專利名稱：制備某些吡咯并三嗪化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新穎改良的制備某些吡咯并三嗪化合物的方法，該類化合物能抑制生長因子如VEGFR-2和FGFR-1的酪氨酸激酶的活性，因而能將它們用做抗癌劑。除癌癥外，用本發(fā)明方法制備的化合物也能用于治療與通過生長因子及抗血管生成受體如VEGFR-2起作用的信號傳導(dǎo)途徑相關(guān)的疾病。
背景技術(shù)：
正常的血管生成在各種生理活動過程中，如胚胎發(fā)育、傷口愈合、肥胖、女性生育機能的一些組成成分中中起重要作用。非期望的或病態(tài)的血管生成與包括糖尿病性視網(wǎng)膜病，牛皮癬、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動脈粥樣化、卡波西(氏)肉瘤和血管瘤、哮喘、癌癥和轉(zhuǎn)移性疾病在內(nèi)的疾病有關(guān)(Fan et al，1995，Trend Pharmacol.Sci.1657-66；Folkman，1995，Nature Medicine 127-31)。據(jù)認(rèn)為，血管通透性的變化在正常和病理生理過程中都發(fā)揮重要作用(Cullinan-Bove et al，1993，Endocrinology 133829-837；Senger et al，1993 Cancer and MetastasisReviews，12303-324)。
受體酪氨酸激酶(RTKs)在將生物信號傳遞通過細(xì)胞質(zhì)膜過程中具有重要的作用。特別地，這些轉(zhuǎn)膜分子具有一種胞外配體結(jié)合區(qū)域，該區(qū)域通過質(zhì)膜中的片斷與胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)域相連接。配體與受體的結(jié)合刺激產(chǎn)生與受體關(guān)聯(lián)的酪氨酸激酶活性，從而對受體和其他胞內(nèi)蛋白上的酪氨酸殘基進行磷酸化，進而引起各種細(xì)胞響應(yīng)。到目前為止，至少有19個不同的RTK亞家族，是用氨基酸序列同源性劃定的，已被鑒定到。這其中的一個亞家族目前包括fms樣酪氨酸激酶受體、Flt或Flt1(VEGFR-1)、含激酶插入?yún)^(qū)域受體、KDR(也指Flk-1或VEGFR-2)和其他fms樣酪氨酸激酶受體、Flt4(VEGFR-3)。這些相關(guān)的RTKs、Flt和KDR中的其中兩個已經(jīng)顯示出能以很高的親合力結(jié)合血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)(De Vries et al，1992，Science 255989-991；Terman et al，1992，Biochem.Biophys.Res.Comm.1992，1871579-1586)。VEGF與這些在異種細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的受體的結(jié)合，是與細(xì)胞蛋白酪氨酸磷酸化狀態(tài)和鈣流的變化有關(guān)。已經(jīng)證明，VEGF同酸性和堿性纖維原細(xì)胞生長因子(aFGF&bFGF)在體外具有促內(nèi)皮細(xì)胞生長活性。值得指出的是，aFGF和bFGF結(jié)合到稱作FGFR-1的受體酪氨酸激酶上并激活之。依據(jù)其受體的限制性表達(dá)，VEGF的生長因子活性相比起FGFs的生長因子活性對內(nèi)皮細(xì)胞具有相對高的特異性。目前的證據(jù)顯示VEGF對于正常及病態(tài)的血管生成(Jakeman et al，1993，Endocrinology，133848-859；Kolch et al，1995，Breast Cancer Researchand Treatment，36139-155)和血管通透性(Connolly et al，1989，J.Biol.Chem.26420017-20024)都是重要的刺激體。
在成人中，除了在組織更新時，如傷口愈合、女性生育周期、脂肪生成時，內(nèi)皮細(xì)胞具有較低的增殖指數(shù)。然而，在處于病態(tài)時，如癌癥、遺傳性血管疾病、子宮內(nèi)膜異位、牛皮癬、關(guān)節(jié)炎、視網(wǎng)膜病和動脈硬化癥，內(nèi)皮細(xì)胞增殖活躍并組織成血管。一旦受到諸如VEGF和bFGF的生長因子的血管生成刺激，內(nèi)皮細(xì)胞重新進入細(xì)胞周期，增殖、遷移、組織成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。現(xiàn)在普遍認(rèn)為，腫瘤擴散和遷移的能力取決于該血管網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的形成。
VEGF或bFGF與它們相應(yīng)的受體結(jié)合，導(dǎo)致二聚化、酪氨酸殘基自動磷酸化，并產(chǎn)生酶活性。這些磷酸化酪氨酸殘基充當(dāng)特異的下游信號分子的“錨定”位點，而酶活性激活EC活性(胚胎癌活性)。這些途徑的中斷將抑制內(nèi)皮細(xì)胞的激活作用。FGFR-1途徑的的中斷也將影響腫瘤細(xì)胞增殖，因為除了在增殖性內(nèi)皮細(xì)胞中外，這種激酶也在許多類型的腫瘤性細(xì)胞中被激活。最后，目前的證據(jù)也表明VEGF信號傳導(dǎo)的中斷抑制了內(nèi)皮細(xì)胞遷移，內(nèi)皮細(xì)胞遷移是血管網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成過程中一個關(guān)鍵的步驟。
已經(jīng)顯示，在腫瘤相關(guān)的脈管系統(tǒng)中，VEGFR-2和FGFR-1的過量表達(dá)和激活在腫瘤血管生成中發(fā)揮作用。血管生成和隨后的腫瘤生長受到針對VEGF配體和VEGF受體的抗體，以及截短了的(缺少轉(zhuǎn)膜序列和胞質(zhì)激酶區(qū)域)可溶性VEGR-2受體的抑制。引入到VEGFR-2或FGFR-1并導(dǎo)致酶活性喪失的顯性突變能在體內(nèi)抑制腫瘤生長。靶向這些受體或它們的同源配體的反義物質(zhì)(antisense)也能抑制血管生成和腫瘤生長。目前的證據(jù)已經(jīng)部分闡明了在腫瘤生長中對這些受體的瞬時需求。很明顯地，VEGF信號傳導(dǎo)對于早期的腫瘤生長是至關(guān)重要的，而bFGF在與腫瘤擴散相關(guān)的后期更為重要。
依據(jù)本發(fā)明方法獲得益處的化合物包括那些優(yōu)先權(quán)申請以及WO00/71129公開的化合物，將它們以其全部而引入此處作為參考。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了一種制備某些吡咯并三嗪化合物的方法。本發(fā)明方法提供了一種有用、方便、改良了的方法，用于制備吡咯并三嗪衍生物，包含有一個直接連接于吡咯并三嗪環(huán)的羥基。
在一個實施方案中，本發(fā)明方法包括下列步驟將氯取代的吡咯并三嗪與氧化物陰離子反應(yīng)生成醚；將酯轉(zhuǎn)化為芐醇，氧化重排醇形成酚。該羥基化合物隨后被親電子試劑烷基化生成苯氧基取代化合物，再水解生成酰胺化合物。將這酰胺化合物轉(zhuǎn)化為最終化合物，方法是首先形成氯代亞氨酸酯(chloroimidate)，使其與烷化劑如羥基氟吲哚在堿存在下反應(yīng)得到最終化合物，反應(yīng)在極性溶劑中進行。
在第二個實施方案中，本發(fā)明提供了一種使用新穎改良的、可適合用于大規(guī)模生產(chǎn)的工藝制備化合物的氟吲哚部分的方法，并提供高質(zhì)量的氟吲哚衍生物。除此之外，使用在此描述的方法制備的氟吲哚衍生物是穩(wěn)定的固體，容易分離并具有較長時期的穩(wěn)定性，使得該產(chǎn)品比起用其他替代方法制備的氟吲哚衍生物具有更高的質(zhì)量。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了一種制備下述通式所示的某類吡咯并三嗪化合物
和它們的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽、藥物前體及其溶劑合物的方法，這些物質(zhì)能抑制生長因子受體如VEGFR-2的酪氨酸激酶的活性。在通式I和整個說明書中，上述符號定義如下X和Y獨立地選自O(shè)、OCO、S、SO、SO2、CO、CO2、NR10、NR11CO、NR12CONR13、NR14CO2、NR15SO2、NR16SO2NR17、SO2NR18、CONR19、鹵素、硝基、氰基，或者X或Y空缺；R1為氫；R2和R3獨立地選自氫、烷基、取代烷基、鏈稀基、取代鏈稀基、炔基、取代炔基、芳香基、取代芳香基、雜環(huán)、取代雜環(huán)、芳烷基、取代芳烷基、雜芳基、取代雜芳基，雜環(huán)烷基(heterocycloalkyl)或取代雜環(huán)烷基；附帶限制性條件如下，當(dāng)X為鹵素、硝基或氰基時，R2空缺，和，當(dāng)Y為鹵素、硝基、氰基時，R3空缺；R6為H；R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、R17、R18和R19獨立地選自氫、烷基、取代烷基、芳香基、取代芳香基、雜芳基、取代雜芳基、雜環(huán)、取代雜環(huán)；R42為 在(R43)n中，其中n等于0、1或2，且每個R43獨立地選自氫、氟、氯和甲基；和R44為甲基或氫，進一步的限制性條件是a.如果X為SO、SO2、NR13CO2或NR14SO2，R2不能為氫；和b.如果Y為SO、SO2、NR13CO2或NR14SO2，R3不能為氫。
在一個實施方案中，本發(fā)明方法包括下列步驟
a)轉(zhuǎn)化下式所示化合物 其中Re為低級烷基或芳香基，X1為鹵素，至下式化合物1 其中的Rd為低級烷基、芳香基、取代芳香基、雜芳基或取代雜芳基，是通過用酚鹽或醇鹽處理進行轉(zhuǎn)化。
b)對化合物1進行烷基化生成下式所示的化合物2 c)在路易斯酸存在下，用過氧化物處理化合物2生成下式化合物3
d)對化合物3中的酚羥基(phenol group)進行烷基化提供下式化合物4 其中，R2為芐基或取代芐基，e)水解化合物4生成下式化合物5 其中，R2為芐基或取代芐基，和f)將化合物5轉(zhuǎn)化為下式化合物6 通過先將化合物5轉(zhuǎn)化為氯代亞氨酸酯，再對氯代亞氨酸酯進行烷基化得到化合物6，其中R2為芐基。在催化劑存在下，用氫供體處理實現(xiàn)對酚的去保護作用，得到化合物6，其中R2為氫。
在本發(fā)明的第二個實施方案中，下式表示的起始化合物 其中X1為鹵素；與親核試劑反應(yīng)得到下式化合物8 用烷化劑在低溫條件下處理化合物8，得到下式化合物9
然后，將化合物9在路易斯酸存在下用過氧化物處理得到化合物10 在本發(fā)明的一個進一步的實施方案中，氟吲哚片斷能用下述方法制備a)將下式的氟化合物 與親核試劑反應(yīng)生成下式化合物11 b)將化合物11與烷氧基陰離子反應(yīng)，生成下式化合物12
其中R為保護基團，c)用去保護試劑處理，對烷氧基進行去保護，得到下式化合物13 d)在還原性條件下，環(huán)化化合物13得到下式化合物14 在一個優(yōu)選實施方案中，圖解方案1中的步驟1包括將化合物轉(zhuǎn)化為醚，是用親核試劑如酚鹽或醇鹽陰離子處理進行。優(yōu)選地，醇鹽陰離子為甲醇鹽或乙醇鹽陰離子。
圖解方案1的步驟2中優(yōu)選的烷化劑包括烷基鹵化鎂，也就是甲基溴化鎂或甲基氯化鎂，在從大約-25℃至大約25℃的低溫條件下。
步驟3中的化合物2優(yōu)選用過氧化物如過氧化氫或過硼酸鈉處理得到化合物3，是在有機溶劑如二氯甲烷(DCM)中，在路易斯酸如三氟化硼存在的條件下。化合物3在堿如NaH存在下用親電試劑進行烷基化作用，親電試劑如芐基溴或芐基氯，作用溫度約0℃至約100℃。
化合物4用酸處理水解得到化合物5，優(yōu)選是在含水HCl在增高了的溫度下進行?；衔?最終轉(zhuǎn)化為化合物6，通過氯代亞氨酸酯，其隨后被烷基化，優(yōu)選用羥基氟吲哚，反應(yīng)在堿如碳酸鉀或氫化鈉存在下，在極性溶劑如二甲基甲酰胺(DMF)或甲苯中進行，其中優(yōu)選DMF在中進行。通過用氫源如甲酸銨，在催化劑如鈀碳存在下，處理完成芐基去保護作用。
第二個實施方案的優(yōu)選條件包括，在步驟1中，使用親核基團如氟吲哚，在堿如碳酸鉀或氫化鈉存在下，處理化合物7得到化合物8。該反應(yīng)，優(yōu)選在極性溶劑如DMF中進行。步驟2包括用烷化劑如烷基鹵化鎂，如甲基溴化鎂或甲基氯化鎂在-25℃至25℃的低溫下處理化合物8。在優(yōu)選實施例中，步驟3包括用用過氧化物，如過氧化氫或過硼酸鈉在路易斯酸，如三氟化硼存在的下，在約-25℃至約25℃之間處理化合物9，得到化合物10。
制備吲哚側(cè)鏈時，起始氟化物(在本例子中為三氟硝基苯)能與親核基團如乙酰乙酸乙酯或乙酰乙酸丁酯反應(yīng)，然后在酸或堿，優(yōu)選含水酸存在下對酯基團進行脫羧作用。在步驟2中，化合物11與烷氧基陰離子如甲醇鈉或甲醇，在堿如碳酸鉀或苯甲醇的鈉鹽存在下反應(yīng)，得到化合物12。然后，對烷氧基或芐氧基基團用去保護劑，如氯化吡啶或溴化氫，在乙酸中進行去保護作用，得到化合物13。在最后一步中，在還原性條件下，優(yōu)選使用還原劑如連二硫酸鈉或鈀碳，在氫源存在下環(huán)化化合物13，得到需求的吲哚化合物。
本發(fā)明也提供了一種包含通式I或II化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。
本發(fā)明也提供了一種包含通式I或II化合物及藥學(xué)上可接受的載體和一種抗癌或細(xì)胞毒素劑的藥物組合物。在優(yōu)選實施例中，所述抗癌或細(xì)胞毒素劑選自間四羥基苯二氫卟吩、整聯(lián)蛋白αvβ3功能抑制劑、血管生長抑素、丙亞胺、它莫西芬、枸櫞酸托瑞米芬、雷洛昔芬〔一種選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑〕、屈洛昔芬、愛多昔芬(iodoxifene)、醋酸甲地孕酮、阿那曲唑、來曲唑、硼嗪(borazole)、依西美坦、氟它胺、泥魯米特、比卡他胺、醋酸環(huán)丙氯地孕酮、醋酸戈舍瑞林、醋酸亮丙瑞林；非那雄胺(finasteride)、金屬蛋白酶抑制劑、尿激酶血漿酶原激活質(zhì)受體功能抑制劑、生長因子抗體、生長因子受體抗體如Avastin(bevacizumab)和Erbitux(cetuximab)、酪氨酸激酶抑制劑、絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑、氨甲喋呤、5-氟尿嘧啶、嘌呤、腺苷類似物、阿糖胞苷、阿霉素、道諾霉素、表阿霉素、伊達(dá)比星、絲裂霉素-C、放線菌素-D、光神霉素、順鉑、碳鉑、氮芥、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、馬利蘭、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、亞硝基脲、三胺硫酸、長春新堿、Taxol(紫杉醇)、Taxotere(多烯紫杉醇)、埃坡霉素(epothilone)類似物、discodermolide類似物、eleutherobin類似物、依托泊甙、替尼伯甙、安吖啶、鹽酸拓?fù)涮婵?、flavopyridols、生物反應(yīng)改良藥物及蛋白酶抑制劑，如Velcade(bortezomib)。
本發(fā)明也提供了一種抑制生長因子受體的蛋白激酶活性的方法，該方法包括給藥于需要治療的哺乳動物種以能有效抑制蛋白激酶活性劑量的通式I化合物。
此外，本發(fā)明也公開了抑制至少一種生長因子受體的酪氨酸激酶活性的方法，包括給藥于需要治療的哺乳動物種以有效劑量的通式I或者通式II化合物。在一個優(yōu)選實施方案中，所述生長因子受體選自VEGFR-2或FGFR-1。
最后，本發(fā)明公開了一種治療增殖性疾病的方法，包括給藥于需要治療的哺乳動物種以有效劑量的化合物I。在一優(yōu)選實施方案中，增殖性疾病為癌癥。
下面是說明書中可能用到的術(shù)語的定義，除非另外指出，這里對于某基團或者術(shù)語的最初定義單獨或者作為其他基團的一部分運用于整個說明書中。
術(shù)語“烷基”指直鏈或支鏈未被取代的具有1至20個碳原子的烴基，優(yōu)選1至7碳原子。表述“低級烷基”指具有1至4碳原子的未被取代的烷基。
術(shù)語“取代烷基”指烷基被1至4個取代基。如鹵素、羥基、烷氧基、氧代、烷?；?、芳氧基、烷酰氧基、氨基、烷氨基、芳氨基、芳烷氨基(aralkylamino)、取代胺(其中兩個氨基取代基選自烷基、芳香基或芳烷基)、烷酰氨基(alkanoylamino)、芳酰氨基(aroylamino)、芳烷酰氨基(aralkanoylamino)、取代烷酰氨基(alkanoylamino)、取代芳氨基、取代芳烷酰氨基(aralkanoylamino)、硫基、烷硫基、芳硫基、芳烷硫基(aralkylthio)、烷硫羰基(alkylthiono)、芳硫羰基(arylthiono)、芳烷硫羰基(aralkylthiono)、烷磺?；?alkylsulfonyl)、芳磺?；?arylsulfonyl)、芳烷磺?；?aralkylsulfonyl)、磺酰氨基，如SO2NH2、取代磺酰氨基、硝基、氰基、羰基、氨基甲酰，如CONH2、取代氨基甲酰，如CONH-烷基(CONHalkyl)、CONH-芳基(CONHaryl)、CONH-芳烷基(CONHaralkyl)，或在氮上有兩個取代基，這些取代基選自烷基、芳香基或芳烷基；烷氧基羰基、芳香基、取代芳香基、胍基和雜環(huán)取代基，如吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基及其類似物。如上所述的，如取代基進一步被取代，將是烷基、烷氧基、芳香基或芳烷基。
術(shù)語“鹵素”或“鹵”指氟、氯和碘。
術(shù)語“芳香基”指在環(huán)上具有1至6個碳原子的單環(huán)或雙環(huán)芳香烴基團，諸如苯基、萘基、聯(lián)苯和二苯基，每個都能被取代。
術(shù)語“芳烷基”指一個芳香基直接結(jié)合上一個烷基，如芐基(苯甲基)。
術(shù)語“取代芳香基”指一個芳香基團被1至4個取代基取代，如烷基、取代烷基、鹵素、三氟甲氧基、三氟甲基、羥基、烷氧基、烷酰基、烷酰氧基、氨基、烷氨基、芳氨基、二烷氨基、烷酰氨基、硫基、烷硫基、脲基、硝基、氰基、羰基、硫基、氨基甲酰、烷氧基羰基、烷硫羰基(alkylthiono)、芳硫羰基(arylthiono)、芳烷磺酰氨基(arylsulfonylamine)、磺酸、烷磺?；?alkylsulfonyl)、亞磺酰氨基、芳氧基及類似物。取代基進一步可以被羥基、烷基、烷氧基、芳香基、取代芳香基、取代烷基或芳烷基取代。
術(shù)語“雜芳基”指任意被取代的芳香基，如4-7元的單環(huán)，7-11元的雙環(huán)，或10-15元的三環(huán)系，其具有至少一個雜原子和至少一個含碳原子的環(huán)，如嘧啶，四唑、吲唑、吲哚。
術(shù)語“鏈烯基”指具有2至20個碳原子的直鏈或支鏈烴基，優(yōu)選2至15個碳原子，最優(yōu)選2個8碳原子，同時具有1個到4個雙鍵。
術(shù)語“取代鏈烯基”指鏈烯基基團被1至2個取代基取代，如鹵素、羥基、烷氧基、烷?；?、烷酰氧基、氨基、烷氨基、二烷氨基、烷酰氨基、硫基、烷硫基、烷硫羰基(alkylthiono)、烷磺?；?alkylsulfonyl)、亞磺酰氨基、硝基、氰基、羰基、氨基甲酰、取代氨基甲酰、胍基、吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基及其類似物。
術(shù)語“炔基”指具有2至20個碳原子的直鏈或支鏈烴基，優(yōu)選2至15個碳原子，最優(yōu)選2至8個碳原子，同時具有1個到4個三鍵。
術(shù)語“取代炔基”指炔基基團被1至4個取代基取代，如鹵素、羥基、烷氧基、烷酰基、烷酰氧基、氨基、烷氨基、二烷氨基、烷酰氨基、硫基、烷硫基、烷硫羰基(alkylthiono)、烷磺?；?alkylsulfonyl)、亞磺酰氨基、硝基、氰基、羰基、氨基甲酰、取代氨基甲酰、胍基和雜環(huán)化合物、例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡咯烷基、吡啶基、嘧啶基和類似物。
術(shù)語“環(huán)烷基”指任意取代的飽和烴環(huán)系，優(yōu)選包含1至3個環(huán)，每個環(huán)有3個到7個碳原子，其可以進一步與不飽和的C3-C7碳環(huán)稠合。舉例的基團包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基(cycloctyl)、環(huán)癸基cyclodecyl)、環(huán)十二烷基(cyclododecyl)和金剛烷。列舉的取代基包括一個或多個上述描述的烷基，或一個或者多個上述描述的烷基取代基。
術(shù)語“雜環(huán)”，“雜環(huán)的”和“heterocyclo”指一任意被取代的，完全飽和或不飽和的，芳香的或非芳香的環(huán)狀基團，如其為4至7元的單環(huán)，7-11元的雙環(huán)、或10-15元的三環(huán)系，其在至少一個含碳原子的環(huán)中包含至少一個雜原子。每一個含有一個雜原子的雜環(huán)基團的環(huán)可以具有1、2或3個雜原子，這些雜原子選自氮原子、氧原子和硫原子，其中，氮和硫雜原子可以任意地被氧化，氮雜原子也可以任意被季銨化。雜環(huán)基團可以結(jié)合于任何雜原子或碳原子上。
舉例的單環(huán)的雜環(huán)基團包括吡咯烷基、吡咯基、吡唑基、氧但基(oxetanyl)、吡唑啉基、咪唑基、咪唑啉基(imidazolinyl)、咪唑烷基(imidazolidinyl)、噁唑基、唑烷基(oxazolidinyl)、異噁唑啉基(isoxazolinyl)、異噁唑基、噻唑基、噻二唑基、噻唑啉基(thiazolidinyl)、異噻唑(isothiazolyl)、異噻唑啉基(isothiazolidinyl)、呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、噁二嗪基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基(2-oxopiperazinyl)、2-氧代哌啶基(2-oxopiperidinyl)、2-氧代吡咯啉基(2-oxopyrrolidinyl)、2-氧代氮雜基(2-oxazepinyl)、氮雜基、4-哌啶子基(4-piperidonyl)、吡啶基、N-氧代-吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、四氫吡喃基、嗎啉基、硫代嗎啉基(thiamorpholinyl)、硫代嗎啉亞砜(thiamorpholinyl sulfoxide)、硫代嗎啉砜(thiamorpholinylsulfone)、1、3-二氧戊環(huán)和四氫-1，1-二氧代噻吩基、二噁烷、異噻唑啉基(isothiazolidinyl)、thietanyl、硫雜丙環(huán)、三嗪基和三唑基及其類似物舉例的雙環(huán)的雜環(huán)基團包括2，3-二氫-2-氧代-1H-吲哚基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、奎寧環(huán)基、喹啉基、喹啉基-N-氧化物、四氫異喹啉(tetrahydroisoquinolinyl)、異喹啉基(isoquinolinyl)、苯并咪唑基(benzimidazolyl)、苯并吡喃基、中氮茚基、苯并吡喃基、色酮基、香豆素基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃吡啶基(furopyridinyl)(如呋喃[2，3-c]吡啶基、呋喃[3，1-b]吡啶基或呋喃[2，3-b]吡啶基)、二氫異吲哚基、二氫噻唑啉基如3，4-二氫-4-氧代-噻唑啉基)，苯并異噻唑基、benzisoxazolyl、苯并二嗪基、苯并咪唑基(benzimidazolyl)、苯并呋喃基、苯并硫代吡喃基、苯并三唑基、benzpyrazolyl、二氫苯并吡喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并硫代吡喃(dihydrobenzothiopyranyl)、二氫苯并硫代吡喃砜(dihydrobenzothiopyranyl sulfone)、二氫苯并吡喃基(dihydrobenzopyranyl)、二氫吲哚基、吲哚基、異苯并二氫吡喃基(isochromanyl)、異二氫吲哚基、1，5-二氮雜萘基、2，3-二氮雜萘基、3，4-亞甲二氧芐基、嘌呤基、吡啶并吡啶、噻唑啉基、四氫喹啉基、噻吩并呋喃基、噻吩并吡啶基、噻吩并噻吩基及其類似物。
舉例的取代基包括一個或多個上述描述的烷基或芳烷基，或一個或多個上述描述的烷基取代基。也包括較小的雜環(huán)，如環(huán)氧化物和吖丙啶。
術(shù)語“雜原子”包括氧、硫和氮。
通式I的化合物也可以形成鹽，其也在本發(fā)明之列。優(yōu)選藥學(xué)上可接受的(如，無毒、生理上可接受的)的鹽，盡管其他鹽在分離、純化本發(fā)明化合物時也是有用的。
通式I的化合物也可以與堿金屬，如鈉、鉀、鋰，與堿土金屬，如鈣、鎂，與有機堿，如雙環(huán)己胺、三丁胺、嘧啶和氨基酸，如精氨酸、賴氨酸和類似物形成鹽。這些鹽可以用本領(lǐng)域已知的方法制得。
通式I的化合物也可以與各種有機和無機酸形成鹽。這些鹽包括與氯化氫、溴化氫、甲磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、馬來酸、苯磺酸、甲苯磺酸和其他各種酸形成的鹽(如硝酸鹽、磷酸鹽、硼酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、甲苯酸鹽、抗壞血酸鹽、水楊酸鹽及其類似物)。這些鹽可以用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制得。
此外，也可以形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)。
所有本發(fā)明化合物的立體異構(gòu)體都予以考慮，或是以混合物的形式或是以純化合物或基本純化合物的形式。本發(fā)明中，對化合物的定義包括所有可能的立體異構(gòu)體和它們的混合物。特別是包括具有特異活性的外消旋形式的化合物和旋光異構(gòu)體?？梢酝ㄟ^物理方法，如分級結(jié)晶、分離或結(jié)晶非對映異構(gòu)體衍生物或手性柱色譜法分離的方法獲得外消旋體。
各個旋光異構(gòu)體通過常規(guī)的方法，如用一具有旋光活性的酸形成鹽再進行結(jié)晶，從外消旋體獲得各個旋光異構(gòu)體。
通式I化合物也可以有藥物前體形式。任何將在體內(nèi)轉(zhuǎn)化并提供生物活性劑(如通式I化合物)的化合物是包含本發(fā)明范圍和創(chuàng)新性之內(nèi)的藥物前體。
各種形式的藥物前體是本領(lǐng)域眾所周知的。這些藥物前體衍生物的例子，請見a)《藥物前體的設(shè)計》(Design of Prodruss)，H.Bundgaard編(Elsevier，1985)和酶學(xué)方法(Methods inEnzymolooy)，Vol.42，p.309-396，K.Widder，et al.(Acamedic Press，1985)；b)《藥物設(shè)計和開發(fā)教科書》(A Textbook of Drug Design andDevelopment)Krosgaard-Larsen和H.Bundgaard編，第5章，″藥物前體設(shè)計和應(yīng)用(Design and Applicaition of Prodrugs)″H.Bundgaard編，p.113-191(1991)；c)H.Bundgaard，最新藥物傳遞綜述(Advanced Drugs DeliveryReviews)，8，1-38(1992)。
進一步應(yīng)知道的是通式I化合物的溶劑合物(如水合物)也是在本發(fā)明之列。溶劑化作用的方法是本領(lǐng)域眾所周知的。
因此根據(jù)本發(fā)明進一步的內(nèi)容，本發(fā)明提供了了通式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于在哺乳動物如人體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的藥物中的應(yīng)用。
根據(jù)本發(fā)明進一步的特點，本發(fā)明提供了一種在需要治療的哺乳動物如人體內(nèi)產(chǎn)生抗血管生成和/或血管通透性降低效應(yīng)的方法，該方法包括對所述動物給予有效劑量的在此限定的通式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在此描述的化合物也能抑制其他受體酪氨酸激酶，包括HER1和HER2，因此可用于治療增殖障礙，如牛皮蘚和癌癥。已經(jīng)顯示，HER1受體激酶在許多實體瘤中，包括非小細(xì)胞性肺癌、腸癌和乳癌中被表達(dá)和激活。類似地，已經(jīng)顯示HER2受體激酶在胸癌，卵巢癌、肺癌、和胃癌中被過度表達(dá)。能降低HER2受體豐度或抑制通過HER1信號傳導(dǎo)的單克隆抗體已經(jīng)在臨床前和臨床研究中顯示出了抗腫瘤功效。因此，可以預(yù)測HER1和HER2激酶的抑制劑對治療依靠這兩種受體或其中之一的信號傳導(dǎo)的腫瘤將有功效。這些化合物抑制HER1的能力進一步增加了其作為抗血管生成試劑的應(yīng)用。見下面引用的文獻和參考資料。Cobleigh，M.A.，Vogel，C.L.，Tripathy，D.，Robert，N.J.，Scholl，S.，F(xiàn)ehrenbacher，L.，Wolter，J.M.，Paton，V.，Shak，S.，Lieberman，G.，and Slamon，D.J.，“Multinational study of the efficacy andsafety of humanized anti-HER2 monoclonal antibody in women who haveHER2-overexpressing metastatic breast cancer that has progressed afterchemotherapy for metastatic disease”，J.of Clin.Oncol.17(9)，p.2639-2648(1999)；Baselga，J.，Pfister，D.，Cooper，M.R.，Cohen，R.，Burtness，B.，Bos，M.，D′Andrea，G.，Seidman，A.，Norton，L.，Gunnett，K.，F(xiàn)alcey，J.，Anderson，V.，Waksal，H.，and Mendelsohn，J.，“Phase Istudies of anti-epidermal growth facter receptor chimeric antibody C225alone and in combination with cisplatin”，J.Clin.Oncol.18(4)，p.904-914(2000)。
在此之前描述的抗增殖性、抗血管生成和/或血管通透降低效應(yīng)治療方法可作為單一的治療方法使用，除了本發(fā)明化合物之外，也可以包含一種或多種其他物質(zhì)和/或治療方法。此聯(lián)合治療可以通過同時、先后和分開給藥的方法實現(xiàn)。本發(fā)明化合物也可以與已知的抗癌和細(xì)胞毒素劑和治療方法包括放射療法一起使用。如果以固定劑量配藥，這種組合產(chǎn)品可以配以下面描述的劑量范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物和已經(jīng)批準(zhǔn)的劑量范圍的其他藥學(xué)活性劑。當(dāng)不適合用組合配方時，通式I的化合物可以在使用已知的抗癌和細(xì)胞毒素劑和治療方法包括放射療法之后使用。
在醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)領(lǐng)域，綜合運用各種不同的治療方法來治療各個癌癥患者是正常的事情。在在醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)領(lǐng)域，除了此前描述的抗增殖性和抗血管生成和/或血管通透降低效應(yīng)治療方法之外，此種綜合治療方法的其他方法可以是手術(shù)，放射療法或化學(xué)療法。此種化學(xué)療法可包括三類主要的治療劑。
(i)抗血管生成劑，如間四羥基苯二氫卟吩、整聯(lián)蛋白αvβ3功能抑制劑、血管生長抑素、丙亞胺，其以上文中定義的不同的機制作用的。
(ii)細(xì)胞生長抑制劑，如雌激素對抗劑(如它莫西芬、枸櫞酸托瑞米芬、雷洛昔芬〔一種選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑〕、屈洛昔芬、愛多昔芬(iodoxifene))，孕激素(如醋酸甲地孕酮)，芳香酶抑制劑(如阿那曲唑、來曲唑、硼嗪(borazole)、依西美坦)，抗激素藥、抗孕素、抗雄性激素物質(zhì)(如氟它胺、泥魯米特、比卡他胺、醋酸環(huán)丙氯地孕酮)、促黃體激素釋放激素(LHRH)促效劑和對抗物(如醋酸戈舍瑞林、醋酸亮丙瑞林)、睪丸激素5α-二氫還原酶抑制劑(如非那雄胺)、法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑、抗侵襲劑(如金屬蛋白酶抑制劑如馬立馬司他和尿激酶血漿酶原激活質(zhì)受體功能抑制劑)和生長因子功能抑制劑(這些生長因子包括如EGF、FGF、血小板源生長因子和肝細(xì)胞生長因子，而抑制劑包括生長因子抗體、生長因子受體抗體如Avastin(bevacizumab)和Erbitux(cetuximab)、酪氨酸激酶抑制劑和絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑)；和(iii)抗增殖性抗腫瘤藥物及其組合物，用于醫(yī)學(xué)腫瘤學(xué)，如抗代謝藥(如抗葉酸劑如氨甲喋呤、氟嘧啶如5-氟尿嘧啶、嘌呤和腺苷類似物、阿糖胞苷)；嵌入式抗腫瘤抗生素(如蒽環(huán)類抗生素如阿霉素、道諾霉素、表阿霉素、伊達(dá)比星、絲裂霉素-C、放線菌素-D、光神霉素)；鉑衍生物(如順鉑、碳鉑)；烷化劑(如氮芥、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、馬利蘭、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、亞硝基脲、三胺硫酸；抗有絲分裂劑(如長春花生物堿如長春新堿和紫杉類藥物(taxoids)如Taxol(紫杉醇)、Taxotere(多烯紫杉醇)和新的微管劑newer microbtubuleagents如埃坡霉素(epothilone)類似物、discodermolide類似物和eleutherobin類似物)；拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑(如epipodophyllotoxins如依托泊甙和替尼伯甙、安吖啶、鹽酸拓?fù)涮婵?；細(xì)胞周期抑制劑(如eflavopyridols)；生物反應(yīng)調(diào)整劑和蛋白酶體抑制劑如Velcade(bortezomib)。
如上所述，本發(fā)明的式I化合物因其抗抗血管生成和/或血管通透降低效應(yīng)而具有重要意義。本發(fā)明的化合物有望應(yīng)用于各種疾病情況，包括癌、糖尿病、牛皮蘚、關(guān)節(jié)炎風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、肥胖、急性和慢性腎病、動脈粥樣化、動脈再狹窄癥、自體免疫性疾病、急性炎癥和與視網(wǎng)膜增殖相關(guān)的眼睛疾病如糖尿病性視網(wǎng)膜病。
更為特別地是，式I化合物能用于治療各種癌癥，包括(但不限于)-癌，膀胱癌，乳癌，腸癌，腎癌，肝癌，肺癌，包括小細(xì)胞性肺癌，食道癌，膽囊癌，卵巢癌，胰腺癌，胃癌，子宮癌，甲狀腺癌，前列腺癌及皮膚癌包括扁平細(xì)胞癌；-淋巴系造血腫瘤，包括白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、B細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、何杰金淋巴瘤、非何杰金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；-骨髓系造血腫瘤，包括急性和慢性骨髓性白血病、骨髓增生異常綜合癥和前髓細(xì)胞性白血?。?間質(zhì)細(xì)胞腫瘤，包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤；-中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，包括星細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤和神經(jīng)鞘瘤；和-其他腫瘤，包括黑素瘤、精原細(xì)胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、xenoderoma pigmentosum色素癌、keratoctanthoma、甲狀腺濾泡癌和卡波西肉瘤。
由于激酶普遍地在調(diào)控細(xì)胞增殖中具有關(guān)鍵性作用，抑制劑能作為可逆性細(xì)胞生長抑制劑，其可以用于治療任何以細(xì)胞異常增殖為特征的疾病，如良性前列腺增生、家族性腺瘤性息肉、神經(jīng)纖維瘤、動脈硬化癥、肺纖維化、關(guān)節(jié)炎、牛皮蘚、血管球性腎炎、血管成形或血管手術(shù)后的再狹窄癥、肥厚型瘢痕形成、炎癥性腸病、移植排斥、內(nèi)毒素休克及真菌感染。
式I化合物可以引發(fā)或抑制細(xì)胞凋亡(編程性細(xì)胞死亡)。該凋亡響應(yīng)在各種人類疾病中是異常的。式I化合物，作為細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)劑，將可以用于治療癌癥(包括但不限制于上文提到的類型)，病毒感染(包括但不限制于皰疹病毒、痘病毒、愛潑斯坦-巴爾病毒、辛德畢斯病毒和腺病毒)，預(yù)防HIV感染個體的艾滋病病發(fā)，自體免疫疾病(包括但不限制于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自體免疫調(diào)節(jié)的血管球性腎炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮蘚、炎癥性疾病、和自體免疫性糖尿病、神經(jīng)變性障礙(包括但不限制于阿耳茨海默(氏)病、與艾滋病相關(guān)的癡呆癥、帕金森氏癥、肌萎縮性(脊髓)側(cè)索硬化、色素性視網(wǎng)膜炎、脊髓性肌萎縮和小腦退化癥)、骨髓增生異常綜合癥、再生障礙性貧血、心肌梗塞伴隨的缺血性損傷、中風(fēng)和再灌注損傷、心律不齊、動脈硬化癥、毒素誘發(fā)的或酒精相關(guān)的肝臟疾病、血液病(包括但不限制于慢性貧血和再生障礙性貧血)、肌骨骼系統(tǒng)退化癥(包括但不限制于骨質(zhì)疏松癥和關(guān)節(jié)炎)、阿斯匹林過敏性鼻炎、囊腫性纖維化、多發(fā)性硬化癥、腎病和癌痛。
式I化合物特別的能用于治療具有高發(fā)病率的酪氨酸激酶活性的腫瘤，如結(jié)腸、肺和胰腺腫瘤。通過用以本發(fā)明化合物的組合物(或聯(lián)合使用)，哺乳動物宿主腫瘤患病率降低了。
式I化合物也可用于治療除癌癥之外的疾病，這些疾病與生長因子，如VEGFR-2和FGFR-1作用的信號傳導(dǎo)途徑相關(guān)。
本發(fā)明化合物也可以與藥用載體或稀釋劑配制成藥劑，以口服、靜脈注射、皮下注射的方式給藥。藥物組合物可以根據(jù)需求的給藥方式按照常規(guī)方法用固態(tài)或液體載體、稀釋劑和添加劑配制而成?？诜脑?，化合物可以以片劑、膠囊、微粒、粉未和類似的形式給藥。本化合物也可以使用適合這種給藥方式的載體制成懸浮液的方式給藥。本化合物的給藥劑量可以約0.05-300mg/kg/天，優(yōu)選少于200mg/kg/天，一次服用或分2-4次服用。
制備方法式I的某類化合物可以根據(jù)下述方案和本領(lǐng)域的技術(shù)人員的知識制備。
除非另外指出，所有溫度都指攝氏度(℃)。制備型反相(RP)HPLC純化在C18反相(RP)柱YMC S5 ODS柱中進行，用含有1％TFA緩沖液的90％含水甲醇洗脫，并在220nm波長下監(jiān)控。對于分析性HPLC，使用0.2％磷酸替代TFA。所有合成的化合物至少用質(zhì)子核磁共振(NMR)和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC/MS)方法鑒定。除非另外指出，在反應(yīng)逐步建立過程中，將有機抽提物用硫酸鎂(MgSO4)干燥。
下列縮寫用于經(jīng)常使用的試劑。Et2O二乙醚；Na2SO4硫酸鈉；HCl鹽酸；NaOH氫氧化鈉；NaCl氯化鈉；Pd/C鈀炭；K2HPO4磷酸氫二鉀；K2CO3碳酸鉀；NaHCO3碳酸氫鈉；LiOH氫氧化鋰；RT室溫；TFA三氟乙酸；h小時。
方案1 步驟1PCT公開號WO 0071129的化合物在4位點轉(zhuǎn)化為醚(醚化)，如用酚鹽或者甲醇鹽或乙醇鹽陰離子處理。
步驟2然后用烷化劑，如甲基溴化鎂或甲基氯化鎂在低溫下處理化合物1，得到化合物2。
步驟3用過氧化物，如過氧化氫或過硼酸鈉在路易斯酸如三氟化硼下處理化合物2，得到酚化合物3，處理在低溫條件下進行。
步驟4用親電試劑如芐基溴，在堿如NaH存在下，在0-80℃溫度范圍內(nèi)，對化合物3中的酚基團進行烷化作用，得到化合物4。
步驟5用一種酸，如NaH在增高了的溫度下水解本方案的化合物4，得到化合物5。
步驟6本方案的化合物5轉(zhuǎn)化為化合物6，首先轉(zhuǎn)化為如上面描述的氯代亞氨酸酯，再對獲得的氯代亞氨酸酯，用羥基氟吲哚，在堿如碳酸鉀存在下，在極性溶劑如二甲基甲酰胺中，進行烷基化作用得到被保護的化合物6。
方案2 步驟1PCT公開號WO 0071129的化合物，其中X1為鹵素如氯，能與親核基團，如氟吲哚在堿如碳酸鉀存在下進行反應(yīng)得到化合物8，反應(yīng)在極性溶劑，如二甲基甲酰胺中進行。
步驟2然后用烷化劑如甲基溴化鎂或甲基氯化鎂在低溫條件下處理化合物8，得到化合物9。
步驟3化合物9然后在路易斯酸如三氟化硼存在下，用過氧化物，如過氧化氫或過硼酸鈉處理得到酚化合物10。
方案3 步驟1將氟化物，如三氟硝基苯與親核試劑，如乙酰乙酸乙酯反應(yīng)，再在酸或堿存在下對酯基進行脫羧作用生成化合物11。
步驟2化合物11能與烷氧基陰離子如甲醇鈉或苯甲醇的鈉鹽反應(yīng)得到化合物12。
步驟3在乙酸中用試劑如氯化吡啶或溴化氫處理本方案的化合物12，而完成對化合物12烷氧基的去保護作用，得到化合物13。
步驟4化合物13然后可以在還原性條件下，如連二亞硫酸鈉鈀碳，在氫存在下環(huán)化化合物13，得到式14的吲哚衍生物。
可以在氫源如甲酸銨存在下用鈀碳處理化合物12直接得到化合物14。
實施例1 4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧聯(lián))-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-醇A.4-氯-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸乙酯將置于甲苯(800mL)中的4-羥基-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸乙酯(60.0g，271.2mmol，制備方法見WO 0071129)、磷酰氯(30.3mL，325.4mmol)和二異丙基己胺(37.7mL，217mmol)混合物在氬中加熱回流18h，然后冷卻到室溫。在旋轉(zhuǎn)式蒸發(fā)器(rotovap)中濃縮混合物，殘留物用二氯甲烷(1000mL)和碳酸氫納溶液(300mL)稀釋。獲得的混合物在室溫下攪拌10min。用冷鹽水洗滌分離到的有機層，干燥、真空中濃縮。粗物質(zhì)用硅膠板色譜法純化，以二氯甲烷洗脫，得到需求的黃色固體混合物(64.8g，99％)。
B.4-乙氧基-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸乙酯向本實施例混合物A(23g，96mmol)的四氫呋喃(0.6L)溶液，在氬中0℃條件下，滴加含有乙醇鈉的乙醇(21％w/w，43mL，115.2mmol)，滴加時間超過20min。反應(yīng)在0℃下攪拌1h，用乙酸乙酯稀釋，用氯化銨溶液和鹽水洗滌。干燥、濃縮有機層，殘留物硅膠板色譜法純化，用二氯甲烷和含有50％乙酸乙酯的己烷洗脫，得到需求的白色固體混合物((23.5g，98％)。LC/MS；(M+H)+＝250.17
C.2-(4-乙氧基-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基)-丙-2-醇向本實施例的化合物B的THF(2.5L)溶液，在0℃下，用漏斗緩慢加入甲基溴化鎂(3M，于Et2O中，360mL，1.08mol)。可以將溫度提高到室溫，持續(xù)攪拌4h。用氯化銨溶液終止反應(yīng)，用乙酸乙酯抽提。有機層用氯化鈉溶液洗滌，干燥，得到需求的黃色固體化合物(78g，100％)。LC/MS；(M+H)+＝236.1D.4-乙氧基-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-醇將過氧化氫(30％，10.3mL，178.5mmol)和三氟化硼乙醚(271.4mL，2.14mol)的混合物在0℃下攪拌30min。然后冷卻到-20℃，在-15℃下加入本實施例化合物C(30g，129.5mmol)的二氯甲烷(1.45L)溶液，反應(yīng)混合物的溫度達(dá)到-3℃，然后再冷卻到-40℃。在這混合物中攪拌加入飽和亞硫酸鈉溶液。所得的混合物用乙酸乙酯抽提，干燥，真空中濃縮，得到化合物D(26g，76％)。LC/MS；(M+H)+＝194.2E.6-芐氧基-4-乙氧基-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪將含有本實施例化合物D(1g，5.2mmol)、芐基溴(0.62mL，5.2mmol)和碳酸鉀(2.1g，15.5mmol)混合物的二甲基甲酰胺(10mL)在室溫下攪拌12h。反應(yīng)物用乙酸乙酯稀釋，用水、10％的氯化鋰溶液和鹽水洗滌。用有機層用Na2SO4干燥，真空中濃縮，得到黃色固體化合物E(1g)，其無需進一步純化便用于下一步驟。
F.6-芐氧基-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-醇將本實施例的化合物E(90g，粗)放入1N HCl(600mL)和乙醇(800mL)中，加熱回流4h。固體沉淀，過濾收集，用混合溶劑(水/乙醇/甲醇＝4/4/2)洗滌，干燥，得到淺白色固體，再用二氯甲烷洗滌得到白色固體化合物F(65g)。LC/MS；(M+H)+＝256.2G.6-芐氧基-4-氯-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪將含有本實施例化合物F(10g，39.2mmol)、磷酰氯(4.4mL，47.1mmol)和二異丙基己胺(5.5mL，31.4mmol)的甲苯(150mL)在85℃下攪拌2h，然后又加入磷酰氯(1.1mL，11.8mmol)。2h后，再次加入磷酰氯(1.1mL，11.8mmol)。反應(yīng)混合物在85℃下持續(xù)攪拌1h，然后濃縮。殘留物融解于二氯甲烷，用冷的碳酸氫鈉溶液洗滌，干燥，真空中濃縮。粗物質(zhì)用硅膠板色譜法純化，以二氯甲烷洗脫，得到黃色固體化合物G(9.9g，93％)。
H.6-芐氧基-4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧聯(lián))-5-甲基吡咯并[2，1f][1，2，4]三嗪將實施例2的4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-羥基(6.47g，39.2mmol)的二甲基甲酰胺(100mL)溶液用氬進行脫氣，然后冷卻到-20℃。加入一份氫化鈉(60％，在油中，1.57g，39.2mmol)。攪拌30min以上允許將反應(yīng)混合物提高到0℃，然后再次冷卻到-20℃，加入一份本實施例化合物G的二甲基甲酰胺(100mL)溶液。將反應(yīng)溫度升到室溫。30min后，混合物用1N HCl(200mL)酸化，用乙酸乙酯(1.8L)稀釋，用10％的氯化鋰溶液(0.4L×2)、1N NaOH溶液(0.3L×2)、緩沖液(pH＝2,200mL)和NaCl溶液(0.4L)洗滌。干燥有機層，真空中濃縮，得到棕褐色固體化合物H(15g，95％)。LC/MS；(M+H)+403.1I.4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧聯(lián))-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-醇在室溫下，將含有本實施例化合物H(15g，37.3mmol)、甲酸銨(12g，190mmol)和Pd/C(10％，1.5g)混合物的二甲基甲酰胺(100mL)攪拌2h。用Celite(硅藻土)過濾混合物，過濾物用乙酸乙酯稀釋，依次用10％的氯化鋰溶液(2X)、5％的碳酸氫鈉溶液(2X)和鹽水洗滌。有機層用Na2SO4干燥，真空中濃縮，得到淺棕色固體，用二氯甲烷洗滌，得到淺白色的標(biāo)題化合物(7.8g，64％)。MS[M+H]+＝313.2。1HNMR(CDCl3)δ2.44(s，3H)，2.51(s，3H)，6.31(s，1H)，6.95(dd，1H)，7.07(d，1H，J＝8.8Hz)，7.38(s，1H)，7.78(s，1H)。
實施例1也可以用下述描述的替換程序制備。
A-1.4-氯-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸乙酯10L的反應(yīng)器中加入4-羥基-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸乙酯(155.1g，0.7mol)和甲苯(2.7L)。然后加入磷酰氯(128.8g，78mL，0.84mol)，再加入二異丙基己胺(94.2g，127mL，0.7mol)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物5min，然后加熱回流20h。HPLC分析顯示起始物質(zhì)完全消失。然后將反應(yīng)混合物冷卻到0℃，以一定的速度加入冷的K2HPO4溶液(527g K2HPO4溶于2.4L水)，加入速度應(yīng)將反應(yīng)混合物內(nèi)的溫度維持在5℃以下。混合物的最終pH值為8。然后混合物先在0-5℃之間攪拌20min，再在室溫下攪拌1h。分離有機層，用K2HPO4溶液(85g于405mL水中)和水(345mL)洗滌，然后過濾，真空中濃縮，直至黃色固體開始沉淀。加入二甲基甲酰胺(1L)，在真空中除去剩余的甲苯(水浴溫度＝38℃，壓力＝9Torr)。濃縮之后，通過HPLC分析可看到約4％的甲苯。
J.4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧聯(lián))-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸乙酯將前面步驟A-1的殘留物轉(zhuǎn)移到一個10L的反應(yīng)器中，加入二甲基甲酰胺(1.1L)，再加入K2CO3(276g，2.1mol)和4-氟-2-甲基-lH-吲哚-5-羥基(109.5g，0.7mol)。在環(huán)境溫度下攪拌反應(yīng)混合物16h，然后冷卻到0℃。以一定的速率加入水(2.0L)和乙酸乙酯(2L)，加入速度應(yīng)將反應(yīng)混合物內(nèi)的溫度維持在20℃以下。然后分相，水相用乙酸乙酯(2L)抽提。混合有機抽提物用水(2L)、10％的含水LiCl(2L)和水(2L)洗滌。然后加入甲苯(1L)，真空中濃縮有機抽提物。再加入甲苯(500mL)，混合物再次真空中濃縮。LC/MS；(M+H)+＝369.4.1HNMR(CDCl3)δ1.41(t，3H，J＝7.15Hz)，2.45(s，3H)，2.87(s，3H)，4.39(q，2H，J＝7.15Hz)，6.34(s，1H)，6.98(dd，1H)，7.08(d，1H，J＝8.25Hz)，7.90(s，1H)，8.15(s，1H)。
K.2-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧聯(lián))-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-丙-2-醇前面步驟(步驟J)的殘留物轉(zhuǎn)移到一個10L的反應(yīng)器中，加入足量的甲苯使得總反應(yīng)體積達(dá)到1.1L。然后加入THF(1.1L)，再加入LiCl(140g)，將反應(yīng)混合物冷卻到0℃。以一定的速率加入甲基溴化鎂[1.4M于甲苯，THF(75∶25)，2.1L中，2.8mol]，加入速度應(yīng)將反應(yīng)混合物內(nèi)的溫度維持在5℃以下，總加入時間約2h。反應(yīng)混合物再在0℃下攪拌2h，然后在超過3h的時間內(nèi)將溫度提高到15℃，這時HPLC分析依然能看到5％的起始物質(zhì)。反應(yīng)混合物再次冷卻到5℃，再加入100mL的甲基溴化鎂，將混合物再攪拌1.5h。然后以將內(nèi)部溫度維持在5℃以下的速率加入乙酸乙酯(1.5L和15％的NH4Cl(3.2L)溶液和)。然后進行分層，水相用乙酸乙酯(2L)抽提?；旌嫌袡C層用15％的NH4Cl(2×2L)和水(2L)洗滌，真空中濃縮得到需求的無定型的黃色固體產(chǎn)品。粗物質(zhì)溶解于二氯甲烷(5L)，利用水浴(T＝37℃)以有助于溶解。然后使溶液通過一個短的硅膠墊(400g)，用二氯甲烷(7L)和5％的乙酸乙酯/二氯甲烷(1.2L)洗滌。蒸發(fā)濾出液得到淺白色固體，加入乙酸乙酯(1.2L)。將得到的漿狀物轉(zhuǎn)移到10L的反應(yīng)器中，在50℃下攪拌2h后，得到清澈的溶液。將溶液冷卻到環(huán)境溫度，產(chǎn)生白色沉淀。然后加入庚烷(2.6L)，混合物在室溫下攪拌20h。過濾得到的固體，用庚烷(1L)洗滌，在50℃下，在減壓下干燥24h。得到白色固體2-[4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧聯(lián))-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-丙-2-醇(186g，75％，超過3步)。LC/MS；(M+H)+＝355.4I-1.4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧聯(lián))-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-醇在0℃下，向BF3·OEt2(120mL，0.948mol)的二氯甲烷(200mL)溶液中加入H2O2(50％水溶液，4.6mL，0.079mol)。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌30min，然后冷卻到-20℃。在分離長頸瓶中，將前面步驟獲得2-[4-(4-氟-2-甲基-IH-吲哚-5-基氧聯(lián))-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-丙烷-2-醇(20g，0.0564mol)溶解于二氯甲烷(400mL)中，利用間接加熱達(dá)到完全溶解。通過一套管將溶液迅速加入到過氧化物溶液中(加入時間＝20min)。加入時的反應(yīng)溫度在-15--25℃之間，加入完畢后，將反應(yīng)溫度提升到-15℃，并再維持該溫度40min。加入Na2SO3(200mL，20％水溶液)和乙醇胺(33％的水溶液，300mL)終止反應(yīng)混合物，兩種試劑均以將溫度維持在0℃下的速率加入。去除冷浴，反應(yīng)混合物攪拌2h，然后注入分液漏斗。進行分層，水相用，乙酸乙酯(100mL)抽提，混合有機層用5％的含水檸檬酸(100mL)、10％的含水NaHCO3(100mL)、水(2×100mL)和鹽水(100mL)洗滌，干燥，過濾，真空中濃縮，得到橙色泡沫。將粗物質(zhì)填充于一個Florisilo柱上，以四氫呋喃作為填充劑，柱用30％的乙酸乙酯/庚烷洗脫。收集含有需求的產(chǎn)品的那部分，真空中濃縮，然后從乙酸乙酯/庚烷中重結(jié)晶。收集固體，用庚烷洗滌，得到需求的淺白色固體產(chǎn)品(9.1g，52％)。過濾產(chǎn)物在真空中濃縮，硅膠上純化，用40％的乙酸乙酯/庚烷作為洗提液，得到另外的2.5g(14％)需求產(chǎn)品。4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧聯(lián))-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-醇的總產(chǎn)量為11.6g，66％。
反相HPLC3.75min(YMC S5 ODS柱4.6×50mm，10-90％含水甲醇，超過4min含0.2％磷酸，流速4mL/min，在220nm檢測)。LC/MS；(M+H)+＝313.2。
實施例2 4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-醇A.1-(2，3-二氟-6-硝基苯)-丙-2-酮將叔丁氧基鉀(570.6g，5.082mol)和四氫呋喃(2L)加入到10L的反應(yīng)器中。啟動懸空攪拌，將得到的懸浮液冷卻到11℃，然后加入乙酰乙酸乙酯(668mL，5.082mol)。乙酰乙酸乙酯的加入時間需要1h，可以觀察到放熱現(xiàn)象?？刂萍尤胨俣纫允沟梅磻?yīng)器內(nèi)的溫度不超過25℃。獲得的混合物變均勻，顏色為淺黃色。添加完成后，反應(yīng)混合物冷卻至10-25℃，1，2，3-三氟硝基苯(260mL，600g，2.259mol)以四氫呋喃(1L)溶液的形式滴加到反應(yīng)混合物中，這需35min，可以觀察到放熱現(xiàn)象。控制滴加速度以使得反應(yīng)器內(nèi)的溫度不超過21℃。滴加完成后，將得到的棕色反應(yīng)混合物加熱到室溫，并攪拌2.5h，在該溫度，LC分析顯示了100％的轉(zhuǎn)化率，無殘留的1，2，3-三氟硝基苯。反應(yīng)混合物重新冷卻到15℃，在超過15min的時間內(nèi)緩慢加入3L的1N HCL，棕色溶液最終變?yōu)榍宄旱狞S色溶液。水相的pH約為pH4。用乙酸乙酯(2×1L)抽提混合物，用鹽水洗滌(1L)混合有機相，真空中濃縮，得橙色的油。
獲得的油裝入到10L的反應(yīng)器內(nèi)，溶解于冰乙酸(1L)。然后加入硫酸(濃硫酸(conc.)，1L)，除了放熱現(xiàn)象之外還能觀察到強烈的放氣現(xiàn)象。開始進行機械攪拌，然后混合物在70℃下加熱3h，3h后LC分析顯示100％的轉(zhuǎn)化率。反應(yīng)混合物冷卻到15℃-20℃之間，加入乙酸乙酯(3L)，再加入水(6L)，無可見界面可觀察到。分離到7L的水相，用乙酸乙酯(2×2L)抽提。此時，能觀察到一個可見界面。混合有機抽提物用1N NaOH(6×1L)(水相的pH值為6.6)和鹽水(3×1L)洗滌。在對比壓下(水浴溫度35℃，36torr)濃縮棕色有機抽提物約10h，得到569g需求的粗的棕色的油，82％AP(HPLC)。殘余乙酸乙酯為3％(GC)。KF0.25％.1H和13C NMR波譜匹配報告數(shù)據(jù)。主要的雜質(zhì)為pararegioisomer(對位區(qū)域異構(gòu)體)。
B.將含有1-(2，3-二氟-6-硝基苯)-丙烷-2-酮(183g)和碳酸鉀(100g)混合物的甲醇(1L)加熱回流3h。冷卻反應(yīng)混合物，真空濃縮以除去大部分的甲醇。殘余物用乙酸乙酯(1L)稀釋，過濾，水洗。分離到的水層用2N HCl中和，用乙酸乙酯(2×500mL)抽提。混合有機層用鹽水洗滌，干燥(用Na2SO4)，真空濃縮，得到棕色固體。該固體用二乙醚研制，過濾得到黃色固體1-(2-氟-3-甲氧基-6-硝基苯)-丙-2-酮(121g，71％)。C/MS；(M+H)+＝228.2.
C.在180℃下，攪拌由前步驟獲得的1-(2-氟-3-甲氧基-6-硝基苯)-丙-2-酮(454mg，21mmol)和氯化吡啶(0.9g，7.8mmol)的混合物75min。反應(yīng)冷卻到室溫，并用1N HCL(3mL)和乙酸乙酯(10mL)稀釋，過濾。過濾物用鹽水(2x)洗滌，干燥，真空中濃縮，得到灰色固體1-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯)-丙-2-酮(410mg，96％)，其不用進一步純化直接用于下一步。LC/MS；(M+H)+＝214.1HNMR(CDCl3)82.37(s，3H)，4.22(s，2H)，6.95(dd，1H)，7.95(d，1H，J＝9.35Hz)。
D.將由前一步驟獲得的1-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯)-丙-2-酮(50g，0.234mol)加入到2L的圓底長頸瓶中，加入1L水，在室溫下攪拌該黃色懸浮液。一次性加入連二硫酸鈉(225g，5.5eq)，攪拌反應(yīng)混合物，溫度維持在30℃下，直至HPLC分析顯示無起始物質(zhì)殘留(通常少于1h)。一旦完成后，反應(yīng)混合物冷卻到0℃，真空過濾收集棕褐色固體。在50℃以下于真空中干燥濕產(chǎn)品，得到棕褐色結(jié)晶粉末4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-醇(31.4g，81％產(chǎn)率)。該物質(zhì)的HPLC純度＞99.8。1HNMR(CDCl3，400MHz)δ7.8(s，1H)，6.9-6.7(m，2H)，6.2(s，1H)，4.7(s，1H)，2.4(s，3H).3C NMR(CDCl3，100MHz)δ145.7，143.4，137.5，136.7，134.4，120.1，112.7，106.8，95.4，13.3。
而且，1-(2，3-二氟-6-硝基苯)-丙-2-酮可以通過下述替換程序轉(zhuǎn)化成標(biāo)題化合物。
E.1-(3-芐氧基-2-氟-6-硝基-苯基)-丙-2-酮向1-(2，3-二氟-6-硝基苯)-丙-2-酮(2.5g，HPLC分析純度為82％，9.54mmol)中加入芐基醇(2.5mL)和LiOH·H2O(1.07g，25.58mmol)。然后將反應(yīng)化混合物加熱到100℃-110℃，攪拌4h，直至HPLC分析顯示反應(yīng)完成。冷卻到室溫之后，反應(yīng)混合物用二氯甲烷(18mL)稀釋，并1N HCI中和到pH6-7。進行分層，用鹽水洗滌有機相并收集之。邊攪拌，邊向有機溶液中加入庚烷(30-25mL)，從而啟動結(jié)晶化作用。獲得的漿狀物冷卻到0-5℃，再攪拌1h。過濾漿狀物，用庚烷洗滌濾餅。真空中50℃下干燥黃棕固體12-15h，得到想要化合物(1.6g)，HPLC分析顯示純度為95％。HPLC方法；柱YMC Pack Cyano(3um4.6×50mm)；溶劑A0.05％TFA于MeOH∶水(20∶80)中；溶劑B0.05％TFA于MeOH∶水(20∶80)中；波長254nm；流速3mL/min；梯度洗脫時間3min；最終％B100；最初保留時間(Initial Hold)0.5min；起始％B0；典型滯留時間SM，1.2min；產(chǎn)品2.2-2.3min。
F.4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-醇向前步獲得的化合物E(20.00g，66.03.30mmol)的甲醇溶液，在氮氣氛中(300mL)、在室溫下、在避光條件下，加入10％Pd/C(2.0g)和甲酸銨(60.0g，0.95mol)。反應(yīng)混合物攪拌3.5h，然后用乙酸乙酯(200mL)稀釋，通過一個Celite(硅藻土)/硅膠板進行過濾。殘留物用下述方法之一純化真空中濃縮之后，獲得的殘留物用色譜法純化，以30％乙酸乙酯/己烷洗脫，用二氯甲烷/己烷研碎之后得到需求的白色固體混合物(7.32g，67％)。
真空濃縮，殘留物溶解于二氯甲烷，通過一個硅膠板，并用二氯甲烷洗脫。真空濃縮過濾物，得到白色固體標(biāo)題化合物(6.66g，61％)。
本實施例的化合物E也可以通過下面兩種替代方法轉(zhuǎn)化為1-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯)-丙-2-酮。
1-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯)-丙-2-酮方法G-1在室溫下，向溶于乙酸酐(5mL)和乙酸(5mL)的1-(3-芐氧基-2-氟-6-硝基苯)-丙-2-酮(3.03g，10mmol)溶液，加入氫溴酸(48％的水溶液，3mL)。加入完畢之后，反應(yīng)在100℃加熱30min，然后冷卻至室溫。邊攪拌，邊向該混合物加入10mL的己烷。潷析并濃縮溶液，殘留物用乙酸乙酯(50mL)稀釋，用鹽水洗滌(3×20mL)。干燥有機層，真空中濃縮，得到棕色固體1-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯)-丙-2-酮(1.7g，80％)，其無需進一步純化直接用于下一步驟。LC/MS；(M+H)+＝213.2方法G-21-(3-芐氧基-2-氟-6-硝基苯)-丙-2-酮(65.0g，0.214mol)和氯化吡啶(60.74g，0.526mol)的混合物在180℃下攪拌1h，反應(yīng)混合物冷卻到室溫，用3N HCl(100mL)和乙酸乙酯(500mL)稀釋，過濾。水相用乙酸乙酯(2X)抽提，混合有機層用鹽水洗滌，MgSO4干燥，通過一硅膠板過濾，真空中濃縮。殘留物用木炭在甲醇中進行脫色，過濾并在真空中濃縮，得到棕色固體1-(2-氟-3-羥基-6-硝基苯)-丙-2-酮(37g，81％)。LC/MS；(M+H)+＝213.2。
可替代地，1-(3-芐氧基-2-氟-6-硝基苯)-丙-2-酮可以按下述描述的方法環(huán)化成5-芐氧基-4-氟-2-甲基-1H-吲哚，然后可按照上面描述的方法進行脫芐基作用。
H.將含有1-(3-芐氧基-2-氟-6-硝基苯)-丙-2-酮(9.09g，30mmol)和蘭尼(氏)鎳(約5g)的甲醇(100mL)加熱至40℃。劇烈攪拌下，滴加入聯(lián)氨的甲醇(15mL)溶液，滴加時間超過30min?；亓?h之后，反應(yīng)混合物冷卻到室溫，通過硅膠板過濾，用二氯甲烷洗脫，真空中濃縮，得到黃色的油5-芐氧基-4-氟-2-甲基-1H-吲哚(6.1g，80％)。LC/MS；(M+H)+＝256.3+。
權(quán)利要求
1.一種方法，用于制備下式化合物 所述方法包括下列步驟a)將下式的氟化合物 與親核試劑反應(yīng)，生成下式化合物11 b)將化合物11與烷氧基陰離子反應(yīng)，生成下式化合物12 其中R為保護基團，c)用去保護試劑對烷氧基進行去保護，得到下式化合物13 和d)在還原性條件下環(huán)化化合物13，得到下式化合物14
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(d)的還原作用使用溶于水或水與有機溶劑混合液的連二亞硫酸鈉。
3.權(quán)利要求2所述的方法，所述有機溶劑為THF。
4.權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟(c)的還原作用使用氯化吡啶或碘化吡啶或溴化氫。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備通式(1)的某些吡咯并三嗪化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的方法。通式(1)化合物能抑制生長因子受體，如VEGFR－2和FGFR－1的絡(luò)氨酸激酶的活性，因而能使它們用作抗癌劑。通式(1)化合物也能用于治療其他與通過生長因子受體起作用的信號傳導(dǎo)途徑相關(guān)的疾病。
文檔編號C07D209/08GK1903840SQ200610115789
公開日2007年1月31日 申請日期2003年7月21日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月19日
發(fā)明者R·比德, J·范, L·帕蘭蒂, S·巴爾博薩, L·錢, Z-W·蔡, F·S·吉布森 申請人:百時美施貴寶公司