMR: δ ppm0.83 (t，3，J=6.8Hz,H12,, )，1.18-1.21 (m, 12，H4,, +H5,, +H6,, +Hr +H8,, +H9,, )，1.47 (p，2，J=7.1 HZ, H3,, )，2.27 (t，2，J=7.4Hz，H2,, )，3.51-3.55(m，2，H2, +H3, )，3.98—4.04 (m，2，H4, +H5, ) ,4.10 (dd，1，J=Il.7，
7.1Hz, H6, ) ,4.32 (d, 1,J= 11.6Hz, H6, ) ,4.97 (d, 1，J=7.4Hz, H1, )，5.15 (apparent d,1，J=3.8Hz, OH4, ) ,5.26 (t, 2, J=7.2Hz, OH2, +OH3, ),7.17 (d, 2, J=8.4Hz, H2+H6)，7.87 (d，2，J=8.3HZ, H3+H5), 9.89 (s, 1，OH7).13C NMR: δ ppml3.83(C10〃 ),22.03(C9〃 ), 24.40 (C3? )，28.43 (Cr )，28.60 (Cr )，28.67 (C6? )，28.80 (C5? ) ,31.22 (C8? )，33.49 (C2? )，63.58 (C6,)，67.32 (C4 , ) ,69.98 (C2 , ) ,71.26 (C5 , ) ,71.54 (C3 , ),97.84? , )，116.26 (C2+C6)，130.49 (C4)，131.47 (C3+C5)，162.10 (C1)，172.67 (C1,, ), 191.16 (C7).
[0033]實施例6:豆腐果苷6'-月桂酸酯的合成
[0034]將?腐果苷(57mg,0.2mmol)、月桂酸甲酯(2mmol)、20mL[C6MIm]PF6 / 叔丁醇(I / 9，V / V)加入50mL具塞三角瓶中混勻后，于其中加入600mg來源于嗜熱絲孢菌(Thermomyces Ianuginosus)脂肪酶，常壓下于50 °C、200rpm的恒溫振蕩器內(nèi)振蕩，利用TLC監(jiān)控反應(yīng)。反應(yīng)4h后，過濾、真空濃縮濾液、柱層析(石油醚(PE) /乙酸乙酯(EA)=4 / 1，Rf=0.27)純化，得白色粉末產(chǎn)物85mg，收率為91%，純度大于99%。結(jié)構(gòu)通過 13C NMR(100.5MHz)和1H NMR(400MHz)確認。核磁數(shù)據(jù)如下,HNMR:δ ppm0.85 (apparent t, 3, J=6.6Hz, H12" )，1.19-1.24 (m, 16, H4" +H5" +H6,, +H7" +H8,, +H9,, +Hio" +H1!? ), 1.48 (apparent t, 2, J = 7.3Hz, H3,, '),2.28 (t, 2, J=7.5Hz, H2,, )，3.42-3.53 (m,2，H2, +H3, ) ,3.95-4.02 (m，2，H4, +H5, ) ,4.08 (dd, 1，J=Il.7,7.1Hz, H6, ) ,4.30 (d, 1,J =11.4Hz, H6, )，4.96(d，1，J=7.4Hz，H1, )，5.14 (d，1，J=3.8Hz，OH4, ), 5.24 (apparent dd,2，J = 10.3，7.4Hz, OH2, +OH3, )，7.17 (d, 2，J=8.4Hz, H2+H6)，7.87 (d, 2，J=8.3Hz, H3+H5)，9.90 (s, I, 0H7).13C NMR: δ ppml3.91 (C12^), 22.05 (C11 〃 ), 24.40 (C3 〃 ), 28.42 (C4 ? )，28.66 (C5,, +C9,, )，28.83 (C7,, )，28.94 (C6,, +C8 〃 ),31.25 (C10")，33.48 (C2,, )，63.56 (C6,)，67.29 (C4 , ),69.96 (C2 , ),71.28 (C5 , ),71.53 (C3 , ) ,97.83 (C1 , ), 116.27 (C2+C6),130.50 (C4)，131.52 (C3+C5)，162.09 (C1)，172.70 (C1,, ), 191.27 (C7).[0035]實施例7:豆腐果苷6'-甲基丙烯酸酯的合成
[0036]將豆腐果苷(57mg, 0.2mmol)、甲基丙烯酸乙烯酯(3mmol)、20mL[C4MIm]BF4 /乙腈(I / 19, V / V)加入50mL具塞三角瓶混勻后，于其中加入400mg嗜熱絲孢菌(ThermomycesIanuginosus)脂肪酶，常壓下于55°C、150rpm的恒溫振蕩器內(nèi)振蕩，利用TLC監(jiān)控反應(yīng)。反應(yīng)8h后，過濾、真空濃縮濾液、柱層析(石油醚(PE) /乙酸乙酯(EA)=4 / 1，Rf=0.25)純化，得白色粉末產(chǎn)物48mg，收率為75%，純度大于99 %。結(jié)構(gòu)通過13C NMR (100.5MHz)和1H NMR(400MHz)確認。核磁數(shù)據(jù)如下:? NMR:.δ ppml.88 (S，3，H4,, )，3.43-3.55 (m，2，H2 , +H3, ),3.97 (apparent d, I, J=3.2Hz, H4, ), 4.03-4.13 (m, 2, H5+H6 , ), 4.42 (d, I,J=I0.0Hz, H6, )，5.01(d，l，J=7.4Hz, H1, )，5.15(d, I, J=6.3Hz, OH4, )，5.25(dd，2，J =13.5,7.4Hz, OH2, +OH3, )，5.71(s，l，H3" ) ,6.07 (s, I, H3")，7.18 (d，2，J = 8.7Hz, H2+H6)，7.84 (d，2，J = 8.7HZ, H3+H5), 9.90 (s, 1，OH7).13C NMR: δ ppml7.93 (C4 ,, ) ,64.29 (C6 丨)，67.37 (C4 , ) ,69.97 (C2 , ) ,71.34 (C5 , ) ,71.55 (C3 , ) ,97.83 (C1 , )，116.30 (C2+C6)，125.85 (C3 〃 ), 130.54 (C4), 131.50 (C3+C5), 135.79 (C2 〃 ), 162.0i(C1), 166.35(^ 〃)，191.46 (C7).[0037]實施例8:豆腐果苷6'-巴豆酸酯的合成
[0038]將豆腐果苷(57mg, 0.2mmol)、巴豆酸乙烯酯(2mmol)、20mL[C6MIm]BF4 /四氫呋喃(I / 19, V / V)加入50mL具塞三角瓶混勻后，于其中加入500mg嗜熱絲孢菌(ThermomycesIanuginosus)脂肪酶,常壓下于50°C、180rpm的恒溫振蕩器內(nèi)振蕩,利用TLC監(jiān)控反應(yīng)。反應(yīng)24h后，過濾、真空濃縮濾液、柱層析(石油醚(PE) /乙酸乙酯(EA) = 4 / l,Rf=0.25)純化，得白色粉末產(chǎn)物51mg，收率為80%，純度大于99 %。結(jié)構(gòu)通過13C NMR (100.5MHz)和 1H NMR(400MHz)確認。核磁數(shù)據(jù)如下=1H NMR: δ ppml.86(dd，3，J=6.9，1.6HZ, H4,,)，
3.47-3.53 (m，2，H2 , +H3, )，3.97 (s, 1，H4, )，4.01-4.06 (m, 1，H5, )，4.14 (dd, 1，J=Il.8，6.9ΗΖ，Η6, )，4.34(dd，1，J=Il.7，1.7ΗΖ，Η6, ), 4.99 (apparent s, LH1, )，5.15 (s，1，OH4,)，
5.26 (d，2，J=8.0Hz, OH2, +OH3, )，5.90 (dd, 1,J= 15.5，1.7Hz, H2? )，6.90 (dq, 1，J=13.8，
6.9Hz, H3,, )，7.17 (d，2，J=8.7Ηζ, Η2+Η6)，7.86 (d，2，J = 8.8Ηζ, Η3+Η5)，9.90 (S，1，OH7).13CNMR: δ ppml7.66 (C4? ), 63 .51 (C6, ),67.26 (C4, ),69.97 (C2, ) ,71.33 (C5, ),71.49 (C3,)，97.84? , ), 116.34(C2+C6), 122.13 (C3 〃 ), 130.50 (C4), 131.56 (C3+C5), 145.34 (C2 〃 ),162.04 (C1)，165.37 (C1,, ), 191.44 (C7)。
【權(quán)利要求】
1.豆腐果苷酯衍生物，其特征在于:其結(jié)構(gòu)如通式(I)所示:
2.一種如權(quán)利要求1所述的豆腐果苷酯類衍生物的制備方法，其特征在于:在有機溶劑或含離子液介質(zhì)中，加入豆腐果苷和?；w，豆腐果苷的濃度為1.0-40mg / mL，?；w與豆腐果苷的摩爾比為1-20:1，按糖苷與酶制劑的質(zhì)量比為0.1-10:1加入酶，在溫度為30-60°C、振蕩速度為100-300rpm和常壓條件下，轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)0.5~72小時，分離純化制得豆腐果苷的酯類衍生物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于酰基供體為羧酸乙烯酯、酸酐、羧酸甲酯或羧酸乙酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所用的酶制劑為來源于南極假絲酵母(Candida antarctica B)、嗜熱絲抱菌(Thermomyces Ianuginosus)、根霉(Rhizomucormiehei)、洋蔥假單胞菌(Pseudomonas cepacia)、皺落假絲酵母(Candida rugosa)、米赫毛霉(Mucor miehei)中的一種或由其中兩種組成的組合生物催化劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所用的組合生物催化劑中兩種固定化酶的重量比為1:1-1:10o
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:所述的有機溶劑為四氫呋喃、丙酮、乙腈、二噁烷、叔丁醇、二甲基亞砜、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶；含離子液介質(zhì)為離子液與上述其中一種有機溶劑的混合溶劑，離子液含量為5%-95% (V / V)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所用離子液的陰離子為四氟硼酸根離子、六氟磷酸根離子、二(三氟甲基磺酰)亞胺離子或氨基酸離子；陽離子為1-烷基-3-甲基咪唑離子、1-烷基_2，3- 二甲基咪唑離子、季銨離子、季磷離子、氨基酸離子或N-烷基吡啶離子。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的豆腐果苷酯衍生物的合成方法，其特征在于:所述分離純化方法為反應(yīng)結(jié)束后，過濾除酶、真空濃縮，再用甲醇、乙醇或者乙酸乙酯結(jié)晶，或者經(jīng)過硅膠柱層析得到目標產(chǎn)物。
【文檔編號】C07H15/203GK103554199SQ201310565734
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月14日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月14日
【發(fā)明者】楊榮玲, 劉學銘, 陳智毅, 林耀盛, 楊春英, 王思遠, 唐秋實 申請人:廣東省農(nóng)業(yè)科學院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所