專利名稱：廣譜抗腫瘤復合疫苗的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗腫瘤藥物，特別涉及一種廣譜型的抗腫瘤復合疫苗。
背景技術(shù)：
癌癥己成為人類的"第一殺手"。據(jù)美國紐約時報2009年報告，從1996 年到2005年，按人口和年齡矯正，心腦疾病死亡數(shù)下降60%以上，而癌癥死 亡數(shù)僅降低5%。
自1971年以來，全世界投入癌癥研究的總經(jīng)費，扣除通貨膨脹因素，大 約是2000億美元；癌癥研究領(lǐng)域的研究論文已經(jīng)達到156萬篇，但腫瘤死亡 率未明顯降低；追求知識本身成了終極目標，對PubMed在線數(shù)據(jù)庫的檢索表 明，有150855篇論文是以老鼠為實驗對象，但真正對癌癥治療有價值的論文 極少。
癌癥治療的主要困難是無法解決癌癥轉(zhuǎn)移?；熓悄壳肮J的主要的治療 癌癥轉(zhuǎn)移的手段。但真正對化療有效的癌癥只有7%，另有15%的患者應用化 療后，生存時間可能較預期的不用化療的生存期為長，但不是治愈，甚至不是 恢復生活質(zhì)量。有報導說，接受化療的人發(fā)生繼發(fā)性腫瘤的可能性增加18倍 (New England J Medicine 1996)。還有一份調(diào)查顯示，75%的腫瘤科醫(yī)生表示， 如果自己得癌癥，將不會接受化療(Ulrich Abel德國)。
新的化療藥，包括分子靶向藥物，沒有解決腫瘤轉(zhuǎn)移。兩位意大利藥理學 家對1995 2000年在歐洲上市的12種新藥，同相應的批準療法進行比較，沒 有發(fā)現(xiàn)這些新藥對患者生存率有任何實質(zhì)性優(yōu)越之處，生活質(zhì)量也沒有改善， 安全性也沒有改進，而這種藥物的價格卻大幅度上升，其中一種新藥比"舊藥" 貴350倍(Garattini, S and Bertele'V. BMJ 2002; 325:269 271)。
癌癥免疫愈來愈受到重視。美國著名癌癥專家Kattlove說"免疫療法可 能是唯一致癌于死地的方法。""令人振奮的是，我們看到(免疫療法)將成為抗癌之戰(zhàn)新武器。"研究低毒、廉價、高效和廣譜的癌癥疫苗是人們夢寐以 求的理想，是當前全世界的研究熱點。
早在幾千年以前，人們就發(fā)現(xiàn)細菌、真菌、病毒和原蟲感染后腫瘤可退縮，
這種現(xiàn)象實際上就是原始的腫瘤免疫治療。紐約紀念醫(yī)院外科醫(yī)生Willian Coley在100多年前對這種天然現(xiàn)象進行研究，開發(fā)了一種殺癌性細菌疫苗。 他觀察到，人工誘發(fā)的發(fā)熱對腫瘤退縮有決定性作用。Coley用2種細菌即化 膿性鏈球菌和沙雷靈桿菌制成疫苗。實驗研究發(fā)現(xiàn)后一種細菌能增加前一種細 菌的毒性。這種疫苗引起感染癥狀如炎癥、發(fā)熱和寒顫，但無急性感染發(fā)生。 這就是所謂"Coley毒素"?？偨Y(jié)896例患者的資料，他們的癌癥診斷均得到 病理證實，不能手術(shù)治療。接受Coley疫苗治療后，5年生存率34% 73%， 類似于未手術(shù)的肉瘤患者疫苗治療后的成績(13% 79%)。
有一份回顧性研究，使用癌癥流行病學終端結(jié)果的資料，評價了Coley方 案治療的患者的10年生存率，并與現(xiàn)代常規(guī)治療比較。這一研究雖然有標本 大小和分期的限制，但仍然發(fā)現(xiàn)，盡管花費數(shù)十億美元發(fā)展現(xiàn)代癌癥治療，但 接受現(xiàn)代常規(guī)治療的病人并不比100年以前就開始應用的Coley治療的病人有 更好的結(jié)局。如果我們花費同樣多的努力和基金研究Coley創(chuàng)立的治療，那么 今天癌癥治療會是一個什么樣的局面？
癌癥免疫治療的最早實例可以追溯到幾千年以前。EbersPapurus (公元前 1550年)曾記載，偉大的埃及醫(yī)生Imhotep(公元前2600年)即用切開腫瘤(腫 脹處)，敷上泥罨劑(poultice)，使之感染的方法進行治療。17和18世紀， 簡陋的癌癥免疫治療曾被廣泛應用并得到接受。例如，Tanchou在1844年曾發(fā) 表一篇癌癥專著，對怎樣實施免疫治療進行了闡述"已知(有些)淋巴結(jié)和 原發(fā)性新生物在合并感染過程中，常消失，不再復發(fā)?！凑者@種設(shè)想，大 量的觀察應該確立一種方案(化膿指數(shù))，即手術(shù)后讓身體不同部位甚至傷口 處保留感染。"作者列舉了其他醫(yī)生的許多病例，成功地確立了這種治療方案。
在18 19世紀，其他治療策略尚有應用腐敗性(細菌)敷料敷于潰瘍性 腫瘤上，使之感染，或誘發(fā)感染如丹毒、壞疽和梅毒。但在Coley發(fā)明用死菌 疫苗治療之前，這種用活菌誘發(fā)感染仍是一冒險的事。
許多學者研究了 Coley混合細菌疫苗引起腫瘤退縮的機制，希冀找出Coley疫苗的"活性成分"，探求這種疫苗導致腫瘤退縮的反應中宿主產(chǎn)生的因子。 細胞因子，如腫瘤壞死因子、白介素和干擾素被認為是起作用的可能因子。但 真正的機制不是想象得那樣一個或幾個因子起作用。任何對致病因子的免疫反 應總是復雜的，有大量細胞因子參與， 一種或一組激發(fā)另一種另一組，同時有
多種細胞反應。這種免疫鎖鏈可由使用粗制Coley疫苗激發(fā)，但難以由單一的 細胞因子復制。BCG是治療表淺性膀胱癌的有效制劑，是目前唯一常規(guī)使用的 抗腫瘤細菌疫苗。BCG直接應用于腫瘤部位，并需反復應用。在膀胱內(nèi)注射這 種疫苗后，許多細胞因子從尿中可測出，例如IL-1、 -2、 -6、 -8、 -10、 -12、 -18， 以及干擾素-C誘導蛋白-lO、巨噬細胞刺激因子和TNF-a[115 121]。治療過程 中許多細胞因子上調(diào)，另一些則下調(diào)。
實際上，我們所知的這些免疫調(diào)節(jié)因子僅是感染和腫瘤退縮過程中復雜免 疫反應的一小部分。
BCG的作用在周部，表現(xiàn)為局部炎癥和免疫反應。為了消除侵襲性癌腫， 必須引發(fā)全身性反應，但因為BCG是活菌疫苗，顯然這種策略有一定風險。 正因為此原因，BCG目前只限用于表淺性膀胱癌。
業(yè)已證實，許多微生物，包括細菌、真菌、病毒和原蟲，均有引起腫瘤退 縮的作用。由此推測，細胞介導的免疫反應(I型)而不是體液免疫反應(II 型)是引起癌腫退縮的關(guān)鍵。但是許多自發(fā)性退縮的病例以及實驗性動物感染 (如曲霉菌、瘧疾、旋毛蟲或錐蟲)后腫瘤抑制，被激發(fā)的是體液免疫反應， 而且，注射Coley疫苗后幾個小時內(nèi)腫瘤就可退縮，但原發(fā)性適應性反應卻在 幾天到1周才出現(xiàn)，說明這種免疫反應不是細菌感染后腫瘤退縮的原發(fā)機制。 Coley的經(jīng)驗和對一些自發(fā)性腫瘤退縮病例的探索性研究均提示感染刺激的 腫瘤退縮是"非特異性"天生免疫反應的結(jié)果。
某些病例感染刺激后腫瘤部分退縮， 一旦過了感染的急性發(fā)熱期，則殘存 腫瘤會再長，如果感染再發(fā)生，或再誘發(fā)感染，則腫瘤可如同以前那樣再退縮。 Coley指出，疫苗應每天注射，只要病人能耐受，停用疫苗即使幾天，有時也 會引起腫瘤再長。這又一次提示，特異性適應性抗腫瘤免疫不是這種疫苗的原 發(fā)機制。
天生性免疫反應的重要介導因子是Toll樣受體家族，主要表達于巨噬細胞和樹突狀細胞。這些受體影響著天生性防衛(wèi)反應和調(diào)節(jié)修復反應。有人發(fā)現(xiàn)，
Coley疫苗的抗原復合物是一種重要因子，能啟動許多對防衛(wèi)反應有關(guān)的Toll 樣受體。多種微生物均能引起腫瘤退縮的事實，說明天生性免疫反應存在一種 一致的特性，導致腫瘤退縮。
免疫反應具有重要的雙重作用，以維持宿主的完整性。免疫系統(tǒng)主要在防 衛(wèi)外來病原體中被識別，發(fā)揮作用；但在組織修復過程中同樣起重要作用。在 傷口愈合過程中，白細胞活化，參與基質(zhì)降解，生長因子產(chǎn)生，新的血管和淋 巴管生成。如果傷口是無菌的，細胞毒性防衛(wèi)功能便不會被激活。但是，腫瘤 是部分"自我的"，部分"外來的"，能從腫瘤內(nèi)白細胞激發(fā)一種修復性生長 促進性反應。
免疫系統(tǒng)怎樣促進或抑制腫瘤生長？如同傷口一樣，不斷擴張的腫瘤釋放 化學因子和其他細胞因子，這些因子吸引白細胞，同時釋放信號，增加氧和營 養(yǎng)物水平，由此一種異常的和有害的修復反應產(chǎn)生，從而促進腫瘤生長。白細 胞，尤其是巨噬細胞，存在于許多快速生長的腫瘤內(nèi)。巨噬細胞是多功能的適 應性很強的吞噬細胞，在酸性傷口環(huán)境中生命長。而且，巨噬細胞導致所有免 疫細胞的生成、動員和活化。有證據(jù)顯示，單核/巨噬細胞能分化為內(nèi)皮前體細 胞和成纖維細胞。有趣的是，來自腫瘤的成纖維細胞在體外能刺激腫瘤細胞， 但正常組織內(nèi)成纖維細胞沒有這種作用。因此，巨噬細胞在腫瘤形成中可能起 關(guān)鍵性作用。
目前認為，巨噬細胞分泌許多因子，其中某些刺激血管和淋巴管生長(如 血小板衍生生長因子、血管內(nèi)皮生長因子-A、 -B、 -C禾口-D)。但巨噬細胞能通 過反應性氧和氮代謝物生成，直接殺滅腫瘤細胞。巨噬細胞表達參與防衛(wèi)和修 復的ToU樣受體，說明在免疫介導的腫瘤生長和退縮之間存在精細平衡。無菌 性腫瘤內(nèi)缺氧和壞死的存在能促進刺激腫瘤生長的因子釋放。Coley疫苗或細 菌、病毒或真菌產(chǎn)物能使平衡轉(zhuǎn)向防衛(wèi)性免疫反應。文獻中混淆了什么是免疫 反應，什么是其副反應。例如，高劑量白介素-2治療黑色素瘤的文獻，常指出 這種治療的流感樣癥狀"是易于處理的，……為了控制發(fā)熱、頭痛和肌痛，常 預防性應用退熱劑"。殊不知，這種治療一方面剌激免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生干擾素-a， 但另一方面，這種作用又被退熱劑中止。事實上，這種流感樣癥狀能改善患者生存期。免疫治療失k在某種程度上是由于過多顧慮副反應，因而使用免疫抑 制性藥物。
單一細胞因子治療常引起明顯毒性，這是由于這種治療是一種非自然的挑
戰(zhàn)。Coley疫苗不是沒有不良反應，但重要的是要認識到這種治療引起的癥狀 如發(fā)熱、寒顫、疲勞等是機體對免疫調(diào)節(jié)的正常適應性反應，能促進腫瘤退縮， 同時能改善癌性疼痛，減少鴉片類和退熱劑等藥物用量，而這些藥物能抑制免 疫反應。
免疫系統(tǒng)是引起腫瘤自發(fā)性退縮的主要因素。 一些免疫抑制治療如化療、 放療和退熱劑，以及無菌性技術(shù)和抗生素引起的感染減輕，均能減弱免疫系統(tǒng) 引發(fā)的腫瘤退縮。對肺癌病人所作的回顧性研究提示，意外性感染對生存期有 明顯的有益影響。膀胱癌、肺癌和結(jié)直腸癌手術(shù)后感染并不少見，這種感染如 何恰當控制，既讓其發(fā)揮刺激抗腫瘤免疫，又不致危及病人生命，是值得進一 步研究的課題。
在使用70多年以后，Coley疫苗1963年被美國FDA設(shè)定為"新藥"范疇。 這一裁定要求任何對此有興趣的人要對基本上類似于Coley治療的方案，進行 大量的昂貴試驗。這實際上阻礙發(fā)展一種便宜的有效的適用于各種癌癥的療 法。
進一步研究Coley疫苗可采用以下途徑(1)試用于動物自發(fā)性腫瘤， 這方面可以尋求獸醫(yī)的幫助。(2)試用于看來無生存希望的轉(zhuǎn)移性腫瘤病例， 即作I期研究，探討在終末期病人的療效。
Coley提出的腫瘤退縮的幾個關(guān)鍵點，包括誘導發(fā)熱(方法、程度)、注 射途徑(直接腫瘤內(nèi)注射抑或一般的皮下注射)，以及注射次數(shù)、時間等，應 該予以研究；同時，對疫苗的副作用要進行量化；支持誘導和維持發(fā)熱的因素， 是治療轉(zhuǎn)移性疾病的基本因素，也要進一步分析；此外，治療的作用如何通過 測定血清腫瘤標記、細胞因子表達以及免疫細胞數(shù)及其活性進行監(jiān)測。
可以預期， 一旦Coley治療原理得到進一步研究，并將其與已經(jīng)獲得的大 量人類治療實踐聯(lián)系起來，則更廣泛的人類研究就可能展開。不管怎樣，微生 物疫苗的抗腫瘤作用是無法視而不見的，其在未來腫瘤治療中的地位最終肯定 會得到公認。重新對Coley治^產(chǎn)生興趣，正確評價其科學貢獻，似乎將癌癥治療拖向 倒退，但從現(xiàn)代常規(guī)治療的緩慢進展看，退后一步可能預示將使腫瘤治療向前 跨進一大步。
遺憾的是，目前已很少有人對抗腫瘤中發(fā)熱反應的作用予以重視?？焖偕?長的腫瘤內(nèi)含有大量白細胞，這些細胞在機體防衛(wèi)和修復中起一定作用，但其 修復功能也促進腫瘤生長。腫瘤內(nèi)感染可重建防衛(wèi)功能，引起腫瘤退縮。顯然， Coley療法在過去、現(xiàn)在和將來均具有一定地位，它為我們提供了一難得的機 會去發(fā)展一種廣譜的便宜的有效的腫瘤治療手段。
因此，研究具有應用前景的抗腫瘤疫苗將是一項造福人民的既重要又緊迫 的任務。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的任務是提供一種廣譜抗腫瘤復合疫苗，它能促進內(nèi)源性干擾素、 IL-2、 TNF分泌，增強巨噬細胞吞噬功能；促進淋巴細胞轉(zhuǎn)化；提高NK細胞 活性；改變T細胞亞群；改變腫瘤細胞膜的凝集素受體；在形態(tài)學上，增加脾 臟濕重；促進脾生發(fā)中心增殖等。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案如下
一種廣譜抗腫瘤復合疫苗，它包含靜脈注射用脂肪乳劑，它還包含百白破 疫苗、風疹麻疹二聯(lián)疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、布病疫苗以及輔 料。
所述廣譜抗腫瘤復合疫苗還包含細菌疫苗為綠膿桿菌疫苗。 所述廣譜抗腫瘤復合疫苗還包含PBS緩沖液。
所述輔料包含Lecithin卵磷脂、Dextran葡聚糖、吐溫-80以及注射用油。 所述廣譜抗腫瘤復合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百白破疫苗 10% 15%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗 10% 15%，癤病疫苗10% 15%，靜脈注射用脂肪乳劑20% 30%，輔料 10% 15。％， PBS緩沖液為余量用于補足100%重量百分比。
所述廣譜抗腫瘤復合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百白破疫苗 10% 15%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗10% 15%，療病疫苗10% 15%，綠膿桿菌疫苗10% 15。％，靜脈注射用 脂肪乳劑20% 30%，，輔料10% 15%， PBS緩沖液為余量用于補足100%重 量百分比。
所述廣譜抗腫瘤復合疫苗的配方的第一實施例，其組分含量以重量百分比 計為百白破疫苗10%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗5%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián) 疫苗13%，癤病疫苗13%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料14%， PBS緩沖 液20%。
所述廣譜抗腫瘤復合疫苗的配方的第二實施例，其組分含量以重量百分比 計為百白破疫苗15%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián) 疫苗15%，癤病疫苗10%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料10%， PBS緩沖 液17%。
所述廣譜抗腫瘤復合疫苗的配方的第三實施例，其組分含量以重量百分比 計為百白破疫苗12%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3%,傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián) 疫苗10%，癤病疫苗10%，綠膿桿菌疫苗10%，靜脈注射用脂肪乳劑30%, 輔料10%， PBS緩沖液15%。
我國著名血液腫瘤專家王振義院士，全世界應用誘導分化療法治療急性早 幼粒細胞白血病的發(fā)明者，早在上世紀80年代就提出抗擊癌癥必須"換一個 思路"，主張從提高機體整體免疫入手，實行多靶位免疫攻擊，即"多成分多 靶點作用"。他的這一理念包括.，(1)癌細胞的形成和發(fā)展與機體免疫處于 平衡狀態(tài)，只要機體免疫能力存在并保持足夠水平，癌細胞就不能生成或很快 被消滅(凋亡)或"休眠"。癌細胞并非單純在增殖，同時也在不斷凋亡。只 要免疫一癌細胞平衡向免疫側(cè)稍微傾斜，腫瘤就會因大量癌細胞凋亡而停止生 長。(2)癌細胞非常復雜，其表面和細胞內(nèi)，有許多"靶點"(抗原)，更 重要的是，癌細胞具有遺傳學不穩(wěn)定性。與正常細胞分裂其遺傳信息會全部復 制到下一代的情況不同，癌細胞分裂時，遺傳信息會不斷改變，分化出無數(shù)各 有特點的不同細胞。機體抗癌免疫的基礎(chǔ)就是不同的免疫細胞或細胞因子作用 于不同的癌細胞靶點，但單一的免疫細胞或因子("單槍匹馬")不一定能消 滅癌細胞。(3)免疫治療不能靠"輸入"，而是靠"激發(fā)"，不是"激發(fā)"一種免疫成分，而是"激發(fā)""f軍萬馬"。被激發(fā)的免疫成分會隨著癌細胞 遺傳信息的改變而變化，"機動靈活"。這種激發(fā)，只能靠非特異性免疫。復 合疫苗符合這一設(shè)想。
王振義同時指出現(xiàn)代醫(yī)學硏究癌癥，研究一個個靶點， 一個個細胞，純 之又純，非常"科學"，但犯了機械唯物論錯誤。癌癥是機體的"病"，人能 生癌，也應能滅癌。不能只看癌不看人。他認為，復合疫苗是一種"整體治療"， 符合"天人合一"的哲學思想。在王振義的抗癌理念指導下，孔潤蓮醫(yī)生研究 微生物疫苗的抗腫瘤作用。在單用不同疫苗的基礎(chǔ)上，將多種市售微生物疫苗 以不同組合，添加連接劑及一定的佐劑，制成復合疫苗，進行了各種毒性及抗 腫瘤試驗，并作為院內(nèi)制劑試用于中晚期癌癥病人；徐克成醫(yī)生介入了復合疫 苗的臨床觀察、隨訪和療效的鑒定，初步總結(jié)出復合疫苗的理論基礎(chǔ)和臨床應 用可行性及其前景，為進一步研究并"成藥"打下基礎(chǔ)。
本發(fā)明是由多種市售細菌疫苗和病毒疫苗以及其它原料復合而成，在配方 并加以佐劑下制成一種廣譜抗腫瘤復合疫苗。本發(fā)明的復合疫苗具有如下特 點
1、 復合疫苗是一種用已經(jīng)批準上市的微生物疫苗和病毒疫苗作為原料制 成的生物制品。依抑瘤率和毒性，進行篩選，包括疫苗選擇和含量比例、輔料
選擇，以及疫苗與輔料的比例，先后試驗30余種疫苗組合，作了40余組抑瘤
試驗，最終確定一組抑瘤率最高、效果最強的配方。
2、 將多種疫苗混合制成復合疫苗，能激發(fā)或誘導不同的免疫細胞或細胞
因子，從而綜合地作用于腫瘤，產(chǎn)生協(xié)同效果。
3、 動物試驗證明對多種腫瘤模型具有明顯的抑瘤效應，提高試驗動物的 免疫能力，并延長荷瘤實驗動物生存期。
4、 有的疫苗成分具有載體作用，能天然地感染職業(yè)性抗原提呈細胞，激 發(fā)I型和II型抗原提呈途徑，誘導強有力的天然性和適應性免疫反應。
5、 本復合疫苗中非疫苗成分能增加疫苗分子的彌散性和穩(wěn)定性，促進疫 苗分子滲透入效應細胞，有的本身即具有誘導機體免疫功能的作用。
應用本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗，則是一種 強人體抗腫瘤能力的措 施，可誘導癌細胞休眠，讓患者長期無病生存或帶瘤生存。按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗，根據(jù)組分和配方制作，制作方法簡單， 抗瘤譜廣，安全無毒，幾乎無副反應，如能幵發(fā)成為新藥，其價格便宜，尤其 它所具有的社會與經(jīng)濟意義將是不可估量的。
具體實施例方式
本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗主要包含百白破疫苗、風疹麻疹二聯(lián)疫苗、 傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗、靜脈注射用脂肪乳劑以及輔料。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其配方可由百白破疫苗、風疹麻疹二聯(lián) 疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗、靜脈注射用脂肪乳劑、輔 料以及PBS緩沖液組成。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其配方也可由百白破疫苗、風疹麻疹二 聯(lián)疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗、綠膿桿菌疫苗、靜脈注
射用脂肪乳劑、輔料以及PBS緩沖液組成。綠膿桿菌疫苗是細菌疫苗。
本發(fā)明的復合疫苗配方中的輔料包含Lecithin卵磷脂、Dextran葡聚糖、吐 溫-80以及注射用油等。PBS緩沖液是溶劑，起到溶解輔料中固體原料、平衡 PH和保護試劑的作用。
本發(fā)明的一種廣譜抗腫瘤復合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百 白破疫苗10% 15%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙 三聯(lián)疫苗10% 15%，癤病疫苗10% 15%，靜脈注射用脂肪乳劑20% 30 %，輔料10% 15%， PBS緩沖液為余量用于補足100%重量百分比。
本發(fā)明的又一種廣譜抗腫瘤復合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為 百白破疫苗10% 15%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副傷寒 乙三聯(lián)疫苗10% 15%，布病疫苗10% 15%，綠膿桿菌疫苗10% 15%， 靜脈注射用脂肪乳劑20% 30%，輔料10% 15%， PBS緩沖液為余量用于 補足100%重量百分比。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗配方制作的第一實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗10%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗5%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗13%，癤病疫苗13%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料14 %， PBS緩沖液20X。按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合，苗配方制作的第二實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗15%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗8%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗15%，癤病疫苗10%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料IO %， PBS緩沖液17%。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗配方制作的第三實施例配方，其組分含量
以重量百分比計為百白破疫苗12%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3%，傷寒副傷寒甲
副傷寒乙三聯(lián)疫苗10%，癤病疫苗105^，綠膿桿菌疫苗10%，靜脈注射用脂 肪乳劑30%，輔料10%， PBS緩沖液15X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗配方制作的第四實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗15%,風疹麻疹二聯(lián)疫苗5%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗15%,癤病疫苗12%,綠膿桿菌疫苗12。％，靜脈注射用脂 肪乳劑21%，輔料13%， PBS緩沖液7X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗配方制作的第五實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗13%,風疹麻疹二聯(lián)疫苗3%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗10%，癤病疫苗15%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料15 %， PBS緩沖液19%。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗配方制作的第六實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗10%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗8%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗12%，癤病疫苗15%,綠膿桿菌疫苗15%，靜脈注射用脂 肪乳劑20%，輔料11%, PBS緩沖液9X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗配方制作的第七實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗11%,風疹麻疹二聯(lián)疫苗6%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗13%,癤病疫苗13%,綠膿桿菌疫苗11%，靜脈注射用脂 肪乳劑22%，輔料12%， PBS緩沖液12X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗配方制作的第八實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗13%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗4%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗14%,癤病疫苗11。Z，綠膿桿菌疫苗13%，靜脈注射用脂 肪乳劑23%，輔料13%， PBS緩沖液9X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗配方制作的第九實施例配方，其組分含量以重量百分比計為百白破疫苗14%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗11%,癤病疫苗14%,綠膿桿菌疫苗12%，靜脈注射用脂 肪乳劑25%，輔料11%， PBS緩沖液10X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗配方制作的第十實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗12%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗4%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗12%，癤病疫苗14%，靜脈注射用脂肪乳劑30%，輔料ll %， PBS緩沖液17%。
經(jīng)動物試驗確認所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗幾乎沒有毒性。自1990年至 2008年近十年來，上海醫(yī)工院、中國科學院上海生化所、藥物所等單位對該復 合疫苗進行數(shù)次小鼠急性毒性試驗，用量相當于人用量的卯0 1500倍，未見 任何毒性反應，在觀察期的小鼠全部存活，尸檢主要臟器未見明顯病理變化， 顯示其十分安全。
研究表明，所述復合疫苗能促進內(nèi)源性干擾素、白細胞介素-2、腫瘤壞死 因子-a分泌，增強巨噬細胞吞噬功能；促進淋巴細胞轉(zhuǎn)化；提高NK細胞活性； 改變T細胞亞群；改變腫瘤細胞膜的凝集素受體；在形態(tài)學上，增加脾臟濕重； 促進脾生發(fā)中心增殖等。推測該復合疫苗能全方位促進抗腫瘤免疫包括天然免 疫和適應性免疫。
曾將本復合疫苗與經(jīng)典化療藥物環(huán)磷酰胺比較，發(fā)現(xiàn)前者短期的抑瘤效果 雖然沒有化療藥物高，但是非常明顯地顯示出，使用本復合疫苗能提高NK細 胞活性，而化療藥物卻使之降低。實驗研究還顯示，對實驗性腫瘤，本復合疫 苗具有抑制腫瘤生長作用，對鼠肝癌、鼠S180肉瘤、鼠膀胱癌和鼠B16黑色 素瘤的抑瘤率達50%以上；對HAC腹水癌和Ehrlich腹水癌具有預防其生成作 用。
經(jīng)過若干年的臨床實踐和動物試驗研究證實，本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫 苗具有一定的療效，能抗腫瘤，抗難治性慢性感染，抗免疫紊亂及低下，抗某 些代謝性疾病，包括動脈粥樣硬化。在腫瘤治療方面，本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復 合疫苗可與三大常規(guī)治療方法并用，能增效、減毒，尤其適用于經(jīng)三大常規(guī)治 療無指征或無效的進展性腫瘤，其抗癌效應較為明顯且全面，除了消瘤作用外， 還有改善KPS、升白、鎮(zhèn)痛和防復發(fā)等作用。
14當然，本技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的一般技術(shù)人員應當認識到，上述諸實施例僅是用來 說明本發(fā)明，而并非用作對本發(fā)明的限定，只要在本發(fā)明的實質(zhì)精神范圍內(nèi)， 對上述實施例的變換、變型都將落在本發(fā)明權(quán)利要求的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種廣譜抗腫瘤復合疫苗，它包含靜脈注射用脂肪乳劑，其特征在于，它還包含百白破疫苗、風疹麻疹二聯(lián)疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗以及輔料。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其特征在于，它還包含細菌疫苗為綠膿桿菌疫苗。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其特征在于，它還包含 PBS緩沖液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其特征在于，它還包含 PBS緩沖液。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其特征在于，所述輔料 包含Lecithin卵磷脂、Dextran葡聚糖、吐溫-80以及注射用油。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其特征在于，所述廣譜 抗腫瘤復合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百白破疫苗10%~15%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副 傷寒乙三聯(lián)疫苗10% 15%，癤病疫苗10% 15%，靜脈注射用脂肪乳劑20 % 30%，輔料10% 15%, PBS緩沖液為余量用于補足100%重量百分比。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其特征在于，所述廣譜 抗腫瘤復合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百白破疫苗10% 15%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副 傷寒乙三聯(lián)疫苗10% 15%，布病疫苗10% 15%,綠膿桿菌疫苗10% 15 %，靜脈注射用脂肪乳劑20% 30。/。，輔料10% 15%， PBS緩沖液為余量 用于補足100%重量百分比。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其特征在于，所述廣譜 抗腫瘤復合疫苗的配方的第一實施例，其組分含量以重量百分比計為百白破 疫苗10%,風疹麻疹二聯(lián)疫苗5%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗13%，癤 病疫苗13%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料14%， PBS緩沖液20X。
9. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其特征在于，所述廣譜抗腫瘤復合疫苗的配方的第二實施例，其組分含量以重量百分比計為百白破 疫苗15%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗15%，癤 病疫苗10%，靜脈注射用脂肪？Uflj25X，輔料10%， PBS緩沖液17X。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的廣譜抗腫瘤復合疫苗，其特征在于，所述廣譜 抗腫瘤復合疫苗的配方的第三實施例，其組分含量以重量百分比計為百白破 疫苗12%，風疹麻疹二聯(lián)疫苗3%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗10%，布 病疫苗10%，綠膿桿菌疫苗10%，靜脈注射用脂肪乳劑30%，輔料10%， PBS 緩沖液15%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種廣譜抗腫瘤復合疫苗，它包含靜脈注射用脂肪乳劑、百白破疫苗、風疹麻疹二聯(lián)疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗以及輔料。本發(fā)明將多種疫苗混合制成復合疫苗，能激發(fā)或誘導不同的免疫細胞或細胞因子，從而綜合地作用于腫瘤，產(chǎn)生協(xié)同效果。應用本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗，則是一種增強人體抗腫瘤能力的措施，可誘導癌細胞休眠，讓患者長期無病生存或帶瘤生存。按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復合疫苗，根據(jù)組分和配方制作，制作方法簡單，抗瘤譜廣，安全無毒，幾乎無副反應，如能開發(fā)成為新藥，其價格便宜，尤其它所具有的社會與經(jīng)濟意義將是不可估量的。
文檔編號A61K39/295GK101628114SQ20091005653
公開日2010年1月20日 申請日期2009年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月17日
發(fā)明者孔潤蓮, 徐克成, 王振義 申請人:孔潤蓮;王振義;徐克成