利用含有噻吩并三唑并二氮雜*化合物的藥物制劑治療白血病的方法
【專利摘要】一種治療哺乳動(dòng)物白血病的方法，通過向需要的患者施用藥學(xué)可接受的量的式(1)表示的噻吩并三唑并二氮雜化合物，或其可藥用的鹽、或其水合物或溶劑化物：其中R1為具有1至4個(gè)碳的烷基；R2為氫原子、鹵素原子、或任選地被鹵素原子或羥基取代的具有1至4個(gè)碳的烷基；R3為鹵素原子；任選地被鹵素原子、具有1至4個(gè)碳的烷基、具有1至4個(gè)碳的烷氧基、或氰基取代的苯基；─NR5─(CH2)m—R6，其中R5為氫原子、或具有1至4個(gè)碳的烷基，m為0至4的整數(shù)，并且R6為任選地被鹵素原子取代的苯基或吡啶基；或–NR7─CO─(CH2)n—R8，其中R7為氫原子或具有1至4個(gè)碳的烷基，n為0至2的整數(shù)，并且R8為任選地被鹵素原子取代的苯基或吡啶基；并且R4為─(CH2)a─CO─NH—R9，其中a為1至4的整數(shù)，并且R9為具有1至4個(gè)碳的烷基；具有1至4個(gè)碳的羥烷基；具有1至4個(gè)碳的烷氧基；或任選地被具有1至4個(gè)碳的烷基、具有1至4個(gè)碳的烷氧基、氨基或羥基取代的苯基或吡啶基；或─(CH2)b—COOR10，其中b為1至4的整數(shù)，并且R10為具有1至4個(gè)碳的烷基。
【專利說明】利用含有噻吩并三唑并二氮雜罩化合物的藥物制劑治療白血 病的方法
[0001] 相關(guān)專利申請的交叉引用
[0002] 本專利申請要求2013年11月27日提交的美國臨時(shí)申請No. 61/909，702、2014年6月 13日提交的美國臨時(shí)申請No . 62/012，128、以及2014年11月17日提交的美國臨時(shí)申請 No. 62/080，804的權(quán)益，所有這些申請的全文均以引用的方式并入本文。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003] 本發(fā)明公開了一種利用噻吩并三唑并二氮雜罩化合物治療白血病的方法，所述化 合物具有改善的溶解度和生物利用度，其可以固體分散體的形式提供。
【背景技術(shù)】
[0004] 下文所述的式（1)的化合物已經(jīng)顯示出可抑制乙?；慕M蛋白H4與包含串聯(lián)的溴 結(jié)構(gòu)域(BRD)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)子家族(稱為BET(溴結(jié)構(gòu)域和額外末端）蛋白，包括BRD2、BRD3和 BRD4)的結(jié)合。參見美國專利申請公開No. 2010/0286127A1，其全文以引用的方式并入本文。 Denis，G. V.在文獻(xiàn) "Bromodomain coactivators in cancer ,obesity, type 2diabetes, and inflammation/'Discov Med 2010;10:489_499(該文獻(xiàn)的全部內(nèi)容以引用方式并入本 文）中報(bào)道了如下內(nèi)容:BET蛋白作為增殖和分化的主要的表觀遺傳調(diào)節(jié)子而出現(xiàn)，并且還 與傾向于血脂異?；蛑旧刹划?dāng)調(diào)節(jié)、心血管病和2型糖尿病的升高的炎癥性質(zhì)和風(fēng)險(xiǎn)、 以及自體免疫疾病(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡)的易感性增加有關(guān)。因此，式 (II)所示的化合物可以用于治療多種癌癥、心血管疾病、2型糖尿病和自體免疫失調(diào)（例如 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和系統(tǒng)性紅斑狼瘡）。
[0005] 下文所述的式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物表現(xiàn)出與廣泛施用和制備蓋 倫組合物有關(guān)的非常特有的困難，尤其包括藥物生物利用度以及患者間和患者內(nèi)的劑量應(yīng) 答的差異性的特定問題，由此迫切需要針對噻吩并三唑并二氮雜罩的幾乎不溶于水的性質(zhì) 而開發(fā)非常規(guī)的劑型。
[0006] 之前，如美國專利申請公開No.20090012064 Al中所報(bào)告(該文獻(xiàn)的全部內(nèi)容以引 用方式并入本文），已經(jīng)發(fā)現(xiàn)式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物可以使用載體丙烯酸乙 酯 -甲基丙稀酸甲酯-三甲基銨乙基甲基丙稀酸酯氯化物（trimethy Iammonioethyl methacrylate chloride)的共聚物(Eudragit RS，由Rohm公司生產(chǎn))來配制，從而提供在下 部腸道優(yōu)先釋放藥物組分以用于治療炎性腸病(例如潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩?。┑目诜?劑。通過多種實(shí)驗(yàn)(包含動(dòng)物測試），發(fā)現(xiàn)就炎性腸病而言，與式（1)的噻吩并三唑并二氮雜 章化合物由胃腸道被吸收至循環(huán)中相比，式（1)的噻吩并三唑并二氮雜草化合物在病變部 位的釋放及其對炎性病變的直接作用更為重要。但是，對于許多其他的病癥而言，則要求將 式（1)的噻吩并三唑并二氮雜草化合物由胃腸道高度吸收至循環(huán)中。因此，需要可以使式 (1)的噻吩并三唑并二氮雜章化合物由胃腸道高度吸收至循環(huán)中的式（1)的噻吩并三唑并 二氮雜罩化合物的制劑。
[0007] 人類BET家族溴結(jié)構(gòu)域(包括BRD2、BRD3、BRD4和BRDT蛋白）已經(jīng)成為研究特異基因 轉(zhuǎn)錄的抑制劑的藥物靶標(biāo)。因此，急迫地需要新型口服BET-BRD抑制劑作為單獨(dú)的試劑或與 其他試劑聯(lián)合施用來治療各種疾病(包括白血?。?。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本公開提供了利用本文所述的組合物治療白血病的方法。
[0009] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本公開提供了治療哺乳動(dòng)物中白血病的方法，包括:向需要的 患者施用藥學(xué)可接受的量的組合物，該組合物包含根據(jù)第III、IV、V、VI和VII部分描述的組 合物的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，白血病選自由急性白血病和慢性白血病構(gòu)成的 組。在一個(gè)實(shí)施方案中，白血病獨(dú)立地選自由以下疾病構(gòu)成的組：急性淋巴細(xì)胞性白血病 (ALL)、急性骨髓性白血病(AML)(或急性成髓細(xì)胞性白血病）、慢性淋巴細(xì)胞性白血病(CLL) 和慢性骨髓性白血病（CML)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，白血病獨(dú)立地選自由以下疾病構(gòu)成的 組:急性骨髓性白血病、慢性急性骨髓性白血病和急性淋巴細(xì)胞性白血病。
[0010] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的治療白血病的方法包括向患者施用有效量的根 據(jù)式（I)的化合物、其可藥用的鹽、或其水合物：以及可藥用的聚合物：
[0011]
[0012 ] 其中，父為鹵素，R1為C1-C4烷基，R2Sc 1-C4烷基，a為1至4的整數(shù)，R3SC1-C4烷基、θα 羥烷基X1-C4 烷氧基、任選地具有取代基的苯基、或任選地具有取代基的雜芳基。在一個(gè) 這樣的實(shí)施方案中，將噻吩并三唑并二氮雜罩化合物配制成含有無定形噻吩并三唑并二氮 雜罩化合物的固體分散體。
[0013]在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的治療白血病的方法，包括向需要此類治療的患 者施用根據(jù)本發(fā)明的有效量的化合物組合物，其中至少式（1)的化合物與至少一種其他的 治療劑聯(lián)合施用，其中式（1)的化合物或其可藥用的鹽以及至少一種其他的治療劑同時(shí)或 依次施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述其他的治療劑獨(dú)立地選自由以下化合物構(gòu)成的組:表觀 遺傳調(diào)節(jié)劑、糖皮質(zhì)激素、m-TOR抑制劑、HDAC-抑制劑、去甲基化試劑、蒽環(huán)霉素、胞嘧啶核 苷類似物和細(xì)胞毒性藥物。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，去甲基化試劑為地西他濱。在另一個(gè) 這樣的實(shí)施方案中，HDAC-抑制劑為伏立諾他或帕比司他。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中， mTOR抑制劑為依維莫司。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，糖皮質(zhì)激素為地塞米松。在另一個(gè)這 樣的實(shí)施方案中，細(xì)胞毒性藥物選自由阿糖孢苷或甲氨蝶呤構(gòu)成的組。在另一個(gè)這樣的實(shí) 施方案中，胞嘧啶核苷的類似物為氮雜胞苷。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，蒽環(huán)霉素為道諾 霉素。
[0014] 在一個(gè)實(shí)施方案中，式（1)選自由以下化合物構(gòu)成的組：（i)(S)-2-[4_(4-氯代苯 基)-2,3,9-三甲基-6!1-噻吩并[3,2-幻[1，2,4]三唑并-[4,3- &][1，4]二氮雜罩-6-基]，-(4-羥苯基）乙酰胺或其二水合物；（ii) (S)-{4-(3 ' -氰基聯(lián)苯-4-基)-2，3，9-三甲基-6H-噻 吩并[3,2-幻[1，2,4]三唑并[4,3-&][1，4]二氮雜罩-6-基}乙酸甲酯；（1^)(5)-{2,3,9-三 甲基-4-(4-苯基氨基苯基)-6H-噻吩并[3,2-f][l，2,4]三唑并[4,3-a][l，4]二氮雜罩-6-基}乙酸甲酯；以及（丨￥)(5)-{2,3,9-三甲基-4-[4-(3-苯基丙?；被?苯基]-6!1-噻吩并 [3,2-卜][1，2,4]三唑并[4,3- &][1，4]二氮雜罩-6-基}乙酸甲酯。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案 中，式（1)為(S)-2-[4-(4-氯代苯基)-2,3,9_三甲基-6H-噻吩并[3,2-幻[1，2,4]三唑并[4， 3-a ] [ 1，4 ]二氮雜罩-6-基]-N- (4-羥苯基）乙酰胺。
[0015] 在一些實(shí)施方案中，所述可藥用的聚合物為醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯。在 一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體中噻吩并三唑并二氮雜罩化合物與醋酸羥丙基甲基纖 維素琥珀酸酯(HPMCAS)的重量比為1:3至1:1。在一些這樣的實(shí)施方案中，所述固體分散體 表現(xiàn)出約130 °C至約140 °C的單一的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)拐點(diǎn)。在一些這樣的實(shí)施方案中， 在40°C下暴露于75%的相對濕度至少一個(gè)月之后，噻吩并三唑并二氮雜章化合物的濃度為 暴露前無定形噻吩并三唑并二氮雜章化合物濃度的至少90%。
[0016] 在其它實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為PVP。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散 體中噻吩并三唑并二氮雜罩化合物與PVP的重量比為1:3至1:1。在一些這樣的實(shí)施方案中， 所述固體分散體表現(xiàn)出約175 °C至約185 °C的單一的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)拐點(diǎn)。在一些這樣 的實(shí)施方案中，在40°C下暴露于75%的相對濕度至少一個(gè)月之后，噻吩并三唑并二氮雜罩 化合物的濃度為暴露前無定形噻吩并三唑并二氮雜罩化合物濃度的至少90 %。
[0017] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述固體分散體由噴霧干燥法得到。
[0018] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，在固體分散體的X射線粉末衍射圖案中，基本上不存在與結(jié) 晶的式(1)的噻吩并三唑并二氮雜草化合物有關(guān)的衍射線。
[0019] 在又一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)通過靜脈施用時(shí)，由所述固體分散體獲得的曲線下面積 (AUC)值為由對照組合物獲得的相應(yīng)AUC值的至少0.5倍，其中所述對照組合物包含等價(jià)量 的結(jié)晶的式(1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物。
[0020] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，與不包含聚合物時(shí)結(jié)晶的式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩 化合物在pH值為5.0至7.0之間的對照體外測試介質(zhì)中的濃度相比，所述固體分散體在pH值 為5.0至7.0之間的水性體外測試介質(zhì)中具有的無定形的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物的 濃度高至少5倍。
[0021] 在又一個(gè)實(shí)施方案中，與不包含聚合物時(shí)結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮 雜罩化合物在pH值為5.0至7.0之間的體外測試介質(zhì)中的濃度相比，所述固體分散體在pH值 為1.0至2.0之間的水性體外測試介質(zhì)中具有的無定形的噻吩并三唑并二氮雜罩._化合物的 濃度高至少50 %。
[0022] 在一個(gè)實(shí)施方案中，式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物和可藥用的聚合物的 固體分散體中的無定形的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物的濃度比式（1)的噻吩并三唑并二 氮雜草化合物的濃度高至少50%，其中所述可藥用的聚合物選自以下物質(zhì)組成的組中：羥 丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯和丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-三甲基銨乙基甲基丙烯酸 酯氯化物共聚物，其中各固體分散體被置于PH值為1.0至2.0的水性體外測試介質(zhì)中。
[0023] 在一個(gè)實(shí)施方案中，式（1)的噻吩并三唑并二氮雜章化合物和可藥用的聚合物的 固體分散體中的無定形的式（1)的噻吩并三唑并二氮雜蓽化合物的濃度比式（1)的噻吩并 三唑并二氮雜罩化合物的濃度高至少50%，其中所述可藥用的聚合物選自以下物質(zhì)組成 的組中：羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯和丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-三甲基銨乙基甲 基丙烯酸酯氯化物共聚物，其中各固體分散體被置于PH值為1.0至2.0的水性體外測試介質(zhì) 中。
【附圖說明】
[0024] 參照示例性實(shí)施方案的附圖來閱讀時(shí)，將會更好的理解前面的發(fā)明概述以及下面 的對本發(fā)明的包含噻吩并三唑并二氮雜罩制劑的藥物組合物和方法的實(shí)施方案的詳述。但 是，應(yīng)該理解的是本發(fā)明不限于所示的精確設(shè)置和手段。
[0025]在本文和附圖全文中，術(shù)語0TX015與化合物（1-1)是同義的。
[0026] 在附圖中：
[0027] 圖IA示出了包含固體分散體的比較制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包含 25% 的化合物（1-1)和Eudragit L100 -55;
[0028] 圖IB示出了包含固體分散體的比較制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包含 50% 的化合物（1-1)和Eudragit L100 -55;
[0029] 圖IC示出了包含固體分散體的示例性制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包 含25%的化合物（1-1)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP);
[0030]圖ID示出了包含固體分散體的示例性制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包 含50%的化合物（1-1)和PVP;
[0031] 圖IE示出了包含固體分散體的示例性制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包 含25%的化合物（1-1)和PVP-乙酸乙烯酯(PVP-VA);
[0032] 圖IF示出了包含固體分散體的示例性制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包 含50%的化合物（1-1)和和PVP-VA;
[0033] 圖IG示出了包含固體分散體的示例性制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包 含25%的化合物(1-1)和醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯(HPMCAS-M);
[0034] 圖IH示出了包含固體分散體的示例性制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包 含50 %的化合物（I -1)和HPMCAS-M;
[0035] 圖II示出了包含固體分散體的示例性制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包 含25%的化合物（1-1)和羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯(HPMCP-HP55);
[0036] 圖IJ示出了包含固體分散體的示例性制劑的溶解情況，其中所述的固體分散體包 含50 %的化合物（1-1)和HMCP-HP55;
[0037]圖2A示出了示例性制劑的體內(nèi)篩選結(jié)果，該示例性制劑包含25%化合物（1-1)和 PVP的固體分散體；
[0038]圖2B示出了示例性制劑的體內(nèi)篩選結(jié)果，該示例性制劑包含25 %化合物（1-1)和 HPMCAS-M的固體分散體；
[0039]圖2C示出了示例性制劑的體內(nèi)篩選結(jié)果，該示例性制劑包含50%化合物（1-1)和 HPMCAS-M的固體分散體；
[0040]圖3示出了化合物(1-1)的固體分散體的X射線粉末衍射圖譜。
[00411圖4A示出了在環(huán)境條件下平衡的25 %化合物（1-1)和PVP的固體分散體的修正的 差示掃描量熱軌跡；
[0042]圖4B示出了在環(huán)境條件下平衡的25 %化合物（1-1)和HPMCAS-M的固體分散體的修 正的差示掃描量熱軌跡；
[0043]圖4C示出了在環(huán)境條件下平衡的50 %化合物（1-1)和HPMCAS-M的固體分散體的修 正的差示掃描量熱軌跡；
[0044] 圖5示出了 25 %化合物（1-1)和PVP或HPMCAS-M的固體分散體、以及50 %化合物（1-1)和HPMCAS-MG的固體分散體的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)對相對濕度(RH)的圖；
[0045]圖6示出了在75 %相對濕度下平衡的25 %化合物（1-1)和PVP的固體分散體的修正 的差示掃描量熱軌跡；
[0046]圖7示出了 lmg/kg靜脈定量給藥后的化合物（1-1)(實(shí)心矩形）、3mg/kg 口服定量給 藥的25%化合物（1-1):PVP(空心圓圈）、3mg/kg口服定量給藥的25%化合物（1-1):HPMCAS-MG (空心三角形)和3mg/kg 口服定量給藥的50 %化合物（I -1): HPMCAS-MG (空心倒三角）的血 漿濃度對時(shí)間的曲線。插圖描繪了在半對數(shù)標(biāo)度上繪制的相同的數(shù)據(jù)；
[0047]圖8示出了化合物（1-1)作為25%化合物（I-I)=PVP(空心圓圈）、25%化合物（1-1): HPMCAS-MG(空心三角形)和50 %化合物（1-1): HPMCAS-MG(空心倒三角)在3mg/kg 口服定 量給藥后的血漿濃度對時(shí)間的曲線。插圖描繪了在半對數(shù)標(biāo)度上繪制的相同的數(shù)據(jù)；
[0048]圖9示出了在穩(wěn)定性測試時(shí)間為0時(shí)，化合物（1-1)在HPMCAS-MG中的固體分散體的 X射線粉末衍射圖譜；
[0049]圖10示出了在40 °C和75 %相對濕度的環(huán)境下暴露1個(gè)月后，化合物（1-1)在 HPMCAS-MG中的固體分散體的X射線粉末衍射圖譜；
[0050]圖11示出了在40 °C和75 %相對濕度的環(huán)境下暴露2個(gè)月后，化合物（1-1)在 HPMCAS-MG中的固體分散體的X射線粉末衍射圖譜；
[0051 ]圖12示出了在40 °C和75 %相對濕度的環(huán)境下暴露3個(gè)月后，化合物（1-1)在 HPMCAS-MG中的固體分散體的X射線粉末衍射圖譜；
[0052] 圖13A示出了用化合物（1-1)和各種化合物聯(lián)合處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì) 胞系48小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0053] 圖13B示出了用氮雜胞苷和化合物（1-1)聯(lián)合處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞 系48小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0054] 圖13C示出了用帕比司他和化合物（1-1)聯(lián)合處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞 系48小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0055] 圖14A示出了用氮雜胞苷處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞系48小時(shí)之后依次用 化合物（I -1)處理48小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0056] 圖14B示出了用氮雜胞苷處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞系72小時(shí)之后依次用 化合物（I -1)處理48小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0057] 圖14B示出了用氮雜胞苷處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞系48小時(shí)之后依次用 化合物（1-1)處理24小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0058] 圖14C示出了用氮雜胞苷處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞系72小時(shí)之后依次用 化合物（I -1)處理48小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0059] 圖14D示出了用氮雜胞苷處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞系之后依次用化合物 (1-1)處理后的聯(lián)合指數(shù)值的總結(jié)；
[0060] 圖15A示出了用帕比司他處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞系48小時(shí)之后依次用 化合物（I -1)處理48小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0061 ] 圖15B示出了用帕比司他處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞系72小時(shí)之后依次用 化合物（1-1)處理24小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0062] 圖15C示出了用帕比司他處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞系72小時(shí)之后依次用 化合物（I -1)處理48小時(shí)后的聯(lián)合指數(shù)值；
[0063] 圖15D示出了用帕比司他處理HL60、U937、Jurkat和K562細(xì)胞系之后依次用化合物 (1-1)處理后的聯(lián)合指數(shù)值的總結(jié)；
[0064]圖16A示出了用化合物（1-1)與氮雜胞苷或帕比司他聯(lián)合處理HL60細(xì)胞系24小時(shí) 后，HL60細(xì)胞系中處于subGl的細(xì)胞百分比；
[0065]圖16B示出了用化合物（1-1)與氮雜胞苷或帕比司他聯(lián)合處理K562細(xì)胞系24小時(shí) 后，K562細(xì)胞系中處于subGl的細(xì)胞百分比；
[0066]圖17A示出了用化合物（1-1)與氮雜胞苷或帕比司他聯(lián)合處理HL60細(xì)胞系24小時(shí) 后，HL60細(xì)胞系中cMYC、切割的胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)、切割的PARP(cleaved PARP)、p21和β肌動(dòng)蛋白的蛋白質(zhì)印跡圖；
[0067]圖17Β示出了用化合物（1-1)與氮雜胞苷或帕比司他聯(lián)合處理Jurkat細(xì)胞系24小 時(shí)后，Jurkat細(xì)胞系中cMYC、切割的胱天蛋白酶3、切割的PARP、ρ21和β肌動(dòng)蛋白的蛋白質(zhì)印 跡圖；
[0068]圖17C示出了用化合物（1-1)與氮雜胞苷或帕比司他聯(lián)合處理U937細(xì)胞系24小時(shí) 后，U937細(xì)胞系中cMYC、切割的胱天蛋白酶3、切割的PARP、p21和抑幾動(dòng)蛋白的蛋白質(zhì)印跡 圖；以及
[0069]圖17D示出了用化合物（1-1)與氮雜胞苷或帕比司他聯(lián)合處理Κ562細(xì)胞系24小時(shí) 后，Κ562細(xì)胞系中cMYC、切割的胱天蛋白酶3、切割的PARP、p21和抑幾動(dòng)蛋白的蛋白質(zhì)印跡 圖。
[0070] 發(fā)明詳述
[0071] 現(xiàn)在，下文將參照附圖和實(shí)施例來更全面地描述本發(fā)明的主題，所述附圖和實(shí)施 例示出了代表性的實(shí)施方案。但是，本發(fā)明的主題可以以不同的形式體現(xiàn)，并且不應(yīng)該解釋 成局限于本發(fā)明列出的實(shí)施方案。提供這些實(shí)施方案旨在描述并使本領(lǐng)域的技術(shù)人員能 夠?qū)嵤?。除非另有說明，否則本發(fā)明所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語都具有所述主題所屬技術(shù) 領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常所理解的相同的含義。本發(fā)明中所提及的所有公開、專利申請、專 利和其他參考文獻(xiàn)均以引用的方式全文并入本文中。
[0072] I.定義
[0073] 本文所用的術(shù)語"烷基"是指飽和的直鏈或支鏈烴。
[0074]術(shù)語"取代的烷基"是指具有一個(gè)或多個(gè)取代基的烷基部分，其中所述的取代基替 代了烴主鏈上的氫或者一個(gè)或多個(gè)碳。
[0075] 無論術(shù)語"烯基"是單獨(dú)使用還是作為取代基的一部分(例如"&-4烯基(芳基)"）使 用，都是指具有至少一個(gè)碳-碳雙鍵部分的部分不飽和支鏈或直鏈一價(jià)烴基團(tuán)，其中所述的 雙鍵是通過由母體烷基分子的兩個(gè)相鄰碳原子的每個(gè)碳原子上除去一個(gè)氫原子而得到的， 并且所述基團(tuán)是通過由一個(gè)碳原子上除去一個(gè)氫原子而得到的。原子可以在雙鍵周圍以順 式(Z)或反式(E)構(gòu)象來排布。典型的烯基基團(tuán)包括但不限于乙烯基、丙烯基、烯丙基(2-丙 烯基）、丁烯基等。例子包括C2-8烯基或C2-4烯基。
[0076] 術(shù)語"CG-k)"（其中j和k為整數(shù)，表示碳原子的指定數(shù)量)是指烷基以包含j至k個(gè)碳 原子(包含端值）的前置代號的腳注來顯示的烷基、烯基、炔基、烷氧基或環(huán)烷基基團(tuán)，或者 指基團(tuán)中的烷基部分。例如Ca-4)表示包含1、2、3或4個(gè)碳原子的基團(tuán)。
[0077]如本文所用，術(shù)語"鹵代"或"鹵素"是指F、Cl、Br或I。
[0078] 術(shù)語"可藥用的鹽"是本領(lǐng)域公認(rèn)的，并且是指化合物的相對無毒性的無機(jī)酸和有 機(jī)酸加成鹽，或者有機(jī)堿或無機(jī)堿加成鹽，包括(例如)在本發(fā)明的組合物中所包含的那些。
[0079] 如本文所用，術(shù)語"固體分散體"是指一組固體產(chǎn)物，其由至少兩種不同的組分組 成，通常為親水性載體和疏水性藥品(活性成分）。
[0080] 術(shù)語"手性的"是本領(lǐng)域公認(rèn)的，并且是指具有鏡像對應(yīng)部分的非重疊性性質(zhì)的分 子，而術(shù)語"非手性"是指可重疊在它們鏡像對應(yīng)部分上的分子。"前手性分子"是指在特定 的過程中具有轉(zhuǎn)化成手性分子的潛力的分子。
[0081] 符號用于表示鍵，其可以是單鍵、雙鍵或三鍵。
[0082] 術(shù)語"對映異構(gòu)體"和用于描述對映異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)式意指包含"純的"對映異構(gòu)體， 其不包含光學(xué)異構(gòu)體以及對映異構(gòu)體及其光學(xué)異構(gòu)體的混合物，其中對映異構(gòu)體以對映異 構(gòu)體過量而存在，例如至少10%、25%、50%、75%、90%、95%、98%或99%對映異構(gòu)體過 量。
[0083] 當(dāng)在本文中使用術(shù)語"立體異構(gòu)體"時(shí)，由所有的幾何異構(gòu)體、對映異構(gòu)體或非對 映異構(gòu)體組成。本發(fā)明涵蓋了這些化合物和它們的混合物的多種立體異構(gòu)體。此外，所公開 的化合物的構(gòu)象異構(gòu)體和旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體也被包括在內(nèi)。
[0084] 如本文所用，術(shù)語"立體選擇合成"是指這樣的化學(xué)或酶反應(yīng)，其中單一的反應(yīng)物 在建立新的立構(gòu)中心的過程中或者在轉(zhuǎn)化現(xiàn)有的立構(gòu)中心的過程中形成了立體異構(gòu)體的 不均勻的混合物，并且這些反應(yīng)是本領(lǐng)域公知的。立體選擇合成涵蓋了對映選擇性和非對 映選擇性的轉(zhuǎn)化。例如參見Carreira,E.M.和Kvaerno,L. ,Classics in Stereoselective Synthesis,Wiley-VCH:Weinheim，2009。
[0085] 術(shù)語"噴霧干燥"是指其中涉及將供料懸液或溶液霧化成小滴并在處理室(其中具 有用于蒸發(fā)的強(qiáng)驅(qū)動(dòng)力，例如熱干氣、部分真空或它們的組合）中快速除去混合物中的溶劑 的工藝。
[0086] 如本文所用，術(shù)語"治療有效量"是指這樣的任何量，與未接受此量的噻吩并三唑 并二氮雜罩或者任何其他藥物活性劑的相應(yīng)患者相比，該量的本發(fā)明的噻吩并三唑并二氮 雜罩或者任何其他藥物活性劑改善性地治療、治愈、預(yù)防或減輕疾病、病癥或副作用，或者 降低疾病或病癥的進(jìn)展的速度。
[0087] 術(shù)語"約"是指+/-10 %。
[0088] 在本申請及隨附的權(quán)利要求書的全文中，除非上下文中必須另外說明，否則詞語 "包括"或其變體(例如"包含"或"包含有"）都應(yīng)該解釋為包括所述的整數(shù)或步驟、或者一組 整數(shù)或步驟，并且但不排除任何其他的整數(shù)或步驟、或一組整數(shù)或步驟。
[0089] 目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，下文所述的式（1)的噻吩并三唑并二氮雜章化合物可以與可藥用 的聚合物一同配制為固體分散體，從而提供可以使藥物組分由胃腸道高度地吸收至血液循 環(huán)中的口服制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為醋酸羥丙甲纖維素琥珀酸酯(也稱 為醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯或HPMCAS)。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為聚乙 烯吡咯烷酮(PVP)。
[0090] 在一些實(shí)施方案中，醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯(HPMCAS)可包括:具有9%乙 ?；?11 %琥珀?；腗級(例如，平均粒徑為5μπι的HPMCAS (即，HPMCAS-MF，細(xì)粉級)或平均 粒徑為1mm的HPMCAS(即，HPMCAS-MG，顆粒級））；具有12 %乙?；?6 %琥珀?；腍級(例如， 平均粒徑為5μπι的HPMCAS(即，HPMCAS-HF，細(xì)粉級）或平均粒徑為1mm的HPMCAS(即，HPMCAS-HG，顆粒級））；以及具有8 %乙?；?15 %琥珀?；腖級（例如，平均粒徑為5μπι的HPMCAS (即，HPMCAS-LF，細(xì)粉級)或平均粒徑為1mm的HPMCAS(即，HPMCAS-LG，顆粒級））。
[0091] 在一些實(shí)施方案中，聚乙烯吡咯烷酮的分子量可為約2,50〇CKollidon 012PF，重 均分子量在2，000至3，000之間）、約9，000(KolHdoa?17PF，重均分子量在7，000至11，000 之間）、約25,000 (丨(〇丨丨idon? 25,重均分子量在28,000至34,000之間）、約50,000( 1〈〇川<_'1〇11?30，重均分子量在44,000至54,000之間）和約1，250,000( 1^〇丨丨丨(1〇丨1泡90或 1(0] lidon? 90F，重均分子量在 1，000，000至 1，500，000之間）。
[0092] II.治療方法
[0093] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本公開提供了治療哺乳動(dòng)物中白血病的方法，包括:向需要此 類治療的患者施用藥學(xué)可接受的量的組合物，該組合物包含根據(jù)第III、IV、V、VI和VII部分 描述的組合物的固體分散體。
[0094] 在一個(gè)實(shí)施方案中，白血病獨(dú)立地選自由以下疾病構(gòu)成的組:急性淋巴細(xì)胞性白 血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)(或急性成髓細(xì)胞性白血?。?、慢性淋巴細(xì)胞性白血病 (CLL)和慢性骨髓性白血病(CML)。
[0095] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的治療白血病的方法，包括向需要此類治療的患 者施用有效量的根據(jù)式（1)的化合物或其可藥用的鹽，其中式（1)的化合物或其可藥用的鹽 以及至少一種其他的治療劑同時(shí)或依次施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)式（1)的化合物以及 至少一種其他的治療劑能夠同時(shí)或依次施用。在一些實(shí)施方案中，該聯(lián)合產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。在 一個(gè)實(shí)施方案中，所述其他的治療劑獨(dú)立地選自由以下化合物構(gòu)成的組:表觀遺傳調(diào)節(jié)劑、 糖皮質(zhì)激素、m-TOR抑制劑、HDAC-抑制劑、去甲基化試劑、蒽環(huán)霉素、胞嘧啶核苷的類似物和 細(xì)胞毒性藥物。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，去甲基化試劑為地西他濱。在另一個(gè)這樣的實(shí)施 方案中，HDAC-抑制劑為伏立諾他或帕比司他。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，mTOR抑制劑為 依維莫司。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，糖皮質(zhì)激素為地塞米松。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案 中，細(xì)胞毒性藥物選自由阿糖孢苷或甲氨蝶呤構(gòu)成的組。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，胞嘧 啶核苷的類似物為氮雜胞苷。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，蒽環(huán)霉素為道諾霉素。
[0096] 在一些實(shí)施方案中，本公開提供了治療哺乳動(dòng)物白血病的方法，包括：向需要的患 者施用藥學(xué)可接受的量的組合物，該組合物包含根據(jù)第III、IV、V和VI部分描述的組合物的 固體分散體。
[0097] 急性骨髓性白血病包括血液癌和骨髓癌，其中骨髓癌產(chǎn)生異常的成髓細(xì)胞、紅血 細(xì)胞或血小板。急性骨髓性白血病包括但不限于由世界衛(wèi)生組織分類的急性骨髓性白血病 亞類以及由法國-美國-英國（FAB)合作組織分類的急性骨髓性白血病亞類。在一些實(shí)施方 案中，急性骨髓性白血病可為混合譜系白血病(MLL)融合陽性急性骨髓性白血病、JAK2突變 的真性紅細(xì)胞增多癥轉(zhuǎn)化的（p〇st_JAK2 mutated polycythemia vera)急性骨髓性白血 病、或骨髓增生異常綜合征轉(zhuǎn)化(P〇st-myelodysplastic syndrome)的急性骨髓性白血病。 在一些實(shí)施方案中，急性骨髓性白血病可以為急性嗜堿細(xì)胞性白血病、急性全髓增殖癥伴 骨髓纖維化或髓樣肉瘤。在一些實(shí)施方案中，急性骨髓性白血病可以為急性髓細(xì)胞白血病 (微分化型）、急性髓細(xì)胞白血病(不伴成熟）、急性髓細(xì)胞白血病(伴粒細(xì)胞成熟）、急性早幼 粒細(xì)胞白血病、急性粒單核細(xì)胞白血病、粒單核細(xì)胞伴隨骨髓嗜酸性粒細(xì)胞增多癥、急性成 單核細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、急性紅細(xì)胞白血病或急性巨核細(xì)胞白血病。在一些 實(shí)施例中，急性骨髓性白血病是伴隨復(fù)發(fā)性遺傳異常的急性骨髓性白血病、伴隨多系發(fā)育 異常的急性骨髓性白血病、或治療相關(guān)的急性骨髓性白血病。伴隨復(fù)發(fā)性遺傳異常的急性 骨髓性白血病包括但不限于，AML伴隨t(8;21)(q22;q22)、AML伴隨in V(16)(pl3q22)或t (16;16)(?13;922)，41^伴隨七（15;17)(922;912)、以及41^伴隨11923異常。治療相關(guān)的八1^ 包括但不限于烷化劑相關(guān)的AML和拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑相關(guān)的AML。
[0098] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的治療白血病的方法，包括向需要此類治療的患 者聯(lián)合施用根據(jù)式（1)的化合物或其可藥用的鹽以及至少一種其他的治療劑，其中式（1)的 化合物或其可藥用的鹽以及至少一種其他的治療劑同時(shí)或依次施用。在一個(gè)實(shí)施方案中， 式（1)的化合物以及其他的治療劑同時(shí)或依次施用。在一些實(shí)施方案中，該聯(lián)合產(chǎn)生協(xié)同效 應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述其他的治療劑獨(dú)立地選自由以下化合物構(gòu)成的組:表觀遺傳調(diào) 節(jié)劑、糖皮質(zhì)激素、m-T0R抑制劑、HDAC-抑制劑、去甲基化試劑、蒽環(huán)霉素、胞嘧啶核苷的類 似物和細(xì)胞毒性藥物。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，去甲基化試劑為地西他濱。在另一個(gè)這樣 的實(shí)施方案中，HDAC-抑制劑為伏立諾他或帕比司他。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，mTOR抑 制劑為依維莫司。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，糖皮質(zhì)激素為地塞米松。在另一個(gè)這樣的實(shí) 施方案中，細(xì)胞毒性藥物選自由阿糖孢苷或甲氨蝶呤構(gòu)成的組。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案 中，胞嘧啶核苷的類似物為氮雜胞苷。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，蒽環(huán)霉素為道諾霉素。
[0099] 在一些實(shí)施方案中，本公開提供了治療哺乳動(dòng)物慢性急性骨髓性白血病，包括：向 需要的患者施用藥學(xué)可接受的量的組合物，該組合物包含根據(jù)第III、IV、V和VI部分描述的 組合物的固體分散體。在一些實(shí)施方案中，該慢性急性骨髓性白血病可以處于慢性期。在其 他實(shí)施方案中，該慢性急性骨髓性白血病可以處于加速期。在另一些實(shí)施方案中，該慢性急 性骨髓性白血病可以處于急變期。
[0100] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的治療慢性急性骨髓性白血病的方法，包括向需 要此類治療的患者聯(lián)合施用有效量的根據(jù)式（1)的化合物或其可藥用的鹽以及至少一種其 他的治療劑，其中式（1)的化合物或其可藥用的鹽以及至少一種其他的治療劑同時(shí)或依次 施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式（1)的化合物以及其他的治療劑同時(shí)或依次施用。在一些實(shí)施 方案中，該聯(lián)合產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述其他的治療劑獨(dú)立地選自由以下化 合物構(gòu)成的組:表觀遺傳調(diào)節(jié)劑、糖皮質(zhì)激素、m-TOR抑制劑、HDAC-抑制劑、去甲基化試劑、 蒽環(huán)霉素、胞嘧啶核苷的類似物和細(xì)胞毒性藥物。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，去甲基化試劑 為地西他濱。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，HDAC-抑制劑為伏立諾他或帕比司他。在另一個(gè) 這樣的實(shí)施方案中，mTOR抑制劑為依維莫司。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，糖皮質(zhì)激素為地 塞米松。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，細(xì)胞毒性藥物選自由阿糖孢苷或甲氨蝶呤構(gòu)成的組。 在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，胞嘧啶核苷的類似物為氮雜胞苷。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案 中，蒽環(huán)霉素為道諾霉素。
[0101] 在一些實(shí)施方案中，本公開提供了治療哺乳動(dòng)物急性淋巴細(xì)胞性白血病的方法， 包括：向需要的患者施用藥學(xué)可接受的量的組合物，該組合物包含根據(jù)第III、IV、V和VI部 分描述的組合物的固體分散體。在一些實(shí)施方案中，急性淋巴細(xì)胞性白血病可被分類為 ALL-Ll。在其他實(shí)施方案中，急性淋巴細(xì)胞性白血病可被分類為ALL-L2。在其他實(shí)施方案 中，急性淋巴細(xì)胞性白血病可被分類為ALL-L3。在一些實(shí)施方案中，急性淋巴細(xì)胞性白血病 可被劃分類前體B急性淋巴細(xì)胞性白血病或前B細(xì)胞。在其他實(shí)施方案中，急性淋巴細(xì)胞性 白血病可被分類為前體T急性淋巴細(xì)胞性白血病或前T細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，前體B急性 淋巴細(xì)胞性白血病可具有細(xì)胞遺傳學(xué)亞型t(12;21)(pl2，q22)TEL/AML-l;t(l;19)(q23; pl3)PBX/E2A;t(9;22)(q34;qll)ABL/BCR;或 T(V，ll)(V;q23)V/MLL。在一些實(shí)施方案中， 急性淋巴細(xì)胞性白血病為Burkitt's白血病。在一些實(shí)施方案中，急性淋巴細(xì)胞性白血病為 雙表型急性白血病。
[0102] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的治療急性淋巴細(xì)胞性白血病的方法，包括向需 要此類治療的患者聯(lián)合施用的有效量的根據(jù)式（1)的化合物或其可藥用的鹽以及至少一種 其他的治療劑，其中式（1)表示的化合物或其可藥用的鹽以及至少一種其他的治療劑同時(shí) 或依次施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，式（1)表示的化合物以及其他的治療劑同時(shí)或依次施用。 在一些實(shí)施方案中，該聯(lián)合產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，其他的治療劑獨(dú)立地選自由 以下化合物構(gòu)成的組:表觀遺傳調(diào)節(jié)劑、糖皮質(zhì)激素、m-TOR抑制劑、HDAC-抑制劑、去甲基化 試劑、蒽環(huán)霉素、胞嘧啶核苷的類似物和細(xì)胞毒性藥物。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，去甲基 化試劑為地西他濱。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，HDAC-抑制劑為伏立諾他或帕比司他。在 另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，mTOR抑制劑為依維莫司。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，糖皮質(zhì)激 素為地塞米松。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，細(xì)胞毒性藥物選自由阿糖孢苷或甲氨蝶呤構(gòu) 成的組。在另一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，胞嘧啶核苷的類似物為氮雜胞苷。在另一個(gè)這樣的實(shí) 施方案中，蒽環(huán)霉素為道諾霉素。
[0103] 在一些實(shí)施方案中，治療急性骨髓性白血病、慢性急性骨髓性白血病或急性淋巴 細(xì)胞性白血病的方法利用了式（1)的噻吩并三唑并二氮雜章化合物(包括其任意的鹽、異構(gòu) 體、對映異構(gòu)體、消旋物、水合物、溶劑化物、代謝物和多型變體），其中：
[0104]
[0105] 其中R1為具有1至4個(gè)碳的烷基;R2為氫原子、鹵素原子、或任選地被鹵素原子或羥 基取代的具有1至4個(gè)碳的烷基;R 3為鹵素原子;任選地被鹵素原子、具有1至4個(gè)碳的烷基、 具有1至4個(gè)碳的烷氧基、或氰基取代的苯基;一 NR5 - (CH2)m-R6,其中R5為氫原子、或具有1 至4個(gè)碳的烷基，m為0至4的整數(shù)，并且R 6為任選地被鹵素原子取代的苯基或吡啶基;或-NR7 一 CO - (CH2)n-R8,其中R7為氫原子或具有1至4個(gè)碳的烷基，η為0至2的整數(shù)，并且R 8為任選 地被鹵素原子取代的苯基或吡啶基;并且R4為一(CH2) a-CO-NH-R9，其中a為1至4的整數(shù)， 并且R9為具有1至4個(gè)碳的烷基;具有1至4個(gè)碳的羥烷基;具有1至4個(gè)碳的烷氧基;或任選地 被具有1至4個(gè)碳的烷基、具有1至4個(gè)碳的烷氧基、氨基或羥基取代的苯基或吡啶基；或一 (CH 2) b-COOR1t3，其中b為1至4的整數(shù)，并且R1t3為具有1至4個(gè)碳的烷基。
[0106] 在一些實(shí)施方案中，式（1)選自式（IA)，其可藥用的鹽或水合物；以及可藥用的聚 合物：
[0107]
[0108] 其中，X為鹵素，R1SC1-C4烷基，R2SC 1-C4烷基，a為1至4的整數(shù)，R3SC1-C4烷基、θα 羥烷基X1-C4 烷氧基、任選地具有取代基的苯基、或任選地具有取代基的雜芳基。在一個(gè) 這樣的實(shí)施方案中，將噻吩并三唑并二氮雜_章化合物配制成含有無定形噻吩并三唑并二 氮雜章合物的固體分散體。
[0109] 在本發(fā)明中，"治療方案"或"治療"是指向被醫(yī)生診斷罹患AML、CML或ALL的患者或 有風(fēng)險(xiǎn)發(fā)展為AMUCML或ALL(的患者)施用本發(fā)明的活性組分的行為或行為過程，其目的在 于(例如)減輕AML、CML或ALL或病癥，防止AML、CML或ALL或病癥的發(fā)作，或恢復(fù)到AML、CML 或AML開始之前的狀態(tài)。
[0110] 在本發(fā)明的方法中，與式（1)的噻吩并三唑并二氮雜章聯(lián)合使用的合適的去甲基 化試劑包括但不限于下表A中所列出的去甲基化試劑。
[0114] 在本發(fā)明的方法中，與式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩聯(lián)合使用的合適的組蛋白 脫乙酰酶(HDAC)抑制劑包括但不限于下表B中所列出的HDAC抑制劑。
[0115] 表B:













[0136] III.噻吩并三唑并二氮雜罩合物：
[0137] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的制劑中使用的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物由式 (1)表示(包括其任意的鹽、異構(gòu)體、對映異構(gòu)體、消旋物、水合物、溶劑化物、代謝物和多型 變體）：
[0138]
[0139] 其中R1為具有1至4個(gè)碳的烷基;R2為氫原子、鹵素原子、或任選地被鹵素原子或羥 基取代的具有1至4個(gè)碳的烷基;R 3為：鹵素原子;任選地被鹵素原子、具有1至4個(gè)碳的烷 基、具有1至4個(gè)碳的烷氧基、或氰基取代的苯基;一 NR5-(CH2)m-R6,其中R5為氫原子、或具 有1至4個(gè)碳的烷基，m為0至4的整數(shù)，并且R 6為任選地被鹵素原子取代的苯基或吡啶基;或-NR7-CO - (CH2)n-R8,其中R7為氫原子或具有1至4個(gè)碳的烷基，η為0至2的整數(shù)，并且R 8為任 選地被鹵素原子取代的苯基或吡啶基;并且R4為:一(CH2)a-CO-NH-R 9,其中a為1至4的整 數(shù)，并且R9為具有1至4個(gè)碳的烷基;具有1至4個(gè)碳的羥烷基;具有1至4個(gè)碳的烷氧基;或任 選地被具有1至4個(gè)碳的烷基、具有1至4個(gè)碳的烷氧基、氨基或羥基取代的苯基或吡啶基;或 -(CH 2) b-COOR1t3，其中b為1至4的整數(shù)，并且R1t3為具有1至4個(gè)碳的烷基。
[0140] 在一個(gè)實(shí)施方案中，合適的烷基包括含有1個(gè)碳原子至4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷 基基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，合適的烷基包括含有1個(gè)碳原子至3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷 基基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，合適的烷基包括含有1個(gè)碳原子至2個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷 基基團(tuán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，示例性的烷基基團(tuán)包括但不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、正 丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基。在一個(gè)實(shí)施方案中，示例性的烷基基團(tuán)包括但不限于甲基、 乙基、丙基、異丙基、甲基-1-丙基和2_甲基_2_丙基。
[0141] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了本發(fā)明所述的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物的 可藥用的的鹽、溶劑化物(包括水合物)和同位素標(biāo)記的形式。在一個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三 唑并二氮雜罩化合物的可藥用的鹽包括與無機(jī)酸形成的酸加成鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，噻 吩并三唑并二氮雜:草的可藥用的無機(jī)酸加成鹽包括鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、磷酸、偏磷酸、硝 酸和硫酸的鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二氮雜罩化合物的可藥用的鹽包括與有 機(jī)酸形成的酸加成鹽。在一個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二氮雜罩化的可藥用的有機(jī)酸加 成鹽包括以下酸的鹽:酒石酸、乙酸、三氟乙酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、富馬酸、苯甲酸、甲 酸、丙酸、乙醇酸、葡萄糖酸、馬來酸、琥珀酸、樟腦硫酸、異硫羰酸（isothionic acid)、粘 酸、龍膽酸、異煙酸、糖二酸、葡萄糖醛酸、糠酸、谷氨酸、抗壞血酸、鄰氨基苯甲酸、水楊酸、 苯乙酸、扁桃酸、撲酸(帕莫酸）、甲烷磺酸、乙烷磺酸、泛酸、硬脂酸、磺胺酸、褐藻酸、半乳糖 醛酸和芳基磺酸(例如苯磺酸和4-甲基苯磺酸）。
[0142] 本發(fā)明提供了本發(fā)明所述的噻吩并三唑并二氮雜章化合物的藥學(xué)可接受的同位 素標(biāo)記形式，其中一個(gè)或多個(gè)原子被原子數(shù)相同、但是原子量或質(zhì)量數(shù)與天然常見的原子 量或質(zhì)量數(shù)不同的原子所替代。適于包含在噻吩并三唑并二氮雜罩化合物中的同位素的實(shí) 例包括以下元素的同位素:氫，例如 2H和3H;碳，例如nC、13C和14C;氯，例如 36Cl;氟，例s如18F; 碘，例如123I和125I;氮，例如 13N和15N;氧，例如150、170和18O;以及硫，例如 35S。通?？梢酝ㄟ^本 領(lǐng)域那些技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)來制備噻吩并三唑并二氮雜章化合物的同位素標(biāo)記形 式。
[0143] 式（1)所示化合物的某些同位素標(biāo)記形式(例如引入了放射性同位素的那些)可用 于藥品和/或底物的組織分布研究中。由于放射性同位素氚( 3H)和碳-H(14C)易于引入和即 時(shí)的檢測手段，所以它們特別適用于上述目的。使用較重的同位素(例如氘( 2H))進(jìn)行取代 可以提供由于更廣的代謝穩(wěn)定性而產(chǎn)生的某些治療益處，例如體內(nèi)半衰期增長或者劑量需 求降低，因此，在一些情況下可以是優(yōu)選的。使用發(fā)射正電子的同位素（例如 nC、18F、150和 13N)進(jìn)行取代可以用于正電子發(fā)射斷層成像術(shù)研究(PET)中，以用于檢測底物受體的占用。
[0144] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明公開的噻吩并三唑并二氮雜章化合物可以與藥學(xué)可接 受的溶劑形成溶劑化以及非溶劑化的形式存在。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，溶劑化物 為溶質(zhì)(在這種情況下為本發(fā)明所述的噻吩并三唑并二氮雜章化合物)和溶劑形成的化學(xué) 計(jì)量可變的復(fù)合物。優(yōu)選的是此類溶劑不會干擾溶質(zhì)(噻吩并三唑并二氮雜章化合物)的生 物活性。用于形成溶劑化物的合適的溶劑的實(shí)例包括但不限于水、甲醇、二甲基亞砜、乙醇 和乙酸。所用的合適的溶劑為藥學(xué)可接受的溶劑。合適的是，所用的溶劑為水。在一個(gè)實(shí)施 方案中，本發(fā)明所述的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物的藥學(xué)可接受的溶劑化物包括乙醇 溶劑化物、異丙醇溶劑化物、二氧戊烷溶劑化物、四氫呋喃溶劑化物、二甲基亞砜溶劑化物、 叔丁醇溶劑化物、2-丁醇溶劑化物、二氧戊烷溶劑化物、1，3_二甲基_3,4,5,6_四氫-2(1H)_ 嘧啶酮（"DMPU"）溶劑化物、I，3_二甲基咪唑啉酮（"DMI"）溶劑化物和I，3_二甲基咪唑啉酮 ("DMP"）溶劑化物、或它們的混合物。
[0145] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物可以包含一個(gè)或 多個(gè)手性中心和/或雙鍵，因此可以以幾何異構(gòu)體、對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體的形式存 在?？梢愿鶕?jù)Cahn-Ingold-Prelog規(guī)則來命名噻吩并三唑并二氮雜罩.化合物的對映異構(gòu)體 和非對映異構(gòu)體，所述的規(guī)則將"R"或"S"描述符指定給每個(gè)立構(gòu)中心(通常也稱為手性中 心），并將E或Z描述符指定給每個(gè)碳-碳雙鍵（以命名幾何異構(gòu)體），這樣可以通過在系統(tǒng)名 中包含描述符而獨(dú)特地描述整個(gè)分子的構(gòu)造。
[0146] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明所述的噻吩并三唑并二氮雜章化合物可以以外消旋混 合物或外消旋物的形式存在，其可以包含手性分子的等量的左旋和右旋對映異構(gòu)體?？梢?通過前綴（±)_或dl-來表示此類外消旋混合物，表明右旋和左旋異構(gòu)體的相等（1:1)的混 合物。此外，前綴rac-(或racem-)或符號RS和SR也可以用于命名外消旋混合物。
[0147] 此外，由取代基圍繞碳-碳雙鍵的排列或者取代基圍繞環(huán)烷基或雜環(huán)的排列而產(chǎn) 生的幾何異構(gòu)體也可以存在于本發(fā)明的化合物中。在一些實(shí)施方案中，符號二=可用于 表示可以為單鍵、雙鍵或三鍵的鍵。圍繞碳-碳雙鍵的取代基可以命名為呈"Z"或"E"構(gòu)型， 其中根據(jù)IUPAC標(biāo)準(zhǔn)使用術(shù)語"Z"和"E"。除非另有說明，否則描述雙鍵的結(jié)構(gòu)涵蓋了 "Z"和 "E"異構(gòu)體。圍繞碳-碳雙鍵的取代基也可以稱為"順式"或"反式("，其中"順式"表示取代基 在雙鍵的同側(cè)上，而"反式"表示取代基在雙鍵的對側(cè)上。取代基圍繞碳環(huán)的排列也可以命 名為"順式"或"反式"。術(shù)語"順式"表示取代基在環(huán)的平面的同側(cè)上，而術(shù)語"反式"表示取 代基在環(huán)的平面的對側(cè)上。其中取代基置于環(huán)的平面的同側(cè)和對側(cè)上的化合物所形成的 混合物命名為"順式/反式"或"Z/E"。
[0148] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物可以以單晶或 多晶形式或多型物存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜罩化合 物包含其無定形形式。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物 包含其單一多晶型物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜罩化合 物包含其多晶型物的混合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述化合物為結(jié)晶形式。
[0149] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜草化合物可以以單一對 映異構(gòu)體或者對映異構(gòu)體富集形式存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑 并二氮雜草化合物以對映異構(gòu)體過量百分比（entiomeric excess)超過80%的形式存在。 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物以對映異構(gòu)體過量百分 比超過90%的形式存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜草化合 物以對映異構(gòu)體過量百分比超過98%的形式存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明所公開的噻 吩并三唑并二氮雜章化合物以對映異構(gòu)體過量百分比超過99 %的形式存在。在一個(gè)實(shí)施 方案中，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜革化合物以選自由至少10%、至少25%、至少 50%、至少75%、至少90 %、至少95 %、至少98%和至少99%所構(gòu)成的組中的對映異構(gòu)體過 量百分比的形式存在。
[0150] 對于一對映異構(gòu)體對而言，可以使用以下等式(等式（1))來計(jì)算對映異構(gòu)體El相 對于對映異構(gòu)體E2的對映異構(gòu)體過量百分比：
[0151] 對映異構(gòu)體El的過量百分比等式(1) (El+E2) v
[0152] 可以通過手性高效液相色譜(HPLC)、核磁共振(匪R)或任何其他合適的方法來測 定El和E2的相對量。在一些實(shí)施方案中，對映異構(gòu)體化合物的純度可以指對映異構(gòu)體El和 E2相對于其他材料的量，這些其他物質(zhì)特別包括副產(chǎn)物和/或未反應(yīng)的反應(yīng)物或試劑。
[0153] 在一些實(shí)施方案中，式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物包括但不限于噻吩并 三唑并二氮雜萆化合物（1-1)至（1-18)，其列于下表A中。
[0154] 本文將表A的化合物（1-1)也稱為0TX-015、0TX015或Y803。
[0155] 表Α:本發(fā)明的示例性化合物：

[0160]
[0161] 在一些實(shí)施方案中，式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜簞化合物包括：（i)(S)-2_ [4-(4-氯代苯基)-2,3,9_ 三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][l，2,4]三唑并 _[4,3_a][l，4]二氮雜 罩-6-基]-N-(4-羥苯基）乙酰胺或其二水合物；（i i) (S) - {4-(3 ' -氰基聯(lián)苯-4-基)-2，3，9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][l，2,4]三唑并[4,3-a][l，4]二氮雜罩-6-基}乙酸甲酯；（iii) (S)-{2,3,9-三甲基-4-(4-苯基氨基苯基)-6H-噻吩并[3,2-f][l，2,4]三唑并[4,3-a][l， 4]二氮雜章-6-基}乙酸甲酯；以及（iv)(S)-{2,3,9-三甲基-4-[4-(3-苯基丙?；被?苯 基]-6H-噻吩并[3,2-f-][l，2,4]三唑并[4,3-a][l，4]二氮雜罩-6-基}乙酸甲酯。
[0162] 在一些實(shí)施方案中，式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物包括（S)-2_[4-(4-氯代苯基)-2,3,9-三甲基-6H-噻吩并[3,2-捫[1，2，-4]三唑并[4,3- &][1，4]二氮雜罩_ 6-基]-N-(4-羥苯基）乙酰胺。
[0163] IV.制劑：
[0164] 式（1)所示的化合物在蓋倫組合物的常規(guī)給藥和制備方面表現(xiàn)出非常特有的困 難，特別包括藥物生物利用度以及患者間和患者內(nèi)的劑量應(yīng)答的可變性的特定問題，由此 需要針對幾乎水不溶性的所述化合物開發(fā)非常規(guī)的劑型。
[0165] 之前，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)可以利用載體丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-三甲基銨乙基甲基丙 稀酸酯氯化物共聚物(Eudragi t RS，由Rohm公司制造)將式（1)所示的化合物配置成固體分 散體，從而提供在下腸道中優(yōu)先釋放藥物組分以用于治療炎性腸病(例如潰瘍性結(jié)腸炎和 克羅恩?。┑目诜苿?2009年1月8日公開的美國專利申請20090012064A1)。通過多個(gè)實(shí)驗(yàn) (包括動(dòng)物試驗(yàn)），發(fā)現(xiàn)就炎性腸病而言，藥物在病變部位的釋放及其對炎性病變的直接作 用比其由胃腸道吸收至循環(huán)中更為重要。
[0166] 現(xiàn)在，意外地發(fā)現(xiàn)根據(jù)式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物、其可藥用的 鹽、溶劑化物(包含水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體以及同位素標(biāo)記的形式可以使用可藥用的 聚合物而配制成固體分散體，從而提供口服制劑，該口服制劑能夠使藥物組分由胃腸道高 度吸收至循環(huán)中，從而治療炎性腸病以及其他疾病。在狗和人類中的研究證明，與之前研發(fā) 的用于治療炎性腸病的Eudragit固體分散體制劑相比，所述這些固體分散體具有高的口服 生物利用度。
[0167] 固體分散體為改善水溶性差的藥物的口服生物利用度的一種手段。
[0168] 如本文所用，術(shù)語"固體分散體"是指一組固體產(chǎn)物，其包含至少2種不同的成分， 通常為親水性載體和疏水性藥物(根據(jù)式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物）?；谒幬?在分散體內(nèi)的分子排布，可以區(qū)分為6種不同類型的固體分散體。通常，固體分散體分為:簡 單低共熔混合物、固溶體、玻璃溶液和懸浮液、以及結(jié)晶載體中的無定形沉淀。此外，可存在 一些組合，例如在同一樣品中，一些分子可以成簇存在，而一些分子以分子形式分散。
[0169] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)式（1)的噻吩并三唑并二氮雜.罩化合物可以以分子形式 分散于無定形顆粒(簇)中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)式（1)的噻吩并三唑并二氮雜章化合 物可以以結(jié)晶顆粒形式分散。在一個(gè)實(shí)施方案中，載體可以是結(jié)晶的。在另一個(gè)實(shí)施方案 中，載體可以是無定形的。
[0170] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包含固體分散體的藥物組合物，其中所述固體 分散體由以下形成:根據(jù)式(1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物 (包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或其同位素標(biāo)記形式；以及可藥用的聚合物。在 一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為醋酸羥丙甲纖維素琥珀酸酯（也稱為醋酸羥丙基甲基 纖維素琥珀酸酯或HPMCAS)。在一個(gè)實(shí)施方案中，分散體中噻吩并三唑并二氮雜罩化合物與 醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯(HPMCAS)的重量比為1:3至1:1。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少 一部分噻吩并三唑并二氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施方案 中，噻吩并三唑并二氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一些實(shí)施方案中，固 體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg在130 °C至 140°C之間出現(xiàn)。在其他這樣的實(shí)施方案中，單一的Tg在約135°C出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方 案中，固體分散體在40°C、相對濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，在 固體分散體的X射線粉末衍射圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二 氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。就本申請的目的而言，"基本上不存在"是指在約21°2Θ下，在 無定形暈(amorphous halo)上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩.化合 物有關(guān)的衍射線。在一些實(shí)施方案中，醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯(HPMCAS)可包括:具 有9 %乙?；?11 %琥珀?；腗級(例如，平均粒徑為5μπι的HPMCAS (即，HPMCAS-MF，細(xì)粉級） 或平均粒徑為1mm的HPMCAS (即，HPMCAS-MG，顆粒級））；具有12 %乙?；?6 %琥珀酰基的H級 (例如，平均粒徑為5μπι的HPMCAS(即，HPMCAS-HF，細(xì)粉級）或平均粒徑為1mm的HPMCAS(即， HPMCAS-HG，顆粒級））；以及具有8 %乙?；?15 %琥珀?；腖級（例如，平均粒徑為5μπι的 HPMCAS(即，HPMCAS-LF，細(xì)粉級)或平均粒徑為1mm的HPMCAS(即，HPMCAS-LG，顆粒級））。
[0171] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包含式（1)所示的噻吩并三 唑并二氮雜罩化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu) 體或同位素標(biāo)記形式在可藥用的聚合物中的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚 合物為聚乙烯吡咯烷酮(也稱為聚維酮或PVP)。在一個(gè)實(shí)施方案中，分散體中噻吩并三唑并 二氮雜罩化合物與PVP的重量比為1:3至1: 1。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一部分噻吩并三唑并 二氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二 氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一些實(shí)施方案中，固體分散體表現(xiàn)出單 一拐點(diǎn)的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg在175°C至約185 °C之間出現(xiàn)。 在其他這樣的實(shí)施方案中，單一的Tg在約17%~出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散 體在40°C、相對濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，在固體分散體的X 射線粉末衍射圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜草化合物 有關(guān)的衍射線。就本申請的目的而言，"基本上不存在"是指在約21° 2Θ下，在無定形暈 (amorphous halo)上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜章化合物有關(guān)的衍 射線。在一些實(shí)施方案中，聚乙烯吡咯烷酮的分子量可為約2,500(K〇llid(m ?12PF，重均 分子量在2，000至3，000之間）、約9，000 (Kollidon? 17PF，重均分子量在7，000至11，000之 間）、約25，000(K〇:llM〇tt? 25，重均分子量在28，000至34，000之間）、約50，000( Kollidon? 30,重均分子量在44,000至54,000之間）和約 1，250,000 (Kollidon? 90或 Kol lidon?90F，重均分子量在 1，000,000至 1，500,000之間）。
[0172] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含無定形形式的式（1)所示的噻吩并 三唑并二氮雜草化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異 構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式與可藥用的聚合物的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚 合物為醋酸羥丙甲纖維素琥珀酸酯。在一個(gè)實(shí)施方案中，式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜 罩化合物與醋酸羥丙甲纖維素琥珀酸酯的重量比為1:3至1:1。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一 部分噻吩并三唑并二氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施方案 中，噻吩并三唑并二氮雜萆化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一些實(shí)施方案中，固 體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg在130 °C至 140°C之間出現(xiàn)。在其他這樣的實(shí)施方案中，單一的Tg在約135°C出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方 案中，固體分散體在40°C、相對濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，在 固體分散體的X射線粉末衍射圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二 氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。就本申請的目的而言，"基本上不存在"是指在約21° 2Θ下，在 無定形暈上不存在與結(jié)晶的式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜草化合物有關(guān)的衍射線。
[0173] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含無定形形式的式（1)所示的噻吩并 三唑并二氮雜草化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異 構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式與可藥用的聚合物的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚 合物為聚乙烯吡咯烷酮。在一個(gè)實(shí)施方案中，式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物與 聚乙烯吡咯烷酮的重量比為1:3至1:1。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一部分噻吩并三唑并二氮 雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二氮雜 罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一些實(shí)施方案中，固體分散體表現(xiàn)出單一拐 點(diǎn)的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg在175°C至約185°C之間出現(xiàn)。在其 他這樣的實(shí)施方案中，單一的Tg在約17%~下出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體 在40°C、相對濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，在固體分散體的X射 線粉末衍射圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物有 關(guān)的衍射線。就本申請的目的而言，"基本上不存在"是指在約21°2Θ下，在無定形暈上不存 在與結(jié)晶的式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。
[0174] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含結(jié)晶形式的式（1)所示的噻吩并三 唑并二氮雜罩化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu) 體或同位素標(biāo)記形式與可藥用的聚合物的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合 物為醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯。在一個(gè)實(shí)施方案中，式（1)所示的噻吩并三唑并二氮 雜章化合物與醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯的重量比為1:3至1:1。
[0175] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含結(jié)晶形式的式（1)所示的噻吩并三 唑并二氮雜章化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu) 體或同位素標(biāo)記形式與可藥用的聚合物的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合 物為聚乙烯吡咯烷酮。在一個(gè)實(shí)施方案中，式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物與聚 乙烯吡咯烷酮的重量比為1:3至1:1。
[0176] 在一些實(shí)施方案中，通過噴霧干燥來制備包含固體分散體的藥物組合物。
[0177] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含噴霧干燥的固體分散體，該固體分 散體由以下形成：式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物 (包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式，和可藥用的聚合物。在一個(gè) 實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合 物（1)與醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯的重量比為1: 3至1:1。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少 一部分噻吩并三唑并二氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施方案 中，噻吩并三唑并二氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一些實(shí)施方案中，固 體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg在130 °C至 140°C之間出現(xiàn)。在其他這樣的實(shí)施方案中，單一的Tg在約135°C出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方 案中，固體分散體在40°C、相對濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，在 固體分散體的X射線粉末衍射圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二 氮雜罩合物有關(guān)的衍射線。就本申請的目的而言，"基本上不存在"是指在約21° 2Θ下，在 無定形暈上不存在與結(jié)晶的式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。
[0178] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含噴霧干燥的固體分散體，該固體分 散體由以下形成：式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜章化合物或其可藥用的鹽、溶劑化物 (包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式和可藥用的聚合物。在一個(gè) 實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為聚乙烯吡咯烷酮。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物（1)與聚乙烯 吡咯烷酮的重量比為1:3至1:1。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一部分噻吩并三唑并二氮雜罩化 合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二氮雜罩化合 物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一些實(shí)施方案中，固體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻 璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg在175°C至185°C之間出現(xiàn)。在其他這樣的 實(shí)施方案中，單一的Tg在約179 °C出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體在40 °C、相對 濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，在固體分散體的X射線粉末衍射 圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜章化合物有關(guān)的衍射線。 就本申請的目的而言，"基本上不存在"是指在約21° 2Θ下，在無定形暈上不存在與結(jié)晶的式 (1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。
[0179] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含噴霧干燥的固體分散體，該固體分 散體由以下形成:無定形的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或其可藥用的鹽、溶 劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式和可藥用的聚合物。 在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯。在一個(gè)實(shí)施方案 中，式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物與醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯的重量 比為1:3至1: 1。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一部分噻吩并三唑并二氮雜罩北合物均勻地分散 于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二氮雜草化合物均勻地分散于 整個(gè)固體分散體中。在一些實(shí)施方案中，固體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度 (Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg在130°C至140°C之間出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方案中， 固體分散體在40°C、相對濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在其他這樣的實(shí)施方案中， 單一的Tg在約135Γ出現(xiàn)。在一些實(shí)施方案中，在固體分散體的X射線粉末衍射圖案中，基本 上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。就本申請的 目的而言，"基本上不存在"是指在約21° 2Θ下，在無定形暈上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的 噻吩并三唑并二氮雜章化合物有關(guān)的衍射線。
[0180] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含噴霧干燥的固體分散體，該固體分 散體由以下形成:無定形的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或其可藥用的鹽、溶 劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式和可藥用的聚合物。 在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為聚乙烯吡咯烷酮。在一個(gè)實(shí)施方案中，式（1)所示的 噻吩并三唑并二氮雜罩化合物與聚乙烯吡咯烷酮的重量比為1:3至1:1。在一個(gè)實(shí)施方案 中，至少一部分噻吩并三唑并二氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè) 實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二氮雜章化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一些實(shí)施 方案中，固體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg 在175°C至185°C之間出現(xiàn)。在其他這樣的實(shí)施方案中，單一的Tg在約179°C出現(xiàn)。在一些這 樣的實(shí)施方案中，固體分散體在40°C、相對濕度為75 %的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在一些實(shí) 施方案中，在固體分散體的X射線粉末衍射圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻 吩并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。就本申請的目的而言，"基本上不存在"是指在 約21°2Θ下，在無定形暈上不存在與結(jié)晶的式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜_草化合物有關(guān) 的衍射線。
[0181] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含噴霧干燥的固體分散體，該固體分 散體由以下形成:結(jié)晶形式的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或其可藥用的鹽、 溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式和可藥用的聚合 物。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯。在一個(gè)實(shí)施方 案中，式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜^章化合物與醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯的重 量比為1:3至1:1。
[0182] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含噴霧干燥的固體分散體，該固體分 散體由以下形成:結(jié)晶形式的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜羣化合物或其可藥用的鹽、 溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式和可藥用的聚合 物。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為聚乙烯吡咯烷酮。在一個(gè)實(shí)施方案中，式(1)所示 的噻吩并三唑并二氮雜草化合物與聚乙烯吡咯烷酮的重量比為1:3至1:1。
[0183] 在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包含固體分散體，該 固體分散體由以下形成:2-[(6S)-4-(4-氯代苯基)-2,3,9_三甲基-6Η-噻吩并[3,2-f]-[l， 2,4]三唑并[4,3- &][1，4]二氮雜罩-6-基]4-(4-羥苯基）乙酰胺二水合物(化合物（1-1)) 或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式； 以及可藥用的聚合物，其中所述化合物(1-1)如下：
[0184]
[0185] 在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為HPMCAS。在一個(gè)實(shí)施方案中，分散體中化合 物（1-1)和HPMCAS的重量比為1:3至1:1。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一部分噻吩并三唑并二氮 雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二氮雜 罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一個(gè)實(shí)施方案中，固體分散體是噴霧干燥的。 在一些實(shí)施方案中，固體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案 中，單一的Tg在130°C至140°C之間出現(xiàn)。在其他這樣的實(shí)施方案中，單一的Tg在約135°C出 現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體在40°C、相對濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè) 月。在一些實(shí)施方案中，在固體分散體的X射線粉末衍射圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的式 (1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。就本申請的目的而言，"基本上不 存在"是指在約21° 2Θ下，在無定形暈上不存在與結(jié)晶的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物（1-1)有關(guān)的衍射線。
[0186] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物包含化合物（1-1)或其可藥用的鹽、溶劑化 物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記形式；以及可藥用的聚合物的 固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為PVP。在一個(gè)實(shí)施方案中，分散體中化合 物（1-1)和PVP的重量比為1: 3至1: 1。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一部分噻吩并三唑并二氮雜 -草化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二氮雜章 化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一個(gè)實(shí)施方案中，固體分散體是噴霧干燥的。在 一些實(shí)施方案中，固體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻璃玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方 案中，單一的Tg在175°C至185°C之間出現(xiàn)。在其他這樣的實(shí)施方案中，單一的Tg在約179°C 出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體在40°C、相對濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1 個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，在固體分散體的X射線粉末衍射圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的 式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。就本申請的目的而言，"基本上 不存在"是指在約21° 2Θ下，在無定形暈上不存在與結(jié)晶的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物 (1-1)有關(guān)的衍射線。
[0187] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含無定形形式的噻吩并三唑并二氮雜 罩化合物（1-1)或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同 位素標(biāo)記形式；以及可藥用的聚合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為HPMCAS。在一 個(gè)實(shí)施方案中，分散體中化合物（1-1)與HPMCAS的重量比為1: 3至1:1。在一個(gè)實(shí)施方案中， 至少一部分噻吩并三唑并二氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一個(gè)實(shí)施 方案中，噻吩并三唑并二氮雜蓽化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一個(gè)實(shí)施方案 中，固體分散體是噴霧干燥的。在一些實(shí)施方案中，固體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻璃化轉(zhuǎn) 變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg在130°C至140°C之間出現(xiàn)。在其他這樣的實(shí)施方 案中，單一的Tg在約135 °C出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體在40 °C、相對濕度為 75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，在固體分散體的X射線粉末衍射圖案中， 基本上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。就本申 請的目的而言，"基本上不存在"是指在約21°2Θ下，在無定形暈上不存在與結(jié)晶的噻吩并三 唑并二氮雜罩化合物(1-1)有關(guān)的衍射線。
[0188] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含無定形形式的噻吩并三唑并二氮雜 草化合物（1-1)或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同 位素標(biāo)記形式與可藥用的聚合物的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為 PVP。在一個(gè)實(shí)施方案中，分散體中化合物（1-1)與PVP的重量比為1:3至1: 1。在一個(gè)實(shí)施方 案中，至少一部分噻吩并三唑并二氮雜章化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在另一 個(gè)實(shí)施方案中，噻吩并三唑并二氮雜罩化合物均勻地分散于整個(gè)固體分散體中。在一個(gè)實(shí) 施方案中，固體分散體是噴霧干燥的。在一些實(shí)施方案中，固體分散體表現(xiàn)出單一拐點(diǎn)的玻 璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在一些實(shí)施方案中，單一的Tg在175°C至185°C之間出現(xiàn)。在其他這樣的 實(shí)施方案中，單一的Tg在約189°C出現(xiàn)。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體在40°C、相對 濕度為75%的環(huán)境下暴露至少1個(gè)月。在一些實(shí)施方案中，在固體分散體的X射線粉末衍射 圖案中，基本上不存在與結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線。 就本申請的目的而言，"基本上不存在"是指在約21° 2Θ下，在無定形暈上不存在與結(jié)晶的噻 吩并三唑并二氮雜罩化合物(1-1)有關(guān)的衍射線。
[0189] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含結(jié)晶形式的噻吩并三唑并二氮雜罩 化合物(1-1)或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位 素標(biāo)記形式與可藥用的聚合物的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為 HPMCAS。在一個(gè)實(shí)施方案中，分散體中化合物（1 -1)與HPMCAS的重量比為1: 3至1:1。在一個(gè) 實(shí)施方案中，固體分散體是噴霧干燥的。
[0190] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含結(jié)晶形式的噻吩并三唑并二氮雜罩 化合物(1-1)或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位 素標(biāo)記形式與可藥用的聚合物的固體分散體。在一個(gè)實(shí)施方案中，可藥用的聚合物為PVP。 在一個(gè)實(shí)施方案中，分散體中化合物（1-1)與PVP的重量比為1:3至1:1。在一個(gè)實(shí)施方案中， 固體分散體是噴霧干燥的。
[0191] 當(dāng)經(jīng)口施用本發(fā)明所述的固體分散體時(shí)，其表現(xiàn)出特別有利的性質(zhì)。當(dāng)在動(dòng)物或 人類的標(biāo)準(zhǔn)生物利用度試驗(yàn)中施用時(shí)，所述固體分散體的有利性質(zhì)的例子包括但不限于一 致的且高水平的生物利用度。本發(fā)明的固體分散體可以包括含有式（1)所示的噻吩并三唑 并二氮雜章化合物、聚合物以及添加劑的固體分散體。在一些實(shí)施方案中，固體分散體可以 實(shí)現(xiàn)使式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜章化合物吸收入血流中，而這是不可能通過僅僅 將式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物與添加劑混合而獲得的，這是因?yàn)槭剑?)所 示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物藥物在水和大多數(shù)水性介質(zhì)中的溶解度可忽略不計(jì)?？?以使用多種體外和/或體內(nèi)研究來測量式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或者噻 吩并三唑并二氮雜草化合物(1-1)的生物利用度。體內(nèi)研究可以使用例如大鼠、狗或人類來 進(jìn)行。
[0192] 可以通過沿著相對于橫坐標(biāo)(X軸）的時(shí)間的縱坐標(biāo)(Y軸），繪制式（1)所示的噻吩 并三唑并二氮雜簞合物或者噻吩并三唑并二氮雜罩化合物d-D的血清或血漿濃度，從 而獲得曲線下面積(AUC)值，由此測量生物利用度。然后，將所述固體分散體中的式（1)所示 的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或者噻吩并三唑并二氮雜罩化合物（1-1)的AUC值與等價(jià) 濃度的不包含聚合物的結(jié)晶的式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或結(jié)晶性的噻吩 并三唑并二氮雜草化合物d-D的AUC值比較。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)將所述固體分散體經(jīng) 口施用給狗時(shí)，該固體分散體的曲線下面積(AUC)值選自：由靜脈施用給狗的對照組合物的 相應(yīng)AUC值的至少0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.8倍、1.0倍，其中所述對照組合物包含等價(jià)量的結(jié) 晶的式(I)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物。
[0193] 可以通過模擬胃環(huán)境和腸環(huán)境的pH值的體外測試來測量生物利用度。可以通過以 下方法進(jìn)行測量:將式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜草化合物或噻吩并三唑并二氮雜罩 化合物（1-1)的固體分散體懸浮在pH為1.0至2.0之間的水性體外測試介質(zhì)中，隨后將對照 體外測試介質(zhì)的pH值調(diào)節(jié)為5.0至7.0?？梢栽趐H值調(diào)節(jié)后的最初2個(gè)小時(shí)中的任何時(shí)間來 測量無定形的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜章化合物或無定形噻吩并三唑并二氮雜 '蕈化合物（1-1)的濃度。在一些實(shí)施方案中，在pH值為5.0至7.0之間的水性體外測試介質(zhì) 中，與不包含聚合物的結(jié)晶的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或者結(jié)晶的噻吩 并三唑并二氮雜韋化合物d-D的濃度相比，固體分散體使無定形的式（D所示的噻吩并三 唑并二氮雜_草化合物或者無定形的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物（1-1)的濃度高至少5 倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍或者至少10倍。
[0194] 在其他的實(shí)施方案中，在pH值為1.0至2.0的水性體外測試介質(zhì)中，與不包含聚合 物的結(jié)晶的式(1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物的濃度相比，固體分散體中無定形 的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜章化合物或無定形噻吩并三唑并二氮雜罩化合物（1-1)的濃度高至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%。在一些這樣的實(shí)施方案 中，固體分散體的聚合物為HPMCAS。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體的聚合物為PVP。
[0195] 在其他的實(shí)施方案中，所述固體分散體中的無定形的式（1)所示的噻吩并三唑并 二氮雜罩化合物或者無定形噻吩并三唑并二氮雜罩化合物（1-1)的濃度是式（1)所示的 噻吩并三唑并二氮雜章化合物和可藥用的聚合物的固體分散體中的式（1)所示的噻吩并三 唑并二氮雜罩化合物的濃度的至少40%、至少50%以上、至少60%、至少70%、至少80%，其 中所述可藥用的聚合物選自以下物質(zhì)組成的組中：羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯和丙烯 酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-三甲基銨乙基甲基丙烯酸酯氯化物共聚物，其中各固體分散體被 放置在pH值為1.0至2.0的水性體外測試介質(zhì)中。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體的 聚合物為HPMCAS。在一些這樣的實(shí)施方案中，固體分散體的聚合物為PVP。
[0196] 在一些實(shí)施方案中，當(dāng)在一定的濕度和溫度下暴露一段時(shí)間時(shí)，本發(fā)明所述的固 體分散體表現(xiàn)出抵抗式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或噻吩并三唑并二氮雜 罩化合物（1-1)的重結(jié)晶的穩(wěn)定性。在一個(gè)實(shí)施方案中，無定形的式（1)所示的噻吩并三唑 并二氮雜罩化合物或噻吩并三唑并二氮雜罩化合物（1-1)的保持無定形的濃度選自：至少 90 %、至少91 %、至少92 %、至少93 %、至少94%、至少95 %、至少96 %、至少97 %、至少98 % 和至少99 %。
[0197] V.劑型：
[0198] 可以用于本發(fā)明的固體分散體的合適的劑型包括但不限于膠囊、片劑、小型片劑、 珠、微囊劑(beadlet)、丸劑、小顆粒(granule)、粒劑(granulate)和粉末。可以使用例如腸 溶包衣來包裹合適的劑型。合適的包衣可以包括但不限于鄰苯二甲酸乙酸纖維素、羥丙基 甲基纖維素(HPMC)、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、聚甲基丙烯酸共聚物、或醋酸羥丙 基甲基纖維素琥珀酸酯(HPMCAS)。在一些實(shí)施方案中，可存在某些組合，例如，在同一樣品 中，本發(fā)明的噻吩并三唑并二氮雜罩的一些分子可以成簇存在，而一些分子則以分子形式 分散于載體中。
[0199] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的固體分散體可以配制成片劑、囊片或膠囊。在一些實(shí) 施方案中，本發(fā)明的固體分散體可以配制成小型片劑或倒入口中（pour-into-mouth)的小 顆粒、或者成分(constitution)的口服粉末。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的固體分散體與其 他的賦形劑（例如，抑制重結(jié)晶/沉淀的聚合物、掩味成分等）組合并分散于合適的稀釋劑 中，從而提供即用型的懸浮制劑。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的固體分散體可以配制用于兒 科治療。
[0200] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物被配制用于口服給藥。在一個(gè)實(shí)施方案 中，所述的藥物組合物包含根據(jù)本發(fā)明所述的多個(gè)實(shí)施方案的固體分散體，其包含:式（1) 所示的噻吩并三唑并二氮雜革化合物、或其可藥用的鹽、溶劑化物(包括水合物）、消旋物、 對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記的形式；以及聚合物載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的藥 物組合物還包含一種或多種添加劑，例如崩解劑、潤滑劑、助流劑、粘結(jié)劑和填料。
[0201] 用于所述的藥物組合物含義合適的可藥用的潤滑劑和可藥用的助流劑的實(shí)例包 括但不限于膠態(tài)氧化硅、三硅酸鎂、淀粉、滑石、三堿式磷酸鈣、硬脂酸鎂、硬脂酸鋁、硬脂酸 鈣、碳酸鎂、氧化鎂、聚乙二醇、粉末狀纖維素、甘油二十二烷酸酯、硬脂酸、氫化蓖麻油、單 硬脂酸甘油酯和硬脂酰富馬酸鈉。
[0202] 用于所述的藥物組合物的合適的可藥用的粘結(jié)劑的實(shí)例包括但不限于:淀粉、纖 維素及其衍生物，例如微晶纖維素(例如AVICELPH，得自FMC公司）、羥丙基纖維素、羥乙基纖 維素和羥丙基甲基纖維素(HPMC，例如METH0CEL，得自Dow Chemical公司）；蔗糖、右旋糖、玉 米糖漿;多糖和明膠。
[0203] 用于所述的藥物組合物的合適的可藥用的填料和可藥用的稀釋劑的實(shí)例包括但 不限于:糖果制造商的糖、可壓縮糖、葡萄糖結(jié)合劑、糊精、右旋糖、乳糖、甘露醇、微晶纖維 素(MCC)、粉末狀纖維素、山梨醇、蔗糖和滑石。
[0204] 在一些實(shí)施方案中，在所述的藥物組合物中，賦形劑可以發(fā)揮多于一種的功能。例 如，填料或粘結(jié)劑還可以為崩解劑、助流劑、抗粘附劑、潤滑劑、甜味劑等。
[0205] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物可以還包含添加劑或配料，例如抗氧化 劑(例如抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基茴香醚(BHA )、二丁基化羥基甲苯(BHT )、α-生育酚、 丙基沒食子酸鹽和富馬酸）、抗微生物劑、酶抑制劑、穩(wěn)定劑(例如丙二酸)和/或防腐劑。
[0206] 通常，本發(fā)明的藥物組合物可以配制成任何合適的固體劑型。在一些實(shí)施方案中， 本發(fā)明的固體分散體混合在單位劑型中，例如作為膠囊或片劑、或者多微粒系統(tǒng)(例如小顆 ?；蛄?、或者粉末），以用于給藥。
[0207] 在一個(gè)實(shí)施方案中，藥物組合物包含:根據(jù)本發(fā)明所述的固體分散體的多個(gè)實(shí)施 方案的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜章化合物和醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯 (HPMCAS)的固體分散體，其中所述噻吩并三唑并二氮雜罩化合物在固體分散體中是無定 形的，并且噻吩并三唑并二氮雜罩化合物與醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯(HPMCAS)的重 量比為1:3至1:1 ;45重量％至50重量％的乳糖一水合物;35重量％至40重量％的微晶纖維 素;4重量％至6重量％的交聯(lián)羧甲基纖維素鈉;0.8重量％至1.5重量％的膠體二氧化硅;和 0.8重量％至1.5重量％硬脂酸鎂。
[0208] VI.劑量：
[0209] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了可以配制成任何合適的固體劑型的藥物組合 物。在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物包含本發(fā)明所述式（1)所示的噻吩并三唑 并二氮雜罩化合物的多種實(shí)施方案中的一種或多種，其中所述式（1)所示的噻吩并三唑并 二氮雜罩的劑量為約IOmg至約100mg。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含本發(fā) 明所述式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜草的多種實(shí)施方案中的一種或多種，其中所述式 (1)所示的噻吩并三唑并二氮雜章的劑量選自由如下劑量組成的組：約IOmg至約100mg、約 IOmg至約90mg、約IOmg至約80mg、約IOmg至約70mg、約IOmg至約60mg、約IOmg至約50mg、約 IOmg至約40mg、約IOmg至約30mg和約IOmg至約20mg。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合 物包含本發(fā)明所述式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩的多種實(shí)施方案中的一種或多種， 其中所述式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩的劑量選自由約1 〇 m g、約5 0 m g、約7 5 m g、約 IOOmg構(gòu)成的組。
[0210] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法包括向有需要的受試者施用本發(fā)明所述多種實(shí) 施方案中的一種或多種的式（1)所示的噻吩并三唑并二氮雜草，其劑量選自由如下劑量組 成的組：約 lmg、約2mg、約2 · 5mg、約3mg、約 4mg、約5mg、約7 · 5mg、約 10mg、約 15mg、約20mg、約 25mg、約 30mg、約 35mg、約40mg、約45mg、約 50mg、約 5 5mg、約 60mg、約 65mg、約 70mg、約 75mg、約 80mg、約85mg、約90mg、約95mg、約 IOOmg、約 11Omg、約 120mg、約 130mg、約 140mg和約 150mg;其 劑型選自由以下組成的組:每周一次、每六天一次、每五天一次、每四天一次、每三天一次、 每隔一天一次、每天一次、每天兩次、每天三次、每天四次、每天五次。在另一個(gè)實(shí)施方案中， 任意前述劑量或劑型可以定期減少或增加。
[0211] 在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法包括向有需要的受試者施用選自由以下化合物 構(gòu)成的組中的噻吩并三唑并二氮雜草:化合物（1-1)、（1-2)、（1-3)、（1-4)、（1-5)、（1-6)、 (1-7)、（1-8)、（1-9)、（1-10)、（1-11)、（1-12)、（1-13)、（1-14)、（1-15)、（1-16)、（1-17)和 (1-18);所述噻吩并三唑并二氮雜罩的施用劑量選自由以下劑量構(gòu)成的組:約Img、約2mg、 約2·5mg、約3mg、約4mg、約5mg、約7·5mg、約10mg、約15mg、約20mg、約25mg、約30mg、約35mg、 約40mg、約45mg、約50mg、約55mg、約60mg、約65mg、約70 mg、約75mg、約80mg、約85mg、約 90mg、約95mg、約IOOmg、約11Omg、約120mg、約130mg、約140mg和約150mg;其劑型選自由以下 組成的組:每周一次、每六天一次、每五天一次、每四天一次、每三天一次、每隔一天一次、每 天一次、每天兩次、每天三次、每天四次以及每天五次。在另一個(gè)實(shí)施方案中，任意前述劑量 或劑型可以定期減少或增加。
[0212] 根據(jù)特定的治療目的、治療階段等，所述單位劑型適合每日給藥1至5次。在一個(gè)實(shí) 施方案中，有需要的受試者可以至少連續(xù)兩天每日至少1次施用該劑型。在一個(gè)實(shí)施方案 中，有需要的受試者可以至少隔日并每日至少1次施用該劑型。在一個(gè)實(shí)施方案中，有需要 的受試者可以至少每周施用該劑型，并且將該劑型分成相等的和/或不等的劑量。在一個(gè)實(shí) 施方案中，有需要的受試者可以每周施用該劑型，每隔3天和/或每周6次施用。在一個(gè)實(shí)施 方案中，有需要的受試者可以每隔1天、每3天、每4天、每5天、每6天和/或每周以分劑量施用 該劑型。在一個(gè)實(shí)施方案中，有需要的受試者可以每個(gè)月服用該劑型的2個(gè)或多個(gè)等分劑量 或非等分劑量。
[0213] 可以使用例如腸溶包衣來包裹所用的劑型（例如膠囊、片劑、小型片劑、珠、微囊 劑、丸劑、小顆粒、粒劑或粉末）。合適的包衣可以包括但不限于鄰苯二甲酸乙酸纖維素、羥 丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、聚甲基丙烯酸共聚物、或醋酸羥 丙基甲基纖維素琥珀酸酯(HPMCAS)。
[0214] VII.工藝：
[0215] 本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物可以以游離堿或酸加成鹽的形式 存在，其可以根據(jù)美國專利申請公開No. 2010/0286127(其全部內(nèi)容以引用方式并入本文或 本申請中）中所述的工序來獲得。本發(fā)明的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物的各對映異構(gòu)體 和非對映異構(gòu)體可以由包含不對稱中心或立體異構(gòu)中心的市售可得的起始材料以合成方 式制備，或者通過制備外消旋的混合物、然后通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的拆分方法來 制備。這些拆分方法例如有：（1)使對映異構(gòu)體的混合物附著在手性助劑上，通過重結(jié)晶或 色譜法分離所得的非對映異構(gòu)體的混合物，并從助劑上釋放光學(xué)純產(chǎn)物；（2)使用光學(xué)活 性拆分劑形成鹽；（3)在手性液相色譜柱上直接分離光學(xué)對映異構(gòu)體的混合物;或者(4)使 用立體選擇性化學(xué)試劑或酶試劑進(jìn)行動(dòng)力學(xué)拆分。此外，外消旋的混合物還可以通過公知 的方法(例如手性相色譜法或使化合物在手性溶劑中結(jié)晶）而拆分成它們的構(gòu)成成分的對 映異構(gòu)體。
[0216] 如果需要，本發(fā)明所公開的噻吩并三唑并二氮雜草化合物的特定對映異構(gòu)體可以 通過不對稱合成或者通過使用手性助劑誘導(dǎo)來制備，其中所得的非對映異構(gòu)體的混合物被 分離并且輔助基團(tuán)被切割，從而提供所需的純的對映異構(gòu)體?？蛇x地，在所述分子包含堿性 官能團(tuán)（例如氨基)或酸性官能團(tuán)（例如羧基）的情況下，非對映異構(gòu)體的鹽是通過以下過程 形成的:使用合適的光學(xué)活性的酸或堿，然后對非對映異構(gòu)體(通過本領(lǐng)域公知的分級結(jié)晶 或色譜手段而由此形成)進(jìn)行拆分，并在隨后回收純的對映異構(gòu)體?？墒褂帽绢I(lǐng)域公知的多 種方法來制備式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物，其中對映異構(gòu)體的過量百分比通常 超過約80%。有利的是，優(yōu)選的對映異構(gòu)體的過量百分比大于80%，優(yōu)選大于90%，更優(yōu)選 大于95%，并且最優(yōu)選為99%以上。
[0217] 本發(fā)明的固體分散體可以通過多種方法來制備，包括熔融和溶劑蒸發(fā)方法。本發(fā) 明的固體分散體還可以根據(jù)如下文中所描述的工序制備：Chiou WL，Riegelman S: "Pharmaceutical applications of solid dispersion systems"，J.Pharm.Sci.1971; 60:1281-1302；Serajuddin ATM:uSolid dispersion of poorly water-soluble drugs: early promises,subsequent problems,and recentbreakthroughs，：，,J.Pharm.Sci . 1999； 88:1058-1066;Leuner C,Dressman J:"Improving drug solubility for oral delivery using solid dispersions"，Eur · J · Pharm · Biopharm · 2000; 50:47-60;以及Vasconce I os T,Sarmento B, Costa P: "Solid dispersions as strategy to improve oral bioavailability of poor water soluble drugs'，，Drug Discovery Today 2007;12: 1068-1075，所有這些文獻(xiàn)均以引用的方式將其全文并入本文中D
[0218] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的固體分散體是通過熔融工藝制備的。在一個(gè)實(shí)施方 案中，熔融工藝包括在載體中將式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩的多個(gè)實(shí)施方案的一個(gè)或 多個(gè)熔融。在一個(gè)實(shí)施方案中，熔融工藝包括使本發(fā)明的熔融化合物和載體冷卻。在一個(gè)實(shí) 施方案中，熔融工藝包括將熔融的化合物和載體粉碎。在一個(gè)實(shí)施方案中，在冷卻步驟之后 將本發(fā)明的熔融的化合物和載體粉碎。
[0219] 在一些實(shí)施方案中，式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩或者其藥學(xué)可接受的鹽、溶劑 化物(包括水合物）、外消旋物、對映異構(gòu)體、異構(gòu)體或同位素標(biāo)記的形式與載體間不相容， 在這種情況中，可以在熔融步驟中加入表面活性劑，從而防止在加熱的混合物中形成兩個(gè) 液相或懸液。在一些實(shí)施方案中，式(1)的噻吩并三唑并二氮雜罩的多個(gè)實(shí)施方案中的一個(gè) 或多個(gè)實(shí)施方案懸浮于之前熔融的載體中，而并未使用熔融狀態(tài)的藥品和載體，由此降低 了工藝的溫度。在一個(gè)實(shí)施方案中，在冰浴攪拌下使熔融的藥品和載體的混合物冷卻。在一 個(gè)實(shí)施方案中，通過噴霧冷卻(可選的通過噴霧冷凝)使熔融的藥品和載體混合物冷卻并固 化。
[0220] 在一個(gè)實(shí)施方案中，通過將熔融物噴霧至冷卻室(使環(huán)境溫度或冷卻溫度的低溫 空氣通過該冷卻室）中以將熔融物形成顆粒，從而使熔融的藥品和載體的混合物冷卻或固 化。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過在合適的流化床處理器中使熔融分散體霧化和再固化，從而使 熔融的藥品和載體混合物冷卻和固化。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過在可加熱的高剪切混合器 中進(jìn)行熔融制粒，從而使熔融的藥品和載體的混合物冷卻并固化。
[0221] 在一些實(shí)施方案中，可以采用熱階段擠出（hot-stage extrusion)或恪融團(tuán)聚物 來避免藥物的熔融局限。熱階段擠出包括如下過程:在熔融溫度下將預(yù)先混合的藥品和載 體以高轉(zhuǎn)速在短時(shí)間內(nèi)擠出;在室溫下冷卻后收集所得的產(chǎn)物并研磨。
[0222] 在一個(gè)實(shí)施方案中，將式（1)的噻吩并三唑并二氮雜革的多個(gè)實(shí)施方案中的一個(gè) 或多個(gè)實(shí)施方案在較低的溫度下加工，從而避免任何熱不穩(wěn)定的化合物發(fā)生降解。在一個(gè) 實(shí)施方案中，通過將熱階段擠出與暫時(shí)性增塑劑(例如二氧化碳)結(jié)合而實(shí)現(xiàn)較低的處理 溫度。在一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的固體分散體的制備中，在常規(guī)的高剪切混合器或 旋轉(zhuǎn)處理器中使用了熔融團(tuán)聚物。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過將包含根據(jù)本發(fā)明的噻吩并三 唑并二氮雜罩化合物的熔融載體加入至加熱的賦形劑中，從而制備根據(jù)本發(fā)明的固體分散 體。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過將包含根據(jù)本發(fā)明的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物、載體和一 種或多種賦形劑的混合物加熱至載體的熔融范圍內(nèi)或以上的溫度，從而制備根據(jù)本發(fā)明的 固體分散體。
[0223] 在一些實(shí)施方案中，通過溶劑蒸發(fā)方法來制備根據(jù)式（1)的噻吩并三唑并二氮雜 罩的制劑的多個(gè)實(shí)施方案中的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案。在一個(gè)實(shí)施方案中，溶劑蒸發(fā)方法包 括使根據(jù)式（1)的噻吩并三唑并二氮雜草和載體溶解于揮發(fā)性溶劑中，然后使揮發(fā)性溶劑 蒸發(fā)。在一個(gè)實(shí)施方案中，揮發(fā)性溶劑可以為一種或多種賦形劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，一種 或多種賦形劑包括但不限于抗粘劑、惰性填料、表面潤濕劑、PH調(diào)節(jié)劑和添加劑。在一個(gè)實(shí) 施方案中，賦形劑可以溶解于揮發(fā)性溶劑中，或者在揮發(fā)性溶劑中呈懸浮或膨脹狀態(tài)。
[0224] 在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的固體分散體的制備包括使懸浮于揮發(fā)性溶劑中 的一種或多種賦形劑干燥。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述的干燥包括真空干燥、使揮發(fā)性溶劑在 低溫下緩慢蒸發(fā)、使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、噴霧干燥、噴霧制粒、冷凍干燥或使用超臨界流體。
[0225] 在一個(gè)實(shí)施方案中，使用了噴霧干燥制備根據(jù)式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩組 合物的制劑，其包括使所述的組合物的懸液或溶液霧化成小滴，然后快速除去制劑中的溶 劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的制劑的制備涉及噴霧制粒，其中將位于溶液中的組合 物的溶液或懸液噴霧至合適的化學(xué)惰性和/或物理惰性填料上，例如乳糖或甘露醇。在一個(gè) 實(shí)施方案中，通過雙通或三通噴嘴對所述的組合物的溶液或懸液進(jìn)行噴霧制粒。
[0226] 在一些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的固體分散體的制備包括使用超臨界流體。術(shù)語 "超臨界流體"是指在臨界溫度和臨界壓力以上以單一液相存在的物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案 中，根據(jù)本發(fā)明的制劑的制備包括使用超臨界二氧化碳流體。在一個(gè)實(shí)施方案中，利用超 臨界流體技術(shù)制備根據(jù)本發(fā)明的制劑，其包括:將根據(jù)式(1)的噻吩并三唑并二氮雜章組合 物和載體溶解于常見溶劑中，該溶劑通過噴嘴與二氧化碳同時(shí)被引入至顆粒形成容器中； 以及將所述溶液噴霧，從而使溶劑被超臨界流體快速萃取，由此使得固體分散體顆粒沉淀 在容器的壁上。
[0227] 在一些實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的固體分散體的制備包括使用共沉淀方法。在一 個(gè)實(shí)施方案中，在持續(xù)攪拌下將非溶劑滴加至根據(jù)式（1)的噻吩并三唑并二氮雜章組合物 和載體溶液中。在一個(gè)實(shí)施方案中，在添加非溶劑的過程中，使根據(jù)式（1)的噻吩并三唑并 二氮雜章組合物和載體進(jìn)行共沉淀，從而形成微顆粒。在一個(gè)實(shí)施方案中，過濾并干燥所得 的微顆粒，從而提供所需的固體分散體。
[0228] 對于式（1)的化合物與聚合物載體(一種或多種）的混合比例沒有特別限定，只要 其可以改善式(1)的化合物的生物利用率即可，并且該比例根據(jù)聚合物的種類而改變。
[0229] 通過以下非限定性實(shí)施例來說明本發(fā)明。
[0230] VIII.例子：
[0231 ]通過以下非限定性實(shí)施例來說明本發(fā)明。
[0232] 實(shí)施例1:化合物(1-1)的固體分散體的體外篩選
[0233] 使用化合物（1-1)以及五種聚合物中的一種來制備十種固體分散體，其中所述聚 合物包括醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯(HPMCAS-M)、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯 (HPMCP-HP55)、聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、PVP-乙酸乙烯酯（PVP-VA)和Eudragi t L100-55,并 且對于每種聚合物，化合物（1-1)的負(fù)載率為25%和50%。使用噴霧干燥，然后在低溫對流 烘箱中進(jìn)行二次干燥，從而通過溶劑蒸發(fā)法來制備固體分散體。通過非沉降溶解性能測試 (non-sink dissolution performance test)來評估各固體分散體的性能，所述測試測量 藥物的總量和隨著時(shí)間溶液中所存在的游離藥物的量。選擇非沉降溶解是由于其能夠最好 地代表低溶解度化合物在體內(nèi)的情況。該測試包括在分散體被引入至測試介質(zhì)后約30分鐘 至40分鐘，分散體由胃？!1(0.謂恥(：1，？!11.0)至腸?!1卬 &?33正，？!16.5)的"胃轉(zhuǎn)移"，從而 模擬了體內(nèi)的情況。[FaFSSIF為禁食狀態(tài)的人工腸液，其由3mM的牛黃膽酸鈉、0.75mM的卵 磷脂、0.174g NaOH顆粒、1.977g NaH2PO4 ·Η20、3.0938 NaCl和適量純凈水500mL組成]。使 用高效液相色譜(HPLC)法和AgiIent 1100串聯(lián)HPLC來定量溶解藥物的量。制劑的溶解情況 (圖1A-1J)表明：相對于在相同介質(zhì)中的未經(jīng)配制的化合物而言，在所有的分散體候選物 中，藥物的溶解度均大幅升高。在所有的固體分散體中，基于在腸 pH下釋放的游離藥物的水 平較高這一發(fā)現(xiàn)可知，與未經(jīng)配制的化合物相比，25 %化合物（1-1)在PVP中的分散體、25 % 化合物（I-1)在HPMCAS-M中的分散體、以及50 %化合物（1-1)在HPMCAS-M中的分散體提供了 增強(qiáng)的經(jīng)口吸收。
[0234] 實(shí)施例2:化合物(I -1)的固體分散體的體內(nèi)篩選
[0235] 以更大的規(guī)模制備化合物（1-1)的固體分散體，即25%化合物（1-1)在PVP中的分 散體、25 %化合物（1 -1)在HPMCAS-MG中的分散體、以及50 %化合物（I -1)在HPMCAS-M中的分 散體，以用于體內(nèi)研究。各制劑均經(jīng)過了實(shí)施例1所述的體外溶解測試的評估。為了確保這 些分散體是無定形且均質(zhì)的，通過X射線粉末衍射法（PXRD)和修正的差示掃描量熱法 (mDSC)來評估各分散體。X射線衍射計(jì)為Bruker D-2Phaser。另外，為了了解水對各種分散 體的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)的影響，對首先在設(shè)定的相對濕度（即，25 %、50 %和75 %RH)下平 衡至少18小時(shí)的樣品進(jìn)行mDSC。[水可以用作固體分散體的增塑劑，并且由活性化合物或聚 合物導(dǎo)致的體系的吸濕性可以影響被這些體系吸收的水的量]。
[0236]非沉降溶解結(jié)果（圖2A-2C)與實(shí)施例1中分散體的結(jié)果相當(dāng)。PXRD結(jié)果（圖3)顯示 沒有證據(jù)表明任意一種分散體中存在結(jié)晶化合物，并且mDSC結(jié)果（圖4A-4C)顯示各分散體 均存在單一的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg )，這表明各分散體是均勻的。對于各分散體，觀察到Tg與 相對濕度之間逆相關(guān)(M)。值得注意的是，對于在75%冊下平衡的 25%化合物（卜1)在pVp 中的固體分散體，出現(xiàn)了兩個(gè)Tg，這表明發(fā)生了相分離，并且該分散體還顯示出在75%RH 下發(fā)生了熔化，這表明在RH平衡過程中發(fā)生了結(jié)晶(_)。該發(fā)現(xiàn)表明25%化合物（1-1)在 PVP中的分散體的穩(wěn)定性弱于HPMCAS-M分散體。
[0237] 為了評估這三種分散體的生物利用度，向多組雄性獵兔犬(每組3只）給予劑量為 3mg/kg的化合物（1-1)的固體分散體的水性懸液(通過口服填喂法給藥），或者給予劑量為 3mg/kg的溶解于水：乙醇:聚乙二醇(PEG) 400 (60: 20: 20)中的化合物（I -1)(并以靜脈推注 給藥至頭靜脈中）。在靜脈給藥后的0分鐘(服藥之前）、5分鐘、15分鐘和30分鐘、和1小時(shí)、2 小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)和24小時(shí)，以及在口服填喂給藥后的0分鐘(服藥之前）、15分鐘 和30分鐘、和1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)和24小時(shí)由各動(dòng)物的頸靜脈收集血液樣 品。使用合格的LC-MS/MS法檢測各樣品中存在的化合物（1-1)的量，并且量化下限為0.5ng/ mL。通過使用線性梯形法則(直至最終可測的濃度，而未將終末消除相外推至無窮大)來測 定血漿濃度-時(shí)間曲線的曲線下面積(AUC)。通過對對數(shù)濃度-時(shí)間曲線的終末線性部分進(jìn) 行最小二乘回歸分析來計(jì)算消除半衰期（t 1/2)。由血漿濃度數(shù)據(jù)直接得到最大血漿濃度 (Cmax)和達(dá)到Cmax的時(shí)間（U ax)。通過用口服給藥后的劑量歸一化的AUC除以靜脈給藥后的劑 量歸一化的AUC來計(jì)算口服生物利用度(F)，并以百分?jǐn)?shù)（％)形式報(bào)告。下表1中總結(jié)的結(jié)果 給出了 2 5 %化合物（1 -1)在PVP中的固體分散體、2 5 %化合物（1 -1)在HPMCAS-M中的固體分 散體和50%化合物（I-1)在HPMCAS-M中的固體分散體的平均口服生物利用度，分別為58%、 49 % 和 74 %。
[0238] 表1:狗口服(Po)和靜脈(iv)給藥后的化合物（1-1)的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)(數(shù)值為3只 狗的平均值）
[0240] AUC:血漿濃度-時(shí)間曲線下的面積;Cmax :最大血漿濃度;F:生物利用度;HPMCAS:醋 酸羥丙基甲基纖維素鈉；IV:靜脈內(nèi)；PEG:聚乙二醇;PO:經(jīng)口，口服;PVP:聚乙烯吡咯烷酮； tmax:達(dá)到Cmax的時(shí)間；t1/2:血漿消除半衰期
[0241] 實(shí)施例3:包含化合物(1-1)的固體分散體的膠囊的制備和臨床應(yīng)用
[0242] 制備IOmg強(qiáng)度的明膠膠囊，在患有惡性血液病的患者中進(jìn)行初步的臨床研究?；?于實(shí)施例1和2中所述的化合物（1-1)的固體分散體的體外和體內(nèi)測試結(jié)果，選擇50%化合 物（I -1)在HPMCAS-M中的固體分散體用于膠囊的研發(fā)。以3號尺寸的硬明膠膠囊，190mg的填 充量為目標(biāo)來開始膠囊的研發(fā)，因?yàn)檫@樣的構(gòu)造可以通過填充更大尺寸的膠囊而潛在地增 加膠囊的強(qiáng)度，同時(shí)保持藥物組合物。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，設(shè)計(jì)了 4種膠囊制劑，其中具有不同量的崩 解劑并且具有或不具有潤濕劑。由于所有4種制劑都顯示出相似的崩解測試和溶解測試結(jié) 果，所以選擇最簡單的制劑(不具有潤濕劑，并具有最少量的崩解劑)用于制造。進(jìn)行制造工 藝的研發(fā)和規(guī)模擴(kuò)大的研究，以確定固體分散體的噴霧干燥工藝和干燥后的時(shí)間；共混的 參數(shù);為獲得約〇. 60g/cc的目標(biāo)堆密度的共混物的輥壓和研磨；以及膠囊填充的條件。
[0243] 將結(jié)晶化合物（1-1)和聚合物醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯(HPMCAS-M)溶解于 丙酮中，并噴霧干燥，從而生產(chǎn)包含50%化合物（1-1)載量的固體分散體中間體（SDI)顆 粒。PXRD分析顯示SDI是無定形的，mDSC分析顯示SDI是均勻的（即在環(huán)境條件下具有單一的 Tg)。在V型攪拌機(jī)的多個(gè)段中將50%化合物（1-1)在HPMCAS-M中的固體分散體(1000 g)和賦 形劑(包括微晶纖維素填料-粘結(jié)劑(4428g)、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉崩解劑(636g)、膠體二氧 化硅分散劑/潤滑劑（156g)、硬脂酸鎂分散劑/潤滑劑（156g)和乳糖一水合物填料(5364g)) 共混。然后將混合物壓制并制粒，從而得到約〇.6g/mL的堆密度。使用自動(dòng)化的填充機(jī)將混 合物分配至3號尺寸的硬明膠膠囊（目標(biāo)填充量：190mg)中，并使用膠囊拋光機(jī)將制得的膠 囊拋光。
[0244] 在口服給藥IOmg膠囊(包含50%化合物（1-1)在HPMCAS中的固體分散體)后進(jìn)行藥 物動(dòng)力學(xué)的評估，并將結(jié)果與對健康志愿者口服給藥4x IOmg膠囊(其包含化合物（1-1)的 Eudragit固體分散體)后進(jìn)行的藥物動(dòng)力學(xué)評估加以對比。
[0245] 在下表2A和2B中提供了這兩種藥物組合物的比較。之前的Eudragit制劑在2009年 1月8日公開的美國專利申請2009/0012064A1中的實(shí)施例5中有所描述。該申請記載:通過在 水和乙醇的混合物中溶解和/或分散式(A)所示的噻吩并三唑并二氮雜罩和包裹用賦形劑 (包含氨溶甲基丙稀酸酯共聚物B型（Eudragit RS)、甲基丙稀酸共聚物C型（Eudragit L100-55)、滑石和硅酸鋁鎂)來制備Eudragit固體分散體制劑。然后，使用離心流化床制粒 機(jī)將上述的非均勾混合物施加在微晶纖維素球(Nonpareil 101，F(xiàn)reund)上，從而生產(chǎn)分配 至2號尺寸的羥丙基甲基纖維素膠囊中的顆粒。
[0246] 在這兩個(gè)臨床研究中，使用經(jīng)驗(yàn)證的LC-MS/MS方法來測定化合物（1-1)的血液水 平，并根據(jù)在膠囊給藥后24小時(shí)內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)測量的化合物（1-1)的血漿濃度來進(jìn)行藥物動(dòng) 力學(xué)分析。下表3中總結(jié)的結(jié)果顯示，根據(jù)AUC(924*4/1140,由于給藥劑量的差異而改變）， HPMCAS-M固體分散體制劑在人中的生物利用度比Eudrag i t固體分散體制劑高3倍以上。此 外，根據(jù)觀察到的Tmax，HPMCAS制劑的吸收速度快于Eudragit制劑（T maxS 1小時(shí)vs 4-6小 時(shí)）^PMCAS-M固體分散體制劑的在系統(tǒng)暴露方面的明顯改善是意料之外的。
[0247] 表2A:用于臨床應(yīng)用的化合物(1-1)的固體分散體膠囊
[0248] 包含化合物（1 -1)的50 %HPMCAS固體分散體的藥物組合物：IOmg強(qiáng)度，3號尺寸的 硬明膠膠囊
[0250] 表2B:包含化合物（1-1)的Eudragit L100-55固體分散體的藥物組合物：IOmg強(qiáng) 度，2號尺寸的硬明膠膠囊
[0252] *為無水形式
[0253] 表3:在將化合物(1-1)的固體分散體經(jīng)口施用給人后的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)
[0255] AUCo-24h:24小時(shí)內(nèi)0TX015血漿濃度對時(shí)間曲線下的面積
[0256] Cmax:最大血漿濃度
[0257] hr:小時(shí)
[0258] HPMCAS:醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯
[0259] mL:毫升
[0260] ng:納克
[0261] PO:經(jīng)口，口服
[0262] Tmax :達(dá)到Cmax的時(shí)間
[0263] 實(shí)施例4:在大鼠中的口服暴露
[0264] 在大鼠中測定化合物（1-1)的固體分散體的3種制劑的口服生物利用度。所選的3 種分散體為25 %化合物（I -1)在PVP中的分散體、25 %化合物（I -1)在HPMCAS-MG中的分散體 和50 %化合物（1 -1)在HPMCAS-MG中的分散體。在該研究中使用的動(dòng)物為得自土爾庫大學(xué) (芬蘭）的中央動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室（Central Animal Laboratory)的無特定病體（SPF)的Hsd: Sprague Dawley大鼠。大鼠最初購自位于荷蘭的Harlan。大鼠為雌性，并且為10周齡，12只 大鼠用于該研究中。在聚碳酸酯Makro I on II籠中飼養(yǎng)動(dòng)物(每個(gè)籠中3只），動(dòng)物室溫為21 +/-3°C，動(dòng)物室內(nèi)的相對濕度為55+/-15%，并且動(dòng)物室內(nèi)照明為人工照明，而且為12小時(shí) 明暗周期的循環(huán)(暗周期為18:00至06:00之間）。白楊木肩（Tapvei Oy ,Estonia)用于墊料， 并且每周至少更換1次墊料。在對動(dòng)物定量給藥之前提供食物和水，但是在定量給藥后最初 的2個(gè)小時(shí)中移除食物和水。
[0265] 將預(yù)先計(jì)算的量的注射用無菌水加入至裝有采用合適的量的分散體的容器中， 獲得化合物（1-1)的濃度為〇.7511^/1^，由此制備包含25%化合物（1-1)在?￥?中的分散體的 口服定量給藥溶液、包含25 %化合物（1-1)在HPMCAS-MG中的分散體的口服定量給藥溶液和 包含50 %化合物（1-1)在HPMCAS-MG中的分散體的口服定量給藥溶液。在每次給藥之前，將 口服定量給藥溶液進(jìn)行渦旋混合20秒。用于靜脈給藥的定量給藥溶液包含0.25mg/mL的化 合物（1-1)，該定量給藥溶液是通過將5mg的化合物（1-1)溶解于這樣的混合物中來制備的， 所述混合物包含4mL的平均分子量為400Da的聚乙二醇(PEG400)、4mL的乙醇（96 %純度）和 12mL的注射用無菌水。在加入水后的30分鐘之內(nèi)使用含有25%化合物（Η)在PVP中的分散 體的定量給藥溶液。在加入水后的60分鐘之內(nèi)使用含有25 %化合物（1-1)在HPMCAS-MG中的 分散體的定量給藥溶液和含有50%化合物（1-1)在HPMCAS-MG中的分散體的定量給藥溶液。 使用4mL/kg定量給藥量，從而使化合物（1-1)的靜脈給藥的給藥水平為lmg/kg，口服給藥的 給藥水平為3mg/kg。定量給藥方案在表4中給出。
[0266] 表4.用于大鼠口服暴露研究的定量給藥方案
[0268] 在定量給藥后的0.25小時(shí)、0.5小時(shí)、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)和24小時(shí) 的時(shí)間點(diǎn)，將約50yL的血液樣品收集至包含5yL乙二胺四乙酸(EDTA)溶液的Eppendorf管 中，并且每個(gè)樣品都是在距所述時(shí)間點(diǎn)5分鐘時(shí)間窗內(nèi)收集的。由各樣品獲得20yL血漿并儲 存在干冰溫度下以用于分析。使用經(jīng)驗(yàn)證的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)法對各樣品中化 合物（1-1)的濃度進(jìn)行分析，其定量下限為〇. 5ng/mL。
[0269] 使用Phoenix WinNonlin軟件包（6.2.1版，Pharsight Corp公司，CA,USA)，米用標(biāo) 準(zhǔn)的非房室模型方法來計(jì)算藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。通過對對數(shù)濃度-時(shí)間曲線的終末線性部分 進(jìn)行最小二乘回歸分析來計(jì)算消除半衰期（t 1/2)。通過使用線性梯形法則直至最終可測的 濃度，此后將終末消除相外推至無窮大來測定血漿濃度-時(shí)間曲線的曲線下面積(AUC)。通 過將藥物濃度曲線外推至無窮大來計(jì)算平均保留時(shí)間(MRT)，其代表了化合物在房室或系 統(tǒng)中保留的平均時(shí)間量。由血漿濃度數(shù)據(jù)直接得到最大血漿濃度(C max)和達(dá)到Cmax的時(shí)間 (tmax)。通過用口服給藥后的劑量歸一化的AUC除以靜脈給藥后的劑量歸一化的AUC來計(jì)算 試驗(yàn)性口服生物利用度(F)，即F=(AUC(口服)/劑量（口服））/(AUC(靜脈)/劑量(靜脈））]， 并以百分?jǐn)?shù)（％ )形式報(bào)告。
[0270] 藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)在表5中給出，血漿濃度對時(shí)間的圖示于圖7和8中。
[0271] 表5. 口服和靜脈給藥后的化合物（1-1)的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。值為得自3只動(dòng)物的平 均值。
[0273] 實(shí)施例5.噴霧干燥分散體的制備
[0274]使用五種所選的聚合物來制備化合物（1-1)的噴霧干燥的分散體，這5種聚合物 為：HPMCAS-MG(Shin Etsu Chemical公司）、HPMCP-HP55(Shin Etsu Chemical公司）、PVP (ISP，Ashland公司的部門）、PVP_VA(BASF公司）和Eudragit L100_55(Evonik Industries AG)。使用每種聚合物以25 %和50 %制備所有的噴霧干燥溶液。除了 PVP溶液以外，所有的溶 液都是在丙酮中制備的，PVP溶液是在乙醇中制備的。對于各溶液而目，在IOg溶劑中制備 1.0 g固體(聚合物和化合物（1-1))。使用具有1.5mm噴嘴的Biichi B-290，PE-024噴霧干燥器 和Biichi B-295，P-002冷凝器將溶液噴霧干燥。將噴霧干燥器的噴嘴壓力設(shè)定為80psi，目 標(biāo)出口溫度設(shè)定為40°C，冷卻器的溫度設(shè)定至_20°C，栗速設(shè)定為100%，并且抽吸器設(shè)定為 100%。在噴霧干燥后，收集固體分散體，并在低溫對流烘箱中過夜干燥，從而除去殘余的溶 劑。
[0275] 實(shí)施例6:濕度和溫度的穩(wěn)定性
[0277] 通過在高溫下暴露于水分來評估化合物（1-1)在HPMCAS-MG中的噴霧干燥分散體 的穩(wěn)定性。通過在75%相對濕度和40°C下放置1、2和3個(gè)月，來測定作為相對濕度的函數(shù)的 玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)。在HDPE瓶中將噴霧干燥的分散體儲存在LDPE袋內(nèi)，從而模擬散裝物 品包裝。結(jié)果總結(jié)于表6中。在時(shí)間0時(shí)，Tg為134°C，在1個(gè)月時(shí)Tg為134°C，在2個(gè)月時(shí)Tg為 135°C，在3個(gè)月時(shí)Tg為134°C，并且在各測量中僅觀測到單一的拐點(diǎn)。對每種樣品還獲得了 X 射線衍射圖譜。圖9示出了在穩(wěn)定性測試的時(shí)間0時(shí)，化合物（1-1)在HPMCAS-MG中的固體分 散體的X射線粉末衍射圖譜。圖1〇、11和12示出了分別在暴露于40°C和75%相對濕度1個(gè)月、 2個(gè)月和3個(gè)月后，化合物（1-1)在HPMCAS-MG中的固體分散體的X射線粉末衍射圖譜。圖案未 顯示與化合物(1-1)有關(guān)的任何衍射線。
[0278] 實(shí)施例7:化合物（1-1)作為單試劑以及與標(biāo)準(zhǔn)化療藥物聯(lián)合使用對人類白血病細(xì) 胞系的效果的體外評價(jià)
[0279] 材料和方法：
[0280]用劑量增加的化合物（1-1)處理來自急性和慢性急性骨髓性白血病(AML，即HL-60 和U-937 ; CML，即K-562和NALM-I)和急性淋巴細(xì)胞性白血病（ALL，即Jurkat、CCRF-CEM、 M0LT-3和-4)的8種已建立的人細(xì)胞系。暴露72小時(shí)后進(jìn)行MTT檢驗(yàn)。利用市售抗體通過通過 Western Blot分析蛋白質(zhì)水平。用Qiagen RNAEasy試劑盒提取RNA，并在StepOnePlus實(shí)時(shí) PCR系統(tǒng)中利用Fast SYBRGreen進(jìn)行RT-PCR。在4種細(xì)胞系(HL60、U937、Jurkat和K562)中評 價(jià)組合效果;化合物（1-1)與道諾霉素、氮雜胞苷、地塞米松、阿糖孢苷或甲氨蝶呤一起施 用。利用CalcuSyn軟件通過中效圖（median effect plot)分析確定48小時(shí)聯(lián)合指數(shù)(Cl)， 以在細(xì)胞系中CI的中值和范圍（Chou&Talalay analysis)表示。CICl表示協(xié)同作用;CI = I 表不累加作用；以及CI>1表不詰抗作用。
[0281] 結(jié)果：
[0282] 在一組AMUALL和CML細(xì)胞系中評價(jià)單試劑化合物（1-1)的的抗增殖效果，HL60、 U937和Jurkat在暴露72小時(shí)后GI50值在230nm和384nm之間，而剩余細(xì)胞系的GI50彡1， OOOnM?；衔铮?-1)敏感和耐受的細(xì)胞均示出8^)4/3/2、(：-1^(：、8(^-2、？21和細(xì)胞周期蛋白 Dl蛋白質(zhì)基礎(chǔ)表達(dá)水平類似。在敏感性細(xì)胞系中，化合物（1-1)以時(shí)間依賴的方式導(dǎo)致細(xì)胞 周期停止在Gl期，而不會誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。類似地，在用500nM化合物（1-1)處理6小時(shí)和至多 72小時(shí)后，cMYC mRNA和蛋白質(zhì)水平下調(diào)。在Jurkat細(xì)胞中，化合物（1-1)誘導(dǎo)BRD2和BRD4的 mRNA水平的上調(diào)而不改變蛋白質(zhì)水平。另一方面，化合物（1-1)-耐受性細(xì)胞系K562在暴露4 小時(shí)和24小時(shí)后示出c-MYC RNA水平的降低，而cMYC蛋白質(zhì)水平即使在處理72小時(shí)后依然 恒定。在化合物（1-1)敏感和耐受的細(xì)胞系中觀察到化合物（1-1)與道諾霉素的協(xié)同作用 (CI = 0.8; 0.4-0.9)。化合物（1 -1)與氮雜胞苷或阿糖孢苷的聯(lián)合是協(xié)同性的（分別為CI = 0.6; 0.6-0.7和CI = 0.8; 0.4-0.9)，盡管Jurkat和K562細(xì)胞系對這些藥物中單獨(dú)任一者具 有原發(fā)耐藥性。甲氨蝶呤、地塞米松和帕比司他(廣譜HDAC抑制劑)與化合物(1-1) 一起在四 種細(xì)胞系中的三者中示出了協(xié)同效應(yīng)(Cl = 0.5; 0.2-0.9; CI = 0.3; 0.1-0.7和CI = 0.6; 0.5-0.7)〇
[0283] 實(shí)施例8:化合物（1-1)作為單試劑以及與標(biāo)準(zhǔn)化療藥物聯(lián)合使用對人類白血病細(xì) 胞系的效果的體外評價(jià)
[0284] 將來自急性(HL60、U937)、慢性(K562)骨髓性白血病以及急性淋巴細(xì)胞性白血病 (Jurkat)的四種已建立的人細(xì)胞系用劑量增加的化合物（1-1)處理。暴露72小時(shí)后進(jìn)行MTT 檢驗(yàn)。利用Pr ism 5. OO通過S形劑量應(yīng)答的等式來計(jì)算Gl5〇和Emax值。結(jié)果表示三次進(jìn)行的 至少3個(gè)獨(dú)立試驗(yàn)的平均值±95%(：ΙΧΙ50值<500nM的細(xì)胞系被認(rèn)為是對化合物（1-1)敏感 的。利用市售抗體通過通過Western Blot分析蛋白質(zhì)水平。對于細(xì)胞周期分析和細(xì)胞凋亡 誘導(dǎo)，細(xì)胞分別用PI或Annex in V分別染色，并用FACScan流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。在 StepOnePlus實(shí)時(shí)PCR系統(tǒng)中利用Fast SYBR Green Master Mix進(jìn)行 RT-PCR。米用Anova之 后采用Dunnett ' s多重比較檢驗(yàn)，細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和qRT-PCR結(jié)果是至少3個(gè)獨(dú)立試 驗(yàn)的平均值土 SD，其中邙〈0.05、*噸〈0.001和#噸〈0.0001相對于對照細(xì)胞(0.1%0150)。在 細(xì)胞系中進(jìn)行化合物（1-1)聯(lián)合研究，所述細(xì)胞系單獨(dú)暴露于增加劑量的化合物（1-1)48小 時(shí)或暴露于增加劑量的化合物（1-1)與若干常規(guī)抗白血病藥物（如表觀遺傳調(diào)節(jié)劑、類固 醇、m-TOR抑制劑和典型的細(xì)胞毒性劑）的聯(lián)合48小時(shí)，并利用Chou&Talalay方法評價(jià)。對于 連續(xù)的聯(lián)合方案，細(xì)胞系暴露于氮雜胞苷或帕比司他48小時(shí)或72小時(shí)，用不含藥物的培養(yǎng) 液洗滌，然后用化合物（1-1)處理24小時(shí)或48小時(shí)。利用CalcuSyn軟件通過中效圖（median effectplot)分析確定聯(lián)合指數(shù)(Cl) <ΧΙ<1表示協(xié)同作用;CI = I表示累加作用；以及CI>1 表示拮抗作用。結(jié)果表示三次進(jìn)行的4個(gè)獨(dú)立試驗(yàn)的中值和范圍。
[0285] 通常，化合物（1-1)在白血病細(xì)胞系中示出體外的抗增殖作用、在亞微摩爾范圍伴 隨細(xì)胞周期停止在Gl期的發(fā)生。化合物（1-1)增強(qiáng)了標(biāo)準(zhǔn)抗白血病試劑的體外抗增殖作用， 這為作為臨床研發(fā)計(jì)劃中前景良好的聯(lián)合療法提供了支持。如圖13所示，在三種具有不同 致癌突變的化合物（1-1)敏感的細(xì)胞系(HL60、U937和Jurkat)以及一種耐受細(xì)胞系(K562) 中，化合物（1-1)以在體內(nèi)可實(shí)現(xiàn)的濃度誘導(dǎo)了抗增殖作用。在圖14中，在化合物（1-1)敏感 的白血病細(xì)胞暴露于500nM化合物（1-1 )48小時(shí)后，化合物（1-1)提高了處于細(xì)胞周期G0/G1 的比例并且略微誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
[0286] 在圖15A至15F中，在化合物（1-1)敏感的細(xì)胞系中，化合物（1-1)誘導(dǎo)c-MYC mRNA 和蛋白質(zhì)快速持續(xù)的下調(diào)。在圖16A至16G中，示出了化合物（1-1)的抗增殖活性不與BRD2/ 3/4、c-MYC、BCL2或P2ImRNA或蛋白質(zhì)表達(dá)的基礎(chǔ)水平直接相關(guān)。在圖17A和17B中，在OTXO15 敏感和耐受的白血病細(xì)胞系中，化合物（1-1)在與去甲基化試劑、HDAC和mTOR抑制劑、糖皮 質(zhì)激素以及常規(guī)的細(xì)胞毒性藥物聯(lián)合時(shí)示出了強(qiáng)的協(xié)同效應(yīng)。
[0287] 本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不脫離本發(fā)明的寬泛的發(fā)明構(gòu)思的條件下可 以對上文所示的并描述的示例性實(shí)施方案進(jìn)行修改。因此，應(yīng)該理解的是本發(fā)明不限于所 示的并描述的示例性實(shí)施方案，其旨在涵蓋在權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍內(nèi) 的修改。例如，示例性實(shí)施方案的特定特征可以為所要求保護(hù)的發(fā)明的一部分或不是其一 部分，并且所公開的實(shí)施方案的特征可以結(jié)合。除非本發(fā)明作出具體說明，術(shù)語"一個(gè)"、"一 種"和"所述"不限于一個(gè)元素，而是應(yīng)該理解為"至少一個(gè)"。
[0288]應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的至少一些特征和描述被簡化為集中于與清楚地理解本發(fā) 明有關(guān)的元素，同時(shí)為了清晰起見，除去了本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解的其他元素(也可以 包含本發(fā)明的一部分）。但是由于此類元素是本領(lǐng)域公知的，并且由于它們不一定會更有利 于更好地理解本發(fā)明，所以在本發(fā)明中未提供此類元素的描述。
[0289]此外，所述的方法并非依賴于本發(fā)明列出的步驟的特定順序，就此而言，步驟的特 定順序不應(yīng)該解釋為對權(quán)利要求的限定。涉及本發(fā)明的方法的權(quán)利要求不應(yīng)該限于書寫順 序的步驟的性能，并且本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以容易理解這些步驟可以改變，并且仍然保持 在本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種治療哺乳動(dòng)物白血病的方法，包括以下步驟： 向需要的患者施用藥學(xué)可接受的量的式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物，或其可 藥用的鹽、或其水合物或溶劑化物：其中R1為具有1至4個(gè)碳的烷基;妒為氫原子、鹵素原子、或任選地被鹵素原子或羥基取 代的具有1至4個(gè)碳的烷基;R3為鹵素原子;任選地被鹵素原子、具有1至4個(gè)碳的烷基、具有1 至4個(gè)碳的烷氧基、或氰基取代的苯基;一冊 5-( CH2 )m-R6，其中R5為氫原子、或具有1至4個(gè) 碳的烷基，m為0至4的整數(shù)，并且R 6為任選地被鹵素原子取代的苯基或吡啶基;或-NR7-C0- (CH2) n-R8,其中R7為氫原子或具有1至4個(gè)碳的烷基，η為0至2的整數(shù)，并且R 8為任選地被鹵 素原子取代的苯基或吡啶基;并且R4為一(CH2) a-C0-NH-R9,其中a為1至4的整數(shù)，并且R9 為具有1至4個(gè)碳的烷基;具有1至4個(gè)碳的羥烷基;具有1至4個(gè)碳的烷氧基;或任選地被具有 1至4個(gè)碳的烷基、具有1至4個(gè)碳的烷氧基、氨基或羥基取代的苯基或吡啶基;或一 (CH2)b- COOR1()，其中b為1至4的整數(shù)，并且R 1()為具有1至4個(gè)碳的烷基。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述白血病獨(dú)立地選自由以下疾病構(gòu)成的組:急性 淋巴細(xì)胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)(或急性成髓細(xì)胞性白血?。?、慢性淋巴 細(xì)胞性白血病(CLL)和慢性骨髓性白血病(CML)。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述白血病獨(dú)立地選自由以下疾病構(gòu)成的組:急性 骨髓性白血病、慢性急性骨髓性白血病和急性淋巴細(xì)胞性白血病。4. 根據(jù)權(quán)利要求2或3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述由式I表示的噻吩并三唑并二氮 雜章化合物選自由以下化合物構(gòu)成的組： (i)(S)-2-[4-(4-氯代苯基)-2,3,9_ 三甲基-6H-噻吩并[3,2-f][l，2,4]三唑并-[4,3_ &][1，4]二氮雜罩-6-基]4-(4-羥苯基）乙酰胺或其二水合物；（丨丨）（5)-{4-(3'-氰基聯(lián)苯-4-基）-2,3,9_三甲基-6H-噻吩并[3,2-幻[1，2,4]三唑并[4,3- &][1，4]二氮雜罩-6-基}乙 酸甲酯；（iii)(S)-{2,3,9-三甲基-4-(4-苯基氨基苯基)-6H-噻吩并[3,2-f][l，2,4]三唑 并[4,3-a][l，4]二氮雜罩-6-基}乙酸甲酯；以及(iv)(S)-{2,3,9-三甲基-4-[4-(3-苯基丙 ?；被?苯基]-6H-噻吩并[3，2-f_] [ 1，2，4]三唑并[4，3-a] [ 1，4]二氮雜罩-6-基}乙酸甲 酯。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述由式I表示的噻吩并三唑并二氮雜萆化合物為 (S)-2-(4-(4-氯代苯基)-2,3,9_ 三甲基-6H-噻吩并[3，2-f][l，2,4]三唑并[4,3-a][l，4] 二氮雜罩-6-基)-N-( 4-羥苯基）乙酰胺二水合物。6. 根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述噻吩并三唑并二氮雜罩化合物形 成為固體分散體。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中所述固體分散體含有無定形的式（1)的噻吩并三唑 并二氮雜罩化合物和其可藥用的鹽、或其水合物；以及可藥用的聚合物。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述固體分散體展示出基本不存在與結(jié)晶的式（1) 表示的噻吩并三唑并二氮雜罩合物有關(guān)的衍射線的X射線粉末衍射圖案。9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述固體分散體展示出基本不存在與結(jié)晶的噻吩 并三唑并二氮雜罩化合物有關(guān)的衍射線的X射線粉末衍射圖案，所述結(jié)晶的噻吩并三唑并 二氮雜章化合物為(S) -2-[4-(4-氯代苯基)-2，3，9-三甲基-6H-噻吩并[3，2-f ] [ 1，2，-4 ]三 唑并[4,3-a][l，4]二氮雜罩-6-基]-N-(4-羥苯基)乙酰胺二水合物。10. 根據(jù)權(quán)利要求6至9中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述可藥用的聚合物為醋酸羥丙基 甲基纖維素琥珀酸酯，其中噻吩并三唑并二氮雜草化合物與醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸 酯(HPMCAS)的重量比為1:3至1:1。11. 根據(jù)權(quán)利要求6至9中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述固體分散體表現(xiàn)出約130°C至約 140 °C的單一的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(Tg)拐點(diǎn)。12. 根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的方法，還包括向所述患者施用至少一種其他的 治療劑。13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述式（1)的噻吩并三唑并二氮雜罩化合物或其 可藥用的鹽以及至少一種其他的治療劑是同時(shí)施用的。14. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述式（1)的噻吩并三唑并二氮雜草化合物或其 可藥用的鹽以及至少一種其他的治療劑是依次施用的。15. 根據(jù)權(quán)利要求12至14中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述至少一種其他的治療劑獨(dú)立 地選自由以下化合物構(gòu)成的組:表觀遺傳調(diào)節(jié)劑、糖皮質(zhì)激素、m-TOR抑制劑、HDAC-抑制劑、 去甲基化試劑、蒽環(huán)霉素、胞嘧啶核苷的類似物和細(xì)胞毒性藥物。16. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述去甲基化試劑為地西他濱。17. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述HDAC-抑制劑為伏立諾他或帕比司他。18. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述mTOR抑制劑為依維莫司。18. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述糖皮質(zhì)激素為地塞米松。19. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述細(xì)胞毒性藥物選自由阿糖孢苷或甲氨蝶呤 構(gòu)成的組。20. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述胞嘧啶核苷的類似物為氮雜胞苷。21. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述蒽環(huán)霉素為道諾霉素。
【文檔編號】A61K31/573GK105960239SQ201480065213
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2014年11月26日
【發(fā)明人】馬里亞·E·里韋羅, 埃里克·雷蒙德
【申請人】翁科埃斯克斯有限公司