本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種用于改善胰島素抵抗的保健食品。
背景技術(shù)：
隨著人們生活水平的提高和生活方式的改變，肥胖、糖尿病、高血壓、高脂血癥等代謝性疾病呈逐年上升趨勢，這些疾病常同時存在，有著共同的致病基礎(chǔ)，即胰島素抵抗。胰島素抵抗是由遺傳和環(huán)境因素導(dǎo)致的，表現(xiàn)為機體組織細(xì)胞對胰島素生理作用的反應(yīng)性降低，主要表現(xiàn)為脂肪、肝臟、肌肉等組織對葡萄糖的攝取障礙、糖代謝紊亂的慢性病理過程，導(dǎo)致代謝綜合癥疾病。探討胰島素抵抗的發(fā)生機制及防治方法一直是生物科學(xué)研究的熱點。用現(xiàn)代研究手段開發(fā)天然產(chǎn)物，開發(fā)有效成分源于食品和藥食同源中藥的保健食品，可輔助化學(xué)藥品使用減少藥物劑量，降低毒副作用；單獨服用適用于輕癥患者，可長期服用；對改善以上代謝性疾病患者癥狀，緩解患者痛苦具有重要的社會價值。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了一種改善胰島素抵抗的組合物，將芝麻素粉末、黃芪總苷粉末和灰樹花多糖粉末混合均勻，得到具有改善胰島素抵抗作用的組合物；其中芝麻素、黃芪總苷和灰樹花多糖的質(zhì)量比為1-2：1-2：1-2，優(yōu)選為1：1：1。
所述芝麻素粉末由芝麻粕中提取，其中的芝麻素含量大于50%；所述黃芪總苷粉末由黃芪中提取，其中的黃芪總苷含量大于50%；所述灰樹花多糖粉末由灰樹花子實體中提取，其中的灰樹花多糖含量大于50%。該組合物可以按公知的工藝加工成口服制劑，如顆粒劑、片劑、膠囊、軟膠囊等。
芝麻中含有油脂、蛋白質(zhì)、多糖、微量元素、維生素、芝麻素等，其中芝麻素是主要的活性成分。黃芪中含有皂苷、多糖、黃酮、氨基酸、酚類和微量元素等，其中皂苷和多糖為主要活性成分。灰樹花子實體中富含氨基酸、多糖以及微量元素等多種營養(yǎng)成份，其中的灰樹花多糖是主要的生物活性成分。
藥理試驗表明，本發(fā)明的芝麻素（SES）、黃芪總苷（AST）和灰樹花多糖（GFP）組合物具有降低胰島素抵抗動物模型血糖、血脂的作用，可協(xié)同增強生理活性，更好地提高各自的功能；毒理試驗表明，本發(fā)明的組合物應(yīng)用安全。本發(fā)明的組合物可用于制備輔助改善胰島素抵抗的保健食品和藥物，可改善代謝綜合癥患者高血糖所致的臨床癥狀。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步地描述。
實施例1：
一種改善胰島素抵抗的組合物由芝麻素粉末、黃芪總苷粉末和灰樹花多糖粉末混合均勻組成，其中芝麻素、黃芪總苷和灰樹花多糖的質(zhì)量比為1：1：1。
芝麻素粉末提取工藝如下：將芝麻粕研磨成粉末，加入約2倍體積的正己烷進行攪拌脫脂，維時3h，過濾后再加入約2倍體積的正己烷進行第二次脫脂，維時3h，風(fēng)干。準(zhǔn)確稱取一定量粉末，加入料液比1：8.5（g/mL）93%的乙醇，在水浴溫度55℃下攪拌，提取時間2.5h，重復(fù)提取一次。提取液過濾，將濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸出部分乙醇(剩余體積<25 mL)，減壓濃縮，并于60℃真空干燥，稱重，得芝麻素粉末，并測定芝麻素的含量（mg/g）。本品性狀為：淺褐色粉末，無臭，無味，有吸濕性，溶于醇，不溶于水。
芝麻素含量測定：采用HPLC法進行測定。芝麻素的標(biāo)準(zhǔn)品溶液在20-100μg/mL之間，相應(yīng)峰面積與芝麻素質(zhì)量濃度有顯著的線性關(guān)系，制訂了標(biāo)準(zhǔn)曲線。用無水乙醇（色譜純）將芝麻素粉末溶解，過濾。在柱溫：室溫；流動相：甲醇-水（8：2，v/v）；流速0.8mL/min；進樣量：20μL；檢測波長290nm；分析時間：15min條件下測定本品中芝麻素含量。根據(jù)標(biāo)樣的保留時間進行定性，用外標(biāo)法計算芝麻素的含量。本品芝麻素含量為617.15mg/g。
芝麻素提取工藝和含量測定方法為公知公用的方法。
黃芪總苷粉末的制備工藝如下：黃芪藥材，切約0.5cm厚的飲片，加70%乙醇回流提取2次，第一次加10倍量，提取90min；第2次加8倍量，提取60min，合并70%乙醇提取液，過濾，濾液減壓濃縮蒸盡乙醇，微熱，加水至2000ml，放置12h，過濾，濾液用適量的D101大孔吸附樹脂，吸附過的濾液棄去，繼續(xù)用水沖洗吸附后的D101大孔吸附樹脂，至洗液檢不出還原糖為止，棄去水洗液，再用適量30%乙醇沖洗，棄去30%醇洗液，再用70%乙醇洗脫，至洗脫液檢不出黃芪甲苷為止，減壓濃縮70%乙醇洗脫液，并于60℃真空干燥，稱重，得黃芪總苷粉末，并測定黃芪總苷的含量（mg/g）。本品性狀為：棕褐色粉末，無臭，味微苦，有吸濕性，溶于醇和水。
黃芪總苷含量測定：采用分光光度法：測定波長為560nm，顯色劑選用香草醛-高氯酸發(fā)色體系，以黃芪甲苷為對照品，在50-250μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。取本品10mg，精密稱定，加水10mL，加熱使溶解，用水飽和正丁醇提取三次，每次20mL，合并正丁醇液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收正丁醇至干，殘渣加甲醇分次溶解，定量轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。精密吸取0.20mL置具塞試管中，于水浴上揮干溶劑，各精密加入5%香草醛冰醋酸溶液0.2mL和高氯酸0.8mL，密塞，搖勻，于70℃水浴中加熱20min，取出后立即用流水冷卻，加入冰醋酸溶液5.0mL，搖勻，在560nm波長處測定吸收度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中相當(dāng)于黃芪甲苷的量，求得黃芪總苷含量。黃芪總苷粉末中黃芪總苷含量為590.52mg/g。
黃芪總苷粉末的制備工藝和含量測定方法為公知公用的方法。
灰樹花多糖粉末的提取工藝如下：將灰樹花子實體研磨成粉末，加入約3倍體積的95%乙醇溶液進行攪拌脫脂，維時2h，抽濾，得沉淀物。準(zhǔn)確稱取一定量沉淀物，加入料液比1：10（g/ml）的蒸餾水，在120℃下高壓提取30min。離心，取上清液，加入1:1體積無水乙醇沉淀12h。離心，取沉淀，于60℃真空干燥，稱重，得灰樹花多糖粉末，并測定灰樹花多糖的含量（mg/g）。本品性狀為：淺褐色粉末，無臭，無味，有吸濕性，微溶于水，不溶于高濃度的乙醇、丙酮等有機溶劑。
灰樹花多糖含量測定：采用蒽酮-硫酸法進行測定。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在20~90μg·ml-1范圍內(nèi)吸光度值和葡聚糖含量呈良好的線性關(guān)系，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.0085X-0.0424 (R=0.9990)。取樣品溶液0.5mL，補水至1mL，于冰水浴中冷卻。加入蒽酮硫酸試劑4mL，搖勻。沸水浴中煮沸10min。再冰水浴中冷卻10min。以蒸餾水為空白對照，620nm處測定吸光度值?；覙浠ǘ嗵欠勰┲谢覙浠ǘ嗵呛繛?54.26mg/g。
灰樹花多糖粉末的提取工藝和含量測定方法為公知公用的方法。
顆粒劑的制備：按顆粒劑制備工藝制備顆粒劑。每袋含芝麻素+黃芪總苷+灰樹花多糖為40mg+40mg+40mg。
實施例2：
一種改善胰島素抵抗的組合物由芝麻素粉末、黃芪總苷粉末和灰樹花多糖粉末混合均勻組成，其中芝麻素、黃芪總苷和灰樹花多糖的質(zhì)量比為1：2：1。
芝麻素粉末、黃芪總苷粉末購于南京澤朗農(nóng)業(yè)科技有限公司。
灰樹花多糖粉末購于浙江慶元縣宏億農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司。片劑的制備，按片劑制備工藝制備片劑。每片含芝麻素+黃芪總苷+灰樹花多糖為15mg+30mg+15mg。
其它同實施例1。
實施例3：
一種改善胰島素抵抗的組合物由芝麻素粉末、黃芪總苷粉末和灰樹花多糖粉末混合均勻組成，其中芝麻素、黃芪總苷和灰樹花多糖的質(zhì)量比為2：2：1。
芝麻素粉末、黃芪總苷粉末購于南京澤朗農(nóng)業(yè)科技有限公司。
灰樹花多糖粉末購于浙江慶元縣宏億農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司。
膠囊的制備，按膠囊制備工藝制備膠囊。每粒含芝麻素+黃芪總苷+灰樹花多糖為24mg+24mg+12mg。
其它同實施例1。
實施例4：
軟膠囊的制備，按軟膠囊制備工藝制備軟膠囊。每粒含芝麻素+黃芪總苷+灰樹花多糖為20mg+20mg+20mg。
其它同實施例1。
每日口服劑量，以有效部位組合物計芝麻素+黃芪總苷+灰樹花多糖為240mg。用于改善胰島素抵抗癥狀，顆粒劑服用方法為每日2次，每次1袋，溫開水沖服；片劑服用方法為每日2次，每次2片；膠囊和軟膠囊服用方法為每日2次，每次2粒。3個月為一療程。
具體動物試驗情況如下：
實驗：對胰島素抵抗動物模型KKay小鼠的降血糖降血脂作用
KKay小鼠50只，體重范圍在40±2g，隨機分為5組：
模型組、芝麻素（SES，60mg·kg-1·d-1）、黃芪總苷（AST，60mg·kg-1·d-1）、灰樹花多糖（GFP，60mg·kg-1·d-1）、SES+GFP+AST（20+20+20 mg·kg-1·d-1，實施例1制備得到），每組10只，雌雄各半；另取10只C57小鼠為正常對照組（因C57為KKay的遺傳背景小鼠）。
每日灌胃給藥，每日2次，正常對照組和模型組灌胃等容積CMC-Na，連續(xù)給藥2周。分別于給藥前1天（d0）、給藥后4、8、12天，小鼠禁食4h后尾尖取血，用血糖儀測定血糖值。用試劑盒測定血脂（甘油三酯、總膽固醇、游離脂肪酸）和血清胰島素水平。試驗結(jié)果見表1，表2。
表1結(jié)果表明，于給藥第4、8、12天可使KKay小鼠空腹血糖明顯下降，說明本發(fā)明具有降低胰島素抵抗動物模型KKay小鼠空腹血糖的作用。表2結(jié)果表明，于給藥第12天可使KKay小鼠血脂水平和血清胰島素水平明顯下降，說明本發(fā)明具有降低胰島素抵抗動物模型KKay小鼠血脂水平和改善胰島素抵抗的作用。SES+AST+GFP三者組合明顯優(yōu)于單用，具有協(xié)同作用。
表1 對胰島素抵抗動物模型KKay小鼠的降血糖作用
表2 對胰島素抵抗動物模型KKay小鼠的降血脂和改善胰島素抵抗的作用
本發(fā)明經(jīng)急性毒性試驗結(jié)果表明，小鼠灌胃給SES+AST+GFP一日最大給藥量（MTD）為19.3g/kg，相當(dāng)于有效劑量120倍；動物未出現(xiàn)任何不良反應(yīng)。說明本發(fā)明產(chǎn)品安全，幾乎無毒副反應(yīng)。