專利名稱：經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉－4－基胺衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于具有用的醫(yī)藥性質(zhì)的經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物，本發(fā)明進(jìn)一步關(guān)于此等化合物用于治療與辣椒素受體活化作用相關(guān)的病癥、用于辨識與辣椒素受體結(jié)合的其它藥劑，及作為檢測與定位辣椒素受體的探針。
先前技術(shù)痛覺或傷害性刺激，是由稱為「傷害性受體」(nociceptor)的一群特定感覺神經(jīng)元的神經(jīng)末梢所媒介。各式各樣物理及化學(xué)刺激誘發(fā)哺乳動物此等神經(jīng)元的活化，導(dǎo)致辨識潛在傷害刺激。但是，傷害性受體的不適當(dāng)或過度的活化，會產(chǎn)生引致衰弱的急性或慢性疼痛。
神經(jīng)病理性疼痛包含缺乏刺激的疼痛訊息傳遞，典型地是由對神經(jīng)系統(tǒng)的傷害所引起。多數(shù)情形下，此等疼痛的發(fā)生，視為是因初始傷害末梢系統(tǒng)(例如，經(jīng)由直接傷害或全身性疾病)后，引發(fā)末梢及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的敏化作用。神經(jīng)病理性疼痛典型地為灼熱、刺痛且強(qiáng)度不退，有時比誘發(fā)疼痛的初始傷害或疾病過程更會引致衰弱。
神經(jīng)性疼痛的現(xiàn)行療法大多效果不彰。鴉片劑，例如嗎啡，為具效力的止痛劑，但由于例如身體上的成癮與戒斷性質(zhì)、以及壓抑呼吸、情緒變化、與伴隨便秘的小腸蠕動降低、噁心、嘔吐、及內(nèi)分泌與自律神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)等不利副作用而使其有效性受限。此外，神經(jīng)病理性疼痛對習(xí)知鴉片劑止痛療法常沒有反應(yīng)或只有部分反應(yīng)。使用N-甲基-D-天門冬胺酸鹽拮抗劑克他命(ketamine)或α(2)-腎上腺素促效劑氯壓啶(clonidine)的療法可降低急性或慢性疼痛，使鴉片劑用量得以減少，但此等制劑由于副作用常令人很難忍受。
使用辣椒素的局部療法已用來治療包括神經(jīng)病理性疼痛的慢性與急性疼痛。辣椒素為衍生自茄科植物(包括嗆辣紅椒)的辛辣物質(zhì)，對傳達(dá)疼痛的小直徑傳入神經(jīng)纖維(A-Δ與C纖維)咸信具有選擇性作用。對辣椒素的反應(yīng)特征為持續(xù)活化末梢組織中的傷害性受體，最終使末梢傷害性受體對一個或多個刺激去敏化。從動物研究得知，辣椒素似乎藉由打開鈣與鈉的陽離子選擇信道而觸發(fā)C纖維細(xì)胞膜的去極化作用。
享有與辣椒素相同類香草醇(vanilloid)基團(tuán)的結(jié)構(gòu)類似物亦引起類似的反應(yīng)。一種此等類似物為樹膠脂毒素(resiniferatoxin，RTX)，是大戟屬(Euphorbia)植物的天然產(chǎn)物。類香草醇受體(VR)一詞是用來敘述辣椒素與此等相關(guān)刺激化合物在神經(jīng)元細(xì)胞膜的識別部位。辣椒素反應(yīng)受到另一辣椒素類似物例如，辣椒氮呯(capazepine)的競爭性抑制(因而受到拮抗)，亦受到非選擇性陽離子信道封阻劑釕紅的抑制。此等拮抗劑僅以適度親和力與VR結(jié)合(通常Ki值不低于140μM)。
自背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞選殖的大鼠及人類類香草醇受體。經(jīng)鑒定出的第一種類香草醇受體稱為類香草醇受體類型1(VR1)，本說明書中「VR1」與「辣椒素受體」等詞可交換使用，以指稱大鼠及/或人類、以及同系哺乳類之具此類型的受體。利用缺乏此受體的小鼠所表現(xiàn)出的無類香草醇引致的疼痛行為與對熱及發(fā)炎傷害的弱反應(yīng)，已證實VR1于痛覺上的角色。VR1為非選擇性陽離子信道，其開放閾值因高溫、低pH、及辣椒素受體促效劑而降低。例如，該信道通常于高于約45℃的溫度下開放。打開辣椒素受體信道后，通常接著從表現(xiàn)該受體的神經(jīng)元及其它鄰近神經(jīng)元釋出炎性勝肽，增加疼痛反應(yīng)。辣椒素受體受到辣椒素初始活化后，即經(jīng)由cAMP依賴型蛋白激酶的磷酸化，進(jìn)行快速去敏化作用。
VR1促效劑類香草醇化合物由于具備使末梢組織中傷害性受體去敏化的能力，因此已用作局部麻醉劑。然而，促效劑的應(yīng)用可能引起灼燒痛，因而使其治療用途受限。近來，據(jù)報告指出，VR1拮抗劑，包括非類香草醇化合物，亦用于治療疼痛(見PCT國際申請案公開案于2002年1月31日公開的WO 02/08221，及于2003年7月31日公開的WO 03/062209)。
因此，期望有與VR1作用而不會引起VR1促效劑類香草醇化合物的初始疼痛感的化合物，以用于治療包括神經(jīng)病理性疼痛的慢性與急性疼痛。特別是期望有此受體的拮抗劑以用于治療疼痛，以及例如暴露于催淚瓦斯、搔癢等狀況及例如尿失禁與膀胱過動等尿道癥狀。本發(fā)明已達(dá)成該些需求，且進(jìn)一步提供相關(guān)的好處。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供如式I的經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物 及該等化合物醫(yī)藥上可接受的鹽。式I中A2、V、X、W、Y與Z各自獨立地為N或視需要可經(jīng)取代的碳(e.g.，CR1)，俾使V與X至少一個為N；A3為N或視需要經(jīng)取代的碳(e.g.，CR9)；或者(i)A4連接至A5以形成經(jīng)0至6個取代基取代的稠合5-至7-員碳環(huán)或雜環(huán)，該取代基較佳為獨立地選自R8，且A1為N或經(jīng)取代的碳(e.g.，CR1)，標(biāo)示為 的此等基團(tuán)不為經(jīng)C1-C6烷磺?；〈?(ii)A1連接至A5以形成經(jīng)0至6個取代基取代的稠合5-至7-員碳環(huán)或雜環(huán)，該取代基較佳為獨立地選自R8，且A4為N或經(jīng)取代的碳(e.g.，CR9)；R1每次出現(xiàn)時獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、-COOH、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基，及單-與二-(C1-C6烷基)氨基；R8每次出現(xiàn)時獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、氧代基、-COOH、C1-C6烷基、C1-C6烯基、C1-C6炔基、C1-C6烷基醚、C1-C6羥基烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6氨基烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、C1-C6烷?；?、單-與二-(C1-C6烷基)氨基(C1-C6烷基)、(5-至7-員雜環(huán)烷基)C1-C6烷基、C1-C6烷基磺酰基，及單-或二-(C1-C6烷基)磺酰氨基；R9每次出現(xiàn)時獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、-COOH、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷磺?；?，及單-或二-(C1-C6烷基)磺酰氨基；U為N或視需要經(jīng)取代的碳(e.g.，CR2)，俾使V與X倘若皆為N，則U為視需要經(jīng)取代的碳；R2為(i)氫、鹵素、氰基或-COOH；或(ii)式-Rc-M-A-Ry的基團(tuán)，其中Rc為C0-C3亞烷基或連接至Ry或Rz以形成經(jīng)0至2個取代基取代的4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，該取代基獨立地選自Rb；M為不存在、單一共價鍵、O、S、SO、SO2、C(＝O)、OC(＝O)、C(＝O)O、O-C(＝O)O、C(＝O)N(Rz)、OC(＝O)N(Rz)、N(Rz)C(＝O)、N(Rz)SO2、SO2N(Rz)或N(Rz)；A為不存在、單一共價鍵或經(jīng)0至3個取代基取代的C1-C8亞烷基，該取代基獨立地選自Rb-；及倘若存在Ry與Rz，為(a)獨立地為氫、C1-C8烷基、C2-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C2-C8烯基、4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，或連接至Rc以形成4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，其中Ry與Rz各獨立地經(jīng)0至6個取代基取代，該取代基獨立地選自Rb；或(b)連接以形成經(jīng)0至6個取代基取代的4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，該取代基獨立地選自Rb；Ar為選自5-至10-員芳族碳環(huán)與雜環(huán)，其中每一個各為視需要經(jīng)取代(其中每一個較佳各為經(jīng)0至3個獨立地選自R1的取代基所取代)，俾使Ar不為噻吩；及Rb每次出現(xiàn)時獨立地選自(i)氫、鹵素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、氧代基與-COOH；及(ii)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷?；?、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷?；趸?、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺酰基、(4-至7-員雜環(huán))C0-C8烷基；其中(ii)中的每一個各為視需要經(jīng)取代；(ii)中的每一個各較佳為經(jīng)0至3個獨立地選自羥基、鹵素、氨基與氰基的取代基所取代。
式I的某些化合物是進(jìn)一步滿足式II 或為其醫(yī)藥上可接受的鹽，其中A2、A3、U、V、X、W、Y與Z如式I所述；A1為N或CR1，其中R1如式I所述； 為經(jīng)0至6個取代基取代的5-至7-員芳族或部分飽和碳環(huán)或雜環(huán)，該取代基較佳為獨立地選自R8，其中R8如式I所述，及其中 不為經(jīng)C1-C6烷基磺?；〈?及Ar為選自苯基與6-員芳族雜環(huán)，其中每一個各為視需要經(jīng)取代(其中每一個較佳為各經(jīng)0至3個獨立地選自R1的取代基所取代，其中R1如式I所述)。
式I的某些化合物進(jìn)一步滿足式III或式IV 其中Ar為苯基或6-員芳族雜環(huán)，其中每一個各經(jīng)0至3個獨立地選自R1的取代基取代；B1、B2、B3與B4獨立地選自C(R8)(例如，CH、C-烷基或C＝O)、C(R8)(R-8)、S、SO、SO2、N、N(R8)與O；而其余的變量如式I所述。顯示為的各鍵結(jié)獨立地為單鍵或雙鍵，其限制條件為不超過各環(huán)員的正常價數(shù)。式III或IV的某些化合物中，B1為SO2或C(CH3)2，B2為C(R8)或N(R8)，及B3與B4獨立地為C(R8)、C(R8)(R8)或N(R8)。舉例而言，某些此等化合物中，B1為C(CH3)2，B2與B3獨立地選自C(R8)，及B4為NH或N-CH3。其它化合物中，B1為O、B2與B3獨立地選自C(R8)，及B4為NH或N-CH3。
某些具體實例中，式III的化合物是進(jìn)一步滿足式IIIa至IIIc中的一個或多個，及式IV的化合物是進(jìn)一步滿足式IVa
其中R代表0至5個獨立地選自鹵素、羥基、氧代基、氰基、氨基、C1-C6烷基、C1-C6烷基醚、C1-C6羥基烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基與C1-C6烷?；娜〈?位于相同或不同的環(huán)員)；各R13獨立地選自氫、鹵素、C1-C4烷基與C1-C4鹵烷基、及顯示為的各鍵結(jié)獨立地為單鍵或雙鍵。
式II的某些化合物進(jìn)一步滿足式V 其中B1、B2與B3獨立地選自C(R8)、C(R8)(R8)、S、SO、SO2、N、N(R8)與O；而其余的變量如式II所述。B1與B2間的鍵結(jié)是為單鍵或雙鍵。
某些具體實例中，式V的某些化合物進(jìn)一步滿足式Va 其中各R13獨立地選自氫與C1-C4烷基。
式II的某些化合物進(jìn)一步滿足式VI 其中B1、B2、B3、B4與B5獨立地選自C(R8)、C(R8)(R-8)、S、SO、SO2、N、N(R8)與O；而其余的變量如式II所述。顯示如的各鍵結(jié)為單鍵或雙鍵。
式II的某些化合物又進(jìn)一步滿足式VII 其中X、Y、Z與A3獨立地為N或CH；R10為氫、鹵素、甲基、單-、二-或三-氟甲基或氰基；各R13獨立地為氫或甲基；B3與B4其中一個為CH(R8)，且B3與B4的另一個為N(R8)；及R2為(i)氫或鹵素；或(ii)C1-C6烷基、-(CH2)nNH2、-(CH2)nN(H)C1-C8烷基、-(CH2)nN(C1-C8烷基)2、-(CH2)n(4-至8-員雜環(huán)烷基)、-(CH2)nOH、-(CH2)nOC1-C6烷基、或-(CH2)nO-苯甲基，其中每一個各為經(jīng)0至4個獨立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基與C1-C6鹵烷基的取代基取代，其中各n為0、1、2或3。
某些態(tài)樣中，式I化合物為VR1調(diào)節(jié)劑，于辣椒素受體結(jié)合試驗中，呈現(xiàn)不大于1微摩爾濃度(micromolar)、100納摩爾濃度(nanomolar)、50納摩爾濃度、10納摩爾濃度或1納摩爾濃度的Ki值；及/或于測定辣椒素受體拮抗劑或促效劑活性試驗中，具有不大于1微摩爾濃度、100納摩爾濃度、50納摩爾濃度、10納摩爾濃度或1納摩爾濃度的EC50或IC50值。
某些具體實例中，如本說明書所述的VR1調(diào)節(jié)劑是VR1拮抗劑，且于辣椒素受體活化的體外試驗中，未呈現(xiàn)可檢出的促效劑活性。
某些態(tài)樣中，如本說明書所述的化合物是經(jīng)可檢測的標(biāo)記物(例如，放射性標(biāo)記或螢光接合)予以標(biāo)記。
于其它態(tài)樣中，本發(fā)明進(jìn)一步提供醫(yī)藥組合物，其包含有至少一種如本說明書所述的化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽，并結(jié)合有生理上可接受的載劑或賦形劑。
進(jìn)一步態(tài)樣中，提供減少細(xì)胞性辣椒素受體的鈣傳導(dǎo)的方法，該方法包括使表現(xiàn)辣椒素受體的細(xì)胞(例如，神經(jīng)細(xì)胞)與至少一種如本說明書所述的化合物接觸。此接觸可發(fā)生在體內(nèi)或體外，且通常使用的化合物濃度為在體外足以改變類香草醇配位體與VR1結(jié)合(利用本說明書所提供的實施例5)與/或VR1-媒介訊號傳遞(利用本說明書所提供的實施例6)。
本發(fā)明進(jìn)一步提供抑制類香草醇配位體與辣椒素受體結(jié)合的方法。某些此等態(tài)樣中，抑制發(fā)生在體外。此等方法包括于可檢測類香草醇配位體與辣椒素受體結(jié)合受抑制的條件與足夠用量下，使辣椒素受體與至少一種如本說明書所述的化合物接觸。其它此等態(tài)樣中，辣椒素受體是于患者體內(nèi)。此等方法包括在體外，于可檢測類香草醇配位體與表現(xiàn)選殖辣椒素受體的細(xì)胞結(jié)合的足夠用量下，使患者的表現(xiàn)辣椒素受體的細(xì)胞與至少一種如本說明書所述的化合物接觸，因而抑制類香草醇配位體與患者的辣椒素受體結(jié)合。
本發(fā)明進(jìn)一步提供患者對辣椒素受體調(diào)節(jié)敏感時的治療方法，該方法包括給藥患者至少一種如本說明書所述化合物的有效治療量。
其它態(tài)樣中，提供治療患者疼痛的方法，該方法包括給藥患者疼痛的患者至少一種如本說明書所述化合物的有效治療量。
本發(fā)明進(jìn)一步提供治療患者搔癢、尿失禁、膀胱過動、咳嗽及/或打嗝的方法，該方法包括給藥患者一或多種前述病癥的患者至少一種如本說明書所述化合物的有效治療量。
本發(fā)明進(jìn)一步提供促進(jìn)肥胖患者減輕體重的方法，該方法包括給藥肥胖患者至少一種如本說明書所述VR-1調(diào)節(jié)劑的有效治療量。
進(jìn)一步提供用于辨識與辣椒素受體結(jié)合的藥劑的方法，該方法包括(a)于容許該化合物與辣椒素受體結(jié)合的條件下，使辣椒素受體與如本說明書所述的經(jīng)標(biāo)志化合物接觸，因此產(chǎn)生經(jīng)結(jié)合且經(jīng)標(biāo)志的化合物；(b)在無測試藥劑存在下，檢測相對應(yīng)于經(jīng)結(jié)合且經(jīng)標(biāo)志化合物量的訊號；(c)使此經(jīng)結(jié)合、且經(jīng)標(biāo)志化合物與測試藥劑接觸；(d)在測試藥劑存在下，檢測相對應(yīng)于經(jīng)結(jié)合且經(jīng)標(biāo)志化合物的訊號；以及(e)相較于步驟(b)所檢測的訊號，檢測出于步驟(d)所檢測的訊號減弱。
又進(jìn)一步態(tài)樣中，本發(fā)明提供測定試樣中是否有辣椒素受體的方法，該方法包括(a)于容許VR1調(diào)節(jié)劑與辣椒素受體結(jié)合的條件下，使樣品與如本說明書所述的VR1調(diào)節(jié)劑接觸；以及(b)檢測與辣椒素受體結(jié)合的VR1調(diào)節(jié)劑含量。
本發(fā)明亦提供經(jīng)包裝的醫(yī)藥制劑，其包括(a)置于容器中的如本說明書所述的醫(yī)藥組合物；及(b)使用該組合物治療對辣椒素受體調(diào)節(jié)作用敏感的一種或多種病癥(例如，疼痛、搔癢、尿失禁、膀胱過動、咳嗽打嗝及/或肥胖癥)的說明書。
又一態(tài)樣中，本發(fā)明提供制備本說明書揭示的化合物(包括中間產(chǎn)物)的方法。
參照下文詳細(xì)說明后，將更明白本發(fā)明彼等及其它態(tài)樣。
如上文所述，本發(fā)明是提供經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物。此等調(diào)節(jié)劑可在體外或體內(nèi)使用，以調(diào)節(jié)各種背景的辣椒素受體活性。
術(shù)語本說明書中化合物通常使用標(biāo)準(zhǔn)命名法予以敘述。對于具有不對稱中心的化合物，應(yīng)了解(除非另行指明)所有光學(xué)異構(gòu)物及其混合物均涵蓋在內(nèi)。此外，具有碳-碳雙鍵的化合物得呈Z與E型，除非另行指明，否則化合物的所有異構(gòu)物型均涵蓋于本發(fā)明范圍內(nèi)。當(dāng)化合物以多種互變異構(gòu)物存在時，所述化合物并不限制為任一特定的互變異構(gòu)物，而是意指涵蓋所有互變異構(gòu)物型。某些化合物于本說明書中是使用包含變量(例如，R3、A1、X)的通式予以敘述。除非另行指明，此一化學(xué)式中的每一變量是與任何其它變量獨立地界定；于化學(xué)式中出現(xiàn)一次以上的任何變量，每次出現(xiàn)時均各自獨立地界定。
本說明書所用「經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物」一詞涵蓋符合本說明書所提供一種或多種式的所有化合物，包括任何鏡像化合物、消旋化合物與立體異構(gòu)物，以及此等化合物之醫(yī)藥上可接受鹽。此等化合物包括其雙環(huán)核心(其包括V、X、W、Y與Z)的環(huán)氮原子之?dāng)?shù)目及/或置換上經(jīng)修改的類似物，以及具有如下文詳述的各種取代基連結(jié)至該等核心結(jié)構(gòu)的類似物。換句話說，喹唑啉-4-基胺衍生物范疇內(nèi)的化合物為其W、Y與Z中的一個或多個為氮的喹啉-4-基胺、喹啉-2-基胺與喹唑啉-4-基胺及其衍生物。某些具體實例中，較佳的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺類似物為Y與Z中至少一個為氮者。
化合物的「醫(yī)藥上可接受鹽」，是為本領(lǐng)域中通常認(rèn)為適于與人類或動物組織接觸而無過多毒性、刺激性、過敏反應(yīng)或其它問題或并發(fā)癥的酸或堿的鹽。此等鹽包含具有堿性殘基的(例如胺類)的無機(jī)酸鹽與有機(jī)酸鹽，以及具有酸性殘基(例如羧酸類)的堿金屬鹽或有機(jī)鹽。特定醫(yī)藥上鹽類包括但不限于，例如鹽酸、磷酸、氫溴酸、蘋果酸、乙醇酸、反丁烯二酸、硫酸、胺磺酸、對氨基苯磺酸、甲酸、甲苯磺酸、甲磺酸、苯磺酸、乙烷二磺酸、2-羥基乙磺酸、硝酸、苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、硬脂酸、水楊酸、麩胺酸、抗壞血酸、雙羥萘酸(pamoic)、琥珀酸、順丁烯二酸、丙酸、羥基順丁烯二酸、氫碘酸、苯基乙酸、烷酸例如乙酸、HOOC-(CH2)n-COOH(其中n為0至4)等酸的鹽。同樣地，醫(yī)藥上可接受的陽離子包括但不限于，鈉、鉀、鈣、鋁、鋰與銨。在此技術(shù)領(lǐng)域具有通常知識者可進(jìn)一步認(rèn)知，本說明書所提供化合物的醫(yī)藥上可接受鹽，包括該些Remington’sPharmaceutical Sciences，第17版，1418頁(賓州Easton市MackPublishing Company出版，1985年)所列舉者。通常，醫(yī)藥上可接受的酸或堿的鹽能以任何習(xí)知的化學(xué)方法，從含有堿性或酸性基團(tuán)的母化合物予以合成。簡單地說，此等鹽能藉由使此等化合物的游離酸或游離堿形式與適當(dāng)堿或酸的化學(xué)計量，于水或有機(jī)溶劑或二者的混合物中反應(yīng)予以制備；通常，以使用非水溶液介質(zhì)，例如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈為佳。
咸了解經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物之每一個各可配制成(但非必需)水合物、溶劑合物或非共價錯合物。此外，各種結(jié)晶形式與多晶形均包括在本發(fā)明范疇內(nèi)。本說明書亦提供前驅(qū)藥物?！盖膀?qū)藥物」為一種不一定完全符合本說明書所提供式的結(jié)構(gòu)所需條件，但可在給藥患者后，在體內(nèi)修飾，產(chǎn)生符合本說明書所提供一種或多種式中的化合物。例如前驅(qū)藥物可為本說明書所提供化合物的?；苌?。前驅(qū)藥物包括其中羥基、胺或氫硫基鍵結(jié)在任何基團(tuán)上的化合物，當(dāng)給藥哺乳動物個體后，會分別裂解形成游離羥基、氨基或氫硫基。前驅(qū)藥物實施例包括但不限于本說明書所提供化合物中醇與胺官能基的乙酸酯、甲酸酯與苯甲酸酯衍生物。本說明書所提供化合物的前驅(qū)藥物可藉由修飾化合物中的官能基，使得該修飾物裂解形成母體化合物而制備。
本說明書所用的「烷基」一詞是指直線或分枝的鏈型或環(huán)型的飽和脂族烴。烷基基團(tuán)包括具1至8個碳原子(C1-C8烷基)、1至6個碳原子(C1-C6烷基)、及1至4個碳原子(C1-C4烷基)的基團(tuán)，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、第二級丁基、第三丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基、3-甲基戊基、環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基、環(huán)戊基、環(huán)戊基甲基、環(huán)己基、環(huán)庚基與降基?！窩0-C4烷基」意指單一共價鍵(C0)或具有1、2、3或4個碳原子的烷基；「C0-C6烷基」意指單一共價鍵或C1-C6烷基；「C0-C8烷基」意指單一共價鍵或C1-C8烷基。某些具體例中，較佳烷基為直線或分枝的鏈型。本說明書某些例子中，具體地指示烷基的取代基。舉例而言，「C1-C6氨基烷基」意指具有至少一個NH2取代基的C1-C6烷基。同樣地，「C1-C6羥基烷基」意指具有至少一個-OH取代基的C1-C6烷基。
「亞烷基」如上文所述意指二價烷基，C0-C3亞烷基為單一共價鍵或具有1、2或3個碳原子的亞烷基。
「烯基」是指直線或分枝的鏈型或環(huán)型烯基，其中存在至少一個不飽和碳-碳雙鍵。烯基包括分別具有2至8個、2至6個或2至4個碳原子的C2-C8烯基、C2-C6烯基及C2-C4烯基，例如乙烯基、烯丙基或異丙烯基?！溉不故侵妇哂幸粋€或多個不飽和碳-碳鍵，且其中至少一個為三鍵的直線或分枝的鏈型或環(huán)型炔基。炔基包括分別具有2至8個、2至6個或2至4個碳原子的C2-C8炔基、C2-C6炔基及C2-C4炔基。某些具體例中，較佳的烯基與炔基為直線或分枝的鏈型。
本說明書所用的「烷氧基」，意指經(jīng)由氧橋連接至如上文所述的烷基。烷氧基包括分別具有1至6個或1至4個碳原子的C1-C6烷氧基及C1-C4烷氧基。具體的烷氧基為甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基、正戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧基、異戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基、及3-甲基戊氧基。
同樣地，「烷硫基」意指經(jīng)由硫橋連接至如上文所述的烷基、烯基或炔基。較佳的烷氧基與烷硫基為其烷基經(jīng)由雜原子橋連接者。
本說明書所使用的「氧代基」，意指酮基(C＝O)。作為非芳香性碳原子上取代基的氧代基，會使-CH2-轉(zhuǎn)變成-C(＝O)-。
「烷?；挂辉~是指呈線型或分支型排列的?；?例如，-(C＝O)-烷基)，其中連接是經(jīng)由酮基的碳。烷?；前ǚ謩e具有2至8個、2至6個或2至4個碳原子的C2-C8烷?；2-C6烷?；癈2-C4烷?；！窩1烷酰基」是指-(C＝O)-H，其(與C2-C8烷酰基)由術(shù)語「C1-C8烷?；顾w。乙?；鶠镃2烷?；?。
「烷酮」是為酮基中的碳原子呈線型或分支型烷基排列者。「C3-C8烷酮」、「C3-C6烷酮」與「C3-C4烷酮」分別是指具有3至8、至6至4個碳原子的烷酮。舉例而言，C3烷酮的結(jié)構(gòu)式為-CH2-(C＝O)-CH3。
同樣地，「烷基醚」是指線型或分支型醚取代基。烷基醚基團(tuán)是包括分別具有2至8、至6或至4個碳原子的C2-C8烷基醚、C2-C6烷基醚及C2-C4烷基醚等基團(tuán)。舉例而言，C2烷基醚的結(jié)構(gòu)式為-CH2-O-CH3。
「烷氧基羰基」一詞是指經(jīng)由羰基(即具有一般結(jié)構(gòu)為-C(＝O)-O-烷基)連接的烷氧基。烷氧基羰基是包括各別具有2至8、至6或至4個碳原子的C2-C8、C2-C6及C2-C4烷氧基羰基。「C1烷氧基羰基」是指-C(＝O)-OH，其中由術(shù)語「C1-C8烷氧基羰基」所涵蓋?！讣籽趸驶挂釩(＝O)-OCH3。
本說明書所用的「烷?；趸梗侵附?jīng)由氧橋(即具有結(jié)構(gòu)通式為-O-C(＝O)-烷基)連接的烷?；?。烷?；趸前ǜ鲃e具有2至8、至6或至4個碳原子的C2-C8、C2-C6及C2-C4烷?；趸?br> 「烷磺?；故侵妇呤?(SO2)-烷基的基團(tuán)，其中該硫原子為附接點。烷磺酰基包括分別具有1至8個或1至6個碳原子的C1-C8烷磺?；癈1-C6烷磺?；?。
「烷基磺酰氨基」是指具式-(SO2)-N(R)2的基團(tuán)，其中該硫原子為附接點，且各R獨立地為氫或烷基。術(shù)語「單或二(C1-C6烷基)磺酰氨基」是指其中一個R為C1-C6烷基，另一個R為氫或獨立地選自C1-C6烷基的此等基團(tuán)。
「烷氨基」是指構(gòu)造通式為-NH-烷基或-N(烷基)(烷基)的二級或三級胺，其中各烷基可為相同或不同。此等基團(tuán)包括，例如，單-及二-(C1-C8烷基)氨基，其中各烷基可為相同或不同，且可含有1至8個碳原子，以及單-與二-(C1-C6烷基)氨基和單-與二-(C1-C4烷基)氨基。
「烷基氨基烷基」意指經(jīng)由烷基連結(jié)的烷基氨基(亦即具有通式結(jié)構(gòu)為-烷基-NH-烷基或-烷基-N(烷基)(烷基)的基團(tuán))，其中各烷基是分別獨立選出。此等基團(tuán)包括例如單-與二-(C1-C8烷基)氨基C1-C8烷基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷基及單-與二-(C1-C4烷基)氨基C1-C4烷基，其中各烷基可為相同或相異。「單-或二-(C1-C6烷基)氨基C0-C6烷基」意指經(jīng)由單一共價鍵或C1-C6烷基連接的單-或二-(C1-C6烷基)氨基。下列為代表性烷基氨基烷基 術(shù)語「氨基羰基」是指酰氨基(亦即，-(C＝O)NH2)?！竼?或二-(C1-C8烷基)氨基羰基」是氨基羰基的一個或兩個氫原子以C1-C8烷基置換。若兩個氫原子均經(jīng)如此置換時，該C1-C8烷基可為相同或不同。
術(shù)語「鹵素」是指氟、氯、溴及碘。
「鹵烷基」為經(jīng)1個或多個鹵素原子取代的分支型、直鏈型或環(huán)型烷基(例如，「C1-C8鹵烷基」具有1至8個碳原子；「C1-C6鹵烷基」具有1至6個碳原子)。鹵烷基的實例包括但不限于，單-、二-或三-氟甲基；單-、二-或三-氯甲基；單-、二-、三-、四-或五-氟乙基；單-、二-、三-、四-或五-氯乙基；及1，2，2，2-四氟-1-三氟甲基-乙基。典型的鹵烷基為三氟甲基及二氟甲基。術(shù)語「鹵烷氧基」是指經(jīng)由氧橋連接的如上文所界定的鹵烷基。「C1-C6鹵烷氧基」具有1至6個碳原子。
非介于兩個字母或符號間的破折號(-)用于指示取代基的附接點。例如，-CONH2是經(jīng)由碳原子附接。
本說明書所用「雜原子」一詞是指氧、硫或氮。
「碳環(huán)」或「碳環(huán)狀基」包括至少一個全部由碳-碳鍵形成的環(huán)(本說明書稱為碳環(huán)狀環(huán))，且不含雜環(huán)狀環(huán)。除非另有指明，否則碳環(huán)中的每一碳環(huán)狀環(huán)得為飽和、部分飽和或芳香族。碳環(huán)通常具有1至3個稠合環(huán)、側(cè)環(huán)或螺環(huán)；某些具體例的碳環(huán)具有一個環(huán)或二個稠合的環(huán)。典型地，每一環(huán)含有3至8個環(huán)員(亦即，C3-C8)；某些具體實施例列舉為C5-C7環(huán)。包含稠合環(huán)、側(cè)環(huán)或螺環(huán)的碳環(huán)通常包含9至14環(huán)員。某些代表性碳環(huán)為環(huán)烷基(亦即，包含飽和與/或部分飽和的環(huán)，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、金剛烷基、十氫-萘基、八氫-茚基，及任何上述的部分飽和的變體，例如環(huán)己烯基)。其它碳環(huán)為芳基(亦即，含有至少一個芳香族的碳環(huán)狀環(huán)，具有或不具有另外的稠合環(huán)、側(cè)環(huán)或螺環(huán)之烷基環(huán))。此等碳環(huán)包括例如，苯基、萘基、芴基(fluorenyl)、茚基、及1，2，3，4-四氫萘基。
本說明書中所列舉的某些碳環(huán)為(C6-C10芳基)C0-C8烷基(亦即，包含經(jīng)由單一共價鏈或C1-C8烷基來連接至少一個芳香環(huán)的碳環(huán)基團(tuán))。此等基團(tuán)包括例如，苯基及茚基，以及經(jīng)由C1-C8烷基(較佳為經(jīng)由C1-C4烷基)來連接上述任一個的基團(tuán)。經(jīng)由單一共價鍵或烷基連接的苯基，標(biāo)示為苯基C0-C8烷基(例如，苯甲基、1-苯基-乙基、1-苯基-丙基與2-苯基-乙基)。苯基C1-C8烷氧基意指經(jīng)由氧橋或具有1至8個碳原子的烷氧基(亦即，苯氧基為苯甲氧基)連接的苯基。
「雜環(huán)」或「雜環(huán)狀基」具有1至3個稠合環(huán)、側(cè)環(huán)或螺旋環(huán)，其中至少一個為雜環(huán)(亦即，一個或多個環(huán)原子為雜原子，而其余的環(huán)原子為碳)。典型地，雜環(huán)狀環(huán)包含1、2、3或4個雜原子；某些具體例中，各雜環(huán)狀環(huán)的各環(huán)具有1或2個雜原子。每個雜環(huán)狀環(huán)通常含有3至8個環(huán)員(某些具體例中列舉出具有4或5至7個環(huán)員的環(huán))，而包含稠合環(huán)、側(cè)環(huán)或螺環(huán)的雜環(huán)通常含有9至14個環(huán)員。某些雜環(huán)含有硫原子做環(huán)員；某些具體實例中，該硫原子經(jīng)氧化為SO或SO2。雜環(huán)可視需要以所指示的各種取代基來取代。除非另有指明，否則雜環(huán)可為雜環(huán)烷基(亦即，各環(huán)為飽和或部分飽和)或雜芳基(亦即，該基團(tuán)中至少一個環(huán)為芳香性)。雜環(huán)基一般可經(jīng)由任何環(huán)或取代基原子來鍵結(jié)，其限制條件為結(jié)果要為穩(wěn)定化合物。N-連結(jié)雜環(huán)基是經(jīng)由成分中的氮原子進(jìn)行連結(jié)。
雜環(huán)狀基包括，例如，吖啶基(acridinyl)、氮口半基(azepanyl)、氮口辛基(azocinyl)、苯并咪唑基(benzimidazolyl)、苯并咪唑啉基(benzimidazolinyl)、苯并異噻唑基(benzisothiazolyl)、苯并異噁唑基(benzisoxazolyl)、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基(benzothiofuranyl)、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并四唑基、克基(chromanyl)、克烯基、口辛喏啉基(cinnolinyl)、十氫喹啉基(decahydroquinolinyl)、二氫呋喃[2，3-b]四氫呋喃基、二氫異喹啉基、二氫四氫呋喃基、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4，5]癸-基、二噻嗪基(dithiazinyl)、呋喃基、呋呫基(furazanyl)、咪唑啉基、咪唑啶基(imidazolidinyl)、咪唑基、吲唑基(indazolyl)、吲哚烯基(indolenyl)、吲哚啉基、吲哚嗪基、吲哚基、異苯并呋喃基、異色滿基、異吲唑基、異吲哚啉基、異吲哚基、異噻唑基、異噁唑基、異喹啉基、嗎啉基、萘啶基(naphthyridinyl)、八氫異喹啉基、噁二唑基(oxadiazolyl)、噁唑啶基(oxazolidinyl)、噁唑基、酞嗪基、嗪哌嗪基(piperazinyl)、哌啶基、哌啶酮基(piperidonyl)、喋啶基、嘌呤基、呱喃基、吡嗪基、吡唑啶基(pyrazolidinyl)、吡唑啉基、吡唑基、嗒嗪基(pyridazinyl)、吡啶并咪唑基、吡啶并噁唑基、吡啶咯并噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯啶基(pyrrolidinyl)、吡咯烷酮基(pyrrolidonyl)、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基(quinazolinyl)、喹啉基、喹喏啉基、醌啶基(quinuclidinyl)、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四唑基、噻二嗪基(thiadiazinyl)、噻二唑基(thiadiazolyl)、噻唑基、噻吩并噻唑基(thienothiazolyl)、噻吩并噁唑基(thienoxazolyl)、噻吩并咪唑基(thienoimidazolyl)、噻吩基(thienyl)、噻吩基(thiophenyl)、硫代嗎啉基、及其硫原子經(jīng)氧化的變體、三嗪基，及以如上所述的1至4個取代基所取代的前述任何基團(tuán)。
某些雜環(huán)基為可視需要經(jīng)取代之包含1個雜環(huán)或2個稠合環(huán)或螺環(huán)的4-至10-員、5-至10-員、3-至7-員、4-至7-員或5-至7-員基團(tuán)，。4-至10-員雜環(huán)烷基包括例如哌啶基、嗪哌嗪基、吡咯啶基、吖口半基、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸-8-基、N-嗎啉基、硫代N-嗎啉基與1，1-二氧代-硫代嗎啉-4-基。此等基團(tuán)可經(jīng)指定的基團(tuán)取代。代表性芳香族雜環(huán)為吖口辛基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、四唑基與3，4-二氫-1H-異喹啉-2-基。(C3-C10)雜環(huán)烷基包括例如哌啶基、嗪哌嗪基、吡咯啶基、吖口半基、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸-8-基、N-嗎啉基、硫代N-嗎啉基與1，1-二氧代-硫代嗎啉-4-基，及其分別經(jīng)取代的基團(tuán)。代表性芳香族雜環(huán)為吖口半基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、四唑基與3，4-二氫-1H-異喹啉-2-基。
其它雜環(huán)基包括例如吖啶基、吖口半基、吖口辛基、苯并咪唑基、苯并咪唑啉基、苯并異噻唑基、苯并異噁唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、唑基、苯并四唑基、NH-唑基、啉基、色滿基、色烯基、口辛啉基、十氫喹啉基、二氫呋喃并[2，3-b]四氫呋喃、二氫異喹啉基、二氫四氫呋喃基、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸-8-基、二噻嗪基、呋喃基、呋呫基、咪唑啉基、咪唑啶基、咪唑基、吲唑基、吲哚烯基、吲哚啉基、吲哚嗪基、吲哚基、異苯并呋喃基、異色滿基、異吲唑基、異吲哚啉基、異吲哚基、異噻唑基、異噁唑基、異喹啉基、嗎啉基、萘啶基、八氫異喹啉基、噁二唑基、噁唑啶基、噁唑基、啡啶基、啡啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基、吩噁嗪基、酞嗪基、嗪哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、喋啶基、嘌呤基、呱喃基、吡嗪基、吡唑啶基、吡唑啉基、吡唑基、嗒嗪基、吡啶并咪唑基、吡啶并噁唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯啶基、吡咯烷酮基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喏啉基、醌啶基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四唑基、噻二嗪基、噻二唑基、噻嗯基(thianthrenyl)、噻唑基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基(thienyl)、噻吩基(thiophenyl)、硫代嗎啉基及其硫原子經(jīng)氧化的變體、三嗪基、呫噸基(xanthenyl)及以如上所述的1至4個取代基所取代的前述任何基團(tuán)。
「雜環(huán)C0-C8烷基」為利用單一共價鍵或C1-C8烷基連結(jié)的雜環(huán)基。(3-至10-員雜環(huán))C0-C6烷基為經(jīng)由單一共價鍵或C1-C6烷基連結(jié)的3至10員雜環(huán)基。(5-至7-員雜環(huán))C0-C6烷基為經(jīng)由單一共價鍵或C1-C6烷基連結(jié)的5至7員雜環(huán)；(4至7員雜環(huán)烷基)C0-C4烷基為用利共價單鍵或C1-C4烷基連結(jié)的4至7員雜環(huán)烷基環(huán)。
本說明書所用「取代基」一詞，是指與所關(guān)注分子的原子共價結(jié)合的分子基團(tuán)。舉例而言，「環(huán)取代基」得為例如鹵素、烷基、鹵烷基或與為環(huán)員之原子(較佳為碳或氮原子)共價結(jié)合的其它本說明書論及的基團(tuán)?！溉〈挂辉~是指以如上述的取代基置換分子結(jié)構(gòu)中的氫原子，且未超出該指定原子的價數(shù)，及由該取代產(chǎn)生具化學(xué)穩(wěn)定性的化合物(亦即，能進(jìn)行單離、鑒定、及測試生物活性的化合物)。
「視需要經(jīng)取代」的基團(tuán)為未經(jīng)取代或于一個或多個可用位置，典型地為1、2、3、4或5個位置，以氫以外的一個或多個適當(dāng)基團(tuán)(可相同或不同)加以取代的基團(tuán)。此等適當(dāng)取代基包括，例如，羥基、鹵素、氰基、硝基、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C1-C8烷氧基、C2-C8烷基醚、C3-C8烷酮、C1-C8烷硫基、氨基、單-或二-(C1-C8烷基)氨基、C1-C8鹵烷基、C1-C8鹵烷氧基、C1-C8烷?；2-C8烷酰氧基、C1-C8烷氧羰基、-COOH、-CONH2、單-或二-(C1-C8烷基)氨基羰基、-SO2NH2、及/或單-或二-(C1-C8烷基)磺酰氨基，以及碳環(huán)基與雜環(huán)基。視需要經(jīng)取代亦以「經(jīng)0至X個取代基所取代」一詞表示，其中X為可能取代基的最大個數(shù)。某些視需要經(jīng)取代的基團(tuán)是經(jīng)0至2、至3或至4個獨立選定的取代基所取代(亦即，未經(jīng)取代或以達(dá)所述最大個數(shù)的取代基所取代)。
「VR1」與「辣椒素受體」等詞可交換使用，以指稱第1型香草醇受體。除非另行指定，否則此等名詞涵蓋大鼠及人類VR1受體(例如，GenBank存取編號AF327067、AJ277028及NM 018727；特定人類VR1cDNAs的序列提供于美國專利案6,482,611的SEQ ID NOs1至3，所編碼的氨基酸序列示于SEQ ID NOs4與5)，以及于其它物種中發(fā)現(xiàn)的同系物。
「VR1調(diào)節(jié)劑」，于本說明書中亦稱為「調(diào)節(jié)劑」，是調(diào)節(jié)VR1活化作用及/或調(diào)節(jié)VR1媒介的訊息傳導(dǎo)作用的化合物。本說明書提供的VR1調(diào)節(jié)劑具體而言為式I化合物及式I化合物醫(yī)藥上可接受的鹽。VR1調(diào)節(jié)劑可為VR1促效劑或拮抗劑。若VR1的Ki小于1微摩爾濃度，較佳為小于100納摩爾濃度、10納摩爾濃度或1納摩爾濃度，則調(diào)節(jié)劑是以「高親和力」結(jié)合。本說明書實施例5提供測定VR1的Ki值的代表性試驗。
調(diào)節(jié)劑若經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)抑制類香草醇配位體與VR1的結(jié)合及/或抑制VR1媒介的訊息傳導(dǎo)作用(例如，使用實施例6提供的代表性試驗)，則視為「拮抗劑」；一般而言，此拮抗劑于實施例6提供的試驗中，以小于1微摩爾濃度，較佳為小于100納摩爾濃度，更佳為小于10納摩爾濃度或1納摩爾濃度的IC50值，抑制VR1的活化作用。VR1拮抗劑包括中性拮抗劑及反促效劑。某些實施例中，本說明書提供的辣椒素受體拮抗劑是非類香草醇。
VR1的「反促效劑」為于添加的類香草醇配位體不存在下，使VR1的活性減少至其基礎(chǔ)活性量以下的化合物。VR1的反促效劑亦得抑制類香草醇配位體在VR1的活性，及/或亦得抑制類香草醇配位體與VR1的結(jié)合?；衔飳︻愊悴荽寂湮惑w與VR1結(jié)合的抑制能力可藉由結(jié)合試驗予以測定，例如實施例5提供的結(jié)合試驗。VR1基礎(chǔ)活性，以及由于VR1拮抗劑存在下VR1活性的減少，均可由鈣移動試驗予以測定，例如實施例6的試驗。
VR1的「中性拮抗劑」為抑制類香草醇配位體在VR1的活性，但不顯著地改變該受體基礎(chǔ)活性的化合物(亦即，于類香草醇配位體不存在下，進(jìn)行如實例6所述的鈣移動試驗中，VR1活性的減少不大于10％，更佳為不大于5％，又更佳為不大于2％；最佳為未有可檢測出的活性減少)。VR1的中性拮抗劑得抑制類香草醇配位體與VR1的結(jié)合。
本說明書所用的「辣椒素受體促效劑」或「VR1促效劑」，是指提升該受體的活性至其基礎(chǔ)活性量以上(亦即，增進(jìn)VR1活化作用及/或增進(jìn)VR1媒介的訊息傳導(dǎo))的化合物。辣椒素受體促效劑活性得使用實施例6提供的代表性試驗予以鑒定。通常，此促效劑于實施例6提供的試驗中，具有小于1微摩爾濃度，較佳為小于100納摩爾濃度，更佳為小于10納摩爾濃度的EC50值。于某些具體實例中，本說明書提供的辣椒素受體促效劑不為類香草醇。
「類香草醇」是含有苯環(huán)的辣椒素或任何辣椒素類似物，該苯環(huán)帶有兩個氧原子結(jié)合至相鄰環(huán)碳原子(其中一個碳原子是位于結(jié)合至該苯環(huán)的第三個基團(tuán)附接點的對位)。類香草醇若以不大于10μM的Ki(以如本說明書所述方式測定)與VR1結(jié)合，則為「類香草醇配位體」。類香草醇配位體促效劑包括辣椒素、歐瓦尼(olvanil)、N-花生四烯?；?多巴胺(N-arachidonoyl-dopamine)及樹膠脂毒素(RTX)。類香草醇配位體拮抗劑包括辣椒氮呯及碘-樹膠脂毒素。
「治療有效量(或劑量)」是指給藥患者后產(chǎn)生可辨別癥狀緩解的量(例如，提供患者從所治療的狀況中檢測出緩解)。此等緩解得使用任何適當(dāng)準(zhǔn)則予以檢測，包括一種或多種癥狀(例如疼痛)的緩解。治療有效量或劑量通常導(dǎo)致體液(例如，血液、血漿、血清、腦脊髓液、關(guān)節(jié)液、淋巴、細(xì)胞組織間、淚液或尿液)中有足以改變體外類香草醇配位體與VR1結(jié)合(使用實施例5提供的測定方法)，及/或VR1-媒介的訊號傳導(dǎo)(使用實施例6提供的測定方法)的化合物濃度。
「患者」是以本說明書提供的化合物(例如，VR1調(diào)節(jié)劑)治療的任何個體?；颊甙ㄈ祟悾约捌渌鼊游锢缗惆閯游?例如，狗與貓)及家畜?；颊呖赡軞v經(jīng)對辣椒素受體調(diào)節(jié)具敏感狀況的一種或多種癥狀(例如，疼痛、暴露于類香草醇配位體、搔癢、尿失禁、膀胱過動、呼吸性疾病、咳嗽及/或打嗝)，或可能并無此等病癥(亦即，為預(yù)防性治療)。
經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物如上所述，本發(fā)明提供經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物得用于多種情況，包括治療疼痛(例如，神經(jīng)性或末梢神經(jīng)媒介的疼痛)；暴露于辣椒素；暴露于酸、熱、光、催淚瓦斯空氣污染物、胡椒噴霧劑或相關(guān)制劑；呼吸性癥狀例如氣喘或慢性梗塞性肺??；搔癢；尿失禁或膀胱過動；咳嗽或打嗝；及/或肥胖癥。此等化合物亦得使用在體外試驗(例如，受體活性試驗)，作為VRI的檢測與定位的探針，以及作為配位體結(jié)合及VR1-媒介的訊息傳導(dǎo)試驗的標(biāo)準(zhǔn)品。
本說明書所提供的某些化合物為可于納摩爾(亦即，次微摩爾濃度)，較佳為于次納摩爾濃度，更佳為于100微微摩爾(picomolar)、20微微摩爾、10微微摩爾或5微微摩爾以下濃度，檢測性地調(diào)節(jié)辣椒素與VR1的結(jié)合。此等調(diào)節(jié)劑較佳不為類香草醇。某些較佳調(diào)節(jié)劑為VR1拮抗劑，于實施例6敘述的試驗中未有可檢測出的促效劑活性。較佳的VR1調(diào)節(jié)劑進(jìn)一步以高親和力與VR1結(jié)合，且實質(zhì)上不抑制人類上皮細(xì)胞生長因子(EGF)受體酪胺酸激酶的活性。
本說明書所提供的某些化合物進(jìn)一步滿足式II至VII中的一個或多個，或其次要式，或此等化合物的醫(yī)藥上可接受的鹽。
式I中，標(biāo)示如下的基團(tuán) 是為雙環(huán)基，其中稠合環(huán)包含A1與A5，或A4與A5。某些此等雙環(huán)基是于上述式II至VII中說明。藉由舉例，具體列舉下述的雙環(huán)基，得如本說明書所述視需要經(jīng)取代 以及上述變體的該稠合環(huán)中得包含一個或多個額外的雙鍵，例如 與 標(biāo)示如下的基團(tuán)的取代基
一般如上所述。某些具體例中，包含A1至A5的環(huán)(亦即，不包括該稠合環(huán))為未經(jīng)取代或經(jīng)選自鹵素、羥基、氰基、C1-C6烷基與C1-C6鹵烷基的單一取代基取代。進(jìn)一步具體例中，該稠合環(huán)(例如，式II中標(biāo)示為B者)經(jīng)0至6個、0至5個或0至3個取代基所取代。某些此等化合物中，該稠合環(huán)的一個取代基是選自氧代基、C1-C6烷基、C1-C6烷基醚、C1-C6羥基烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷?；?與二-(C1-C6烷基)氨基C0-C6烷基與(5-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C6烷基；以及若有任何其它的取代基系選自鹵素、羥基、氧代基、氰基與C1-C6烷基。代表性的5-至7-員雜環(huán)烷基團(tuán)包括，例如，嗎啉、嗪哌嗪與哌啶。
式I至VI的某些具體例中，Ar是為苯基、吡啶基或嘧啶基，其中每一個各為未經(jīng)代或經(jīng)1、2或3個如上述的取代基所取代；若有任何取代基，此等取代基較佳為獨立地選自鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基與C1-C6鹵烷氧基。舉例而言，Ar可含有選自鹵素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷基與C1-C6鹵烷氧基的一個取代基。如果存在一個或多個Ar取代基，在某些具體例中，此等取代基的至少一個是位于附接點的鄰位(例如，Ar可為在2-位置經(jīng)代的苯基，或在3-位置經(jīng)取代的2-吡啶基)?；蛘撸虼送?，在某些具體例中，此等取代基中的至少一個是位于附接點的對位。Ar1基包括，但不限于吡啶-2-基、3-甲基-吡啶-2-基、3-三氟甲基-吡啶-2-基與3-鹵-吡啶-2-基。
式I至VI的某些具體例中，變量X與V獨立地為CH或N，其限制條件為X與V中至少一個為N。某些此等化合物中，X為N，而V為CH某些其它具體實例中，X與V兩者皆為N，或X為CH，而V為N。式VII的某些具體例中，X為N或CH。
式I及II的進(jìn)一步具體例中，變量W、Y與Z獨立地為CR1或N，其中在W、Y與Z位置的R1為氫、C1-C4烷基或C1-C4鹵烷基，以氫為較佳。某些此等化合物中，Y與Z中至少一個較佳為N。某些進(jìn)一步化合物中，各R1為CH。本說明書所提供的化合物包括，例如，其中W為CH者(例如，包括次式的式III至VII的化合物)以及在Y與Z位置的R1為氫、C1-C4烷基或C1-C4鹵烷基，以氫為較佳。某些此等化合物中，Y為N且Z為CH。其它此等化合物中，Y與Z兩者皆為CH，或Z為N且Y為CH。
式I與II的某些具體例中，U為CR2(包含次式的式III至VII，是說明某些此等化合物)。某些如本說明書所述使用式-Rc-M-A-Ry的R2基，其中每一個各是獨立地選出。M得為不存在、單一共價鍵或含有至少一個雜原子的連接基團(tuán)。適當(dāng)?shù)腗基團(tuán)包括O、S、SO(亦即， )、SO2(亦即， )、C(＝O)(亦即， )、OC(＝O)(亦即， )、C(＝O)O(亦即， )、O-C(＝O)O(亦即， )、C(＝O)N(Rz)(亦即， )、OC(＝O)N(Rz)(亦即， )、N(Rz)C(＝O)(亦即， )、N(Rz)(亦即， )、SO2N(Rz)(亦即， )或N(Rz)SO2(亦即， )。某些具體例中，M得為不存在、單一共價鍵、O、OC(＝O)、C(＝O)O、C(＝O)N(Rz)、N(Rz)C(＝O)或N(Rz)，其中Rz為視需要連接至Ry以形成經(jīng)0至3個獨立地選自Rb的取代基所取代的5-至7-員碳環(huán)或雜環(huán)。顯而易見，式Rc-M-A-Ry的基團(tuán)中，若Rc為C0亞烷基，則M與A得為不存在，然后R2為-Ry。
其它此等化合物中，R2是為(i)氫或鹵素；或(ii)如下式的基團(tuán) 其中R為-O-R7或 R7是選自
(i)氫；(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C2-C8烷?；?、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、(C6-C10芳基)C0-C8烷基與(5-至10-員雜環(huán))C0-C8烷基其每一個各經(jīng)0至9個獨立地選自Rb的取代基所取代；及(iii)連接至R5或R6以形成經(jīng)0至6個獨立地選自Rb的取代基所取代的4-至10-員雜環(huán)基的基團(tuán)；R3與R4為(i)各自獨立地選自(a)氫；(b)C1-C8烷基(亦即，C4-C7環(huán)烷基)、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C1-C8烷氧基、C3-C8烷酮、C2-C8烷?；1-C8烷氧基羰基、C2-C8烷基醚、(C6-C10芳基)C0-C8烷基、(5-至10-員雜環(huán))C0-C8烷基與C1-C8烷基磺?；涿恳粋€各經(jīng)0至9個獨立地選自Rb的取代基所取代；及(c)連接至R5或R6以形成經(jīng)0至6個獨立地選自Rb的取代基所取代的4-至10-員雜環(huán)基的基團(tuán)；或(ii)與其所相連的N連接以形成經(jīng)0至6個獨立地選自Rb、C1-C8烷酰基、(4-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C4烷基，及單-與二-(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷基的取代基所取代的4-至10-員雜環(huán)基；及R5與R6每次出現(xiàn)時獨立地為(i)各自獨立地選自(a)氫或羥基；(b)未經(jīng)取代或經(jīng)1或2個獨立地選自Rb的取代基所取代的C1-C8烷基；及(c)連接至R3或R7以形成經(jīng)0至6個獨立地選自Rb的取代基所取代的5-至10-員雜環(huán)基的基團(tuán)；(ii)相連一起以形成酮基-(C＝O)-；或
(iii)連接以形成經(jīng)0至4個選自Rb的取代基所取代的3-至7-員碳環(huán)或雜環(huán)基；及n是為1、2或3。
代表性的R2基包括，例如(i)氫或鹵素；或(ii)C1-C6烷基、-(CH2)nNH2、-(CH2)nN(H)C1-C8烷基、-(CH2)nN(C1-C8烷基)2、-(CH2)n(4-至8-員雜環(huán)烷基)、-(CH2)nOH、-(CH2)nOC1-C6烷基或-(CH2)nO-苯甲基，其每一個各經(jīng)0至4個獨立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基與C1-C6鹵烷基的取代基所取代，其中各n為0、1、2或3。
某些具體例中，R3與R4各自獨立地選自(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8烷酮、C1-C8烷酰基、C2-C8烷基醚、(C6-C10芳基)C0-C8烷基、(5-至10-員雜環(huán))C0-C8烷基與C1-C8烷基磺?；?，其每一個各經(jīng)0至9個獨立地選自Rb的取代基所取代。其它具體例中，R3與R4各自獨立地選自(i)氫；與(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、苯基C0-C4烷基、茚基C0-C4烷基、5-至6-員雜芳基C0-C4烷基與(4-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C4烷基，其每一個各經(jīng)0至4個獨立地選自羥基、鹵素、氨基、C-1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基與C1-C6鹵烷氧基的取代基所取代。代表性的R3與R4基團(tuán)包括C1-C6烷基、C2-C6烯基、(5-至7-員雜環(huán))C0-C4烷基、C2-C6烷基醚、茚基、苯甲基、1-苯基-乙基、1-苯基-丙基與2-苯基-乙基，其每一個各經(jīng)0至3個獨立地選自羥基、鹵素與C1-C4烷基的取代基所取代。舉例而言，R3與R4中至少一個可為吡啶基C0-C4烷基、嘧啶基C0-C4烷基、咪唑基C0-C4烷基或四唑基C0-C4烷基，其中每一個各經(jīng)0、1或2個取代基所取代。或者，R3與/或R4可連接至R5或R6基(與R3與R4所相連的N及介于該N與R5或R6之間的任何碳原子)以形成視需要可經(jīng)取代的雜環(huán)、例如5-至10-員單-或二-環(huán)狀基。
其它具體例中，式II的R3與/或R4形成視需要經(jīng)取代的雜環(huán)。舉例來說，R3與R4可與其所相連的N連接以形成視需要經(jīng)取代的雜環(huán)；或R3或R4可連接至R5或R6的基團(tuán)以形成視需要經(jīng)取代的雜環(huán)。其它例子中，所造成的雜環(huán)可為，例如，經(jīng)0至4個取代基(例如，1至4個取代基或0、1或2個取代基)所取代的4-或5-至10-員之單-或二-環(huán)狀基。某些具體例中，各取代基是獨立地選自羥基、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵烷氧基、C1-C4烷酰基、C1-C4烷氧基羰基、氨基羰基、雜環(huán)C0-C8烷基與雜環(huán)C1-C8烷氧基羰基。某些具體例中，此等取代基是為低碳數(shù)的烷基，例如甲基與/或乙基。
含R3與/或R4的雜環(huán)基可為雜芳基，其包含芳環(huán)(例如，視需要經(jīng)取代之吖啶基、苯并唑啉基、苯并咪唑基、苯并三唑基、咔唑基、口辛啉基、吲唑基、吲哚啉基、吲哚基、異喹啉基、喹喏啉基、萘啶基、啡啶基、啡嗪基、啡噻嗪基、啡噁嗪基、酞嗪基、喋啶基、喹啉基、喹喏啉基、喹唑啉基、四氫異喹啉基或四氫喹啉基)。此等雜芳基的一個為3，4-二氫-1H-異喹啉-2-基。或者，該雜環(huán)可為視需要經(jīng)取代的雜環(huán)烷基，例如氮口半基、吖啶基、十氫喹啉基、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸-8-基、咪唑啶基、咪唑啉基、N-嗎啉基、哌啶基、嗪哌嗪基、嗒嗪基、吡唑啶基、吡唑啉基、吡咯啶基、硫代N-嗎啉基或1，1-二噁-硫代嗎啉-4-基。由R3與R4形成的代表性的雜環(huán)包括，但不限于，視需要經(jīng)取代的氮口半(azepane)、氮口辛(azocane)、二氫異喹啉、咪唑、嗎啉、八氫喹啉、嗪哌嗪、哌啶與吡咯啶。可由R3與R4形成而與R5或R6組合的代表性的雜環(huán)包括(但不限于)，視需要經(jīng)取代的哌啶與吡咯啶。
某些具體例中的R7為(i)氫；或(ii)C1-C8烷基(例如，C4-C7環(huán)烷基)、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、(C6-C10芳基)C0-C8烷基或(5-至10-員雜環(huán))C0-C8烷基，其每一個各經(jīng)0至9個獨立地選自Rb的取代基所取代。其它具體例中，R7為(i)氫；或(ii)C1-C6烷基、C2-C6烷基醚、苯基C0-C4烷基、(5-至6-員雜芳基)C0-C4烷基或(4-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C4烷基，其每一個各經(jīng)0至4個獨立地選自羥基、鹵素、氨基、C-1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基與C1-C6鹵烷氧基的取代基所取代。代表性的R7基團(tuán)包括氫、C1-C4烷基、C1-C4烷基醚與苯甲基，其每一個各經(jīng)0至3個獨立地選自羥基、鹵素與C1-C4烷基的取代基所取代?；蛘?，R7可連接至R5或R6基團(tuán)(與R7所相連的O及任何介于O與R5或R6的間的碳原子)以形成視需要經(jīng)取代的雜環(huán)，例如，5-至10-員之單-或二-環(huán)狀基。所造成的雜環(huán)，例如，可經(jīng)0至4個(例如，0、1或2個)獨立地選自羥基、鹵素、C1-C4烷基、C1-C4鹵烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵烷氧基、C1-C4烷?；1-C4烷氧基羰基、氨基羰基、雜環(huán)C0-C8烷基與雜環(huán)C1-C8烷氧基羰基所取代。
某些具體例中，R5與R6獨立地(于每次出現(xiàn)時)為氫或視需要經(jīng)取代的C1-C6烷基；此外，或者，任何R5或R6可與任何其它的R5或R6連接以形成視需要經(jīng)取代的5-至7-員環(huán)烷基、或(如上所述)與R3或R4連接以形成視需要經(jīng)取代的雜環(huán)。某些此等化合物中，各R5與R6為氫。n可為1、2或3，在某些具體例中，以1為較佳。
某些化合物中，U為R2，且R2為C1-C6烷基、C2-C6烷基醚、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、N-嗎啉基、苯甲基氧甲基、嗪哌嗪基、哌啶基、苯基或吡啶基，其每一個各為經(jīng)0至4個獨立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基與C1-C6鹵烷基的取代基所取代。
某些具體例中，式I的R2為氫、氨基、羥基、鹵素或視需要經(jīng)取代的-(CH2)nNH2、-(CH2)nNH(C1-C8烷基)、-(CH2)nN(C1-C8烷基)2、-(CH2)n(4-至8-員雜環(huán)烷基)或-(CH2)nOH。視需要經(jīng)取代的基團(tuán)包括，例如，經(jīng)0至4個獨立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基、與C1-C6鹵烷基的取代基所取代的基團(tuán)。雜環(huán)烷基包括其雜環(huán)烷基包含直接連接至-(CH2)n的氮或氧原子者。
本說明書所提供的代表性化合物包括，但不限定于，該些于實施例1至3中所特定敘述者。顯然地，本說明書所述的特定化合物僅作為說明代表，而非用以限制本發(fā)明范圍。再者，如上所述，本發(fā)明的所有化合物得以游離的酸或堿或其醫(yī)藥上可接受的鹽呈現(xiàn)。
本發(fā)明的某些態(tài)樣中，本說明書所提供的經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物得如使用體外VR1官能性試驗(例如，鈣移動試驗、背根神經(jīng)節(jié)試驗)或體內(nèi)疼痛緩解試驗予以測定檢測出改變(調(diào)節(jié))VR1活性。此等活性的初期篩選，可使用VR1配位體結(jié)合試驗。本說明書中有關(guān)「VR1配位體結(jié)合試驗」，意欲參照例如實施例5所提供的標(biāo)準(zhǔn)體外受體結(jié)合試驗；「鈣移動試驗」(于本說明書中亦稱為「訊息傳導(dǎo)試驗」)得如依實施例6所述進(jìn)行。簡單而言，欲評估對VR1的結(jié)合作用，得進(jìn)行競爭性結(jié)合試驗，其中將VR1制劑與結(jié)合至VR1(例如，辣椒素受體促效劑如RTX)經(jīng)標(biāo)記(例如，125I或3H)化合物，以及未標(biāo)示的測試化合物一起培養(yǎng)。于本說明書提供的試驗中，所用VR1較佳為哺乳類VR1，更佳為人類或大鼠VR1。受體可經(jīng)重組表現(xiàn)或自然表現(xiàn)。VR1制劑得為，例如，得自重組表現(xiàn)人類VR1的HEK293或CHO細(xì)胞的細(xì)胞膜制劑。與可檢測出調(diào)節(jié)類香草醇配位體與VR1結(jié)合的化合物一起培養(yǎng)，造成與VR1制劑結(jié)合的標(biāo)記量相對于化合物不存在下結(jié)合的標(biāo)記量，呈現(xiàn)降低或增加。如本說明書所述此降低或增加，得用于測定VR1的Ki。一般而言，于此試驗中，以降低與VR1制劑結(jié)合標(biāo)記量的化合物為佳。
如上所述，某些具體例中，以VR1拮抗劑的化合物為較佳。此等化合物的IC50值，得使用如實施例6所提供的體外VR1媒介的鈣移動試驗予以測定。簡言地說，使表現(xiàn)辣椒素受體的細(xì)胞與所關(guān)注的化合物及細(xì)胞內(nèi)鈣濃度指示劑(例如，細(xì)胞膜滲透鈣敏感染料如Fluo-3或Fura-2(例如，二者均可購自Molecular Probes公司，Eugene，OR)，其與Ca++結(jié)合時，均產(chǎn)生螢光訊號)接觸。此接觸較佳為利用使細(xì)胞于包含化合物及/或溶于溶液中的指示劑的緩沖液或培養(yǎng)基中培養(yǎng)一次或多次而進(jìn)行。使接觸維持足夠長的時間，以容許染料進(jìn)入細(xì)胞中(例如，1至2小時)。將細(xì)胞洗滌或過濾，以去除過量染料，然后與濃度為一般等于EC50濃度的類香草醇受體促效劑(例如，辣椒素、RTX或歐瓦尼)接觸，接著測定螢光反應(yīng)。當(dāng)接觸促效劑的細(xì)胞與VR1拮抗劑化合物接觸時，相較于測試化合物不存在下與促效劑接觸的細(xì)胞，其螢光反應(yīng)通常減少至少20％，較佳為至少50％，及更佳為至少80％。本說明書所提供VR1拮抗劑的IC50值，較佳為小于1微摩爾濃度、小于100納摩爾濃度、小于10納摩爾濃度或小于1納摩爾濃度。
其它具體例中，以辣椒素受體促效劑的化合物為較佳。辣椒素受體促效劑活性通常得如實施例6所述予以測定。當(dāng)細(xì)胞與1微摩爾的VR1促效劑化合物接觸時，其螢光反應(yīng)通常較細(xì)胞與100納摩爾濃度辣椒素接觸時所觀察到的增加，增加至少30％。本說明書所提供VR1促效劑的EC50值較佳為小于1微摩爾濃度、小于100納摩爾濃度或小于10納摩爾濃度。
VR1的調(diào)節(jié)活性亦得，或者，使用如實施例9所提供的經(jīng)培養(yǎng)的背根神經(jīng)節(jié)試驗，及/或如實施例10所提供的體內(nèi)疼痛舒緩試驗予以評估。本說明書提供的化合物較佳為于本說明書提供的一個或多個功能性試驗中，對VR1活性具有統(tǒng)計學(xué)上顯著的特定影響。
某些具體例中，本說明書提供的VR1調(diào)節(jié)劑實質(zhì)上不調(diào)節(jié)配位體與其它細(xì)胞表面受體(例如，上皮細(xì)胞生長因子(EGF)受體酪胺酸激酶或煙堿酸乙酰膽堿受體)的結(jié)合。換句話說，此等調(diào)節(jié)劑實質(zhì)上不抑制細(xì)胞表面受體活性，例如人類上皮細(xì)胞生長因子受體酪胺酸激酶或煙堿酸乙酰膽堿受體(例如，此受體的IC50或IC40較佳為大于1微摩爾濃度，最佳為大于10微摩爾濃度)。較佳地，調(diào)節(jié)劑于0.5微摩爾濃度、1微摩爾濃度或更佳為10微摩爾濃度下，未可檢測出抑制人類上皮細(xì)胞生長因子受體活性或煙堿酸乙酰膽堿受體活性。測定細(xì)胞表面受體活性的試驗為市售可購得，包括購自Panvera公司(威斯康辛Madison市)的酪胺酸激酶試驗測試套組。
本說明書提供的較佳化合物為非鎮(zhèn)靜性。換句話說，于測定疼痛舒緩的動物模式(例如，本說明書實施例10提供的模式)中，足以提供止痛的最小劑量的兩倍的化合物劑量，在動物模式鎮(zhèn)靜試驗中(使用Fitzgerald等人，Toxicology 49(2-3)433-9(1988)敘述的方法)，只引起短暫(例如，持續(xù)不超過疼痛舒緩持續(xù)的時間的1/2)，或較佳為統(tǒng)計學(xué)上不顯著的鎮(zhèn)靜作用。較佳地，足以提供止痛的最小劑量的五倍劑量未產(chǎn)生統(tǒng)計學(xué)上顯著的鎮(zhèn)靜作用。更佳地，本說明書提供的化合物于小于25毫克/公斤(較佳為小于10毫克/公斤)的靜脈內(nèi)劑量，或小于140毫克/公斤(較佳為小于50毫克/公斤，更佳為小于30毫克/公斤)的口服劑量，未產(chǎn)生鎮(zhèn)靜作用。
若有需要，得對本說明書所提供的VR1調(diào)節(jié)劑進(jìn)行某些藥理性質(zhì)評估，包括但不限定于，經(jīng)口生體可利用性(較佳化合物為具經(jīng)口生物利用性至容許化合物的治療有效濃度達(dá)到小于140毫克/公斤，較佳為小于50毫克/公斤，更佳為小于30毫克/公斤，又更佳為小于10毫克/公斤，尚又更佳為小于1毫克/公斤，及最佳為小于0.1毫克/公斤的口服劑量程度)、毒性(較佳的VR1調(diào)節(jié)劑為給藥個體治療有效量時無毒性)、副作用(較佳的VR1調(diào)節(jié)劑為給藥個體治療有效量時，產(chǎn)生與安慰劑相當(dāng)?shù)母弊饔?、血清蛋白結(jié)合作用及體外與體內(nèi)半衰期(較佳VR1調(diào)節(jié)劑顯現(xiàn)的體外半衰期是允許Q.I.D.給藥，較佳為T.I.D.給藥，更佳為B.I.D.給藥，及最佳為一天給藥一次)。此外，血腦障壁的差異滲透性對于用于治療疼痛的VR1調(diào)節(jié)劑而言可能符合所需，其利用調(diào)節(jié)CNS VR1活性使得如上述的每日口服總劑量提供此調(diào)節(jié)作用至治療有效的程度，同時VR1調(diào)節(jié)劑于腦中的低含量，用于治療末梢神經(jīng)媒介的疼痛可能較佳(亦即，此等劑量不會提供足以顯著地調(diào)節(jié)VR1活性的化合物于腦(例如，腦脊髓液)中的含量)。可使用此項技術(shù)中習(xí)知的例行試驗來評估該些性質(zhì)，及鑒定特別用途的優(yōu)異化合物。例如，用于預(yù)測生體可利用性的試驗，包括越過人類單層腸細(xì)胞(包括Caco-2單層細(xì)胞)的運送?；衔镉谌祟愌X障壁的滲透性得由給藥該化合物(例如，經(jīng)由靜脈)的實驗室動物的該化合物于腦中的含量予以預(yù)測。血清蛋白結(jié)合得藉白蛋白結(jié)合試驗進(jìn)行預(yù)測?；衔锇胨テ谂c所合物劑量的頻率成反比?；衔锏捏w外半衰期得藉本說明書實施例7敘述的微粒體半衰期試驗予以預(yù)測。
如上所述，本說明書所提供的較佳化合物無毒性。一般而言，應(yīng)了解本說明書所用的「無毒性」一詞為相對意義，是意指由美國食品藥物管理局(FDA)認(rèn)可用于給藥哺乳動物(較佳為人類)用，或與已建立的準(zhǔn)則一致，F(xiàn)DA易認(rèn)可用于給藥哺乳動物(較佳為人類)用的任何物質(zhì)。此外，高度較佳的無毒性化合物滿足一個或多個下述準(zhǔn)則(1)實質(zhì)上不抑制細(xì)胞ATP的產(chǎn)生；(2)不顯著延長心臟QT間隔；(3)實質(zhì)上不引起肝臟擴(kuò)大；或(4)不引起肝臟酵素的實質(zhì)釋放。
本說明書所用實質(zhì)上不抑制細(xì)胞ATP產(chǎn)生的化合物，是滿足本說明書實施例8所述準(zhǔn)則的化合物。換句話說，如實施例8所述，使用100μM此等化合物處理細(xì)胞時，細(xì)胞呈現(xiàn)相較于未處理細(xì)胞中檢出的ATP量至少50％的ATP量。于更高度較佳的實施例中，此等細(xì)胞檢出的ATP量為未處理細(xì)胞的至少80％的ATP量。
不顯著延長心臟QT間隔的化合物，是于給藥產(chǎn)生相當(dāng)于該化合物EC50或IC50血清濃度的劑量后，對天竺鼠、迷你豬或狗不造成統(tǒng)計學(xué)上顯著的延長心臟QT間隔(如心電圖所測定)的化合物。某些較佳具體例中，非經(jīng)腸或經(jīng)口給藥0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、40或50毫克/公斤的劑量不造成統(tǒng)計學(xué)上顯著的延長心臟QT間隔。所謂「統(tǒng)計學(xué)上顯著」意指當(dāng)使用統(tǒng)計顯著性的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)試驗，例如學(xué)生T試驗(student’s T test)測定時，于p＜0.1或更佳為p＜0.5的顯著水準(zhǔn)下，與對照組結(jié)果不同。
若以產(chǎn)生相當(dāng)于該化合物EC50或IC50血清濃度的劑量，每日治療實驗室嚙齒類(例如，小鼠或大鼠)5至10天后，造成肝臟對體重比的增加不大于相配對照組的100％，則該化合物實質(zhì)上不引起肝臟擴(kuò)大。于更高度較佳的具體例中，相對于相配對照組，此等劑量不引起大于75％或50％的肝臟擴(kuò)大。若用于非嚙齒類哺乳動物(例如，狗)，則此等劑量相對于相配對照組，必須不造成肝臟對體重比的增加大于50％，較佳為不大于25％，更佳為不大于10％。此等試驗中的較佳劑量包括非經(jīng)腸或經(jīng)口給藥0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、40或50毫克/公斤。
同樣地，若給藥產(chǎn)生相當(dāng)于該化合物EC50或IC50血清濃度的最小劑量的兩倍，與相配的仿真處理對照組比較，不提高實驗室嚙齒類動物的ALT、LDH或AST于血清中的含量100％以上，則該化合物不促進(jìn)肝臟酵素的實質(zhì)釋放。于更高度較佳的具體實例中，相對于相配對照組，此等劑量不提高此等于血清中的含量75％以上或50％以上?；蛘撸粼隗w外肝細(xì)胞試驗中，相當(dāng)于該化合物EC50或IC50的濃度(在體外與肝細(xì)胞接觸及培養(yǎng)的培養(yǎng)基或其它此等溶液中)，不引致任何此等肝臟酵素可檢出的釋放進(jìn)入培養(yǎng)基中，達(dá)相配仿真處理的對照組細(xì)胞培養(yǎng)基中觀察到的基線量以上，則該VR1調(diào)節(jié)劑不促進(jìn)肝臟酵素的實質(zhì)釋放。于更高度較佳的具體實例中，當(dāng)此等化合物濃度為該化合物EC50或IC50的五倍，較佳為十倍時，仍無檢出任何此等肝臟酵素釋入培養(yǎng)基中超過基線量。
其它具體例中，某些較佳化合物在相當(dāng)于該化合物EC50或IC50的濃度時，不抑制或誘發(fā)微粒體細(xì)胞色素P450酵素活性，例如CYP1A2活性、CYP2A6活性、CYP2C9活性、CYP2C19活性、CYP2D6活性、CYP2E1活性或CYP3A4活性。
某些較佳化合物在相當(dāng)于該化合物EC50或IC50的濃度時，不具基因破壞性(clastogenic)(例如，如使用小鼠紅血球前驅(qū)細(xì)胞(erythrocyteprecursor cell)微核試驗、Ames微核試驗、螺旋微核試驗等所測定)。其它具體實例中，某些較佳的VR1調(diào)節(jié)劑于此等濃度下，不誘發(fā)同源染色單體交換(sister chromatid exchange)(例如，于中國倉鼠卵巢細(xì)胞中)。
為了檢測目的，下文中將做更細(xì)節(jié)的討論，本說明書提供的VR1調(diào)節(jié)劑得進(jìn)行同位素標(biāo)記或放射標(biāo)記。例如，式I至III所列舉的化合物，得有一個或多個原子，以原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)與一般自然界發(fā)現(xiàn)的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同的相同元素的原子置換。能出現(xiàn)于本說明書所提供化合物中的同位素實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯的同位素，例如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F及36Cl。此外，以重同位素例如氘(亦即，2H)置換，由于代謝穩(wěn)定性較高，例如體內(nèi)半衰期增加或劑量需求減少，能提供某些治療優(yōu)點，因此，于一些情形下更宜使用。
制備經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物通?？墒褂脴?biāo)準(zhǔn)合成方法予以制備。一般而言，起始物質(zhì)可自供貨商例如Sigma-Aldrich公司(密蘇里St.Louis市)購得，或可使用已建立的流程由市售的前驅(qū)物合成。舉例而言，可使用與下文略

圖1至5中任一個與略圖6所示的類似合成途徑，以及有機(jī)化學(xué)合成技藝中習(xí)知的合成方法，或于此項技術(shù)領(lǐng)域具有通常知識者所知的其變異方法。下文略圖中各變量，是參照與本說明書所提供化合物的說明中一致的任何基團(tuán)。
略圖1至5所示的合成方法可用于制備式I所示的各種雙環(huán)基 使用此技術(shù)領(lǐng)域中已知的步驟(請參見，例如PCT申請案公開號WO03/062209)，舉例而言，略圖1至5(第40至41頁)與實施例1(第66至82頁)合并于此以做為揭示結(jié)合各種胺至核心芳基的方法的參考，此等雙環(huán)基可連接至該化合物的其余部分，以產(chǎn)生式I的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物。此步驟示于本說明書的略圖6。
下文略圖中的「還原」意指將硝基官能性還原至氨基官能性。此轉(zhuǎn)換可以有機(jī)合成技術(shù)領(lǐng)域所習(xí)知的數(shù)種方式來進(jìn)行，包括但不限于，催化性氫化、以SnCl2還原及以三氯化酞還原。還原方法的概述，請參見Hudlicky，M.Reductions in Organic Chemistry，ACS Monograph 1881996。
下文略圖中的「去保護(hù)」意指從酰胺或氨基官能性去除甲基或苯甲基或其它合適的保護(hù)基。同樣地，「保護(hù)」意指增加此等基團(tuán)。此等保護(hù)基的例子為4-甲氧基苯甲基，而「去保護(hù)」意指可移除此等保護(hù)基的化學(xué)方法。習(xí)知有機(jī)合成技術(shù)領(lǐng)域者所使用的保護(hù)與去保護(hù)方法的概述，請參見Greene，T.與Wuts，P.Protective Groups in OrganicSynthesis，第三版，John Wiley and Sons1999。
下文略圖中的「親核劑」意指一級與二級胺，以及烷氧化物。
下列圖標(biāo)與實施例中所使用的其它定義為Ac 醋酸基(或醋酸酯)AcOH 醋酸DCM二氯甲烷DMA二甲基乙酰胺DME乙二醇二甲基醚EtOAc 醋酸乙酯IPA異丙醇Pd2(PPH3)4肆(三苯基磷)鈀(0)TEA三乙基胺THF四氫呋喃略圖1
略圖2 略圖3
略圖4 略圖5
略圖6 某些具體例中，本說明書所提供的化合物可含有一個或多個不對稱碳原子，使得該化合物能以不同的立體異構(gòu)物形式存在。此等形式，例如，能為消旋性或具光學(xué)活性的形式。如上文所述，所有立體異構(gòu)物均涵蓋于本發(fā)明范圍內(nèi)。然而，一般可能期望獲得單一鏡像異構(gòu)物(亦即，具光學(xué)活性的形式)。制備單一鏡像異構(gòu)物的標(biāo)準(zhǔn)方法，包括不對稱合成及消旋性異構(gòu)物的解析。消旋性異構(gòu)物的解析例如能藉習(xí)知方法，諸如解析劑存在下的結(jié)晶法，或使用例如手性高效液相(HPLC)管柱的層析法而達(dá)成。
化合物得藉使用含有至少一個原子為放射性同位素的前驅(qū)物進(jìn)行其合成而加以放射性標(biāo)記。各放射性同位素較佳為碳(例如，14C)、氫(例如，3H)、硫(例如，35S)、或碘(例如，125I)。以氚標(biāo)記的化合物亦得經(jīng)由氚化乙酸中的鉑催化交換、氚化三氟乙酸中的酸催化交換、或以該化合物為基質(zhì)的使用氚氣的異相催化交換予以催化制備。此外，如果適當(dāng)，某些前驅(qū)物得與氚氣進(jìn)行氚-鹵素交換、進(jìn)行不飽和鍵的氚氣還原、或使用硼氚化鈉進(jìn)行還原。經(jīng)放射性標(biāo)記化合物的制備，亦可向?qū)＞谟喼坪铣煞派湫詷?biāo)記探針化合物的放射性同位素供貨商訂購而便利地達(dá)成。
醫(yī)藥組合物本發(fā)明亦提供包含一種或多種經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉-4-基胺類似物、以及至少一種生理上可接受載劑或賦形劑的醫(yī)藥組合物。醫(yī)藥組合物得包含，例如一種或多種的水、緩沖劑(例如，中性緩沖鹽水或磷酸鹽緩沖鹽水)、乙醇、礦物油、植物油、二甲亞砜(DMSO)、碳水化合物(例如，葡萄糖、甘露糖、蔗糖或葡聚糖)、甘露糖醇、蛋白質(zhì)、佐劑、多肽或氨基酸(例如甘胺酸)、抗氧化劑、螯合劑(例如EDTA)或麩胱甘肽(glutathione)、及/或防腐劑。此外，本說明書提供的醫(yī)藥組合物中得(但并非需要)包含其它活性成分。
醫(yī)藥組合物得進(jìn)行調(diào)配，以供任何適當(dāng)給藥方式的用途，包括例如局部、經(jīng)口、經(jīng)鼻、經(jīng)直腸或非經(jīng)腸投藥。本說明書所用非經(jīng)腸一詞，包括皮下、皮內(nèi)、血管內(nèi)(例如，靜脈內(nèi))、肌內(nèi)、脊髓、顱內(nèi)、椎管內(nèi)及腹腔內(nèi)注射，以及任何類似的注射或輸注技術(shù)。某些具體例中，以適用于口服用途的組合物為佳。此等組合物包括，例如錠劑、片劑、菱形錠劑、水性或油性懸浮液、分散性粉劑或粒劑、乳液、硬或軟膠囊、或糖漿或酏劑(elixier)。又其它具體例中，本發(fā)明組合物得調(diào)配成凍干物。對某些癥狀(例如，于治療諸如灼傷或搔癢等皮膚癥狀)而言，以供局部投藥的調(diào)配物為佳。治療尿失禁及膀胱過動時，以供直接投藥至膀胱(膀胱內(nèi)投藥)的調(diào)配物為佳。
欲供口服用途的組合物得進(jìn)一步包含一種或多種成分，例如甜味劑、調(diào)味劑、著色劑及/或防腐劑，以提供迎合愛好且美味的制劑。錠劑含有活性成分，并摻合適用于制造錠劑的生理上可接受賦形劑。此等賦形劑包括，例如，惰性稀釋劑(例如，碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉)、造粒劑及崩解劑(例如，玉米淀粉或海藻酸)、黏合劑(例如，淀粉、明膠或阿拉伯膠)及潤滑劑(例如，硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉)。錠劑得未包覆或得利用已知技術(shù)包覆以延緩于胃腸道內(nèi)的崩解與吸收，因而提供較長時間的持續(xù)作用。例如，得使用時間延緩物質(zhì)諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
供口服用途的調(diào)配物亦得制成硬明膠膠囊，其中該活性成分與惰性固體稀釋劑(例如，碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合；或制成軟明膠膠囊，其中該活性成分是與水或油介質(zhì)(例如，花生油、液態(tài)石蠟或橄欖油)混合。
水性懸浮液含有活性物質(zhì)，并摻有適用于制造水性懸浮液的賦形劑。此等賦形劑包括懸浮劑(例如，羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃耆膠與阿拉伯膠)；及分散劑或潤濕劑(例如，天然存在的磷脂類例如卵磷脂；環(huán)氧化烷與脂肪酸的縮合產(chǎn)物，例如聚氧伸乙基硬脂酸酯；環(huán)氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產(chǎn)物，例如十七伸乙基氧鯨蠟醇；環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇的部分酯的縮合產(chǎn)物，例如聚氧伸乙基山梨醇單油酸酯；或環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇酐的部分酯的縮合產(chǎn)物，例如聚伸乙基山梨醇酐單油酸酯)。水性懸浮液亦得包含一種或多種防腐劑(例如對羥苯甲酸乙酯或?qū)αu苯甲酸正丙酯)、一種或多種著色劑、一種或多種調(diào)味劑及一種或多種甜味劑例如蔗糖或糖精。
油性懸浮液得藉于植物油(例如，花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油例如液態(tài)石蠟中，懸浮活性成分予以調(diào)配。油性懸浮液得含有增稠劑例如蜜蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。得添加該些如上文所述的甜味劑及/或調(diào)味劑，以提供美味的口服制劑。此等懸浮液得藉添加抗氧化劑(例如抗壞血酸)予以保存。
適用于藉添加水制備水性懸浮液的分散性粉劑及粒劑是由活性成分摻合分散劑或潤濕劑、懸浮劑與一種或多種防腐劑所制成。適當(dāng)?shù)姆稚┗驖櫇駝┘皯腋?，上文已有例述。亦得存在其它賦形劑，例如甜味劑、調(diào)味劑與著色劑。
醫(yī)藥組合物亦得調(diào)配成水包油型乳液。油相得為植物油(例如，橄欖油或花生油)、礦物油(例如，液態(tài)石蠟)、或其混合物。適當(dāng)?shù)娜榛瘎┌ㄌ烊淮嬖诘哪z類(例如，阿拉伯膠或黃耆膠)、天然存在的磷脂類(例如，大豆卵磷脂、及衍生自脂肪酸與己糖醇的酯或部分酯類)、酐類(例如山梨醇酐單油酸酯)、及衍生自脂肪酸與己糖醇的部分酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物(例如，聚氧伸乙基山梨醇酐單油酸酯)。乳液亦得包含一種或多種甜味劑及/或調(diào)味劑。
糖漿與酏劑得與甜味劑(例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖)一起調(diào)配。此等調(diào)配物亦得包含一種或多種緩和劑、防腐劑、調(diào)味劑及/或著色劑。
供局部投藥的調(diào)配物典型地包含結(jié)合活性劑的局部媒劑，視需要含或不含額外的成分。適當(dāng)?shù)木植棵絼┘邦~外成分為此項技術(shù)中所悉知，顯見地，媒劑的選擇取決于特定的物理形態(tài)及傳送方式。局部媒劑包括水；有機(jī)溶劑例如醇類(例如，乙醇或異丙醇)或甘油；二醇類(例如，丁二醇、異戊二醇或丙二醇)；脂族醇類(例如，羊毛脂)；水與有機(jī)溶劑的混合物及有機(jī)溶劑(例如醇)與甘油的混合物；脂質(zhì)為主的物質(zhì)例如脂肪酸、?；视皖?包括油類例如礦物油，及天然或合成來源的脂肪)、磷酸甘油酯類、神經(jīng)鞘脂質(zhì)類及蠟類；蛋白質(zhì)為主的物質(zhì)例如膠原蛋白及明膠；硅酮為主的物質(zhì)(非揮發(fā)性與揮發(fā)性二者)；及烴為主的物質(zhì)例如微囊海綿及聚合物基質(zhì)。組合物得進(jìn)一步包含一種或多種適于改善所用調(diào)配物穩(wěn)定性或有效性的成分，例如穩(wěn)定劑、懸浮劑、乳化劑、黏度調(diào)整劑、膠凝劑、防腐劑、抗氧化劑、皮膚滲透增強(qiáng)劑、保濕劑及持續(xù)釋放物質(zhì)。此等成分的實例如Martindale--TheExtra Pharmacopoeia(倫敦Pharmaceutical Press出版，1993年)及Martin編著Remington’s Pharmaceutical Sciences中所述。調(diào)配物得包括微膠囊，例如羥甲基纖維素或明膠-微膠囊、微脂粒、白蛋白微球體、微乳液、納米粒子或納米膠囊。
局部調(diào)配物得制備成多種物理形態(tài)，包括例如固體、糊劑、乳霜、泡沫劑、洗劑、凝膠、粉劑、水溶液、及乳液。此等形態(tài)的物理外觀及黏度，是由調(diào)配物中乳化劑及黏度調(diào)整劑的存在與否及用量所控制。固體通常堅實且不具傾瀉性，通常調(diào)配成棒狀或條狀、或微粒狀；固體得為不透明或透明，視需要得含有溶劑、乳化劑、保濕劑、軟化劑、芳香劑、染料/著色劑、防腐劑、及增加或加強(qiáng)最終產(chǎn)物效力的其它活性成分。乳霜及洗劑經(jīng)常相似，主要為黏度不同；洗劑及乳霜均得為不透明、半透明或透明，并常含有乳化劑、溶劑、黏度調(diào)整劑、以及保濕劑、軟化劑、芳香劑、染料/著色劑、防腐劑、及增加或加強(qiáng)最終產(chǎn)物效力的其它活性成分。凝膠能制備成具廣泛黏度，從濃稠或高黏度至稀薄或低黏度。該些調(diào)配物，像洗劑與乳霜一樣，亦得含有溶劑、乳化劑、保濕劑、軟化劑、芳香劑、染料/著色劑、防腐劑、及增加或加強(qiáng)最終產(chǎn)物效力的其它活性成分。液體比乳霜、乳液、或膠體稀薄，通常不含乳化劑。液體的局部調(diào)配物常含有溶劑、乳化劑、保濕劑、軟化劑、芳香劑、染料/著色劑、防腐劑、及增加或加強(qiáng)最終產(chǎn)物效力的其它活性成分。
適用于局部調(diào)配物用的乳化劑，包括但不限定于離子性乳化劑例如鯨蠟醇；非離子性乳化劑例如聚氧伸乙基油基醚(polyoxyethyleneoleyl ether)、PEG-40硬脂酸酯、聚氧伸乙基鯨蠟基硬脂酰醇(ceteareth)-12、聚氧伸乙基鯨蠟基硬脂酰醇-20、聚氧伸乙基鯨蠟基硬脂酰醇-30、聚氧伸乙基鯨蠟基硬脂酰醇、PEG-100硬脂酸酯、及硬脂酸甘油酯。適當(dāng)?shù)酿ざ日{(diào)整劑，包括但不限定于保護(hù)性膠體或非離子性膠類(例如羥乙基纖維素、黃原膠、硅酸鋁鎂、硅石、微晶蠟、蜜蠟、石蠟、及棕櫚酸鯨蠟酯)。膠體組合物得藉添加膠凝劑例如幾丁聚糖、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙烯醇、聚季銨鹽類(polyquaterniums)、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素、咔波姆(carbomer)、或胺化的甘草酸而制成。適當(dāng)?shù)慕涌诨钚詣ǖ幌薅ㄓ诜请x子、兩性、離子及陰離子接口活性劑。舉例而言，得于局部調(diào)配物中使用一種或多種下列接口活性劑二甲基聚硅氧烷共聚醇(dimethiconecopolyol)、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60、聚山梨醇酯80、月桂酰胺DEA、椰油酰胺DEA與椰油酰胺MEA、油基三甲銨內(nèi)酯、椰油酰胺丙基磷脂基PG-二硬脂氯(PG-dimonium chloride)及月桂醇硫酸銨。適當(dāng)?shù)姆栏瘎┌ǖ幌薅ㄓ冢刮⑸飫?例如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、山梨酸、苯甲酸、與甲醛)，以及物理穩(wěn)定劑與抗氧化劑(例如維生素E、抗壞血酸鈉/抗壞血酸及沒食子酸丙酯)。適當(dāng)?shù)谋駝┌ǖ幌薅ㄓ?，乳酸與其它羥基酸及其鹽、甘油、丙二醇與丁二醇。適當(dāng)?shù)能浕瘎┌ㄑ蛎?、羊毛脂、羊毛脂衍生物、膽固醇、礦脂、新戊酸異硬脂酯及礦物油。適當(dāng)?shù)姆枷銊┡c著色劑包括但不限定于，F(xiàn)D&C紅色40號、FD&C黃色5號。其它得加入局部調(diào)配物中的適當(dāng)額外成分，包括但不限定于磨蝕劑、吸收劑、抗結(jié)塊劑、抗起泡劑、抗靜電劑、收斂劑(例如，金縷梅、醇與草本萃取物例如洋甘菊萃取物)、黏合劑/賦形劑、緩沖劑、螯合劑、薄膜形成劑、調(diào)理劑、推進(jìn)劑、遮光劑、pH調(diào)整劑及保護(hù)劑。
適用于凝膠調(diào)配物的局部媒劑實例為羥丙基纖維素(2.1％)；70/30異丙醇/水(90.9％)；丙二醇(5.1％)；及聚山梨醇酯80(1.9％)。適用于泡沫劑調(diào)配物的局部媒劑實例為鯨蠟醇(1.1％)；硬脂醇(0.5％)；季銨鹽52(0.1％)；丙二醇(2.0％)；乙醇95PGF3(61.05％)；去離子水(30.05％)；P75烴推進(jìn)劑(4.30％)。所有百分比均為重量％。
典型的局部組合物傳送模式，包括使用手指的施敷法；使用物理施敷器(例如布、面紙、紗布、棉棒或刷子)的施敷法；噴霧法(包括水氣、氣溶液或泡沫噴霧法)；點滴器施敷法；淋灑；浸漬及潤濕法。亦得使用經(jīng)控制的釋放媒劑。
醫(yī)藥組合物得制備成無菌注射用水性或油質(zhì)懸浮液。視所用媒劑與濃度，調(diào)節(jié)劑能懸浮或溶解于媒劑中。此組合物得使用例如該些以上所述的適當(dāng)分散劑、潤濕劑及/或懸浮劑，根據(jù)已知技術(shù)予以調(diào)配。該些可接受的媒劑與溶劑，得為水、1，3-丁二醇、林格氏溶液(Ringer’ssolution)及等張氯化鈉溶液。此外，得使用無菌的固定油類作為溶劑或懸浮介質(zhì)。欲達(dá)此目的，得使用任何溫和的固定油，包括合成的單或二甘油酯。此外，于注射用組合物的制備中得使用脂肪酸例如油酸能溶于媒劑之而佐劑例如局部麻醉劑、防腐劑及/或緩沖劑。
化合物亦得調(diào)配成栓劑(例如，供直腸投藥用)。此等組合物得藉混合該藥物與適當(dāng)?shù)臒o刺激性賦形劑而制得，該賦形劑于常溫時為固體，于直腸溫度時為液體，因而于直腸中融化而釋出該藥物。適當(dāng)?shù)馁x形劑包括，例如，可可脂及聚乙二醇類。
醫(yī)藥組合物得調(diào)配成持續(xù)釋放型調(diào)配物(亦即，投藥后緩慢釋放調(diào)節(jié)劑之例如膠囊的調(diào)配物)。此等調(diào)配物通常得使用習(xí)知技術(shù)予以制備，并利用例如，口服、直腸或皮下植入，或于所需標(biāo)的位置的植入法來給藥。此等調(diào)配物所用的載劑具生物兼容性，亦得具生物降解性；較佳為調(diào)配物提供相當(dāng)固定的調(diào)節(jié)劑釋放量。持續(xù)釋放型調(diào)配物的調(diào)節(jié)劑含量取決于，例如，植入位置、釋放率與預(yù)期持續(xù)釋放時間、及所治療或預(yù)防的癥狀性質(zhì)。
除了上述給藥模式外或并用上述給藥模式，亦得方便地將調(diào)節(jié)劑添加于食物或飲用水(例如，供給藥非人類動物包括陪伴動物(例如，狗與貓)及家畜用)中。得調(diào)配動物飼料與飲用水，俾使動物隨其膳食一起攝入適量組合物。亦得方便地將組合物制成預(yù)混物，供添加于飼料或飲用水中。
調(diào)節(jié)劑通常以治療有效量給藥。較佳的全身性劑量，每天每公斤體重不高于50毫克(例如，每天每公斤體重約0.001毫克至約50毫克)，其中口服劑量通常比靜脈劑量高約5至20倍(例如，每天每公斤體重0.01至40毫克)。
得與媒劑(carrier)物質(zhì)組合以產(chǎn)生單一劑量單位的活性成分用量，例如取決于所治療患者及投藥特定模式而不同。劑量單位通常含有介于約10微克與約500毫克間的活性成分。最適劑量得使用此項技術(shù)領(lǐng)域中習(xí)知的例行測試法及程序予以建立。
醫(yī)藥組合物得加以包裝，以供治療對VR1調(diào)節(jié)有敏感的癥狀(例如，對暴露于類香草醇配位體、疼痛、搔癢、肥胖癥或尿失禁的治療)。經(jīng)包裝的醫(yī)藥組合物得包含，容納如本說明書所述的至少一種VR1調(diào)節(jié)劑有效量的容器，及指示所含組合物用于治療患者對VR1調(diào)節(jié)有敏感癥狀的說明書(例如，卷標(biāo))。
使用方法本說明書提供的VR1調(diào)節(jié)劑得在體外及體內(nèi)的多種情況下，用于改變辣椒素受體的活性及/或活化作用。某些態(tài)樣中，VR1拮抗劑得在體外或體內(nèi)用于抑制類香草醇配位體促效劑(諸如辣椒素及/或RTX)與辣椒素受體的結(jié)合。一般而言，此等方法包括于水性溶液中的類香草醇配位體存在下，或于適于該配位體與辣椒素受體結(jié)合的條件下，使辣椒素受體與本說明書提供的一或多種VR1調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)量接觸的步驟。通常VR1調(diào)節(jié)劑使用在體外足以改變類香草醇配位體與VR1結(jié)合(利用本說明書所提供的實施例5)與/或VR1-媒介訊號傳遞(利用本說明書所提供的實施例6)的濃度。辣椒素受體得存在于溶液或懸浮液中(例如，單離的細(xì)胞膜或細(xì)胞制劑中)，或者培養(yǎng)或單離的細(xì)胞中。某些具體例中，辣椒素受體由存在患者中的神經(jīng)細(xì)胞所表現(xiàn)，且該水性溶液為體液。較佳地，給藥動物一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑的量，以使該VR1調(diào)節(jié)劑在該動物至少一種體液中的治療有效濃度為1微摩爾濃度或更??；較佳為500納摩爾濃度或更??；更佳為100納摩爾濃度或更小、50納摩爾濃度或更小、20納摩爾濃度或更小，或者10納摩爾濃度或更小。例如，得以小于20毫克/公斤體重，較佳為小于5毫克/公斤體重，一些情形下為小于1毫克/公斤體重的劑量，給藥此等化合物。
本說明書亦提供調(diào)節(jié)，較佳為減少，細(xì)胞性辣椒素受體訊息傳導(dǎo)活性(亦即，鈣傳導(dǎo))的方法。此調(diào)節(jié)得藉使辣椒素受體(在體外或體內(nèi))與本說明書所提供一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑，于適合該調(diào)節(jié)劑與受體結(jié)合的條件下接觸而達(dá)成。如本文所述，該VR1調(diào)節(jié)劑通常以在體外足以改變類香草醇配位體與VR1結(jié)合與/或VR1-媒介訊號傳遞的濃度存在。該受體得存在于溶液或懸浮液中、培養(yǎng)或單離的細(xì)胞制劑中或患者的細(xì)胞中。例如，該細(xì)胞得為于動物體內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)接觸的神經(jīng)細(xì)胞?；蛘?，該細(xì)胞得為于動物進(jìn)行體內(nèi)接觸的上皮細(xì)胞，例如膀胱上皮細(xì)胞(泌尿上皮細(xì)胞)或氣管上皮細(xì)胞。訊息傳導(dǎo)活性的調(diào)節(jié)得藉檢測對鈣離子傳導(dǎo)(亦稱為鈣移動或通量)的影響予以評估?；蛘?，訊息傳導(dǎo)活化的調(diào)節(jié)得藉檢測以本說明書所提供一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑治療患者，由癥狀(例如，疼痛、灼燒感、氣管收縮、炎癥、咳嗽、打嗝、搔癢、尿失禁或膀胱過動)的改變予以評估。
本說明書所提供VR1調(diào)節(jié)劑，較佳為以口服或局部投藥方式給藥患者(例如，人類)，以及當(dāng)調(diào)節(jié)VR1訊息傳導(dǎo)活性時，存在于該患者的至少一種體液中。用于此等方法的較佳VR1調(diào)節(jié)劑，于體液(例如血液)中，以1納摩爾濃度或更小，較佳為100微微摩爾濃度或更小，更佳為20微微摩爾濃度或更小，進(jìn)行體外VR1訊息傳導(dǎo)活性調(diào)節(jié)；以1微摩爾濃度或更小、500納摩爾濃度或更小，或者100納摩爾濃度或更小，進(jìn)行體內(nèi)VR1訊息傳導(dǎo)活性調(diào)節(jié)。
本發(fā)明進(jìn)一步提供治療對VR1調(diào)節(jié)有敏感癥狀的方法。于本發(fā)明內(nèi)容中，「治療」一詞涵蓋改善疾病的治療及癥狀的治療，可為預(yù)防性(亦即，于癥狀發(fā)作前，用以預(yù)防、延緩或減輕癥狀嚴(yán)重性)或治療性(亦即，于癥狀發(fā)作后，用以減輕癥狀嚴(yán)重性及/或持續(xù)性)。若癥狀的特征為辣椒素受體活性不適當(dāng)，且無關(guān)于類香草醇配位元體局部存在的量；及/或若辣椒素受體活性調(diào)節(jié)造成狀況或癥狀緩解，則稱該癥狀「對VR1調(diào)節(jié)敏感」。此等癥狀包括，例如，于下文詳述的由暴露于VR1活化刺激引起的癥狀、疼痛、呼吸性疾病(諸如氣喘及慢性哽塞性肺病)、搔癢、尿失禁、膀胱過動、咳嗽、打嗝、及肥胖癥。此等癥狀得使用此項技術(shù)中已建立的準(zhǔn)則予以診斷及偵測。患者可包括人類、馴養(yǎng)的陪伴動物及家畜，使用劑量則如上所述。
治療方法得隨所用化合物及欲治療的特定狀況而不同。然而，對大部分疾病的治療，以每天4次或4次以下的投藥頻率為佳。通常，以每天2次的劑量療法更佳，尤以一天用藥一次為佳。治療急性疼痛時，需要有迅速達(dá)到有效濃度的單一劑量。然而，對任何特別患者的具體劑量標(biāo)準(zhǔn)及治療方法，取決于包括所用特定化合物活性、患者年齡、體重、一般健康情形、性別、飲食、投藥時間、投藥途徑、及排泄率、藥物組合及進(jìn)行治療的特定疾病的嚴(yán)重性。通常，以足以提供有效治療的最小劑量為佳。一般可采用適于治療或預(yù)防狀況的醫(yī)學(xué)或獸醫(yī)學(xué)準(zhǔn)則，偵測患者的治療效果。
經(jīng)歷暴露于辣椒素受體活化刺激引起癥狀的患者，包括因熱、光、催淚瓦斯或酸而灼傷的個體，及該些黏膜暴露(例如，經(jīng)由攝取、吸入或眼睛接觸)于辣椒素(例如，得自胡椒或胡椒噴霧)或相關(guān)刺激物(例如酸、催淚瓦斯或空氣污染物)的個體。引起的癥狀(得使用本說明書提供的VR1調(diào)節(jié)劑，尤其是拮抗劑治療)包括，例如疼痛、氣管收縮及炎癥。
得使用本說明書提供的VR1調(diào)節(jié)劑治療的疼痛，可為慢性或怠性，且包括但不限定于末梢神經(jīng)媒介的疼痛(尤其是神經(jīng)痛)。本說明書提供的化合物得用于治療，例如，乳房切除后疼痛綜合征、殘肢痛、幻覺肢體痛、口腔神經(jīng)痛、牙痛(toothache或dental pain)、假牙痛、帶狀皰疹后神經(jīng)痛、糖尿病神經(jīng)病變、反射性交感神經(jīng)失養(yǎng)癥(RSD)、三叉神經(jīng)痛、骨關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、吉歸-伯二氏綜合征(Guillain-Barre Syndrome)、感覺異常性股痛、口腔灼熱綜合征及/或兩側(cè)性末梢神經(jīng)病變。其它神經(jīng)痛癥狀包括灼熱痛(反射性交感神經(jīng)失養(yǎng)癥-RDS，僅次于末梢神經(jīng)傷害)、神經(jīng)炎(包括，例如，坐骨神經(jīng)炎、末梢神經(jīng)炎、多神經(jīng)炎、視神經(jīng)炎、熱病后神經(jīng)炎、移動性神經(jīng)炎、分節(jié)性神經(jīng)炎及宮保氏神經(jīng)炎(Gombault’s neuritis))、神經(jīng)細(xì)胞炎、神經(jīng)痛(例如，上文所述者，頸臂神經(jīng)痛、顱部神經(jīng)痛、膝狀神經(jīng)痛、舌咽神經(jīng)痛、偏頭性神經(jīng)痛、自發(fā)性神經(jīng)痛、肋間神經(jīng)痛、乳房神經(jīng)痛、下頷關(guān)節(jié)神經(jīng)痛、摩頓氏神經(jīng)痛(Morton’s neuralgia)、鼻睫神經(jīng)痛、枕骨神經(jīng)痛、紅斑性肢痛癥、史路德氏神經(jīng)痛(Sluder’s neuralgia)、蝶腭神經(jīng)痛、眶上神經(jīng)痛及翼管神經(jīng)痛)、與手術(shù)相關(guān)的疼痛、肌肉與骨骼疼痛、與愛滋病(AIDS)相關(guān)的神經(jīng)病變、與多發(fā)性(MS)相關(guān)的神經(jīng)病變、及與脊椎神經(jīng)受傷相關(guān)的疼痛。頭痛，包括涉及末梢神經(jīng)活性的頭痛，例如竇性、叢發(fā)性(亦即，偏頭性神經(jīng)痛)及一些壓力性頭痛與偏頭痛，亦得如本說明書所述予以治療。例如，偏頭痛得于患者一感受到偏頭痛前的預(yù)兆，即給藥本說明書所提供化合物而加以防止。能如本說明書所述加以治療的進(jìn)一步疼痛癥狀，包括「口腔灼熱綜合征」、產(chǎn)痛、夏科氏疼痛癥(Charcot’s pains)、腸氣疼痛、經(jīng)痛、急性與慢性背痛(例如，下背痛)、痔痛、消化不良痛、心絞痛、神經(jīng)根疼痛、同位疼痛及異位疼痛-包括與癌癥有關(guān)的疼痛(例如，骨癌患者)、與暴露于毒液(例如，由于遭蛇咬、蜘蛛咬、或蟲叮)有關(guān)的疼痛(及炎癥)、及與創(chuàng)傷有關(guān)的疼痛(例如，手術(shù)后疼痛、由割傷、挫傷與骨折引起的疼痛、及灼傷痛)。得如本說明書所述給予治療的其它疼痛，包括與炎性腸疾相關(guān)的疼痛、腸激躁綜合征及/或炎性腸疾。
某些態(tài)樣中，本說明書提供的VR1調(diào)節(jié)劑得用于治療機(jī)械性疼痛。本說明書所用「機(jī)械性疼痛」一詞，是指頭痛以外的非神經(jīng)痛或因暴露于熱、冷或外在化學(xué)品刺激引起的疼痛。機(jī)械性疼痛包括物理創(chuàng)傷(熱或化學(xué)品灼燒，或其它暴露于有毒化學(xué)品的刺激及/或疼痛除外)諸如手術(shù)后疼痛及因割傷、挫傷與骨折引起的疼痛；牙痛；假牙痛；神經(jīng)根疼痛；骨關(guān)節(jié)炎；風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；肌纖維痛；感覺異常性股痛；背痛；與癌癥相關(guān)的疼痛；心絞痛；腕隧道綜合征；及由骨折、生產(chǎn)、痔瘡、腸氣、消化不良、及月經(jīng)引起的疼痛。
得加以治療的搔癢癥狀，包括牛皮癬搔癢、因血液透析引起的搔癢、過水搔癢癥、及與陰道前庭炎、接觸性皮膚炎、蟲咬及皮膚過敏相關(guān)的搔癢。得如本說明書所述進(jìn)行治療的尿道癥狀，包括尿失禁(包括滿溢性尿失禁、急迫性尿失禁及壓力性尿失禁)、以及膀胱過動或不穩(wěn)定的膀胱癥狀(包括源自脊椎及膀胱過敏的迫尿肌過度反射)。某些此等治療方法中，VR1調(diào)節(jié)劑是經(jīng)由導(dǎo)管或類似裝置給藥，將VR1調(diào)節(jié)劑直接注入膀胱中。本說明書提供的化合物亦得作為止咳劑(以預(yù)防、緩和或壓制咳嗽)、用于治療打嗝、及促進(jìn)肥胖患者的減輕體重。
其它態(tài)樣中，本說明書提供的VR1調(diào)節(jié)劑，得用于治療涉及炎性成分癥狀的組合療法。此等癥狀包括，例如，習(xí)知具炎性成分的自體免疫失調(diào)與病理性自體免疫反應(yīng)包括但不限定于，關(guān)節(jié)炎(尤其是風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)、牛皮癬、克隆氏病癥(Crohn’s disease)、紅斑狼瘡癥、腸激躁綜合征、組織移植排斥、及移植器官的超急性排斥。其它此等癥狀包括創(chuàng)傷(例如，頭或脊椎神經(jīng)的傷害)、心血管與腦血管疾病及某些感染病癥。
此等組合療法中，VR1調(diào)節(jié)劑是與抗炎劑一起給藥患者。VR1調(diào)節(jié)劑與抗炎劑得存于相同的醫(yī)藥組合物中，或得以任一順序分開給藥?？寡讋┌ǎ?，非類固醇抗炎性藥物(NSAIDs)、非專一性及環(huán)氧酶-2(COX-2)專一性環(huán)氧酶酵素抑制劑、金化合物、皮質(zhì)類固醇類、甲胺喋呤(methotrexate)、癌癥細(xì)胞壞死因子(TNF)受體拮抗劑、抗-TNFα抗體、抗-C5抗體、及介白素-1(IL-1)受體拮抗劑。NSAIDs的實例包括但不限定于異丁苯丙酸(例如，ADVILTM、MOTRINTM)、氟聯(lián)苯丙酸(ANSAIDTM)、甲氧萘基丙酸或甲氧萘基丙酸鈉(例如，NAPROSYN、ANAPROX、ALEVETM)、雙氯芬酸(diclofenac)(例如，CATAFLAMTM、VOLTARENTM)、雙氯芬酸鈉與米索前列醇(misoprostol)(例如，ARTHROTECTM)的組合、舒林酸(sulindac)(CLINORILTM)、二苯噁唑基丙酸(oxaprozin)(DAYPROTM)、二氟苯水楊酸(DOLOBIDTM)、匹若西咔(piroxicam)(FELDENETM)、吲哚美沙辛(indomethacin)(INDOCINTM)、伊托多雷(etodolac)(LODINETM)、菲喏洛芬鈣(fenoprofencalcium)(NALFONTM)、酮布洛芬(ketoprofen)(例如，ORUDISTM、ORUVAILTM)、甲氧萘基丁酮鈉(sodium nabumetone)(RELAFENTM)、柳酸磺胺吡啶(sulfasalazine)(AZULFIDINETM)、托美丁鈉(tolmetin sodium)(TOLECTINTM)、與羥基氯喹啉(hydroxychloroquine)(PLAQUENILTM)。特定的NSAIDs類別由抑制環(huán)氧酶(COX)酵素的化合物組成，例如塞利昔布(celecoxib)(CELEBREXTM)與羅非昔布(rofecoxib)(VIOXXTM)。NSAIDs進(jìn)一步包含水楊酸鹽例如乙?；畻钏峄虬⑺酒レ`、水楊酸鈉、膽堿與水楊酸鎂類(TRILISATETM)、與雙水楊酯(salsalate)(DISALCIDTM)、以及皮質(zhì)類固醇類例如得體松(cortisone)(CORTONETM乙酸鹽)、地塞米松(dexamethasone)(例如，DECADRONTM)、甲基氫化潑尼松(methylprednisolone)(MEDROLTM)、氫化潑尼松(PRELONETM)、氫化潑尼松磷酸鈉(PEDIAPREDTM)、與潑尼松(prednisone)(例如，PREDNICEN-MTM、DELTASONETM、STERAPREDTM)。
于此組合療法中，VR1調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)劑量通常如上所述?？寡讋┙o藥劑量及方法見述于，例如，Physician’s Desk Reference中制造商的指示。某些具體例中，VR1調(diào)節(jié)劑與抗炎劑的組合給藥，導(dǎo)致產(chǎn)生治療效果所需抗炎劑劑量的減少。因此，較佳地，于本發(fā)明的組合或組合治療方法中，抗炎劑的劑量小于制造商建議之未與VR1拮抗劑組合一起給藥的抗炎劑最大劑量。更佳為，該劑量小于廠商建議之未與VR1拮抗劑組合一起給藥的抗炎劑最大劑量的3/4，又更佳為小于1/2，及非常更佳為小于1/4，最佳為小于該最大劑量的10％。顯見地，達(dá)到期望效果的所需組合中，VR1拮抗劑成分的劑量，得同樣地受該組合中抗炎劑成分的劑量與效力所影響。
某些較佳具體實例中，VR1調(diào)節(jié)劑與抗炎劑的組合給藥，藉由在相同包裝盒中將一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑與一種或多種抗炎劑。分別包裝于該包裝盒的分別容器中，或者一種或多種VR1拮抗劑與一種或多種抗炎劑混合成混合物置于相同容器中。較佳的混合物是調(diào)配成供口服用(例如，呈丸劑、膠囊、錠劑等)。某些具體例中，該包裝含印有標(biāo)記的卷標(biāo)，指示該一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑及一種或多種抗炎劑是一起用于治療炎性疼痛癥狀。高度較佳的組合為，其中抗炎劑包含至少一種COX-2專一性環(huán)氧酶酵素抑制劑，例如瓦第昔布(valdecoxib)(BEXTRA)、蘭拉昔布(lumiracoxib)(PREXIGETM)、依托昔布(etoricoxib)(ARCOXIA)、塞利昔布(celecoxib)(CELEBREX)及/或羅非昔布(rofecoxib)(VIOXX)。
進(jìn)一步態(tài)樣中，本說明書提供的VR1調(diào)節(jié)劑得與一種或多種額外的疼痛緩解藥物組合使用。某些此等藥物亦為如上所列舉的抗炎劑。其它此等藥物為麻醉止痛劑，其典型地作用于一種或多種類鴉片劑受體亞型(例如，μ、κ及/或δ)，較佳是作為促效劑或部分促效劑。此等止痛劑包括鴉片劑、鴉片劑衍生物及類鴉片劑，以及其醫(yī)藥上可接受的鹽與水合物。麻醉止痛劑的詳細(xì)實例包括阿芬旦尼(alfentanyl)、阿法普魯汀(alphaprodine)、安尼勒立汀(anileridine)、培集屈密特(bezitramide)、丁基原啡因(buprenorphine)、可待因(codeine)、二乙酰基二氫嗎啡、二乙?；鶈岱?、二氫可待因、氰二苯丙基苯基吡啶羧酸乙酯(diphenoxylate)、乙基嗎啡、芬太尼(fentanyl)、海洛英、二氫可待因酮(hydrocodone)、二氫嗎啡酮(hydromorphone)、異美沙冬(isomethadone)、左旋甲基嗎泛(levomethorphan)、羥甲左嗎南(levorphane)、左旋碼泛(levorphane)、麥啶(meperidine)、美他唑新(metazocine)、美沙酮(methadone)、美索芬(methorphan)、美托酮(metopon)、嗎啡、鴉片萃取物、鴉片流體萃取物、鴉片粉劑、鴉片粒劑、粗鴉片、鴉片酊、羥氫可待因酮(oxycodone)、羥二氫嗎啡酮(oxymorphone)、復(fù)方樟腦酊(paregoric)、潘他唑新(pentazocine)、配西汀(pethidine)、吩那唑新(phenazocine)、匹密喏汀(piminodine)、丙氧吩(propoxyphene)、消旋甲基嗎泛(recemethorphan)、消旋嗎泛(racemorphan)、蒂巴因(thebaine)及前述制劑之醫(yī)藥上可接受的鹽與水合物。
麻醉止痛劑的其它實例，包括乙酰托啡因(acetorphine)、乙?；淇纱?、乙酰美沙多(acetylmethadol)、丙烯普魯汀(allylprodine)、阿法乙酰美沙多、阿法美普魯汀(alphameprodine)、阿法美沙多、苯才西汀(benzethidine)、芐基嗎啡、貝他乙酰美沙多(betacetylmethadol)、貝他美普魯汀(betameprodine)、貝他美沙多、貝他普魯汀、美妥芬喏(butorphonol)、克羅尼他凈(clonitazene)、甲基溴可待因、N-氧化可待因、噻普喏啡(cyprenorphine)、二氫去氧嗎啡(desomorphine)、右旋嗎拉密特(dextromoramide)、狄安普魯密特(diampromide)、二乙基二噻吩基丁烯胺(diethylthiambutene)、二氫嗎啡、狄門喏沙多(dimenoxadol)、狄美菲坦喏(dimepheptanol)、二甲基二噻吩丁烯胺、嗎啉二苯丁酸乙酯(dioxaphetyl butyrate)、狄匹潘濃(dipipanone)、托蒂巴醇(drotebanol)、乙醇、甲基乙基二噻吩丁烯胺、愛托失立汀(etonitazene)、愛托芬(etorphine)、愛托失立汀(etoxeridine)、佛萊西汀(furethidine)、羥二氫嗎啡(hydromorphinol)、羥基配西汀(hydroxypethidine)、羥苯基哌啶丙酮(ketobemidone)、左旋嗎拉密特(levomoramide)、左旋吩納西嗎泛(levophenacylmorphan)、甲基去氧嗎啡、甲基二氫嗎啡、嗎啡里汀(morpheridine)、嗎啡甲基溴化物、甲基磺胺嗎啡、N-氧化嗎啡、密羅啡因(myrophin)、那喏松(naloxone)、那拜芬(nalbuyphine)、那提喝松(naltyhexone)、煙堿酰可待因(nicocodeine)、煙堿酰嗎啡、去甲基乙酰美沙多(noracymethadol)、左旋原嗎泛(norlevorphanol)、原美沙多(normethadone)、原嗎啡(normorphine)、原匹潘濃(norpipanone)、戊唑凱因(pentazocaine)、芬那多松(phenadoxone)、吩喃普魯密特(phenampromide)、吩喏嗎泛(phenomorphan)、吩喏配立汀(phenoperidine)、匹立屈密特(piritramide)、福得汀(pholcodine)、普魯庚唑英(proheptazoine)、普魯配立汀(properidine)、普魯匹蘭(propiran)、外消旋嗎密特(racemoramide)、蒂巴康(thebacon)、屈美配立汀(trimeperidine)及其醫(yī)藥上可接受的鹽與水合物。
進(jìn)一步詳細(xì)的代表性麻醉止痛劑包括，例如TALWINNx與DEMEROL(二者均可購自紐約市Sanofi Winthrop Pharmaceuticals公司)；LEVO-DROMORAN；BUPRENEX(維吉尼亞州Richmond，Reckitt & Coleman Pharmaceuticals公司)；MSIR(康乃狄克州Norwalk，Purdue Pharma L.P.公司)；DILAUDID(紐澤西州MountOlive，Knoll Pharmaceutical公司)；SUBLIMAZE；SUFENTA(紐澤西州Titusville，Janssen Pharmaceutica公司)；PERCOCET、NUBAIN與NUMORPHAN(均可購自賓州Chadds Ford，Endo Pharmaceuticals公司)；HYDROSTATIR、MS/S與MS/L(均可購自肯塔基州Florence，Richwood Pharmaceutical公司)、ORAMORPHSR與ROXICODONE(二者均可購自俄亥俄州Columbus，RoxanneLaboratories)及STADOL(紐約市Bristol-Myers Squibb公司)。又進(jìn)一步的麻醉止痛劑包括CB-2受體促效劑，例如AMl241，及與α2δ次單元結(jié)合的化合物，例如紐若丁(Neurontin)(加巴噴丁(Gabapentin))與普瑞加巴林(pregabalin)。
又于進(jìn)一步態(tài)樣中，本說明書所提供的VR1調(diào)節(jié)劑可與一種或多種白三烯素(leukotriene)受體拮抗劑(例如抑制胱胺酸基白三烯素CysLT1受體的藥劑)組合使用。CysLT1拮抗劑包括Montelukast(SINGULAIR；Merck & Co.，Inc.)。此等組合獲得治療肺病(例如，氣喘)的使用。
本發(fā)明亦進(jìn)一步提供治療尿失禁的組合療法。此等態(tài)樣中，本說明書所提供的VR1調(diào)節(jié)劑可與膽堿(muscarinic)受體拮抗劑(例如Tolterodine(DETROL；Pharmacia Corporation))或抗膽堿劑(例如Oxybutynin(DITROPAN；Ortho-McNeil Pharmaceutical，Inc.，Raritan，NJ))組合使用。
此等組合療法中，VR1調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)劑量通常如上所述。其它疼痛緩解藥物的給藥劑量及方法見述于，例如，Physician’s Desk Reference中的制造商指示。某些具體例中，VR1調(diào)節(jié)劑與一種或多種額外的疼痛緩解藥物的組合給藥，導(dǎo)致產(chǎn)生治療效果所需的各治療劑劑量的減少(例如，制劑中一或二者的劑量得小于制造商建議或上文列舉最大劑量的3/4，小于1/2，小于1/4，或小于該最大劑量的10％)。某些較佳具體例中，VR1調(diào)節(jié)劑與一種或多種額外的疼痛緩解藥物的組合給藥，是如上所述，藉由在相同包裝盒中包裝一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑與一種或多種額外的疼痛緩解藥物而達(dá)成。
為VR1促效劑的化合物得進(jìn)一步用于，例如，群眾控制(作為催淚瓦斯的代用品)、私人保護(hù)(例如，噴霧調(diào)配劑)，或經(jīng)由辣椒素受體去敏化作用作為治療疼痛、搔癢、尿失禁或膀胱過動的醫(yī)藥劑。一般而言，用于群眾控制或私人保護(hù)的化合物，是根據(jù)習(xí)知催淚瓦斯或辣椒噴霧劑技術(shù)加以調(diào)配及使用。
于分別態(tài)樣中，本發(fā)明為本說明書提供的化合物提供多種非醫(yī)藥上的體外及體內(nèi)用途。例如，此等化合物得予以標(biāo)記，作為辣椒素受體(于例如細(xì)胞制品或組織切片、制劑、或其片段的試樣中)檢測與定位用的探針。此外，本說明書提供的化合物包含可用于受體結(jié)合位置之光親和性標(biāo)記研究之合適的反應(yīng)基團(tuán)(例如芳基羰基、硝基或疊氮基)。本說明書提供的化合物得于受體活性試驗中作為陽性對照組用、作為測定候選劑與辣椒素受體結(jié)合能力的標(biāo)準(zhǔn)品、或者作為正子射出斷層掃描術(shù)(PET)成像用或單光子發(fā)射計算機(jī)斷層掃描術(shù)(SPET)用的放射性追蹤劑。此等方法能用于鑒定體中的辣椒素受體。例如，VR1調(diào)節(jié)劑得使用任何各種習(xí)知技術(shù)予以標(biāo)記(例如，以放射性核種例如氚進(jìn)行放射性標(biāo)記，如本說明書所述)，及以適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)時間(例如，由首先進(jìn)行結(jié)合時間試驗而加以決定)與試樣一起培養(yǎng)。培養(yǎng)后，去除未結(jié)合的化合物(例如，利用洗滌)，使用適用于所用標(biāo)記的任何方法檢測已結(jié)合化合物(例如，進(jìn)行放射性標(biāo)記化合物的自動放射照相術(shù)或閃爍計數(shù)；得使用光譜分析法檢測化學(xué)冷光基團(tuán)及螢光基團(tuán))。針對含有標(biāo)記化合物及較大量(例如，10倍量)未標(biāo)記化合物的相配試樣，得以相同方法進(jìn)行，作為對照組。與對照組相較下，較大量的可檢出標(biāo)記殘留于測試試樣中，表示試樣中有辣椒素受體。檢測試驗包括培養(yǎng)細(xì)胞或組織試樣中，辣椒素受體的受體自動放射照相術(shù)(受體制圖)，得如Kuhar于Current Protocols in Pharmacology(紐約John Wiley & Sons出版，1998)中8.1.1至8.1.9章節(jié)所述方式進(jìn)行。
本說明書提供的化合物亦得于用于各種習(xí)知的細(xì)胞分離方法中。例如，調(diào)節(jié)劑得連結(jié)至組織培養(yǎng)盤或其它支撐體的內(nèi)側(cè)表面，作為供固定的親和性配位體，藉而單離體外的辣椒素受體(例如，單離受體表現(xiàn)細(xì)胞)。一較佳具體例中，是使連結(jié)于螢光標(biāo)記(例如，螢光素(fluorescein))的調(diào)節(jié)劑與細(xì)胞接觸，然后利用螢光活發(fā)細(xì)胞分選儀(FACS，亦稱流式細(xì)胞儀)進(jìn)行分析(或單離)。
本說明書所提供VR1調(diào)節(jié)劑可進(jìn)一步用于判別其它結(jié)合于辣椒素受體的分析法。一般而言，此等分析法為標(biāo)準(zhǔn)競爭結(jié)合分析法，其中已結(jié)合的經(jīng)標(biāo)記VR1調(diào)節(jié)劑為試驗化合物所置換。簡單而言，進(jìn)行此等分析法的方式為(a)由辣椒素受體與本說明書所述經(jīng)放射性標(biāo)記的VR1調(diào)節(jié)劑，于可使VR1調(diào)節(jié)劑與辣椒素受體結(jié)合的條件下接觸，藉以產(chǎn)生已結(jié)合且經(jīng)標(biāo)記的VR1調(diào)節(jié)劑；(b)檢測已結(jié)合且經(jīng)標(biāo)記的VR1調(diào)節(jié)劑于沒有試驗制劑存在下的訊號；(c)使已結(jié)合且經(jīng)標(biāo)記的VR1調(diào)節(jié)劑與試驗制劑接觸；(d)在試驗制劑存在下，檢測已結(jié)合且經(jīng)標(biāo)記的VR1調(diào)節(jié)劑的量其相應(yīng)的訊號；及(e)與(b)步驟檢測到的訊號比較，檢測(d)步驟訊號的下降程度，因此得以判別該制劑是否與辣椒素受體結(jié)合。
以下提供的實施例意在說明而非用以限制本發(fā)明。除非另行指出，否則所有試劑與溶劑均為標(biāo)準(zhǔn)商用級，使用時未進(jìn)一步純化。藉運用例行的修飾，起始物質(zhì)得進(jìn)行各種變化，亦得使用額外的步驟來產(chǎn)生本說明書所提供的其它化合物。
實例實例1代表性經(jīng)取代雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物的制備此實例是說明式(I)中由下式所示的代表性雙環(huán)基團(tuán)的制備 該等基團(tuán)可用于產(chǎn)生如略圖4及實例2及3中的式I化合物。
A.6-氨基異喹啉6-氨基異喹啉基本上系依Durant等人所述(歐洲專利申請案EP266949)而制備。
B.7-氨基異喹啉7-氨基異喹啉基本上系依Macdonald等人所述(國際專利申請案WO 97/06158)而制備。
C.8-氨基異喹啉8-氨基異喹啉基本上系依Denny等人(2002)J. Med.Chem.45(3)740所述而制備。
D.2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基胺1.2，4，4-三甲基-7-硝基-4H-異喹啉-1，3-二酮 在0℃下，于2，4，4-三甲基-4H-異喹啉-1，3-二酮(Takechi等人，(1992)Synthesis，778；25.0mmol)的濃H2SO4溶液(50ml)中，滴加發(fā)煙HNO3(5ml)。于室溫下攪拌混合物30分鐘。將混合物注入冰水(100ml)中，以DCM(3×50ml)萃取，利用鹽水洗滌，并以N2SO4脫水。進(jìn)行濃縮而得標(biāo)題化合物。
2.7-氨基-2，4，4-三甲基-7-硝基-4H-異喹啉-1，3-二酮
以10％Pd-C將2，4，4-三甲基-7-硝基-4H-異喹啉-1，3-二酮(10mmol)的MeOH-DCM溶液(5∶1，300ml)氫化3小時。透過硅藻土濾墊進(jìn)行過濾并濃縮，而得標(biāo)題化合物。
3.2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基胺 于7-氨基-2，4，4-三甲基-7-硝基-4H-異喹啉-1，3-二酮(10mmol)的THF回流溶液(200ml)中，滴加BH3-THF溶液(1M，40ml)并持續(xù)回流3小時。冷卻至0℃并滴加MeOH(200ml)。濃縮，添加3N HCl(200ml)，并回流30分鐘。冷卻至0℃，以NaOH調(diào)整至pH 9，以DCM(3×50ml)萃取，利用N2SO4脫水，并濃縮而得標(biāo)題化合物。
E.7-氨基-4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫喹啉 7-氨基-4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫喹啉基本上系依Elbaum等人所述(美國專利公開案第2003/0134836號)而制備。
F.7-硝基-1，2，3，4-四氫-喹啉 7-硝基-1，2，3，4-四氫-喹啉基本上系依Field及Hammond所述(美國專利申請案第5,283,336號)而制備。
G.7-氨基-1，2，3，4-四氫喹啉 7-氨基-1，2，3，4-四氫喹啉基本上系依Field及Hammond所述(美國專利申請案第5,283,336號)而制備。
H.7-氨基喹啉 7-氨基喹啉基本上系依Linsker及Evans(1946)J.Am.Chem.Soc.48149-50所述而制備。
I.1-(2-二甲基氨基-乙基)-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基胺1.2-二甲基氨基-1-(7-硝基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-乙酮 在0℃下，添加二甲基氨基乙?；?5.7mmol)至7-硝基-1，2，3，4-四氫-喹啉(1g，5.6mmol)及三乙胺(8.6mmol)的二氯甲烷溶液中。于室溫下攪拌反應(yīng)16小時，然后在二氯甲烷及飽和NaHCO3之間分層。將有機(jī)層脫水(Na2SO3)并于減壓下濃縮而得標(biāo)題化合物。
2.二甲基-[2-(7-硝基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-乙基]-胺 在0℃、氮環(huán)境下，添加硼烷/THF復(fù)合物(4.5mmol)至2-二甲基氨基-1-(7-硝基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-乙酮(0.85mmol)的無水THF溶液(10ml)中。持續(xù)在0℃下攪拌30分鐘，接著于室溫下攪拌3小時。緩慢地添加3N HCl(3ml)，接著添加水(10ml)。以乙酸乙酯萃取得到的溶液，將有機(jī)層脫水(Na2SO3)，并于減壓下濃縮而得標(biāo)題化合物。
3.1-(2-二甲基氨基-乙基)-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基胺 在50psi及室溫下，利用10％載于碳上的鈀(150mg)將二甲基-[2-(7-硝基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-乙基]-胺(5.5mmol)的乙醇溶液氫化24小時。將溶液透過硅藻土進(jìn)行過濾，并于減壓下濃縮濾液而得標(biāo)題化合物。
J.1-(2-嗎啉-4-基-乙基)-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基胺1.2-氯-1-(7-硝基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-乙酮
利用類似于上述I-1所述之制程，使用氯乙?；葘?-硝基-1，2，3，4-四氫-喹啉轉(zhuǎn)換為標(biāo)題化合物。
2.2-嗎啉-4-基-1-(7-硝基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-乙酮 在80℃下，將2-氯-1-(7-硝基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-乙酮(26mmol)及嗎啉(260mmol)的二甲基乙酰胺混合物加熱16小時。反應(yīng)混合物于10％NaOH溶液及乙酸乙酯之間分層。將有機(jī)層脫水(Na2SO3)，并于減壓下濃縮。利用0至5％MeOH/二氯甲烷作為洗提液，藉由硅膠快速管柱層析法進(jìn)行純化，而得標(biāo)題化合物。
3.1-(2-嗎啉-4-基-乙基)-7-硝基-1，2，3，4-四氫-喹啉 利用類似于上述I-2所述之制程，將2-嗎啉-4-基-1-(7-硝基-3，4-二氫-2H-喹啉-1-基)-乙酮轉(zhuǎn)換為標(biāo)題化合物。
4.1-(2-嗎啉-4-基-乙基)-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基胺 利用類似于上述I-3所述之制程，將1-(2-嗎啉-4-基-乙基)-7-硝基-1，2，3，4-四氫-喹啉轉(zhuǎn)換為標(biāo)題化合物。
實例2
代表性經(jīng)取代雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物的制備此實例是說明代表性經(jīng)取代雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物的制備。
于此實例及后述實例中，質(zhì)譜儀數(shù)據(jù)為為使用MicromassTime-of-Flight LCT，以15V或30V錐電壓(cone voltage)于正離子模式中所獲得的電噴霧質(zhì)譜(Electrospray MS)，該Micromass Time-of-FlightLCT裝配有Waters 600泵、Waters 996光電二極管數(shù)組偵測器、Gilson215自動進(jìn)樣器和Gilson 841微注射器。MassLynx(AdvancedChemistry Development，Inc；Toronto，Canada)4.0版軟件用于資料收集與分析。注射1微升體積試樣于50×4.6毫米Chromolith SpeedRODC18管柱，并于6ml/分鐘流速使用2-相線性梯度(2-phase linear gradient)來洗提。在220至340納米紫外光范圍內(nèi)使用全吸收計數(shù)(totalabsorbance count)測定樣品。洗提條件為移動相A-95/5/0.05水/甲醇/TFA；移動相B-5/95/0.025水/甲醇/TFA。
斜率時間(分鐘)％B0 100.5 1001.2 1001.21 10每次注射間的總運轉(zhuǎn)時間為2分鐘。資料以質(zhì)量+1(M+1)來表示。
下列提供的IC50值為如實例6所述予以測定。
A.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(1-甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-胺(化合物1)1.2-乙?；?3-氯吡啶 于氮環(huán)境下將3-氯-2-氰基吡啶(10.0g，0.072mol，Chem.Pharm.Bull.(1985)33565-571)溶于無水THF(200ml)，并于冰浴中冷卻。滴加含有3.0M MeMgI的二乙醚(48ml，0.14mol)至反應(yīng)混合物中，并于冰浴中攪拌2小時。將反應(yīng)混合物注入冰水中，以2.0N HCl水溶液酸化混合物至pH 2至3。以EtOAc(3×100ml)萃取反應(yīng)混合物并以無水MgSO4脫水。過濾，于真空下濃縮，然后利用20％乙酸乙酯/己烷作為洗提液，透過硅膠濾墊進(jìn)行過濾。于減壓下移除溶劑，而得成油狀的純2-乙?；?3-氯吡啶。
1.1-(3-氯-吡啶-2-基)-3-二甲基氨基丙烯酮 將2-乙?；?3-氯吡啶(0.77g，5.0mmol)與N，N-二甲基甲酰胺二甲醛(3.0g)于105℃加熱20小時。于減壓下濃縮，而得成油狀的1-(3-氯-吡啶-2-基)-3-二甲基氨基丙烯酮。
3.2-氨基-4-(3-氯-吡啶-2-基)-苯甲腈 將1-(3-氯-吡啶-2-基)-3-二甲基氨基丙烯酮(1.05g，5mmol)、3-氨基-3-甲氧基-丙烯腈鹽酸鹽(1.35g，10mmol)及乙酸銨(2.2g，15.0mmol)的乙醇溶液(25ml)于回流下加熱20小時。冷卻混合物，并于減壓下濃縮，而得深色油狀物。將殘質(zhì)溶于EtOAc/水(100ml)中。以EtOAc萃取水溶液，以鹽水洗滌EtOAc，脫水(MgSO4)，并于減壓下濃縮，而得呈棕色油狀的2-氨基-4-(3-氯-吡啶-2-基)-苯甲腈。
4.6-氨基-3’-氟[2，2’]聯(lián)吡啶-5-甲酰安 于氮環(huán)境下，將濃硫酸(10ml)于冰浴中冷卻。于15分鐘期間，分成多份來添加2-氨基-4-(3-氯-吡啶-2-基)-苯甲腈(1.0g，4.3mmol)。于室溫下攪拌隔夜。將反應(yīng)混合物注入冰中，利用10N NaOH水溶液調(diào)整至pH值至10，濾出固體，以水洗滌固體，并于真空下脫水，而得呈黃色固體的6-氨基-3’-氯-[2，2’]聯(lián)吡啶-5-甲酰安。
5.7-(3-氯吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-3H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-酮
于氮環(huán)境下將6-氨基-3’-氯-[2，2’]聯(lián)吡啶-5-甲酰安。(0.5g，2.02mmol)溶于無水THF(10ml)中。滴加吡啶(0.36g，4.04mmol)及甲氧基乙?；?0.48g，4.04mmol)至反應(yīng)混合物中，并于室溫下攪拌隔夜。添加10％NaOH水溶液(10ml)并回流4小時。于真空下濃縮，利用AcOH調(diào)整pH值至6.0，藉由過濾收集固體，并于真空下脫水，而得呈白色固體7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-3H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-酮。
6.4-氯-7-(3-氯基啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶 將7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-3H-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-酮(0.25g)、2，6-二甲基吡啶(0.44g)及POCl3(0.51g)于CHCl3(5ml)的混合物回流20小時。冷卻混合物，并于減壓下濃縮。將殘質(zhì)于EtOAc及飽和NaHCO3溶液之間分層。以額外的NaHCO3洗滌EtOAc部分，然后脫水(Na2SO4)，并于減壓下濃縮。將棕色殘質(zhì)通過2英時硅膠(1∶1EtOAc/己烷洗提液)而進(jìn)行過濾，并于減壓下濃縮，而得4-氯-7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶。
7.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(1-甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-胺 將4-氯-7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶(0.1mol)及1-甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基胺(0.1mmol)于CH3N(1ml)的混合物于80℃加熱24小時。冷卻混合物，以乙醚洗滌沉淀物，而得呈單-HCl鹽的[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺。質(zhì)譜(M+1)481.3。IC50為低于1微摩爾濃度。
B.(2-甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺(化合物2)1.2-(4-溴苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶 于氮環(huán)境下，在經(jīng)脫氣的2-溴-3-(三氟甲基)-吡啶(2.26mmol)、4-溴-苯基硼酸(2.49mmol)及2M Na2CO3(5.65mmol)于DME(10ml)的混合物中添加Pd(PPh3)4(0.09mmol)。將混合物于80℃攪拌隔夜，濃縮，并以EtOAc萃取。利用Na2SO4脫水，于真空下濃縮，并藉由快速層析法(4∶1己烷/EtOAc)進(jìn)行純化，而得2-(4-溴苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶。
2.2-(4-溴-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶 于2-(4-溴苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶(0.93mmol)的H2SO4溶液(4ml)中，小心地添加發(fā)煙HNO3(2ml)。于室溫攪拌該混合物30分鐘，將混合物注入冰水(20ml)中，并收集沉淀物。將沉淀物溶于EtOAc中，并以飽和NaHCO3中和，以Na2SO4脫水，并于真空下濃縮，而獲得2-(4-溴-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶。
3.2-硝基-4(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲腈 于2-(4-溴-3-硝基-苯基)-3-(三氟甲基)-吡啶(0.55mmol)的DMA溶液(4ml)中，添加CuCN(0.60mmol)。于110℃攪拌混合物4小時。冷卻至室溫，以20ml EtOAc稀釋，并透過硅藻土濾墊進(jìn)行過濾。以鹽水洗滌濾液，以Na2SO4脫水，于真空下濃縮，并藉由快速層析法(1∶1己烷/EtOAc)純化，而得2-硝基-4(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲腈。
4.2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲腈
于經(jīng)冰水冷卻的2-硝基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲腈(0.44mmol)的濃HCl溶液(6ml)中，添加SnCl2(1.457mmol)。于室溫攪拌混合物2小時。以NaOH中和，以EtOAc萃取，利用Na2SO4脫水，并于真空下濃縮。藉由快速層析法(4∶1己烷/EtOAc)純化，而得2-氨基-4(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲腈。
5.7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-醇 將2-氨基-4-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-苯甲腈(0.41mmol)及NaOAc(1.23mmol)于HCOOH(10ml)中回流16小時。真空蒸發(fā)溶劑，將殘質(zhì)懸浮于20ml的20％NaOH中，于室溫攪拌30分鐘。過濾，以EtOAc萃取，利用Na2SO4脫水，并于真空下濃縮，而得7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-醇。
6.4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉 將7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-醇(0.38mmol)于POCl3(5ml)中回流18小時。真空蒸發(fā)溶劑，然后小心地以飽和NaHCO3中和，并以EtOAc萃取。利用Na2SO4脫水，并于真空下濃縮，而得4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉。
7.(2-甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺 在80℃下，將4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉(0.16mmol)及2-甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基胺(0.32mmol)于IPA(4ml)中攪拌6小時。冷卻混合物并收集沉淀物，而得(2-甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺鹽酸鹽。
C.[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺鹽酸鹽(化合物3) 1.2，4，4-三甲基-7-硝基-4H-異喹啉-1，3-二酮在0℃下，于2，4，4-三甲基-4H-異喹啉-1，3-二酮[Takechi，H.等人，(1992)Synthesis，778](25.0mmol)的濃H2SO4溶液(50ml)中，滴加發(fā)煙HNO3(5ml)。于室溫下攪拌混合物30分鐘。將混合物注入冰水(100ml)中，以DCM(3×50ml)萃取，利用鹽水洗滌，并以Na2SO4脫水。進(jìn)行濃縮而得標(biāo)題化合物。
2.7-氨基-2，4，4-三甲基-7-硝基-4H-異喹啉-1，3-二酮以10％Pd-C將2，4，4-三甲基-7-硝基-4H-異喹啉-1，3-二酮(10mmol)的MeOH-DCM溶液(5∶1，300ml)氫化3小時。透過硅藻土濾墊進(jìn)行過濾并濃縮，而得標(biāo)題化合物。
3.2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基胺于7-氨基-2，4，4-三甲基-7-硝基-4H-異喹啉-1，3-二酮(10mmol)的THF回流溶液(200ml)中，滴加BH3-THF溶液(1M，40ml)并持續(xù)回流3小時。冷卻至0℃并滴加MeOH(200ml)。濃縮，添加3N HCl(200ml)，并回流30分鐘。冷卻至0℃，以NaOH調(diào)整至pH 9，以DCM(3×50ml)萃取，利用Na2SO4脫水，并濃縮而得標(biāo)題化合物。
4.[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四異-異喹啉-7-基)-胺鹽酸鹽在80℃下，將4-氯-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-醇(請參見WO 03062209，0.16mmol)及2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基胺(0.32mmol，如上述)于IPA(4ml)中攪拌6小時。冷卻混合物并收集沉淀物，而得[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺鹽酸鹽。質(zhì)譜(M+1)464.0。IC50為低于1微摩爾濃度。
D.(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-[2-異丁氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺鹽酸鹽(化合物4) 在25℃下，將4-氯-2-異丁氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶(請參見WO 03062209，0.1mmol)及7-氨基-4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫喹啉(0.1mmol，依照美國專利申請案2003/0134836中，Elbaum等人之方法而制備)于乙腈(1ml)中攪拌20小時。濾出固體而得標(biāo)題化合物。質(zhì)譜(M+1)537.34。IC50為低于1微摩爾濃度。
E.[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-胺(化合物5) 在25℃下，將4-氯-2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶(請參見WO 03062209，0.1mmol)及7-氨基-1，2，3，4-四氫喹啉(0.1mmol，依照美國專利案第5,283,336號而制備)于乙腈(1ml)中攪拌20小時。濾出固體而得標(biāo)題化合物。質(zhì)譜(M+1)467.2。IC50為低于1微摩爾濃度。
F.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-乙氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基)-胺(化合物6)
1.7-硝基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪于氮環(huán)境下，將2-氨基-4-硝基酚(4.0g，26mmol)溶于無水DMF(20ml)中。添加1，2-二溴乙烷(2.36ml，27.6mmol)及K2CO3(7.2g，52mmol)至混合物中，并于125℃攪拌3小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，以1.0N NaOH水溶液(250ml)稀釋，以EtOAc(2×200ml)萃取，利用水(2×100ml)及鹽水(100ml)洗滌萃取物，并以MgSO4脫水。過濾并于真空下濃縮，而得橙黃色固體。
2.1-甲基-7-硝基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪于氮環(huán)境下，將7-硝基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪(1.8g，10mmol)溶于無水DMF(30ml)中。添加60％NaH(480mg，12mmol)，并攪拌15分鐘。添加MeI(1.5ml)至所得混合物中，并于室溫攪拌隔夜。以水(100ml)淬冷反應(yīng)混合物，以EtOAc(2×200ml)萃取，利用鹽水(100ml)洗滌萃取物，并以MgSO4脫水。過濾并于真空下濃縮，而得棕黃色固體。
3.7-氨基-1-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪將1-甲基-7-硝基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪(0.5g)溶于無水EtOH(50ml)中，然后添加10％Pd/C(0.25g)。于室溫下，在20psi氫氣中氫化2小時。濾除催化劑，并于真空下濃縮，而得呈棕色油狀的氨基衍生物。
4.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-乙氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基)-胺鹽酸鹽在25℃下，將4-氯-2-乙氧基甲基-7-(3-氯-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶(請參見WO 03/062209，0.1mmol)及7-氨基-1-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪(0.1mmol，如上述)于乙腈(1ml)中攪拌20小時。濾出固體而得標(biāo)題化合物。質(zhì)譜(M+1)463.2。IC50為低于1微摩爾濃度。
G.1-{6-[2-乙氧基甲基-7-(3-甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[23-d]嘧啶-4-基-氨基]-3，3-二甲基-2，3-二氫-吲哚-1-基}-乙酮(化合物7)
1.N-(2-溴-4-硝基-苯基)-乙酰胺于氮環(huán)境下，將2-溴-5-硝基苯胺(5.2g，24mmol)溶于冰醋酸(150ml)中。添加乙酸酐(2.3ml，24mmol)至混合物中，并于25℃攪拌20小時。以水(100ml)淬冷反應(yīng)混合物，濾出固體，以水(2×50ml)洗滌固體，并于真空下脫水，而得灰白色固體。
2.N-(2-溴-4-硝基-苯基)-N-(2-甲基-烯丙基)-乙酰胺于氮環(huán)境下，將N-(2-溴-4-硝基-苯基)-乙酰胺(5.6g，22mmol)溶于無水DMF(100ml)中。添加K2CO3(12.1g，4eq)，接著添加3-溴-2-甲基丙烯(4.5mmol，2.0eq)至反應(yīng)混合物中，并于室溫攪拌隔夜。以水(100ml)淬冷反應(yīng)混合物，以EtOAc(3×200ml)萃取，利用鹽水(100ml)洗滌萃取物，并以MgSO4脫水。過濾并于真空下濃縮，而得固體。
3.1-(3，3-二甲基-5-硝基-2，3-二氫-吲哚-1-基)-乙酮將N-(2-溴-4-硝基-苯基)-N-(2-甲基-烯丙基)-乙酰胺(6.7g，21mmol)溶于無水DMF(50ml)中，然后添加甲酸鈉(1.75g，26mmol)、乙酸鈉(4.4g，54mmol)、四乙基氯化銨水合物(3.7g，21mmol)及乙酸鈀(0.48g)。將所得混合物于80℃加熱20小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，濾除催化劑，以飽和NaHCO3(200ml)稀釋反應(yīng)混合物，以EtOAc(2×200ml)萃取，利用鹽水(100ml)洗滌萃取物，并以MgSO4脫水。過濾并于真空下濃縮，而得棕色固體。
4.1-(5-氨基-3，3-二甲基-2，3-二氫-吲哚-1-基)-乙酮將1-(3，3-二甲基-5-硝基-2，3-二氫-吲哚-1-基)-乙酮(1.0g，4.27mmol)溶于無水乙醚(30ml)中，并冷卻至0℃。添加二水合氯化錫(6.0g)，接著添加12.0N HCl(3.3ml)至混合物中，并于0℃攪拌10分鐘。將反應(yīng)混合物慢慢溫?zé)嶂潦覝兀缓髷嚢韪粢?。以EtOAc(100ml)稀釋反應(yīng)混合物，以10.0NNaOH(10ml)洗滌，并以MgSO4脫水。過濾并于真空下濃縮，而得黃色固體。
5.1-{6-[2-乙氧基甲基-7-(3-甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基-氨基]-3，3-二甲基-2，3-二氫-吲哚-1-基}-乙酮在25℃下，將4-氯-2-乙氧基甲基-7-(3-氯-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶(請參見WO 03/062209，0.1mmol)及1-(5-氨基-3，3-二甲基-2，3-二氫-吲哚-1-基)-乙酮(0.1mmol，如上述)于乙腈(1ml)中攪拌20小時。濾出固體而得標(biāo)題化合物。質(zhì)譜(M+1)483.28。IC50為低于1微摩爾濃度。
H.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-異丁氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(1，3，3-三甲基-2，3-二氫-1H-吲哚-6-基)-胺(化合物8) 1.3，3-二甲基-5-硝基-2，3-二氫-1H-吲哚將1-(3，3-二甲基-5-硝基-2，3-二氫-吲哚-1-基)-乙酮(2.0g，8.55mmol)溶于無水乙醇(30ml)中，然后添加12N HCl(20ml)。將混合物回流3小時，然后于室溫下隔夜。將混合物冷卻至0℃，濾出固體，并于真空下干燥，而得灰白色固體。
2.1，3，3-三甲基-5-硝基-2，3-二氫-1H-吲哚于氮環(huán)境下，將3，3-二甲基-5-硝基-2，3-二氫-1H-吲哚(1.5g，7.8mmol)溶于無水DMF(50ml)中。添加60％NaH(930mg，23mmol)并攪拌15分鐘。添加MeI(0.53ml)至所得混合物中，并于室溫攪拌3小時。以水(100ml)淬冷反應(yīng)混合物，以EtOAc(2×200ml)萃取，利用鹽水(100ml)洗滌萃取物，并以MgSO4脫水。過濾并于真空下濃縮，而得固體。
3.1，3，3-三甲基-2，3-二氫-1H-吲哚-5-基胺將1，3，3-三甲基-5-硝基-2，3-二氫-1H-吲哚(1.6g，7.7mmol)溶于無水乙醚(30ml)中，并冷卻至0℃。添加二水合氯化錫(10.6g)，接著添加12.0N HCl(5.6ml)至混合物中，并于0℃攪拌10分鐘。將反應(yīng)混合物慢慢溫?zé)嶂潦覝兀缓髷嚢韪粢?。以EtOAc(100ml)稀釋反應(yīng)混合物，以10.0N NaOH(10ml)洗滌，并以MgSO4脫水。過濾并于真空下濃縮，而得棕色油狀物。
4.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-異丁氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(1，3，3-三甲基-2，3-二氫-1H-吲哚-6-基)-胺在25℃下，將4-氯-2-異丁氧基甲基-7-(3-氯-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶(請參見WO 03/062209，0.1mmol)及1，3，3-三甲基-2，3-二氫-1H-吲哚-5-基胺(0.1mmol，如上述)于乙腈(1ml)中攪拌20小時。濾出固體而得標(biāo)題化合物。質(zhì)譜(M+1)503.28。IC50為低于1微摩爾濃度。
I.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺鹽酸鹽(化合物9) 在80℃下，將4-氯-7-(3-氯-吡啶-2-基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶(0.16mmol，請參見WO 03/062209)及2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基胺(0.32mmol)于IPA(4ml)中攪拌6小時。冷卻混合物并收集沉淀物，而得[7-(3-氯-吡啶-2-基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺鹽酸鹽。質(zhì)譜(M+1)431。IC50為低于1微摩爾濃度。
J.(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-[1，8]萘啶-4-基]-胺(化合物10) 1.6-氨基-3’-三氟甲基-[2，2’]聯(lián)吡啶-5-羧酸 將6-氨基-3’-三氟甲基-[2，2’]聯(lián)吡啶-5-甲腈(2.33g，8.82mmol，請參見WO 03/062209)溶于12M HCl(50ml)中，并于110℃加熱隔夜。于減壓下移除酸水溶液，而得呈鹽酸鹽形式的標(biāo)題化合物。
2.6-氨基-3’-三氟甲基-[2，2’]聯(lián)吡啶-5-羧酸2，5-二氧代基-吡咯啶-1-基酯 將6-氨基-3’-三氟甲基-[2，2’]聯(lián)吡啶-5-羧酸鹽酸鹽(11.33g，35.44mmol)、N-羥基-丁二酰亞胺(8.15g，70.9mmol)及EDCI(10.19g，53.16mmol)溶于干燥THF(100ml)及何尼氏堿(Hunig’s base)的溶液中。將反應(yīng)混合物于室溫攪拌隔夜。添加乙酸乙指(200ml)，以水(3×100ml)及鹽水(100ml)萃取有機(jī)相。將有機(jī)萃取物利用Na2SO4脫水，并于減壓下移除溶劑，而得呈棕色泡沫的標(biāo)題化合物。
3.4-羥基-2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-[1，8]萘啶-3-羧酸甲酯 將含有6-氨基-3’-三氟甲基-[2，2’]聯(lián)吡啶-5-羧酸2，5-二氧代基-吡咯啶-1-基酯(10.4g，27.3mmol)的50ml干燥THF溶液一次性添加至含有第三丁氧化鉀(7.36g，65.6mmol)及4-甲氧基-乙酰乙酸甲酯(8.77g，60.7mmol)的干燥THF混合物(100ml)中。將反應(yīng)混合物于室溫攪拌隔夜。添加水(30ml)并濃縮溶液(至約30ml)。將所得混合物以乙醚(2×50ml)萃取。以濃鹽酸酸化水溶液部分，并以CH2Cl2(4×100ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取物利用Na2SO4脫水，并于減壓下移除溶劑，而得呈淺棕色油狀物(靜置后則凝固)的標(biāo)題化合物。
4.2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-[1，8]萘啶-4-醇 將4-羥基-2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-[1，8]萘啶-3-羧酸甲酯(200mg，0.508mmol)溶于12M HCl(20ml)，并于110℃加熱6小時。將反應(yīng)混合物注入冰(100g)中，并以CH2Cl2(4×150ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取物利用Na2SO4脫水，并于減壓下移除溶劑。粗產(chǎn)物藉由硅膠制備性TLC進(jìn)行純化，利用己烷/丙酮(3∶1)洗提，而得呈白色固體的標(biāo)題化合物。
5.4-氯-2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-[1，8]萘啶 將2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-[1，8]萘啶-4-醇(191mg，0.569mmol)溶于氯仿(15ml)、POCl3(0.212ml，2.28mmol)及2，6-二甲基吡啶(0.256ml，2.28mmol)的溶液中。將反應(yīng)于回流下加熱隔夜。于減壓下濃縮混合物。將所得殘質(zhì)溶于EtOAc(50ml)中，并以水(50ml)、飽和NaHCO3水溶液(50ml)及鹽水(50ml)萃取。將有機(jī)萃取物利用Na2SO4脫水，并于減壓下移除溶劑。粗產(chǎn)物藉由管柱層析法于硅膠上進(jìn)行純化，利用己烷/EtOAc(1∶1)洗提，而得呈白色固體的標(biāo)題化合物。
6.(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-[1，8]萘啶-4-基]-胺將4-氯-2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-[1，8]萘啶(100mg，0.282mmol)及4，4-甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉(54.8mg，0.311mmol)溶于異丙醇(3ml)及2M HCl(6滴，乙醚)的溶液中。將混合物于室溫攪拌隔夜。于減壓下濃縮溶液。將粗反應(yīng)產(chǎn)物溶于EtOAc(25ml)及1NNaOH(25ml)的溶液中。移除有機(jī)相，并以Na2SO4脫水。于減壓下移除溶劑。粗混合物藉由硅膠制備性TLC進(jìn)行純化，利用CH2Cl2/MeOH(93∶7)洗提，而得標(biāo)題化合物。質(zhì)譜(M+1)494.28。IC50為低于1微摩爾濃度。
實例3其它經(jīng)取代雙環(huán)喹唑啉-4-基胺衍生物利用以上提供的方法，以熟悉此相關(guān)技藝的人士顯然已知的起始材料及微小變化，來制備下列化合物。表1中，質(zhì)譜資料系如上述方式而獲得。標(biāo)示「EC50/IC50」的欄項中，「*」表示如本文實例6中所述而測定的EC50或IC50為低于1微摩爾濃度或更低。
表1







表2
表3
表4 表5
表6 實例4VR1-轉(zhuǎn)染細(xì)胞與細(xì)胞膜制劑此實例說明制備結(jié)合試驗(實例5)及功能試驗(實例6)用的VR1-轉(zhuǎn)染細(xì)胞與膜制劑。
將人類辣椒素受體全長的cDNA序列(美國專利6,482,611號的SEQ ID NO1、2或3)次選殖至用于哺乳動物細(xì)胞中重組表現(xiàn)的質(zhì)體pBK-CMV(Stratagene，La Jolla，CA)。
使用標(biāo)準(zhǔn)方法，將人類胚胎腎臟(HEK293)細(xì)胞以表現(xiàn)人類辣椒素受體全長序列的pBK-CMV予以轉(zhuǎn)染。置于含G418(400μg/mL)的培養(yǎng)液中兩周，從中選出轉(zhuǎn)染細(xì)胞，以得到一群安定的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。藉由限制稀釋(limiting dilution)從該群細(xì)胞中單離出獨立的選殖系，以獲得安定選殖細(xì)胞株，做為下一個試驗的使用。
進(jìn)行放射性配位體結(jié)合試驗時，將細(xì)胞接種于T175細(xì)胞培養(yǎng)燒瓶內(nèi)且不含抗生素的培養(yǎng)液中，生長至約90％融合度(confluency)。再以PBS洗滌燒瓶，并于含5mM EDTA的PBS中收集細(xì)胞。藉由溫和離心使細(xì)胞集結(jié)成團(tuán)，并保存于-80℃至分析為止。
以組織均質(zhì)器將先前冷凍細(xì)胞于冰冷HEPES均質(zhì)緩沖液中分散(5mM KCl 5、5.8mM NaCl、0.75mM CaCl2、2mM MgCl2、320mM蔗糖與10mM HEPES pH 7.4)。組織均質(zhì)液先于1000xg(4℃)下離心10分鐘，以移除核部分及細(xì)胞碎片，然后將第一次離心的上清液于35,000xg(4℃)下再離心30分鐘，得到部分純化的膜部分。將膜再懸浮于HEPES均質(zhì)緩沖液中，再進(jìn)行分析。取一份膜均質(zhì)液，利用Bradford方法(BIO-RAD蛋白質(zhì)分析套組，#500-0001，BIO-RAD，Hercules，CA)測定蛋白質(zhì)濃度。
實例5辣椒素受體結(jié)合試驗本實例說明辣椒素受體的代表性結(jié)合試驗，可用于測定化合物對辣椒素(VR1)受體的結(jié)合親和性。
與[3H]樹膠脂毒素(RTX)的結(jié)合試驗基本上是依Szallasi與Blumberg(1992)J.Pharmacol.Exp.Ter.262883-888所述的方法進(jìn)行。該方法中，當(dāng)結(jié)合反應(yīng)結(jié)束后，非專一性的RTX結(jié)合會由于添加牛α1酸醣蛋白(每支試管100μg)而下降。
RTX(37Ci/mmol)是由國家癌癥研究所-費得利克癌癥研究與發(fā)展中心的化學(xué)合成與分析實驗室(the Chemical Synthesis andAnalysis Laboratory，National Cancer Institute-Frederick Cancer Researchand Development Center，F(xiàn)rederick，MD)合成所得到。[3H]RTX亦可為市售可得者(例如Amersham Pharmacia Biotech，Inc.；Piscataway，NJ)。
將實例4的膜均質(zhì)液如上述離心，并再懸浮于均質(zhì)緩沖液中以達(dá)蛋白質(zhì)濃度333μg/ml。于冰上制備結(jié)合試驗混合物，該混合物是包括[3H]RTX(比活性2200mCi/ml)、2μl非放射活性試驗化合物、0.25mg/ml牛血清白蛋白(Cohn V部份)、與5×104-1×105VR1-轉(zhuǎn)染細(xì)胞。以上述冰-冷HEPES均質(zhì)緩沖液(pH 7.4)調(diào)整最終體積至500μl(用于競爭結(jié)合試驗)或1,000μl(用于飽和結(jié)合試驗)。非專一性結(jié)合的定義為在1μM非放射活性RTX(Alexis Corp.；San Diego，CA)的存在下的結(jié)合性。進(jìn)行飽和結(jié)合時，使用1比2的稀釋，添加的[3H]RTX濃度范圍為7至1,000pM。每條飽和結(jié)合曲線一般收集11個濃度點。
競爭結(jié)合試驗是于60pM[3H]RTX及不同濃度的試驗化合物存在下進(jìn)行。藉由將分析混合物移至37℃水浴來開始結(jié)合反應(yīng)，60分鐘培育后，將試管置于冰上冷卻以中止反應(yīng)。藉由在WALLA玻璃纖維濾紙(PERKIN-ELMER，Gaithersburg，MD)上過濾，將結(jié)合RTX的膜及任何與α1酸醣蛋白結(jié)合的RTX從游離態(tài)的分離出來，該玻璃纖維濾紙使用前先浸泡1.0％PEI(聚伸乙基亞胺)2小時。使濾紙干燥隔夜后，于添加WALLAC BETA SCINT閃爍液后，于WALLAC 1205BETA PLATE計數(shù)器上計數(shù)。
平衡結(jié)合參數(shù)的決定是藉由代入變構(gòu)性希爾公式(the allosteric Hillequation)，以計算機(jī)程序FIT P(Biosoft，F(xiàn)erguson，MO)輔助計算資料(說明于Szallasi等人的(1993)J.Pharmacol.Exp.Ther.266678-683)。本文所提供化合物于此分析法中對辣椒素受體的Ki值小于1μM、100nM、50nM、25nM、10nM或1nM。
實例6鈣離子移動試驗本實例說明用于監(jiān)控表現(xiàn)辣椒素受體的細(xì)胞對辣椒素與辣椒素受體的其它類香草醇配位體的反應(yīng)，以及評估試驗化合物的促效劑與拮抗劑活性的代表性鈣離子移動試驗。
將轉(zhuǎn)染有表現(xiàn)質(zhì)體(如實例4所述)而表現(xiàn)人類辣椒素受體的轉(zhuǎn)染細(xì)胞，接種于FALCON黑邊、透明底板的96孔分析盤中(#3904，BECTON-DICKINSON，F(xiàn)ranklin Lakes，NJ)，生長至70至90％融合度。將96孔盤中的培養(yǎng)液排空，并于各孔中加入FLUO-3AM鈣敏感性染料(Molecular Probes，Eugene，OR)(染料溶液1mg FLUO-3AM、440μLDMSO與440μl 20％普羅尼克酸(pluronic acid)的DMSO溶液，于克氏-林格氏(Krebs-Ringer)HEPES(KRH)緩沖液(25mM HEPES、5mMKCl、0.96mM NaH2PO4、1mM MgSO4、2mM CaCl2、5mM葡萄糖、1mM羧苯磺胺(probenecid)，pH 7.4)中稀釋為1∶250)，每孔有50μl稀釋溶液)。以鋁箔覆蓋分析盤，并于37℃于含5％CO2環(huán)境下培育1至2小時。培育后，排空分析盤中的染料，并以KRH緩沖液洗滌細(xì)胞一次，再懸浮于KRH緩沖液中。
使用FLUOROSKAN ASCENT(Labsystems，F(xiàn)ranklin，MA)或FLIPR(螢光成像的分析盤讀取系統(tǒng)；Molecular Devices，Sunnyvale，CA)儀器監(jiān)控促效劑(如歐瓦尼(olvanil)、辣椒素或RTX)所誘發(fā)的鈣離子移動。將不同濃度的拮抗劑釕紅(ruthenium red)或辣椒平(capsazepine)(RBI；Natick，MA)與促效劑(例如，25至50nM辣椒素)一起添加至細(xì)胞中。對于促效劑所誘發(fā)的鈣反應(yīng)，于促效劑施用后30至60秒間獲得的資料被用來產(chǎn)生IC50值。使用KALEIDAGRAPH軟件(SynergySoftware，Reading，PA)將資料代入公式y(tǒng)＝a*(l/(l-t-(b/x)c))以決定反應(yīng)的IC-50。此公式中，y為螢光訊號最大值，x為促效劑或拮抗劑濃度，a為Emax；b相當(dāng)于IC50值，而c為希爾系數(shù)(Hill coefficient)。
為了測定試驗化合物拮抗(抑制)表現(xiàn)辣椒素受體的細(xì)胞對辣椒素或其它類香草醇促效劑產(chǎn)生反應(yīng)的能力，首先測定辣椒素的IC50值。將額外的20μl KRH緩沖液及1μl DMSO添加至如上述方式制備的細(xì)胞的各孔中。藉由FLIPR儀器自動添加100μl含辣椒素的KRH緩沖液至各孔中。采用8點式濃度反應(yīng)曲線，以1nM至3μM的最終辣椒素濃度，來測定辣椒素的IC50值。
將試驗化合物溶于DMSO中，稀釋于20μl KRH緩沖液，以使分析孔中試驗化合物最終濃度在1μM至5μM之間，并加入如上述制備的細(xì)胞。將含有所制備細(xì)胞及試驗化合物的96孔分析盤于室溫下在暗室中培育0.5至6小時。注意不可連續(xù)培育超過6小時。在即將測定螢光反應(yīng)前，藉由FLIPR儀器自動添加100μl含辣椒素的KRH緩沖液(其濃度如上述測定所得的IC50濃度的2倍)至96孔分析盤的各孔中，使最終試樣體積為200μl，且最終辣椒素濃度等于IC50。在分析孔中的試驗化合物的最終濃度介于1μM至5μM之間。典型地，細(xì)胞暴露于一辣椒素的IC50將顯現(xiàn)出約10,000相對螢光單位的螢光反應(yīng)。相對于對應(yīng)的對照組，辣椒素受體的拮抗劑使此反應(yīng)下降至少約20％，較佳為至少約50％，與最佳為至少80％。提供下降50％的拮抗劑所需濃度為該拮抗劑的IC50，且較佳低于1微摩爾濃度、100納摩爾濃度、10納摩爾濃度或1納摩爾濃度。
化合物作用為辣椒素受體促效劑的能力，為采用上述方法，在辣椒素、RTX或其它辣椒素受體促效劑不存在下，藉由測定表現(xiàn)辣椒素受體的細(xì)胞的螢光反應(yīng)來測定。使細(xì)胞顯現(xiàn)出高于背景值的螢光的化合物即為辣椒素受體促效劑。某些較佳的本發(fā)明化合物為基本上無促效劑活性的拮抗劑，其藉由如上述分析法中，于低于4nM的化合物濃度，更佳為低于10μM的濃度，及最佳為低于或等于100μM的濃度下，沒有可檢測的促效劑活性所證實。
實例7微粒體的體外半衰期此實例為說明采用代表性肝微粒體半衰期分析來評估化合物半衰期值(t1/2值)。
叢聚的人類肝微粒體是由XenoTech LLC，3800Cambridge St.，Kansas City，Kansas 66103(目錄編號H0610)所獲得。該肝微粒體亦可得自體外技術(shù)(Baltimore，MD)或組織轉(zhuǎn)形技術(shù)(Tissue TransformationTechnologies)(Edison，NJ)。制備6個試驗反應(yīng)，分別含25μl微粒體、5μl的100μM試驗化合物溶液，與399μl的0.1M磷酸鹽緩沖液(19mL0.1M NaH2PO4、81mL 0.1M Na2HPO4，以H3PO4調(diào)至pH7.4)。制備第7個反應(yīng)作為陽性對照組，其中包含25μl微粒體、399μl的0.1M磷酸鹽緩沖液與5μl的100-已知代謝性質(zhì)的化合物溶液(例如DIAZEPAM或CLOZAPINE)。反應(yīng)是于39℃下預(yù)培養(yǎng)10分鐘。
輔因子混合物(CoFactor Mixture)的制法是將16.2mg NADP與45.4mg葡萄糖-6-磷酸鹽(Gluose-6-phosphate)稀釋于4mL的100mMMgCl2中。葡萄糖-6-磷酸鹽脫氫(Gluose-6-phosphate dehydrogenase)溶液是取214.3μl葡萄糖-6-磷酸鹽脫氫懸浮液(Roche MolecularBiochemicals，Indianapolis，IN)于1285.7μl蒸餾水中稀釋制備而成。添加71μl起始反應(yīng)混合物(3mL輔因子混合物；1.2mL葡萄糖-6-磷酸鹽脫氫溶液)至6個試驗反應(yīng)中的5個以及陽性對照組中。添加71μl的100mM MgCl2至第6個試驗反應(yīng)中，作為陰性對照組。在各時間點(0、1、3、5、與10分鐘)，將75μl的各反應(yīng)混合物滴加至含有75μl冰冷乙的96孔深孔分析盤的孔中。將樣本渦轉(zhuǎn)混合，于3500rpm下離心10分鐘(Sorval T 6000D離心機(jī)，H1000B轉(zhuǎn)子)。自各反應(yīng)中取出75μl上清液移至96孔分析盤的孔中，其各孔含有150μl的0.5μM具有已知其LCMS圖形(內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn))的化合物溶液。各樣本進(jìn)行LCMS分析，以AUC測定未代謝試驗化合物的含量，畫出化合物濃度對時間的關(guān)系圖，外插得到試驗化合物的t1/2值。
本發(fā)明的較佳化合物于人類肝微粒體體外顯現(xiàn)出大于10分鐘至小于4小時的t1/2值，較佳為30分鐘至1小時之間。
實例8MDCK毒性分析此實例為說明使用Madin Darby犬腎臟(MDCK)細(xì)胞的細(xì)胞毒性分析評估化合物的毒性。
在透明底板的96孔分析盤(PACKARD，Meriden，CT)的各孔中添加1μl試驗化合物，以得到分析法中化合物終濃度為10微摩爾濃度、100微摩爾濃度或200微摩爾濃度。對照組孔中則添加沒有試驗化合物的溶劑。
取MDCK細(xì)胞，ATCC no.CCL-34(美國菌種培養(yǎng)收集處(American Type Culture Collection，Manassas，VA))，依ATCC生產(chǎn)資料頁的指示，維持在無菌條件下。取融合的MDCK細(xì)胞經(jīng)胰蛋白處理，收集后，以溫?zé)?37℃)培養(yǎng)液(VITACELL伊格氏最低必需培養(yǎng)液(Minimum Essential Medium Eagle)、ATCC目錄#30-2003)稀釋至濃度為0.1×106個細(xì)胞/ml。將100μL稀釋的細(xì)胞加至各孔中，除了5個標(biāo)準(zhǔn)曲線對照組的分析孔中含有不具細(xì)胞的100μl溫?zé)崤囵B(yǎng)液。再將該分析盤于37℃下，95％O2、5％CO2中，恒定振蕩培育2小時。培育后，于各孔中加入50μL哺乳動物細(xì)胞溶胞液，孔上加蓋PACKARDTOPSEAL貼紙，將分析盤于約700rpm，在合適振蕩器上振蕩2分鐘。
相較于未處理的細(xì)胞，造成毒性的化合物將會降低ATP產(chǎn)生。PACKARD，(Meriden，CT)ATP-LITE-M冷光ATP檢測套組(產(chǎn)品編號6016941)通常是依據(jù)制造商的指示使用，以測量已處理及未處理的MDCK細(xì)胞中的ATP產(chǎn)量。使PACKARD ATP LITE-M試劑平衡至室溫。一旦平衡后，即取凍干的受質(zhì)溶液于5.5mL受質(zhì)緩沖液(來自套組)中再組成。凍干的ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液于去離子水中再組成，得到10mM母液。關(guān)于5個對照組孔，則分別添加10μL序列稀釋的PACKARD標(biāo)準(zhǔn)物至各標(biāo)準(zhǔn)曲線對照組孔中，使各連續(xù)孔的最終濃度為200nM、100nM、50nM、25nM與12.5nM。將PACKARD受質(zhì)溶液(50μL)添加至所有孔中，然后加蓋，將分析盤于約700rpm，在合適振蕩器上振蕩2分鐘。將白色PACKARD貼紙粘在各分析盤底部，并以金屬箔包裹分析板使試樣于黑暗中10分鐘。接著于22℃下使用冷光計數(shù)器(例如PACKARD TOPCOUNT微分析板閃爍與冷光計數(shù)器或TECANSPECTRAFLUOR PLUS)量測冷光，并由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算ATP含量。比較未處理細(xì)胞與經(jīng)試驗化合物處理的細(xì)胞中的ATP含量。以10μM較佳試驗化合物處理的細(xì)胞中的ATP含量為未處理細(xì)胞的至少80％，較佳為至少90％。當(dāng)試驗化合物使用100μM濃度時，以較佳試驗化合物處理的細(xì)胞中檢測的ATP含量為未處理細(xì)胞的至少50％，較佳為至少80％。
實例9背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分析法此實例為說明用于評估化合物的VR1拮抗劑活性的代表性背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分析。
DRG是自新生老鼠切下，使用標(biāo)準(zhǔn)方法(Aguayo與White(1992)Brain Research 57061-67)分離及培養(yǎng)。經(jīng)過48小時培育后，洗滌細(xì)胞一次，并以鈣敏感性染料Fluo 4AM(2.5至10μg/ml；TefLabs，Austin，TX)培育30至60分鐘。然后再洗滌細(xì)胞一次，并添加不同濃度化合物至細(xì)胞中。添加辣椒素于細(xì)胞中導(dǎo)致細(xì)胞外鈣含量隨著VR1而增加，該鈣含量是以螢光計監(jiān)測Fluo-4螢光的變化。收集60至180秒的資料，以決定螢光訊號的最大值。然后以螢光訊號做為化合物濃度的函數(shù)來作圖，以判別達(dá)到抑制50％辣椒素活化反應(yīng)所需的濃度，或IC50。辣椒素受體拮抗劑的較佳的IC50為低于1微摩爾濃度、100納摩爾濃度、10納摩爾濃度或1納摩爾濃度。
實例10用于測定疼痛緩解的動物模式此實例為說明用于評估化合物所提供的疼痛緩解程度的代表性方法。
A.疼痛緩解試驗下列方法是用于評估疼痛緩解。
機(jī)械性異常疼痛基本上評估機(jī)械性異常疼痛(對無害刺激產(chǎn)生的異常反應(yīng))是依Chaplan等人的(1994)J.Neurosci.Methods 5355-63及Tal與Eliav的(1998)Pain 64(3)511至518所述。取一系列不同剛度的凡弗瑞(vonFrey)絲線(典型為一系列8至14種絲線)施加在后腳足底表面上，其力量恰足使絲線彎曲。絲線保持此位置不超過3秒或直到大鼠出現(xiàn)陽性異常疼痛反應(yīng)為止。陽性異常疼痛反應(yīng)是包括舉起處理的后腳，立即舔或搖動腳部。使用狄克森上下分析法(Dixon up-down method)決定各絲線的施加順序與頻率。以此系列中的中等絲線開始試驗，隨后依向上或向下順序連續(xù)施用，分別依開始時所使用絲線是否出現(xiàn)陰性或陽性反應(yīng)而定。
若接受此等化合物處理的大鼠相較于未處理對照組或媒劑處理組大鼠需要使用較高剛度的凡弗瑞(von Frey)絲線方可引起陽性異常疼痛反應(yīng)時，表示該化合物可有效逆轉(zhuǎn)或預(yù)防類似機(jī)械性異常疼痛的癥狀?；蛘撸虼送?，可在投與化合物之前及之后測試動物的慢性疼痛。此等分析法中，相較于處理前誘發(fā)反應(yīng)時所需絲線、或未經(jīng)處理或經(jīng)媒劑處理且亦具慢性疼痛的動物所需絲線，有效化合物可使處理后的誘發(fā)反應(yīng)所需絲線的剛度提高。試驗化合物是于疼痛發(fā)作之前或之后投藥。當(dāng)試驗化合物在疼痛發(fā)作之后投藥時，則在投藥后10分鐘至3小時進(jìn)行試驗。
機(jī)械性痛覺過敏基本上評估機(jī)械性痛覺過敏(對疼痛刺激的反應(yīng)過度)是依Koch等人的(1996)Analgesia 2(3)157至164所述。大鼠置于有溫?zé)岫嗫捉饘俚匕宓膫€別籠內(nèi)。在任一只后腳足底表面上溫和針刺后，測定后腳抽回的時間期(亦即動物將其后腳放回地板上之前保持的時間)。
若化合物使后腳抽回的時間期縮短達(dá)統(tǒng)計顯著性時，則該化合物可降低機(jī)械性痛覺過敏。試驗化合物可于疼痛發(fā)作之前或之后投藥。當(dāng)試驗化合物在疼痛發(fā)作之后投藥時，則在投藥后10分鐘至3小時進(jìn)行試驗。
熱痛覺過敏基本上評估熱痛覺過敏(對有害熱刺激的反應(yīng)過度)是依Hargreaves等人的(1988)Pain.32(1)77至88所述。簡言之，在動物任一只后腳的足底表面施加恒定的輻射熱源。抽回后腳的時間(亦即動物移動后腳之前的加熱時間期)，或稱為熱閾值或潛伏期，即可決定動物后腳對熱的敏感性。
若化合物使后腳抽回的時間期增加達(dá)統(tǒng)計顯著性時(亦即出現(xiàn)反應(yīng)的熱閾值或潛伏期加長)，則該化合物可降低熱痛覺過敏。試驗化合物是于疼痛發(fā)作之前或之后投藥。當(dāng)試驗化合物在疼痛發(fā)作之后投藥時，則在投藥后10分鐘至3小時進(jìn)行試驗。
B.疼痛模式可采用下述任一種方法誘發(fā)疼痛，以測定化合物的止痛效力。一般而言，采用雄性SD大鼠及下述至少一種模式時，本文所提供的化合物是藉由上述至少一種試驗方法導(dǎo)致疼痛于統(tǒng)計上顯著降低。
急性發(fā)炎疼痛模式急性發(fā)炎疼痛基本上是依Field等人的(1997)Br.J.Pharmacol.121(8)1513至1522中的角叉菜膠(carrageenan)模式所誘發(fā)。取100至200μl的1至2％角叉菜膠溶液注射大鼠后腳中。注射后3至4小時，依上述方法測定動物對熱及機(jī)械性刺激的敏感性。在試驗前或注射角叉菜膠之前，對動物投與試驗化合物(0.01至50mg/kg)?；衔锟赏高^口服或任何非口服、或局部方式投藥至腳部。在此模式中解除疼痛的化合物可使機(jī)械性異常疼痛與/或熱痛覺過敏在統(tǒng)計上顯著降低。
慢性發(fā)炎疼痛模式慢性發(fā)炎疼痛是使用下述其中一種方法所誘發(fā)1.基本上是依Bertorelli等人的(1999)Br.J.Pharmacol.128(6)1252至1258，及Stein等人的(1998)Pharmacol.Biochem.Behav.31(2)455至451所述，取200μl完全弗洛伊德氏輔劑(Complete Freund′s Adjuvant)(0.1mg熱殺死并干燥的結(jié)核菌(M.Tuberculosis))注射至大鼠后腳中100μl注入足背，100μl注入足底表面。
2.基本上是依Abbadie等人的(1994)J Neurosci.14(10)5865至5871所述，在大鼠的脛骨-跗骨關(guān)節(jié)上注射150μl CFA(1.5mg)。
任一方法中，于即將注射CFA之前，先獲得各試驗動物后腳對機(jī)械及熱刺激的個別敏感度底線。
注射CFA后，依上述測試大鼠的熱痛覺過敏、機(jī)械性異常疼痛與機(jī)械性痛覺過敏。為了確使其發(fā)展出癥狀，在注射CFA后5、6與7天時才開始進(jìn)行大鼠試驗。第7天時，以試驗化合物、嗎啡或媒劑處理動物。以口服劑量為1至5mg/kg的嗎啡作為合適的陽性對照組。典型采用的試驗化合物劑量為0.01至50mg/kg。化合物可在試驗前呈單一劑量投藥，或在試驗前每天投藥1、2或3次，進(jìn)行數(shù)天。藥物可以口服或任何非口服、或局部方式投藥給動物。
結(jié)果以百分比最大值可能效力(Percent Maximum PotentialEfficacy，MPE)表示。0％MPE的定義為媒劑的止痛效力，100％MPE的定義為動物恢復(fù)注射CFA前的底線敏感度。在此模式中解除疼痛的化合物所得到的MPE為至少30％。
慢性神經(jīng)病變性疼痛模式慢性神經(jīng)病變性疼痛的誘發(fā)基本上是依Bennett與Xie的(1988)Pain 3387-107所述，采用慢性收縮傷害(CCI)處理大鼠坐骨神經(jīng)。麻醉大鼠(例如經(jīng)腹膜內(nèi)使用劑量50至65mg/kg的戊巴比妥及依需要增加其它劑量)。將各后腳側(cè)面刮干凈及消毒。采用無菌技術(shù)，切開后腳側(cè)面中股。將股二頭肌切成鈍端，曝露出坐骨神經(jīng)。在每只動物的其中一只后腳上，依約1至2mm的間隔，將四條結(jié)扎線松弛地結(jié)扎于坐骨神經(jīng)周圍。另一只腳的坐骨神經(jīng)則沒有結(jié)扎且不處理。隨后蓋上肌肉，使用傷口夾或縫合線縫合皮膚。依上述分析大鼠的機(jī)械性異常疼痛、機(jī)械性痛覺過敏與熱痛覺過敏。
當(dāng)化合物在此模式中，在即將試驗前以單一劑量投藥，或在試驗前每天投藥1、2或3次，進(jìn)行數(shù)天(0.01至50mg/kg，口服、非口服或局部投藥)時，該化合物可在統(tǒng)計上顯著降低機(jī)械性異常疼痛、機(jī)械性痛覺過敏與/或熱痛覺過敏。
權(quán)利要求
1.一種如下式的化合物 或其醫(yī)藥上可接受的鹽，式中A2、V、X、W、Y與Z各自獨立地為N或CR1，限制條件為V與X中至少一個為N；A3為N或CR9；或者(i)A4連接至A5以形成稠合5-至7-員碳環(huán)或雜環(huán)，該碳環(huán)或雜環(huán)各經(jīng)0至6個獨立地選自R8的取代基取代；及A1為N或CR1；標(biāo)示為 的基團(tuán)不是被C1-C6烷磺?；〈?或(ii)A1連接至A5以形成稠合5-至7-員碳環(huán)或雜環(huán)，該碳環(huán)或雜環(huán)經(jīng)0至6個獨立地選自R8的取代基取代，及A4為N或CR9；R1于每次出現(xiàn)時，獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、-COOH、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基，或者單-或二-(C1-C6烷基)氨基；R8于每次出現(xiàn)時，獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、氧代基、-COOH、C1-C6烷基、C1-C6烯基、C1-C6炔基、C1-C6烷基醚、C1-C6羥基烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6氨基烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、C1-C6烷?；?、單-或二-(C1-C6烷基)氨基(C0-C6烷基)、(5-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C6烷基、C1-C6烷基磺酰基，或者單-或二-(C1-C6烷基)磺酰胺基；R9于每次出現(xiàn)時，獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、-COOH、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷磺酰基、或者單-或二-(C1-C6烷基)磺酰胺基；U為N或CR2，限制條件為若V與X皆為N，則U為CR2；R2為(i)氫、鹵素、氰基或-COOH；或(ii)式-Rc-M-A-Ry的基團(tuán)，其中Rc為C0-C3亞烷基或連接至Ry或Rz以形成4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，該碳環(huán)或雜環(huán)經(jīng)0至2個獨立地選自Rb的取代基取代；M為不存在、單一共價鍵、O、S、SO、SO2、C(＝O)、OC(＝O)、C(＝O)O、O-C(＝O)O、C(＝O)N(Rz)、OC(＝O)N(Rz)、N(Rz)C(＝O)、N(Rz)SO2、SO2N(Rz)或N(Rz)；A為不存在、單一共價鍵或經(jīng)0至3個取代基取代的C1-C8亞烷基，該取代基獨立地選自Rb-；及Ry與Rz若存在時，則(a)獨立地為氫、C1-C8烷基、C2-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C2-C8烯基、4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，或連接至Rc以形成4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，其中Ry與Rz各獨立地經(jīng)0至6個取代基取代，該取代基獨立地選自Rb；或(b)連接以形成4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，該碳環(huán)或雜環(huán)經(jīng)0至6個獨立地選自Rb的取代基取代；Ar選自5-至10-員芳族碳環(huán)或雜環(huán)，其各經(jīng)0至3個獨立地選自R1的取代基取代，限制條件為Ar不為噻吩；及Rb于每次出現(xiàn)時，獨立地選自(i)羥基、鹵素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、氧代基或-COOH；或(ii)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷?；2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷酰基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺?；?、或者(4-至7-員雜環(huán))C0-C8烷基；其中(ii)中的每一個各經(jīng)0至3個獨立地選自羥基、鹵素、氨基或氰基的取代基取代。
2.一種如下式的化合物 或其醫(yī)藥上可接受的鹽，式中A1、A2、V、X、W、Y與Z各自獨立地為N或CR1，限制條件為V與X中至少一個為N；A3為N或CR9；U為N或CR2，限制條件為若V與X皆為N，則U為CR2； 為各經(jīng)0至6個取代基取代的5-至7-員芳族或部分飽和碳環(huán)或雜環(huán)，所述取代基獨立地選自R8，限制條件為 不為經(jīng)C1-C6烷基磺?；〈?R1于每次出現(xiàn)時，獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、-COOH、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基，或者單-或二-(C1-C6烷基)氨基；R2為(i)氫、鹵素、氰基或-COOH；或(ii)如式-Rc-M-A-Ry的基團(tuán)，其中Rc為C0-C3亞烷基或連接至Ry或Rz以形成4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，該碳環(huán)或雜環(huán)經(jīng)0至2個獨立地選自Rb的取代基取代；M為不存在、單一共價鍵、O、S、SO、SO2、C(＝O)、OC(＝O)、C(＝O)O、O-C(＝O)O、C(＝O)N(Rz)、OC(＝O)N(Rz)、N(Rz)C(＝O)、N(Rz)SO2、SO2N(Rz)或N(Rz)；A為不存在、單一共價鍵或經(jīng)0至3個取代基取代的C1-C8亞烷基，該取代基獨立地選自Rb；及Ry與Rz若存在時，則(a)獨立地為氫、C1-C8烷基、C2-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C2-C8烯基、4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，或連接至Rc以形成4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，其中Ry與Rz各獨立地經(jīng)0至6個取代基取代，該取代基獨立地選自Rb；或(b)連接以形成4-至10-員碳環(huán)或雜環(huán)，該碳環(huán)或雜環(huán)經(jīng)0至6個獨立地選自Rb的取代基取代；R8于每次出現(xiàn)時，獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、氧代基、-COOH、C1-C6烷基、C1-C6烯基、C1-C6炔基、C1-C6烷基醚、C1-C6羥基烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6氨基烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、C1-C6烷酰基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基C0-C6烷基、(5-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C6烷基、C1-C6烷基磺?；蛘邌?或二-(C1-C6烷基)磺酰胺基；R9于每次出現(xiàn)時，獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、氨基、硝基、-COOH、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷磺?；?、或者單-或二-(C1-C6烷基)磺酰胺基；Ar選自苯基或6-元芳族雜環(huán)，其各經(jīng)0至3個獨立地選自R1的取代基取代；及Rb于每次出現(xiàn)時，獨立地選自(i)羥基、鹵素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、氧代基或-COOH；或者(ii)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷?；?、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷?；趸?、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺?；?、(4-至7-員雜環(huán))C0-C8烷基；其中(ii)的每一個各經(jīng)0至3個獨立地選自羥基、鹵素、氨基或氰基的取代基取代。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式 其中Ar為苯基或6-員芳族雜環(huán)，其各經(jīng)0至3個獨立地選自R1的取代基取代；及B1、B2、B3與B4獨立地選自C(R8)、C(R8)(R-8)、S、SO、SO2、N、N(R8)或O。
4.如權(quán)利要求3所述的化合物或鹽，其中B1為C(CH3)2或SO2；B2為C(R8)或N(R8)；及B3與B4獨立地為C(R8)、C(R8)(R8)或N(R8)。
5.如權(quán)利要求4所述的化合物或鹽，其中B1為C(CH3)2；B2與B3為C(R8)；及B4為NH或N-CH3。
6.如權(quán)利要求3所述的化合物或鹽，其中B1為O；B2與B3為C(R8)；及B4為NH或N-CH3。
7.如權(quán)利要求3所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式 其中R代表獨立地選自鹵素、羥基、氧代基、氰基、氨基、C1-C6烷基、C1-C6烷基醚、C1-C6羥基烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6烷?；?至5個取代基。
8.如權(quán)利要求7所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式
9.如權(quán)利要求7所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式 其中各R13獨立地選自氫、鹵素、C1-C4烷基或C1-C4鹵烷基。
10.如權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式 其中Ar為苯基或6-員芳族雜環(huán)，其各經(jīng)0至3個獨立地選自R1的取代基取代；及B1、B2、B3與B4獨立地選自C(R8)、C(R8)(R-8)、S、SO、SO2、N、N(R8)或O。
11.如權(quán)利要求10所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式 其中R代表獨立地選自鹵素、羥基、氧代基、氰基、氨基、C1-C6烷基、C1-C6烷基醚、C1-C6羥基烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6烷酰基的0至5個取代基。
12.如權(quán)利要求2所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式 其中Ar為苯基或6-員芳族雜環(huán)，其各經(jīng)0至3個獨立地選自R1的取代基取代；及B1、B2、B3與B4獨立地選自C(R8)、C(R8)(R-8)、S、SO、SO2、N、N(R8)或O。
13.如權(quán)利要求12所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式 其中各R13獨立地選自氫或C1-C4烷基。
14.如權(quán)利要求2所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式 其中Ar為苯基或6-員芳族雜環(huán)，其各經(jīng)0至3個獨立地選自R1的取代基取代；及B1、B2、B3、B4與B5獨立地選自C(R8)、C(R8)(R-8)、S、SO、SO2、N、N(R8)或O。
15.如權(quán)利要求1至14中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中所述Ar為非必要地經(jīng)一個選自鹵素、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6鹵烷氧基取代的苯基或吡啶基。
16.如權(quán)利要求15所述的化合物或鹽，其中所述Ar為吡啶-2-基、3-甲基-吡啶-2-基、3-三氟甲基-吡啶-2-基或3-鹵代-吡啶-2-基。
17.如權(quán)利要求1至14中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中所述U為CR2。
18.如權(quán)利要求17所述的化合物或鹽，其中R2為(i)氫或鹵素；或(ii)如下式的基團(tuán) 其中R為-O-R7或 R7選自(i)氫；(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C2-C8烷?；?、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、(C6-C10芳基)C0-C8烷基或(5-至10-員雜環(huán))C0-C8烷基，其各經(jīng)0至9個獨立地選自Rb的取代基取代；或(iii)連接至R5或R6以形成4-至10-員雜環(huán)基的基團(tuán)，該雜環(huán)基經(jīng)0至6個獨立地選自Rb的取代基取代；R3與R4為(i)各自獨立地選自(a)氫；(b)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C1-C8烷氧基、C3-C8烷酮、C2-C8烷?；?、C1-C8烷氧基羰基、C2-C8烷基醚、(C6-C10芳基)C0-C8烷基、(5-至10-員雜環(huán))C0-C8烷基或C1-C8烷基磺?；涓鹘?jīng)0至9個獨立地選自Rb的取代基取代；或(c)連接至R5或R6以形成4-至10-員雜環(huán)基的基團(tuán)，該雜環(huán)基經(jīng)0至6個獨立地選自Rb的取代基取代；或(ii)與其鍵結(jié)的N連接以形成4-至10-員雜環(huán)基，該雜環(huán)基經(jīng)0至6個獨立地選自Rb、C1-C8烷?；?、(4-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C4烷基、或者單-或二-(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷基的取代基取代；及R5與R6于每次出現(xiàn)時，獨立地為(i)各自獨立地選自(a)氫或羥基；(b)經(jīng)0、1或2個獨立地選自Rb的取代基取代的C1-C8烷基；及(c)連接至R3或R7以形成5-至10-員雜環(huán)基的基團(tuán)，該雜環(huán)基經(jīng)0至6個獨立地選自Rb的取代基取代；(ii)共同形成酮基-(C＝O)-；或(iii)連接以形成3-至7-員碳環(huán)或雜環(huán)基，所述的每個碳環(huán)或雜環(huán)基經(jīng)0至4個選自Rb的取代基取代；及n是為1、2或3。
19.如權(quán)利要求18所述的化合物或鹽，其中R2為(i)氫或鹵素；或(ii)C1-C6烷基、-(CH2)nNH2、-(CH2)nNH(C1-C8烷基)、-(CH2)nN(C1-C8烷基)2、-(CH2)n(5-至8-員雜環(huán)烷基)、-(CH2)nOH或-(CH2)nO(C1-C6烷基)，其中每一個n為0、1、2或3，其中每一個經(jīng)0至4個獨立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基或C1-C6鹵烷基的取代基取代。
20.如權(quán)利要求19所述的化合物或鹽，其中R2為C1-C6烷基、C2-C6烷基醚、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、N-嗎啉基、苯甲基氧甲基、哌嗪基、哌啶基、苯基或吡啶基，其各經(jīng)0至4個獨立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基或C1-C6鹵烷基的取代基取代。
21.如權(quán)利要求1至14中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中，X為N。
22.如權(quán)利要求1至14中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中，X與V皆為N。
23.如權(quán)利要求1至14中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中，X為CH且V為N。
24.如權(quán)利要求1或2的化合物或鹽，其中，W為CH。
25.如權(quán)利要求3至14或24中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中，Y為N且Z為CH。
26.如權(quán)利要求25所述的化合物或鹽，其中，Y與Z皆為CH。
27.如權(quán)利要求26所述的化合物或鹽，其中Z為N且Y為CH。
28.如權(quán)利要求2所述的化合物或鹽，其中所述化合物具有下式 其中X、Y、Z與A3獨立地為N或CH；R10為氫、鹵素、甲基、單-、雙-或三-氟甲基或氰基；各R13獨立地為氫或甲基；B3與B4其中之一為CH(R8)，且B3與B4的另一個為N(R8)；及R2為(i)氫或鹵素；或(ii)C1-C6烷基、-(CH2)nNH2、-(CH2)nN(H)C1-C8烷基、-(CH2)nN(C1-C8烷基)2、-(CH2)n(4-至8-員雜環(huán)烷基)、-(CH2)nOH、-(CH2)nOC1-C6烷基、或-(CH2)nO-苯甲基，其各經(jīng)0至4個獨立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基、或C1-C6鹵烷基的取代基取代，其中各n為0、1、2或3。
29.如權(quán)利要求2所述的化合物或鹽，其中各R8獨立地為氫、C1-C6烷基、C1-C6烷基醚、C1-C6羥基烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷?；?、單-或二-(C1-C6烷基)氨基C0-C6烷基、或(5-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C6烷基。
30.如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中所述化合物于辣椒素受體促效體外試驗中顯示為沒有可檢測的促效劑活性。
31.如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中所述化合物于辣椒素受體鈣離子移動試驗中，具有1微莫耳摩爾濃度或更小的EC50或IC50值。
32.如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中所述化合物于辣椒素受體鈣離子移動試驗中，具有100納摩爾濃度或更小的EC50或IC50值。
33.如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中該化合物于辣椒素受體鈣離子移動試驗中，具有10納摩爾濃度或更小的EC50或IC50值。
34.一種醫(yī)藥組合物，包括至少一種如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽，組合生理上可接受的載劑或賦形劑。
35.一種降低細(xì)胞性辣椒素受體鈣離子傳導(dǎo)的方法，包括以至少一種如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽接觸表現(xiàn)辣椒素受體的細(xì)胞，由此降低辣椒素受體的鈣離子傳導(dǎo)。
36.如權(quán)利要求35所述的方法，其中所述細(xì)胞于動物體內(nèi)接觸。
37.如權(quán)利要求36所述的方法，其中在接觸期間，所述化合物是存在于動物的體液中。
38.如權(quán)利要求37所述的方法，其中所述化合物是以1微摩爾濃度或更少的濃度存在于動物血液中。
39.如權(quán)利要求37所述的方法，其中所述動物為人類。
40.如權(quán)利要求37所述的方法，其中所述化合物以口服給藥。
41.一種抑制類香草醇配位體與辣椒素受體在體外結(jié)合的方法，該方法包括在足以檢測到抑制類香草醇配位體與辣椒素受體結(jié)合的條件與用量下，以至少一種如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽接觸辣椒素受體。
42.一種抑制類香草醇配位體與辣椒素受體在患者體內(nèi)結(jié)合的方法，該方法包括在足以檢測到抑制類香草醇配位體與表現(xiàn)選殖辣椒素受體的細(xì)胞在體外結(jié)合的用量下，以至少一種如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽接觸表現(xiàn)辣椒素受體的細(xì)胞，由此抑制患者的類香草醇配位體與辣椒素受體的結(jié)合。
43.如權(quán)利要求42所述的方法，其中所述化合物是以1微摩爾濃度或更少的濃度存在于患者血液中。
44.一種治療患者對辣椒素受體的調(diào)節(jié)作用易敏感的方法，該方法包括對患者給藥至少一種治療有效量的如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，由此舒緩患者的癥狀。
45.如權(quán)利要求44所述的方法，其中所述患者患有(i)暴露于辣椒素，(ii)暴露于熱所引起的燒傷或刺激，(iii)暴露于光所引起的燒傷或刺激，(iv)暴露于催淚瓦斯、空氣污染物或胡椒噴霧劑所引起的燒傷、支氣管阻塞或刺激，或(v)暴露于酸引起的燒傷或刺激。
46.如權(quán)利要求44所述的方法，其中所述化合物是以1微摩爾濃度或更少的濃度存在于患者血液中。
47.如權(quán)利要求44所述的方法，其中所述癥狀為氣喘或慢性梗塞性肺病。
48.一種治療患者疼痛的方法，包括對患有疼痛的患者給藥至少一種治療有效量的如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，由此緩解患者疼痛。
49.如權(quán)利要求48所述的方法，其中所述化合物是以1微摩爾濃度或更少的濃度存在于患者血液中。
50.如權(quán)利要求48所述的方法，其中所述患者患有神經(jīng)病理性疼痛。
51.如權(quán)利要求48所述的方法，其中所述疼痛為選自與下列癥狀相關(guān)的病痛乳房切除后疼痛綜合征、殘肢痛、幻覺肢體痛、口腔神經(jīng)痛、牙痛、帶狀疹后神經(jīng)痛、糖尿病神經(jīng)病變、反射性交感神經(jīng)失養(yǎng)癥、三叉神經(jīng)痛、骨關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、吉蘭-拜瑞癥候群歸-伯二氏綜合征、感覺異常性股痛、口腔灼熱綜合征、兩側(cè)性末稍神經(jīng)病變、灼熱痛、神經(jīng)炎、神經(jīng)細(xì)胞炎、神經(jīng)痛、與AIDS相關(guān)的神經(jīng)病變、與MS相關(guān)的神經(jīng)病變、及與脊椎神經(jīng)受傷相關(guān)的疼痛、與手術(shù)相關(guān)的疼痛、肌肉與骨胳疼痛、背痛、頭痛、偏頭痛、心絞痛、產(chǎn)痛、痣痛、消化不良痛、夏科氏疼痛癥、腸氣疼痛、經(jīng)痛、癌癥、毒液接觸、腸激躁癥、炎性腸疾和/或創(chuàng)傷。
52.如權(quán)利要求44所述的方法，其中所述患者為人類。
53.一種治療患者搔癢的方法，包括對患者給藥治療有效量的如權(quán)利要求1至14、28或29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，因此緩解患者搔癢。
54.一種治療患者咳嗽或打嗝的方法，包括對患者給藥治療有效量的如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，因此緩解患者咳嗽或打嗝。
55.一種促進(jìn)肥胖患者減重的方法，包括對患者給藥治療有效量的如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，因此促進(jìn)肥胖患者減重。
56.如權(quán)利要求1至14、28或29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中所述化合物或鹽經(jīng)放射性標(biāo)記。
57.一種確定試樣中是否有辣椒素受體存在的方法，包括下列步驟(a)在允許化合物與辣椒素受體結(jié)合的情況下，以如權(quán)利要求1至29中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽接觸試樣；及(b)測定所述化合物與辣椒素受體結(jié)合的程度，由此確定試樣中是否有辣椒素受體存在。
58.如權(quán)利要求57所述的方法，其中所述化合物為經(jīng)放射性標(biāo)記的化合物，且其中所述檢測步驟包含下列步驟(i)從結(jié)合的化合物中分離出未結(jié)合的化合物；及(ii)檢測試樣中是否有辣椒素受體存在。
59.一種經(jīng)包裝的醫(yī)藥制劑，包括(a)裝于容器中的如權(quán)利要求34所述的醫(yī)藥組合物；及(b)使用該組合物治療疼痛的說明書。
60.一種經(jīng)包裝的醫(yī)藥制劑，包括(a)裝于容器中的如權(quán)利要求34所述的醫(yī)藥組合物；及(b)使用該組合物治療咳嗽或打嗝的說明書。
61.一種經(jīng)包裝的醫(yī)藥制劑，包括(a)裝于容器中的如權(quán)利要求34所述的醫(yī)藥組合物；及(b)使用該組合物治療肥胖的說明書。
62.7-[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基]-2，4，4-三甲基-4H-異喹啉-1，3-二酮或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
63.(2，3-二氫-苯并[1，4]二噁嗪-6-基)-[2-異丁氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
64.(2-異丁氧基甲基-7-吡啶-2-基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-(1，3，3-三甲基-2，3-二氫-1H-吲哚-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
65.(2-異丁氧基甲基-7-吡啶-2-基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
66.(2-異丁氧基甲基-7-吡啶-2-基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
67.(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-(2-異丁氧基甲基-7-吡啶-2-基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
68.(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-[2-乙氧基甲基-7-(3-甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
69.(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-[2-乙氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
70.(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
71.(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-[7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
72.[2-苯甲基氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
73.[2-苯甲基氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
74.[2-苯甲基氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-喹唑啉-4-基]-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
75.[2-乙氧基甲基-7-(3-甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
76.[2-乙氧基甲基-7-(3-甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
77.[2-乙氧基甲基-7-(3-甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(1，3，3-三甲基-2，3-二氫-1H-吲哚-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
78.[2-異丁氧基甲基-7-(3-甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2-甲基-苯并噁唑-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
79.[2-異丁氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
80.[2-異丁氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
81.[2-異丁氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(1，3，3-三甲基-2，3-二氫-1H-吲哚-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
82.[2-異丁氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2-甲基-苯并噁唑-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
83.[2-甲氧基甲基-7-(3-甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
84.[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-[1，8]萘啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
85.[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-，1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
86.[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
87.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
88.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-乙氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
89.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-乙氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
90.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-乙氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(1，3，3-三甲基-2，3-二氫-1H-吲哚-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
91.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-乙氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2，3-二氫-苯并[1，4]二噁嗪-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
92.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-乙氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2-甲基-苯并噁唑-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
93.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-異丁氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2，4，4-三甲基-1，2，3，4-四氫-異喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
94.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-異丁氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
95.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-異丁氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4-甲基-3，4-二氫-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
96.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-異丁氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2，3-二氫-苯并[1，4]二噁嗪-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
97.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-異丁氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(2-甲基-苯并噁唑-6-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
98.[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-甲氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基]-(4，4-二甲基-1，2，3，4-四氫-喹啉-7-基)-胺或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
99.1-[6-(2-異丁氧基甲基-7-吡啶-2-基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基)-3，3-二甲基-2，3-二氫-吲哚-1-基]-乙酮或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
100.1-{6-[2-異丁氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基]-3，3-二甲基-2，3-二氫-吲哚-1-基}-乙酮或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
101.1-{6-[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基]-3，3-二甲基-2，3-二氫-吲哚-1-基}-乙酮或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
102.1-{6-[7-(3-氯-吡啶-2-基)-2-乙氧基甲基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基]-3，3-二甲基-2，3-二氫-吲哚-1-基}-乙酮或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
103.7-[2-甲氧基甲基-7-(3-三氟甲基-吡啶-2-基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-基氨基]-4，4-二甲基-3，4-二氫-1H-喹啉-2-酮或其醫(yī)藥上可接受的鹽。
全文摘要
本發(fā)明提供經(jīng)取代的雙環(huán)喹唑啉－4－基胺衍生物。此等化合物為用于調(diào)節(jié)體內(nèi)或體外之特定受體活性的配位體，特別用于治療與人類、陪伴動物及家畜的病理受體活化作用相關(guān)的狀況。本發(fā)明亦提供使用此等化合物醫(yī)藥組合物及方法以治療此等病癥，及使用此等配位體供受體定位研究的方法。
文檔編號C07D401/00GK1878771SQ200480032983
公開日2006年12月13日 申請日期2004年9月9日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月9日
發(fā)明者R·巴克沙瓦特開拉姆, C·A·布盧姆, B·L·謝納爾 申請人:神經(jīng)能質(zhì)公司