專利名稱：：苯并喹嗪-2-羧酸的前藥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及新的光學(xué)純的苯并喹嗪-2-羧酸的前藥以及包含該前藥的藥物組合物。本發(fā)明的化合物和組合物可用于治療革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌和厭氧菌感染，尤其是耐藥性革蘭氏陽性生物和革蘭氏陰性生物導(dǎo)致的感染，分枝桿菌感染以及出現(xiàn)的醫(yī)院病原體感染。
背景技術(shù)：
：前藥是治療劑，其本身無活性但在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為有治療活性的母體分子。前藥具有最優(yōu)的物理化學(xué)、藥動學(xué)和藥效學(xué)性質(zhì)?？蓪⑺鼈冊O(shè)計(jì)成克服藥學(xué)、藥動學(xué)或藥效學(xué)屏障，例如口服吸收不足、溶解度差、化學(xué)穩(wěn)定性不夠、不能接受的味道或氣味、刺激或疼痛、血腦屏障滲透性不充分、毒性以及顯著的系統(tǒng)前代謝。為了使用方便，大多數(shù)藥物通過口服途徑給藥。從口服途徑遞送藥物面臨明顯的障礙，常常不能讓所有給予的藥物都到達(dá)其指定的作用部位?；衔锟朔诜o藥障礙到達(dá)全身循環(huán)的程度可通過術(shù)語口服生物利用度進(jìn)行定量。手性氟喹諾酮S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111，511-苯并[^]喹嗪-2-羧酸，也稱為S(-)-那氟沙星在日本專利JP63,192,753A和JP05,339,238A中描述。S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i，j]喹嗪-2-羧酸由于其抗菌活性曲線而具有用作市售抗菌劑的潛在能力。但是，大鼠中靜脈內(nèi)途徑給予S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111，511-苯并^]喹嗪-2-羧酸鈉鹽具有導(dǎo)致靜脈炎的高風(fēng)險(xiǎn)性。并且，28°C，pH8.0-9.5范圍內(nèi)，S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111,511-苯并[^]喹嗪-2-羧酸的水溶性為0.8-2.0毫克/毫升，從而導(dǎo)致必須將該藥物配制成片劑或膠囊的問題，或者制備用于強(qiáng)飼法和胃腸外注射的制劑。因此，能夠克服上述問題的合適的實(shí)體將有助于開發(fā)在人和動物中全身性使用的可接受的劑型。為此，我們發(fā)現(xiàn)S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸L-精氨酸鹽是一種廣譜抗生素，大鼠靜脈內(nèi)途徑給予導(dǎo)致靜脈炎的風(fēng)險(xiǎn)較低，如PCT申請WO00/68229中所述。最穩(wěn)定的鹽形式，S-(-)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸L-精氨酸鹽四水合物在PCT申請WO05/023805Al(以及對應(yīng)的美國專利7,164,023)中描述?？捎糜谥苽浞€(wěn)定的藥物劑型，包括水性溶液劑。由于它在pH9.5下優(yōu)良的水溶性，重復(fù)靜脈內(nèi)給藥而不會導(dǎo)致靜脈炎癥的理想適宜性，及其安全性曲線，該注射劑型尤其適合長時間靜脈內(nèi)療法，用于治療細(xì)菌感染導(dǎo)致的疾病。但是，發(fā)現(xiàn)8-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-1-氧代-111,511-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸和S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111，511-苯并[1,"喹嗪-2-羧酸L-精氨酸鹽四水合物在動物中的口服生物利用度較差。S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH，5H-苯并[ij]喹嗪-2-羧酸的口服生物利用度差可能是因?yàn)槿芙獠煌耆?，因而體內(nèi)吸收差。而8-(-)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-1-氧代-111,511-苯并["喹嗪-2-羧酸的L-精氨酸鹽的口服生物利用度差可能是因?yàn)樵摶衔锿ㄟ^pH約1-2的胃部區(qū)域時在酸性pH條件下傾向于沉淀。因此，利用前藥方法來改善S-(-)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸的口服生物利用度。S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-1-氧代-111,511-苯并[』喹嗪-2-羧酸的前藥已在美國專利6,750,224中描述。該'224專利描述了兩種前藥-哌啶側(cè)鏈的2位羧酸和4位羥基的前藥。4-羥基哌啶的前藥包括氨基酸前藥。研究這些前藥是為了開發(fā)口服藥物組合物。所述8-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-1-氧代-lH,5H-苯并[i，j]喹嗪-2-羧酸的前藥不具有最優(yōu)特征(例如在消化道中很可能存在的廣泛pH范圍內(nèi)的充分溶解性)以顯示實(shí)質(zhì)上的前藥作用，或與S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH，5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸L-精氨酸鹽四水合物相比，該前藥不能提高S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-1-氧代-111,511-苯射^]喹嗪-2-羧酸的口服生物利用度。在氨基酸前藥中，還描述了L-丙氨酸和L-纈氨酸前藥。這兩種前藥都具有有限的水溶性(<10毫克/毫升)。通常認(rèn)為水溶性不充分是限制口服生物利用度的重要因素。本發(fā)明的目的是提供在消化道中可能遇到的寬pH范圍內(nèi)具有改善的水溶性且口服生物利用度提高的化合物。發(fā)明概述本發(fā)明描述了式I的S-(-)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸的前藥的鹽及其藥學(xué)上可接受的溶劑合物、多晶型物或水合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>式I式中R是CH3或CH(CH3)2;和Ri是CrC6烷基或任選地被一個或多個選自CrC6烷基、卣素、硝基、羥基或Q-C6垸氧基的取代基所取代的苯基。本發(fā)明也涉及一種制備式I化合物的方法，所述方法包括以下步驟使胺保護(hù)的L-丙氨酸或L-纈氨酸與8-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基小氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸偶聯(lián)以形成式II的化合物，式II的化合物脫保護(hù)，和分離式I的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。此外，本發(fā)明還提供了制備式I的化合物及其多晶型物和水合物的方法。本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明化合物的藥物組合物，并涉及使用本發(fā)明化合物和組合物來治療或預(yù)防細(xì)菌感染的方法。本發(fā)明一個或多個實(shí)施方式的詳細(xì)描述如下所述。通過說明書和權(quán)利要求書，本發(fā)明的其他特征、目的和優(yōu)點(diǎn)將顯而易見。發(fā)明詳述本發(fā)明描述了式I的S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸的前藥及其藥學(xué)上可接受的溶劑合物、多晶型物或水合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>式I式中R是CH3或CH(CH3)2;和Rj是CVC6垸基或任選地被一個或多個選自CrC6烷基、鹵素、硝基、羥基或CrC6垸氧基的取代基所取代的苯基。水溶性是藥物口服生物利用度的重要參數(shù)。發(fā)現(xiàn)pH7時本發(fā)明化合物的水溶性>200毫克/毫升，顯著高于游離堿或鹽酸鹽。與母體化合物即S-(-)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111,511-苯并[^]喹嗪-2-羧酸及其1^精氨酸鹽相比，式I的化合物能提供尤其優(yōu)良的吸收性，表現(xiàn)為大鼠口服給藥后AUC和C,提高。同樣，與8-(-)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-L-丙氨酰氧基(alaninyloxy)哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i，j]喹嗪-2-羧酸的前藥鹽酸鹽相比，大鼠口服給予后本發(fā)明化合物的AUC和Cmax提高。而且，S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-L-丙氨酰氧基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-1&511-苯并[^]-喹嗪-2-羧酸鹽酸鹽較低的溶解度在通過胃部區(qū)域時可能遭受同離子效應(yīng)。并且，發(fā)現(xiàn)式I的本發(fā)明化合物在嚙齒動物和狗中能夠在高劑量下很好地耐受。本發(fā)明的另一個實(shí)施方式提供了制備式I的化合物的方法。式I化合物的制備包括在偶聯(lián)劑的存在下，使胺保護(hù)的氨基酸與8-(-)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH，5H-苯射i,j]喹嗪-2-羧酸偶聯(lián)。所用氨基酸是L-丙氨酸或L-纈氨酸。式II的化合物脫保護(hù)，得到式I的本發(fā)明化合物。本發(fā)明化合物可從S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111，511-苯并[^]喹嗪-2-羧酸制備，采用本領(lǐng)域已知的技術(shù)，在偶聯(lián)劑的存在下，用N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸或N-叔丁氧基羰基-L-纈氨酸酯化4-羥基-哌啶。通常，在合適的溶劑中，在一種或多種堿的存在下，溫度范圍-3(TC到+15(TC下，在偶聯(lián)劑的存在下進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)，得到式II的化合物。優(yōu)選的偶聯(lián)劑包括碳二亞胺、2,4，6-三氯苯甲酰氯、甲磺酰氯等。碳二亞胺如二環(huán)己基碳二亞胺或N-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳二亞胺可用作偶聯(lián)劑。合適的溶劑選自鹵代溶劑如二氯甲垸、氯仿，或偶極非質(zhì)子溶劑如四氫呋喃、N,N-二甲基甲酰胺或它們的混合物。一種或多種堿選自三乙胺、N,N-二甲基氨基吡啶、胡寧堿(Hunig，sbase)(N,N-二異丙基乙胺)。偶聯(lián)反應(yīng)過程包括在鹵代烴如二氯甲垸、氯仿或二氯乙垸中，在N,N-二甲基氨基吡啶和偶聯(lián)劑二環(huán)己基碳二亞胺的存在下，在-l(TC到0"C下，用N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸或N-叔丁氧基羰基-L-纈氨酸處理S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[ij]喹嗪-2-羧酸?；蛘呖蛇x地，偶聯(lián)反應(yīng)過程包括在四氫呋喃和二甲基甲酰胺中，使用偶聯(lián)劑三氯苯甲酰氯，在N，N-二甲基氨基吡啶的存在下，在一1(TC到0"C下，用N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸或N-叔丁氧基羰基-L-纈氨酸處理S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯射i，j]喹嗪-2-羧酸。偶聯(lián)反應(yīng)也可以在四氫呋喃和二甲基甲酰胺中，使用甲磺酰氯作為偶聯(lián)劑，在三乙胺的存在下，在-l(TC到Ot:下進(jìn)行，用N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸或N-叔丁氧基羰基-L-纈氨酸處理8-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-1-氧代-111,511-苯并[^]喹嗪-2-羧酸。N-叔丁氧基羰基(BOC)的脫保護(hù)步驟可通過采用T.W.Greene和P.G.M.Wuts，/V她c"vegraw戸〖"wg畫'c，,/zew'5f(f存教合成卞游保y基^9」)，第三版，JohnWiley&Sons，紐約(1999)所述的方法進(jìn)行。因此，脫保護(hù)過程可通過在水性或非水溶液中，采用溫和酸性條件處理式II的化合物來實(shí)現(xiàn)。脫保護(hù)步驟中所用的溶劑是溶液，添加或不添加有機(jī)溶劑的水性酸，或非水有機(jī)溶劑。有機(jī)溶劑選自丙酮、乙腈、乙醇、異丙醇、或它們的混合物。酸性條件可通過采用無機(jī)酸如鹽酸等，可選地采用任何其他有機(jī)酸如甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、對硝基苯磺酸、三氟乙酸、乙酸、甲酸或它們的混合物來實(shí)現(xiàn)。優(yōu)選地，在-l(TC到100°C的溫度下，在丙酮或乙腈中，用甲磺酸、對甲苯磺酸、苯磺酸、對溴苯磺酸或?qū)ο趸交撬崽幚硎絥的化合物，得到式i的本發(fā)明化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>本發(fā)明的另一方面是純化式I的本發(fā)明化合物的粗產(chǎn)物。通過使雜質(zhì)溶解在有機(jī)溶劑中之后去除雜質(zhì)來進(jìn)行本發(fā)明化合物的純化。所用溶劑是丙酮、乙醚或其混合物。通過在多種條件下，例如溫度，時間和/或使用特定溶劑，使式I的化合物結(jié)晶來制備式I化合物的多晶型物。式I化合物的水合物可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法進(jìn)行制備。術(shù)語"d-C6烷基"表示含有1-6個碳原子的飽和、直鏈或支鏈烴基。CrQ烷基的例子包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基及其分支異構(gòu)體如異丙基、異丁基、叔丁基。術(shù)語"d-C6垸氧基"表示具有烴鏈取代基的氧基團(tuán)，其中所述烴鏈?zhǔn)峭榛?g卩-o-烷基)。crc6烷氧基的例子是甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基。本文所用術(shù)語"鹵素"表示選自氟、氯、溴和碘的原子。術(shù)語"硝基"表示通式-N02-的基團(tuán)。術(shù)語"垸基磺酸"指通式(C,-C6垸基)-S03H;例如甲烷磺酸(CH3S03H)、乙垸磺酸(CH3CH2S03H)。本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明前藥的液體和固體藥物制劑，例如注射溶液劑、混懸劑、乳劑、片劑、包衣片、包衣片芯、膠囊、溶液劑、含片、分散劑、丸劑、顆粒劑、栓劑、硬或軟明膠膠囊等。根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員制備穩(wěn)定有效組合物所使用的常規(guī)方法制備藥物組合物。這些方法包括將活性化合物與藥學(xué)輔料如運(yùn)載體、稀釋劑、溶劑或賦形劑進(jìn)行混合、攪拌、混懸、分散、乳化、溶解，并將各組分加工成適用于胃腸外、口服、鼻內(nèi)、含服或直腸等形式給藥的劑型。在固體、液體、胃腸外劑型中，活性化合物或活性成分的有效量可以是能夠產(chǎn)生所需效果的任何量。根據(jù)本發(fā)明已發(fā)現(xiàn)，可利用本發(fā)明前藥有益的溶解性質(zhì)來配制藥學(xué)劑型。也可通過濕法造?；虺Ｒ?guī)干法造粒過程來制備片劑。也可用于制備含水劑型。可通過本領(lǐng)域己知的任何常規(guī)技術(shù)來制備劑型，但優(yōu)選通過將本發(fā)明前藥與其他成分進(jìn)行混合來配制。用于配制固體口服劑型的其他成分可包括常規(guī)惰性成分，如微晶纖維素、甲基纖維素等，合適的甜味劑、著色劑和/或芳香劑，需要時還包含防腐劑?？蓪⑦@些固體口服劑型或適用于制備混懸劑的干燥制劑配制成包含有效量的本發(fā)明化合物。通常，考慮含100-1500毫克本發(fā)明化合物的固體劑型。適用于口服混懸劑的制劑包含類似的劑型?？蓪⑺幬镏苿┡c藥學(xué)領(lǐng)域常用的輔料和添加劑，例如片劑粘合劑、填充劑、防腐劑、片劑崩解劑、流動調(diào)節(jié)劑、試劑、增塑劑、濕潤劑、分散劑、乳化劑、溶劑、pH調(diào)整添加劑、芳香劑等一起配制。第二種優(yōu)選的方法是用于肌內(nèi)、靜脈內(nèi)或皮下給藥的胃腸外方法。如果將藥物組合物配制成注射用制劑，在將藥物組合物配制成溶液或混懸劑形式時，可使用本領(lǐng)域常規(guī)使用的所有稀釋劑。合適的稀釋劑的例子是水、乙醇、聚丙二醇、乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇和去水山梨糖醇酯?？蓪⒙然c、葡萄糖或甘油摻入治療劑中。優(yōu)選地，注射用制劑中活性成分的濃度為0.1-100毫克/毫升。除上述常規(guī)劑型之外，本發(fā)明化合物也可通過控釋方式和/或諸如美國專利3,845,770;3,916,899;3,536,809;3,598,123和4,008,719中所述的遞送裝置進(jìn)行給藥；將這些專利的內(nèi)容納入本文作為參考。通常，本發(fā)明前藥總的日劑量范圍約為200-5000毫克。優(yōu)選地，本發(fā)明前藥總的日劑量為300-3000毫克。然而，劑量也可根據(jù)患者需要和狀況提高或降低。本發(fā)明抗菌化合物和藥物組合物可用于治療具有廣譜細(xì)菌感染的人和動物，這些感染包括膿皰病、肺炎、支氣管炎、咽炎、心內(nèi)膜炎、尿路感染、糖尿病足潰瘍、胃腸道感染和菌血癥。這些細(xì)菌感染可以是由以下細(xì)菌中的任一種導(dǎo)致的金黃色葡萄球菌(&flMy/ococcwflwm^)，凝固酶陰性葡萄球菌，甲氧西林耐藥性金黃色葡萄球菌，甲氧西林耐藥性凝固酶陰性葡萄球菌，腸球菌，(3-溶血性鏈球菌，草綠色鏈球菌，多藥耐藥性結(jié)核分枝桿菌及其他非典型分枝桿菌如胞內(nèi)分枝桿菌(M.Wrace〃w/fl")和鳥分枝桿菌(M.av/ww)導(dǎo)致的分枝桿菌感染，以及新出現(xiàn)的革蘭氏陰性病原體如腦膜膿毒性金黃桿菌(C7z^seo6a"en'Mmmew/wgose/"cwm)、產(chǎn)B引哚金黃桿菌(C7^"eo6acfe〃.ww/"^/oge"化)和其他革蘭氏陰性病原體如大腸桿菌(五.co//)、克雷白桿菌、變形菌、沙雷氏菌、檸檬酸細(xì)菌屬和假單胞菌。本發(fā)明還涉及在需要預(yù)防和/或治療系統(tǒng)性感染，具體是耐藥性革蘭氏陽性生物體感染、革蘭氏陰性生物體感染、分枝桿菌感染和醫(yī)院病原體感染的人和動物中進(jìn)行治療的抗感染組合物，所述組合物包含一定量基本上足以根除所述感染的本發(fā)明化合物，而不會導(dǎo)致過度的副作用。本發(fā)明的化合物和組合物可給予存在感染風(fēng)險(xiǎn)的人和動物，例如本發(fā)明化合物或組合物可以在外科手術(shù)之前和/或之后給予患者，給予醫(yī)療衛(wèi)生工作者或存在感染風(fēng)險(xiǎn)的其他人員。本發(fā)明包括給予人或動物對象所述化合物。因此，本發(fā)明使用的化合物和組合物必須是藥學(xué)上可接受的。如本文所用，"藥學(xué)上可接受的"組分是指適合用于人體和/或動物而不會導(dǎo)致過度副作用(例如毒性、刺激和過敏反應(yīng))的組分，相當(dāng)于合理的效益/風(fēng)險(xiǎn)比?？赏ㄟ^本發(fā)明化合物進(jìn)行治療的動物包括但不限于哺乳動物、魚和鳥。下面詳細(xì)的實(shí)施例是為了更全面地闡述本發(fā)明而不限制本發(fā)明的范圍。應(yīng)理解，本發(fā)明實(shí)踐過程中的各種其他實(shí)施方式和修飾形式都是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所明白的且容易進(jìn)行，而不背離上述本發(fā)明的范圍和精神。因此，所附權(quán)利要求書的范圍并不限于上述精確描述，而是應(yīng)解釋為權(quán)利要求書包括本發(fā)明所具有的所有可專利的新穎性特征，包括相關(guān)
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員理解為等價(jià)形式的所有特征和實(shí)施方式。參考下面的實(shí)驗(yàn)工作來進(jìn)一步描述本發(fā)明。下面詳細(xì)描述的實(shí)施例是為了更全面地闡述本發(fā)明而不是限制其范圍。實(shí)驗(yàn)根據(jù)C/zem.Bw//.1996，44(4)，642-645所述的方法來制備(S)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH，5H-苯并[i，j]-喹嗪-2-羧酸。實(shí)施例-1(2，8,58)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-(^-叔丁氧基羰基七-丙氨酰氧基)-哌啶-1-基)-5-甲基小氧代"H,5H-苯并[i，j]喹嗪-2-羧酸的制備方法-l:在N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸(473g)在二氯甲烷(2L)中的混合液中，-10到0°。下，加入二環(huán)己基碳二亞胺(515g)的二氯甲垸(2L)溶液，得到混濁的懸浮液。在該混濁的懸浮液中，加入300g(S)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-羥基-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i，j]喹嗪-2-羧酸，然后加入4-N,N-二甲基氨基吡啶(58g)，并將該反應(yīng)混合物在-10-5"C的溫度下攪拌2小時。將該懸浮液過濾，并用500ml二氯甲烷洗滌固體。濾液用水洗滌。將濾液在無水硫酸鈉上干燥。然后將干燥的有機(jī)層濃縮至其一半的體積，固體發(fā)生沉淀。將固體過濾并用300ml二氯甲垸洗滌。將澄清的有機(jī)濾液濃縮至干，得到油狀物質(zhì)。用乙醚(4L)研磨油狀物質(zhì)，得到白色固體。將該固體在抽吸下過濾并用乙醚洗滌(1L)，得到415g標(biāo)題化合物(94"5/0)。方法-2:在三乙胺(98.0ml)和N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸(llOg)在四氫呋喃(1050ml)和N，N-二甲基甲酰胺(350ml)中的混合液中，加入2,4,6-三氯苯甲酰氯(100ml)。將所得混合液在-5到0。C的溫度下攪拌5小時。在該反應(yīng)混合物中，加入4-N,N-二甲基氨基吡啶(24g)和(S)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸(70g)。將反應(yīng)混合物在-5到O'C的溫度下再攪拌7小時。將懸浮液在室溫下過濾，加水后濾液用乙酸乙酯萃取。減壓蒸發(fā)有機(jī)層，得到粘稠固體，用乙醚研磨，得到85g白色固體。方法-3:-10到0°。下，向N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸(7.9g)在四氫呋喃(75ml)和N，N-二甲基甲酰胺(25ml)的混合液中，逐滴加入甲磺酰氯(2.42m1)。5分鐘內(nèi)在上述溶液中逐滴滴加三乙胺(8.7ml)。維持-10到0"C的溫度，將反應(yīng)液攪拌1.5小時。在該反應(yīng)混合物中，加入(8)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i，j]喹嗪-2-羧酸(5.01g)和4-N,N-二甲基氨基吡啶(1.70g)。-5到0°。的溫度下，將該反應(yīng)混合物再攪拌1小時。室溫下過濾懸浮液，將濾液用水(300ml)稀釋，用乙酸乙酯萃取(150mlX2)萃取。減壓蒸發(fā)有機(jī)層，得到粘稠固體，用乙醚研磨后得到6.38g白色固體(86%)。實(shí)施例-2(2'S，5S)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-L-丙氨酰氧基-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111,511-苯射^]喹嗪-2-羧酸甲磺酸鹽的制備在(2，8,58)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-^叔丁氧基羰基丄-丙氨酰氧基-哌啶-1-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸(415g)的丙酮(4.5L)混合液中加入甲磺酸(66ml)。將該反應(yīng)混合物在65-67'C的溫度下攪拌過夜。將混懸液在40-45。C下過濾。固體用丙酮(1.5L)，再用乙醚(1.5L)洗滌。將灰白色固體在40-45mm真空、55-60°C的溫度下干燥3-4小時。得到自由流動的灰白色物質(zhì)形式的標(biāo)題化合物383.0g(93%)。對于MF:C23H3()FN308S，MS(ES+)m/z432(對于游離堿形式的MF:C22H26FN305);DSC測定的熔點(diǎn)為278.50°C。實(shí)施例-3(2，S,5S)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-L-纈氨酰氧基-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-1&511-苯并^]喹嗪-2-羧酸甲磺酸鹽的制備步驟-l:(2'S,5S)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-[N-叔丁氧基羰基-L-纈氨酰氧基]-哌啶小基卜5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸的制備在三乙胺(14ml)和N-叔丁氧基羰基-L-纈氨酸(18g)在四氫呋喃(50ml)和N,N-二甲基甲酰胺(15ml)的混合液中，加入2,4,6-三氯苯甲酰氯(14.3ml)。將所得混合液在-5到0'C的溫度下攪拌5小時。在該反應(yīng)混合物中，加入4-N,N-二甲基氨基吡啶(3.4g)和(S)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111,511-苯并[^]喹嗪-2-羧酸(10g)。將該反應(yīng)混合物在-5到O"C的溫度下再攪拌7小時。將該懸浮液在室溫下過濾，濾液加水后用乙酸乙酯萃取。減壓蒸發(fā)有機(jī)層，得到粘稠固體，用乙醚研磨，得到12.5g白色固體。步驟-2:(2'S,5S)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-L-纈氨酰氧基-哌啶-l-基)-5-甲基-1隱氧代-111，511-苯并[^]喹嗪-2-羧酸甲磺酸鹽的制備63-65'C的溫度下，將步驟1的所得化合物(12g)和甲垸磺酸(1.81ml)在丙酮(150ml)中的混合物攪拌10小時。將該懸浮液在室溫下過濾，固體用丙酮洗滌，得到9.8g灰白色固體。實(shí)施例-4(2'S,5S)-9-氟-6，7-二氫-8-H-(L-丙氨酰氧基)-哌啶-l-基卜5-甲基-l-氧代-111,511-苯射^]喹嗪-2-羧酸甲苯磺酸鹽的制備(2，8,58)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-^叔丁氧基羰基丄-丙氨酰氧基-哌啶-1-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸(3.0gm;5.64mol)在丙酮(35ml)的混合液中，加入一水合對甲苯磺酸(1.61gm;8.47mol)。將該反應(yīng)混合物回流過夜。懸浮液在40-45。C下過濾，所得固體用丙酮，再用乙醚洗滌。將固體在40-45mm真空、55-60°C的溫度下干燥3-4小時，產(chǎn)生3.0g灰白色固體形式的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率88.23%)。對于MF:C29H34FN308S，MS(M+H)m/z432(對于游離堿形式的MF:C22H26FN305);熔點(diǎn)232°C。實(shí)施例-5(2'S,5S)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-(L-丙氨酰氧基)-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111,511-苯并^]喹嗪-2-羧酸苯磺酸鹽的制備向(2，8,58)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-:^-叔丁氧基羰基丄-丙氨酰氧基-哌啶-1-基)-5-甲基-l-氧代-lH，5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸(3.0g;5.64mol)在丙酮(35ml)的混合液中，加入苯磺酸(1.33gm;8.41mol)。將該反應(yīng)混合物回流過夜。懸浮液在40-45。C下過濾，所得固體用丙酮，再用乙醚洗滌。將固體在40-45mm真空、55-60"的溫度下干燥3-4小時，產(chǎn)生3.1g淡黃色固體形式的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率90.0%)。對于MF:C28H32FN308S，MS(M+H)m/z432(對于游離堿形式的MF:C22H26FN305);熔點(diǎn)229。C。實(shí)施例-6(2，S,5S)-9-氟-6,7-二氫-8-H-(L-丙氨酰氧基)-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-111,511-苯并[^]喹嗪-2-羧酸硝基苯磺酸鹽的制備向(2，8,58)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-^叔丁氧基羰基丄-丙氨酰氧基-哌啶-1-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸(3.0gm;5.64mol)在丙酮(35ml)中的混合液中，加入對硝基苯磺酸(1.73gm;8.47mol)。將該反應(yīng)混合物回流過夜。懸浮液在40-45。C下過濾，所得固體用丙酮，再用乙醚洗滌。將固體在40-45mm真空、55-60°C的溫度下干燥3-4小時，產(chǎn)生3.3g淡黃色固體形式的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率92.43%)。對于MF:C28H31FN401QS，MS(M+H)m/z432(對于游離堿形式的MF:C22H26FN305);熔點(diǎn)240°C。測試實(shí)施例-1溶解度分析用于測定在25-3(TC的溫度下，不同生理學(xué)pH下的水溶性的方法25-3(TC下，在精確稱量的試驗(yàn)物質(zhì)中，分批加入特定的緩沖液(約50微升)，直到固體完全溶解并得到澄清溶液。表l:pH7時的溶解度<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>生物學(xué)實(shí)施例在SD(SpragueDawley)大鼠中的藥動學(xué)(PK)研究方法對禁食過夜的重200-220g的雄性SD大鼠進(jìn)行藥動學(xué)研究。將(2，S,5S)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-L-丙氨酰氧基-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH,5H-苯并[^]-喹嗪-2-羧酸甲磺酸鹽(入)，(2'S,5S)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-L-丙氨酰氧基-哌啶-l-基)-5-甲基-l-氧代-lH，5H-苯并[i,j]喹嗪-2-羧酸鹽酸鹽(B)和(2'S,5S)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-L-纈氨酰氧基-哌啶小基)-5-甲基小氧代"H,5H-苯并[i，j]喹嗪-2-羧酸甲磺酸鹽(C)溶解在MimQ水中。將化合物A,B和C以基于活性成分計(jì)算的50mg/kg的口服劑量進(jìn)行給藥。使用前，將(58)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基-哌啶-1-基)-5-甲基-1-氧代-111，511-苯射i,j]喹嗪-2-羧酸L-精氨酸鹽(D)溶解在1%吐溫中。將化合物A和D以基于活性成分計(jì)算的200mg/kg的口服劑量進(jìn)行給藥。給藥體積為0.5ml/200g。將在預(yù)定的時間間隔，即0，0.5，1，2，4，6和8小時的血樣收集到含10飽和氟化鈉溶液的埃膨道夫(eppendorff)離心管中。將血樣在10000rpm下離心10分鐘，收集血漿。在HPLC上分析血漿樣品用于測定藥物水平。采用Wi皿onlin軟件通過非房室分析來計(jì)算PK參數(shù)AUC，Cmax。表2:口服劑量的大鼠研究中C,和AUC的改善百分比<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>權(quán)利要求1.式I結(jié)構(gòu)的化合物及其藥學(xué)上可接受的溶劑合物、多晶型物或水合物式I式中R是CH3或CH(CH3)2；和R1是C1-C6烷基或任選地被一個或多個選自C1-C6烷基、鹵素、硝基、羥基或C1-C6烷氧基的取代基所取代的苯基。2.如權(quán)利要求l所述的化合物，其特征在于，R!是CrC6垸基。3.如權(quán)利要求l所述的化合物，其特征在于，R!是任選地被一個或多個選自CrC6烷基、鹵素、硝基、羥基或CrC6烷氧基的取代基所取代的苯基o4.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于，R是CH3或CH(CH3)2，是甲基、乙基、苯基、對硝基苯基、甲苯基。5.—種制備式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的溶劑合物、多晶型物或水合物的方法，所述方法包括a)在一種或多種溶劑中，使S-(-)-9-氟-6,7-二氫-8-(4-羥基哌啶-l-基)-5-甲基-1-氧代-111,511-苯并[^]喹嗪-2-羧酸與胺保護(hù)的L-丙氨酸或L-纈氨酸偶聯(lián)，得到式II的保護(hù)的化合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>式IIb)用通式RrS03H的磺酸使式II的化合物脫保護(hù)，其中&如權(quán)利要求1所定義；c)分離式I的化合物。6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述偶聯(lián)反應(yīng)在偶聯(lián)劑的存在下進(jìn)行。7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述偶聯(lián)劑包括雙環(huán)碳二亞胺、2，4，6-三氯苯甲酰氯和甲磺酰氯中的一種或多種。8.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法還包括在堿的存在下進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)。9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述堿包括三乙胺、N,N-二甲基氨基吡啶和二異丙基乙胺中的一種或多種。10.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述溶劑包括二氯甲垸、氯仿、二氯乙烷、四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺中的一種或多種或其混合物。11.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述偶聯(lián)反應(yīng)在約-l(TC到約0。C的溫度下進(jìn)行。12.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所用磺酸是烷基磺酸。13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，所述磺酸是甲垸磺酸。14.一種藥物組合物，其包含治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1所述的化合物以及藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體、賦形劑或稀釋劑。15.如權(quán)利要求1所述的化合物在制備用于治療或預(yù)防由細(xì)菌感染導(dǎo)致或引起的疾病的藥物中的應(yīng)用，所述應(yīng)用包括給予哺乳動物治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1所述的化合物。16.如權(quán)利要求15所述的化合物應(yīng)用，其特征在于，所述疾病選自膿皰病、肺炎、支氣管炎、咽炎、心內(nèi)膜炎、尿路感染、糖尿病足潰瘍、胃腸道感染或菌血癥。17.如權(quán)利要求15所述的化合物應(yīng)用，其特征在于，所述細(xì)菌感染是由革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌或厭氧菌引起的。18.如權(quán)利要求17所述的方法，其特征在于，所述革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌或厭氧菌選自金黃色葡萄球菌，凝固酶陰性葡萄球菌，甲氧西林耐藥性金黃色葡萄球菌，甲氧西林耐藥性凝固酶陰性葡萄球菌，腸球菌，(3-溶血性鏈球菌，草綠色鏈球菌，多藥耐藥性結(jié)核分枝桿菌及其他非典型分枝桿菌如胞內(nèi)分枝桿菌和鳥分枝桿菌導(dǎo)致的分枝桿菌感染，以及新出現(xiàn)的革蘭氏陰性病原體如腦膜膿毒性金黃桿菌、產(chǎn)吲哚金黃桿菌和其他革蘭氏陰性病原體如大腸桿菌、克雷白桿菌、變形菌、沙雷氏菌、檸檬酸細(xì)菌屬和假單胞菌。全文摘要本發(fā)明涉及新的光學(xué)純的苯并喹嗪-2-羧酸的前藥以及包含該前藥的藥物組合物。具體說，本發(fā)明涉及S-(-)-9-氟-6，7-二氫-8-(4-羥基哌啶-1-基)-5-甲基-1-氧代-1H，5H-苯并[i，j]喹嗪-2-羧酸的L-丙氨酸和L-纈氨酸前藥磺酸鹽。本發(fā)明的化合物和組合物可用于治療革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌和厭氧菌感染，尤其是耐藥性革蘭氏陽性生物和革蘭氏陰性生物導(dǎo)致的感染，分枝桿菌感染以及出現(xiàn)的醫(yī)院病原體感染。文檔編號A61K31/4375GK101500564SQ200780013073公開日2009年8月5日申請日期2007年3月1日優(yōu)先權(quán)日2006年3月7日發(fā)明者M(jìn)·V·帕特爾,P·K·德斯潘德,R·D·約勒,R·P·卡勒,V·N·德塞申請人:沃克哈特有限公司