專利名稱：以3S-四氫-β-咔啉-3-羧酸為連接臂的雜交肽、其制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種雜交肽，尤其涉及以3S-四氫-β-咔啉-3-羧酸為連接臂的雜交 肽、其制備方法，本發(fā)明還涉及該雜交肽作為及應(yīng)用溶血栓劑的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
目前臨床使用的治療急性血栓栓塞性疾病的鏈激酶、尿激酶和重組組織型纖溶酶 原激活劑等藥物普遍存在全身出血傾向和免疫原性反應(yīng)，尋找安全有效的溶血栓藥物是新 藥研究的熱點(diǎn)之一。發(fā)明人以纖維蛋白降解產(chǎn)物Ρ6Α(ARPAK)為先導(dǎo)結(jié)構(gòu)，通過液相合成 進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，得到了一系列寡肽(發(fā)明人彭師奇，趙明，王超，唐朝樞，王銀葉；發(fā)明名 稱心血管活性多肽以及它們的合成和在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用；授權(quán)公告號(hào)CN1055479C ；授權(quán)公 告日2000年8月16日)。這些寡肽具有明確的溶血栓活性，成為優(yōu)秀的溶血栓寡肽先導(dǎo) 結(jié)構(gòu)。在研究P6A及類似物的代謝時(shí)，發(fā)明人使用LC/MS跟蹤P6A及類似物在小鼠體內(nèi)的 變化，發(fā)現(xiàn) P6A 在小鼠體內(nèi)降解為 Arg-Pro-Ala-Lys, Pro-Ala-Lys, Ala-Arg-Pro-Ala 禾口 Ala-Arg-Pr0四種代謝產(chǎn)物。發(fā)明人用液相合成法制備了這四種代謝產(chǎn)物，在大鼠血栓模型 上確認(rèn)了它們作為溶血栓劑的應(yīng)用前景(彭師奇，趙明，王超，徐友宣，吳艷芬，P6A的代謝 產(chǎn)物及其在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用，專利申請?zhí)?1136780. 6，中華人民共和國知識(shí)產(chǎn)權(quán)局)。P6A及類似物作為溶血栓寡肽先導(dǎo)結(jié)構(gòu)及P6A的代謝產(chǎn)物作為溶血栓寡肽先導(dǎo)結(jié) 構(gòu)都有固有的改進(jìn)空間，即體內(nèi)存在的蛋白和多肽給它們的檢測造成的困難，以及LC/MS 檢測造成的技術(shù)和經(jīng)濟(jì)困難都有待改進(jìn)。發(fā)明人注意到咔啉羧酸具有優(yōu)秀的抗血小板聚集 作用(姚鑫生等，中國藥物化學(xué)雜志，1995，5，134)，同時(shí)咔啉羧酸的吲哚環(huán)母核具有優(yōu)秀 的紫外吸收性質(zhì)并且作為可食天然產(chǎn)物具有潛在的應(yīng)用前景。發(fā)明人采用化學(xué)方法合成了 咔啉羧酸，并將咔啉羧酸作為藥效團(tuán)引入到P6A及相關(guān)序列中制備擬肽。制得的擬肽包含 了 PAK序列肽的溶栓活性，還包含了咔啉羧酸的抗血小板聚集活性，以及具有紫外可檢測 性(發(fā)明人彭師奇，趙明，王超，吳艷芬；發(fā)明名稱含P6A相關(guān)序列的咔啉羧酸，它們的合 成和在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用；授權(quán)公告號(hào)CN1373139 ；授權(quán)公告日2002年10月9日)。血小板聚集在血栓形成中有重要作用。正常的血小板在凝血酶原、二磷酸腺苷 或膠原的誘導(dǎo)下被激活，釋放花生四烯酸(AA)。AA經(jīng)環(huán)氧化酶催化，生成環(huán)內(nèi)過氧化物 (PGH2)。PGH2在異構(gòu)酶的作用下生成血栓素A2(TXA2)，引起血小板聚集和粘附。血小板激 活后，表面的糖蛋白nb/IIIa(GP Ilb/IIIa)受體暴露，發(fā)生構(gòu)象變化，并與纖維蛋白原結(jié) 合，導(dǎo)致血栓形成。研究GP Ilb/IIIa受體與纖維蛋白結(jié)合的過程中，發(fā)現(xiàn)纖維蛋白之中存 在的RGD序列是介導(dǎo)它自身與GP nb/IIIa結(jié)合的關(guān)鍵序列(Samanen J.，et al.，J.Med.Chem.，1991,34,3114)。發(fā)明人采用液相法合成了 RGDS，RGDV和RGDF，并證實(shí)它們可以抑制 血栓形成(趙明，彭師奇，含RGD四肽的合成與功能，藥學(xué)學(xué)報(bào)，1997，32，271)。發(fā)明人曾報(bào) 道，含RGD的四肽，例如RGDS，可以把溶血栓藥物，例如尿激酶，輸送到血栓形成部位，具有 明確的靶向性(凌世長，趙明，彭師奇，RGDS修飾的脂質(zhì)體作為藥物載體導(dǎo)向溶栓的研究， 北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1994，26，174)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的之一是提供具有溶血栓劑活性的以3S-四氫- β -咔啉-3-羧酸為連 接臂的的雜交肽。本發(fā)明目的之一是通過通式II的化合物IIa-O來實(shí)現(xiàn)的
權(quán)利要求
1.通式II的化合物
2.一種制備權(quán)利要求1所述通式II化合物的方法，包括(1)按照常規(guī)方法分別制備下述三種四肽Arg-Gly-ASp-Ser-0H、 Arg-Gly-Asp-Val-OH, Arg-Gly-Asp-Phe-OH ；將上述三種四肽的C-端和側(cè)鏈用保護(hù)基進(jìn)行 保護(hù)；(2)按照常規(guī)方法制備3S-四氫-β-咔啉-3-羧酸，然后芐基化制備得到3S-四 氫-β-咔啉-3-羧酸芐酯；(3)按照常規(guī)方法分別制備N-端和側(cè)鏈保護(hù)的下述5種短肽Gly-Arg-Pro-Ala-Lys-OH> Gln-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、Ala-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、 Arg-Pro-Ala- Lys-0H>Pro-Ala-Lys-OH ；(4)按照常規(guī)方法先分別將N-端和側(cè)鏈保護(hù)的Gly-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、 Gln-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、Ala-Arg-Pro-Ala-Lys-OH、Arg-Pro-Ala-Lys-OH 或 Pro-Ala-Lys-OH連接到3S-四氫-β -咔啉_3_羧酸芐酯的2位氮上、脫去芐酯基；再分別 把 C-端和側(cè)鏈保護(hù) Arg-Gly-Asp-Ser-OH、Arg-Gly-Asp-Val-OH 或 Arg-Gly-Asp-Phe-OH 連 接到3S-四氫- β -咔啉-3-羧酸的3-位羧基上、脫去所有保護(hù)基，得到通式II化合物。
3.按照權(quán)利要求2所述制備方法，其特征在于所述的3S-四氫-β-咔啉-3-羧酸由 L-色氨酸與甲醛縮合制備得到。
4.一種治療溶血栓的藥物組合物，由有效量的權(quán)利要求1所述的通式II化合物和藥學(xué) 上可接受的載體或輔料組成。
5.權(quán)利要求1所述的通式II化合物在制備溶血栓藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了具有溶血栓活性的通式II的化合物，其制備方法以及它們作為溶血栓劑的應(yīng)用。本發(fā)明采用大鼠頸動(dòng)靜脈旁路插管血栓模型上評(píng)價(jià)了通式II化合物的溶血栓活性，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明通式II的化合物具有優(yōu)秀的溶血栓活性，臨床上可作為溶血栓劑應(yīng)用。
文檔編號(hào)C07K1/06GK102120757SQ201010586608
公開日2011年7月13日 申請日期2007年6月4日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月4日
發(fā)明者崔國輝, 彭師奇, 溫敏, 趙明 申請人:北京大學(xué)